專利名稱：鹽668的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的新的鹽形式，含有所述新的鹽形式的組合物，制備所述鹽形式的方法和所述鹽形式在治療病癥(例如，呼吸系統(tǒng)病癥(respiratory disease states)，例如哮喘或COPD)中的用途。

背景技術(shù)：
N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺游離堿及其二氫溴酸鹽和二鹽酸鹽為β2腎上腺素受體激動劑，并披露在PCT/SE2006/000927(公開號WO 2007/018461，參見實施例7、15和16)中。這些化合物對β2腎上腺素受體的選擇性是對腎上腺素能α1D、腎上腺素能β1和多巴胺D2的至少10倍。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的藥用鹽，前提是所述鹽不是二氫溴酸鹽或二鹽酸鹽。
藥用鹽包括例如三氟乙酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、丙酮酸鹽、琥珀酸鹽、草酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、苯磺酸鹽、乙磺酸鹽、丙二酸鹽、昔萘甲酸鹽(xinafoate)、抗壞血酸鹽、油酸鹽、煙酸鹽、糖精酸鹽(saccharinate)、己二酸鹽、甲酸鹽、羥乙酸鹽、L-乳酸鹽、D-乳酸鹽、天冬氨酸鹽、蘋果酸鹽、L-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、硬脂酸鹽、2-糠酸鹽、3-糠酸鹽、萘二磺酸鹽(萘-1，5-二磺酸鹽或萘-1-(磺酸)-5-磺酸鹽)、乙二磺酸鹽(乙烷-1，2-二磺酸鹽或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸鹽)、羥乙磺酸鹽(2-羥基乙基磺酸鹽)、均三甲苯-2-磺酸鹽或萘-2-磺酸鹽。合適的鹽也可是D-扁桃酸鹽或L-扁桃酸鹽。
本發(fā)明的鹽可作為溶劑化物(例如水合物)存在，本發(fā)明涵蓋所有這樣的溶劑化物。
在一個具體方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的藥用鹽，所述鹽為檸檬酸鹽、二甲苯磺酸鹽(ditosylate)、磷酸鹽、二昔萘甲酸鹽、硫酸鹽、單苯甲酸鹽、富馬酸鹽或苯磺酸鹽。
在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的單-檸檬酸鹽。
在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的檸檬酸鹽，所述鹽的X-射線粉末衍射(XRPD)圖具有下述的特征峰4.4(±0.1°)，7.2(±0.1°)，13.7(±0.1°)，17.4(±0.1°)，18.7(±0.1°)和21.4(±0.1°)2θ。
可通過如下方式制備檸檬酸鹽將檸檬酸加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺于合適脂肪族醇(例如，甲醇)中的溶液中，使所有物質(zhì)溶解(如有必要，在升高的溫度(elevated temperature))，使溶液冷卻，檸檬酸鹽隨之從溶液中沉淀并可將其收集。
在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的二昔萘甲酸鹽。
又在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的二昔萘甲酸鹽，其為二水合物(di-hydrate)，其X-射線粉末衍射圖具有下述的特征峰4.8(±0.1°)、7.7(±0.1°)、9.1(±0.1°)、12.2(±0.1°)、16.1(±0.1°)和21.3(±0.1°)2θ。
在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的二昔萘甲酸鹽，其為二-半-水合物(Di-Hemi-Hydrate)，其X-射線粉末衍射圖具有下述的特征峰8.5(±0.1°)、9.4(±0.1°)、11.6(±0.1°)、11.9(±0.1°)、16.6(±0.1°)、17.7(±0.1°)和22.4(±0.1°)2θ。
可通過如下方式制備昔萘甲酸鹽將1-羥基-萘-2-甲酸加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺于合適脂肪族醇(例如，甲醇)中的溶液中，在升高的溫度(例如，回流溫度)混合，并使其冷卻，隨之可收集昔萘甲酸鹽。
在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的磷酸鹽。
又在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的磷酸鹽，其為二-半-水合物，其X-射線粉末衍射圖具有下述的特征峰5.5(±0.1°)、8.4(±0.1°)、9.04(±0.1°)、11.8(±0.1°)、16.3(±0.1°)和20.6(±0.1°)2θ。
可通過如下方式制備磷酸鹽將磷酸加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺于合適脂肪族醇(例如，甲醇)的溶液中，在升高的溫度(例如，回流溫度)混合，并使其冷卻，隨之可收集磷酸鹽。
在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的單苯甲酸鹽。
又在另一個方面，本發(fā)明提供N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的單苯甲酸鹽的結(jié)晶形式，其X-射線粉末衍射圖具有下述的特征峰5.6(±0.1°)、8.3(±0.1°)、9.5(±0.1°)、14.8(±0.1°)、20.1(±0.1°)和22.5(±0.1°)2θ。
可通過如下方式制備苯甲酸鹽將苯甲酸加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺于合適脂肪族醇(例如，甲醇)中的溶液中，混合(例如，在室溫(例如，10-30℃))，然后收集苯甲酸鹽。
本發(fā)明的鹽可通過使用上面介紹的方法；下面制備或?qū)嵤├薪榻B的方法；或文獻中描述的方法來制備，或者對這些所述方法進行調(diào)整來制備。
本發(fā)明的鹽可用在治療如下疾病中 1.呼吸道氣道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支氣管哮喘、過敏性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、運動誘發(fā)性哮喘、藥物誘發(fā)性(包括阿司匹林和NSAID誘發(fā)的)哮喘和粉塵誘發(fā)性哮喘，間歇性哮喘和持續(xù)性哮喘，以及各種嚴(yán)重度的哮喘，及其它原因引起的氣道高反應(yīng)性；慢性阻塞性肺病(COPD)；支氣管炎，包括傳染性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣腫；支氣管擴張；囊性纖維化；結(jié)節(jié)??；農(nóng)民肺及相關(guān)疾病；超敏感性肺炎；肺纖維化，包括隱原性纖維化肺泡炎、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、抗腫瘤治療和慢性感染(包括結(jié)核病和曲霉病及其它真菌感染)并發(fā)的纖維化；肺移植的并發(fā)癥；肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺動脈高壓；鎮(zhèn)咳活性，包括治療與氣道炎癥和分泌情況相關(guān)的慢性咳嗽及醫(yī)源性咳嗽；急性鼻炎和慢性鼻炎，包括藥物性鼻炎和血管運動性鼻炎；常年性(perennial)過敏性鼻炎和季節(jié)性過敏性鼻炎，包括神經(jīng)性鼻炎(花粉癥)；鼻息肉??；急性病毒感染，包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠狀病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；或嗜酸性食管炎(eosinophilic esophagitis) 2.骨和關(guān)節(jié)與骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病相關(guān)或包括骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病的關(guān)節(jié)炎，包括原發(fā)性關(guān)節(jié)炎和繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎，例如先天性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良；頸和腰脊椎炎及腰背痛和頸部疼痛；骨質(zhì)疏松；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和斯蒂爾病(Still’s disease)；血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病，包括強直性脊柱炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎和未分化脊柱關(guān)節(jié)??；膿毒性關(guān)節(jié)炎和其它感染相關(guān)的關(guān)節(jié)病和骨疾病，例如結(jié)核病，包括波特病(Potts’disease)和蓬塞綜合征(Poncet’s syndrome)；晶體誘發(fā)的急性和慢性滑膜炎，包括尿酸鹽沉積病、焦磷酸鈣沉積病和鈣磷灰石相關(guān)的腱、粘液囊和滑膜炎癥；貝切特病(Behcet’s disease)；原發(fā)性和繼發(fā)性斯耶格倫綜合征(Sjogren’s syndrome)；全身性硬化和局限性硬皮??；系統(tǒng)性紅斑狼瘡、混合性結(jié)締組織病和未分化結(jié)締組織??；炎性肌病，包括皮肌炎和多肌炎；風(fēng)濕性多肌痛；幼年型關(guān)節(jié)炎，包括分布在任何關(guān)節(jié)的特發(fā)性炎性關(guān)節(jié)炎及相關(guān)綜合征和風(fēng)濕熱及其全身性并發(fā)癥；血管炎(vasculitis)，包括巨細(xì)胞性動脈炎、高安動脈炎(Takayasu’s arteritis)、丘-施綜合征(Churg-Strauss syndrome)、結(jié)節(jié)性多動脈炎、顯微鏡性多動脈炎和與病毒感染、超敏反應(yīng)、冷球蛋白和異蛋白相關(guān)的血管炎；腰背痛；家族性地中海熱、穆-韋綜合征(Muckle-Wells syndrome)和家族性愛爾蘭熱(Familial Hibemian Fever)、菊池病(Kikuchi disease)；藥物誘發(fā)性關(guān)節(jié)痛、腱炎和肌??； 3.由損傷(例如運動損傷)或疾病引起的疼痛和結(jié)締組織再造的肌肉骨骼疾病關(guān)節(jié)炎(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)或晶體性關(guān)節(jié)病)、其它關(guān)節(jié)疾病(例如椎間盤變性或顳下頜關(guān)節(jié)變性)、骨再造疾病(例如骨質(zhì)疏松、佩吉特病(Paget’s disease)或骨壞死)、多軟骨炎、硬皮病、混合性結(jié)締組織病、脊椎關(guān)節(jié)病或牙周病(例如牙周炎)； 4.皮膚牛皮癬、特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎或其它濕疹性皮膚病及遲發(fā)型超敏反應(yīng)；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、皰疹樣皮炎、扁平苔癬、萎縮性硬化性苔癬、壞疽性膿皮癥、皮膚結(jié)節(jié)病、盤狀紅斑狼瘡、天皰瘡、類天皰瘡、大皰性表皮松解、蕁麻疹、血管性水腫、血管炎、中毒性紅斑、皮膚嗜酸粒細(xì)胞增多、斑禿、男性型脫發(fā)、斯威特綜合征(Sweet’s syndrome)、韋-克綜合征(Weber-Christian syndrome)、多形性紅斑；蜂窩組織炎，包括傳染性和非傳染性蜂窩組織炎；脂膜炎；皮膚淋巴瘤、非黑素瘤皮膚癌和其它發(fā)育不良性損傷；藥物誘發(fā)的疾病，包括固定性藥疹； 5.眼瞼炎；結(jié)膜炎，包括常年性過敏性結(jié)膜炎或春季過敏性結(jié)膜炎；虹膜炎；前色素層炎和后色素層炎；脈絡(luò)膜炎；自身免疫；影響視網(wǎng)膜的變性或炎性疾??；眼炎，包括交感性眼炎；結(jié)節(jié)??；感染，包括病毒、真菌和細(xì)菌感染； 6.胃腸道舌炎、齦炎、牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸性胃腸炎、肥大細(xì)胞增多、克羅恩病(Crohn’s disease)、結(jié)腸炎包括潰瘍性結(jié)腸炎、直腸炎、肛門瘙癢；腹部疾病、腸應(yīng)激綜合征，以及具有遠(yuǎn)離腸作用的食物相關(guān)的變態(tài)反應(yīng)(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹)； 7.腹部肝炎，包括自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纖維化和硬化；膽囊炎；胰腺炎，包括急性和慢性胰腺炎； 8.生殖泌尿系統(tǒng)腎炎，包括間質(zhì)性腎炎和腎小球性腎炎；腎病綜合征；膀胱炎，包括急性和慢性(間質(zhì)性)膀胱炎和杭納潰瘍(Hunner’s ulcer)；急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睪炎、卵巢炎和輸卵管炎；女陰陰道炎；佩倫涅病(Peyronie’s disease)；勃起機能障礙(男性和女性)； 9.同種異體移植物排斥在例如腎臟、心臟、肝臟、肺臟、骨髓、皮膚或角膜移植后或在輸血后出現(xiàn)的急性和慢性同種異體移植物排斥；或慢性移植物抗宿主?。? 10.CNS阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease)和其它癡呆疾病包括CJD和nvCJD；淀粉樣變性病；多發(fā)性硬化和其它脫髓鞘綜合征；腦動脈粥樣硬化和血管炎；顳動脈炎；重癥肌無力；急性和慢性疼痛(急性、間歇性或持續(xù)性疼痛，無論是中樞源性的還是外周源性的)，包括內(nèi)臟痛、頭痛、偏頭痛、三叉神經(jīng)痛、不典型面痛、關(guān)節(jié)和骨痛、由癌癥和腫瘤侵入引起的疼痛、神經(jīng)性疼痛綜合征包括糖尿病性、皰疹后和HIV相關(guān)的神經(jīng)病；神經(jīng)性肉樣瘤?。粣盒?、感染性或自身免疫性過程的中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥； 11.其它自身免疫性和變態(tài)反應(yīng)性疾病，包括橋本甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、格雷夫斯病(Graves’disease)、阿狄森病(Addison’s disease)、糖尿病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE綜合征、抗磷脂綜合征； 12.其它帶有炎性或免疫性組成的疾病，包括獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、麻風(fēng)病、塞扎里綜合征(Sezary syndrome)和瘤外綜合征； 13.心血管影響冠脈和外周循環(huán)的動脈粥樣硬化；心包炎；心肌炎；炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌結(jié)節(jié)?。蝗毖栽俟嘧p傷；心內(nèi)膜炎、心瓣炎和主動脈炎，包括傳染性(例如梅毒性)的；血管炎；近端和外周靜脈的疾病，包括靜脈炎和血栓形成包括深靜脈血栓形成及靜脈曲張的并發(fā)癥； 14.腫瘤對一般癌癥的治療，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、胰腺、腸和結(jié)腸、胃、皮膚和腦腫瘤及影響骨髓(包括白血病)和淋巴增生系統(tǒng)的惡性腫瘤(例如何杰金(Hodgkin’s)和非何杰金淋巴瘤)；包括對轉(zhuǎn)移性疾病和腫瘤復(fù)發(fā)及瘤外綜合征的預(yù)防和治療；和 15.胃腸道腹部疾病、直腸炎、嗜酸性胃腸炎、肥大細(xì)胞增生、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、顯微鏡性結(jié)腸炎、不確定性結(jié)腸炎、腸應(yīng)激病、腸應(yīng)激綜合征、非炎性腹瀉、具有遠(yuǎn)離腸作用的食物相關(guān)的變態(tài)反應(yīng)(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹)。
因此，本發(fā)明提供上述定義的鹽，其用于治療。
另一方面，本發(fā)明提供如上定義的鹽在制備用于治療(例如，治療呼吸系統(tǒng)病癥)的藥物中的用途。
又一方面，本發(fā)明提供如上定義的鹽，其用于治療呼吸系統(tǒng)病癥。
在本申請說明書的上下文中，除非另有相反的具體說明，術(shù)語“治療”也包括“預(yù)防”。術(shù)語“治療的”和“治療地”也可相應(yīng)地解釋。
預(yù)防被認(rèn)為與患有所述疾病或病癥的先前發(fā)作的人員的治療特別有關(guān)，或被認(rèn)為與處于所述疾病或病癥的增加危險之中的人員的治療特別有關(guān)。處于形成具體疾病或病癥的危險之中的人員，通常包括具有該疾病或病癥的家族史的那些人員，或已經(jīng)通過遺傳學(xué)試驗或篩選確定為對特別易患該疾病或病癥的那些人員。
本發(fā)明還提供治療炎癥性疾病或病癥(包括可逆的阻塞性氣道疾病或病癥)或降低所述疾病或病癥風(fēng)險的方法，所述方法包括向需要治療的患者給藥治療有效量的如上定義的鹽。
具體地，本發(fā)明的鹽可用在治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘和鼻炎中。
對于上述治療用途，劑量當(dāng)然會隨所采用的化合物、給藥模式、所期望的治療和所指出的紊亂而變化。例如，如果吸入給藥，本發(fā)明化合物的劑量可在0.05微克/千克體重(μg/kg)至100微克/千克體重(μg/kg)的范圍內(nèi)?？蛇x擇地，如果化合物口服給藥，則本發(fā)明化合物的每日劑量可在0.01微克/千克體重(μg/kg)至100毫克/千克體重(mg/kg)的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的鹽可單獨使用，但通常以藥物組合物的形式給藥，其中本發(fā)明的鹽(活性成分)與藥用助劑、稀釋劑或載體結(jié)合。用于選擇和制備合適藥物制劑的常規(guī)方法描述在例如″Pharmaceuticals-The Science of Dosage FormDesigns″，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988中。
依賴于給藥模式，所述藥物組合物可包含例如0.05至99％w(重量百分比)，例如0.05至80％w，例如0.10至70％w，以及例如0.10至50％w活性成分，所有重量百分比都基于組合物總重量。
本發(fā)明也提供藥物組合物，其包含如上所定義的鹽和藥用助劑、稀釋劑或載體。
本發(fā)明還提供制備本發(fā)明組合物的方法，所述方法包括將如上所定義的鹽與藥用助劑、稀釋劑或載體混合。
本發(fā)明的藥物組合物可以局部給藥(例如給藥至皮膚或給藥至肺和/或氣道)，例如以乳膏劑、溶液劑、混懸劑、七氟代烷(HFA)氣霧劑和干粉制劑(例如在稱為

的吸入裝置中的制劑)的形式局部給藥；或全身給藥，例如以片劑、膠囊劑、糖漿劑、粉劑或顆粒劑的形式口服給藥；或溶液劑或混懸劑的形式胃腸外給藥；或皮下給藥；或以栓劑的形式直腸給藥；或經(jīng)皮給藥。
本發(fā)明鹽的干粉制劑和加壓HFA氣霧劑可通過口或鼻吸入給藥。就吸入而言，化合物理想的是微細(xì)分散的。微細(xì)分散的化合物的質(zhì)量中值直徑優(yōu)選小于10μm，并且可在分散劑(例如C8-C20脂肪酸或其鹽(例如油酸)、膽汁鹽、磷脂、烷基糖、全氟化或聚乙氧基化表面活性劑或其它藥用分散劑)的輔助下，將微細(xì)分散的化合物懸浮于噴射劑混合物中。
本發(fā)明的鹽也可通過干粉吸入器的途徑給藥。所述吸入器可以是單一或多劑量吸入器，以及可以是呼吸驅(qū)動的干粉吸入器。
一種可能性是混合微細(xì)分散的本發(fā)明化合物與載體物質(zhì)例如單糖、二糖或多糖、糖醇或另一種多元醇混合。合適的載體有糖例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麥芽醇、海藻糖、蔗糖、甘露醇或淀粉?？晒┻x擇地，微細(xì)分散的化合物可用另一種物質(zhì)包衣。也可將該粉末混合物分裝到硬明膠膠囊中，每個膠囊均包含所需劑量的活性化合物。
另一種可能性是將微細(xì)分散的粉末制成球，所述球在吸入操作期間碎裂。可將這種球化粉末裝到多劑量吸入器(例如稱為

)的儲藥器中，其中計量給藥單元計量出所需的劑量，所需的劑量然后會被患者吸入。利用該系統(tǒng)，在存在或不存在載體物質(zhì)的情況下，將活性化合物給予患者。
對于口服給藥，本發(fā)明的化合物可與輔料或載體，例如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如馬鈴薯淀粉、玉米淀粉或支鏈淀粉；纖維素衍生物；粘合劑，例如明膠或聚乙烯吡咯烷酮，和/或潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、聚乙二醇、蠟、石蠟等混合，然后壓制成片。如果需要包衣片，那么如上所述制備的片芯可用濃的糖溶液包衣，所述糖溶液可包含例如阿拉伯膠、明膠、滑石和二氧化鈦?？晒┻x擇地，片可用溶解在易揮發(fā)有機溶劑中的合適聚合物包衣。
為了制備軟明膠膠囊，可將本發(fā)明的化合物與，例如植物油或聚乙二醇混合。硬明膠膠囊可包含所述化合物的顆粒，所述顆粒使用用于片劑的任一上述賦形劑。也可將本發(fā)明化合物的液體或半固體制劑裝到硬明膠膠囊中。
用于口服給藥的液體制劑的形式可以是糖漿劑或混懸劑，例如包含本發(fā)明的鹽以及余量為糖以及乙醇、水、甘油和聚丙二醇的混合物的溶液。任選地，這些液體制劑可包含著色劑、調(diào)味劑、糖精和/或作為增稠劑的羧甲基纖維素或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它賦形劑。
本發(fā)明的鹽也可與另一種用于治療一種或多種上述病癥的化合物結(jié)合給藥。
因此，本發(fā)明還涉及聯(lián)合治療，其中本發(fā)明的鹽或包含本發(fā)明的鹽的藥物組合物或制劑與另一種治療劑或多種治療劑同時或先后給予，或與另一種治療劑或多種治療劑一起作為組合制劑來給予，用于治療所列出病癥中的一種或多種。
具體地，為了治療炎癥疾病，例如(但不局限于)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、哮喘、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、牛皮癬和炎性腸病，可將本發(fā)明的鹽與以下藥物之一組合非甾類抗炎藥(在下文中為NSAIDs)，包括無論局部應(yīng)用還是全身應(yīng)用的非選擇性環(huán)氧化酶COX-1/COX-2抑制劑(例如吡羅昔康；雙氯芬酸；丙酸類，例如萘普生、氟比洛芬、非諾洛芬、酮洛芬和布洛芬；芬那酸類，例如甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸、阿扎丙宗(azapropazone)；吡唑酮類，例如保泰松；水楊酸鹽(酯)，例如阿司匹林)；選擇性COX-2抑制劑(例如美洛昔康、塞來考昔、羅非考昔、伐地考昔、魯馬考昔(lumarocoxib)、帕瑞考昔和艾托考昔)；抑制環(huán)氧化酶的一氧化氮供體(CINODs)；糖皮質(zhì)激素(無論通過局部、口服、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)途徑還是通過關(guān)節(jié)內(nèi)途徑來給藥)；甲氨蝶呤；來氟米特；羥氯喹；d-青霉胺；金諾芬或其它胃腸外或口服金制劑；鎮(zhèn)痛藥；雙醋瑞因(diacerein)；關(guān)節(jié)內(nèi)治療劑，例如透明質(zhì)酸衍生物；和營養(yǎng)補劑，例如氨基葡萄糖。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合細(xì)胞因子或細(xì)胞因子功能的激動劑或拮抗劑(包括作用于細(xì)胞因子信號傳導(dǎo)路徑的藥物，例如SOCS系統(tǒng)的調(diào)節(jié)劑)，包括α-、β-和γ-干擾素；I型胰島素樣生長因子(IGF-1)；白介素(IL)，包括IL1至17和白介素拮抗劑或抑制劑(例如阿那白滯素)；α腫瘤壞死因子(TNF-α)抑制劑，例如抗TNF單克隆抗體(例如英夫利昔單抗(infliximab)、阿達木單抗(adalimumab)和CDP-870)和TNF受體拮抗劑(包括免疫球蛋白分子(例如依那西普)和低分子量藥物(例如己酮可可堿(pentoxyfylline)))。
另外，本發(fā)明涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合靶向于B淋巴細(xì)胞的單克隆抗體(例如CD20(利妥昔單抗(rituximab))、MRA-aIL16R)和靶向于T淋巴細(xì)胞的單克隆抗體(CTLA4-Ig、HuMax Il-15)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合趨化因子受體功能調(diào)節(jié)劑，例如CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10和CCR11(C-C家族)的拮抗劑；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4和CXCR5(C-X-C家族)的拮抗劑；和CX3CR1(C-X3-C家族)的拮抗劑。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)即溶基質(zhì)蛋白酶(stromelysin)、膠原酶和明膠酶及蛋白聚糖酶(aggrecanase)(尤其是膠原酶-1(MMP-1)、膠原酶-2(MMP-8)、膠原酶-3(MMP-13)、溶基質(zhì)蛋白酶-1(MMP-3)、溶基質(zhì)蛋白酶-2(MMP-10)和溶基質(zhì)蛋白酶-3(MMP-11)及MMP-9和MMP-12)的抑制劑，包括藥物，例如多西環(huán)素。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合白三烯生物合成抑制劑、5-脂肪氧化酶(5-LO)抑制劑或5-脂肪氧化酶活化蛋白(FLAP)拮抗劑，例如齊留通；ABT-761；芬留頓；替泊沙林；Abbott-79175；Abbott-85761；N-(5-取代的)-噻吩-2-烷基磺酰胺；2，6-二-叔丁基苯酚腙；甲氧基四氫吡喃，例如Zeneca ZD-2138；化合物SB-210661；吡啶基取代的2-氰基萘化合物，例如L-739，010；2-氰基喹啉化合物，例如L-746，530；或吲哚或喹啉化合物，例如MK-591、MK-886和BAY×1005。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合白三烯(LT)B4、LTC4、LTD4和LTE4的受體拮抗劑，選自吩噻嗪-3-基化合物，例如L-651，392；脒基化合物，例如CGS-25019c；苯并噁胺(benzoxalamine)，例如昂唑司特；苯甲脒(benzenecarboximidamide)，例如BIIL 284/260；和化合物，例如扎魯司特、阿魯司特、孟魯司特、普侖司特、維魯司特(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、伊拉司特(CGP 45715A)和BAY×7195。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合磷酸二酯酶(PDE)抑制劑，例如甲基黃嘌呤(methylxanthanine)，包括茶堿和氨茶堿；選擇性PDE同工酶抑制劑，包括PDE4抑制劑、同工型PDE4D抑制劑或PDE5抑制劑。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合組胺1型受體拮抗劑，例如西替利嗪、氯雷他定、地氯雷他定、非索非那定、阿伐斯汀、特非那定、阿司咪唑、氮

斯汀、左卡巴斯汀、氯苯那敏、異丙嗪、賽克力嗪(cyclizine)或咪唑斯汀；口服、局部或胃腸外給藥。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合質(zhì)子泵抑制劑(例如奧美拉唑)或胃保護性組胺2型受體拮抗劑。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合組胺4型受體拮抗劑。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合α1/α2腎上腺素受體激動劑、血管收縮藥、擬交感神經(jīng)藥，例如丙己君(propylhexedrine)、苯福林、苯丙醇胺、麻黃堿、偽麻黃堿、鹽酸萘甲唑啉、鹽酸羥甲唑啉、鹽酸四氫唑啉、鹽酸木甲唑啉、鹽酸曲馬唑啉或鹽酸乙基去甲腎上腺素。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合抗膽堿能藥，包括毒蕈堿受體(M1、M2和M3)拮抗劑，例如阿托品、東莨菪堿、格隆銨(glycopyrrrolate)、異丙托溴銨(ipratropium bromide)、噻托溴銨(tiotropiumbromide)、氧托溴銨(oxitropium bromide)、哌侖西平(pirenzepine)或替侖西平(telenzepine)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合色原酮，例如色甘酸鈉或奈多羅米鈉。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合糖皮質(zhì)激素，例如氟尼縮松、曲安奈德、二丙酸倍氯美松、布地奈德、丙酸氟替卡松、環(huán)索奈德或糠酸莫米松。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合調(diào)節(jié)核激素受體(例如PPARs)的藥物。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合免疫球蛋白(Ig)或Ig制品；或調(diào)節(jié)Ig功能的拮抗劑或抗體，例如抗IgE(例如奧馬珠單抗(omalizumab))。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合另一種全身或局部應(yīng)用的抗炎藥，例如沙利度胺(thalidomide)或其衍生物、類維生素A、地蒽酚(dithranol)或卡泊三醇(calcipotriol)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合氨基水楊酸鹽(酯)和磺胺吡啶(例如柳氮磺吡啶、美沙拉嗪、巴柳氮和奧沙拉嗪)的組合；和免疫調(diào)節(jié)藥，例如硫代嘌呤和皮質(zhì)類固醇(例如布地奈德)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合抗菌藥，例如青霉素衍生物、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯、β-內(nèi)酰胺、氟喹諾酮、甲硝唑、吸入性氨基糖苷；抗病毒藥，包括阿昔洛韋、泛昔洛韋、伐昔洛韋、更昔洛韋、西多福韋、金剛烷胺、金剛乙胺、利巴韋林、扎那米韋(zanamavir)和特敏服(oseltamavir)；蛋白酶抑制劑，例如茚地那韋、奈非那韋、利托那韋和沙奎那韋；核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，例如去羥肌苷、拉米夫定、司他夫定(stavudine)、扎西他賓或齊多夫定；或非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，例如奈韋拉平(nevirapine)或依法韋侖(efavirenz)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合心血管藥，例如鈣通道阻斷劑、β-腎上腺素受體阻斷劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑、血管緊張素2受體拮抗劑；降脂藥，例如抑制素或貝特類；血細(xì)胞形態(tài)學(xué)調(diào)節(jié)劑，例如配妥西菲林(pentoxyfylline)；溶栓藥或抗凝藥，例如血小板聚集抑制劑。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合CNS藥，例如抗抑郁藥(例如舍曲林)、抗帕金森藥(例如丙炔苯丙胺、L-多巴、羅匹尼羅、普拉克索、MAOB抑制劑(例如司來吉蘭和雷沙吉蘭)、comp抑制劑(例如托卡朋(tasmar))、A-2抑制劑、多巴胺重攝取抑制劑、NMDA拮抗劑、尼古丁激動劑、多巴胺激動劑或神經(jīng)元一氧化氮合酶抑制劑)或抗阿耳茨海默藥(例如多奈哌齊(donepezil)、利伐斯的明、他克林、COX-2抑制劑、丙戊茶堿或美曲磷酯)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合用于治療急性或慢性疼痛的藥物，例如在中樞或外周發(fā)揮作用的止痛藥(例如阿片樣物質(zhì)或其衍生物)、卡馬西平、苯妥英、丙戊酸鈉、阿米替林(amitryptiline)或其它抗抑郁藥、對乙酰氨基酚或非甾類抗炎藥。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合胃腸外或局部應(yīng)用的(包括吸入的)局麻藥，例如利諾卡因或其衍生物。
本發(fā)明的鹽也可與以下物質(zhì)聯(lián)用抗骨質(zhì)疏松藥，包括激素藥物(例如雷洛昔芬(raloxifene))或二膦酸鹽(例如阿倫膦酸鹽(alendronate))。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的鹽與以下物質(zhì)的組合(i)類胰蛋白酶(tryptase)抑制劑；(ii)血小板活化因子(PAF)拮抗劑；(iii)白介素轉(zhuǎn)化酶(ICE)抑制劑；(iv)IMPDH抑制劑；(v)粘附分子抑制劑，包括VLA-4拮抗劑；(vi)組織蛋白酶；(vii)激酶抑制劑，例如酪氨酸激酶(例如Btk、Itk、Jak3或MAP)抑制劑(例如吉非替尼(gefitinib)或甲磺酸伊馬替尼(imatinib))、絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑(例如MAP激酶(例如p38，JNK，蛋白激酶A、B或C，或IKK)抑制劑)或在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)中牽涉的激酶(例如細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶)的抑制劑；(viii)葡萄糖-6磷酸脫氫酶抑制劑；(ix)激肽B1受體或激肽B2受體拮抗劑；(x)抗痛風(fēng)藥，例如秋水仙堿；(xi)黃嘌呤氧化酶抑制劑，例如別嘌醇；(xii)排尿酸藥，例如丙磺舒、磺吡酮或苯溴馬??；(xiii)生長激素促分泌劑；(xiv)轉(zhuǎn)化生長因子(TGFβ)；(xv)血小板源性生長因子(PDGF)；(xvi)成纖維細(xì)胞生長因子，例如基本的成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)；(xvii)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)；(xviii)辣椒素油(capsaicin cream)；(xix)速激肽NK1受體或速激肽NK3受體拮抗劑，例如NKP-608C、SB-233412(他奈坦(talnetant))或D-4418；(xx)彈性酶抑制劑，例如UT-77或ZD-0892；(xxi)TNF-α轉(zhuǎn)化酶抑制劑(TACE)；(xxii)誘導(dǎo)的一氧化氮合酶(iNOS)抑制劑；(xxiii)TH2細(xì)胞上表達的化學(xué)引誘物受體同源分子(例如CRTH2拮抗劑)；(xxiv)P38的抑制劑；(xxv)調(diào)節(jié)Toll樣受體(TLR)功能的藥物；(xxvi)調(diào)節(jié)嘌呤能受體活性的藥物，例如P2X7；(xxvii)轉(zhuǎn)錄因子活化抑制劑，例如NFkB、API或STATS；或(xxviii)糖皮質(zhì)激素受體激動劑。
一般制備方法 如下是制備N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(在制備、實施例和測定中稱作化合物A)的方法，也有顯示該化合物活性的測定方法以及數(shù)據(jù)。
在實施例中，將N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺稱作化合物B。
在Varian Inova 400MHz或Varian Mercury-VX 300MHz設(shè)備上記錄1HNMR光譜。將氯仿-d(δH 7.27ppm)、二甲基亞砜-d6(δH 2.50ppm)、乙腈-d3(δH1.95ppm)或甲醇-d4(δH 3.31ppm)的中間峰用作內(nèi)標(biāo)。使用硅膠(0.040-0.063mm，Merck)進行柱色譜法。除非另有說明，起始物質(zhì)是商購的。所有的溶劑和商購試劑都是實驗室級的并原樣使用。
下述方法用于LC/MS分析 設(shè)備Agilent 1100；柱Waters Symmetry 2.1x 30mm；質(zhì)量APCI；流速0.7ml/min；波長254nm；溶劑A水+0.1％TFA；溶劑B乙腈+0.1％TFA；梯度15至95％/B進行8分鐘，95％B進行1分鐘。
采用如下方式進行分析性色譜法在Symmetry C18-柱(2.1x 30mm，3.5μm粒徑)上運行，用乙腈/水/0.1％三氟乙酸作為流動相，歷時8分鐘，梯度為5％至95％乙腈，流速為0.7ml/min。
設(shè)備細(xì)節(jié) ○XRPD(X-射線粉末衍射)

構(gòu)造的Philips X-Pert MPD機器，在2°至40°

的掃描范圍內(nèi)，100-秒暴露/0.03°增量。通過在45kV和40mA操作的銅制長-細(xì)聚焦管(long-fine focus tube)產(chǎn)生X-射線。銅X-射線的波長為

(Kα1)和

(Kα2)。將數(shù)據(jù)收集到零背景支持器(zero backgroundholder)上，其上放置～2mg化合物。所述支持器由單晶硅制成，已經(jīng)沿非衍射平面對其進行切割，然后在光學(xué)平面拋光機(optically flat finish)上進行拋光。入射在該表面上的X-射線被Bragg消散(extinction)抵消。XRPD數(shù)據(jù)呈現(xiàn)在下表中，以及提供了反射角度(°2θ)和D-間隔

數(shù)據(jù)(括號內(nèi)的)。
○DSC(示差掃描量熱法)熱分析圖是使用具有鋁盤和穿孔蓋(piercedlid)的TA Q1000機器測量的。樣品重量在1至5mg之間變化。所述方法在氮氣流(50ml/min)中進行，研究的溫度以10℃/分鐘的恒定溫度增加速率從25℃增加至300℃。
○TGA(熱解重量分析法)熱分析圖是使用TA Q500機器(具有鉑盤)測量的。樣品重量在2至15mg之間變化。所述方法在氮氣流(60ml/min)中進行，研究的溫度以10℃/分鐘的恒定溫度增加速率從25℃增加至300℃。
○13C CPMAS(交叉極化幻角自旋(Cross Polarisation Magic AngleSpinning))固態(tài)NMR光譜是使用Bruker Avance 400WB機器獲得的。使用4mm探針并在下述參數(shù)條件對樣品進行分析傾斜的交叉極化(ramped crosspolarization)，tppm15復(fù)合脈沖，1H去偶合(decoupling)，接觸時間2ms，以及自旋速率5kHz。
○拉曼光譜是使用Jobin Yvon Horiba Lab Ram HR拉曼顯微鏡測量的。將固體樣品(～0.1mg)放置在玻片上，激光束集中在代表整裝樣品的單個顆粒上。在200至2000cm-1范圍內(nèi)，記錄2-4分鐘采集的光譜。
○IR光譜是使用配備Specac ATR附件的Perkin Elmer SpectrumgXFT-IR系統(tǒng)機器記錄的。將固體樣品(～1mg)放置在ATR的金剛石表面上，并施加70cN-M的壓力。在4000至625cm-1范圍內(nèi)，記錄64次掃描的光譜，間隔為1cm-1，分辨率為4cm-1。
○GVS分布圖是使用動態(tài)蒸汽吸收(Dynamic Vapour Sorption)DVS-1設(shè)備測量的。將約4-10mg的固體樣品放置在玻璃容器上，在混合循環(huán)步驟方法(40至90至0至90至0％相對濕度(RH)，步長為10％RH)中在25℃記錄樣品重量。
○離子-化學(xué)計量法是使用KOH梯度和具有電化學(xué)檢測的DionexAS11柱和Dionex IC3000設(shè)備進行的。
○溶液1H NMR光譜是使用Varian Unity Inova光譜儀在400MHz質(zhì)子頻率記錄的。
用在下面實施例中的縮寫或術(shù)語具有如下含義 SCX使用磺酸吸附劑的固相萃取法 HPLC高效液相色譜 DMFN，N-二甲基甲酰胺 制備1 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(化合物A)
a)3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酸叔丁酯 萘-1-乙醇(10g)用芐基三甲基氫氧化銨(

；0.9mL 40％甲醇溶液)處理，將所得混合物真空攪拌30分鐘。然后將混合物冷卻至0℃，用丙烯酸叔丁酯(8.19g)處理。將所得混合物緩慢溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。隨后將粗制混合物吸收到氧化鋁(30g)上，并用乙醚(200mL)洗脫。濃縮有機物得到粗制物質(zhì)(16.6g)，通過快速硅膠色譜法對所述粗制物質(zhì)進行純化(用乙醚∶己烷＝1∶8洗脫)，得到標(biāo)題化合物(12.83g)。
1H NMR(CDCl3)δ8.05(dd，1H)，7.84(dd，1H)，7.72(dd，1H)，7.54-7.34(m，4H)，3.81-3.69(m，4H)，3.35(t，2H)，2.52-2.47(m，2H)，1.45(s，9H)。
b)3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酸 將3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酸叔丁酯(6.19g)吸收在二氯甲烷(30mL)中并用三氟乙酸(5mL)處理。將所得溶液在室溫攪拌2小時，再加入1mL三氟乙酸，將溶液攪拌過夜。將混合物濃縮，吸收在濃度為2M的氫氧化鈉溶液(30mL)中，用乙醚(ether，2x20mL)洗滌。隨后將水層酸化(使用濃度為1M的鹽酸溶液)，用乙醚(2x30mL)萃取。合并的有機物用鹽水(20mL)洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到小標(biāo)題化合物(5.66g)，其為透明油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ8.05(bs，1H)，7.85(bs，1H)，7.74(bs，1H)，7.50-7.38(m，4H)，3.84-3.75(bm，4H)，3.39(bs，2H)，2.65(bs，2H)。
c)N-(2-二乙基氨基乙基)-N-(2-羥基乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]-丙酰胺 將草酰氯(0.33g)滴加到3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酸(0.53g)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中，加入二甲基甲酰胺(1滴)，繼續(xù)在室溫攪拌1小時。隨后將混合物濃縮并重新懸浮在二氯甲烷(10mL)中，滴加到2-(2-二乙基氨基乙基氨基)乙醇(0.35g)和二異丙基乙基胺(0.56g)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中。將所得混合物在室溫攪拌1小時，稀釋(二氯甲烷，50mL)，用水(2x 20mL)、鹽水(20mL)洗滌，硫酸鎂干燥并濃縮，得到粗制產(chǎn)物(0.91g)，通過快速柱色譜法對所述粗制產(chǎn)物進行純化(用5-7％甲醇/二氯甲烷洗脫)，得到0.63g小標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ8.05(d，1H)，7.85(d，1H)，7.73(d，1H)，7.52-7.47(m，2H)，7.42-7.35(m，2H)，3.84-3.78(m，6H)，3.72-3.70(m，1/2H)，3.45-3.35(m，6H)，2.79-2.77(m，1+1/2H)，2.62-2.58(m，2H)，2.54-2.49(m，4H)，1.04-1.01(m，6H)。
d)N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺 在-78℃，將二甲基亞砜(0.097g)于二氯甲烷(1mL)中的溶液加至草酰氯(0.079g)于二氯甲烷(10mL)的溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后加入N-(2-二乙基氨基乙基)-N-(2-羥基乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]-丙酰胺(0.22g)于二氯甲烷(1mL+1mL洗液)中的溶液，將反應(yīng)混合物再攪拌15分鐘。加入三乙胺(0.29g)，歷時1小時使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀S后將混合物稀釋(二氯甲烷，30mL)，有機物用碳酸氫鈉溶液(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到小標(biāo)題化合物(0.21g)。
將粗制產(chǎn)物溶解在甲醇(10mL)中，并將7-(2-氨基乙基)-4-羥基-1，3-苯并噻唑-2(3H)-酮·鹽酸鹽(根據(jù)在Organic Process Research&Development 2004，8(4)，628-642中描述的方法制備；0.131g)與乙酸(0.1mL)和水(0.1mL)一起加入。在室溫攪拌30分鐘后，加入氰基硼氫化鈉(0.020g)，將反應(yīng)混合物攪拌過夜。加入氨(7N的甲醇溶液，1mL)，將混合物濃縮。通過快速色譜法對粗制殘余物進行純化(用1％氨；5％-7％甲醇/二氯甲烷洗脫)。將粗制產(chǎn)物直接用在下一步驟中。
N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的再次制備提供了進行分析的樣品。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.06(d，1H)，7.90(d，1H)，7.77(d，1H)，7.51(m，2H)，7.40(m，2H)，6.80(m，1H)，6.70(m，1H)，3.68(m，4H)，3.27(m，6H)，2.79-2.53(質(zhì)子數(shù)目不能確定)，2.44(m，4H)，0.92(m，6H)。


圖1化合物B的無定形形式的XRPD e)N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽
將N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.052g)溶解在乙醇(1.5mL)中，用48％氫溴酸(21μl)處理。過濾收集白色二氫溴酸鹽固體(0.058g)。
MSAPCI(+ve)579(M+1)。
1H NMR(DMSO)δ11.78-11.71(m，1H)，10.11-10.06(m，1H)，9.51-9.43(m，0.33H)，9.21-9.13(m，0.66H)，8.75-8.66(m，1H)，8.59-8.51(m，1H)，8.06(d，1H)，7.95-7.90(m，1H)，7.79(d，1H)，7.60-7.48(m，2H)，7.47-7.39(m，2H)，6.87(t，1H)，6.76(dd，1H)，3.78-3.53(m，10H)，3.25-3.09(m，10H)，2.91-2.80(m，2H)，2.73-2.61(m，2H)，1.26-1.15(m，6H)。NMR表明了在298K約2∶1旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物。

圖2化合物A的多晶型物的XRPD 制備2 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(化合物A)
a)N′-(2，2-二甲氧基乙基)-N，N-二乙基-乙烷-1，2-二胺.
在10-15℃，將N，N-二乙基-乙二胺(150g)于甲醇(500mL)中的溶液用乙二醛縮二甲醇(60wt％水溶液，225g)逐滴快速處理。加入結(jié)束后，將溶液溫?zé)嶂?5℃，然后溫?zé)嶂?2℃，并在該溫度保留16小時。將反應(yīng)混合物用5％鈀/炭(Johnson-Matthey型38H糊狀物(paste)，15g)處理，在6巴氫化直到通過GC/MS判斷反應(yīng)結(jié)束。過濾除去催化劑，蒸發(fā)濾液至干(甲苯共沸物，2.5L)，得到196.2g小標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ4.48(t，1H)，3.39(s，6H)，2.75(d，2H)，2.69(t，2H)，2.57-2.48(m，6H)，1.01(ts，6H)。
b)N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺.
歷時45分鐘，將草酰氯(151mL)滴加到3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酸(389g)(實施例7步驟b))于二氯甲烷(2.1L)和DMF(0.5mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物再攪拌16小時。隨后將混合物濃縮，重新溶解在DCM(1.7L)中，在0℃和歷時1.75小時滴加至N′-(2，2-二甲氧基乙基)-N，N-二乙基乙烷-1，2-二胺(325g)和異丙基二乙基胺(551mL)于DCM(1.7L)中的溶液中。將所得混合物在室溫攪拌3小時，用飽和溶液碳酸氫鈉(5x1L)、水(1.5L)洗滌，用硫酸鈉干燥，濃縮得到650g小標(biāo)題化合物。
m/e 431(M+H+，100％) c)N-[2-(二乙基氨基)乙基]-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]-N-(2-氧代乙基)丙酰胺
在0℃和歷時1.5小時，將N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2，2-二甲氧基乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(93g)于DCM(270mL)中的溶液用三氟乙酸(270mL)逐滴處理。加完后，使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀⒃贁嚢?小時。將反應(yīng)混合物濃縮，將殘余物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(1800mL，小心！)中。將含水混合物用DCM(4x400mL)萃取，合并的萃取物用硫酸鎂干燥并濃縮。將殘余物直接用在下一反應(yīng)中。
d)N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(化合物A)
將7-(2-氨基-乙基)-4-羥基-3H-苯并噻唑-2-酮·鹽酸鹽(53g)于無水NMP(216mL)中的溶液加熱至60℃，并用NaOH(8.2g)于甲醇(102mL)中的溶液一次性處理。將亮橙色懸浮液冷卻到室溫，并歷時20分鐘用N-[2-(二乙基氨基)乙基]-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]-N-(2-氧代乙基)丙酰胺于二氯甲烷(475mL)中的溶液逐滴處理。使反應(yīng)混合物攪拌25分鐘。然后歷時20分鐘逐份加入三乙酰氧基硼氫化鈉(91.5g)，將混合物再攪拌50分鐘。將反應(yīng)混合物倒入水(1.8L)中，用叔丁基甲基醚(TBME)(3x500mL)洗滌所得酸性溶液(pH5)。通過加入固體碳酸鉀將水相堿化至pH8，用二氯甲烷(3x750mL)萃?。缓喜⒌挠袡C物用硫酸鎂干燥，濃縮得到黑色油狀物。將該油狀物溶解在乙醇(200mL)中，加入48％氫溴酸水溶液(73rnL)。將溶液老化30分鐘，然后蒸干。將殘余物用乙醇(560mL)研磨；過濾收集所得固體，在50℃真空干燥。將粘稠的固體懸浮在沸乙醇(100mL)中，趁熱過濾。在50℃真空干燥收集的固體。將該物質(zhì)從乙醇/水(3∶1，500mL)中重結(jié)晶。在靜置過夜后，過濾收集所得固體，用冰冷的乙醇(75mL)洗滌。在真空干燥24小時，得到57g標(biāo)題化合物。
制備3 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(化合物B) 將N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(10g)在飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)和二氯甲烷(100mL)(加入少量甲醇以有助于溶解)。將混合物在室溫攪拌1小時。然后將各相分離，水相用另一份二氯甲烷(100mL)萃取。合并的有機相用飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)和飽和鹽水溶液(100ml)洗滌，硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)留下標(biāo)題化合物(8.66g)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.06(d，1H)，7.90(d，1H)，7.77(d，1H)，7.51(m，2H)，7.40(m，2H)，6.80(m，1H)，6.70(m，1H)，3.68(m，4H)，3.27(m，6H)，2.79-2.53(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.44(m，4H)，0.92(m，6H)。
制備4 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(化合物A) 將N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(例如，如在制備2中所制備)(1.88kg)于異丙醇∶水＝80∶20(20.97kg)中的懸浮液加熱至回流。然后過濾溶液，使濾液冷卻至50℃，然后加入N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二氫溴酸鹽(1.08g)的晶種。在50℃溫度保持20分鐘，然后將反應(yīng)混合物以速率0.1℃/min冷卻到5℃，將懸浮液在5℃保持3天，然后過濾收集沉淀的物質(zhì)。濾餅用異丙醇∶水＝80∶20(2.91kg)洗滌。然后在40℃真空干燥固體至恒重，得到標(biāo)題化合物(1.545kg)。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ11.50-8.52(m，3H)，8.06(d，1H)，7.90(d，1H)，7.77(d，1H)，7.52(m，2H)，7.42(m，2H)，6.87(d，1H)，6.76(d，1H)，3.74(m，4H)，3.61(br，4H)，3.29(t，2H)，3.2-3.0(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.87(m，2H)，2.65(t，2H)，1.22(t，6H)。
制備5 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二鹽酸鹽 將37wt/wt％鹽酸溶液(245.95μL)加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.56g)于甲醇(5.6mL)中的溶液中，生成透明溶液，將該透明溶液在室溫攪拌15分鐘。從溶液的主體中取出0.5mL等份液，用乙醚處理，形成流動固體(mobile solid)。將該懸浮液加回到溶液中，并將混合物在室溫攪拌2小時。然后過濾收集標(biāo)題化合物，用甲醇(1.12mL)洗滌，在濾器上干燥(0.46g)。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ11.46(m，1H)，8.06(d，1H)，7.88(d，1H)，7.75(d，1H)，7.55-7.38(m，4H)，6.88(d，1H)，6.76(d，1H)，3.74(m，8H)，3.28(t，2H)，3.2-3.0(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.92(m，2H)，2.66(t，2H)，1.25(t，6H)。
C32H44Cl2N4O4S的計算值C，58.98；H，6.81；N，8.60；S，4.92。實測值C，58.89；H，6.87；N，8.58；S，5.24。

圖3化合物B·二鹽酸鹽的多晶型物A的XRPD 下述實施例說明本發(fā)明。
實施例1 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·檸檬酸鹽 將檸檬酸(248.96mg)加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.5g)于甲醇(5mL)中的溶液中。透明溶液立即變得不透明，有橙色油狀物析出。將該混合物在60℃的外部溫度進行加熱，形成透明溶液，然后使該透明溶液冷卻至室溫并攪拌48小時。過濾收集所得沉淀物，用甲醇(1mL)和乙醚(1mL)洗滌。然后在室溫真空干燥固體4小時，得到標(biāo)題化合物(0.3g)。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.06(d，1H)，7.88(d，1H)，7.75(d，1H)，7.50(m，2H)，7.39(m，2H)，6.82(d，1H)，6.72(d，1H)，3.75(t，2H)，3.70(t，2H)，3.6-3.3(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，3.28(t，2H)，3.1-2.4(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，0.99(br，6H)。
圖4化合物B·檸檬酸鹽的二水合物多晶型物A的XRPD

實施例2 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二甲苯磺酸鹽 將對甲苯磺酸一水合物(667.33mg)一次性加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(1g)于甲醇(10mL)中的溶液中，生成透明溶液。將該溶液在室溫攪拌30分鐘，然后真空除去溶劑。將殘余物在乙醚(20mL)中在室溫攪拌16小時，然后除去溶劑，加入甲基叔丁基醚(20mL)。然后將該混合物在室溫攪拌16小時，接著過濾收集所得固體，用甲基叔丁基醚(5mL)洗滌。在室溫真空干燥標(biāo)題化合物16小時留下標(biāo)題化合物，其為無定形固體(1.18g)。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ11.35(1H，br)，8.05(d，1H)，7.88(d，1H)，7.76(d，1H)，7.51(m，6H)，7.40(m，2H)，7.09(d，4H)，6.83(d，1H)，6.74(d，1H)，3.77(t，2H)，3.72(t，2H)，3.64(br，4H)，3.4-3.0(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.85(m，2H)，2.64(t，2H)，2.28(s，6H)，1.22(t，6H)。
圖5化合物B·二甲苯磺酸鹽的無定形形式的XRPD 實施例3 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·磷酸鹽二-半-水合物 將磷酸(199.19mg)加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(1g)于甲醇(10mL)中的溶液中，生成膠狀物。將混合物加熱至回流，持續(xù)的攪拌得到流動固體。使懸浮液緩慢冷卻至室溫，然后過濾，濾餅用甲醇(2mL)洗滌。使標(biāo)題化合物(0.93g)在濾器上干燥。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.05(d，1H)，7.87(d，1H)，7.74(m，1H)，7.48(m，2H)，7.38(m，2H)，6.78(d，1H)，6.68(d，1H)，3.73(t，2H)，3.67(t，2H)，3.31(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，3.26(t，2H)，2.8-2.3(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，0.94(t，6H)。
圖6化合物B·磷酸鹽的二-半-水合物多晶型物A的XRPD
實施例4A N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·昔萘甲酸鹽二水合物 將1-羥基-萘-2-甲酸(328.42mg)于甲醇(3mL)中的懸浮液加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.5g)于甲醇(3mL)中的溶液中，將所得混合物加熱回流，然后使其冷卻至室溫，攪拌16小時。過濾標(biāo)題化合物，用甲醇(1mL)洗滌，室溫真空干燥1小時(0.47g)。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.24(d，2H)，8.04(d，1H)，7.87(d，1H)，7.75(m，5H)，7.50(m，4H)，7.40(m，4H)，7.11(d，2H)，6.83(d，1H)，6.73(d，1H)，3.75(t，2H)，3.70(t，2H)，3.6-3.3(m，4H)，3.26(t，2H)，2.6-3.1(不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.59(t，2H)，1.05(br，6H)。

圖7化合物B·二-昔萘甲酸鹽的二水合物多晶型物A的XRPD 實施例4B N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·二昔萘甲酸鹽二-半-水合物 將20mg二-水合物多晶型A(實施例4A)在水(0.5ml)中漿化1周。將所得溶液離心，并將上清液與固體物質(zhì)分離，使后者在通風(fēng)櫥中風(fēng)干過夜。

圖8化合物B·二-昔萘甲酸鹽的二-半-水合物多晶型物的XRPD 實施例5 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·硫酸鹽 將濃硫酸(23.98μL)滴加到N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.25g)于甲醇(2.5mL)中的溶液中。將混合物在室溫攪拌20分鐘，然后在外部溫度60℃加熱，接著使其冷卻回到室溫。然后加入甲基叔丁基醚(0.5mL)，將混合物在外部溫度60℃加熱，接著使其冷卻至室溫。用甲醇將混合物轉(zhuǎn)移到另一個燒瓶中以溶解混合物，然后真空除去溶劑。將甲基叔丁基醚(10mL)加至殘余物中，將混合物在室溫攪拌16小時。過濾收集標(biāo)題化合物，在濾器上干燥(0.24g)。發(fā)現(xiàn)固體為無定形的。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.05(m，1H)，7.88(m，1H)，7.75(m，1H)，7.50(m，2H)，7.38(m，2H)，6.85(m，1H)，6.73(m，1H)，3.74(m，4H)，3.58-3.40(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，3.28(t，2H)，3.03-2.73(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.60(t，2H)，1.09(s，6H)。
圖9化合物B·硫酸鹽的無定形形式的XRPD 實施例6 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·單苯甲酸鹽 將苯甲酸(52.75mg)一次性加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.25g)于甲醇(2.5mL)中的溶液中，生成透明溶液。將其在室溫攪拌1小時，然后真空除去溶劑。將殘余物在乙腈(5mL)中在室溫攪拌16小時，然后除去溶劑，加入甲基叔丁基醚(10mL)。將混合物在室溫攪拌3小時，然后過濾收集標(biāo)題化合物。分離標(biāo)題化合物，其為無定形固體。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.04(m，1H)，7.94(m，2H)，7.87(m，1H)，7.73(m，1H)，7.57-7.34(m，7H)，6.84-6.68(m，2H)，3.80-3.54(m，6H)，3.30(m，由于與水重疊而不能確認(rèn))，2.78-2.37(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，0.91(m，6H)。
圖10化合物B·單苯甲酸鹽的無定形形式的XRPD 實施例6A 結(jié)晶形式的N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·單苯甲酸鹽 將20mg無定形形式的單苯甲酸鹽(實施例6)溶解在1ml丙-2-醇中。使所得溶液在通風(fēng)櫥中在室溫緩慢蒸發(fā)，留下灰白色固體。

圖11化合物B·單苯甲酸鹽的結(jié)晶形式的XRPD 實施例7 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·單富馬酸鹽 將富馬酸(168.31mg)加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.84g)于甲醇(2mL)中的溶液中，生成不透明混合物。將混合物在外部溫度60℃進行溫?zé)?，然后使其冷卻到室溫，攪拌16小時。得到標(biāo)題化合物，其在蒸干后為無定形形式。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.05(m，1H)，7.87(m，1H)，7.74(m，1H)，7.49(m，2H)，7.38(m，2H)，6.80(m，1H)，6.70(m，1H)，6.58(s，2H)，3.78-3.53(m，6H)，3.36-3.19(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，2.82-2.40(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，0.96-0.86(m，6H)。
圖12化合物B·單富馬酸鹽的無定形形式的XRPD 實施例8 N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺·單苯磺酸鹽 將苯磺酸(158.51mg)加至N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺(0.58g)于甲醇(5.8mL)中的溶液中，生成透明溶液。將混合物在室溫攪拌1小時。得到標(biāo)題化合物，其在蒸干后為無定形固體。
1H NMR(400MHz，DMSO，90℃)δ8.05(d，1H)，7.88(d，1H)，7.75(m，1H)，7.64(m，2H)，7.50(m，2H)，7.40(m，2H)，7.28(m，3H)，6.83(m，1H)，6.73(m，1H)，3.77-3.35(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，3.28(t，2H)，3.01-2.47(m，不能確定質(zhì)子數(shù)目)，1.05(br，6H)。
圖13化合物B·單苯磺酸鹽的無定形形式的XRPD。
生物測定 腎上腺素能β2介導(dǎo)的cAMP生成 細(xì)胞制備 在培養(yǎng)箱中，在37℃和5％CO2下，H292細(xì)胞在225cm2燒瓶中在包含10％(v/v)FBS(胎牛血清)和2mM L-谷氨酰胺的RPMI培養(yǎng)基中生長。
實驗方法 通過用AccutaseTM細(xì)胞脫附溶液處理15分鐘，使附著的H292細(xì)胞從組織培養(yǎng)燒瓶脫離。在加濕培養(yǎng)箱中，在37℃和5％CO2下，將燒瓶孵育15分鐘。以0.05×106個細(xì)胞/mL，將脫附的細(xì)胞重新懸浮在RPMI培養(yǎng)基(包含10％(v/v)FBS和2mM L-谷氨酰胺)中。將5000個細(xì)胞(100μl)加至組織培養(yǎng)處理96孔板的每個孔，在加濕培養(yǎng)箱中，在37℃和5％CO2下，將細(xì)胞孵育過夜。將培養(yǎng)基取出，細(xì)胞用100μl測定緩沖液洗滌兩次，用50μl測定緩沖液(包含10mM HEPES pH7.4和5mM葡萄糖的HBSS溶液)置換。在室溫，將細(xì)胞放置20分鐘，在此之后，添加25μl的咯利普蘭(在包含2.4％(v/v)二甲基亞砜的測定緩沖液中制成1.2mM)。將細(xì)胞與咯利普蘭一起孵育10分鐘，在此之后，添加試驗化合物，在室溫將細(xì)胞孵育60分鐘。測定液中最終的咯利普蘭濃度為300μM，最終的載體濃度為1.6％(v/v)二甲基亞砜。反應(yīng)通過除去上清液來停止，用100μl測定緩沖液洗滌一次，用50μl細(xì)胞溶解緩沖液置換。將細(xì)胞單層冷凍于-80℃，保持30分鐘(或過夜)。
AlphaScreenTM cAMP檢測 使用AlphaScreenTM方法學(xué)，測定細(xì)胞溶解物中cAMP(環(huán)腺苷酸)的濃度。在板振蕩器上，使冷凍的細(xì)胞板解凍20分鐘，然后將10μl的細(xì)胞溶解物轉(zhuǎn)移至96-孔白色板。將40μl與生物素化cAMP一起預(yù)孵育的混合的AlphaScreenTM檢測珠子加至每個孔，將板在室溫避光孵育10小時。按照制造商所推薦的設(shè)置，使用EnVision分光光度計(Perkin-Elmer Inc.)，測量AlphaScreenTM信號。通過參考在相同實驗中使用標(biāo)準(zhǔn)cAMP濃度來確定的校正曲線，確定cAMP濃度。構(gòu)建激動劑的濃度響應(yīng)曲線，將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定pEC50和內(nèi)在活性。在每個實驗中，將內(nèi)在活性表達成對福莫特羅而確定的最大活性的分?jǐn)?shù)。
選擇性測定 腎上腺素能α1D 膜制備 膜從表達重組人α1D受體的人胚腎293(HEK293)細(xì)胞來制備。將這些膜稀釋在測定緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，0.1％明膠，pH7.4)中，使最終的膜濃度能在最大和最小特異性結(jié)合之間提供明顯窗口(clear window)。
實驗方法 測定在U形底的96孔聚丙烯板中進行。將10μl[3H]-哌唑嗪(0.3nM最終濃度)和10μl的試驗化合物(10×最終濃度)加至每個試驗孔。對于每塊測定板，就在存在10μl載體(10％(v/v)DMSO的測定緩沖液；定義最大結(jié)合)或10μL BMY7378(10μM最終濃度；定義非特異性結(jié)合(NSB))情況下的[3H]-哌唑嗪結(jié)合而言，得到8個重復(fù)樣。然后，添加膜，使最終體積為100μL。將板在室溫孵育2小時，然后使用96孔板Tomtec細(xì)胞收集器，將板過濾到PEI涂覆的GF/B濾板(在測定緩沖液中預(yù)浸1小時)上。在4℃，用250μl洗滌緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，pH7.4)洗滌五次，以除去未結(jié)合的放射性物質(zhì)。將板干燥，然后使用Packard板密封劑(plate sealer)，從下面將板密封，將MicroScint-O(50μl)加至每個孔。將板密封(TopSeal A)，用閃爍計數(shù)器(TopCount，Packard BioScience)，使用3分鐘計數(shù)方案，測量過濾器結(jié)合的放射性。
通過從平均最大結(jié)合減去平均NSB，確定總特異性結(jié)合(B0)。也從所有其它孔的值減去NSB值。將這些數(shù)據(jù)表達成占B0的百分比。使用通常范圍為0.1nM至10μM的系列稀釋度，確定化合物濃度-效應(yīng)曲線(對[3H]-哌唑嗪結(jié)合的抑制作用)。將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定化合物效力，將其表達成pIC50(對[3H]-哌唑嗪結(jié)合產(chǎn)生50％抑制作用的摩爾濃度的負(fù)對數(shù))。
腎上腺素能β1 膜制備 包含重組人腎上腺素能β1受體的膜得自Euroscreen。將這些膜稀釋在測定緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，120mM NaCl，0.1％明膠，pH7.4)中，使最終的膜濃度能在最大和最小特異性結(jié)合之間提供明顯窗口。
實驗方法 測定在U形底的96孔聚丙烯板中進行。將10μl[125I]-碘代氰基吲哚洛爾(Iodocyanopindolol)(0.036nM最終濃度)和10μl的試驗化合物(10×最終濃度)加至每個試驗孔。對于每塊測定板，就在存在10μl載體(10％(v/v)DMSO的測定緩沖液；定義最大結(jié)合)或10μl普萘洛爾(10μM最終濃度；定義非特異性結(jié)合(NSB))情況下的[125I]-碘代氰基吲哚洛爾結(jié)合而言，得到8個重復(fù)樣。然后，添加膜，使最終體積為100μL。將板在室溫孵育2小時，然后使用96孔板Tomtec細(xì)胞收集器，將板過濾到PEI涂覆的GF/B濾板(在測定緩沖液中預(yù)浸1小時)上。在4℃，用250μl洗滌緩沖液(50mM HEPES，1mMEDTA，120mM NaCl，pH7.4)洗滌五次，以除去未結(jié)合的放射性物質(zhì)。將板干燥，然后使用Packard板密封劑，從下面將板密封，將MicroScint-O(50μl)加至每個孔。將板密封(TopSeal A)，用閃爍計數(shù)器(TopCount，PackardBioScience)，使用3分鐘計數(shù)方案，測量過濾器結(jié)合的放射性。
通過從平均最大結(jié)合減去平均NSB，確定總特異性結(jié)合(B0)。也從所有其它孔的值減去NSB值。將這些數(shù)據(jù)表達成占B0的百分比。使用通常范圍為0.1nM至10μM的系列稀釋度，確定化合物濃度-效應(yīng)曲線(對[125I]-碘代氰基吲哚洛爾結(jié)合的抑制作用)。將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定化合物效力，將其表達成pIC50(對[125I]-碘代氰基吲哚洛爾結(jié)合產(chǎn)生50％抑制作用的摩爾濃度的負(fù)對數(shù))。
多巴胺D2 膜制備 包含重組人多巴胺D2s亞型受體的膜得自Perkin Elmer。將這些膜稀釋在測定緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，120mM NaCl，0.1％明膠，pH7.4)中，使最終的膜濃度能在最大和最小特異性結(jié)合之間提供明顯窗口。
實驗方法 測定在U形底的96孔聚丙烯板中進行。將30μl[3H]-螺哌隆(spiperone)(0.16nM最終濃度)和30μl的試驗化合物(10×最終濃度)加至每個試驗孔。對于每塊測定板，就在存在30μl載體(10％(v/v)DMSO的測定緩沖液；定義最大結(jié)合)或30μl氟代哌啶醇(10μM最終濃度；定義非特異性結(jié)合(NSB))情況下的[3H]-螺哌隆結(jié)合而言，得到8個重復(fù)樣。然后，添加膜，使最終體積為300μL。將板在室溫孵育2小時，然后使用96孔板Tomtec細(xì)胞收集器，將板過濾到PEI涂覆的GF/B濾板(在測定緩沖液中預(yù)浸1小時)上。在4℃，用250μl洗滌緩沖液(50mM HEPES，1mM EDTA，120mM NaCl，pH7.4)洗滌五次，以除去未結(jié)合的放射性物質(zhì)。將板干燥，然后使用Packard板密封劑，從下面將板密封，將MicroScint-O(50μl)加至每個孔。將板密封(TopSeal A)，用閃爍計數(shù)器(TopCount，Packard BioScience)，使用3分鐘計數(shù)方案，測量過濾器結(jié)合的放射性。
通過從平均最大結(jié)合減去平均NSB，確定總特異性結(jié)合(B0)。也從所有其它孔的值減去NSB值。將這些數(shù)據(jù)表達成占B0的百分比。使用通常范圍為0.1nM至10μM的系列稀釋，確定化合物濃度-效應(yīng)曲線(對[3H]-螺哌隆結(jié)合的抑制作用)。將數(shù)據(jù)擬合成四參數(shù)對數(shù)方程式，以確定化合物效力，將其表達成pIC50(對[3H]-螺哌隆結(jié)合產(chǎn)生50％抑制作用的摩爾濃度的負(fù)對數(shù))。
開始測定(Onset assay) Dunkin-Hartley豚鼠(交付時為200g至300g)由指定的飼養(yǎng)機構(gòu)提供。這些豚鼠通過頸脫位法來處死，將氣管分離。將粘連的結(jié)締組織除去，然后將每根氣管都切成四個環(huán)。然后，將這些組織環(huán)連接到等長傳感器。將這些組織洗滌，然后將1g的力施加給每個環(huán)。在所有實驗中，都使用成對的曲線設(shè)計(paired curve design)。將致敏劑量的1μM醋甲膽堿施加給這些組織。然后，將組織洗滌(三次，各次洗滌間隔一分鐘)，重新施加維持不變的1g張力，使組織保持1小時，達到平衡。然后，用1μM醋甲膽堿使組織收縮，一旦得到穩(wěn)定的響應(yīng)，就構(gòu)建異丙腎上腺素的蓄積濃度響應(yīng)曲線(10-9M-10-5M)。然后，將組織洗滌(三次，各次洗滌間隔一分鐘)，然后放置休息一小時。在此之后，用1μM醋甲膽堿使組織收縮，添加p[A]50濃度的試驗化合物。一旦組織已達到最大松弛，就添加30×p[A]50濃度的試驗化合物。一旦組織響應(yīng)已達到坪值，就將10μM索他洛爾加至上述浴中，以確認(rèn)松弛是β2介導(dǎo)的。
使用ADInstruments chart4forwindows軟件來收集數(shù)據(jù)，所述軟件測量激動劑的每個濃度所產(chǎn)生的最大張力。
對于異丙腎上腺素蓄積濃度曲線的每個濃度，都將響應(yīng)值計算成醋甲膽堿所引起收縮的松弛百分比。將曲線描繪成log10[激動劑](M)與對醋甲膽堿所引起收縮的抑制百分比。然后，將這些數(shù)據(jù)擬合成非線性回歸曲線擬合。對于每個實驗，都利用以下形式的4參數(shù)對數(shù)函數(shù)來對E/[A]曲線進行擬合· E和[A]分別為藥理作用(松弛百分比)和激動劑的濃度；α、β、[A]50和m分別為漸近線參數(shù)、基線參數(shù)、位置參數(shù)和斜率參數(shù)。每條異丙腎上腺素曲線的p[A]50和IA都從這種擬合來確定，以確定組織是否可用于得出試驗化合物的起效時間。
對于每個試驗化合物的p[A]50濃度，都將響應(yīng)值計算成醋甲膽堿所引起收縮的松弛百分比。將結(jié)果描繪成松弛百分比與時間，計算并且記錄達到90％松弛值所消耗的時間。
添加30×p[A]50濃度，這使得能確定個體組織中的最大化合物作用。因此，計算并且記錄p[A]50濃度時的化合物作用占最大化合物作用的百分比。
大鼠的藥物動力學(xué) 使用合適的給藥載體，制備試驗化合物的給藥溶液。給藥溶液中化合物的濃度通過以下方法來確定將等份液稀釋至50μg·ml-1的標(biāo)稱濃度(nominal concentration)，并且憑借以此濃度雙重注射標(biāo)準(zhǔn)溶液和QC標(biāo)準(zhǔn)來進行校正?；衔锿ㄟ^推注到尾靜脈內(nèi)而以靜脈內(nèi)的方式給予到多組大鼠(每組由三只250-350g大鼠組成)(約1ml·kg-1)。對于口服給藥，另一組動物(由2或3只動物組成)通過經(jīng)口管飼法來給藥(3ml·kg-1)。所遞送的劑量通過失重來估計。通常在給藥之前沒有對動物禁食，雖然如果需要的話就對這種情況進行研究。
從尾靜脈將血液樣品(0.25ml)采集到1ml注射器中，在樣品采集之后，立即將其轉(zhuǎn)移至EDTA試管，通過離心(5min，13000rpm)來制備血漿，之后貯存在-20℃。典型的采樣時間為2、4、8、15、30、60、120、180、240、300分鐘或直到準(zhǔn)確地描述了終末半衰期(terminal t1/2)。
血漿中分析物(或多種分析物)的濃度通過定量性質(zhì)譜來測定。以甲醇中1mg/ml的濃度來制備標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控儲備溶液。將一定范圍的通過系列稀釋來制備的標(biāo)準(zhǔn)和QC儲備液加至對照大鼠血漿(50μl)。此濃度范圍覆蓋了大鼠樣品中分析物的水平的范圍。使用包含內(nèi)標(biāo)(被選擇為與分析物非常相似)的50μl有機溶劑和100μl有機溶劑，對標(biāo)準(zhǔn)物、QC物和樣品進行液體提取。然后，樣品通過反復(fù)倒置來混合，在-20℃貯存至少1小時，然后在離心機中以3500rpm離心20分鐘。轉(zhuǎn)移每種樣品的等份液(120μl)，用于通過LC-MSMS進行分析。覆蓋試驗樣品中濃度范圍的標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控樣品處于上述標(biāo)稱濃度的25％。
利用WinNonlin來進行藥物動力學(xué)數(shù)據(jù)分析。利用標(biāo)準(zhǔn)的非房室分析(non-compartmental analysis)來估計參數(shù)，例如Tmax、Cmax、λ_z、t1/2_λ_z、AUCall、AUCINF(觀察到的)、Cl(觀察到的)、Vss(觀察到的)。
權(quán)利要求
1.N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的藥用鹽，前提是所述鹽不是二氫溴酸鹽或二鹽酸鹽。
2.權(quán)利要求1所述的藥用鹽，其中所述鹽為三氟乙酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、丙酮酸鹽、琥珀酸鹽、草酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、苯磺酸鹽、乙磺酸鹽、丙二酸鹽、昔萘甲酸鹽、抗壞血酸鹽、油酸鹽、煙酸鹽、糖精酸鹽、己二酸鹽、甲酸鹽、羥乙酸鹽、L-乳酸鹽、D-乳酸鹽、天冬氨酸鹽、蘋果酸鹽、L-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、硬脂酸鹽、2-糠酸鹽、3-糠酸鹽、萘二磺酸鹽(萘-1，5-二磺酸鹽或萘-1-(磺酸)-5-磺酸鹽)、乙二磺酸鹽(乙烷-1，2-二磺酸鹽或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸鹽)、羥乙磺酸鹽(2-羥基乙基磺酸鹽)、均三甲苯-2-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、D-扁桃酸鹽或L-扁桃酸鹽。
3.N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的藥用鹽，所述鹽為檸檬酸鹽、二甲苯磺酸鹽、磷酸鹽、二昔萘甲酸鹽、硫酸鹽、單苯甲酸鹽、富馬酸鹽或苯磺酸鹽。
4.一種制備權(quán)利要求1所述的鹽的方法，所述方法包括使合適的酸與N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺在合適的溶劑中，以及任選地在升高的溫度反應(yīng)。
5.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1所述的藥用鹽以及結(jié)合有藥用助劑、稀釋劑或載體。
6.權(quán)利要求1所述的藥用鹽，其用于治療。
7.權(quán)利要求1所述的藥用鹽在制備用于治療對β2腎上腺素受體活性的調(diào)節(jié)是有益的人類疾病或病癥的藥物中的用途。
8.權(quán)利要求1所述的藥用鹽在制備用于治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘或鼻炎的藥物中的用途。
9.權(quán)利要求1所述的藥用鹽，其用于治療呼吸系統(tǒng)病癥。
10.權(quán)利要求1所述的藥用鹽，其用于治療成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘或鼻炎。
11.治療對β2腎上腺素受體活性的調(diào)節(jié)是有益的疾病或病癥或降低所述疾病或病癥風(fēng)險的方法，所述方法包括向需要治療的患者給藥治療有效量的權(quán)利要求1所述的藥用鹽。
12.治療炎癥性疾病或病癥或降低所述疾病或病癥風(fēng)險的方法，所述方法包括向需要治療的患者給藥治療有效量的權(quán)利要求1所述的藥用鹽。
13.權(quán)利要求10或權(quán)利要求11所述的方法，其中所述疾病或病癥為成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)、肺氣腫、支氣管炎、支氣管擴張、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘或鼻炎。
全文摘要
本發(fā)明披露了N-[2-(二乙基氨基)乙基]-N-(2-{[2-(4-羥基-2-氧代-2，3-二氫-1，3-苯并噻唑-7-基)乙基]氨基}乙基)-3-[2-(萘-1-基)乙氧基]丙酰胺的藥用鹽，前提是其不是二氫溴酸鹽或二鹽酸鹽；以及披露了所述化合物作為藥物的用途，例如，用于治療呼吸系統(tǒng)病癥，例如哮喘或COPD中。
文檔編號C07D277/00GK101605770SQ200880004616
公開日2009年12月16日 申請日期2008年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月8日
發(fā)明者羅伯特·惠托克, 簡·威思內(nèi)爾 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司