專利名稱：烏飯樹黑色素中黃酮類單體的提取、分離、純化及鑒定的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種烏飯樹樹葉黑色素中黃酮類化合物單體的提取、分離、純化及結(jié)構(gòu)鑒定的方法，屬于黃酮類化合物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
烏飯樹是一種豐富的天然資源，其樹葉中的黑色素具有很強(qiáng)的生理功能。在烏飯樹樹葉黑色素提取物中黃酮類化合物的含量很高，所以有必要對其進(jìn)行提取、分離、純化以及鑒定，以利于烏飯樹的開發(fā)利用。
從天然植物中提取分離出化合物單體，并進(jìn)行結(jié)構(gòu)的分析鑒定，是天然產(chǎn)物研究中的一個(gè)重要方面，意義在于(1)發(fā)現(xiàn)藥用植物中的有效成分，尋找其臨床療效的依據(jù)；(2)有助于闡明天然藥物的構(gòu)效關(guān)系；(3)為植物的分類、植物的生理研究提供證據(jù)和方向。
黃酮類化合物的分離純化方法主要有各種柱層析法、HPLC法、離心薄層層析法、制備性薄層層析法和紙層析法等。其中柱層析法是最常用的分離純化黃酮類化合物的方法，主要有三類(1)聚酰胺柱層析法聚酰胺對黃酮苷類具有較好的分離作用，其層析容量大，適合用于制備性分離，洗脫劑常用水-甲醇，也有用水-乙醇和甲醇-氯仿；(2)硅膠柱層析法這種方法的應(yīng)用范圍最廣，不僅可以分離黃酮苷，也可以分離各種黃酮苷元；(3)葡聚糖凝膠柱層析法它主要是靠分子篩作用分離黃酮苷類，在洗脫時(shí)一般按照分子量的大小順序洗出柱體。HPLC法分離黃酮類物質(zhì)的報(bào)道則較多，在HPLC中用于黃酮類化合物分離純化的一般有C8、C18、CN柱，CN柱與前兩種柱填料的性質(zhì)不同，極性較強(qiáng)，對于低極性部分的組分分離效果不佳，C18柱對植物黃酮苷元和配基基本可以實(shí)現(xiàn)分離，但是對于極性大的苷部分洗脫出峰慢，總的洗脫時(shí)間增長，分離效果不是很理想，而C8填料極性介于二者之間，并且更加接近C18一些，因而對黃酮苷類的化合物分離比較理想。而后幾種用于黃酮類化合物的分離純化則較少。在黃酮類化合物的分離純化過程中有時(shí)需要將幾種方法交替使用。
黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定研究主要集中在苷元部分，苷元的基本結(jié)構(gòu)可以分為10多種主要類型。黃酮類化合物的苷元是由15個(gè)碳原子組成，共有A、B、C3個(gè)環(huán)組成，結(jié)構(gòu)如下。在A、B環(huán)上常見的取代基有羥基、甲氧基、異戊烯基等等。
目前對于黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究主要利用波譜法，包括質(zhì)譜、紫外光譜以及核磁共振圖譜。在研究黃酮類化合物苷元結(jié)構(gòu)時(shí)，利用質(zhì)譜比較有效，因?yàn)辄S酮類化合物苷元的分子離子峰很強(qiáng)，而在研究黃酮苷類化合物的時(shí)候由于所連接的糖基出現(xiàn)碎片，所以研究要稍微難一些。黃酮類化合物在300～400nm之間以及240～280nm之間有兩個(gè)吸收帶，前者是由B環(huán)上原子的電子躍遷產(chǎn)生的吸收，而后者是由A環(huán)上原子的電子躍遷產(chǎn)生的吸收。添加不同的化學(xué)試劑(甲醇鈉、乙醇鈉、三氯化鋁、硼酸、醋酸鈉等)，黃酮類化合物的這兩個(gè)吸收帶會由于苷元部分結(jié)構(gòu)的變化而產(chǎn)生移動(dòng)，所以可以利用添加不同的移動(dòng)試劑來判斷苷元上的取代基及其位置。利用核磁共振技術(shù)研究黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)一般有核磁共振氫譜(1H-NMR)、核磁共振碳譜(13C-NMR)以及二維核磁共振譜(2D-NMR)等等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種烏飯樹樹葉黑色素中黃酮類化合物單體的提取、分離、純化及結(jié)構(gòu)鑒定的方法，利用大孔吸附樹脂、聚酰胺柱、HW-40柱等方法從烏飯樹樹葉黑色素中分離純化得到黃酮類化合物單體，利用HPLC-MS以及核磁共振技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究。
本發(fā)明的技術(shù)方案以烏飯樹樹葉為原料，經(jīng)乙醇提取得到烏飯樹樹葉黑色素溶液，再經(jīng)大孔吸附樹脂對黑色素中的黃酮類化合物進(jìn)行粗分離，再通過聚酰胺柱和HW-40柱對黃酮類化合物單體進(jìn)行純化，再用高效液相色譜-質(zhì)譜、核磁共振技術(shù)對純化組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
(1)烏飯樹樹葉黑色素溶液的提取將清洗干凈、晾干的烏飯樹樹葉利用組織搗碎機(jī)濕法搗碎，加入反應(yīng)釜，利用酒精溶液進(jìn)行提取，料液比以質(zhì)量計(jì)為1∶20～1∶30，酒精溶液體積濃度為60％，提取溫度為55～60℃，攪拌提取1h，將溶液濾出，回收酒精后得到提取物的水溶液，回收的酒精溶液調(diào)節(jié)體積濃度為60％后加入至反應(yīng)釜，按照相同條件對反應(yīng)釜中的樹葉二次提取1h，將溶液濾出，回收酒精后得到提取物的水溶液和第一次提取得到的提取物的水溶液合并，濃縮至提取液的水分含量不超過10％，備用。
(2)大孔吸附樹脂對黑色素中的黃酮類化合物進(jìn)行粗分離提取液常溫下加體積比為1∶1的正丁醇萃取半小時(shí)，正丁醇萃取液減壓濃縮至無醇味，加入以體積計(jì)為1∶2～1∶3的去離子水，超聲振蕩，水溶液上AB-8大孔吸附樹脂柱，先用2～3倍柱體積的去離子水洗脫，棄去洗脫液，再用3～5倍柱體積的體積濃度為95％的酒精洗脫，收集洗脫液，濃縮至酒精含量不超過5％，備用。
(3)聚酰胺柱和HW-40柱對黃酮類化合物單體進(jìn)行純化將大孔吸附樹脂柱洗脫下來的洗脫濃縮液，上聚酰胺大柱，柱體積φ4cm×50cm，分別用水、體積濃度為20％的酒精、45％酒精、70％酒精、95％酒精依次進(jìn)行洗脫，每次洗脫液用量為2～3個(gè)柱體積，收集洗脫液，在薄板上點(diǎn)樣分析，合并相同的組分，相同組分濃縮至水分含量不超過5％，各組分分別上聚酰胺小柱，φ3cm×30cm，以酒精的體積濃度逐次增加5％為一個(gè)梯度，進(jìn)行洗脫，一個(gè)梯度洗脫量為一個(gè)柱體積，每10mL收集在一個(gè)試管中，在薄板上點(diǎn)樣分析，合并相同組分；各組分濃縮至水分含量不超過5％，各組分分別上HW-40柱，以酒精的體積濃度逐次增加5％為一個(gè)梯度，進(jìn)行洗脫，采用部分收集器收集，每5mL收集在一個(gè)試管中，薄板點(diǎn)樣合并相同組分，得到黃酮類化合物單體A、B、C、D、E、F、G。
(4)高效液相色譜-質(zhì)譜、核磁共振技術(shù)對純化組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定將得到的黃酮類化合物單體溶解于甲醇中，利用液質(zhì)連用儀進(jìn)行分析。
液相條件色譜儀WATERS 2690；檢測器WATERS 996；分析柱Lichrospher C-18 2.1X250mm；流動(dòng)相甲醇與1％乙酸梯度洗脫，甲醇濃度從0到100％；柱溫30℃；流速0.3mL/min；進(jìn)樣量10μL。
質(zhì)譜條件離子方式EIS-，EIS+；毛細(xì)管電壓EIS-為3.88kV，EIS+為3.87kV；錐孔電壓EIS-為30V，EIS+為24V；離子源溫度120℃；脫溶劑氣溫度300℃；質(zhì)量范圍200-800m/z；光電倍增器電壓650V；分析柱壓2.6e-5mBar；氣體流速4.2L/hr。
將分離出的黃酮類化合物單體溶解于二甲基亞砜中，在Bruker核磁共振儀上測定1H-NMR，13C-NMR，DEPT-NMR，以四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)物。
本發(fā)明的有益效果1、通過AB-8大孔吸附樹脂、聚酰胺柱以及HW-40柱對烏飯樹樹葉黑色素中黃酮類化合物進(jìn)行分離純化，從中分離出7種黃酮類化合物單體，分別為A、B、C、D、E、F和G。
2、利用樣品波長掃描圖譜、HPLC-MS以及核磁共振技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)研究，對化合物B、C、D、E和F進(jìn)行了精確的結(jié)構(gòu)鑒定，確定分別為槲皮素、白楊黃素、芹黃素、山奈酚和木犀草素，其相對含量分別為37.51％，2.26％，9.57％，1.72％和15.16％。


圖1化合物A的波長掃描圖譜圖2化合物A的HPLC圖譜圖3化合物A的MS圖譜圖4化合物B的MS圖譜(正離子)圖5化合物B的MS圖譜(負(fù)離子)圖6化合物G的波長掃描圖譜圖7化合物G的HPLC圖譜具體實(shí)施方案實(shí)施例1 化合物A的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)由于量較少，進(jìn)一步純化比較困難，所以只是進(jìn)行簡單的分析。本物質(zhì)氨熏呈現(xiàn)黃色，進(jìn)行鹽酸—鋅粉實(shí)驗(yàn)，變成紅色，靜置后有紅色沉淀；鉛鹽沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果，有明顯的紅色沉淀；AlCl3實(shí)驗(yàn)，生成黃色并且在紫外光下有熒光。對本物質(zhì)進(jìn)行波長掃描，見圖1，從圖中可以看出，本化合物具有黃酮類化合物的特征吸收。對本物質(zhì)進(jìn)行HPLC純度測定，具體結(jié)果見圖2，從中可以看出化合物A的純度較高，另外從圖3中可以看出本化合物黃酮苷元分子量為302，分子量464推測為連接一個(gè)葡萄糖。綜合以上的分析，化合物A可能為一個(gè)羥基被一分子葡萄糖取代的槲皮素。
實(shí)施例2 化合物B的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)為淡黃色粉末，易溶于甲醇、乙醇。氨熏呈現(xiàn)黃色，所以為黃酮類化合物。從圖4和圖5可以看出，樣品的相對分子質(zhì)量應(yīng)該為302，這和槲皮素的相對分子質(zhì)量一致，可以初步說明二者為同一種物質(zhì)。氫譜(1H-NMR)δ7.67(1H，H-2’)，δ7.53(1H，d，d，J＝8.5Hz，1.6Hz，H-6’)，δ6.88(1H，d，J＝8.5Hz，H-5’)，δ6.19(1H，S，H-6)，δ6.41(1H，S，H-8)。
通過對以上圖譜的分析，并且根據(jù)有關(guān)參考文獻(xiàn)可以得出提取出的化合物B為槲皮素。分子結(jié)構(gòu)式如下 實(shí)施例3 化合物C的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)為淡黃色粉末，氨熏呈現(xiàn)黃色，易溶于甲醇、乙醇。氫譜(1H-NMR)δ8.02(2H，d，J＝7.1，H-2’，6’)，δ7.6(1H，dd，J＝7.1，6.8，H-4’)，δ7.56(2H，dd，J＝7.1，6.8，H-3’，5’)，δ6.9(1H，S，H-3)，δ6.5(1H，d，J＝2.0，H-8)，δ6.2(1H，d，J＝2.0，H-6)。從1H-NMR可以看出，單環(huán)區(qū)有8個(gè)氫，其中δ6.5和δ6.2的兩個(gè)氫相互偶合，從J值來看應(yīng)該是單環(huán)上的間位氫，表明該苯環(huán)為4位取代。δ8.02，δ7.6和δ7.56處有5個(gè)氫，從峰形和J值來看，應(yīng)該為一個(gè)自旋體系，所以是單取代苯環(huán)。
碳譜(13C-NMR)δ181.8(C4)，δ164.4(C2)，δ163.1(C8’)，δ161.4(C7)，δ157.4(C5)，δ131.9(C1’)，δ130.7(C4’)，δ129.0(C2’，C6’)，δ126.3(C3’，C5’)，δ105.1(C3)，δ103.9(C4a)，δ99.0(C8)，δ94.0(C6)。從13C-NMR上可以看出，該化合物有15個(gè)碳，有一個(gè)羰基，表明該化合物為黃酮類化合物。從中分析化合物中包含4個(gè)連氧碳，說明除黃酮母核外還有兩個(gè)含氧取代基。另外從1H-NMR可以看出，在δ6.9處存在一個(gè)單峰氫，這更加能夠說明該物質(zhì)為黃酮類化合物。參考有關(guān)文獻(xiàn)可以判斷該化合物為白楊黃素，分子結(jié)構(gòu)式如下 實(shí)施例4 化合物D的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)為土灰色粉末，氨熏呈現(xiàn)黃色，易溶于甲醇、乙醇。氫譜(1H-NMR)δ7.91(2H，d，J＝8.6，H-2’，6’)，δ6.93(2H，d，J＝8.7，H-3’，5’)，δ6.75(1H，s，H-3)，δ6.5(1H，d，J＝1.9，H-8)，δ6.19(1H，d，J＝1.9，H-6)。從氫譜(1H-NMR)可以看出，δ7.91和δ6.93處有四個(gè)氫，構(gòu)成AA’BB’系統(tǒng)，故為二取代苯環(huán)上的四個(gè)氫。δ6.5和δ6.19處有兩個(gè)氫，構(gòu)成AX系統(tǒng)，通過J值判斷為間位氫，所以有 結(jié)構(gòu)單元，δ6.75處的單峰氫表明還有一個(gè)環(huán)基上只有一個(gè)氫，所以從氫譜看該化合物可能為黃酮類化合物。
碳譜(13C-NMR)δ181.7(C4)，δ164.1(C2)，δ163.7(C8)，δ161.4(C7)，δ161.1(C4’)，δ157.3(C5)，δ128.4(C2’，6’)，δ121.2(C1’)，δ115.9(C3’，5’)，δ103.7(C4a’)，δ102.8(C3)，δ98.8(C8)，δ93.9(C6)。從13C-NMR上可以看出，該化合物有15個(gè)碳，而且含有羰基，可以明確地證實(shí)該化合物為黃酮類化合物。另外從譜中還看出有5個(gè)連氧碳，所以除母核外還有三個(gè)含氧取代基。從以上的資料分析同時(shí)參考有關(guān)文獻(xiàn)得出該化合物為芹黃素，其結(jié)構(gòu)式如下 實(shí)施例5 化合物E的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)為黃色粉末，氨熏呈現(xiàn)黃色，易溶于甲醇、乙醇。氫譜(1H-NMR)δ8.06(2H，d，J＝8.8，H-2’，6’)，δ6.94(2H，d，J＝8.8，H-3’，5’)，δ6.4(1H，d，J＝1.8，H-8)，δ6.2(1H，d，J＝1.8，H-6)。從氫譜(1H-NMR)可以看出在δ8.06和δ6.94處有四個(gè)氫，構(gòu)成AA’BB’系統(tǒng)，表明有 結(jié)構(gòu)，δ6.4和δ6.2處有兩個(gè)氫，構(gòu)成AX系統(tǒng)，從J值判斷應(yīng)該為間位氫，所以有 結(jié)構(gòu)單元。
碳譜(13C-NMR)δ175.9(C4)，δ163.9(C4’)，δ160.7(C8)，δ159.2(C7)，δ156.2(C5)，δ146.8(C2)，δ135.6(C3)，δ129.5(C2’，6’)，δ121.7(C1)，δ115.4(C3’，5’)，δ103.0(C4a)，δ98.2(C8)，δ93.4(C6)。從13C-NMR上可以看出，該化合物有15個(gè)碳，有一個(gè)羰基，說明該化合物為黃酮類化合物。從δ135.6處的碳可以看出該化合物為黃酮醇類化合物。從譜中可以看出該化合物有6個(gè)連氧碳，除母核外，還有四個(gè)連氧取代基。通過以上的分析，并參考有關(guān)文獻(xiàn)可以知道該化合物為山奈酚，其分子結(jié)構(gòu)式如下 實(shí)施例6 化合物F的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)為亮黃色粉末，氨熏呈現(xiàn)黃色，易溶于甲醇、乙醇。氫譜(1H-NMR)δ7.36(2H，br，H-2’，5’)，δ6.83(1H，t，J＝4.5，H-6’)，δ6.67(1H，d，J＝2.0，H-8)，δ6.21(1H，s，H-3)，δ6.08(1H，d，J＝2.0，H-6)。從氫譜(1H-NMR)可以看出，δ6.67和δ6.08處有兩個(gè)氫，構(gòu)成AX系統(tǒng)，所以有 結(jié)構(gòu)單元。δ7.36和δ6.83處有三個(gè)氫，從峰形和化學(xué)位移來看應(yīng)該有 結(jié)構(gòu)單元。
碳譜(13C-NMR)δ181.2(C4)，δ167.5(C2)，δ163.6(C8a)，δ161.4(C7)，δ157.6(C5)，δ151.3(C4’)，δ146.4(C3’)，δ120.5(C1’)，δ118.8(C6’)，δ116.0(C5’)，δ112.7(C2’)，δ102.5(C4a)，δ102.1(C3)，δ99.6(C8)，δ94.3(C6)。從13C-NMR上可以看出，該化合物有15個(gè)碳，有一個(gè)羰基，說明該化合物為黃酮類化合物。其中有6個(gè)連氧碳，除母核外應(yīng)該還含有4個(gè)連氧碳。通過以上的分析并且參考有關(guān)文獻(xiàn)可以得出該化合物為木犀草素，其分子結(jié)構(gòu)式如下

實(shí)施例7 化合物G的結(jié)構(gòu)鑒定本物質(zhì)由于進(jìn)一步純化比較困難，所以也只是進(jìn)行簡單的分析。本物質(zhì)氨熏呈現(xiàn)黃色，進(jìn)行鹽酸—鋅粉實(shí)驗(yàn)，變成紅色，靜置后有紅色沉淀；鉛鹽沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果，有明顯的紅色沉淀；AlCl3顯色實(shí)驗(yàn)，生成黃色有少許黃色沉淀，并且在紫外光下有熒光。對本物質(zhì)進(jìn)行波長掃描，見圖6，從圖中可以看出，本化合物具有黃酮類化合物的特征吸收。對本物質(zhì)進(jìn)行HPLC純度測定，具體結(jié)果見圖7，從中可以看出化合物G的純度較高。綜合以上的分析，化合物G為黃酮類化合物。
各化合物相對含量測定表1各組分相對含量

烏飯樹樹葉黑色素提取液中其余的組分有待于進(jìn)一步研究。
權(quán)利要求
1.一種烏飯樹樹葉黑色素中黃酮類化合物單體的提取、分離、純化及結(jié)構(gòu)鑒定的方法，其特征是以烏飯樹樹葉為原料，經(jīng)乙醇提取得到烏飯樹樹葉黑色素溶液，再經(jīng)大孔吸附樹脂對黑色素中的黃酮類化合物進(jìn)行粗分離，再通過聚酰胺柱和HW-40柱對黃酮類化合物單體進(jìn)行純化，再用高效液相色譜-質(zhì)譜、核磁共振技術(shù)對純化組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；(1)烏飯樹樹葉黑色素溶液的提取將清洗干凈、晾干的烏飯樹樹葉利用組織搗碎機(jī)濕法搗碎，加入反應(yīng)釜，利用酒精溶液進(jìn)行提取，料液比以質(zhì)量計(jì)為1∶20～1∶30，酒精溶液體積濃度為60％，提取溫度為55～60℃，攪拌提取1h，將溶液濾出，回收酒精后得到提取物的水溶液，回收的酒精溶液調(diào)節(jié)體積濃度為60％后加入至反應(yīng)釜，按照相同條件對反應(yīng)釜中的樹葉二次提取1h，將溶液濾出，回收酒精后得到提取物的水溶液和第一次提取得到的提取物的水溶液合并，濃縮至提取液的水分含量不超過10％，備用；(2)大孔吸附樹脂對黑色素中的黃酮類化合物進(jìn)行粗分離提取液常溫下加體積比為1∶1的正丁醇萃取半小時(shí)，正丁醇萃取液減壓濃縮至無醇味，加入以體積計(jì)為1∶2～1∶3的去離子水，超聲振蕩，水溶液上AB-8大孔吸附樹脂柱，先用2～3倍柱體積的去離子水洗脫，棄去洗脫液，再用3～5倍柱體積的體積濃度為95％的酒精洗脫，收集洗脫液，濃縮至酒精含量不超過5％，備用；(3)聚酰胺柱和HW-40柱對黃酮類化合物單體進(jìn)行純化將大孔吸附樹脂柱洗脫下來的洗脫濃縮液，上聚酰胺大柱，柱體積φ4cm×50cm，分別用水、體積濃度為20％的酒精、45％酒精、70％酒精、95％酒精依次進(jìn)行洗脫，每次洗脫液用量為2～3個(gè)柱體積，收集洗脫液，在薄板上點(diǎn)樣分析，合并相同的組分，相同組分濃縮至水分含量不超過5％，各組分分別上聚酰胺小柱，φ3cm×30cm，以酒精的體積濃度逐次增加5％為一個(gè)梯度，進(jìn)行洗脫，一個(gè)梯度洗脫量為一個(gè)柱體積，每10mL收集在一個(gè)試管中，在薄板上點(diǎn)樣分析，合并相同組分；各組分濃縮至水分含量不超過5％，各組分分別上HW-40柱，以酒精的體積濃度逐次增加5％為一個(gè)梯度，進(jìn)行洗脫，采用部分收集器收集，每5mL收集在一個(gè)試管中，薄板點(diǎn)樣合并相同組分，得到黃酮類化合物單體A、B、C、D、E、F、G；(4)高效液相色譜-質(zhì)譜、核磁共振技術(shù)對純化組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定將得到的黃酮類化合物單體溶解于甲醇中，利用液質(zhì)連用儀進(jìn)行分析，液相條件色譜儀WATERS 2690；檢測器WATERS 996；分析柱Lichrospher C-18 2.1×250mm；流動(dòng)相甲醇與1％乙酸梯度洗脫，甲醇濃度從0到100％；柱溫30℃；流速0.3mL/min；進(jìn)樣量10μL；質(zhì)譜條件離子方式EIS-，EIS+；毛細(xì)管電壓EIS-為3.88kV，EIS+為3.87kV；錐孔電壓EIS-為30V，EIS+為24V；離子源溫度120℃；脫溶劑氣溫度300℃；質(zhì)量范圍200-800m/z；光電倍增器電壓650V；分析柱壓2.6e-5mBar；氣體流速4.2 L/hr；將分離出的黃酮類化合物單體溶解于二甲基亞砜中，在Bruker核磁共振儀上測定1H-NMR，13C-NMR，DEPT-NMR，以四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)物。
全文摘要
一種烏飯樹樹葉黑色素中黃酮類化合物單體的提取、分離、純化及結(jié)構(gòu)鑒定的方法，屬于黃酮類化合物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明以烏飯樹樹葉為原料，經(jīng)乙醇提取得到烏飯樹樹葉黑色素溶液，再經(jīng)大孔吸附樹脂對黑色素中的黃酮類化合物進(jìn)行粗分離，再通過聚酰胺柱和HW－40柱對黃酮類化合物單體進(jìn)行純化，再用高效液相色譜－質(zhì)譜、核磁共振技術(shù)對純化組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；從中分離出7種黃酮類化合物單體，分別為A、B、C、D、E、F和G，并對B、C、D、E和F進(jìn)行了精確的結(jié)構(gòu)鑒定，確定分別為槲皮素、白楊黃素、芹黃素、山奈酚和木犀草素，其相對含量分別為37.51％，2.26％，9.57％，1.72％和15.16％。
文檔編號C07D311/22GK1844116SQ20061004041
公開日2006年10月11日 申請日期2006年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月10日
發(fā)明者王立, 姚惠源, 張暉 申請人:江南大學(xué)