專利名稱：：N-糖基-3-芳基丙烯酰胺衍生物、其制法及其醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥物化學領(lǐng)域，具體涉及一類N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄(或半乳)糖基)-3-芳基丙烯酰胺衍生物、它們的制備方法、以及對血管內(nèi)皮細胞增殖的抑制作用。
背景技術(shù)：
：腫瘤血管生成抑制劑(tumorangiogenesisinhibitor,TAI)能夠破壞或抑制血管生成，有效阻止腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移和復發(fā)，與傳統(tǒng)抗腫瘤藥物比較顯示出了巨大的優(yōu)勢。由于TAI是通過抑制內(nèi)皮細胞的增生而達到抑制腫瘤生長的目的，而不能徹底消除腫瘤細胞，故一般用藥周期較長。而目前在臨床研究和應用的TAI有許多是活性蛋白或結(jié)構(gòu)復雜的分子，藥物的制備比較困難，病人的治療花費大。因此開發(fā)療效好、結(jié)構(gòu)簡單、易于制備、成本低、毒副作用小的TAI是目前該類藥物的研究重點。惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是導致病人死亡的主要原因。目前研究認為腫瘤細胞實現(xiàn)侵襲轉(zhuǎn)移，必須首先穿越由細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix,ECM)和基底膜(basementmam-brance,BM)組成的屏障。這個屏障主要由兩部分組成一是結(jié)構(gòu)蛋白；二是氨基聚糖(GAGs)。GAGs的主要成分是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparansulfateproteogcyean，HSPG)，而HSPG是由1個核心蛋白和數(shù)個與之共價連接的硫酸乙酰肝素(hepa-ransulfate,HS)側(cè)鏈組成。乙酰肝素酶(heparanase，HPA)是一種內(nèi)切糖苷酶，通過特異性水解硫酸乙酰肝素，在ECM和BM的降解中發(fā)揮重要作用，此外其還具有促血管生成的能力。VEGF(vascularendothelialgrowthfactor)是促血管生成活性最強的生長因子，VEGF在腫瘤血管生成中起重要作用。bFGF(basicfibroblastgrowthfactor)可通過上調(diào)內(nèi)皮細胞表達和分泌膠原酶、尿激酶型纖溶酶原激活物(Urokinase-PlasminogenActivator,uPA)及其受體等，誘導內(nèi)皮細胞的增殖和遷移。bFGF與VEGF對促血管生成具協(xié)同效應，后者可使內(nèi)皮細胞bFGF生成增多，VEGF體外促血管生成的作用及誘導纖溶酶原激活物(PA)的能力也有賴于內(nèi)皮細胞產(chǎn)生的bFGF。臨床研究表明，許多腫瘤組織中bFGF表達升高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明公開了一類通式I的化合物及其水合物，經(jīng)藥理實驗顯示，本發(fā)明的化合物對bFGF刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖具有較強的抑制作用。因此，本發(fā)明的式I化合物及其含結(jié)晶水的化合物可以用于治療各種與血管生成相關(guān)的疾病，這些疾病包括各種癌癥和慢性炎癥，以及其它血管原性的疾病。本發(fā)明的化合物通式I如下其中G-NH-代表:.OAcAcOAcOOAc或AcOAcO.OAc.OAcNHG2-NH2Ar代表/=/=v。H/=>OAc/=>OCH3/=vNHAc/=>CH3/=vCI^>、、、、"1/、^&、、^y、HI1///=>N02=yCN/=^S02CH3=>OCH3/=yOAc/=>CH3/=>CI、vi一、zOAc、CHq、CIOAcN02'dCH3、—,f2"N、H、、其中Ar優(yōu)選代表勺fV《/CH3、CI、OCH3、N02/=^OCH3OCH3=VOCH3■OAc/=^QCH3/=^NHAc/=<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>本發(fā)明化合物的水合物也具有與化合物同樣的療效，其中的水合物以結(jié)晶水的形式存在,結(jié)晶水的摩爾當量從0.5到10。本發(fā)明部分化合物是N墨(l,3,4，6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-苯基丙烯酰胺(1-1)N-(l，3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃葡萄糖基)-3-(4-乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(1-2)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-(4-甲氧基苯萄-丙烯酰胺(1-3)N-(l,3,4，6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D4此喃葡萄糖基)-3-(4-乙酰氨基苯基)-丙烯酰胺(1-4)N-(l，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-(4-硝基苯基)-丙烯酰胺(1-5)N-(l,3，4，6-四-0-乙酰基-2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3-硝基苯基)-丙烯酰胺(1-6)N-(l,3,4，6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃葡萄糖基)-3-(4-甲磺?；交?-丙烯酰胺(1-7)N-(l,3,4，6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3,4-二乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(1-8)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3-甲氧基-4-乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(1-9)N-(l，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-卩-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3，4-二甲氧基苯基)-丙烯酰胺(1-10)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3,4-二氯苯基)-丙烯酰胺(1-11)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃葡萄糖基)-3-(2,3-二氯苯基)-丙烯酰胺(1-12)N-(l,3,4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3，4,5-三甲氧基苯基)-丙烯酰胺(1-13)N-(1，3,4，6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃葡萄糖基)-3-(2,3,4-三甲氧基苯基)-內(nèi)烯酰胺(1-14)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-{3-0-吡喃葡萄糖基)-3-(吡啶-3-基)-丙烯酰胺(1-15)化(1,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-e-D-卩比喃葡萄糖基)-3-(噻吩-2-基)-丙烯酰胺(1-16)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃半乳糖基)-3-苯基-丙烯酰胺(1-17)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃半乳糖基)-3-(4-乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(1-18)N-(l,3，4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃半乳糖基)-3-(4-甲氧基苯基)-丙烯酰胺(1-19)N-(l，3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(4-乙酰氨基苯基)-丙烯酰胺(1-20)N-(l,3,4，6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(3-硝基苯基)-丙烯酰胺(1-21)N-(l,3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(4-甲磺?；交?-丙烯酰胺(1-22)N-(l,3,4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-a4-二乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(1-23)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(3-甲氧基-4-乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(1-24)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃半乳糖基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-丙烯酰胺(1-25)N-(l,3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(2，4-二氯苯基)-丙烯酰胺(1-26)N-(l,3,4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(2-氯苯基)-丙烯酰胺(1-27)N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃半乳糖基)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)-丙烯酰胺(1-28)N-(l,3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(2,3，4-三甲氧基苯基)-丙烯酰胺(1-29)仏(1,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-0-0-吡喃半乳糖基)-3-(吡啶-3-基)-丙烯酰胺(1-30)本發(fā)明通式化合物(I)的制備方法如下-其中關(guān)鍵中間體G-NH2，的制備方法如下，其中G-NH2代表G,-NH2或G2-NH2:1,3,4，6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃氨基葡萄糖(G!-NH2)的合成路線如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>2-氨基葡萄糖鹽酸鹽.OAc<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>1，3，4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃氨基半乳糖(G2-NH2)的合成是以2-氨基半乳糖鹽酸鹽為原料，方法同G!-NH2.目標化合物I的制備方法如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中ae代表反應條件a:反應物為苯甲醛；溶劑為氫氧化鈉和水。b:反應物為醋酐；溶劑為吡啶。c:反應物為HC1;溶劑為丙酮。d:反應物為醋酸鈉；溶劑為水。e:反應物為草酰氯，或二氯亞砜，或EDCI/H0Bt;溶劑為二氯甲垸或DMF-下面是本發(fā)明部分化合物的藥理試驗及結(jié)果。本發(fā)明部分化合物在常氧狀態(tài)下對血管內(nèi)皮細胞增殖抑制活性的測試方法如下材料細胞系人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC，4000個/孔)培養(yǎng)基高糖DMEM(HG-DMEM)，10%胎牛血清(FBS)稀釋方法所有化合物先用DMSO配成0.5mol/L的母液，給藥前用新鮮培養(yǎng)基稀釋使用。操作流程平底96孔板接種4000個細胞/孔。孵育24小時(37'C,5。/。C02)后加入不同濃度，含有重組牛堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的化合物(終濃度10ng/ml)。孵育48hr后，每孔加入20^1MTT(5mg/ml,PBS溶解過濾，4'C避光保存)。37。C孵育4hr。用多道移液器將MTT從96孔板中吸出(小心處理勿損傷細胞)。每孔加100plDMSO。室溫振蕩15分鐘后，使用ThermoMultiskan系統(tǒng)檢測570nm的吸收情況。使用GWBASIC的logit計算方法，評估化合物對血管內(nèi)皮細胞增值的抑制作用。結(jié)果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表1中化合物代號對應的化學結(jié)構(gòu)同實施例。藥理測試結(jié)果表明，本發(fā)明的化合物對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)的增殖有不同程度的抑制作用，其中I-9，1-26和1-27的活性較強。本發(fā)明還提供了一種治療與血管生成相關(guān)的疾病的藥物組合物，其中含有治療有效量的通式I化合物和藥學上可接受的載體。所述藥物組合物可以是普通片劑或膠囊、緩釋片劑或膠囊、控釋片劑或膠囊、口服液、注射劑等制劑學上常規(guī)的制劑形式。一般地，本發(fā)明的N-糖基-3-芳基丙烯酰胺衍生物用于治療時，人用劑量范圍為lmg5000mg/天。也可根據(jù)劑型的不同和疾病嚴重程度，使用劑量超出該范圍。具體實施例方式實施例1N-(l,3A6-四-0-乙?；?2-脫氧-p-D-吡喃葡萄糖基)-3-苯基丙烯酰胺半水化合物(I-l)的制備2-亞芐基-l,3,4,6-四羥基-2-脫氧-p-D-吡喃氨基葡萄糖(II-l)0'C下將U,4，6-四羥基-2-脫氧-D-吡喃氨基葡萄糖鹽酸鹽10g(46mmol)加入到含有NaOH2.2g(55mmol)的47mL水溶液中，攪拌下緩緩加入苯甲醛5.4mL(53mmo1)，很快析出白色固體，繼續(xù)攪拌lh后停止反應，0。C下放置12h，過濾，依次用水、乙醚(V):乙醇(V)二4:1的混合溶劑洗滌，干燥得白色固體混合物10.42g，不純化直接投入下步反應。2-亞芐基-l，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃氨基葡萄糖(III-l)含中間體II-1的混合物10.4g加入到60mL吡啶中，冰水浴中攪拌下加入醋酸酐42mL(0.46moD，升溫至35t-4(TC，保溫6h，3(TC下減壓蒸出部分溶劑，將剩余反應液倒入冰水中，有白色固體析出，攪拌lh，過濾，依次用水、石油醚洗滌，干燥得白色固體10.2g，產(chǎn)率60%。m.p.153-154.5。C(文獻值m.p.158-160°C[合成化學，2003,11:379-380])1,3,4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃氨基葡萄糖鹽酸鹽(G廣NH2.HC1)將中間體III-l10.42g(23mmo1)加入到322mL丙酮中，室溫攪拌下緩慢加入含濃HC10.95mL的11.5mL甲醇溶液，很快析出白色固體，反應lh后加入乙醚停止反應，冷卻，0'C下保溫lh,過濾，濾餅用乙醚洗滌，干燥得白色固體G廣NH2.HC15.27g，產(chǎn)率58%。M.p.229°C(碳化)(文獻值:m.p.230°C,[US4216208].1,3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃氨基葡萄糖(Gi-NH2)將中間體G,-NH2.HC15.27g(mmol)溶解在28mL水中，加入乙酸鈉2.25g，常溫下攪拌lh，析出白色固體，氯仿萃取，萃取液減壓蒸餾除去溶劑得白色固體，乙醚洗滌后干燥得白色固體4.23g，產(chǎn)率68%，m.p.l29-131。C。(文獻值m.p.127-129,[US4216208]).N-(l，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-苯基丙烯酰胺半水化合物(I-l)將肉桂酸0.21g(1.44mmo1)和1-羥基苯并三唑(HOBt)0.19g(1.44mmo1)懸浮于10mL干燥的CH2C12中，然后將1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)0.28g(1.44mmo1)慢慢加入其中，溶液馬上澄清，室溫下反應24h后，將中間體GrNHb0.50g(L44mmo1)慢慢加入反應液中，在N2保護下室溫反應24h。反應液分別用水(20mLxl)，飽和NaHC03(20mLx2)，飽和NaCl(20mLxl)洗滌，無水MgS04干燥。過濾，濾液濃縮后柱層析(2:1—1:1，石油醚/乙酸乙酯)，(2:1，石油醚/乙酸乙酯，R產(chǎn)0.14)，所得到的固體于真空干燥器中干燥24h得白色固體0.42g，收率61.15%，m.p.200-20rC;LH-NMR(300MHz，CDC13)S(ppm):7.62(1H,d,J=15.6Hz，-CH=)，7.48(2H,m，aromatic),7.36(3Rm,aromatic),6.30(1H，d,J=15.6Hz,-CH=)，5.82(1H,d，J=9.6Hz，H-l)，5,76(1H，d,J=9Hz,NH),5.21(2H,m,H-3,4)，4.50(1H,q，J=9.6Hz，H-2),4.30(1H,dd,J=4.5Hz,J=12.3Hz,H-6a),4.15(1H，dd,J=2.1Hz，J=12.6Hz，H-6b),3.85(1H,ddd,J=1.8Hz,J=4.2Hz,J=9Hz,H-5),2.108,2.101,2.056,2.029(each3H，eachs，eachCH3);IR(cm"):3261(NH)，3085,2969,2888(CH)，1749(ester，C=0),1660，1639(amide,C=0)，1551，1230,1130,1091，1074，1042,745,702MS(ESI(+)70V，m/z):477.6[M+H]+;Anal.CalcdforC23H27NO100.5H2O:C,56.79,H,5.80,N,2.88.Found,C,56.98,H，5.82,N,2.78.實施例2N-(l,3，4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-p-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3,4-二乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(I-8)的制備9冰浴冷卻下將咖啡酸1.5g(8.33mmoD加入到1.15g(28.75mmol)NaOH溶于11ml水所形成的溶液中，待全溶后慢慢滴加Ac202.27ml(20.82mmol)，滴加完后溶液變渾濁，撤去冰浴常溫下攪拌反應1.5h。停止反應，冰浴下用10%H2S04溶液調(diào)pH至2-3左右，繼續(xù)攪拌20min，過濾，濾餅用水充分洗滌數(shù)次，于紅外燈下烘干得灰白色固體(全乙?；Х人?2.01g，收率91.36%。將全乙?；Х人?.34g(1.3mmol)懸浮于10mL的干燥CH2Cl2中，慢慢滴加草酰氯0.70g(0.47mL，5.5mmol)，溶液有澄清現(xiàn)象，之后滴加一滴無水DMF,大量氣泡產(chǎn)生，溶液馬上澄清，然后于室溫下攪拌反應24h。減壓下除去溶劑得到黃色固體，無需純化直接投入下一步反應。將中間體G廣NH20.5g(1.3mmol)懸浮于7mL的CH2C12中，攪拌下加入碳酸鈉(0.30g，2.8mmol)溶于水(7mL)所形成的溶液，有機層馬上澄清。將制得的酰氯溶于CH2CI2(4mL)中，然后慢慢滴入到以上的兩相溶液中，之后于室溫下攪拌反應過夜。將反應液移入分液漏洞中，分出有機層，水層用CH2C12(lOmL")萃取，有機相合并后用飽和NaHC03溶液(10ml><2)洗滌，無水MgS04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(1:1，石油醚/乙酸乙酯，R產(chǎn)0.18)，得淡黃色泡沫狀固體0.61g，收率79.1%，m.p.211-212。C;[a]7D=+43.86(cO.14，CH3OH);!H-NMR(300MHz,CDC13)5(ppm):7.55(1H，d,J=15.6Hz,-CH-)，7.35(1H,d,J=8.4Hz,aromatic),7.32(1H,s,aromatic),7.20(1H,d,J=8.4Hz,aromatic),6.21(1H，d,J=15.3Hz,-CH=)，5.74(1H,d，J=8.7Hz,NH),5.66(1H，d,J=9.6Hz,H-1),5.19(2H,m,H-3,4)，4.46(1H，m，H-2),4.29(1H，dd,J=4.5Hz,J=12.3Hz,H-6a),4.14(1H,m，H-6b),3.83(1H,m,H-5),2.310，2.300(each3H,eachs,eachCH3),2.107，2.100,2.049,2.020(each3H,eachs,eachCH3);13C-NMR(300MHz,CDC13)S(ppm):171.28，170.66,169.55，169.24(4C,esterC=0),168.08,167.99(2C,esterC=0),165.31(1C,amideC=0)，143.31,142.41,140.59,126.35,123.89,120.57(6C,aromaticC),133.24，122.49(2C,CH=CH)，92.75(1C,C-l),73.06,72.59,67.78，61,68(4C，C-2,3，4，5)，53.10(1C,C-6),20.86,20.71,20.62，20.56(4C,4xCH3);IR(cm"):3345(NH)，3042,2967，2880(CH)，1773,1754(ester,OO),1666,1635(amide，OO),1535，1505,1226,1106，1076,1043,835;MS(EI,70V,m/z):593[M]+;Anal.CalcdforC27H31N014:C,54.64，H,5.26，N,2.36.Found,C，54.70,H,5.19,N,2.21.實施例3N-(l,3，4，6-四-0-乙酰基-2-脫氧-(3-D-吡喃葡萄糖基)-3-(3-甲氧基-4-乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(I-9)的制備將中間體G!-NH20.5g(1.3mmol)懸浮于20ml的干燥CH2Cl2+，冰浴下慢慢滴加干燥的三乙胺3ml(22mmol)，溶液馬上澄清，然后分批加入HOBt0.175g(1.3mmoD，攪拌至溶液澄清。撤去冰浴，于室溫下加入乙酰化阿魏酸0.31g(1.3mmo1)，反應液呈桔黃色，之后再加入EDCI0.25g(1.3mmo1)，加完后于室溫下攪拌反應24h。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHCCV溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20ml><2)洗滌，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(1:1，石油醚/乙酸乙酯，R產(chǎn)0.23)，得白色絮狀固體0.25g，收率34.0%，m.p.192-194。C;[a]7D=+42.56(c0.125，CH3OH);'H-NMR(300MHz，CDC13)S(ppm):7.57(1H,d,J=15.3Hz,-CH=),7.06(3H,m,aromatic),6.23(1Rd,J=15.6Hz，-CH=),5.75(1H，d,J=9Hz,NH),5.67(1H,d,J=9.6Hz，H-l)，5.19(2H,m,H-3,4),4.48(1H,m,H-2),4.29(1H,dd,J=12.3Hz,J=4.5Hz,H-6a),4.14(1H,dd,J=2.4Hz,J=9.9Hz,H-6b),3.86(3H,s,OCH3),3.83(1H,m,H-5),2.32(3H，s,CH3),2.110,2.104，2.054，2.047(each3H,eachs,eachCH3);IRCcm.1):3334(NH),3071,2965(CH),1756(ester,00)，1662,1630(amide，C=0)，1601,1532，1515,1223,1125,1043,846;MS(EI,70V,m/z):565.2[M〗+;Anal.CalcdforC26H31N013:C，55.22,H,5.53,N,2.48.Found:C,55.11,H,5.45,N,2.20.實施例4N-(l,3,4，6-四-0-乙酰基-2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(4-甲氧基苯基)-丙烯酰胺(I-19)的制備2-亞芐基-l，3,4,6-四羥基-2-脫氧-卩-D-吡喃氨基半乳糖(II-2)(TC下將1，3,4,6-四羥基-2-脫氧-D-卩比喃氨基葡萄糖鹽酸鹽10g(46mmol)加入到含有NaOH2.2g(55mmol)的47mL水溶液中，機械攪拌下緩緩加入苯甲醛5.4mL(53mmo1)，很快析出白色固體，繼續(xù)攪拌lh后停止反應，0卩下放置12h，過濾，依次用水、乙醚(V):乙醇(V)=4:1的混合溶劑洗滌，干燥得白色固體混合物10g，未經(jīng)純化直接投下步反應。2-亞芐基-l,3,4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-卩-D-吡喃氨基半乳糖(III-2)將含有中間體II-2的混合物10g加入到60mL吡啶中，冰水浴中攪拌下加入醋酸酐42mL(0.46mol)，升溫至35。C-4(TC，保溫6h，30。C下減壓蒸出部分溶劑，將剩余反應液倒入冰水中，有白色固體析出，攪拌lh，過濾，依次用水、石油醚洗滌，干燥得白色固體11.5g，未經(jīng)純化直接投下反應。1，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-卩-D-吡喃氨基半乳糖鹽酸鹽(G2-NH2.HC1)將含有中間體III-2的混合物4.4g加入到200mL丙酮中，室溫攪拌下緩慢加入含濃HC14.4g的5mL甲醇溶液，很快析出白色固體，反應lh后加入乙醚停止反應，冷卻，O"C下保溫lh，過濾，濾餅用乙醚洗滌，干燥得白色固體3.8g，產(chǎn)率100%。mp200-204。C(炭化)(文獻值m.p.204-206°C[Eur.J.Org.Chem.2006，657-671])N-(l，3,4，6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(4-甲氧基苯基)-丙烯酰胺(I-19)的制備將化合物G2-NH2.HC10.5g(1.3mmol)懸浮于20ml干燥CH2C12中，冰浴下緩慢滴加干燥三乙胺0.17ml(1.3mmol)，溶液澄清，撤冰浴，于室溫下攪拌lh后，分批加入HOBt0.21g(1.56mmol)，再加入4-甲氧基肉桂酸0.28g(L56mmo1)，再加入EDCI0.30g(1.56mmol)，室溫下攪拌36h。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHC03溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1:1)，得白色固體0.32g,收率48.6%，m.p.l81-183。C198D=+24.10(c0.195，CHC13);1H-麗R(300MHz，CDC13)S(ppm):7.58(1H,d,J=15.6Hz，-CH=),7.37-7.19(3H,m,aromatic),6.26(1H,d，J=15.6Hz，-CH=),5.75(1H,d,J=8.7Hz,NH)，5.58(1H，d,J=9.6Hz,H-l)，5.41(1H，d，J=3Hz，H扁4)，5.05(1H,dd,J=3.3Hz，J=11.4Hz,H-3)，4.63(1H,dd，J=9.6Hz,J=10.5Hz，H-2),4.19-4.06(3H,m,H-5,6a,6b),2.31(3H,s,COCH3),2.32(3H,s,COCH3),2.19,2.11,2.06,2.00(each3H,eachs,eachCH3);IR(cm"):3385(NH)，2939(CH)，1751(ester,C=0),1668(amide，C=0),1632(C=C),1544，1506,1429,1219，1074，1041;MS(ESI(+)70V，m/z):594.1[M+H〗+;Anal.CalcdforC27H31NO140.5H2O:C,53.82，H,5.35，N,2.32.Found:C,53.91,H，5.26,N,1.90.實施例6N-(l，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(3-甲氧基-4-乙酰氧基苯基)-丙烯酰胺(I-24)的制備將化合物GrNH2.HCl0.5g(1.3mmol)懸浮于20ml干燥CH2C12中，冰浴下緩慢滴加干燥三乙胺0.17ml(1.3mmol)，溶液澄清，撤冰浴，于室溫下攪拌lh后，分批加入HOBt0.175gU.3mmo1)，再加入乙酰化阿魏酸0.31g(L3mmo1),再加入EDCI0.25g(1.3mmol)，室溫下攪拌36小時。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHC03溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20ml><2)洗滌，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析柱層析(石油醚/乙酸乙酯=2:1)，得白色固體0.17g，收率23.3%，m.p.l83-185。C[a]24D=+20.63(c0.095，CHC13);1H-NMR(300MHz,CDC13)S(ppm):7.56(1H,d,J=15.6Hz,-CH=)，7.06(3H，m,aromatic),6.24(1H,d,J=15.6Hz,-CH=)，5.77(1H，d，J=8.7Hz,NH),5.56(1H,d,J=9.6Hz,H-l)，5.41(1H，d，J=3Hz,H-4),5.15(1H,dd,J=3.3Hz,J=11.4Hz，H-3)，4.63(1H，dd,J=9.6Hz,J=10.5Hz,H-2),4.17-4.06(3H，m,H-5,6a,6b),3.86(3H,s,OCH3),2.32(3H,s，COCH3),2.19,2.11,2.06,2.00(each3H,eachs,eachCH3);IR(cm"):3337(NH),2950(CH),1745(ester,OO),1663(amide,C=0),1630(C=C),1601，1520,1221，1126,廳，860;MS(ESI(+)70V,m/z):567.0[M+H]+;MS(ESI(-)70V，m/z):564.0[M-H]-;Anal.CalcdforC26H31N013:C,55.22，H，5.53,N，2.48.Found:C,55.32,H,5.46,N,2.47.實施例7N-(l，3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)-丙烯酰胺(I-25)的制備將化合物G2-NH2.HC10.5gU.3mmo1)懸浮于20ml干燥CH2C12中，冰浴下緩慢滴加干燥三乙胺0.17ml(1.3mmol)，溶液澄清，撤冰浴，于室溫下攪拌lh后，分批加入HOBt0.21g(1.56mmo1)，再加入3，4-二甲氧基肉桂酸0.33g(1.56mmo1),再加入EDCI0.30g(1.56mmo1)，室溫下攪拌36h。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHC03溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1:1)，得白色固體0.44g，收率62.8%，m.p.105-108°C[a]24D=+23.2(c0.075，CHC13);1H-NMR(500MHz，CDC13)S(ppm):7.54(1H，d，J=15.5Hz,-CH=),7.07(1H,d,J=8.2Hz,aromatic):7.01(1H，d,J=1.88Hz,aromatic),6.85(1H,d，J=8.5Hz，aromatic),6.17(1H,d,J=15.5Hz,-CH=)，5.76(1H,d，J=9Hz,H-l),5.45(1H，d，J=9.5Hz,NH),5.41(1H,d,J=2.5Hz,H-4),5.15(1H,dd，J=3.3Hz,J=11.4Hz,H-3),4.63(1H,dd，J=9.3Hz,J=10.5Hz,H-2),4.22-4.06(3H,m,H-5,6a,6b)，3.94(3H,s,OCH3),3.91(3H,s，OCH3),2.19,2.11,2.05,2.00(each3H,eachs,eachCH3);IR(cm-l):3457(NH),2939(CH)，1750(ester,C=0)，1662(amide,C=0),1626(OC),1516，1423,1370,1264，1220，1074,1040,846,810;MS(ESI(+)70V，m/z):538.1[M+H]+;Anal.CalcdforC25H31N012:C,55.86，H,5.81,N,2.61.Found:C，55.81,H,5.87,N，2.44.實施例8N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-p-D-吡喃半乳糖基)-3-(2,4-二氯苯基)-丙烯酰胺(I-26)的制備將化合物G2-NH2.HC10.5g(1.3mmol)懸浮于20ml干燥CH2C12中，冰浴下緩慢滴加干燥三乙胺0.17ml(1.3mmol)，溶液澄清，撤冰浴，于室溫下攪拌lh后，分批加入HOBt0.21g(1.56mmol)，再加入2，4-二氯肉桂酸0.28g(1.56mmol),再加入EDCI0.30g(1.56mmoD，室溫下攪拌36h。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHC03溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1:1)，得白色固體0.38g，收率53.5%，m.p.l53-156。C[a]24D=+16.22(c0.185，CHC13);1H-NMR(300MHz,CDC13)S(ppm):7.卯(1H,d,J=15.6Hz，-CH-),7.49(1H,d,J=8.4Hz,aromatic):7.43(1H,s,，aromatic),7.24(1H，d,J=8.7Hz,aromatic),6.32(1H,d，J=15.6Hz,-CH=),5.86(1H,d,J=9.3Hz,NH),5.80(1H,d，J=8.7Hz,H-l),5.41(1H,d,J=2.4Hz,H-4),5.18(1H,dd,J=3.0Hz,J=ll.lHz,H-3),4.61(1H,dd，J=9.3Hz,J=9.6Hz,H-2),4.23-4.07(3H，m,H-5,6a,6b),2.20,2.12,2.06,2.00(each3H,eachs,eachCH3);IR(cm4):3342(NH),2940(CH),1748(ester,C=0),1665(amide,C=0),1629(OC),1532,1471,1373，1223,1081,1044,869;MS(ESI(-)70V,m/z):543.9[M-H].;Anal.CalcdforC23H25Cl2NO10:C，50.56，H，4.61,N,2.56.Found:C，50.40,H,4.64,N，2.15.14實施例9N-(l,3,4,6-四-0-乙?；?2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(2-氯苯基)-丙烯酰胺(I-27)的制備將化合物G2-NH2.HC10.5gU.3mmo1)懸浮于20ml干燥CH2C12中，冰浴下緩慢滴加干燥三乙胺0.17ml(1.3mmoD，溶液澄清，撤冰浴，于室溫下攪拌lh后，分批加入HOBt0.21g(1.56mmoD，再加入2-氯肉桂酸0.29gU.56mmo1)，再加入EDCI0.30g(1.56mmol)，室溫下攪拌36h。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHC03溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20mlx2)洗漆，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1-1)，得白色固體0.38g，收率53.5%，m.p.l00-102。C[a]24D=+18.4(c0.075，CHC13);1H-NMR(500MHz,CDC13)S(ppm):7.53(1H,d,J=l5.6Hz,-CH=),7.47(1H,s,aromatic),7.35-7.27(3H,m，aromatic),6.32(1H,d,J=15.6Hz,-CH=),5.81(2H,d，J=8.8Hz，overlapping,NH,H-l)，5.42(1H,d，J=2.8Hz，H-4),5.21(1H,dd,J=3.3Hz,J=11.3Hz，H-3),4.60(1H，dd，J=9.3Hz，J=10.5Hz,H-2),4.22-4.08(3H,m,H-5，6a，6b),2.20，2.11，2.05，2.00(each3H,eachs，eachCH3);IR(cm"):3375(NH),2970(CH),1751(ester,C=0)，1666(amide,C=0),1631(C=C),1547,1431,1369,1221，1077,1041，788,745;MS(ESI(-)70V,m/z):509.9[M-H]-;Anal,CalcdforC23H26ClNO10:C,53.96,H,5.12,N,2.74.Found:C,53.91,H,5.42，N，2.44.實施例10N-(l，3，4,6-四-0-乙酰基-2-脫氧-P-D-吡喃半乳糖基)-3-(2,3，4-三甲氧基苯基)-丙烯酰胺(I-29)的制備將化合物G2-NH2.HC10.5g(1.3mmol)懸浮于20ml干燥CH2C12中，冰浴下緩慢滴加干燥三乙胺0.17ml(1.3mmol)，溶液澄清，撤冰浴，于室溫下攪拌lh后，分批加入HOBt0.21g(1.56mmoD，再加入2,3,4-三甲氧基肉桂酸0.37g(1.56mmol)，再加入EDCI0.30g(1.56mmol)，室溫下攪拌36h。反應液依次用水(20mlx2)，飽和NaHC03溶液(20mlx2)，飽和食鹽水(20mlx2)洗滌，無水Na2S04干燥過夜。過濾，濾液減壓蒸去溶劑。剩余物柱層析(石油醚/乙酸乙酯=1:1)，得白色固體0.47g，收率63.5%,m.p.92-94。C[a]24D=+21.3(c0.28，CHC13);1H-NMR(500MHz,CDC13)S(卯m):7.75(1H,d,J=15.8Hz，-CH=),7.20(1H,d,J=8.8Hz,aromatic)6.67(1H，d,J=8.8Hz,aromatic),6.32(1H,d,J=15.7Hz，-CH=),5.76(1H,d，J=8.8Hz，NH)，5.51(1H,d，J=9.6Hz,H-1),5.41(1H,d,J=2.5Hz，H-4),5.15(1H,dd，J=3.3Hz，J=11.4Hz,H-3)，4.64(1H,dd,J=9.3Hz,J=10.5Hz,H-2),4.20-4.07(3H,m,H-5,6a,6b),3.90(3H,s,OCH3)，3.89(3H,s，OCH3),3.86(3H,s,OCH3),2.19,2.11,2.05,2.00(each3H,eachs,eachCH3);IR(cm"):3471(NH)，2942(CH)，1751(ester,C=0),1660(amide,00)，1624(C=C),1548,1437:1370,1220,1096,1041,800;MS(ESI(+)70V,m/z):568.2[M+H]+;MS(ESI(-)70V,m/z):566.1[M-H]-;Anal.CalcdforC26H33N013:C，55.02,H,5.86,N,2.47.Found:C，54.71,H,6.02,N,2.24.實施例11片劑取實施例9中所得化合物0.5g，淀粉2g,糊精lg混合，用適量30%乙醇作濕潤劑，制粒，壓片。1權(quán)利要求1、通式(I)的化合物或其水合物其中G-NH-代表Ar代表2、權(quán)利要求1的化合物或其水合物，其中Ar代表/=vOH/=>OAc/<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>3、權(quán)利要求2的化合物或其水合物，其中Ar代表/=vOH/=>OAc/<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>4、權(quán)利要求1至3中任一項的化合物或其水合物，其中的水合物以結(jié)晶水的形式存在，結(jié)水的摩爾當量從0.5到10。5、一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求1至4中任一項的的化合物或其水合物和藥學上可接受的載體。6、權(quán)利要求1至4中任一項的化合物或其水合物在制備治療血管生成性疾病的藥物中的用途。7、權(quán)利要求6的用途，其中血管生成性疾病是腫瘤或慢性炎癥。全文摘要本發(fā)明涉及藥物化學領(lǐng)域，具體涉及一類N-(1，3，4，6-四-O-乙?；?2-脫氧-β-D-吡喃葡萄(或半乳)糖基)-3-芳基丙烯酰胺衍生物(I)，其中G和Ar的定義同說明書，藥理試驗證明，本發(fā)明化合物具有抑制血管內(nèi)皮細胞增殖的作用，可用于臨床治療腫瘤或慢性炎癥。文檔編號C07H15/26GK101591369SQ20081012396公開日2009年12月2日申請日期2008年5月30日優(yōu)先權(quán)日2008年5月30日發(fā)明者姚碩蔚,張飛皇,徐云根申請人:徐云根