專利名稱：漿果赤霉素Ⅲ衍生物的制備方法
本申請為2001年7月27日提交的申請?zhí)枮镻CT/EP01/08730、發(fā)明名稱為“漿果赤霉素III衍生物的制備方法”的國際申請的分案申請，該申請于2003年2月8日進(jìn)入中國國家階段，申請?zhí)枮?1813867.5。
本發(fā)明涉及用于合成14β-羥基-1，14-碳酸酯-脫乙?；鶟{果赤霉素III衍生物的新中間體及其制備方法。采用本發(fā)明方法獲得的中間體可用于制備具有抗腫瘤活性的新型紫杉烷衍生物。
紫杉烷類化合物是近年來開發(fā)出來的最重要的一類抗腫瘤劑。紫杉醇是一種復(fù)雜的二萜，是從短葉紅豆杉(Taxus brevifolia)的樹皮中分離出來的，被認(rèn)為是一種癌癥治療的“先導(dǎo)化合物”。目前，人們對具有更高藥理學(xué)活性和改善的藥動學(xué)性質(zhì)的紫杉烷衍生物正進(jìn)行著深入的研究。具體的研究涉及對基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)進(jìn)行各種修飾的漿果赤霉素III衍生物。這種化合物的實例為公開于下述文獻(xiàn)中的14β-羥基漿果赤霉素III衍生物US5,705,508、WO 97/43291、WO 96/36622。目前，14β-羥基-1，14-碳酸酯-脫乙?；鶟{果赤霉素III衍生物的制備原料為14β-羥基-脫乙?；鶟{果赤霉素III前體，它是一種天然化合物，可以少量地從西藏紅豆杉(Taxuswallichiana)的葉子中提取得到，如EP 559,019中所述。目前，強烈需要新的衍生物和那些常用方法的替代方法，通過它們可以簡單而有效地制備14β-羥基-1，14-碳酸酯-脫乙?；鶟{果赤霉素III衍生物。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)，14β-羥基-1，14-碳酸酯-脫乙?；鶟{果赤霉素III可以用10-脫乙?；鶟{果赤霉素III作為起始化合物進(jìn)行制備，與14β-羥基-漿果赤霉素III不同，這種10-脫乙?；鶟{果赤霉素III可從歐洲紅豆杉(Taxusbaccata)的葉子中大量分離。
因此，本發(fā)明提供了一種制備14β-羥基-1，14-碳酸酯-脫乙?；鶟{果赤霉素III的方法，該方法包括下述步驟1.對10-脫乙?；鶟{果赤霉素III的7-位和10-位的羥基進(jìn)行保護(hù)
其中，R和R1選自氫、C1-C10烷基或芳基、C1-C10烷基-或芳基-羰基、三氯乙?；?、C1-C4三烷基甲硅烷基；優(yōu)選地，當(dāng)R和R1相同時，它們均為三氯乙?；?dāng)它們不同時，優(yōu)選R為三氯乙?；鳵1為乙酰基，或者R為三乙基-或三甲基-甲硅烷基而R1為乙?；?；2.經(jīng)兩步氧化得到在13-位氧化并在14-位羥基化的衍生物 3.將1-位和14-位的相鄰的羥基進(jìn)行碳酸酯化，得到1，14-碳酸酯衍生物 4.將13-位的羰基還原
5.除去7-位和10-位的保護(hù)基 保護(hù)7-位和10-位羥基的方法如下述文獻(xiàn)所述Holton等，Tetrahedron Letters 39，(1998)2883-2886。由于具有不同的反應(yīng)性，對起始化合物脫乙?；鶟{果赤霉素III的羥基進(jìn)行選擇性地保護(hù)是可能的。具體而言，對?；?、烷基化或甲硅烷基化試劑的反應(yīng)性按照如下次序變化C(7)-OH＞C(10)-OH＞C(13)-OH＞C(1)-OH，因此，可選擇性地對7-位和10-位上的基團(tuán)進(jìn)行保護(hù)而使1-位和13-位上的羥基保持游離狀態(tài)。
此外，通過改變反應(yīng)條件，可以使7-位和10-位上的羥基的反應(yīng)性次序顛倒，從而可以對它們進(jìn)行不同的取代。用于保護(hù)10-位和7-位羥基的試劑和反應(yīng)條件的例子在上述引用的公開文獻(xiàn)中有述。
13-位羥基的氧化步驟可在選自乙腈、丙酮或乙酸乙酯/二氯甲烷9∶1混合物的溶劑中，在劇烈攪拌下，用二氧化錳或二氧化鉍進(jìn)行氧化，優(yōu)選在乙腈或丙酮中用二氧化錳進(jìn)行氧化。反應(yīng)進(jìn)行的很快，得到在13-位氧化了的衍生物，其可從反應(yīng)介質(zhì)中回收，而更長時間的反應(yīng)將得到13-位氧化和14-位羥基化的衍生物。
隨后在1-位和14-位的羥基上進(jìn)行的碳酸酯化步驟通常是在吡啶的存在下，在二氯甲烷/甲苯混合物中用光氣或三光氣進(jìn)行。隨后，很容易將形成的1，14-碳酸酯衍生物在13-位還原而得到相應(yīng)的13-羥基衍生物。所述的還原反應(yīng)區(qū)域選擇性地在13-位的羰基上進(jìn)行，而9-位的羰基保持不變，并且立體選擇性地、幾乎排它性地得到13-α異構(gòu)體。該反應(yīng)通?？捎门饸浠c于甲醇中高收率地進(jìn)行。最后一步是對7-位和10-位上的羥基進(jìn)行脫保護(hù)，得到最終的產(chǎn)物14β-羥基-1，14-碳酸酯脫乙?；鶟{果赤霉素III。用于對7-位和10-位上的羥基進(jìn)行選擇性脫保護(hù)的條件和試劑如下述文獻(xiàn)所述Zheng等，Tetrahedron Lett.，1995，36，2001，以及Datta等，J.Org.Chem.，1995，60，761。形成的最終產(chǎn)物是合成各種紫杉烷衍生物的極為有用的中間體。如前所述，所述的中間體到目前為止還采用提取自西藏紅豆杉葉子的14β-羥基漿果赤霉素III低收率地制備。本發(fā)明的方法允許高收率地制備相同的中間體，其所采用的原料可大量獲得。用14β-羥基-1，14-碳酸酯脫乙?；鶟{果赤霉素III作為原料制備的具有抗腫瘤活性的化合物的實例參見以下文獻(xiàn)US 5,705,508、WO 97/43291、WO 96/36622。
按照本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，將脫乙?；鶟{果赤霉素III與三氯乙酰氯在二氯甲烷中在三乙胺的存在下進(jìn)行反應(yīng)，并使用催化量的N，N-二甲基氨基吡啶(DMAP)。已證明，使用三氯乙酸酯作為保護(hù)基在本發(fā)明方法中的氧化、碳酸酯化和還原步驟中是非常有利的。具體而言，氧化和碳酸酯化后的7，10-雙三氯乙酸酯衍生物(由起始化合物以定量收率獲得)很容易在13-位被還原，并同時脫除三氯乙酸酯基團(tuán)，得到14β-羥基-1，14-碳酸酯-脫乙酰基漿果赤霉素III。使用催化量的DMAP從工業(yè)和環(huán)境的角度提供了明確的優(yōu)點，因為到目前為止，該物質(zhì)的?；磻?yīng)都是在吡啶中進(jìn)行的，存在著殘留溶劑排放的問題。
按照上述優(yōu)選實施方案獲得的下述中間體也構(gòu)成了本發(fā)明的一部分
下述實施例更詳細(xì)地說明了本發(fā)明。
實施例I7，10-雙三氯乙?；?10-脫乙酰基漿果赤霉素III的制備第一種方法將4.77ml三氯乙酸酐(42.32mmol)滴加至10g的10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(18.4mmol)在125ml無水二氯甲烷和42ml吡啶中的溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌3小時或直到反應(yīng)完成，通過硅膠TLC進(jìn)行檢測，用正己烷/乙酸乙酯1∶1混合物作為洗脫劑。反應(yīng)完成后，加入5ml甲醇以破壞過量的三氯乙酸酐，然后加入水。有機相用酸性的水(HCl)充分洗滌以除去吡啶，然后將剩余的有機相用硫酸鎂干燥，真空濃縮至干得到淺黃色固體(17g)，將其在氯仿中進(jìn)行結(jié)晶[α]D-34(二氯甲烷C5.8)；IR(KBr)3517，1771，1728，1240，981，819，787，675cm-1；1H-NMR(200MHz)δ8.11(Bz C)，7.46(Bz，BB′)，6.50(s，H-10)，5.72(m，H-7H-29)，5.02(d，J＝8Hz，H-5)，4.95(m，H-13)，4.37(d，J＝8Hz，H-20a)，4.18(d，J＝8Hz，H-20b)，4.02(d，J＝6Hz，H-3)，2.32(s，4-Ac)，2.22(s，H-18)，1.91(s，H-19)，1.25和1.11(s，H-16，H-17)，1.94(m，H14α)，1.89(m，H14β)。
第二種方法將10-脫乙酰基漿果赤霉素III(10g，18.38mmol)懸浮于二氯甲烷(120ml)中，加入DMAP(220mg，1.4mmol，0.1當(dāng)量)并在冰浴中冷卻至0℃。加入三乙胺(10.26ml，73.6mmol，4當(dāng)量)，隨后立即在氮氣流下于5分鐘內(nèi)加入Cl3CCOCl(4.12ml，36.8mmol，2當(dāng)量)，保持溫度在10℃以下。加完后，將混合物在冰浴中攪拌15分鐘，然后除去冰浴，在室溫下攪拌1小時。1小時后，通過TLC檢測反應(yīng)(乙酸乙酯2/正己烷3，Rf10-DAB III＝0.05，Rf7，10-雙三氯乙酰基-10-DAB III＝0.26)并加入Cl3CCOCl(1ml，0.5當(dāng)量)。繼續(xù)在室溫下攪拌10分鐘，然后將反應(yīng)物倒入盛有160g碎冰的燒杯中，在攪拌下放置，直至在室溫下達(dá)到平衡(約1小時)。分離出水相，用二氯甲烷(3×40ml)萃取。將合并后的有機相用1N HCl(20ml)洗滌，然后用NaHCO3飽和溶液(20ml)洗滌，用硫酸鈉干燥，蒸出溶劑。粗品重16.5g。在氯仿中結(jié)晶后，IR、1H-NMR和[α]D光譜值與采用吡啶和三氯乙酸酐獲得的化合物相同。
實施例II7，10-雙三氯乙酸酯10-脫乙?；鶟{果赤霉素III在13-位的氫化和14-位的羥基化將30g活化的MnO2加至10-脫乙酰基漿果赤霉素III7，10-雙三氯乙酸酯(3g)的乙腈(40ml)溶液中，室溫下通過磁攪拌器對懸浮液進(jìn)行攪拌，通過TLC檢測反應(yīng)進(jìn)程(石油醚-乙酸乙酯5∶5；原料的Rf大約為0.31)。在約1小時后，完成了13-脫氫衍生物的形成(TLC分析，13-脫氫衍生物的Rf約為0.50)。繼續(xù)攪拌約72小時，在此期間，13-脫氫衍生物被緩慢地氧化成相應(yīng)的14β-羥基衍生物(Rf約0.36)。將反應(yīng)混合物用硅藻土過濾，濾餅反復(fù)用乙酸乙酯洗滌。蒸出溶劑，將殘余物用硅膠柱色譜(100ml，洗脫劑∶石油醚-乙酸乙酯7∶3)純化，得到170mg的13-脫氫衍生物和2.38g的14β-羥基-13-脫氫衍生物。
13-脫氫-14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III，7，10-雙三氯乙酸酯白色粉末，m.p.97℃；IR(KBr片)3440，1780，1767，1736，1686，1267，1232，1103，1010，854cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ8.07(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.49(Bz，BB′)，6.52(s，H-10)，5.92(d，J＝6.7Hz，H-2)，5.70(br t，J＝8.0Hz，H-7)，4.95(br d，J＝8.2Hz，H-5)，4.37(d，J＝8.2Hz，H-20a)，4.31(d，J＝8.2Hz，H-20b)，4.17(s，H14)，4.02(d，J＝6.7Hz，H-3)，2.71(m，H-6)，2.29(s，OAc)，2.17(s，OAc)，1.96(s，H-18)，1.27，1.01(s，H-16，H-17和H-19)。
實施例III7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III的氧化/羥基化將10g活化的MnO2加至7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III(1.0g)的乙腈(10ml)溶液中，在室溫下用磁攪拌器攪拌懸浮液，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程(石油醚-乙酸乙酯6∶4；原料的Rf約為0.25)。約2小時后，完成了13-脫氫衍生物的形成(TLC分析，13-脫氫衍生物的Rf約0.45)。繼續(xù)攪拌188小時，在此期間再加入MnO2(10g)。13-脫氫衍生物被緩慢地氧化成相應(yīng)的14β-羥基衍生物(Rf約0.38)。將反應(yīng)混合物用硅藻土過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌。蒸出溶劑，將殘余物用硅膠柱色譜(40ml，洗脫劑∶石油醚-乙酸乙酯7∶3)純化，得到126mg的13-脫氫衍生物、479mg(46％)的14β-羥基-13-脫氫衍生物和189mg兩者的混合物。
13-脫氫-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III，白色粉末，m.p.168℃。[α]D25-35(二氯甲烷，C 0.67)；IR(KBr)3488，1726，1711，1676，1373，1269，1244，1230，1105cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ8.07(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.49(Bz，BB′)，6.59(s，H-10)，5.69(d，J＝6.9Hz，H-2)，4.92(d，J＝8.2Hz，H-5)，4.48(dd，J＝10.6Hz，H-7)，4.33(d，J＝8.0Hz，H-20a)，4.12(d，J＝8.0Hz，H-20b)，3.91，(d，J＝6.9Hz，H-3)，2.96(d，J＝20Hz，H-14a)，2.65(d，J＝20Hz，H-20b)，2.50(m，H-6α)，2.23(s，OAc)，2.19(s，OAc+H-18)，1.67，1.28，1.19(s，H-16，H-17和H-19)，0.19(m，TES)。
13-脫氫-14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III，7，10-雙三氯乙酸酯∶白色粉末，m.p.153℃；[α]D25+20(二氯甲烷，C 0.75)；IR(KBr)3431，1723，1692，1371，1269，1242，1223，1096cm-1；1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ8.06(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.48(Bz，BB′)，6.51(s，H-10)，5.88(d，J＝6.9Hz，H-2)，4.90(d，J＝8.2Hz，H-5)，4.47(dd，J＝10.67Hz，H-7)，4.30(d，J＝8Hz，H-20a)，4.28(d，J＝8.2Hz，H-20b)，4.13(br d，J＝2Hz，H-14)，3.84(d，J＝6.9Hz，H-3)，3.69(br d，J＝2Hz，14-OH)，3.62(s，1-OH)，2.52(m，H-6α)，2.24(s，OAc)，2.21(s，OAc)，2.11(s，H-18)，1.92(m，H-6β)，1.74，1.56，1.28(s，-H-16，H-17和H-19)，0.94(m，TES)，0.59(m，TES)。HRNS714.3092(C37H50O12Si的計算值714.3092)。
實施例IV7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III的氧化/羥基化將10g活化的MnO2加至7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III(1.0g)的乙腈(10ml)溶液中，將懸浮液在室溫下用磁攪拌器攪拌，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程(石油醚-乙酸乙酯6∶4；原料的Rf約為0.25)。約2小時后，完成了13-脫氫衍生物的形成(TLC分析，13-脫氫衍生物的Rf約0.45)。繼續(xù)攪拌188小時，在此期間再加入MnO2(10g)。13-脫氫衍生物被緩慢地氧化成相應(yīng)的14β-羥基衍生物(Rf約0.38)。將反應(yīng)混合物用硅藻土過濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌。蒸出溶劑，將殘余物用硅膠柱色譜(40ml，洗脫劑∶石油醚-乙酸乙酯7∶3)純化，得到126mg的13-脫氫衍生物、479mg(46％)的14β-羥基-13-脫氫衍生物和189mg兩者的混合物。
13-脫氫-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III。白色粉末，m.p.210℃；[α]D25-48(二氯甲烷，C 0.50)；IR(KBr)3478，1728，1676，1373，1271，1240，1071，1026cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ8.07(Bz AA′)，7.64(Bz，C)，7.50(Bz，BB′)，6.46(s，H-10)，5.70(d，J＝6.9Hz，H-2)，4.95(d，J＝8.2Hz，H-5)，4.51(dd，J＝10.7Hz，H-7)，4.32(d，J＝8.4Hz，H-20a)，4.14(d，J＝8.4Hz，H-20b)，3.92，(d，J＝6.9Hz，H-3)，2.99(d，J＝20Hz，H-14a)，2.68(d，J＝20Hz，H-14b)，2.56(m，H-6α)，2.29(s，OAc)，2.18(s，OAc)，2.08(s，H-18)，1.68，1.29，1.20(s，H-16，H-17和H-19)，0.19。
13-脫氫-14β-羥基-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III白色粉末，m.p.220℃；[α]D25+19(二氯甲烷，C 0.42)；IR(KBr)3568，1710，1719，1686，1372，1282，1240，1219，1073cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ8.09(BzAA′)，7.60(Bz，C)，7.51(Bz，BB′)，6.39(s，H-10)，5.89(d，J＝6.9Hz，H-2)，4.94(d，J＝8.2Hz，H-5)，4.47(dd，J＝10.7Hz，H-7)，4.31(br s，-H-20a+H-20b)，4.15(s，H-14)，3.69(d，J＝6.9Hz，H-3)，2.29(s，OAc)，2.16(s，H-18)，2.14(s，OAc)，1.74，1.21，1.10(s，H-16，H-17和H-19)，HRMS600.61120.19(C31H36O12Si的計算值600.6103)。
實施例V1.14-碳酸酯-13-脫氫-7-三乙基甲硅烷基-漿果赤霉素III的制備在5分鐘內(nèi)，將13-脫氫-14β-羥基-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III(124mg，1.17mM0l)在二氯甲烷(1ml)和吡啶(0.56ml，6.8mm0l，20摩爾當(dāng)量)中的溶液滴加至光氣(1.8ml 20％的甲苯溶液，3.4mmol，20摩爾當(dāng)量)的二氯甲烷(2ml)溶液中。將混合物在室溫下攪拌1小時，隨后用碳酸氫鈉飽和溶液中和過量的光氣并用二氯甲烷萃取。有機相用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。蒸出溶劑，得到紅色的殘余物，將其用小的硅膠柱(約5ml，洗脫劑∶己烷/乙酸乙酯8∶2)純化，得到118mg(92％)碳酸酯。當(dāng)用三乙胺作為堿進(jìn)行反應(yīng)而無反向加成時，得到1，14-碳酸酯和2-脫苯甲酰基-1，2-碳酸酯-14-苯甲酸酯的混合物(約1∶15)。
13-脫氫-14β-羥基-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯，白色粉末，m.p.153℃；[α]D25+23(二氯甲烷，C 0.75)IR(KBr)；譜帶OH號1834，1734，1709，1373，1242，1225，1088，1057cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ7.99(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.48(Bz，BB′)，6.51(s，H-10)，6.12(d，J＝6.9Hz，H-2)，4.90(d，J＝8.2Hz，H-5)，4.78(s，H-14)，4.44(dd，J＝10.7Hz，H-7)，4.34(d，J＝8Hz，H-20a)，4.19(d，J＝8.2Hz，H-20b)，3.80(d，J＝6.9Hz，H-3)，2.50(m，H-6α)，2.23(s，OAc)，2.22(s，OAc)，2.19(s，H-18)，1.92(m，H-6β)，1.72，1.39，1.26(s，-H-16，H-17和H-19)，0.90(m，TES)，0.56(m，TES)。HRNS740.2851(C38H48O13Si的計算值740.2864)。
13-脫氫-14β-羥基漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯，白色粉末；240℃；[α]D25-2.5(二氯甲烷，C 0.4)；IR(KBr)3539，1831，1736，1240，1088，1068，1057，1024cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ7.98(Bz AA′)，7.61(Bz，C)，7.50(Bz，BB′)，6.39(s，H-10)，6.14(d，J＝6.9Hz，H-2)，4.98(d，J＝8.2Hz，H-5)，4.80(s，H-14)，4.43(dd，J＝10.7Hz，H-7)，4.35(d，J＝8Hz，H-20a)，4.24(d，J＝8.2Hz，H-20b)，3.80(d，J＝6.9Hz，H-3)，2.50(m，H-6α)，2.30(s，OAc)，2.20(s，OAc)，2.15(s，H-18)，1.90(m，H-6β)，1.74，1.34，1.25(s，H-16，H-17和H-19)，HRMS626.2005(C33H34O1的計算值626.1999)。
實施例VI1，14-碳酸酯-7-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III的制備將過量的NaBH4(約20mg)分成小份加至13-脫氫-14β-羥基-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯(50mg)的甲醇(5ml)溶液中。30分鐘后，向反應(yīng)混合物中加入飽和氯化銨，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并除去溶劑得到殘余物，將其用硅膠柱色譜(約5ml，用己烷-乙酸乙酯8∶2洗脫)純化，得到35mg的13α-羥基衍生物和9mg的13β-羥基衍生物。
14β-羥基-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯；[α]D25-35(二氯甲烷，C 0.60)；IR(KBr)3054，1819，1736，1603，1371，1261，1238，1090，1069，cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ8.06(Bz AA′)，7.65(Bz，C)，7.50(Bz，BB′)，6.47(s，H-10)，6.12(d，J＝6.9Hz，H-2)，5.05(br d，J＝5.5Hz，H-13)，4.98(br d，J＝9Hz，H-5)，4.83(d，J＝5Hz，H-14)，4.50(dd，J＝10.7Hz，H-7)，4.34(d，J＝8Hz，H-20a)，4.23(d，J＝8Hz，H-20b)，3.75(d，J＝6.9Hz，H-3)，2.56(m，H-6α)，2.34(s，OAc)，2.22(s，OAc)，1.78(m，H-6β)，1.35(s，H-18)，1.75，1.18，0.95(s，-H-16，H-17和H-19)，0.90(m，TES)，0.62(m，TES)。
14β-羥基-7-三乙基甲硅烷基-13-表漿果赤霉素(epibaccatin)III 1，14-碳酸酯，無定形；[α]D25-13(二氯甲烷，C 0.60)；IR(KBr)3630，1825，1734，1603，1375，1262，1091，1071，1049cm-1；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ8.01(Bz AA′)，7.63(Bz，C)，7.48(Bz，BB′)，6.44(s，H-10)，6.12(d，J＝7.2Hz，H-2)，4.90(br d，J＝9Hz，H-5)，4.81(d，J＝8Hz，H-14)，4.48(br，J＝8Hz，H-13)，4.50(dd，J＝10，7Hz，H-7)，4.41(d，J＝8Hz，H-20a)，4.31(d，J＝8Hz，H-20b)，3.68(d，J＝7.2Hz，H-3)，2.60(m，H-6α)，2.32(s，OAc)，2.26(s，H-18)，2.21(s，OAc)，1.80(m，H-6β)，1.72，1.43，1.27(s，-H-16，H-17和H-19)，0.93(m，TES)，0.61(m，TES)。
實施例VII13-脫氫-14β-羥基-7，10-雙三氯乙?；?漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯的制備在5分鐘內(nèi)，將13-脫氫-14β-羥基-7，10-雙三氯乙?；鶟{果赤霉素III(200mg)在二氯甲烷(2ml)和吡啶(1.12ml，20當(dāng)量)中的溶液加至光氣(20％的甲苯溶液，3.6ml，20當(dāng)量)的二氯甲烷(2ml)溶液中。將混合物在室溫下攪拌1小時，隨后用碳酸氫鈉飽和溶液(3ml)中和過量的光氣。將混合物用二氯甲烷萃取，有機相用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，然后用飽和氯化鈉溶液洗滌并用硫酸鈉干燥。蒸出溶劑后，將殘余物通過硅膠柱色譜純化(洗脫劑∶己烷/乙酸乙酯9∶1)，得到175mg(89％)碳酸酯。
13-脫氫-14β-羥基-7，10-雙三氯乙?；?漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯，無定形白色固體。IR(KBr)1834，1771，1735，1709，1232，1103，1010，854cm-1。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ＝8.03(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.50(Bz，BB′)，6.52(s，H-10)，5.92(d，J＝6.7Hz，H-2)，5.70(br t，J＝8.0Hz，H-7)，4.95(br d，J＝8.2Hz，H-20b)，4.77(s，H-14)，4.02(d，J＝6.7Hz，H-3)，2.71(m，H-6)，2.29(s，OAc)，1.96(s，H-18)，1.27-1.01(m，H-16，H-17，H-19)。
實施例VIII14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III 1.14-碳酸酯的制備于冰浴中將13-脫氫-14β-羥基-7，10-雙三氯乙?；?漿果赤霉素III1，14-碳酸酯(500mg)在甲醇(8ml)中的溶液冷卻至0℃，在5分鐘內(nèi)加入固體NaBH4(44mg)。將混合物在室溫下攪拌1小時，然后冷卻至℃。在5分鐘內(nèi)加入丙酮(2ml)，將混合物濃縮，然后加入乙酸乙酯(10ml)并用硅藻土過濾。將澄清的溶液用氯化鈉飽和溶液洗滌并用硫酸鈉干燥。蒸出溶劑得到殘余物(4.5∶1 C13差向異構(gòu)體的混合物)，將其通過硅膠柱色譜純化(洗脫劑∶己烷/乙酸乙酯1∶1)，得到脫保護(hù)的碳酸酯的251mg 13β差向異構(gòu)體和55mg13α差向異構(gòu)體(合計88％)。
13α-14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III 1，14-碳酸酯。無定形白色固體。IR(KBr)3520(OH)，1834，1709，1232，1103，1010，854cm-1。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ＝8.03(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.50(Bz，BB′)，6.27(s，H-10)，5.92(d，J＝6.7Hz，H-2)，4.95(br d，J＝8.2Hz，H-20b)，4.85(m，H-13)，4.77(s，H-14)，4.42(br t，J＝8.0Hz，H-7)，4.02(d，J＝6.7Hz，H-3)，2.71(m，H-6)，2.29(s，OAc)，1.96(s，H-18)，1.27-1.01(m，H-16，H-17，H-19)。
13α-14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III 1，14-碳酸酯，無定形白色固體。IR(KBr)3520(OH)，1834，1709，1232，1103，1010，854cm-1。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δ＝8.03(Bz AA′)，7.60(Bz，C)，7.50(Bz，BB′)，6.27(s，H-10)，5.92(d，J＝6.7Hz，H-2)，4.95(br d，J＝8.2Hz，H-20b)，4.80(m，H-13)，4.77(s，H-14)，4.42(br t，J＝8.0Hz，H-7)，4.02(d，J＝6.7Hz，H-3)，2.71(m，H-6)，2.29(s，OAc)，1.96(s，H-18)，1.27-1.01(m，H-16，H-17，H-19)。
權(quán)利要求
1.下述反應(yīng)中間體13-脫氫-14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III，1，14-碳酸酯-13-脫氫-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III，13-脫氫-14β-羥基-7，10-雙三氯乙酰基-漿果赤霉素III 1，14-碳酸酯。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于制備具有抗腫瘤活性的新型紫杉烷衍生物的14β－羥基－1，14－碳酸酯－脫乙酰基漿果赤霉素III的制備方法和中間體。
文檔編號C07D493/08GK1736995SQ20051008731
公開日2006年2月22日 申請日期2001年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2000年8月10日
發(fā)明者A·蓬迪羅利, E·邦巴爾代利 申請人:因德納有限公司