專(zhuān)利名稱(chēng)：一種多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種多氯聯(lián)苯及其制備，特別是涉及一種多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原及 其制備方法。
背景技術(shù)：
多氯聯(lián)苯(PCBs)作為一種受到世界各國(guó)環(huán)境工作者廣泛關(guān)注的環(huán)境激素類(lèi)污染物， 其檢測(cè)方法的研究成為一個(gè)研究熱點(diǎn)。近年來(lái)，采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定多氯聯(lián)苯的研究成為 其快速監(jiān)測(cè)方法的改進(jìn)研究方向。中國(guó)國(guó)內(nèi)的幾個(gè)大學(xué)發(fā)表的研究文章，其多氯聯(lián)苯的半 抗原均來(lái)自國(guó)外研究機(jī)構(gòu)的饋贈(zèng)[l， 2]。國(guó)內(nèi)迄今為止還沒(méi)有見(jiàn)到多氯聯(lián)苯半抗原制備方 法的報(bào)道。PCBs同族體的物理、化學(xué)、生物和毒物學(xué)的性質(zhì)不同。因此有關(guān)前沿研究要求 PCBs的分析必須由測(cè)定總量的水平提高到測(cè)定同類(lèi)物和異構(gòu)體的水平上來(lái)，因此單個(gè)PCBs 同族體的定性和定量分析是十分必要的。多氯聯(lián)苯同系物及其衍生物的制備對(duì)其毒理學(xué)性 質(zhì)，遷移轉(zhuǎn)化，生態(tài)效應(yīng)等研究具有重要意義。多氯聯(lián)苯半抗原是采用免疫方法測(cè)定多氯 聯(lián)苯的基礎(chǔ)，因此，對(duì)于多氯聯(lián)苯及其半抗原的制備就具有重要的應(yīng)用價(jià)值和理論價(jià)值。當(dāng)前市場(chǎng)上銷(xiāo)售的多氯聯(lián)苯單體，都是從工業(yè)混合物中通過(guò)色譜分離得到。雖然純度 比較高，但標(biāo)準(zhǔn)品的含量一般都低于lmg/ml，而且由于處理程序的復(fù)雜價(jià)格都很昂貴。這 樣的標(biāo)準(zhǔn)品是不適于用來(lái)作為反應(yīng)原料制備半抗原。因此，國(guó)內(nèi)外關(guān)于多氯聯(lián)苯免疫分析 的半抗原以及抗原的制備，都是通過(guò)一定的不對(duì)稱(chēng)合成方法，制備出多氯聯(lián)苯單體，然后 再進(jìn)一步修飾為半抗原。對(duì)于多氯聯(lián)苯同系物的制備方法，已有多種方法和原理被報(bào)道， 例如利用Sandmeyer reaction[3]用氯化亞銅還原聯(lián)苯胺的方法制備多氯聯(lián)苯，應(yīng)用 Ullmarm法的碘苯偶聯(lián)反應(yīng)等。這些方法的局限性在于只能制備對(duì)稱(chēng)的多氯聯(lián)苯。在對(duì)原 來(lái)方法改進(jìn)的基礎(chǔ)上，Hans-Joachim Lehmhler[4]研究小組多年來(lái)采用金屬鈀催化的不對(duì) 稱(chēng)合成方法，制備了一系列的多氯聯(lián)苯單體，為多氯聯(lián)苯的毒理等研究奠定了良好的基礎(chǔ)。 但此方法使用的催化劑成本較高，而且反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，且后處理程序復(fù)雜，產(chǎn)率也不高。本 發(fā)明在對(duì)傳統(tǒng)的Gomberg-Bachmann法[5]進(jìn)行機(jī)理分析的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)出了采用重氮化法 制備對(duì)稱(chēng)和不對(duì)稱(chēng)多氯聯(lián)苯同系物的方法，此方法使用的試劑價(jià)格低，反應(yīng)時(shí)間短，方法 后處理簡(jiǎn)單易操作，同時(shí)也能夠得到純度較好的多氯聯(lián)苯同系物。在對(duì)半抗原的制備方法方面，Yu-WenChiu等[6]采用把聯(lián)苯環(huán)上的甲氧基還原為羥 基后，采用活化酯法進(jìn)一步引入含有6個(gè)碳的羧基基團(tuán)，用來(lái)作為官能團(tuán)和蛋白質(zhì)偶聯(lián)。
MilanFrdnek等[7, 8]采用了還原甲氧基的方法和在聯(lián)苯環(huán)上引入氨基然后進(jìn)一步重氮化的 方法，引入含有6個(gè)碳的羧基官能團(tuán)。這些文獻(xiàn)上的方法采用多步反應(yīng)，才得到相應(yīng)的半 抗原。豈今為止，尚未見(jiàn)國(guó)內(nèi)多氯聯(lián)苯及其半抗原的制備。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了一種多氯聯(lián)苯同系物半抗原及其制備方法，該方法步驟簡(jiǎn)單，速度快，產(chǎn)率高。本發(fā)明的多氯聯(lián)苯同系物半抗原，結(jié)構(gòu)式如下其中，R=C1， Ri二H或Cl， n=l、 2、 3， R3 = COCH2CH2COOH。本發(fā)明的一氯取代聯(lián)苯，二氯取代，三氯取代，四氯取代聯(lián)苯及其半抗原，具有如下 的結(jié)構(gòu)式,COOH三氯聯(lián)苯半抗原 四氯聯(lián)苯半抗原 其中二氯、三氯、四氯苯胺半抗原的熔點(diǎn)分別為154-156°C、 162-164。C或272-274。C。其結(jié)構(gòu)和純度可以通過(guò)元素分析，核磁共振，紅外光譜等檢測(cè)手段分析鑒定。本發(fā)明的方法的反應(yīng)式可以描述如下
其中，R=C1， n=l， 2， 3， R^二H或C1， R2=H或CI, R3=COCH2CH2COOH。本發(fā)明的一種多氯聯(lián)苯(PCBS)同系物半抗原衍生物的制備方法，包括下列步驟(1) 將0.05摩爾的1，2-二氯苯胺和5-10ml水溫?zé)嶂?，2-二氯苯胺熔化，然后加入10-20ml 濃鹽酸攪拌，用20-40ml的水加熱溶化后，冷之室溫，然后在l-4'C冰浴的條件下用25-33% 的亞硝酸鈉重氮化，得到產(chǎn)物(1)。(2) 在0-5。C的條件下，加入60-80ml芳香烴溶劑(苯，氯苯，二氯苯)，攪拌，同時(shí)滴加 濃堿溶液。當(dāng)溶液呈強(qiáng)堿性時(shí)(PH12-14)，停止滴加。室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-3小時(shí)。(3) 產(chǎn)物的后處理可以采用水蒸氣蒸餾的方法蒸出反應(yīng)產(chǎn)物，或者通過(guò)非極性有機(jī)溶劑 萃取的方法，得棕黃色粗產(chǎn)品。粗產(chǎn)物用50-100ml熱無(wú)水乙醇溶解,加入l-3g鋅粉和l-3ml 的濃鹽酸，等體系中不再有氣體生成，趁熱過(guò)濾，晶體便析出，得到產(chǎn)物(2)。(4) 稱(chēng)取多氯聯(lián)苯同系物，攪拌溶解于裝有20-40mL非質(zhì)子性有機(jī)溶劑(二氯甲烷或硝基 苯等)的容器中，加入琥珀酸酐，攪拌溶解，在冰浴(0-4°C)的條件下，加入無(wú)水AlCl3，多氯聯(lián)苯，琥珀酸酐和無(wú)水AlCl3的摩爾比為1: 1-2: 1-3。無(wú)水A1CL在1-2h內(nèi)分次加入。隔水密封攪拌16-56h,停止反應(yīng)。反應(yīng)產(chǎn)物的后處理方法為反應(yīng)液傾入50-100ml2M的鹽酸溶液中，用50-100ml極性有 機(jī)溶劑(乙醚，二氯甲烷)萃取，用50-100ml2M的鹽酸洗滌萃取液，干燥，過(guò)濾，蒸去溶劑， 得粗品。粗品用非極性溶劑(正己烷，乙醚，丙酮等洗滌，得純品(3)。本發(fā)明采用一步反應(yīng)，根據(jù)原料氯苯胺上的氯原子的位置，和相應(yīng)的溶劑苯上的氯原子 的個(gè)數(shù)和位置，在苯環(huán)上引入含有4個(gè)碳原子的羧基官能團(tuán)，制得相應(yīng)的多氯聯(lián)苯同系物 半抗原。本發(fā)明經(jīng)過(guò)(1)苯胺的重氮化反應(yīng)，(2)親電加成反應(yīng)；(3)后處理以及純化，合成出多種多氯聯(lián)苯同系物。再用傅克?；磻?yīng)的方法，在苯環(huán)上修飾上一個(gè)含四個(gè)碳的
羧基偶聯(lián)臂，制得含有羧基活性基團(tuán)的半抗原。


圖1二氯聯(lián)苯半抗原紅外光譜。 圖2三氯聯(lián)苯半抗原紅外光譜。 圖3四氯聯(lián)苯半抗原紅外光譜。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而 不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定 的范圍。實(shí)施例13,4-二氯聯(lián)苯的制備(1) 在100ml燒杯中，將0.05摩爾的1， 2-二氯苯胺(8.101g)和5ml水溫?zé)嶂谅缺桨啡?化，然后加入10ml濃鹽酸，劇烈攪拌，加入20ml水，加熱到混合物幾乎完全溶解。然后 加入5ml7j^，攪拌到形成均勻的乳狀懸濁液，此時(shí)有3， 4-二氯苯胺鹽酸鹽呈細(xì)的晶體析 出。放冷至室溫，加入數(shù)塊小冰，外面以冰水浴冷卻，在4"C條件下用30%的亞硝酸鈉重 氮化，用PH試紙控制反應(yīng)的酸度為2-3。用淀粉碘化鉀試紙監(jiān)測(cè)終點(diǎn)。(2) 將重氮化后的溶液倒入預(yù)先用冰水冷卻的60ml苯中，在4'C的條件下，滴加5mol/L 的KOH溶液。加堿時(shí)生成黃色沉淀活化物質(zhì)，與苯作用生成3,4-二氯聯(lián)苯。體系反應(yīng)到 強(qiáng)堿性為止。然后室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)1小時(shí)，停止反應(yīng)。(3) 把反應(yīng)物轉(zhuǎn)移至250ml三口燒瓶中，蒸去苯，然后通入水蒸氣，進(jìn)行水蒸氣蒸餾。 多氯聯(lián)苯與水蒸氣一同蒸出。得黃棕色油狀粗品。粗品用正已垸萃取，蒸去多余溶劑，溶 于100ml無(wú)水熱乙醇，加入鋅粉lg和濃鹽酸2ml,等容器中氣體不再生成，過(guò)濾除去不溶 物，產(chǎn)品即析出，為白色的針狀晶體。產(chǎn)物經(jīng)紅外光譜儀和核磁共振等分析來(lái)鑒定其化學(xué) 結(jié)構(gòu)。測(cè)熔點(diǎn)為48-50°C。表征數(shù)據(jù)如下IR(cm"): 1583， 1485, 1470， 1067， 848， 810, !HNMRb (CDC13， 400MHz) 5 7.40 (1H),7.48 (7' = 8 Hz, 3H),7.56 (7' = 8 Hz, 3H), and 7.68(S， 1H).元素分析:實(shí)測(cè)值(計(jì)算值)%: C12H8C12C 62.3 (64.5) ，H 3.684(3.587)N〈0. 030(0)。(4) 3，4-二氯聯(lián)苯半抗原制備稱(chēng)取3， 4-二氯聯(lián)苯5mmo1,溶解于裝有20mL CH2C12的燒瓶中，加入5mmo1的琥珀酸酐， 攪拌溶解，在冰浴的條件下，加入12. 5 mmol的無(wú)水A1C13。在1.5h內(nèi)分次加入。密封攪 拌16h后，停止反應(yīng)，把反應(yīng)液傾入60ml2M的鹽酸中，然后用30mlX3的(:仏(:12萃取，用 50ml2M的鹽酸洗滌萃取液，干燥，過(guò)濾，蒸除溶劑，得粗品。粗品用正己垸洗滌，可得純 品，為棕黃色晶體，熔點(diǎn)154-156'C。產(chǎn)物經(jīng)紅外，核磁和元素分析進(jìn)行鑒定，認(rèn)為是所 合成產(chǎn)物。IR(cm") 3059， 2928， 1675， 1468， 1413， 1186， 990， 809， 778， 648; 'HNMR15 (CDC13 ， 400MHz) 5 2.50 (d，" = 8.4 , =2.0 Hz,2H， -CH2), 3.2(乂 = 8.2,3H),7.760 (d, 乂 = 8. 4 Hz, 2H ph-H), 7.9 (d, 乂 = 8.44Hz, 2H)， 8.0(d,, = 12 Hz, 3H)， 12.1 (S， 1 H);元素分析 實(shí)測(cè)值(計(jì)算值)% Ci6H12Cl203 C 59. 58 (55.44) ，H 3. 732(3. 715). N 〈0.030(0)實(shí)施例2半抗原的應(yīng)用本發(fā)明制備的多氯聯(lián)苯半抗原，主要應(yīng)用在環(huán)境中多氯聯(lián)苯的免疫檢測(cè)中。它的主要 用途之一，就是可以用來(lái)直接和蛋白質(zhì)大分子偶聯(lián)，制備出用來(lái)免疫動(dòng)物的免疫原，進(jìn)而 制備出相應(yīng)的單克隆或多克隆抗體。下面就3， 4-二氯聯(lián)苯半抗原的使用做以應(yīng)用舉例稱(chēng)取0.4mmol半抗原4- (3， 4-二氯聯(lián)苯基)-4-氧-丁酸,置于潔凈干燥的小錐形瓶中， 加入400PL DMF使之溶解。稱(chēng)取64.8 mg DCC與38. 8mg NHS溶于300叱DMF，在磁力攪拌下逐 滴加到小錐形瓶中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)8h， 4t:過(guò)夜。將反應(yīng)后產(chǎn)物置于低溫高速離心機(jī)9 000 r/min，經(jīng)15 min分離出上清液。稱(chēng)取160mg BSA溶于10mL 0. 02mol / L pH 7. 4磷酸鹽緩 沖溶液中，逐滴加入600叱上述清液，于冰浴條件下反應(yīng)4h。反應(yīng)畢，將溶液裝入透析袋， 自來(lái)水沖洗48h， ， 0. 9%生理鹽水透析3 d，離心分出上清液，即得PCB-BSA偶聯(lián)物。偶聯(lián) 物經(jīng)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)掃描鑒定后，從偶聯(lián)物PCB-BSA的紫外吸收光譜圖可以看到，3, 4-二氯聯(lián)苯在300nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，BSA在波長(zhǎng)280咖處有最大吸收峰，PCB-BSA最高 吸收峰出現(xiàn)前移，符合PCB和BSA吸收峰疊加特征。說(shuō)明半抗原已和蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，生成 新的偶聯(lián)物。實(shí)施例33， 4， 4，-三氯聯(lián)苯及其半抗原的制備(1)在100ml燒杯中，將0.05摩爾的1， 2-二氯苯胺(8.101g)和10ml水溫?zé)嶂寥刍?，?后加入15ml濃鹽酸，攪拌，加入30ml水，加熱攪拌到形成均勻的乳狀懸濁液。放冷至室 溫，加入數(shù)塊小冰，外面以冰水浴冷卻，在5'C條件下用25%的亞硝酸鈉重氮化，用PH 試紙控制反應(yīng)的酸度為2-3。用淀粉碘化鉀試紙監(jiān)測(cè)終點(diǎn)。 (2) 將重氮化后的溶液倒入預(yù)先用冰水冷卻的80ml氯苯中，在5°C的條件下，滴加5mol/L 的NaOH溶液。加堿時(shí)生成黃色沉淀活化物質(zhì)，與氯苯作用生成3，4, 4，-三氯聯(lián)苯。反應(yīng) 到強(qiáng)堿性為止。然后室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時(shí)，停止反應(yīng)。(3) 把反應(yīng)物轉(zhuǎn)移至250ml三口燒瓶中，通入水蒸氣蒸去氯苯，三氯聯(lián)苯與水蒸氣一同 蒸出。得黃棕色固體。粗品用石油醚萃取，蒸去多余溶劑，溶于50ml無(wú)水熱乙醇，加入 鋅粉1.5g和濃鹽酸2ml,等容器中氣體不再生成，過(guò)濾除去不溶物，產(chǎn)品即析出，為白色的 針狀晶體。測(cè)熔點(diǎn)為54-56°C，產(chǎn)物經(jīng)紅外光譜儀和核磁共振等分析來(lái)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。 表征數(shù)據(jù)如下IR(cm") 1545， 1463， 1134， 878， 828， 765， 1HNMRb (CDC13 ， 400MHz) 5 7.26(d,= 8.4 Hz,lH， H-6)， 7.30 (dd， J, = 8.4Hz， j, = 2. OHz, 1H, H-5)，7.33 (AA' XX' system, 2H， H-3' ， 5' ), 7.49 (AA' XX' system,2H， H-2' ,6' ), 7.54(d， 乂 = 2. OHz， 1H， H-3).Elemental analysis實(shí)測(cè)值(計(jì)算值)% Ci2H7Cl3C 55.69 (55.92) ,H 2.701(2.718)， N 〈0.030(0)o(4) 稱(chēng)取3， 4,4'-三氯聯(lián)苯5咖o1,溶解于裝有30mL 0^12的燒瓶中，加入5咖o1的琥 珀酸酐，攪拌溶解，在冰浴的條件下，加入lOmmol的無(wú)水AlCl3。在2h內(nèi)分次加入。密 封攪拌28h后，停止反應(yīng)，把反應(yīng)液傾入100ml2M的鹽酸中，然后用40mlX3的0^12萃 取，用80ral 2M的鹽酸洗滌萃取液，干燥，過(guò)濾，蒸除溶劑，得粗品。粗品用石油醚洗滌， 可得純品，為紅棕色晶體，熔點(diǎn)162-164°C。產(chǎn)物經(jīng)紅外，核磁和元素分析進(jìn)行鑒定，認(rèn) 為是所合成產(chǎn)物。數(shù)據(jù)如下IR&m-1) 3090, 2933, 1721， 1694， 1590， 1463， 1310， 1186， 1032， 881， 820， ！HNMRb (CDC13 ， 400MHz) 5 2.58 (dd, J, = 8.4 J, =2.0 Hz,2H， -CH2), 7.50 (d, " = 8.4 Hz, 1H, H-6), 7.77 (d， J' = 2. 0 Hz， 2H, H-2,2' O),8.0(d，" = 2. 0 Hz, 2H, H-3)， 12.1 (S，1H) ， Elemental analysis實(shí)測(cè)值(計(jì)算值)%Ci6HiiCl303 C 51.9 (53.7) ，H 3.071(3.076)， N 〈0.030 (0)。實(shí)施例43， 3',4,4'-四氯聯(lián)苯及其半抗原的制備(1)在100ml燒杯中，將0.05摩爾的1， 2-二氯苯胺(8.101g)和10ml水溫?zé)嶂寥刍?后加入20ml濃鹽酸，攪拌，加入25ml水，加熱攪拌到形成均勻的乳狀懸濁液。放冷至室 溫，加入數(shù)塊小冰，外面以冰水浴冷卻，在O'C條件下用33%的亞硝酸鈉重氮化，用PH 試紙控制反應(yīng)的酸度為2-3。用淀粉碘化鉀試紙監(jiān)測(cè)終點(diǎn)。 (2)將重氮化后的溶液倒入預(yù)先用冰水冷卻的80ml 二氯苯中，在O'C的條件下，滴加 3mol/L的NaOH溶液。加堿時(shí)生成黃色沉淀活化物質(zhì)，與二氯苯作用生成3，3，,4, 4，-四氯 聯(lián)苯。用PH試紙檢測(cè)PH為12。停止加堿。然后室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，停止反應(yīng)。 (3)把反應(yīng)物轉(zhuǎn)移至250ml三口燒瓶中，通入水蒸氣蒸去二氯苯，四氯聯(lián)苯與水蒸氣一同 蒸出。得黃棕色固體。粗品用苯萃取，蒸去多余溶劑，溶于70ml無(wú)水熱乙醇，加入鋅粉2g 和濃鹽酸3ml,等容器中氣體不再生成，過(guò)濾除去不溶物，產(chǎn)品即析出，為白色的針狀晶體。 測(cè)熔點(diǎn)為174-176°C，產(chǎn)物經(jīng)紅外光譜儀和核磁共振等分析來(lái)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。表征數(shù)據(jù) 如下IR(cm-1) 1546， 1475， 1445， 1135， 828， 671;'HNMRb (CDC13 ， 400MHz) :57.34 (dd， 乂 = 8.4 乂 =2.0 Hz, 2H, H隱6,6' ), 7.50 (d, 乂 = 8. 4 Hz, 2H, H陽(yáng)5,5' )， 7.60 (d， 乂 = 2.0 Hz,2H,H-2,2' ); Elemental analysis實(shí)測(cè)值(計(jì)算值)%C12H6C14:C 47.59 (49.3) ，H 2.122(2.0548)， N 0(<0. 030)。 (4) 3, 3',4，4'-四氯聯(lián)苯半抗原制備稱(chēng)取四氯聯(lián)苯5鵬ol，溶解于裝有30mL CH2Cl2的燒瓶中，加入5mmol的琥珀酸酐，攪拌 溶解，在冰浴的條件下，加入15 mmol的無(wú)水AlCl3。在2h內(nèi)分次加入。密封攪拌56h后， 停止反應(yīng)，把反應(yīng)液傾入100ml2M的鹽酸中，然后用40mlX3的CH2Cl2萃取，用60ml2M的鹽 酸洗滌萃取液，干燥，過(guò)濾，蒸除溶劑，得粗品。粗品用正己烷洗滌，可得純品，為棕褐 色晶體，熔點(diǎn)272-274°C。產(chǎn)物經(jīng)紅外，核磁和元素分析進(jìn)行鑒定，認(rèn)為是所合成產(chǎn)物。 IR(cm-1) : 3065， 2929， 1711， 1545， 1363， 1134， 1030， 878， 818; ^NMRb (CDC13 ， 400MHz): 5 2.58 (dd, 乂 = 8.4 乂 =2.0 Hz,2H, -CH2), 7.43(d， = 8. 4 Hz, 1H, H-6), 7.72 (d, =2.0Hz,2H,H-2,2' 0).8.0(d,乂 = 2. 0 Hz, 1H, H-5)， 12.1 (s, 1 H);Elemental analysis實(shí)測(cè)值(計(jì)算值)%: C16H10Cl4O3 C 48.73 ( 48.97 ) ， H 2.431(2.551)， N 0.312(0)。
權(quán)利要求
1.一種多氯聯(lián)苯半抗原，結(jié)構(gòu)式如下其中，R＝Cl，R1＝H或Cl，n＝1、2、3，R3＝COCH2CH2COOH。
2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯半抗原，其特征是在于結(jié)構(gòu)式如下:<formula>formula see original document page 2</formula>其中二氯、三氯、四氯聯(lián)苯半抗原的熔點(diǎn)分別為154-156°C、 162-164。C和272-274。C。
3. —種多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，包括下列步驟(1) 將0.05摩爾的1，2-二氯苯胺和5-10ml水溫?zé)嶂?，2-二氯苯胺熔化，然后加入10-20ml 濃鹽酸攪拌，用20-40ml的水加熱溶化后，冷之室溫，在0-4"冰水浴的條件下，用25-33% 的亞硝酸鈉重氮化；(2) 在0-5°0的條件下，加入60-80ml芳香烴溶劑，攪拌，同時(shí)滴加濃堿溶液，當(dāng)溶液PH 達(dá)到12-14時(shí)，停止滴加，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-3小時(shí)；(3) 水蒸氣蒸出反應(yīng)產(chǎn)物，或者通過(guò)非極性有機(jī)溶劑萃取的方法，得棕黃色粗產(chǎn)品，粗 產(chǎn)物用50-100ml熱無(wú)水乙醇溶解，加入l-3g鋅粉和l-3ml的濃鹽酸，體系中不再有氣體 生成，趁熱過(guò)濾，多氯聯(lián)苯晶體析出；(4) 稱(chēng)取多氯聯(lián)苯同系物，攪拌溶解于裝有20-40mL非質(zhì)子性有機(jī)溶劑的容器中，加入琥 珀酸酐，攪拌溶解，在0-4'C冰浴的條件下，加入無(wú)水AlCl3,在l-2h內(nèi)分次加入，在無(wú) 水條件下攪拌16-56h,停止反應(yīng)；反應(yīng)產(chǎn)物的后處理方法為反應(yīng)液傾入50-100ml2M的冰鹽酸溶液中，用50-100ml極性 有機(jī)溶劑萃取，用50-100ml2M的鹽酸洗滌萃取液，干燥，過(guò)濾，蒸去溶劑，得粗品，非極性溶劑洗滌或過(guò)柱分離，得純品。
4. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，其特征在于步驟2 所述的芳香烴溶劑是苯、氯苯或二氯苯。
5. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，其特征在于步驟3所述的非極性有機(jī)溶劑是石油醚、丙酮或正己垸。
6. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，其特征在于步驟4 所述的非質(zhì)子性有機(jī)溶劑是二氯甲烷或硝基苯。
7. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，其特征在于步驟4 所述的極性有機(jī)溶劑為二氯甲烷或乙醚。
8. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，其特征在于步驟4 所述的非極性溶劑是正己烷或石油醚。
9. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原的制備方法，其特征在于步驟4 所述的多氯聯(lián)苯、琥珀酸酐和無(wú)水A1C13的摩爾比為1: 1-2: 1-3。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種多氯聯(lián)苯(PCBs)同系物半抗原及其制備方法，多氯聯(lián)苯半抗原，結(jié)構(gòu)式如下右式，其中，R＝Cl，R¹＝H或Cl，n＝1、2、3，R³＝COCH₂CH₂COOH，制備包括(1)二氯苯胺熔化，加入濃鹽酸攪拌，用20-40ml的水加熱熔化后，用25-33％的亞硝酸鈉重氮化；(2)在0-5℃的條件下，加入60-80ml芳香烴溶劑攪拌，滴加濃堿，攪拌反應(yīng)1-3小時(shí)；(3)水蒸氣蒸出反應(yīng)產(chǎn)物，或者通過(guò)非極性有機(jī)溶劑萃取的方法，得棕黃色粗產(chǎn)品。加入1-3g鋅粉和1-3ml的濃鹽酸，體系中不再有氣體生成，趁熱過(guò)濾，晶體析出；(4)多氯聯(lián)苯，琥珀酸酐和無(wú)水AlCl₃的摩爾比為1∶1-2∶1-3。冰水浴條件下無(wú)水AlCl₃在1-2h內(nèi)分次加入。密封攪拌16-56h，停止反應(yīng)。本發(fā)明步驟簡(jiǎn)單，速度快，產(chǎn)率高。
文檔編號(hào)C07C59/84GK101157611SQ20071017051
公開(kāi)日2008年4月9日 申請(qǐng)日期2007年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月16日
發(fā)明者莊惠生, 陳寒玉 申請(qǐng)人:東華大學(xué)