專利名稱：肥厚型心肌病致病基因的新突變及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一些肥厚型心肌病致病基因的新突變，以及它們在肥厚型心肌病治療和診斷方面的用途。
背景技術(shù)：
早在19世紀(jì)中葉，法國人A.Vulpian就在鏡下觀察并描述了肥厚型心肌病，但是直到20世紀(jì)50年代后期，肥厚型心肌病獨特的臨床特點才被系統(tǒng)地論述。它通常以不對稱的左和/或右心室肥厚為特征，可累及心室的不同部位，尤以心室間隔為著，左室容積可正?；驕p少。典型的形態(tài)學(xué)改變?yōu)榧±w維排列紊亂。臨床常表現(xiàn)為呼吸困難、心絞痛及暈厥，心律失常、猝死。肥厚型心肌病以往被認(rèn)為是一種少見的心臟疾病，但Maron等進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查顯示，年輕人的發(fā)病率達(dá)0.2％(Maron BJ，Gardin JM，F(xiàn)lack JM，et al.Prevalence ofhypertrophic cardiomyopathy in a general population of youngadultsechocardiographic analysis of 4111 s ubjects in theCARDIA study.Circulation.1995；92785-789)。我們對中國九省市8080個正常人的超聲心臟多普勒檢查表明，中國人中的肥厚型心肌病亦非常常見，患者可多達(dá)0.08％(Zou Y.等，Am.J.Med.2004，11614-18)。肥厚型心肌病至少有60％-70％以上為常染色體顯性遺傳，稱家族性肥厚型心肌病(FHC)。分子遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，編碼肌小節(jié)結(jié)構(gòu)蛋白的基因突變是家族性肥厚型心肌病的根本病因[Seidman JG，Seidman C.The genetic basis for cardiomyopathyfrom mutationidentification to mechanistic paradigms.Cell.2001；104(4)557-67；Bonne，Carrier L，Richard P.Familialhypertrophic cardiomyopathyfrom mutations to functionaldefects.Cir Res.1998；83580-593]。
肌小節(jié)是心肌收縮的基本單位，主要由粗、細(xì)肌絲兩部分組成。粗肌絲主要為肌球蛋白(myosin)和肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MyBPC)，前者包括兩條肌球蛋白重鏈(MHC)和兩條輕鏈——必需/堿性輕鏈(MELC，MLC-1)及調(diào)節(jié)/磷酸化輕鏈(MRLC，MLC-2)。細(xì)肌絲包括肌動蛋白(actin)、α-原肌球蛋白(α-Tm)和肌鈣蛋白復(fù)合體(TnT，TnC，TnI)。此外，肌小節(jié)成分還有肌連蛋白(titin)等。
1.家族性肥厚型心肌病致病基因1.目前，已證實13個基因160多個位點的突變與FHC的發(fā)病有關(guān)，其中有10種是編碼肌小節(jié)結(jié)構(gòu)蛋白的基因，絕大部分突變位于這些基因(Marian AJ，Roberts R.The molecular menetic basis for hypertrophiccardiomyopathy.J Mol Cell Cardio.2001；33655670)(表1)。
表1.家族性肥厚型心肌病致病基因的發(fā)生頻率及突變類型

然而，這些突變并未囊括所有的遺傳型心肌肥厚型致病基因突變。
本發(fā)明的目的在于發(fā)現(xiàn)新的突變，便于肥厚型心肌病的早期診斷和預(yù)防。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明基于的是肥厚型心肌病致病基因中存在一些以前尚未報道的突變這一發(fā)現(xiàn)基礎(chǔ)之上的。本發(fā)明提供了含有這樣的突變的分離核酸。本發(fā)明還提供了可用于檢測這些突變的寡核苷酸，以及利用這樣的寡核苷酸檢測突變的方法。本發(fā)明提供了利用這樣的突變進(jìn)行肥厚型心肌病診斷或者藥物篩選或評估的方法。本發(fā)明另外涉及微陣列。
具體實施例方式
在本發(fā)明中，術(shù)語“樣品”是指來源于人類個體的任何生物學(xué)樣品，包括但不限于例如細(xì)胞，組織樣品如機(jī)體軟組織例如骨組織、毛發(fā)等，生物學(xué)流體如淋巴液、血液、唾液、尿液和其它機(jī)體排泄液等。術(shù)語“分離的”意指非天然存在的?！胺蛛x的核酸”指并不與其所來源的個體基因組中相鄰的5’和/或3’側(cè)翼序列相毗鄰的核酸。因此，“分離的核酸”也包括插入載體內(nèi)的核酸，摻入異源細(xì)胞的基因組內(nèi)的核酸，或者以獨立體存在的核酸。該術(shù)語還包括與其它核酸序列相連接的重組核酸。這樣的重組核酸可能用于生產(chǎn)融合蛋白。
在本發(fā)明中，野生型基因指的是與肥厚型心肌病致病基因?qū)?yīng)的正?；颉Ｋ鼈兊男蛄性诂F(xiàn)有技術(shù)中是已知的，并列于例如Genbank數(shù)據(jù)庫中。例如，野生型β-MHC基因的序列以Genbank登錄號giM57965.1公開，在本發(fā)明中以SEQ ID NO1表示；野生型cMYBPC基因的序列以Genbank登錄號giY10629公開，在本發(fā)明中以SEQ IDNO2表示；野生型cTnT基因的序列以Genbank登錄號giX90780公開，在本發(fā)明中用SEQ ID NO3表示。但是，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員十分清楚，由于基因的測序過程中可能存在一些錯誤，將會導(dǎo)致野生型基因的序列與本文列出的登錄號指示的序列有所不同，或者核苷酸殘基的編號有所變化。此時，將以最終確定的序列為準(zhǔn)。
本發(fā)明中基因突變的表示方法如下“x nt1＞nt2”表示在參考序列中發(fā)生了核苷酸的置換。其中“x”指突變發(fā)生的位點，它遵循的是Genbank中相應(yīng)登錄號給出的野生型基因的核苷酸殘基編號?！埃尽北硎景l(fā)生了置換?！皀t1”指突變前的核苷酸，即正?；?野生型基因)中相應(yīng)位點的核苷酸殘基?！皀t2”指突變后的核苷酸殘基。例如，cTnT基因中的“4693C＞T”表示在cTnT基因中發(fā)生了置換突變，導(dǎo)致在相應(yīng)于Genbank登錄號giX90780(SEQ ID NO3)列出的序列中第4693位核苷酸殘基位點處的“C”被取代為“T”。
“x1-x2 del nt1...nt2”表示在參考序列的第“x1”位到第“x2”位的核苷酸位點處發(fā)生了缺失，從而缺失了“nt1”到“nt2”的核苷酸殘基。例如，“14262-14264delAAG”表示第14262位到第14264位的核苷酸“AAG”被缺失了。
“x1^x2 ins nt1...nt2”表示在參考序列的第“x1”位與第“x2”位的核苷酸位點之間插入了“nt1...nt2”核苷酸殘基。例如，“18115^18116insGCAAG”表示在第18115位與第18116位核苷酸位點之間插入了“GCAAG”。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種突變的β-MHC基因或其片段，其在對應(yīng)于Genbank登錄號giM57965.1所列序列(SEQ ID NO1)中的下述位置處，含有選自下組的一個或多個突變10353G＞A，10429A＞C，10895A＞T，11811A＞C，13653A＞C，14449T＞C，14452G＞A，14557G＞A。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種突變的cMYBPC基因或其片段，其在對應(yīng)于Genbank登錄號giY10629(SEQ ID NO2)所列序列中的下述位置處，含有選自下組的一個或多個突變4826G＞A，8697G＞A，8887G＞A，12101G＞A，13261G＞A，14262-14264delAAG，14364delG，18115^18116insGCAAG。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供了一種突變的cTnT基因或其片段，其在對應(yīng)于Genbank登錄號giX90780(SE Q ID NO3)所列序列中的下述位置處，含有選自下組的一個或多個突變4693C＞T，4769G＞A。
在進(jìn)一步的實施方案中，本發(fā)明的突變基因或片段中還含有額外的突變，包括任何已知的或?qū)慝@知的突變或核苷酸多態(tài)性。
本發(fā)明還涉及由上述突變基因或片段衍生的mRNA或cDNA或者編碼的蛋白質(zhì)。
本發(fā)明還涉及可與上述任一突變基因或片段或由其衍生的mRNA或cDNA或者它們的互補序列特異性雜交，但不能與相應(yīng)的野生型基因序列或其互補序列雜交的核酸，例如寡核苷酸，它們可作為探針或引物用于特異性檢測人類個體中的上述突變。本領(lǐng)域中的技術(shù)人員均清楚，探針一般具有與目的核酸的序列互補、并與包含待檢測突變的核酸特異性雜交而不與具有野生型基因序列的核酸相雜交的序列。該寡核苷酸一般定位于突變位點周圍，特異性地檢測樣品中上述突變的存在與否。優(yōu)選地，所述核酸或其互補序列中含有上文所定義的任何一個或多個突變。作為例示，寡核苷酸引物或探針可設(shè)計成待檢測的突變位點位于其5’或3’末端或者在中間，或者待檢測的突變位點位于該引物或探針的互補序列的5’或3’末端或者在中間。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“特異性檢測”是指該寡核苷酸只與包含上文定義的突變的核酸或其互補序列發(fā)生雜交，而不與分別具有野生型基因序列或其互補序列的核酸發(fā)生雜交。
在突變位點涉及多個核苷酸時，寡核苷酸探針或引物可設(shè)計成使得突變位點的核苷酸序列或與其互補的序列的整個或部分包含在探針或引物的核苷酸序列中。這樣，有可能利用由此制備的寡核苷酸作探針通過雜交或差異雜交的存在與否來測定突變的存在情況，或者作為引物通過擴(kuò)增并隨后檢測(通過例如測序、限制性酶切等)突變的存在情況。
寡核苷酸探針或引物一般長度大于約10bp，例如10-100個核苷酸，優(yōu)選地，其長度為15-75個核苷酸，更優(yōu)選18-50個核苷酸，尤其優(yōu)選為20-35個核苷酸，最優(yōu)選為23-30個核苷酸。本領(lǐng)域中的技術(shù)人員可以很容易設(shè)計出合適的寡核苷酸探針或引物，用于突變位點的檢測。至于其制備，則可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法進(jìn)行，包括但不限于例如化學(xué)合成法等。優(yōu)選地，探針/引物是被可檢測標(biāo)記的，以便于檢測。標(biāo)記可以是例如生物素、熒光染料、放射性同位素等，但并不限于此。它們是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，并可通過常規(guī)方法連接到探針/引物上。該核酸可以是單鏈的，也可以是雙鏈的。
在本領(lǐng)域中眾所周知，可利用引物通過添加游離核苷酸而延伸核酸序列。雜交指的是在嚴(yán)謹(jǐn)條件下與核酸序列發(fā)生選擇性結(jié)合。在本文中，嚴(yán)謹(jǐn)條件是僅允許引物與含突變的核酸序列或其互補序列雜交，而不與野生型核酸序列或其互補序列雜交的條件。依照所使用的引物，普通技術(shù)人員可以通過常規(guī)實驗確定相應(yīng)的嚴(yán)謹(jǐn)雜交條件。在這方面有眾多的現(xiàn)有技術(shù)可供參考，包括例如Sambrook等，分子克隆實驗室手冊，第2版，冷泉港實驗室出版社，冷泉港，紐約。
本發(fā)明還涉及利用設(shè)計成在擴(kuò)增后將得到包含待檢測突變的片段的引物進(jìn)行突變檢測。所述引物一般定位于突變位點周圍或者其5’或3’方向1000bp、優(yōu)選500bp、更優(yōu)選250bp、尤其優(yōu)選200bp、最優(yōu)選100bp的范圍內(nèi)，其長度一般大于約10bp，優(yōu)選為15-100bp，更優(yōu)選為18-75bp，尤其優(yōu)選為20-50bp，最優(yōu)選為25-40bp。
還可以在本發(fā)明的寡核苷酸序列5’和/或3’末端連接一些額外的核苷酸序列。這樣的寡核苷酸也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
利用這樣的寡核苷酸，通過對來自人類個體的遺傳材料進(jìn)行擴(kuò)增和隨后分析，可以檢測所述人類個體中所述突變的存在與否。例如，可以將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，隨后用溴化乙錠、SYBR綠色溶液、諸如此類染色，從而以條帶(DNA片段)的形式檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。由此，可以以DNA片段的形式檢測包含突變位點的基因片段。除了瓊脂糖凝膠電泳以外，也可以進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳或毛細(xì)管電泳。進(jìn)一步地，可以分離擴(kuò)增產(chǎn)物，隨后通過測序或者限制性酶切分析突變的存在與否。還有可能使用預(yù)先經(jīng)諸如熒光染料等物質(zhì)標(biāo)記的引物進(jìn)行PCR，并檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。還可以采用不需要電泳的檢測方法；在這種方法中，將擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合到固體支持物諸如微型板上，并通過熒光、酶反應(yīng)、諸如此類等手段來檢測目的DNA片段。
本發(fā)明提供了檢測上述突變的方法，包括應(yīng)用上文所述寡核苷酸探針或引物檢測生物學(xué)樣品，或者應(yīng)用設(shè)計成在擴(kuò)增后將得到包含該突變的片段的引物對擴(kuò)增該生物學(xué)樣品并進(jìn)行檢測的步驟。在檢測中，通常應(yīng)用待測個體的生物學(xué)樣品，例如其血液，但并不限于此。在一個實施方案中，直接應(yīng)用該生物學(xué)樣品進(jìn)行檢測。例如，利用上述核酸作為引物，通過PCR法擴(kuò)增包含待檢測突變位點的片段。在另一個實施方案中，在檢測前首先從該生物學(xué)樣品分離遺傳材料，例如基因組DNA，但并不限于此。檢測可通過例如核酸雜交、PCR法、測序法、限制性片段長度多態(tài)性測定法等方法常規(guī)進(jìn)行，但并不局限于這些方法。其條件是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的，或可非常容易地確定。優(yōu)選地，使用如上所述制備的寡核苷酸作為引物，用DNA聚合酶擴(kuò)增編碼包含待檢測突變位點的DNA片段。或者，將如上所述制備的探針與模板DNA雜交，從而檢測那些具有感興趣突變的DNA?？梢砸勒粘Ｒ?guī)方法來制備模板DNA，如氯化銫梯度離心、SDS裂解法、或酚/氯仿抽提。
本發(fā)明還涉及一種微陣列，其中含有上述寡核苷酸探針或引物。該寡核苷酸可以固定在固相支持物上。在一個實施方案中，所述微陣列是DNA芯片、基因芯片、微型芯片、珠陣等的形式。DNA芯片是將很多種DNA探針排列并固定在基片例如玻璃片上，然后在上面進(jìn)行標(biāo)記DNA的雜交、通過檢測探針上的標(biāo)記信號而可區(qū)分地檢測完全匹配和核苷酸錯配，由此對核酸進(jìn)行檢測。芯片的常規(guī)制備方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。
本發(fā)明還涉及可用于檢測上述突變的試劑盒，其中包括一種或多種相關(guān)的診斷性引物或探針和/或該突變基因特異的寡核苷酸引物，例如前文所述的寡核苷酸探針或引物。試劑盒中還可包括容器、使用說明書、緩沖液、酶和/或其它反應(yīng)成分。優(yōu)選地，其中還包含陽性對照和陰性對照，以便進(jìn)一步確認(rèn)檢測結(jié)果。在一個實施方案中，本發(fā)明的試劑盒包含用于預(yù)定測定法的任何和所有成分酶或成分。這些成分的實例包括但不限于寡核苷酸、聚合酶(如Taq聚合酶)、緩沖液(如Tris緩沖液)、dNTP、對照試劑(如組織樣品、用作陽性和陰性對照的靶寡核苷酸、等)、標(biāo)記和/或檢測試劑(熒光染料諸如VIC、FAM)、固體支持物、說明書、例示性圖表和/或產(chǎn)品信息、抑制劑等。本發(fā)明的試劑盒可以是只包含部分必需成分的部分試劑盒。在這種情況中，使用者可以提供其余成分。本發(fā)明的試劑盒可以包含兩個或多個分開的容器，每個都包含將要使用的部分成分。例如，在試劑盒中，第一個容器包含酶，而第二個容器包含寡核苷酸。酶的具體實例包括適當(dāng)保存緩沖液或容器中的結(jié)構(gòu)特異性切割酶。
本發(fā)明還涉及診斷肥厚型心肌病或確定肥厚型心肌病預(yù)后風(fēng)險的方法，包括對個體的體外樣品檢測下述中的一種或多種突變的步驟β-MHC基因中的下述突變10353G＞A，10429A＞C，10895A＞T，11811A＞C，13653A＞C，14449T＞C，14452G＞A，14557G＞A；cMYBPC基因中的下述突變4826G＞A，8697G＞A，8887G＞A，12101G＞A，13261G＞A，14262-14264delAAG，14364delG，18115-18116insGCAAG；或者cTnT基因中的下述突變4693C＞T，4769G＞A。優(yōu)選地，檢測步驟是按照前文所述突變檢測方法進(jìn)行的。例如，使用位于突變位點上下游的寡核苷酸首先對包含待檢測的突變位點的核酸片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。檢測可通過例如PCR法、測序法、限制性片段長度多態(tài)性等進(jìn)行。
本發(fā)明還涉及利用上述突變基因作為靶點篩選或評估藥物的方法，包括例如對攜帶所述突變的細(xì)胞、組織、器官或動物個體給予一種或多種藥物，并評估其一個或多個指示肥厚型心肌病狀況的指標(biāo)，以指示疾病改善狀況。優(yōu)選地，所述細(xì)胞、組織、器官或動物個體是通過基因敲除(gene knockout)或敲入(gene knockin)或者轉(zhuǎn)基因的方法而得到的。基因敲除或敲入或者轉(zhuǎn)基因的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，包括例如設(shè)計兩個與內(nèi)源基因同源的側(cè)翼片段。在基因敲除的情況下，兩同源片段之間包含預(yù)定使體內(nèi)內(nèi)源基因失活的突變，從而在導(dǎo)入體內(nèi)后，能將相應(yīng)的內(nèi)源基因失活。在基因敲入的情況下，兩同源片段之間包含預(yù)定導(dǎo)入體內(nèi)內(nèi)源基因處的核酸，從而在導(dǎo)入體內(nèi)后，能將目的核酸插入預(yù)定的位點。操作對象可以是個體，例如小鼠。或者，操作對象也可以是細(xì)胞，例如人的心肌細(xì)胞。這樣，可以在個體或細(xì)胞水平上對藥物進(jìn)行篩選或評估。
下面以實施例的方式對本發(fā)明作出說明。這些實施例都是示范性的，它們不以任何方式限定本發(fā)明的范圍。
實施例實施例1基因組DNA的提取1研究對象的選擇研究對象為在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外心血管病醫(yī)院診斷明確的門診就診或住院的肥厚型心肌病病人，共100例，經(jīng)家族調(diào)查無血緣關(guān)系。其中包括肥厚型心肌病家系先證者51人，相關(guān)家系成員356人，散發(fā)病例49人。正常研究對照120例為性別、年齡匹配的健康人。入選者填寫《分子遺傳學(xué)研究病例調(diào)查表》，內(nèi)容包括病人聯(lián)系方式、個人一般情況、臨床癥狀、體檢結(jié)果、家族史調(diào)查、實驗室檢查、心電圖(必要時Holter)，胸片報告，超聲心動圖報告(必要時需心臟MRI或左室及冠脈造影結(jié)果)。建立資料數(shù)據(jù)庫。
肥厚型心肌病診斷標(biāo)準(zhǔn)(WHO/ISFC 1996年公布)(1)基本標(biāo)準(zhǔn)超聲心動圖診斷的原因不明的心臟左室壁厚度大于或等于13mm；或心尖部肥厚或右室肥厚。
(2)參考標(biāo)準(zhǔn)心電圖左室高電壓表現(xiàn)，伴/不伴II、III、avF、avL及V4V5導(dǎo)聯(lián)病理性Q波及ST-T改變。
(3)排除標(biāo)準(zhǔn)長期高血壓、缺血性心肌病及其他可引起心室肥厚的原發(fā)性疾病。
(4)家族性肥厚型心肌病確定標(biāo)準(zhǔn)有心肌病的家族遺傳傾向，即病人(先證者)家族中有多人發(fā)病，并符合常染色體顯性遺傳特點。
2基因組DNA的分離取患者肘靜脈血5ml，EDTA(0.5M)抗凝，2500rpm離心10min。小心吸取上層血漿，用1.5ML的Eppendorf管分裝。在血細(xì)胞中加入3倍體積的溶血液(NH4Cl 8.29g、KHCO31.0g、EDTA-Na20.03734g，加雙蒸餾水至1000ml，調(diào)節(jié)PH為7.4)，搖勻，冰浴15min。2500rpm離心10min，棄上清。向細(xì)胞沉淀中加入10ml溶血液，搖勻，冰浴15min。3000rpm離心10min，棄上清，得到白細(xì)胞，直接用于提取基因組DNA，或者于-80℃凍存?zhèn)溆谩?br> 如下提取基因組DNA取白細(xì)胞，加4.5ml SE(NaCl 4.383g、EDTA-Na29.306g加雙蒸餾水至1000ml，調(diào)節(jié)PH值為8.0)，使勁吹打，混勻。沿管壁加入0.5ml的10％SDS，然后加蛋白酶E(100mg/ml，MilliQ水)50μl，首尾輕搖10min，混勻，然后于37℃水浴過夜。第二天取出，沿管壁加3ml飽和NaCl，迅速手搖15s，使蛋白變性析出，然后于4000rpm離心10min。取上清，轉(zhuǎn)入另一管中，加等體積的三氯甲烷，搖10min，混勻。2500rpm離心10min。取上清，轉(zhuǎn)入另一管中，加等體積的三氯甲烷，搖10min，混勻。2500rpm離心10min，取上清，轉(zhuǎn)入50ml管中，加3倍體積無水乙醇后，首尾輕搖，見DNA絮狀沉淀析出。將DNA挑至管壁，用75％乙醇洗滌2遍。將DNA挑至0.5ml管中，凍干。最后加TE(10mM Tris-HCl、1mM EDTA，調(diào)節(jié)PH為8.0)300μl，使DNA溶解，紫外分光光度計測OD值定量，4℃保存。
實施例2 PCR法篩選β-肌球蛋白重鏈(B-MHC)基因中的突變所用引物及擴(kuò)增條件如下表1所示(基因組序列來自Genebankdatabase，登陸號為M57965)
表1

制備如下PCR反應(yīng)基本體系(50μl)引物(濃度20pmol/μl) 1μl10×buffer 5μlTaqDNA聚合酶(2u/μl) 1μldNTP(10mM) 1μl人基因組DNA 1μlddH2O 41μl按照表1中的PCR條件對各患者或?qū)φ盏幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并按下述步驟對PCR反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行測序前純化步驟(1)將50μl PCR反應(yīng)產(chǎn)物同其6倍體積的無水乙醇與5M醋酸胺(5∶1)混合溶液混合，置于-80℃30分鐘以上。
(2)14000rpm，4℃離心15分鐘，吸上清棄去。
(3)加入200μl的75％酒精，14000rpm，4℃離心5分鐘，吸上清棄去。
(4)室溫或冷凍干燥后，加入20μl TE溶解。
(5)吸2μl點樣，定量。
如下進(jìn)行測序反應(yīng)(1)反應(yīng)體系(20μl)BigDyeTM4μlBigDyeTMBuffer2μl 引物(同PCR擴(kuò)增引物)10pmol/μl(2)反應(yīng)條件(根據(jù)引物的退火溫度而定)

(3)測序產(chǎn)物的純化20μl產(chǎn)物中加25μl醋酸銨和125μl乙醇，置-70℃ 1小時，14,000rpm離心10分鐘，棄上清，加75％的乙醇100μl，14,000rpm離心5分鐘，棄上清，95℃1分鐘烤干，加入2μl loading buffer，混勻，94℃變性5分鐘，然后迅速置于冰上。
(4)將純化后的測序反應(yīng)產(chǎn)物在ABI PRISM377自動測序儀上測序。
(5)用GeneJockey、AssemblyLIGNTM、Sequencing Analysis 3.4軟件閱讀及核對測序圖，并與以公布的基因序列相比較。由此篩選出來的基因突變列于表5中。
實施例3 PCR法篩選心臟肌鈣蛋白T(cTnT)基因中的突變所用引物及擴(kuò)增條件如下表2所示(基因組序列來自Genebankdatabase，登陸號為AY044273)表2

制備與實施例2基本上相似的PCR反應(yīng)基本體系(50μl)，只是換用此實施例的引物。
按照表2中的PCR條件對各患者或?qū)φ盏幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)常規(guī)方法分離擴(kuò)增產(chǎn)物并對其測序。由此篩選出來的基因突變列于表5中。
實施例4 PCR法篩選心臟肌鈣蛋白I基因中的突變所用引物及擴(kuò)增條件如下表3所示(基因組序列來自Genebankdatabase，登陸號為X90780)表3

制備與實施例2基本上相似的PCR反應(yīng)基本體系(50μl)，只是換用此實施例的引物。
按照表3中的PCR條件對各患者或?qū)φ盏幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并按照實施例2的方法分離擴(kuò)增產(chǎn)物并對其測序。由此篩選出來的基因突變列于表5中。
實施例5心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C基因(cMYBPC)的PCR擴(kuò)增所用引物及擴(kuò)增條件如下表4所示(基因組序列來自Genebankdatabase，登陸號為Y10629)表4

制備與實施例2基本上相似的PCR反應(yīng)基本體系(50μl)，只是換用此實施例的引物。
按照表4中的PCR條件對各患者或?qū)φ盏幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并按照實施例2的方法分離擴(kuò)增產(chǎn)物并對其測序。由此篩選出來的基因突變列于表5中。
實施例6限制性片斷長度多肽性(RFLP)檢測因基因某位置的堿基改變，破壞了或建立了可被限制性內(nèi)切酶識別的特異性酶切位點，當(dāng)該樣品被特異性限制性內(nèi)切酶處理后，因其與正常樣品的酶切片段長度不同，在凝膠電泳時，可顯示不同的遷移速度。以此原理，可進(jìn)行已知突變位點的患者家系成員的基因突變篩查。此檢測中使用Promega公司酶切試劑盒，并按照所附的產(chǎn)品說明書進(jìn)行。
表5 100例肥厚型心肌病病人β-MHC、cMYBPC、cTnT及cTnI基因突變篩查結(jié)果

注帶著重色的都是新突變，共19個。
2.MHCG425R、Q734P、M822T、G823E；cMYBPCG263R、8887 G＞A(intron15)、R668H、G758D、18115^18116 insGCAAG(exon 29)；cTnTR145W等突變在家系患者中發(fā)現(xiàn)，與肥厚型心肌病呈共分離趨勢。
3.120例正常對照中未發(fā)現(xiàn)以上位點的突變。
上述實施例只是為了闡明、而不是限制本發(fā)明。相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員清楚地知道，可對本文所述的內(nèi)容作其它適當(dāng)?shù)男揎椇妥兓?，并可在本發(fā)明或其任何實施方案的范圍內(nèi)進(jìn)行這種修飾和變化。這樣的修飾和變化都落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
序列表<110>中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 阜外心血管病醫(yī)院<120>肥厚型心肌病致病基因的新突變及其用途<130>idc040150<160>4<170>PatentIn version 3.2<210>1<211>28438<212>DNA<213>β-MHC基因<220>
<221>misc_feature<222>(11380)..(11380)<223>n is a，c，g，or t<400>1gatctatctg gtccagacca tcctttgaac caagtggact tagtggggct gaaggaggtg60tggggacaaa gaacctatgg cagggcaacc ggccctcctg tctgcagcct ggcttcctca120attttgtgtt cctaacctaa gagctgccat tcagtgaggg cccacagtgt gtctgctgtg180tgtagactct gcttgtgcaa tctctaatgg cctgagtagc cctggaaaca aaatgtggct240atccccatgt tacagatgac aaaactggct caaagcaatt atatgactga cgtagaccac300acagctagaa aatggaatca ctgggtttca aagtggattt ttgtgactga ctccaaagct360gaccagagtg ctcatcctgt atgcttctga ggcctctggc cctccagacc ggtcactccc420cacaaagtct cccttttggt gagttgtgtc cctccaaaca ctccctgaag gcaagatcaa480cctgccctaa ctaccccaaa gtgaactagg ccagccccaa gcctgtctcc ggccctccat540ctctctcttt gttcacatcc atcagaaagc agagacctag agtagggaat gagagggggt600gcacaagtac aaaagatttt gaagcagcag gaagacgaaa gaagtacaag aaggagcagc660tgtttgtaaa agggaaaatc tgagacaggc agaaagctca gctccctaat cctaggctcg720tgtggagcca gggcagggtc ccccaaggtc agggattctg ggggcaggcg gatgggagag780tcagcctcca ctcctgggtg gctcccctct gccctgtgca caaacaacga gtgcctcatt840cctcccctgc accaagtgcc ctgcctcttc ctgccccgtt tcttccttcc ctttgggtac900cggatctttt ttctgattcc cctctctcca tgctgacatc gcttctaatt cgccctggtg960tctccctccc tcacaattac tgggagtaat tttagcaact tttcctctga actaccgctg1020gcgtgttcac agcaaatggc ccctgttttg gcttgacact tgatcagggt ggtgacagag1080tgcagacaaa gccggcacaa tgcggggagg ggaggaccgg ggcagatcac cttcctttca1140cttcagggcc ttatttggtc taccttgccg aagcggccct ccttccagcc tctctttatt1200tatagcattt tgcttgctct cctttatctt gctatcactt gtagcacact ctgcacaatc1260cccacccacc ccagcatggt ggggcccctg gctcactctc cccacaagga atgtgcatgt1320gtgcaaaggg taggcctgga tgccatttct acaaacagtt gactaaagca gtccagagca1380
gggatctttc tttgggtcat tgttatgtcc ttattgacca gaataatgcc tggcacatag1440taggcactca ataaatactt gttgaatgga ggaatctgca aagctgctca gtcttcagac1500agcagcaagc agcaggaaga gaatcatgat gtaaccaaga gcaggtgctg gaggagctag1560ggagtgagtg gggatcttta aggacagcag gccctctgat ctgtctgagc gtgtgagcaa1620agcctagtta gggaggtgag ttctatctgc aatgagaggg ggcatgggtg gagacagata1680acaccaacac caacagacca gacctcccaa acccgaaagg agagacaaag tgtgattgat1740ttcccaaatg cagaaaagac tacccaagtc cccagccaag aagaatcgct ggcctgtgga1800tgaagacact ggctttgaaa tggctcaact acgtcccaag caccctttgt gcatcttaat1860tgccctggga aatcagggag gggtggcagt ttggagcttg gaaagctgga aggtggggac1920gaaaggagtt tttgcccctc atcgccaatc cttgaggttc ctacagggaa cctcagacaa1980cagctgtctt aggggtttcc ttccagctcc aagcagctgt attatctata gctttgagag2040ggtctgtctc tgtcaatggg gctgattcct cagcacctgg cagggcctgg gggggactgc2100cagagtctgt tctgccgggc atgttagtag cacagactac tgggataacc tcagcaactg2160tataccttag cactgcagag ctgcggtgtt gtcagacaca ggcccttgca gttcgtggtc2220tacccccact tgcctgcacc ccccttatag ctgctcaatg tcctcagact gtaccttagt2280gccttggtta ccaagcaacc cccacagagg ccctcctcct ggattttccc ttccctgcta2340tgcccacccc accttcaaaa tgtacctgct gcacccatcc cccaggcctg cctcactcct2400tccaagctga cagctaatca gatggactaa tcgcatgcgc ggaagagctg tgctcgggaa2460gaagggggag atttcacacc aaatcgtgca gtggttgcct agacacggag ccagtcaagc2520ttgcatgccc cgttgctaga agagcatggc atcggttgtg ttctgtgctc gtaggctggg2580ccccagctcc ctttcctccc ctcctttgtg gctgttcctc aggcctgcag aggggaagat2640ttttcctgtc ctgttactct gcctcacttg ccagaacact agtcgcctcc agctctggat2700aaagctgagg ctgggtgggc cagacaacag ctgtcttagg ggtctccttc cagctccaag2760tagttgtatt atctatagct ctgagagggt ctgtctctgg gctcaggcct ttagtacctg2820tggggcagag ccaggaacgt gagtcaggca aaccgctcca aactaggacc aatgcagctg2880ggtcctgctc tctgcgcata gggggtcccc acatctttgg aatcccagcc cacctttcca2940ggctaccctc cacaggccgg gctccactcc catctgctga ggtttcccac cttgaatcct3000gctgccccga ttagctgtat aaccttaaag aatgcactgt ccctctccat taaatgaagt3060gcttggatgg attgctaaag gcctgtctgg ctcggaggct tggtgcctca acacattgcc3120tgctggtcca aggaaatcag tgcctgagcc agagtcccca tctctaagct ccatggttat3180tgttcttgcc acctggctag gaaatgtcct tccagctgcc ccagtctagc tgcctcaccc3240tggggccatg ccccaactct gtcctaccct tctctgctgc tgacactcag ccccttccca3300gcttccagtt ggatacagga cctgggccag gagagcaggg aggacactgt ggaaatgcgg3360ccaggccatc aggggcctcg cagcagggga ctggaggggg agcagtgtcc agggccagaa3420
gtgccctgcg ggagagccag gacattggct gcctgtggtc ttggtggtcg tggtcagttc3480cctctcctgc cagctgtgga atgtgaggcc tggcctggga gatatttttg ctgcactttg3540agccaccccg ccccctggaa ctcagaccct gcacagtcca tgccataaca atgacgacca3600cttccaattg tttcctagct ggagaggcgg ggaggggagc actgtttggg aaggggggga3660gcctggggga aatgcttcta gtgacaacag ccctttctaa atccggctag ggactgggtg3720ccgttggggg tgggggtgcc ctgctgcccc atatatacag cccctgagac caggtctggc3780tccacagctc tgtcctgctc tgtgtctttc cctgctgctc tcaggtagga gcgggagctg3840gaggctttac tctgggataa gggggctcca ggcttaggaa gggattcctc ttggaatagc3900aagcttcatg caggacttca tgcagagtac caggtccagt cactgggcac acatgtgcag3960gtctaaacat gggcgtatgt gccacaggag ttccataggg gcagatatct gcatctgagc4020atatgggacc aatatgcatt acagggtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgga4080caagcctgca tagtctgaat gtgagaaagg gtatgtacct cactgactga tacagaaata4140tcaagtggga gatgtgggtg tatgatcacg tctgtgaacg aggaggttcc tttgcaggga4200gggagaaaga atggtggaga aggattctag gaagtgtgta tgccttcatg tgattctgtg4260aggcctggaa tgtgtagcta cccctgtcca tgcatgcaga ggttcttgtc tatgcctcca4320cgagtaatga ctgttatagt atctgtaccc tctgcagaag gaactcacag gcacgggggt4380gtaggatgtt ccaggtcttt gtgtactgaa gaacacgcag atgtgatcta cttacgtggc4440acacatcctc aaatgtgcac atttgctgtt gaggcatata tggcaccctg gggttggggt4500gcggattgag gtatgggaag gaagcctgtc ctcatgtgag aggcatgccc aagcagcagg4560catgagtgtt catcagaggg cttgtggagg gtgtttggct atgtgatggg tgtgtctgtg4620agaggaagcc cacagtgtct tctctctgag aatgtccaca aagtctgaca acaaaatggg4680gacaggatgg aaaagaagtc tctttagagt catcagactt gcattcaagt cttggctctc4740ccacttgttg tcatgggctc ttggccaagc aagccattta acctcgattt cctcatctgt4800caaatggggt gaagactgag taggagaaag tgcattgaag tgcttttaga ctggaaagtg4860ccgaacaaat gtgaccatta gttgtctctc agatggctca aagaaaggta ccactagatg4920ggtacaggca ggggtgggac catctcgcag gagtgaagag gattagggtt caggttgagt4980tgacacagga agctgttaga actagttctt gaggaaaaag ggaatagggt ttgaaaaaca5040agaaggatgg gttgggccag agaagctgac caccctttcc accttgtttt ggaagagggt5100ggatgctgaa gaacagagcc agggagaagc aggaaggtgg gactggtcag gtgggcacag5160cctgccctga cacagcctct tccctctctc caggtcccct gcaggccttg gcccctttcc5220tcatctgtag acacacttga gtagcccagg taagaaaagc tgaagctaga gcgttgaaaa5280tctagtaaga ctgggcatta gagccccaaa gccagcctat ggaactctag tttctgccat5340gtgctggaga gaatatcttg gctatcaaga gctacttacc tgtgaccagg gggtccaggg5400atagatgagg gtcagagatg gaaatagtta gatttctgct cctacagggg acctgcaggg5460agctcagaat gctcttcctt cccctaggag agccccagct tgaacaatag ttagttgttc5520
cttttaccct ggcaggtttg ctaggctgct cctctggtta aggggtaacc tcaaaaggaa5580gggactcact ggtaactcct cttgactctt gagcatggtg ctaggttttg gggctcccac5640tgaaggggag agcccaggga gggaagggaa gaatgggcag atgggagggc agccagcttc5700tgctcactcc aggcacagcc atgggagatt cggagatggc agtctttggg gctgccgccc5760cctacctgcg caagtcagag aaggagcggc tagaagcgca gaccaggcct tttgacctca5820agaaggatgt cttcgtgcct gatgacaaac aggagtttgt caaggccaag atcgtgtctc5880gagagggtgg caaagtcact gccgagactg agtatggcaa ggtgggtgtc aggctgatgt5940gagagtccac cctggccacc tgtacacctg ggtggacaga gaggggtaca cccatgcccc6000atgcccatgc agacctgagg atggtcccat tctccttccc tttgggaaga atccagaccc6060tccaaagagc cctctccttc ccaatatccc ttctgtcttc cctgtgagat cctggttcct6120tctctcttga gcactattgc cctgtcactc accaactcct aaccctcttg aggaaggagg6180gaaagcccag gctgacagga gggcttgggt gggggctctt gcagacagtg accgtgaagg6240aggaccaggt gatgcagcag aacccaccca agttcgacaa aatcgaggac atggccatgc6300tgaccttcct gcatgagccc gcggtgctct acaacctcaa ggatcgctac ggctcctgga6360tgatctacgt gagtgctgca cctggcccta cgttgggatc tctgttcttg ctccatccat6420gtccacccca ggagccaaga gtgtcttctg tttgtgtcta ggcagggtta cactctaacc6480tcgtcccaac atccttggtt caattccaac actctgggga ctggcattac tcagattgag6540tgcatgcaga ggttttcctt tctcttcttt ctctcctggg atctttctct aactcccaaa6600atcaccagcc ctcccccttc gcaactggca agtcactgct ccttttctat ccccagacct6660actcgggcct cttctgtgtc accgtcaacc cttacaagtg gctgccggtg tacactcctg6720aggtggtggc tgcctaccgg ggcaagaaga ggagcgaggc cccgccccac atcttctcca6780tctccgacaa cgcctatcag tacatgctga caggtgagag gccctggaag gtcttcctga6840agggaactgg gataggccgg gagggagagg gagaaggaag ggagaagccc cacgagagca6900tcctgtgcag ctcctgacct ttcctcccca ccctctcccc acagacagag aaaaccagtc6960catcctgatc acgtgagtgt agctgctact gtattccctt tcagaatctc cctgatccca7020gcctccagcc ccatcaggtg tcccaggccc cgaggcatag actcagcctc tttcccccca7080acctcgtgcc catctccttc ttctctgacc attaccctga cccctctctt tgctctccct7140cttcctttct gctttccatc cccttcatgt ttttcctctc ccacctcctt cacccactct7200ccaactcatc acgcgtttat ccagaagctc attatcgcca tgtcttcacc tctgcatttt7260ctttcccttc agaaacattt cccattcttc cagccctacc aacttttccc aaaacagccc7320aggcccatct cccctgttta ctttgcccag ccaagcacag gtcagcctgc ccaaaccagt7380gccttctggt ggcatccttc ctggtgccag ccctgacctc tgtgcatcag aagacagttg7440tggattttgg gtgtagataa cctggcagct tcttgcccag ggctcctact ctcgggtagg7500cccaggcatt ctctcctgat ttgaggcttg ctggtctcca gtagtattgt tcactgccca7560
ataagcccct gtcttcacag cggagaatcc ggagcaggga agacagtcaa caccaagagg7620gtcatccagt actttgctgt tattgcagcc attggggacc gcagcaagaa ggaccagagc7680ccgggcaagg taggcctgct gccctccaag gtcctgtacc gcagaaggga gggagaagag7740ctctcacctg cctccttctt ggcctctgca gggcaccctg gaggaccaga tcatccaggc7800caaccctgct ctggaggcct ttggcaatgc caagaccgtc cggaacgaca actcctcccg7860cttcgtgagt ggtccctgac cttggccttg ggacttggac tggtggagga atggtctcag7920atatgagcct tcccccaact catcaccact ctcttccatc tctccagggg aaattcattc7980gaattcattt tggggcaaca ggaaagttgg catctgcaga catagagacc tgtgagtgcc8040atgaatctgc taggctcagc ctaagctcac ccttgctcta gaccatctgg tcttgacctc8100tctctctctc ccctccctcc ctctgttttt ctcctcttta agtctctgtc tgtaggtgtc8160tctgtcttca ggtctacata tctgtctctc tctgagactt cctctgcatc tttctccatt8220tctgtctctg catggctagg tgtctttctc tgggatttct ctctgagact atttctctcc8280ttctgggtct ctgtttccat ctctctgtgt gatctctttg tgtctgtcca actagtctct8340ctggctcttc ccttccctct gccttttgct tgctacattt atcattaatt ttccttgtgc8400ccaaacccta acttttcttt ctctccttct tctccccacc tgttcacaga tcttctggaa8460aaatccagag ttattttcca gctgaaagca gagagagatt atcacatttt ctaccaaatc8520ctgtctaaca aaaagcctga gctgctgggt gagtcagagc caccgactga gaccaactat8580ctccatggca acctggtccc ctctgcttgt ggctggactc agctggcatg ccctgggttt8640catggcactg ctggattcaa ttcagctggg atgtggggcc aagccaagcc ctgtcctgtg8700ctgcttcctc aggccatgtg ctgtggcgag cagcctccat gagagccggg ggcttgtgtc8760ccaccctaac catgtttttt cccctagaca tgctgctgat caccaacaac ccctacgatt8820atgcattcat ctcccaagga gagaccaccg tggcctccat tgatgacgct gaggagctca8880tggccactga tgtgagtgtg tgaggaccca gccagggggt gggaggattg gcagtgaggg8940gcaaacaggg gtccaaaagc agagctaaga ctctggccat tggttgttta aagtggtatg9000gacctcctga gagccagaat gtgccctgtg atcagggtgt actggggaat ggatgaggtg9060agacaggact ggccagtatc tggtgttcta tcaaaccagg aagagctgaa agccatgaga9120cagagagaca cacaagccaa gaaacaagca tcaccgaggg agcaggacga ggagggaagg9180ccatgcagac ggcatggggc tggaggggct gttaggtgaa cagatgcaga caggtatgga9240aggccaggca ggaagcaagt gtagggccag gaagcataag tgggtaactc agaaaagctg9300tggccactga cactggggct gcggccaact gacgtctgct ctgctcttgc atcttacatc9360ctttgttttg gagttccctg catcttacat cctttgtttt ggagctcccc actgggtatg9420ggagtctcag aacccacagg gattaaggag acaagttttc tctccaactt acaagggatc9480tcacttaccc atcatacttc tttttctggg gtccgccaat atggggcctc cctacagaac9540gcttttgatg tgctgggctt cacttcagag gagaaaaact ccatgtataa gctgacaggc9600gccatcatgc actttggaaa catgaagttc aagctgaagc agcgggagga gcaggcggag9660
ccagacggca ctgaaggtgg gaggcaggat tcttggggca gctgtaagtc atgaggcagt9720ctgctcagca gtatctctct tctcttttct tttttttttt ttttttgaga tggagtcttg9780ctctgttgcc caggctggag cgcagtggca cgatcttggc tcactgccac ctccacatcc9840tgggttcaag tgattctcct gcctcagcct cccgagtagc tggaattaca ggcatgcacc9900accatgcctg gctaattttt gtatttttag tagagatggg gtttcatcat gttggccagg9960ttggtctcaa actcctgacc tcaagtgatc cgcctgcctt ggcctcccaa agtgctggga10020ttacaggcat gaaccaccac acctggccag cagtcatctc tttaccaact ttgctacttg10080ccttttcctt ccagaggctg acaagtctgc ctacctcatg gggctgaact cagccgacct10140gctcaagggg ctgtgccacc ctcgggtgaa agtgggcaat gagtacgtca ccaaggggca10200gaatgtccag caggtgggtc catcttcaga tgataatggg tgggcagggt agggagactg10260gcatggtggg atgagagttt tcaagttcac tcttcccaac aaccctgctc aatatgggtc10320tctcctccac cttgcaggtg atatatgcca ctggggcact ggccaaggca gtgtatgaga10380ggatgttcaa ctggatggtg acgcgcatca atgccaccct ggagaccaag cagccacgcc10440agtacttcat aggagtcctg gacatcgctg gcttcgagat cttcgatgtg agttgggacc10500cctgggagtg ggagaacaat cactcactcg ctcccacatt caacagctat ttgcttagag10560ccagctgtgg accagacatg ggaaggcagt ggggactgtg tggtgacaga ggcagtcatt10620ttctctgtct tcaggggaag ccctccttca ctgccttgac atggagggga ccagccacgc10680cctgctgggc tcaggcacag tggacgggca cagccccaat ggccactcac acccactttc10740tgactgctcc cacccctcat gccccctgca gttcaacagc tttgagcagc tctgcatcaa10800cttcaccaac gagaagctgc agcagttctt caaccaccac atgtttgtgc tggagcagga10860ggagtacaag aaggagggca tcgagtggac attcattgac tttggcatgg acctgcaggc10920ctgcattgac ctcatcgaga aggtgcctct ttggccttac cacctgaatt ctccctgcac10980acccaacaag aacaccatag acaaaatagc agcccctctc ccttctgggg aatataaaaa11040tagaaggggc tgaaggatcc gagcccttgg ttccagagcc tatgttgtgc tgagcaccca11100ggacagggtg gcaccaggga cagctgattt cccaggggct tgaaagtgga cacatggagg11160atgggcacct gcatgatgac ctcccacacc tgcatgttta ttgggcctgg tttatgcatc11220caaggatcag gaagtgtgag ggtggtgtag gggatcataa gagtgcacct attttcaacc11280ctagcatctc aggcatctgg gtcgtggagt ggtgtgtaca gcatcgatag aatccatatt11340cccagacttt cacaaagtcc ttctgtcatc agacaaaatn ctccaccttg aaccggttcc11400agtcagtaga taactgtact cagagctgag cctactacct taacacccaa catggcacct11460ccacgagcaa gtatattgac catagagcag aatccatgtc cacctgtgtg aaggacactc11520agtgatgctc tctcctgctt cctcagccca tgggcatcat gtccatcctg gaagaggagt11580gcatgttccc caaggccacc gacatgacct tcaaggccaa gctgtttgac aaccacctgg11640gcaaatccgc caacttccag aagccacgca atatcaaggg gaagcctgaa gcccacttct11700
ccctgatcca ctatgccggc atcgtggact acaacatcat tggctggctg cagaagaaca11760aggatcctct caatgagact gtcgtgggct tgtatcagaa gtcttccctc aagctgctca11820gcaccctgtt tgccaactat gctggggctg atgcgcgtaa gtagggactg aggctcccgg11880tacagaggag cagggattct gccaaggttc tgagccaggt caattgctac accccaccac11940ttcaatgtca ggttgtaccc caaggtttac agactcagtg ggatggaact gggtgaagaa12000actgaggcag ccacattgaa ggcctaccag gggcaaatgc cagcaaggat gtaaagaggg12060gctgtgatct tactcacacc ctacctcccc acactgatgc ttcttttgtt gactctcctt12120cctgcagcta ttgagaaggg caaaggcaag gccaagaaag gctcgtcctt tcagactgtg12180tcagctctgc acagggtgag tgggacacag ccccagccaa cttggctccc catctgccca12240accccaccca gccccaccct tccctgcctt gttcatcccc tactcctccc gttccctgtc12300tccttggtgc attcgggacc attttcactc tgtcttctct tcccgtcatc tcctggcctc12360ttcacttatt tacttcccat ctcccttctc tcctctttcc cttctgtctc ccaccctctc12420tccttatccc tgtctccccc agggcccctt catctctgtg acttctcgaa ttctctccat12480ctctcttttc cttccttctt ctcctctctt cttcctgcat ctctttctgg cattttcttt12540acttttctct attgcatttt tggccacagg aaaatctgaa caagctgatg accaacttgc12600gctccaccca tccccacttt gtacgttgta tcatccctaa tgagacaaag tctccaggtg12660aggccacaaa ctagggccaa cccactgctg ggcatacacc gccctgggaa caggacctcc12720taggacatct ccctacctac caccacagtg gtttccaaac cacattcttc tcctcccatc12780ccgcatgagg cctcccaggg tacctccctc tcagcgctac cttgcacttg cagtgtgtaa12840tgagggtgat gtgtaaggca ctctgatgga cattacctca tcagtggccc tacaaccccc12900tggatagctg gttgtccaag acagaatctt agttcaactt taaatttacc tgcagaacca12960cttaagcccc caatgagaca tattcaaatt gttaatccat ttttggctaa ttaggagaca13020gaggctcagg gacctgggtt caagacctgg ctctgttctt gatcagctta gtgaacttgg13080cctgtcccgt aacccctctg ggcttaattt actcatctag aacattggat atatctgttc13140tggctaccac ctatgataat aggtgtgaat catataaaaa aggaatgtga aagcctttta13200gttaaaaatg tggctagaag aaaatgaaac aaatgattat tactaactga cttgctaaga13260ttacaagcta atcagtgaca aagccaggat cagaacccag aacttcagtc cagtgttctc13320acagactcct cctacttcct tcttgccaca ggcgtgatgg acaaccccct ggtcatgcac13380cagctgcgct gcaatggtgt gctggagggc atccgcatct gcaggaaagg cttccccaac13440cgcatcctct acggggactt ccggcagagg tgggtatgag ggtgcaccag agctcataga13500acagggggag ccaggctgcc ctgatgggaa tgggatctgc aggtgaccct agaattctat13560gggcagagca gatcactgca gagcatgggt gactctggac acttccctcc tcaggtatcg13620catcctgaac ccagcggcca tccctgaggg acagttcatt gatagcagga agggggcaga13680gaagctgctc agctccctgg acattgatca caaccagtac aagtttggcc acaccaaggt13740gaggaaagga gactaattaa ttaaaggaag acatctcttt tccattgact cctctgatgc13800
ttttcctgtt gtaatcatct tagcaaaatc tcttacctgt atgctacccc tcccagtgga13860acatctagca ccactcccct catcccagct ccagctgcca ttgacctcct ccctgcaatc13920cttttctagg ctgttaccct tcctaaggta atccccacca tctctttccc tcgtacccct13980ccctagtcat ggccaacaca caccttgcct gcaggtgttc ttcaaggccg ggctgctggg14040gctgctggag gaaatgaggg acgagaggct gagccgcatc atcacgcgta tccaggccca14100gtcccgaggt gtgctcgcca gaatggagta caaaaagctg ctggaacgta ggtgagagat14160ctcaagagga ggtttcccgc ttctctgagg cccaggctgg ttcaggggca gtgtcaggaa14220aaaaagctca gcagatcttc aaacacagag acctgcagga ggggctcata tgaacacact14280gcagtcacag ggtcagaggc ctcaggaagg gtgggaggga tgaaggaaat gggatattcc14340caaggtttca ggacctcagg taggaaggag gcagaggctc agcactcctt tcaatgggcc14400cctgcagaga ctccctgctg gtaatccagt ggaacattcg ggccttcatg ggggtcaaga14460attggccctg gatgaagctc tacttcaaga tcaagccgct gctgaagagt gcagaaagag14520agaaggagat ggcctccatg aaggaggagt tcacacgcct caaagaggcg ctagagaagt14580ccgaggctcg ccgcaaggag ctggaggaga agatggtgtc cctgctgcag gagaagaatg14640acctgcagct ccaagtgcag gcggtgaggc tcctgggcta ctgttggctc ttccaccctg14700ctctgccttc acttcccaca accctgcacc tccctgcaca ggggctcact gtcttgttcc14760ttcagtcaga ggactctggg atcaacactt ctaaagacct ccaaagaggt ccctcaggag14820gaggaaaggg cagagggaaa agagctgact tttaaaagca caggctttct acttgggttc14880aacctagata cacagcttaa ttattttgtg accttgggca gaccatgcat catctttgag14940cctcaatttc ctctagacag ggaataaagc tgtccatttc attaagccat catacataag15000tgcttggcat cagcaaatgc aattcccacc cttcgatgga ggagaccaga ggaagaggtc15060cagatgaaga tttctggttc ctttcctctc tgctcccctc cccagtgttc ccaagttata15120ctatcctgaa actcttcccc tccccatact tctgaagctc ttgccaagtg gggatatcct15180agagttaccc tcctatttga gtgatgtgcc tctccttccc tctacctgca agaatgagga15240ccttaccccc tgaacagcct cccctctgtt cctcaccttc aggaacaaga caacctggca15300gatgctgagg agcgctgtga tcagctgatc aaaaacaaga ttcagctgga ggctaaggtg15360aaggagatga acgagaggct ggaggatgag gaggagatga atgctgagct cactgccaag15420aagcgcaagt tggaagatga gtgctcagag ctcaaaaggg acatcgatga tctggagctg15480acactggcca aagtggagaa ggagaaacac gcaacagaga acaaggtaag ggcagctccc15540tttggctcca gcccgggtct catcaggact ctcagaccat actgaccttg acccaggcta15600gccactcgca tccagagagc agcatggacc ttgatcatgg agctccccac agatggcacc15660aagctggtga cctttgaccc taaaggagat gggattcttg gtcggcaggt gaaaaacctg15720acagaggaga tggctgggct ggatgagatc attgccaagc tgaccaagga gaagaaagct15780ctgcaagagg cccaccaaca ggctctggat gaccttcagg ccgaggagga caaggtcaac15840
accctgacta aggccaaagt caagctggag cagcaagtgg atgatgtgag tagattgaga15900gttgtggggc ctagatatgc catgtctatc tgtgcccaga gctctgtgtg tgtgtgtgtg15960tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgtgtgtg tttgtgttta tgtttagagg ggggtagggt16020tagaggatgt taacttttct gatatctttc tagaaaggag ctggggaatg aaaagtcaga16080ggtggtgatc aattctgaat tatgtatcta atctcactgg tatgatcaat aatagagatg16140agttttctta tttaatttaa gtgcaatccc atatatctct gcctttgaca caagatttag16200agggtcatct cataagaaca tgataaattt ctttggaaat tttgtgaggc tccccaagta16260gaatttttga aattccaata tttaaggcag aatctgatca ttgttccctc tgatgcacat16320atgtctgttg actcacttat cactctgtat tttaattatt taagcttcta tctcagccat16380aagactacaa gcttccttta gataggaact tagatctatt caatttgggg actgcagtgc16440ttagcaagag cctgatgccc agtaggtgtt tataggatgc tgaaagaatg aatacgcgcg16500gccagccggt ggctcacacc tgtaatccca gcactttggg aggccaaggc gggtggatca16560cgaggtcaag agatcgagac catcctggcc aatatggtga aaccccatct ctactaaaaa16620tacaaaaatt agctggatgt ggtggcgtgc gcctgtagtc ccagctactc aggaggctga16680ggcagaataa tcccttgaac cagggaggcg gaggttgcag tgagccgaga tcgcgccact16740gcactccagc ctggcgacag agtgagactc cataaaaaaa aaaaaaaaaa aaaggaggaa16800ggaaggaagg aaggagagaa agaaaggaga gaaagaaaga aagaaagaaa gggaaagaaa16860gaaagaatac ggctttgggg tttcatccca cagtcattta ttcctttatc tataaaatat16920tgattcagca tcccctatat ctaggcaatc tcacagtccc ctaataacat ttggcccact16980ctggggaagg tttcccaagt cctgaacaca aagatttacc aagtcctgag gtaactgaac17040aacaaaatca ccaagtcagg atgctttgcc tcactgggcc tggctccttc tctctaccag17100ctggaaggat ccctggagca agagaagaag gtgcgcatgg acctggagcg agcgaagcgg17160aagctggagg gcgacctgaa gctgacccag gagagcatca tggacctgga gaatgacaag17220cagcagctgg atgagcggct gaaaaagtac tgtgtcccct ccctgctgcc cttcctcctc17280cccagcccat aacagtacaa gcagacccaa gacagccatc ctctgaggca acaacctcac17340gcagcctcca caagtggagg cgcaaaccat gggaaaaggc ctcccaggca agggctttcc17400tcccctagtc ccagatatca gggttagtta gatggtcctc cctggcaaaa agtccattgt17460atcccatgag acctttcttc ttgttaggca ctcagtggga atgaaaataa cagccttccc17520ccttcataca catctctctt tggagaccag ttccttgaca tggaggaagg ctccacatga17580gagcctctta ggaaagtccc tttgtggctt ttcacagaga gcccacaggg caccaagaaa17640tgccctcaca ttaaagaagt caggggatca gggccatttc tttgttttgc ttaacttgtg17700gttccaattc ttagtgtaag ttcttccaaa atgtatagac tttccagact tggtaaacag17760tgagcttgca gaacatattt tgataattga aggtcttatg gtgtttcagg ctcaggactt17820tgaaaggctt tgagaatcat cataatctac atcctcatca agtttgtgtt tgcacaggaa17880tcttcatacc ttcccaggca cagaatgtgt tgaataaatg aataaataca cgatcctatt17940
tgattctcaa aacacctttt aaggatggta tctttaattt cactttacca aagaggaaaa18000taagtttcag aaaggttagc tgagttaccc aaagcaatag tgacaaaatt aaagaccatc18060agagctaaaa aggacctttg aaacaatcta gtccgacccc ctcattttac attatgagaa18120aacaaggacc aaagatggga atgtcctgta gagcccaggc cccatcaccc tgtctacagc18180actcctccca ttacattctt gttggatttc aatctaccgc aggtgttaca cttccaggga18240tcctacatca cccccagaag ctgtttttct aatgaaatcc tactctttac ctgtatcatt18300accattttca accactggtg gaccctcctg aggccccacg agtctccctt acctcaccat18360ccctccttcc ccacagaaaa gactttgagc tgaatgctct caacgcaagg attgaggatg18420aacaggccct cggcagccag ctgcagaaga agctcaagga gcttcaggtg aggtctggac18480acccacgcgg gatgctgagt ccctgggctg gttctgtttc ccctgccccc tcctctaggg18540tgtcctgttc acagcattac aggaactgat tatgtgtcca tggaggcagg cacgcagcta18600tcacagtgtg cccatggata catccaaaag gggtcaggtg atccacagag accctgaaaa18660ggtgcacagg cctggagggc agaattcctg gcttcctgtc tcagctctgc cttagttggg18720tgacctctgg gagcccactc cagatctctg ggtctccatg ccctcccctg ttacatggag18780gtttttaaga gtccttcgac tctgatggca tgactttcct ccttactcta gagcagaagc18840tgtgttaggt ctttagttgt ctggtcagac aaatacggct ctctcatttt caacttttgt18900tattttttta tgactaaact gcttaaaata tccccagaac acaggtctct ttgtccatct18960ttaagagcaa gtttcaacca ctttccttcc aataaagagc catgtagact gtcaggccct19020cgcctaaagg aaggctcttc aaactatctt ccccaaatcc tttaattccc acctctccag19080tggaagagct aaactgactt gctgttccag agaagccgag agccttttag agccgggggg19140attccagtgg aggggtccag gcggtgggtc tgagcccttt gtgtctgacc aggcacgcat19200cgaggagctg gaggaggagc tggagtccga gcgcaccgcc agggctaagg tggagaagct19260gcgctcagac ctgtctcggg agctggagga gatcagcgag cggctggaag aggccggcgg19320ggccacgtcc gtgcagatcg agatgaacaa gaagcgcgag gccgagttcc agaagatgcg19380gcgggacctg gaggaggcca cgctgcagca cgaggccact gccgcggccc tgcgcaagaa19440gcacgccgac agcgtggccg agctgggcga gcagatcgac aacctgcagc gggtgaagca19500gaagctggag aaggagaaga gcgagttcaa gctggagctg gatgacgtca cctccaacat19560ggagcagatc atcaaggcca aggcaggctc tgctcggcct cccctcctcc aacttcctcc19620tcccacctcc cctttctgtc catgtagtgt ctcttccttc atggttcatt ttcccacttc19680ccttcctctg cctggttctc agatcccctc cttcttttca caccttccct cttcttttct19740ccttcagttg cacctcttac accccttcat tccccccgcc cccaacatcc atcatataac19800tctccttccc ttctcaggct aacctggaga agatgtgccg gaccttggaa gaccagatga19860atgagcaccg gagcaaggcg gaggagaccc agcgttctgt caacgacctc accagccagc19920gggccaagtt gcaaaccgag aatggtgagc ctagagcagg ggctccatgg ttcccaccac19980
agtctcccca acctcctgag ccactccagc ctcgggcaca agccaataca cgcacacaca20040gacacagagt ctctccagaa aatggggcct gagggctaga ggaggaggtg gggatagaga20100ggagtgctga tctagaatgg tgcttcccca ggtgagctgt cccggcagct ggatgagaag20160gaggcactga tctcccagct gacccgaggc aagctcacct acacccagca gctggaggac20220ctcaagaggc agctggagga ggaggttaag gtaagggcta gactcgggcc acctggccca20280agcaaggagc acactgacta gccttgcatc aaatcacttc ccttcccagc aataaggctg20340gctgtggacc aacagttctc caagaattct aaaaagaaat cacagcccaa accctgccac20400atgccatcta ctccccaggc tgaggccctc tgcttctgct gcatccctgg acgggaggca20460gggtgtgaga aggaggagag aaaatgaact agggaggcac gagatggcct tgcccgggca20520cggctagggg atgtagggac tgcacaaatg ggtcctggat tgctagggcc accctgaaaa20580ctggagaaag aaattcaact ggagcctatt cctagcactt tgctggactc atgaaaaagg20640agaaagaaca tgatttttaa aaaactccag ggttcatact aacctgcctc ttatagctca20700gtgatcttag gttagggaag tcccctaacc tttctgagcc tgtttccctc tccccagcca20760ggtaaaatgg cggtgatgat gaccatgtct ggtgtgggga ggagctcagg gccaatggcc20820atgaagcttt tcttaaatag ttcactgctg tattggcatt ctttgttatc agcaaacagt20880aaaccatgac aggtccactg ggggtttgga catagatgag gccaagggat gatgttgaga20940ttggggtgag gagaagggca agggtggggt tgctttatgg agaaagctga acccacctcc21000tggtgcccac ccctccccag gcgaagaacg ccctggccca cgcactgcag tcggcccggc21060atgactgcga cctgctgcgg gagcagtacg aggaggagac ggaggccaag gccgagctgc21120agcgcgtcct ttccaaggcc aactcggagg tggcccagtg gaggaccaag tatgagacgg21180acgccattca gcggactgag gagctcgagg aggccaagtg agttctgagc agcctgactt21240ctggctgagg cccctttgca ggcaggactc agcccagccc cagcctcagc agatcccaca21300caggcgatgc ttagctagtg tttgacaaca caggaggact ctgccccggc cccacctcct21360tctcctctca gggaagcttt ttgctcgaat tatgtttctg atccgaatat aagacgaaca21420aaaggtttgt ctgagggcag agtgcttccg tctggggcag ggcactgtgg cagggaaagg21480cagtggggag ggctgcagaa gcccatacct cctcaatgtc catagcgcag aggctgggcc21540agggtcagag ggtgcctggg tctccacgcc ctgctgggat cctctgcctg atgttctcgg21600cccctgggac ctgtcctcag gcttctccag ctacacttct gaggtttcaa ggattgtctt21660tgagaaggtt catgttgttt acctcttgtc cccatccaca ccctccatcc tccccaccct21720ctgccacctc ccctgggcag gaagaagctg gcccagcggc tgcaggaagc tgaggaggcc21780gtggaggctg ttaatgccaa gtgctcctcg ctggagaaga ccaagcaccg gctacagaat21840gagatcgagg acttgatggt ggacgtagag cgctccaatg ctgctgctgc agccctggac21900aagaagcaga ggaacttcga caaggtgggc cctgggtggg ggccgcagcc agcatgcagg21960gcaagggggc atgaggggtt cagtgagagg ccagagccat cctccttgga ggtgggggag22020gagggctgag cccaggcagg tcctgagaca gaccctggac atggggctga ggctgggggg22080
ctgaagagtg agccttgtcc ccgggcagat cctggccgag tggaagcaga agtatgagga22140gtcgcagtcg gagctggagt cctcgcagaa ggaggctcgc tccctcagca cagagctctt22200caaactcaag aacgcctatg aggagtccct ggaacatctg gagaccttca agcgggagaa22260caaaaacctg cagggtgtgc tgggggccca agaggctggg gaggggctgc actggcagtg22320ttcccatatg gtgccaccca agggctccaa gaggcgtctg ggcaaagagg cgtgtccctc22380caactccact ggacctcagc agccctcaac cgagttaccg tgttccccac acagaggaga22440tctccgactt gactgagcag ttgggttcca gcggaaagac tatccatgag ctggagaagg22500tccgaaagca gctggaggcc gagaagatgg agctgcagtc agccctggag gaggccgagg22560tgtgtgtgtg tgcagggcac ggggtgcagg gagctgagct ccaggatttt ggctccctgt22620tctcatcccc cgctttgtcg ttttgttcac tgtcccatcc ccagagccta ggacagagcc22680tggcacatag taggcattca gtgaagattt gtggagtgaa tgaatgacca gtcactgaac22740tctcttcaca taggcatttt acccattgca tcttagctga gcttcccatt tccacatacc22800tcccggttcc cacctctgcc tccctctgtt ttcttttata ctctatacct gattgcctct22860gtttccttgg caacactttt ttcttcattt tcctccttat cttcatagct ggctctcccc22920tgtgagggcc tgaatcactt tctcttaggc ttatttttat tttctcttag attctctttt22980cctccacctt ctgcttcttt gaaccactta caccactctt gaagtcactt cgtatccatg23040attagtgagc aggcccccac cctgccctgt gccctgactg tctgcctgca tcccctcccc23100caaccccttc ccaggcctcc ctggagcacg aggagggcaa gatcctccgg gcccagctgg23160agttcaacca gatcaaggca gagatcgagc ggaagctggc agagaaggac gaggagatgg23220aacaggccaa gcgcaaccac ctgcgggtgg tggactcgct gcagacctcc ctggacgcag23280agacacgcag ccgcaacgag gccctgaggg tgaagaagaa gatggaagga gacctcaatg23340agatggagat ccagctcagc cacgccaacc gcatggccgc cgaggcccag aagcaagtca23400agagcctcca gagcttgttg aaggtactca cccagagggg actggcctcc acgtggcctg23460gcgaagcagt agtgtcttga tacaggcacc agattcctcc tgcccctagg ttactgcagg23520gacctctgac aggtgccttt agtgaaggga accgaggctg gctccctgct catgcccact23580ctcctgatcc tcaggacacc cagattcagc tggacgatgc agtccgtgcc aacgacgacc23640tgaaggagaa catcgccatc gtggagcggc gcaacaacct gctgcaggct gagctggagg23700agttgcgtgc cgtggtggag cagacagagc ggtcccggaa gctggcggag caggagctga23760ttgagactag tgagcgggtg cagctgctgc attcccaggt gagcagctcc cctgctcatt23820cctgaaggga gcacaggctg gggctcagca agcaaggctt gagagctatg catagatgct23880caatgctttt cctgctctgc ccaaccctcc cccaacccag aacaccagcc tcatcaacca23940gaagaagaag atggatgctg acctgtccca gctccagact gaagtggagg aggcagtgca24000ggagtgcagg aatgctgagg agaaggccaa gaaggccatc acggatgtaa gtcccccact24060ccaccgaccc gatccagacc agtgtctctc cgtgggctgg gcagcaagtg tgtgaggact24120
tgaccagacc atgtgccacc tctctcctgc acacaggccg ccatgatggc agaggagctg24180aagaaggagc aggacaccag cgcccacctg gagcgcatga agaagaacat ggaacagacc24240attaaggacc tgcagcaccg gctggacgaa gccgagcaga tcgccctcaa gggcggcaag24300aagcagctgc agaagctgga agcgcgggtg cgggagctgg agaatgagct ggaggccgag24360cagaagcgca acgcagagtc ggtgaagggc atgaggaaga gcgagcggcg catcaaggag24420ctcacctacc aggtgcgacg ggcggtgact ccaggcagag ccctggcacc atagccacag24480tgacaaccag ctgaggagaa tgaagagttt gctcttagcc tcttccaggg cgaggatggg24540aatgcagccc ccgtttaaac tttgcctagc cctgccccac tctgaatgtc ccctagctca24600gaggtcagtc tctgagcctc ctggcctggg agctccatct caacacccac tcttagccca24660tgcgccaggg gacacacaca gaattccaga caaagctcac ccagtacagc tcaccagaaa24720gcaaatatgt agccagggtc acccccaaaa gacaccaaaa acacacccat cccattcaaa24780caagcataaa aactttttca ttgcccaggg cagtgtggac tctagctttc tgaggtgttt24840tctagaatca gactctgaat tagaatttgt ttcttttcca atccaggatg tcactatctc24900tctaagcaca ctttgtcctt aacttagatt aagtcagtgt tttcctggcc tgcattgcag24960cccaggaaat tccatcacac tcatagcccc aaagtcactc ccagcatgtg ccgaggtcca25020gagcagggga cttcatcccg catggggtcc ccggaccctg aaaaacctgc tccctggagc25080actgcacaca cacaattttg tgcataattt caggagtccc actagttctt tggactcttt25140cctggtacag atcatttaaa atatttacac atatttggta agaaattata aggagaattc25200aagtgtttag tgaggatcag aaagtagaat tgggtcagga tatcagatga agcagggcag25260ggcggagggg atgctacctt ctatgactgt gccatcttca ccccctgcct accctctggc25320ccccagacgg aggaggacag gaaaaacctg ctgcggctgc aggacctggt agacaagctg25380cagctaaagg tcaaggccta caagcgccag gccgaggagg cggtgagtga ccctgctggg25440gactaggccc aggggaggca taggagagct cgtcccccaa gccaggagtc tgagaaccca25500ggccccctct cacctcatgc tcccacctcc cgcaggagga gcaagccaac accaacctgt25560ccaagttccg caaggtgcag cacgagctgg atgaggcaga ggagcgggcg gacatcgccg25620agtcccaggt caacaagctg cgggccaaga gccgtgacat tggcacgaag gtgggtccct25680cttttgggct ttgctagtca cccccacagc aggcataccc agacagagca ccctcaaacc25740cgggatgctt ccttttcatt tattccacac acttgagcca catggcccca gaggccaagg25800taatgcagtt ctctgtgatt tcaaggattc ttccagctct aacttttttt tttttttttt25860ttgagacggt gtctcactct gccgcccagg ctggagtgca gtggcacaat ctcagctcac25920tgcaacctct gcctcctggg ttctcctgcc tcagcctccc aagtagctgg gattataggc25980atgtgctacc atgtctagct aatttttata ttttagtaga gatgcggttt caccatgttg26040gccaggctgg tcttgaactc ctgaccttgt gatccactcg cctcagcctc ccaaagtacg26100ggattacagg cgtggagcac cactcccagc tcagctctaa gtttcagtgg ttctgggaat26160ttcagcgtta gggaggggtg ccacctagaa gaccctaatt tatatacaac cagtatatcc26220
cagtttcccc ccaactgcta gtttccagtt cccttccacc taattttgtc ctgcaatcat26280tgtaactaaa acctaaaatg gacatcccag agaacccggg cctggctttg ttctcgccca26340ggcaacttcc ctctgaccaa ccccagaacc ctaccctcca gaacttgccc cccgaccatc26400gatccctgga aacacatgtg ctgctgccac aggggcttcc acctgcccac aaagcaggcc26460ccccaccatc agacccctct cacctttgtt cccatgccct gtccctgccc aataccatct26520ctccaaggac tgattggact ttgtttcctt tcaaaagggc ttgaatgagg agtagctttg26580ccacatcttg atctgctcag ccctggaggt gccagcaaag ccccatgctg gagcctgtgt26640aacagctcct tgggaggaag cagaataaag caattttcct tgaagccgag atcctgactc26700cagactcttc ttcactgccc tgaggacccg gggatggggt ctggcatagg ggaggtggaa26760atgcacggga gtgggggcaa attcaaaggc ctggcctagg aggccttcgt ggagcagcac26820tgaaaacccc tttcacttcc cccaaaccag ccaaatgcag tagaggcgac acctctcctc26880ccagccttct ccctggtcca gccaggattt aaaggagatt tagggagacc cctaaagttc26940acctagagca ccctgagccc atctactgtg gacctgcacc ccagcttccg tcaaccctgc27000cccacccacc accatggata ctgcccaggg ctgggcaaag ggcagcggtt cggggtgtgg27060gtgctggcca gtgccctttc tgagcccgga gaagttgtga accactgggc caggtgaggc27120aatggctgcc taagtgccag tcccaggcga gtctctgaga gtacacaagg attcacagct27180gtagcctgca tcccctttta aatagagcca ccaccctctc cagccaccgc cagaagccag27240cataccccct gcccaccaca ggtggagaaa cacaccctca gcccacctgc cgtcctcctc27300agctcctcct ggtgccgagc ccccttggcc cagggtgctc ccttcttccc actcatttct27360tcccattgta attcccatta ccaagccctt tgtcctctgg gcttgtggga agatggggtt27420ctcctggccc atttatggca agccattctt gaggggaggc agacagatga ggggctgggg27480aaggttatgt gtgaacagga ctctggggag agggagggaa gggatggctc ccgagagggc27540caggaggtgg aggaaagagt aagtctcctc caactaaaca agttcagccc ctttggagtt27600cctgccacag ctggattgct taggcaggcc tggtactgtg ggccacagag gtcaggggct27660tgaaaggcac tggggctgtc ggaccccact gggaacctgg gaaggagtgg ttcaaccctg27720gactggatct cccccaaccc accaaccata cccactcgga gcccactcct gctctctacc27780cagctctgag ctctgaggac tgcggcagca gagccaaggg cctaagccgg agaaggagaa27840acactactgg acaatagcag gtgacagcag aggagaaaaa gggggtaggg aggggacaag27900gaaagaacct gagggggtgg cagtggacaa agagattgag caaccacagg acaaggtaac27960cagaggaaac agagacaagg aaaaaagatg caggaaatga ggaggcccca gaaagatccg28020cagcgccgcc acctttctcc tcatagccac ctccattctc cttccctagg ccaacccaga28080cagagctcct caaaacaggg atgcttcctt ttcatttatc cagctcaatt gaaccacaca28140gccccagagg ccaaggtaat tcagtatctc tgtgatttct aggattcttt cagtcctttt28200tgtttttgtt tttgtttttg tgacggagtc tcactctgct gcccaggctg gagtgcagtg28260
gcacaacctc ggcttgggcc gagatcccta gggccattcc tctggctagg aacagacttg28320gacagcaatg caagagataa ctagaaacaa aggagagaac ccttgaaaag ggagctatgc28380agagagaccc agggcaccta agcaaccaga gcaagagaga ccgcaagaga tacagatc 28438<210>2<211>20662<212>DNA<213>cMYBPC基因<220>
<221>misc_feature<222>(7506)..(7516)<223>n is a，c，g，or t<400>2catggtgagt agcctggtgt gacgtctctc aggatgcctg agccggggaa gaagccaggt60agctttagga ctggggttgg gtctaagtgt gggagcatgg gggtgtctac aattggggag120caggctagga ggagttcttg agggggttga cgaggacgtg gcctctgagc cccaggacag180gggcagccag tcctccaggg tccttttttg attctcggtt tctttttccc atccctctga240tgagaggtga aggtaaaccc aaggtcaggg acgcagagag gggacacagc caagacagga300aagcacccgg ggtcaaccca ttctgagaat gcaaagggac cccttccctg tcccattgcc360ttcaccttcc acagcaaggt tccccgcgga cagaacccac gtttagtatg gagctgagcc420aggctcacgg catgccttca gaccagtctc tacccactat gggtctcagt ctcccaacct480ggggtgccgg gggtggtggt ggcattgggt tggttcctcc tggctgtgac attatctgct540tcatgagcct gtacggtgtg gcccccatgt tgagggtgac acagcccctc ttctctgaga600gaggacagtc aggagcccct gaacccaggc caagggcagg gaaaatcaca gcccagggac660ctgggcctgg gctgtgccct tatgaaggtt gtccagggca gagatccagg tcccatcccc720cagcgccctc ccaggccagc tttatctcag ttgctgatac ccagcctgag gtccttggag780gacaaatttg gccacattcc aagtaggcag acttccccgc cccctgccaa gggcccgaaa840tggttggggg aaagggagct gggttcatca cgggtgtctc caagcaggga aagtggacac900atgcagaaaa agtcttgttg ggaggtcagg accacagccc tggctctccc gactgctagc960tgtgtgatct tggaggagcc gcttagcttc tctgagcctc agtgtcctcc tctgagaaat1020gaacagaata actgcaacta cctcagagaa ctggtagagt attacgtgag gggatgcata1080gaaagtgcta gcacagtatt tactgagagg ggctgcaggg gcggggtgca cgctccaacc1140aggggccgct gtagcctcca cctggccctt cagtctcagc ctttagcaag aagccacggt1200cagtggaagt ggccgcaggc agccctgccg tgttcgaggc cgagacagag cgggcaggag1260tgaaggtgcg ctggcagcgc ggaggcagtg acatcagcgc cagcaacaag tacggcctgg1320ccacagaggg cacacggcat acgctgacag tgcgggaagt gggccctgcc gaccagggat1380cttacgcagt cattgctggc tcctccaagg tcaagttcga cctcaaggtc atagaggcag1440gtaagatcct gatcagcctt ccctgagttt gggctgctgg gggagggcag cccagcgact1500
ctccatccat ccagggaaca ggaggtgctt tcacactttc ttgcctttgc tgtggctgtg1560ccccccgcca ggaacgccct ttcccccttt tctgcacatg acctctctga tacccccatg1620tgccatcctg gcttgttcca gccatggggt agtgggagag atgaacaaga cacaacccca1680ctctccccct gcagacctcc ctggggagat gacctgcaca gacggccggg aagccccagg1740agctgtggat gaggggagtg cagcccagtc tgaggggctg ctctaaggct ggggcagagc1800agggatggac ctggagctgt tcagggcaga tgcagaggac atgggaagtg atggcctggg1860acggggagga gaatgtgaga ggcaggctgg ctctccagct cagcatgagc tgcctctgag1920gggcccaggc agcgggagga cagccatggc agactttcct catccacagc gggctcatgg1980gtccaatgct caggagagag agggtggagg ggtctctggt tagtggctgc accacgactc2040ccatctgatc ccctccagag aaggcagagc ccatgctggc ccctgcccct gcccctgctg2100aggccactgg agcccctgga gaagccccgg ccccagccgc tgagctggga gaaagtgccc2160caagtcccaa aggtgagagg ggctgggcag ggaggggcag gatccgtggg tagggcgtgt2220ccagggcagg tctcaaaagc ctttgctggg ccaggtgcgg tggctcaggc ctataatccc2280cagtactttg ggaggccgag gtgggcggat catgaggtca ggagattgag accatcctgg2340ctaacatgat gaaaccccat ctctactaaa aatacaaaaa attagccggg cgtggtggcg2400ggcacctgcg gtcccagcta acttgggagg ctgaggcagg agaatggtgt gaacctggga2460ggcggagctt gcagtgagcc gagattgtgc ctctgcactc cagcctgggt gacagagcaa2520gactccatct caaacaaaca gaaaaagcct ttgctcacag ggtcaagctc agcagctctc2580aatggtccta cccctggagc ccccgatgac cccattggcc tcttcgtgat gcggccacag2640gatggcgagg tgaccgtggg tgagtgtgag ctgctgtgcc cagcattggg gtgggaaggg2700ggggcagcag gacactcccc aagccgggcc tgtcgccctg cctttgcagg tggcagcatc2760accttctcag cccgcgtggc cggcgccagc ctcctgaagc cgcctgtggt caagtggttc2820aagggcaaat gggtggacct gagcagcaag gtgggccagc acctgcagct gcacgacagc2880tacgaccgcg ccagcaaggt gggccagcac ctgcagctgc acgacagcta cgaccgcgcc2940agcaaggtgg gtccaccggg gtcgtggaga cacggagaga ggggacatgg agagccctag3000aaggcacaag gcacacagag ggcaccatga gacccagagg cacacacgag ctgcaagcaa3060ggggtgtggg gaatctggga ggcaggtgga ggggccaggg gcccacaggg agatcccgga3120ggcctggggg ccagggagtg catgaggctc atgggagcac tgtcggggac ctgggagact3180tggtggacat gatcacctca agggggcacc taataaggtt tggccggggg tgggggggcg3240cccagggtgg tcaggaagcc tggaggacac tgtgaagcat gggggcacca gctagtgggg3300ttgtaaagcc ccgggatggg tgagtatcag ggctaagggc tcaagggact ctcagggatt3360aaccagaaca attcctcatt atacagacac ggaaaccaaa gcttgagagg ttaagtggct3420gctccaaggt cacttagaca taggcctaga accttaagcc ttcgtttttt gtgttttgtt3480tttttccgcc ctgcccacca gaaccttaag gcttaagtcc ccttgtttgt tcactccaag3540cctctgcttt tcccaacctt ccccagtcct gggctaggca agggggcctc tagcaagaga3600
ggccaacatg ttctgctgtg cggggctgtg cattgcacaa aagcctgtat ttcaccacaa3660ccgtgtgcca gcagatggca atcatgggtt tcgagatagt cccctttctc tgtacaaaaa3720ctctgtatgg gttaactaaa gcctgagggt gcgaagatcg atgagcattt gtcactccca3780gcctccttta aatatatata tatatatata atttgagaca gggtctcgct ctgtcgctca3840ggctggagtg cagtggctca atctcggctc actgcaacct ccacctcctg ggttcaagcg3900attctcccac ctcagcctcc cgagtagctg aaactagagg tgtgcaccac catacttggc3960taattttcgt tatttttagt agagacggaa tttcaccacg ttggccaggc tggtctggag4020ctcctggtct tatgtgatcc gcccgcctca gcctcccaaa gtggggatta caggcctgag4080ccaccgcgcc cggccactcc cagtctcctt taagggtgcg gagccttgtc tcccggcccc4140tggtgtcccc tgacgccccg tccctccatg cacacaggtc tatctgttcg agctgcacat4200caccgatgcc cagcctgcct tcactggcag ctaccgctgt gaggtgtcca ccaaggacaa4260atttgaatgc tccaacttca atctcactgt ccacggtgag ggggccctgg tgtctgtcct4320gggctcgggc tccccatggg tcctggtctc ctacctcctt ttcccaacac taaggaggat4380gcctcgtccc atccagacat gagtgctggc cacgtgccca gtgctgcaca cacagggtgt4440gagagaaacc ccaaggcttg cagggtaggc gtgggggctt agggctgaat ccgggtctca4500tctgggtggg actctgtttt atcatcttgg tgtcacggct cctggcccac ggcctggcac4560tgtctgaatg tttgggcgat gggtgaaggt gagttgagag atgggtggga attggggaca4620ataaaccgtc ccacctgctg gtaccttgac cctgggaaag gctgggaagg tgagatcctg4680gggcagatgc ccagcctcat ggggtcatga atgggcaagt ctgtgaatac tcagaggccg4740cccccagggc agggcttctc aaacggcccc tctgaagccc cttcccccat ctctccaccc4800tttgaaccca gaggccatgg gcaccggaga cctggacctc ctatcagcct tccgccgcac4860gtgagtggcc atcctcaggg cctgggggag ccagtgctgg agtctgaggc ccttcagggt4920ctcgactggg ggtcagggct ggggatgatt tgcggggcgg aactgaagtc agtgggggct4980gcaggggaga gcaagcttcc caggcaggtg aggatactga gtctaacccc cacaggagcc5040tggctggagg tggtcggcgg atcaggtacc cctgccccag gccctacctg caccatccgc5100agacccccag gggtctgaga cgggtgggag cccaatctgg ctagtgtccc tttctccctc5160cccactccac tcccatcctg ctcctaatcc ctttccagtc cctcactgca gcctcactgg5220gggtccctct ccatagtgat agccatgagg acactgggat tctggacttc agctcactgc5280tgaaaaagag gtgagtcctg ggtggcagtt cctggggcat ctggtgaggc ctggctccaa5340atcccagcac tgtggtttgc cagctgtgtg accctgagca caacactgca cctctctgag5400ttggtttcct tgtctgtcga ggggatgatc ccagtgtgga aggagttaaa gggctctgca5460gacattatgt cccgtcaaca gtcatcctca cagtgtcccc cacggccact ccacacttga5520ggctgcaaaa gctccctccg taaactccgg ggacccagaa ggaacagaga gagggtcccc5580agagctgcag ggtctaccag gtcggcccaa ctgacttatg ttctctctgc cctctctctc5640
cctctccccc ggcccctcca ttatggctgc tgctgctgtg gcccagagag taagaatcgg5700ggtctgggtg tttgggggcg gcagggcgct ggtgggtgca gaggggattc ccgtcccctc5760tctgagaggc tgtggtgaga gactcagagc agggtgcggc tccccacgga caggggtgag5820tctctgtgcc ttgggcttct cctgccaccc acctatctgt cagagcttag gagggataag5880aaaaagtaat gcacacagga ggtcctgcca gagcctccgg agcagcatgg gtgccccaca5940acacagggag tgcaagtgcg gaaaataggg aggaagtaaa ggcccatggg tggggtccag6000gtctttgagg gaaggtggcc atacctctca tgtgccacct accctttctc ccacccccac6060ccctggagca gcagtttccg gaccccgagg tgagtgccca acatagcaca gcaccctcat6120cacccctaat tctgccagga gcccctccag atccccagcc cctcttcagc tcccttggcc6180cccagtcctg cctggcctgg gacccagagc agctccagct gccccaccag aagggaaggg6240gcagagggac aggggtggct acagctcctt ggtcctgggc ccaggaagcc ccgcccaggg6300ggctgcagtc ttgcccccgg ccacagccta gactgcggga cacagggact cgaagctgga6360ggcaccagca gaggaggacg tgtgggagat cctacggcag gcacccccat ctgagtacga6420gcgcatcgcc ttccagtacg gcgtcactga cctgcgcggc atgctaaaga ggctcaaggg6480catgaggcgc gatgagaaga agagcacagg ttagcccttc ctcagaggga gaggaagagg6540gcacaggcta gcccttccct acacaggaga ggagagggca taggttagcc cttccccaca6600ggggagagga gagggcacag gttagccccc cacctcgtcc acatacatgg aaagagcgga6660gtccggcttt agcacagaga ctcacaggaa acaagagccc aggttaaccc ctccttgtgt6720agaaaaagcc aagaatgccc aggttagccc cttaccacag agatagaaga gaagagcaaa6780agttaggcca ggacagccac aaggaaaagg acagagctca ggttaaccct cctcaccaag6840gaaaaatcag gctacacttt ctttctctac cctcttctga aaagaaatga agcccggtta6900accctctcca cacccaaaag aaaagggaag aggcccgcta agcctggaga gccacacaca6960ggcaaagaac agagcctggc taatctttct ctcaggcaaa caaagcagga tggcttgggt7020taactaccct cacccccagg cagatggaaa gaggagagcc caggaatagc ccttctccac7080tgaggggttg acagggcggg tgtgaccggg aaagcagggg tctcacatgc cttctcccca7140ccatgtctgg gtctagcaca gggcctggca cacacctcga gcgctctata aacaccgact7200gaatggaggg gtcagcttcc atgcaggata tgggagacaa gcccctccca aagcacacac7260acaaaacaca cacgatcatg gggacgggga gaggagctgg ttagtccctc cctgctgacc7320tcccccaggc cccttatccc tctgccctgc ctccctgttg tctcagcctc actgggtttc7380ccatcacccc atcgctaggt ggcctggccc ttaccggcac gtggcccatt taagccaggg7440atcccctgaa tgccacaact gtctctggta ctcctgaact gctgagccca gaagggcaca7500agccannnnn nnnnnntggg caacagaggt gctagtggag cgctgggaag gagtacacac7560aactcagggt gctgagagaa gagaaggcac agcgtcccag ccccagttct ctgacaagtt7620ctttctttct ggaagcccta acccatcctg agctgagcag gtggagagga ccccaaggaa7680gacagaagga caagtcagac agacagagac aaggaggtgg gttgacacat agacacagat7740
aaagaaatga agacaccatg cctgtaatcc cagcactttg ggaggctgag gcgggcgcat7800cacctgaggt caggatttca agaccagccc ggccaacatg gtaaaacccc gtctctacta7860aaaatacaaa aattagctgg gcgtggtggc acatgcctgt aatcccagct atcgggaggc7920cgaggcagga gaatcacttg aacctgggag gcagaggttg cagtgagcca agatggcggc7980cattgcatcc agcctggccc acagagcaag atttgtccga aaacaaccaa cagacacacc8040aaccaaccta aagaaataga gacacagaga agtggaagcg gggcggcaca gaggggattg8100gaggggggga cctgggcccc agccacagcc acagtagctt ggcctggggg agcagggtgc8160gggcggtggg gtggccgggg ctgaggggtg gtgctcagcc tttcagaaga agctggagcc8220ggcctaccag gtgagcaaag gccacaagat ccggctgacc gtggaactgg ctgaccatga8280cgctgaggtc aaatggctca agaatggcca ggagatccag atgagcggca ggtgcagcct8340ggggtgggga gggggctcgg gtggaggtgg ggacccccat agccttgcct cctgcccctc8400tccacatgcg tatctctgac tcggtgtggc tctcagcccc atctctctgg gcctaatttc8460ccatcctttt gctcctgccg gtccctctct ctctctcctt ttgtctcggg gctcacttcc8520tcccgtcggg aacacttcaa cggccccttc tgttctacag caagtaagtt cccctctgga8580tggcttgggg tggggggcac agggattatc acggggcgca ctgggcccgg aggggtgtcc8640gcagctttcc tgccacttcc ctgcggcccc cacccaggta catctttgag tccatcggtg8700ccaagcgtac cctgaccatc agccagtgct cattggcgga cgacgcagcc taccagtgcg8760tggtgggtgg cgagaagtgt agcacggagc tctttgtgaa aggtgggcct gggacctgag8820gatgtgggaa cctggggagg agatggcctc aggggagcca accctcatgc tcaccctgcc8880tggacagagc cccctgtgct catcacgcgc cccttggagg accagctggt gatggtgggg8940cagcgggtgg agtttgagtg tgaagtatcg gaggaggggg cgcaagtcaa atggtgagtt9000ccagaagcac ggggcatggg tgttgggggc atctgcccag aagaggccac agcacttgcc9060acccacccac ccggctaggc tgaaggacgg ggtggagctg acccgggagg agaccttcaa9120ataccggttc aagaaggacg ggcagagaca ccacctgatc atcaacgagg ccatgctgga9180ggacgcgggg cactatgcac tgtgcactag cgggggccag gcgctggctg agctcattgt9240gcagggtgag cctggctggg ggggcacatg aggctttagg gcttggaccc ctcagccccc9300accccaccta gccctgtagg ggagcaggca aacctgggct caaggcctct gtgaccttgg9360gcctttgaca gcctaaacct catccttctc atctctaaaa tgacgatgct gaggtgaccg9420ctccagaggg tactgagagg gtcatacggg cctggtgagc atcaccaccc ctcagacact9480tgaggttcct tatgtgcact gcaccatcac aggcaaacat ggcacacaca ggcacacgtg9540ttttcacatg cccacatgca cccagacacg tgcgcaccag cgcccatggg cccacacgcc9600ctccacaggg attcacgcca cacccacaca ccctcccgag ctcaatggct ctgccctgcc9660ctgcagaaaa gaagctggag gtgtaccaga gcatcgcaga cctgatggtg ggcgcaaagg9720accaggcggt gttcaaatgt gaggtctcag atgagaatgt tcggggtgtg tggctgaaga9780
atgggaagga gctggtgccc gacagccgca taaaggtgtc ccacatcggg cggtgagtgt9840gcagggcagg tggatgggac aggtggagac tgagatggag acagagagag acacagggag9900aaacagagag agagagataa agacaggtgg acagagaggc agatgcacag agacaggaca9960gagactgaga cagagaccca cagagaggga gaaacagaca gacccaaaaa gacaaagaga10020cagaaagaca gaaatagttc tatagagaca gaaagatatg cacagggagg cacacacata10080ggagagttcg tcagagacag agaagaacag agggacagag acaaagaggc agcaggggag10140agacacggac ggggtcgaga gctccccagc accctccccc agcttgtgac cagggcaggg10200caggaggcca ccaaggaggc cggctctggc cagaggccct cactgcctct cccgccctct10260tgctcatccc tggagcaact gggctggcct gctgggccca agttcacaga gattaatgag10320acccagcccc tgcccagtct ccaagggccc agccaaggag atgctttgat gtagaaatca10380cttttacgct gcctacctct gaaggcacat taaaaagctg gaaaattaga taatatagaa10440aaaaaaaggc atttttaaaa atcagaatac caacaagcca ggacaaggtg agggcctcct10500gggaccctgg ctggggtatc tggcaaggcc aggggtgtgt ggcccagtgg ggtcccctga10560gccactgctc ccctgcaggg tccacaaact gaccattgac gacgtcacac ctgccgacga10620ggctgactac agctttgtgc ccgagggctt cgcctgcaac ctgtcagcca agctccactt10680catgggtgag cctgctccag ggtagggtgg gtcggggcag tggggccagg agcccctgtc10740actgggccct gcctttgccc ccgtgctact tgctcttcct tctcttgcag aggtcaagat10800tgacttcgta cccaggcagg gtaagtcttg gggcccctga gtcttggttc tgctcacttt10860cccgcaaccc acccacgcag gcctcccctc cactcacaga gggaaaagca aggatcaaaa10920ttgggggtcc tggggcccag ctccagcttt gccactcatg accatgggtc aattataatc10980tctgtgagcc tcagtttcct cttctctaaa atgggaaccc tgatagtgcc acctcatagg11040atagttataa agatgaggtg acatgatgta tcagacctgt caagtgctgt cacactgtga11100ctgttattat tacatctttt cttcttcttc cttttttttt atttttattt tttttgagac11160ggattctccc tctgtcgccc acgctggaga gaagtggcgc gatctcggct cactgcaagc11220tccgcctccc aggttcacac cactctcctg cctcagcctc ctgagtagct gggactacag11280gcgcccgcca ccatgcccag ctaattattt tttgtatttt tagtagagac ggggtttcac11340catgttagcc aggatggttt cgatctcctg atctcatgat ctgcctgcct cggcctccca11400aagtgctggg attacaggcg tgagccactg cgtccagact gctttgcttt gtttaactga11460gggcagattc ttgatttatt tggccaggga acccttttaa tgtgtgcatg tgtgcgtgca11520tgtgtgcgcg cgtgcgtgtg tgtgcatgtg tctgtgtgtg tatgtatata tgtgtgtctg11580tgtctgtgtg tgtgcgtgta tgtatgtgta tttgtgtctg tgtgcatgtg tgtgtctgtg11640tgtgcatgtg tgtatgtgta tgtgtgtctg tgtgtatgtg tatatgcgtg tgtgtgtgtg11700tattgtgtgt gtgtgtatgt gtgtggcaag acactgatgt tcccccagtt ttcaaaatgc11760tatgctaggt gacctgacct gaatattaca agcctcccag ccaacgtcct ggggtgatgg11820gaatgttcca gatcttggtt ggattaataa ttgcatgggt gtattcatct gtcagaactc11880
agcctactgt cagatctgag cataaactat acctcaatac aaatctaaaa aaccaataac11940caggggccca ggctcttgag cagccccgcc ccagtgacct gtgctcctcc tggctctccc12000gtttctctga actacattgt gtcttctgca gaacctccca agatccacct ggactgccca12060ggccgcatac cagacaccat tgtggttgta gctggaaata agctacgtct ggacgtccct12120atctctgggg accctgctcc cactgtgatc tggcagaagg ctatcacgca ggtactgtgg12180gtccctcctc agtctcccca tctataagat gggtgtgtgg aaccagccaa gtgctaggac12240ctgctgcaca ccccacccac atgtgcacgc cctgctgttg gctaccccat gggagagact12300ggtcaggggg caggcaaggt gggcagtgtg ggtcaggggg tggaagaatc agcagagggc12360cgcttccagg ctgagtcagc tcctctgctc cctacttccc tcctgccctg ttcccagggg12420aataaggccc cagccaggcc agccccagat gccccagagg acacaggtga cagcgatgag12480tgggtgtttg acaagaaggt gagtgagact gaggtcagga ggaggatcgt ttgtctttca12540tcactttcta cctacgtggt gccggccctt ggagaagtct ccataggtgc cacacttggt12600cgggtgtgtt gctgccccca gcagggctcc ctgtgggacc ctcacacctc agccagaggg12660tctctgttga agttgctgat gcccatcaca aggatgtgga caccctctca ttaccaggaa12720cccctcatga ctgggctgct ccctggctcc cttcatccta agctgaccat gaccttgacc12780ttgtgctccc tctcaactca ggagtagttt ctgagacact tttctgccag tgtagctgcc12840ggggtcttgc tcctgcctgg cactgttggt tcttctgaag gctggggtct tgaggggtcc12900tcatgatagc tcacctgaga ggaacaggtg gttcccccag gtcccgtgcc aaatcaagaa12960aggcgagccc ctgccttcag tcggtgccca gagatgaatt gtactagaat attgtggatt13020cagtcttccc acagactgtg ttccccccat ggacccccgg gacatctggc tgttgggagg13080ctgcaaggac ctcctgggtc tgacttggat ctcaccccaa ctctgcaccc ccccagctgc13140tgtgtgagac cgagggccgg gtccgcgtgg agaccaccaa ggaccgcagc atcttcacgg13200tcgagggggc agagaaggaa gatgagggcg tctacacggt cacagtgaag aaccctgtgg13260gcgaggacca ggtcaacctc acagtcaagg tcatcggtga ggccggccgg ggtccaagct13320ggagaacaca gaggggcagc cccaaggagg gcccatccgt tcgctcattc agccactcga13380caaacatcac gggcatgctc cctgagccga gcggcaacag gacaggtttt tctgcccaaa13440aggagccccg ctctggggga gatggaggca gatgcatcca gcagatttcc tgcgacactg13500ctgtacatga gccatgtcca gagtgccgtg ggagcactga gcagagagcc atccctgtgc13560ctgggggtga tgcctttagg aggctgagaa gatggtgagg aaaggcatcc caggcagagg13620aaactgtgta caaaggggtg gaggagggaa agggcctttt gggtgtggag aatgaatgaa13680acatgtcagg agaggactgg gtggggttgg gaggatcaga gccaggacag gggtgaatat13740gggcagtgag aagccttaaa gggttgacgg agggctggcg acatgatcag aaatgcatcc13800tgttggagac cagcctggac aacacagtgg agactccata tcactaaaaa aaaaaaaaaa13860aaggaaaaga agaaagaaat gcattctaga aagatctctt tggatctggg ggtggtgggg13920
gcagcctgtg gcggttagtt ggagtgggaa ggggacgagc aacgttactc aaggccctga13980gcggggcagg gctgatgtgg gtccatccca ccccatccag acgtgccaga cgcacctgcg14040gcccccaaga tcagcaacgt gggagaggac tcctgcacag tacagtggga gccgcctgcc14100tacgatggcg ggcagcccat cctgggtgag tgcaagggca ccggatggag gtgtgagggc14160gccaaacaga tccgagggaa ggtggtgtgg ggatgcctgg gttccagacc agagctgcca14220cctcccctga gccaggctac atcctggagc gcaagaagaa gaagagctac cggtggatgc14280agctgaactt cgacctgatt caggagctga gtcatgaagc gcggcgcatg atcgagggcg14340tggtgtacga gatgcgcgtc tacgcggtca acgccatcgg catgtccagg cccagccctg14400cctcccagcc cttcatgcct atcggtgagc ctgcctggcc tggtcctgcc ccccgccccc14460tccccagtta aaaacctcca ataatagcag gtgctctgca ggcagccatg ctagacactc14520acatccacag tctcctttca tcctcgactg gggatactca gccgcatttt acagatgagg14580aaacaggctc caagcagtta aatgacctgc ttgagatctc ccagctggtt ggggtggagc14640tgactctcac actacgccga cccctagttc acgtttcaag cctctctttc catgtctaca14700aaatgggaat aatgacactg cctatctcag agagctgtta ggatgatatg ggatgaccag14760gcaggccatc tggcatctaa caggtgctca ataaatgttc attgtcccct gttctccaca14820cccttcaacc cagggttttc acctatggga tggggcaagg gctgtagtta gtggaggggt14880ctcaggggca tctgtctgtg gaaagagtcc tggaccaaga ctcagagatg gcagaggcag14940ctccatggtc cccggggggc caactggagt catccctccc tgaagcctca gcttcctcat15000ctgtataatg gggtctgagt gggcagaaca gtgttgagac tgtgcaggct cagagacacc15060tgtcccacta ggtggtgatc ggggcagctg ctgtgcaggc agcagacctg gccagatggg15120cacacttgga gatgcagatc ggctgtggga gaggtcagct ctcttttagt tttttttttt15180ttttttttgg agatggagtc tcgctctgtc acccagactg gagtgcagtc ctggcgcgat15240ctggggtcac tgtaaccttc acctcccagg ttcaagcaat tctcccacct cagccttctg15300agtagctggg attacaggca tccaccacca tgcccagcta atttttgtat ttttgtagag15360acggagtttc accatgttgg ccaggctggt cttgaactcc tgacctcagg tgatcctccc15420acctcggcct cccaaagtgc tgggattaca ggcgtgagcc accgtgcctg gctgctgttg15480ctgtttgttt ttaagccaat ttacagacat gtcttgtaac agggacaaaa tattccttaa15540agtggccaaa agccagctga acaggaagtg ccccctatgt gaccagtggg cagttcagag15600tctagggcat ggatctccag cttccccagg cttgctcaga cccctctctg acctctcctc15660tgcccaggtc cccccagcga acccacccac ctggcagtag aggacgtctc tgacaccacg15720gtctccctca agtggcggcc cccagagcgc gtgggagcag gaggcctgga tggctacagc15780gtggagtact gcccagaggg ctgtgagtgt ccccgccccc aacccccctc cccaaaggaa15840gaacatgctc accttgccat tgagcagatt cacctgtagt caagtttttt aggcccactt15900ttgccgaaag ttgaggacac ccagagaaat atctgtcctg ttttcagaag taaaaaagct15960tgcctagtga aaaacaaatg cagagtaaag ctgactgtaa cacttctttg agcagtgcga16020
aatcagcaac tacattttaa aaacatattt aaggccaggc gcgatggctt acgcctgtaa16080tcccagcact ttgggaggcc aaggtgggcg gatcacctga ggtcgggagt tcgagaccag16140tctgaccaac gtggagaaac cccgtctcta ctaaaaatac aaaattagcc gggtgtggtg16200gtgggcacct gtgatcccag ctacgcggga ggctgaggca ggagaatcac ttgaactcgg16260gaggcagaag ttgcggtgag ccaagatcat gccattgcac tccagcctgg gagacaagag16320cgaaactcca tctcaaaaat aaataaacaa ataaaaattt aaaaaaacat atttaaatcc16380tggagattcc tatcagagga gtgggcagtg ggagtggggt gtcagtggtg acacagcctg16440tggccttgcc tccccctccc cacccccagg ctcagagtgg gtggctgccc tgcaggggct16500gacagagcac acatcgatac tggtgaagga cctgcccacg ggggcccggc tgcttttccg16560agtgcgggca cacaatatgg cagggcctgg agcccctgtt accaccacgg agccggtgac16620agtgcaggag atcctgcgtg agtgcccctt tgtgcagtca caagacccgc cattgacacc16680ccaggccctt ggtgtccagt ggaggtgggg acagttgggg aggcccagaa tgctctgccc16740agaacgctgg gcagagacag gaggggttgg agccatcgtc catgcgctag gcctagggaa16800aaagtgcaga gagggtggcc aggcacagtg gctcaagcct gtaatcccag cactttagga16860ggccaaggca ggcagatcac ttgaggtcag gagtttgaga ccagcctggc caacatagtg16920aaaccctgtc tctactaaaa atacaaaaac tagccaggtg tggtggcgcg tgcctgtatt16980ccctcaacta cttggggagc tgaggcagaa gaatcgcttg gacccgggag gtggcagttg17040caatgagctg agatcacact attgcactcc agtctgggtg acagagtgag acaacgtctc17100aaaaaaaaaa aagtgcagaa agggctctct tggtgtatgt cagtccctta gttctggaac17160agggaaagta aaagccacag tacccaagct ctcttccagg agtgtctcag ctccaacagg17220taaatattgt ctatgtagtc agattggtcc ctctgggatc cacttcccat tcctttgttc17280cttgtcccaa caaagggtcc atcttttgta aggattggtt ctcaaagctg gaacgaggca17340gcaaactcag gtggtaacaa cacagggcat agggtgtcaa agcccaggct tacaccctgg17400tctatgactt actagctgtg tgacttcagt caagttgctt accctctctg atccctgcct17460tttgaagtgg tgaggctcgg ggaagccagc tgggcttggg cagcctggag ttgctgtgtt17520agcaggagct aaaggaggcg cagggcccag caggcagctt ttttcttagc tgcagctctc17580tgggccttgt ctcaagggag gttggagctg tggagcccct cagagctgtg gcgggccctc17640acttagctac ccactttata cccacagaac ggccacggct tcagctgccc aggcacctgc17700gccagaccat tcagaagaag gtcggggagc ctgtgaacct tctcatccct ttccaggtgg17760gactggcccc cttccctgtc ccccagggga gagaggctat agtgtgttgt tcccatccag17820tggactgatg tctcagggct ggcctgatct gaggtaccag aggctggggt ggcggccggc17880ccttggagtg atccaggttc agggttaagc ttttcctccc ctcagggcaa gccccggcct17940caggtgacct ggaccaaaga ggggcagccc ctggcaggcg aggaggtgag catccgcaac18000agccccacag acaccatcct gttcatccgg gccgctcgcc gcgtgcattc aggcacttac18060
caggtgacgg tgcgcattga gaacatggag gacaaggcca cgctggtgct gcaggttgtt18120ggtgcgtggc caaggcctcc ttgagccccc ttgtttccct tccctgggct gggctgctgg18180ggccaagggt ggggccacgg ggacccaacc cacagctcac attttccagt ccactgcccc18240agcaggcctg gccctggttg gcaggggtgg ggtggtccct ggagccagtg accccctgct18300cactgtcagg aggcgtggtg acccaactgg gtctgtctcc cgcagacaag ccaagtcctc18360cccaggatct ccgggtgact gacgcctggg gtcttaatgt ggctctggag tggaagccac18420cccaggatgt cggcaacacg gaactctggg ggtacacagt gcagaaagcc gacaagaaga18480ccatggtgag cccagggtct ggggtcccca cgtgcaccct gcctaggccc ggcagaccca18540ggccgcagct acccttcact gtcctcaccg tggacccctc accctccctc tgctgatctg18600aatccctcca tagtaggggt ggagatgcca agggcaccca ggagaggctc tcggcatcag18660gaagggcctg gcccagagat gcctcccctc cctccctgcc cccaggagtg gttcaccgtc18720ttggagcatt accgccgcac ccactgcgtg gtgccagagc tcatcattgg caatggctac18780tacttccgcg tcttcagcca gaatatggtt ggctttagtg acagagcggc caccaccaag18840gagcccgtct ttatccccag accaggtgct gtaccctcat tcttccaacc aggggctggg18900gcagggaggc tgtgggaaca gggagagggg cctagctttg tgtggccctc tcggtaccaa18960gtcctgtcac caacaggcat cacctatgag ccacccaact ataaggccct ggacttctcc19020gaggccccaa gcttcaccca gcccctggtg aaccgctcgg tcatcgcggg ctacactgct19080atgctctgct gtgctgtccg gggtagcccc aaggtaggga actttaggcg ctggtccagg19140ccgaccagga ggcagggctc acaggccccg acgttgagca gtcctctccc cagcctgtct19200cccctgcttt ctctccacct tggggtgtat ggaccgggtt cctccccctg ggcagggcca19260tggtactcac tcttggttcc atgtttgttt ccagccttgg gcatagtcag ggactctcgt19320gggacccccc gagtagaaac acagatgtgt ctccctgggt ccctgccagg tcccctctca19380gcctggatgg cttccctccc tctctttacc ttatttatag cccaagattt cctggttcaa19440gaatggcctg gacctgggag aagacgcccg cttccgcatg ttcagcaagc agggagtgtt19500gactctggag attagaaagc cctgcccctt tgacgggggc atctatgtct gcagggccac19560caacttacag ggcgaggcac ggtgtgagtg ccgcctggag gtgcgaggtg aggaccctcg19620gggccagggc ctgggagatg ggaagagcgg gcggcagtgg ggaccctggg ctttgctccg19680ttgtcctcgg ccaagcacct gccctggctg caagggcacg gaccctgcca cgcccagatg19740ggcaatagct tccagaaggc tgggaggaca cagtgacatg gcctcctctt ctgcagtgcc19800tcagtgacca ggctggctcc tggggatggc caggtatgtc cacccgacac ccagggcaca19860agtcagtggc tgagccctgg cccttggtcc tggggcagcc atcagtaaat gggaggctgt19920aggggccctc cattcactcg taagataacc tgtgttgcag gtacaaccgg atgccagccc19980cgtgccagga gcctggaggg aagttgggga aacccctccc tactgttgga tgtatgtgtg20040acaagtgtgt ctcctgtgct gcgatggggg atcagcaggg cagttgtcgg gcagtcctga20100gtgggtgttg cacagactgg tccacagggc tcctgaagga agcccctgga tctttggggt20160
aaaaggaggg tggcctcaag aaacaatgtc tggggacagg cctttctggc ctgctatgtc20220ttcccaatgt ttattgggca ataaaagata agtgcagtca cagagaactc actcttcatc20280acctgagctc accatagtct aatagaaaac aaccgaaacc aaataattca agcactgctt20340attacaattt tactgggtct ctattttacc ctcctacaag cctcagagta cttcgagtct20400cccttcacca tttccgacgg catctacggc tcaacatttt ttgtagccac aggcttccac20460ggacttcacg tcattattgg ctcaactttc ctcactatct gcttcatccg ccaactaata20520tttcacttta catccaaaca tcactttggc ttcgaagccg ccgcctgata ctggcatttt20580gtagatgtgg tttgactatt tctgtatgtc tccatctatt gatgagggtc ttaaaaaaaa20640aaaaaaaaaa aaggaattct cg 20662<210>3<211>6592<212>DNA<213>cTnT基因<400>3gaattccaaa ttccacttct gaggctctaa tgccagccta ggatctgaca ctgagtctca60gggccttgac tttggccccc tgttcccagg caccctgtgg ctgactaggg ctggggtgtc120tcctcaggag ggcctcagca cccagaggat ggttcaagta agcaagttgt gtccaccctt180ctgtgtgtcc aagcgtcttt cctgtcctat gtccgtctcc agggctggga gagaaaggcc240caggagtgct ggacagagga ggccagaaac cagattcctg ggtttccaag tggacgaggg300atggatttcc cagtgctatt gactgagagc tagccccgag cacagctgca tcctcaaatt360aatcaacaac atttattgag tggcctggac tcctgggtct gaggggagag ggattggggt420cctggactcc tcggtctgag gggagaggga ttggggtcct ggactcctgg tctgagggag480gaggagctga gggtgcagac tcttgagtct gagagaggaa gtgtgctggg ggcctgcctg540gactcccttg tctgagggag gggctggggg cctggacccc tgggtctgag ggaggagggg600ctgggggcct ggactcctgg gtctgaggga ggaggggctg gggcctggac tcttgggtct660gagggaggag gggctggggc ctggactctt gggtctgagg gaagaggagc tgggggcctg720gactcttggg tctgagggag gaggggctgg gggcctggac tcttgggtct gagggaagag780gagctggggg cccagacact tgagtctgag ggaaaagggg gctgggggcc tggactcctt840gtgtgaggga gtggccaggg tctcccaggg tcctgggact gagggaggag gaggttggga900ggtcgggcat tctctgggtc tgagggagga ggggtctagg actccaggat cagagggagg960gtccggattc ctgtgcccgg aggtggctgg tgatccagct ggagcagggc ccaccccgcc1020cctcacgcgc ccccgttatc tggcatagtg ggcaggggga ggaggaggtg acagtatatt1080tagtctgtgt cctcgccctt tatctcagtg tcctcgggga gtctcaagca gcccggagga1140gactgacggt ccctgggacc ctgaaggtca cccgggcggc cccctcactg accctccaaa1200cgcccctgtc ctcgccctgc ctcctgccat tcccggcctg agtctcagca tggcggatgg1260gtgagtgatg ccccaaggca gtggggagtt gggggcgacc tcccgggttc ccaagagggg1320
tcgcagctga gaggctggac ccaaggcctg cgaggatggc gtagggactc ttccctgaag1380agaggaagtg ggtttgcgag tcagactcct ggaacccaag gaaggggaag ctcggtcccc1440cgacctcttg ttcatagggg actccagggg tcccttagga gacaggacac agcccaccac1500taacccccct ccttggtttc tctccttcca ggagcagcga tgcggtgaga gcagcgggct1560aaggcgtggc tgggaccccc aggtccaggg tgggccctgc agtgaggggt ctgggtcggg1620aggctgcagc ctagcagagg gtgcggtacg gtaagggctg ggtggggtct tggtggtcat1680ggggtcccca ctcctcctaa cccaggctag ggaacctcgc cctgcaccag ccccaatcag1740acgccgctcc tccaactacc gcgcttatgc cacggagccg cacgccaagg tgggacgggg1800cttcctgggg gcagagtaca ggcgccggag ggatccaaga ccctgggagt ggggggagga1860gccagggctg cgaagggggc ggggactacg cggaggggct tcaggggcgg agttttgcag1920agggtcatgc tcggattggt gacagcagcc tgcgggcgga actccgttgc cctcggactt1980gcttagggat agatgggaag tgcctatcca aaggaagaga cccagattgg tggatgggaa2040tgaggggcgg ggcctcccgt agactcaggg ctcaagttgg acgtgggccc aaatctggac2100cggctgggtt tgctgggggt gtcttgaggt cccctccacc gtcgtctccg aatccccctc2160catgatcctt ccttgctcca tctcaccctg gcagaaaaaa tctaagatct ccgcctcgag2220aaaattgcag ctgaaggtga ggacgggcgg gactgggaaa gagcaggcag gtgctcaggg2280ggcggacgtt gagaatgggt ggggctttcg gggtaggtgg gcggaagtgg gcggggtttg2340gccgctcggg gcgtggcttt agcggggagt actgctcggg gtgggacggg gccttggaac2400agtggagacc aaactggagg gtttagaagg gcagaggcgg ttccccacgc ctggtcttta2460tcctgaagcc ccgggtggcg tgcgcttccc tcccacccct ctgcagactc tgctgctgca2520gattgcaaag caagagctgg agcgagaggc ggaggagcgg cgcggagaga aggggcgcgc2580tctgagcacc cgctgccagc cgctggagtt ggccgggctg ggcttcgcgg agctgcaggt2640accggctccc aaggatgcga ggtttctagt cccggaattc agcagtacag cctctatccc2700ctcttctgct cgggacccag gcgtccaata tggctgtcct tacccaatta tatatggttc2760gtgggactcc tggcccctaa caccctttgt gtgcaggtct gtggagtctt ggctccaacc2820tactccttca ggaccatgtg gccctcctat cccagacaga agcccaagcc ccagcccctc2880ctccctcaga ccctggagtc caggccccag cccctcctcc ctcagaccca ggagtccagt2940ccccagcccc tcctccctga gaccctgaag tccaggcccc agcccctcct ccctcagacc3000ctggagtcca ggccccagcc cctcctccct cagaccctgg agtccaggcc ccagcccctc3060ctccctcaga ccctggagtc caggccccca gcccctcctc cctcagaccc tggagtccag3120gccccagccc ctcctccctc agacccagga gtccagtccc cagcccctcc tccctcagac3180cctggaatcg aggccctcag cccctcctcc ctcagaccct gaagtccagg ccccagcccc3240tcctccctca gaccctgaag tccaggcccc agcccctcct ccctcagacc ctgaagtcca3300ggccccagcc cctcctccct cagacccagg agtccagtcc ccagcccctc ctccctcaga3360
ccctggagtc caggccccag cccctcctcc ctcagaccct ggagtcgagg ccccagcctc3420tcctccctga gaccctggag tccaggcccc agcctctcct ccctcagacc ctggagtcca3480ggccccagcc cctcctccct cagaccctgg agtccaggcc ccagctcctc ctccctcaga3540ccctggagtc caggccccag cccctcctcc ctcagaccct ggagtccagg ccccagcccc3600tcctccctca gacccaggag tccagtcccc agcccctcct ccctcagacc ctgaagtcca3660ggccccagcc cctcctccct cagacccagg agtccagtcc ccagcccctc ctccctcaga3720cccaggagtc cagtccccag cccctcctcc ctcagaccct ggaatcgagg ccctcagccc3780ctcctccctc agacccagga gtccaggccc ccagcccctt ctcctccctc aaacccagga3840gtccaggccc ccaactcctc cctcagaccc aggagtccag gcccccagcc ccttctcctc3900cctcagaccc aggagtccag gccccgagcc ccttctccct cagacccagg agtccaggtc3960tccctgtttt tggttccccc aacaacacac accacgttcc tcctccagga cttgtgccga4020cagctccacg cccgtgtgga caaggtggat gaagagagat acgacataga ggcaaaagtc4080accaagaaca tcacggaggt gggacgcatg ggcagctcgg gtaccttcgg ggtagggtga4140gatggctggg acttggtctc tgcctgaccc cttgcagctg cttttggctg cacatcccag4200gagacccagg acaactgtga gcctggcagg gctggggcag aaggatgagt acaatatagt4260caaggaaagc tgttctaggc agagggaaca gcacatgcaa ggccatgggt tgggaaacag4320aaaataagtt agtgaacatg ctcagggcat cacatgttgg taaattagct caggcactgg4380ccagggaatt gtgatttgca tgtagctgga ccaggttatg ccagtggttt tgagaggtga4440ggctggagca tatgaggagg gggattcagt tccaggatta gaagcctaga ctgggagcct4500aagccgggaa gagactggta aggcctcggt actggaagac gagataagga gaataaaaaa4560ggagtgtagg atggaggagt tgggtgtgcg ggaaatggaa ggagaagtac ccaccccctc4620gtgtgccccc agattgcaga tctgactcag aagatctttg accttcgagg caagtttaag4680cggcccaccc tgcggagagt gaggatctct gcagatgcca tgatgcaggc gctgctgggg4740gcccgggcta aggagtccct ggacctgcgg gcccacctca agcaggtgaa gaaggaggac4800accgagaagg tgagtgtggg ctaaggccag gaaagaggat gctgagggga agggctgtgg4860gtgccaacaa ccctaggcct gagggcagat ggtgcttgga gttggaggta gaagcagcta4920gtaaggggtc ctcagaaatg caagaggaag acaggaagta gaaggggaag acaggaagtg4980cattagggct acaggaagtc catgtaagag caaagaggta catgaaggtc caggtgcagt5040ggcttatgcc tgtaatcttt gaggtttaaa aaaaattttt tttaaatttc cttttttttt5100tttttgagat ggagtctctg ctgtccaggt gcagttgctt atgcctgtaa tctttgaggt5160ttaaaaaaaa ttttttttta atttcctttt tttttttttt ttgcgatgga gtctctgctg5220cccaggctgg agtgcaatga caccatctcg gttgctggag tgcagtgaca ccatctcggc5280tcactgcaac ctctgcctcc caggatcaag tgattctcat gcctcagcct cccgagtagc5340tgggactaca ggtgcacacc accatgttgt tgttttaatt tctacaaatt tcttttttaa5400attagccagt cacggtggtg gcatgcagct tctcaggagg ctgaggcagg aaaatcgctt5460
gagcccatga gatcgagggt gcagtgagct atgactgcac cactgcactc cagcccaggc5520aacactggga gactccatct caaaacaaaa caaaacagaa caaaagttag ctgggcatgg5580tggcacacac ctgtggtccc agctcctcag gagtctgagg tgagaggatg gcttgagccc5640aggaagttga ggctgcagtg agccgagatt gcacgactgc actccagctt ggatgaggca5700gccagaccct gtctcaaata ataataataa taaaatagaa caattataac agattgtaat5760aaaactcatg aatgtggtct ctttctcaaa atatcttata gcactgtaat cacccttctt5820ttccttgtga tgtaaaatga cagtgcctat gtgctgagat gaggtgaggt ggatgacata5880ggcattatga cctggcgtta ggctactatt gacctgagaa tccatcaaac ttatgaattg5940tttatttctg gaattttcca tttaatattt ttgggccatg gtttacctca ggtaactgaa6000accacacaaa gtaaaattgc agaaaaggag ggactactat aataagaaga gaaggaagga6060gacaggaagg gcataaggca gacaggaagt ggaggggaaa gataggaagt gcaggaagga6120gacaggaagt ggaggggaaa gacaggaagt gcatgaggga gacaggaagt ggatggggaa6180agacagaaag tacatgaggg agacaggaag tgctggggaa agacaggaag tgcatgaggg6240ggacaggaag tgcatgaggg agacaggaag tgcatgggga aaattggcag ggattatctt6300gaaaagacag gaagtgctcc agaactagat acttaggcat ccagggtaga gtggccccac6360aggctggagg gaagacaggg attcttgaga gactggagac caagaagaga ccctaacctc6420tgactcatcg ccatcctcca ggaaaaccgg gaggtgggag actggcgcaa gaacatcgat6480gcactgagtg gaatggaggg ccgcaagaaa aagtttgaga gctgagcctt cctgcctact6540gcccctgccc tgaggagggc cctgaggaat aaagcttctc tctgagctga aa6592<210>4<211>26875<212>DNA<213>cTnI基因<400>4attttaaagc cgttagggga tgacctttga cagtccgcat cacccctctc acacaacgag60cgcctgttca aggttcttga ctggaagttc taccttgtat ctggcctcct gtagcagttt120cagtccattc cctgtgagga gggtgtgcca catggctttg ggggtcatgg agaagaccca180ccttgcagat gtcctcactg gggctggcag agccggcaac ctgcctaagg ctgctcagtc240cattaggagc cagtagcctg gaagatgtct ttacccccag catcagttca agtggagcag300cacataactc ttgccctctg ccttccaaga ttctggtgct gagacttatg gagtgtcttg360gaggttgcct tctgcccccc aaccctgctc ccagctggcc ctcccaggcc tgggttgctg420gcctctgctt tatcaggatt ctcaagaggg acagctggtt tatgttgcat gactgttccc480tgcatatctg ctctggtttt aaatagctta tctgagcagc tggaggacca catgggctta540tatggcgtgg ggtacatgtt cctgtagcct tgtccctggc acctgccaaa atagcagcca600acacccccca cccccaccgc catccccctg ccccacccgt cccctgtcgc acattcctcc660ctccgcaggg ctggctcacc aggccccagc ccacatgcct gcttaaagcc ctctccatcc720
tctgcctcac ccagtccccg ctgagactga gcagacgcct ccaggatctg tcggcagctg780ctgttctgag gtaaggctcg ggcagggctc tggggaagag gagagcagag aatggacggg840gagatgtgag ggtcttgggc cctggcatat ttacccagag tctgcctgtg tccgcagaag900tccatggccc ctcctggtgg aggccacact tcagaggaca ggttgccagg tctgggctcc960aagattggta caatagagca gagagaaaga gagaatccca tggtagccat tggagactag1020ggttggagtc ctggacctgc cactaaagat gtagagttta aactcttgga tgagtcactt1080tccctcccca ggcctcagtt ttctcatctg tagagtgggc taaatatttg ctaggcctct1140gcctgctcta aatacaatga ggctctaacc aacagagact cccctaaatt gcttgttcca1200ggccgagggt cacctatacc tttccagtca ggtccttctt gagtcccagg gagcagagcg1260agactgcagc cctgtcagtc aagtgagtct cctggtcata ttctcaaggc taggaactca1320gaaactgtcc tggaagtact gagaacgacc agatgtgcag ggtcctctgc agcgcctctc1380caggccaacg cgggaattcc atttgatgcc gctgactcag tgccattccc tcccagagct1440gagctgagct cccagaccct gagctgagct gcacttgggg ggcagatggg gaaaggcccc1500actgggagaa cctgtccttg ggtgtgagcc cagctggttg gcattaaagg gtttaacctg1560ggcccccgta agtgtaaccc ttgtcccatc ccaccccaac accccatctt gggacaagcc1620ttgctctgtg cccaggagtg gtagagaaag attcccttgg tttctagttt ctcctgggca1680ggctgaggac tattcaggga gggggttgcc tggtgtgtaa ggaatttcag agcacattcc1740tggcctgctg tagccgggaa gctacctgcc ctcccaaatt ccttttctga cccatgtctt1800agagggcgaa tcttccttct ctctgcaaaa gtggaatctg agaggatcag gttgctggct1860gcctcctatt tctgaccccc acttccactc ttcctgccct ctccccatcc ccttaccccc1920gctctcctgg tgggctaaca gctgttggct taggaaaatc ccattcgagt gctggggaca1980aggactgagg ggtggggcct gtgtttctca gaaactcgga gactgtttct acagggacag2040aactcaaggc tctcctgctt tgtagttggt taactgaagt cagagaggct aggtgactta2100aataaggcca cacagcaaaa tctgggtttt aagcccagat tttttgaccc caaggtcagt2160atgccttatg ccttctattg tctttgcttt actccccaag aaaggtgacc ctgtgaacgt2220gttaggcttc caacacgtgt tggctatgaa tgcattaggc tagaaagctg cctgtggaag2280tgggtgggac ttgggtgtga ggacacaggt gtttcaggac attctggttc cttgccctgc2340caggttcttg actctctccc attctgcagc ccccagtctc agcccacctc tttcccctgc2400atcaggtcct gcctttgagc cactggcatg gtggtgtcct ctgggctggc tgaaagccct2460cctccatcct gcatgtctgc atgctatttt tgggagctgg atggtgcccc caggaacagg2520gagaggagtc caagctgctc tgtcctcctg tgaggcccca gcaccatgcc cagtggctct2580gaactggtgg aagggcagag taggagagga gagagaaagc tagaagctat gcgcccaggc2640tggccatgca cggttcctct gagaattttc tccctcccac tgagggacaa gcttctcctg2700gggctcaggt aggagctcct caagttctca agtcactagt tctggccgct cccctggggc2760
tttgggtaac aattgtcagc cccacccatc ctagggttag gaaggctatt ctctttggcc2820actctcatcc taagacctat ttggagaacc tctggggttt gagtcttttt ttcagcagaa2880tgaggcttga tcccgcatta tagcacctcg cacatttgat gtctcttctt ctcacccact2940caccccaccc tgggggttgg ggcaaaaaag tggctcagag ctgcggttca gagctccttg3000taaacaaggc tcctccctca ctgtcctcac cctgctccag cagagggagc agcggaagga3060ccactctgct gcagccatgc ttgtttctaa cccagcagaa ctggacataa tgggaacagg3120gtctgaagac aatcaatcca ggctgcagtg ggtgctgagt ctggggaagc ctccacctgg3180aggggcagct gggcagtggc agctcccttg gaatggctca gcctctggac atcaccccac3240ccaaccagag ccctggctct tgctggatgt ccacagatga gtgcctggga ttggtctcag3300ccactatggg ggggatgtgc agggagaggt gatgagggag tgagcaggac tgtctatgtg3360cctctgtcct catcctgagg cttgggtctg aaattggtgc tgcagcactg gcacgcgtga3420gtggggcagg aggtgggcag caggggagga gcattggagg gtggtcctga gcatcatttg3480gattcttctc ccgcctcact ttagcctcac tctcacataa ccctgtccat tctctccctt3540ggaagccaac atcaggaagg ctgtggagct ggcatattgc actataacag aggctgctgt3600tcacgtttca aacaacgtga ttgtgtccct ggagcagtgc actgtcatgg ccccggaggg3660ttgggtcata gtagttatta gctgaatgcc tacacttcac actacctctg ttcctcacac3720ctacccaaga agagcagtaa tttcacagca aagagagctg agatgtgggg aggttaagtg3780accttgccaa ggtcgcaggc aaacgcatgc tggagccagc attcaaaacg agattagtct3840cacactcaag tgcttgctct ctgccccctc cctgtgatta cacgcgcact gtaacacctg3900acgttgccta atgccttccc cttttgttaa tgtcaactgg agcctcgtaa agaccctgag3960tagccaggat gtgtacactt tatctccatg agacagagaa aggactgagg tttggagatg4020ttaaaaagac tcgcctaaac accctcggca agctaatgga agaggatctg aatctagatt4080atctgttccc agtgcagtga gaagatgatc tcagaatgag ttccctgggg gaacattttt4140ttaatcggaa ttttcattga cataattaaa gactagtaca cagttgtctt taataacgag4200cgtttacaca cggtgcctag tttctcccga gggcaacatt tgcaaaatta gtactatatc4260aaaaccaaga ttggacatca atacaatcaa tctatgatct tattcagatt tgcccacaat4320tgcaccatgt gtatgtgaaa ctctaaacaa ctttaacctg tggaggttca cgtatccatc4380accacagtct acatactgaa aagatcccaa accacaagga tcccccctgt gtgctttgat4440ttatttattt agagacaagt tctcactcat ttgtccaggc cagtctcttg gggtgcccaa4500agaccttttg tccaggtctc acttttgtcc agcacacatg gaatgggtgc ggtggctcac4560gcctgtaatc tcagcacttc gagaggctga ggcaggagga tcccttgagc ctgggagttc4620gaaacagcct gggcaatgtg gcaaaatccc agctttacta aaaatacaaa aattagtcgg4680gcatggtggt gcacaactat agtcccagca actcaggagg ctgaggtggg agaatcgctt4740gagcccagaa ggttgaggct gcagtgaggc tttgtgcagt gaagatttgt acagtgctga4800acagatcctg tggagtgggg gtgggcagag tggatggaaa ggttgagaaa ctgcagacat4860
tgtcttgagt gtcacaaatg gaaatgcagc atcccaggca gtattgcctg ttcaggggca4920aggaacgaag tggacatcag caggtggcct tgctgccatg tgggtgtcac tatctccccc4980agcaggggag aaaacaggct ttttgttgca ggtcacacag ctcatgaggg gtggaactag5040attcacccta ggcctcgctg atctctgtac aacgggggcc agagctcttc tgaggaaggc5100aggcttccct ttgtacctgc actgactttt ttctcctttt ggagggagag cagagaccat5160gtctgacata gaagaggtgg tggaagagta cgaggaggag tgagtatctg gagcatcttg5220cctgagtggg gtcctctccc gccgctgccc tgacacctgg tccaggagcc tcccagctgt5280ccctcggatt ctgggtagaa gtagctgtgt gtgttttggg caccccgagg agagatatag5340ccatttcctt tccactcctg tacccctggg ttgtagatcc caggcagagc acaggccgag5400agacttcggg aagcacagag gttcagctcc agggtcatca gtgtccttgg ccagtcttgg5460ctaggggcca tgaacagaga agctgagatg ttgggtctcc tgaaactgac tgaggaaggt5520tcagtgactc tccagaggca cagagctgat tatgcccccc aaaccccagc tcagaaccca5580gtgttatcac cctgtcttgg atccctactc tctcatgaca gtgccctgcc cacagtccta5640tcccagaggg aaaccagggg gtgggacaca gccaatccaa taactacaga ggatagtggt5700caccagggag gagacagagg tataggcacg gctactgccc tcacagaact tactcttgtt5760gagatgttaa gacataaact gggagaagaa attagcaact gggggcctgg tgtggagggc5820gggctgttgg tagtgtagga gttctgagga gagggagatc aggggctgga atagtcaggg5880ggctgtgtgg agaaggcagg tcttacctgt gtagaatttg gaaagataag agatttggga5940gagggcagga ctttctagaa aggggtacag cttgggcaaa gatggaaaga gtaagtgagc6000agaacgctgg tgagaccaag ctggctgggg cggaggcttg cggaggatgg taggaggcag6060ccctgcatga gaacggcagg ccaggctagt gggtgtcatt gcaaggtggg cagggcagcg6120tggactccac taggcaacaa gggaaaagaa agggggatta tctttgggga aaggccagtg6180tgtgcatgtg tgtgcaggcg tgtgtgtttg catgtgcttg tgtgcgagct actgacagtg6240tttcctgttg ctctcaggga gcaggaaggt aagcgtaaac gtgtgtactc atttggatca6300aagacagcct ggttcgaaac tgacccacct cttctctctt ctcttgctgc ctggacttct6360cttctgagca gaagcagctg ttgaaggtat gtgcctcagg caggtggaga gccagaaagg6420ggcaggctca gcaatgtgga aatcctggga gccctgggaa agcagctcat ctgtccctgc6480tcctcactct cagctgagca agatcctcca acaacagtgc cttctaaaat gggaatcagt6540cctacctggg ttgctcgggt cttgaggcaa acgatttaaa cctgtctctt ctgtctgcca6600tttgcttcaa acacactgat cacttttccc aatttttttt gcttcttctc ccttttatca6660tgggaaattt taaatgcaca taaaggtagc aataataata ataatggccc cccctgccca6720aggtacccat taccagcttc aacaatcatc atcttagggc cagtcttctt tcctctatac6780tccaccttcc accagttatt ttggagcaga catccaaaat tgttcccagg caccatgtca6840gttcacgctt caagatttcg ctacaccgta tctctaagag ataagcacta cttaaaaacc6900
ataaccacaa tgccatgata tgccccaaaa gattccattt agtaatttct caaatgcgat6960tgtgagtatg aaattgctca gtgatctgag acgtcttatc tcggcatgaa gatttgtcat7020gattctgagc ttgcagaggc ccctcttgct gctcctatgc tgatcggtta acccatcgcc7080ctcctcagct gtgggtccca catctccctg aaagaacgcc ctcaccttcc cttcttcctg7140agagcttggc acatggaaat gactcagagg cttcactcca gtcctccccc tgcaccccag7200gcaggtggac cctgcctttt agtggctcag gtatcacttc agcatgtggc atgtagatat7260taggagaagg gtctctatga aggtccaagg ggggagccag gtggccccgc ccttgctccc7320catggctcct agggaaaatg gggaccctcc tgcacattta gggctgttcc agggctgtct7380ggccaaagag gagacagaag agaaattcac aggagaaact gaaagaggcc acaggcgtct7440tttttggttt ttaaggaaca ccagatactt cagaagctat cagaaatata tttttgaata7500aaaaatctaa ctggctccaa attctgctgt gttccctgaa cagactcttg atatgatatc7560ccttcctttg ttttggagga ttttccactt ccttataaca ggtttagggt ggtggagttt7620gagacataga tctctggatt tgggaccaat ctgcctgcca cacacagtag aatttggctg7680tgagttagca gagtcattct ccactgtgct ggggcctgag ccgtgtagca tctgccttgc7740ttgccatgaa tagacgagac ttgcctccca cacagttgag gatctggctg caaatgatca7800agagagagca acgtctagat gggtgtccac taagcctgca ggatagataa tgccaggtgt7860ccttcttcca ggagaggaat tgttccactt gctggaactg tttttttggg cagatatttg7920tacgtagaac aactgttgta gatgcagcct ctttccttag atttataatg ctggaccctt7980cttagatggg gcagcatcct cccaacaggc cgggcaaatc tcccctgggg ccaggctctc8040caatgaggct ttctaaagtg tgactcctgg aaactggaca tagtttgcag gatacccaag8100agcctcattc agagcaggaa catgggcagg ctcgttgagg gcaggaaatt tgatggaaga8160gaattgtccc ccactctctg ctctttaggg gcctctgtct tagtaagaag gaggccaagg8220ctctgtcgtc tagaggcatt gcagttacca cagatcgcat gctcctcttg tgccaggcac8280ctgctgggcg ctctatgcac gctaggtcat tcagtcctca ccacggctga gaagtgagta8340gaatgattcc cattttactg atgaggcacc tgaggctcag ggaagtaact gagagttgcc8400cctgttgctg gaaagtagtg gcttgggaat tggaatgccg gcctaactcc aaagcccaca8460ctcttaaaac cactgcgctg ggtggctgct cctgccgcgg gctctctgct cccagactaa8520cctgtctcgc ttttcccctc cgctgcggcc actccctgaa cctcagaaga ggaggactgg8580agagaggacg aagacggtag tacagccttt ccttctgtgg tgctttctgc tgcctgctgt8640cccaagtgca gcctccttgt ccaggggccc tgttctgggg gctggggggt gtgagtaggc8700ggcagggacg gagtgggtca gtcgtttcct cccctgcctc ccaggggcca ggatcacagt8760tccaagctga tcatcatgcc tgaacttcag ggccactggc tcctcttcct ggttcctgga8820tccttcccct gggttgggtg gtgggaggga ccaaggctag ctggtctccc aagctgctcc8880aaatgtggcc atagagggga cctggcacct ggaagacagc agcgccaccc tgcccccgcg8940cacaccccag tgttccatgc tgggccctcc ttaggagctg gacagcacca agcagggtgg9000
ccaggtgttg gttggggggt ctggggacag agtcctctgg agagcagcca gggagactgg9060aaatagccag agcaggaagg acatgacgtc agccttcaga tgcgccctgc tgatggggag9120cacaggacca aggcaaggga gtgagaccag ggcttaattt tagaaagtgc gttctgacag9180ctatatctca agatgcagta ggtgggttgg ggaggcagta agctccccat ccttgggatg9240ttgcatggcc actgggtggg ctggggtata ttatatagag aaatgacacg tcagatgagg9300tggcagaggt gtgaacaaga tggcctaaag gtagacccca caatggccat gtccttcctc9360gctagccctc tgctttcaca ctttctagaa ggatcatttt gaggtaagac tcctgcaggg9420atcaaataaa aggcatctcc aggcttcaga gaggactcag acctgggaag ggaggacaga9480gggaatgaag gccaaccctt ctcccacgat ggtgtcttcc tcctgtctga ggtttttctt9540ctccctctgc caagaggcac ccacttccca gtgcatcagt gaacaggcat cacagaacac9600ttcctacagg cacagcccag gccaggcggc atcctgtctc ccttatctgt ttgtctgtct9660gtctacacca agtgcctgag tgagatgggg gccacatcct gccaaacaaa tagatgaaaa9720tagaaaaatc ctgcccactt tctggatagt acgaagatcc agatattgag tgtgccatcc9780agccacacag tcgtactctt ttggtttctt tgagatgtgg attgagggtg tctagagtca9840ctaggttcag gacaggagct tctggacacc tcggcttaag cagagcatgt tctgtggtgc9900cagacacggg tgaaacttct gggctggaaa gttgggaatg aggtggagtc ccatcatcag9960ggagtttgcc gggatgagtg gggctaagct gggtggcggg aggtagccga cagtcaaaac10020caagaatggc agccccccag cacgttgttg cccccaaatt catctggacc tagacgtctt10080gacccccatc cccactcccc gctgcccatt ctctgctctg ggttctgcct gatagcatga10140gtggggcctg cttcttcact ctgtctgctt cacttctcca gagcaggagg aggcagcgga10200agaggatgct gaagcagagg ctgagaccga ggagaccagg gcagaaggta agtctctggt10260tgagggtgca ggggcctcag ggggtggcga gagcccctgg agccattcct gaggcagtaa10320gaaacccccc agaacaggct ttcccatgtg cacctgactc tcctattgac taagattcaa 10380ccattgattg cccaatcaac aaacgttgac ccagcgcttc tcttgtgtca ggcagtcttg10440ggtccagggg aatgtgtgtg tgagagacag ctctgtaacc ccaaaaacca acagagtgca10500tcttggctag ggcttatctg tggggaaggc tcttgctggt ggcggagggg gggacttgag10560ctcagaacaa ggaccttgat tgatttctcg tgtttcattt agaagatgaa gaagaagagg10620aagcaaagga ggctgaaggt aaggatatca ggagagaggt acaagggagg caaaggaacc10680cctcacagca gctttggagg agaatgccca cagtgctctt tccagggaag tggatgtgca10740ctgagagggt ttgggagagg agaggacaga acttggtggc acttccaaag ttttagatgt10800tgagctttca actttgcccc ttctcccaga gaagttgcat tggtggcacc cagtgggaga10860ggggaccatt gtccagcccc ctggtctgga cagagcaatg ggacccagaa gtcatatcca10920cacatgaagc tcctagagct taggtgaaat cacttgtagg atgtggtgtc cgtaggatga10980aatcccaatg catagatggt catggtgggt cattgctgca gtcatcgtca tgctgcagcc11040
ttcaccaggg ttctaagtgg tcccagtcac ttctccaaag gggaggggac aaccagctgg11100ggcttggaat catgtcatca gcttctgccc tgtggccacc gggaagtcca aggggtaaca11160aagaaggcaa agacctggga ggggattcta gggccaggac ccttggggac ctttccaaag11220gccttgtcac tgtgaagcac aagagaagca aaattgcttt gcccagaact ggtgagtgag11280agaaggcttt gtgtgaagtt ccacactgcg tgagtgtgtg ccctgcagaa ctctatggga11340gggggagtgt ggcatctgca gcccccgctg ccttcattct cctggatgct tctggaatca11400gggctcccca gtgccgggag ggactcactg tgcagatggg gaaatggaaa tccacaggga11460tctagctcat cgagggcgga gttgggacca cttctggggc ccctgaccca tggctgtgtg11520cttctatctc ctccagatgg cccaatggag gagtccaaac caaagcccag gtgagtgggg11580aggcacctgg gtagagccgg gagcagaggc tcagggagag aggatgatga tggaacaggg11640tgcagtatgg tgcagtggac acgggctggg ggtttggtgg gcacagagca ccacagtaca11700gttgtacaag ttgtgtactg cacaagcgtc tcttcctaag ggagtgagtg agggctgaat11760tccacccaac actccatcac caatcgtgca ccctagcagg gatggggcta tgttcttcta11820gaggaagggc cctgaacgga cactctcctc tctcacagta tggccagaac accctcctcc11880atggccgagg tgggaccttg ggattaaggg aagcaaattg tggggagcca aacaatgaaa11940ccgtgccagc ataggcatgg cggcttcaga gagctgagag agggcaggac ggcttggtgc12000cacacacgtg aagcccacct gaaggtggtg tgtgctgggg ggggctgggg gatagggagc12060atttcccttt ttatgatgcc aaccctgcca gcagaggttg acccatggca cctctgccca12120ctcacaggct cttcccattt cagtggggcc ttctgaaacc agcccaagac atcccagatc12180catttatttg cccagtgcct tcccccttcc tggcctcttg tgcactgcgg tatctcattt12240cagctccaca cacctgaggg cagatgggga catgaagaat cagagaaccc ctgggtctca12300gtatgtgttg ggaccaggac caaactgcaa gactcccagg ttcatggcca gtttctgcgg12360ggtccaccag gggatttgaa gtccaagaag catggcatct tgtcacagct tctttgattc12420caagttgtgt ggctttgagc aagtcattct acctccctga gcctcagttc tcctaagtga12480gattaacggt acccacttca tgggcatatc atgagcatga agtgaaatag catatgtgaa12540agagctttgt gtattcccag gtgctgagca aggctgagga ctgccattgt tgacgtcagt12600gttactatca ttgctgtggt tggtcggggc agtgctggaa gattctctag gaaggatcag12660gccctgcctg tcctggacac cctcagtccc tgggtccaga atggggctga tgctgactat12720tcctctctcc aacaggtcgt tcatgcccaa cttggtgcct cccaagatcc ccgatggaga12780gagagtggac tttgatgtaa gcggtggctg tgggttgagt aggcctgggc tggggatagt12840cccaagggcc ctcagtgaca gagattttgt gaccttgggc tggggtagag cataggtggg12900atggggtgca gcacagccag gctgggtgcc catccatgag cgtggtcctg ggttcaggcc12960acagttaccc cttccctggc caggcgccat gccctgccag aggtcttttg cactgcgttg13020ggggtgtcta gcccacccat ctctcctctg gactctttgg agtggcagcc tctgagccgc13080agcggtccac ccacaggaca tccaccggaa gcgcatggag aaggacctga atgagttgca13140
ggcgctgatc gaggctcact ttgagaacag gaagaaagag gaggaggagc tcgtttctct13200caaagacagg atcgtaggtg tccagtctgc ccacctaaca ttctctgatg gcccagtctg13260tcctccatcc cttttgtgag gccccacctc ctccagacag ccttcctcgg cgcctcaaac13320ccagctaggt gtgaggtctc cttcagaggc cctccagcat tctgcacagc tcctgcagcc13380ctgactggtt tctcgggtcc ctgccttccc tccccatcct actggatgct ccttgactgc13440cagagctgag tctgatctgt ttcaggcctc ccccagggcc taattcaggc ccgggctgtg13500gactgattgg tcacaggcct gctgcgccac ccctgccctt gcctcctctt cccccgcaga13560tgaaggggag tgtgacctgc agaatcccac atccttctcc tgcagagcgt ggaggctgct13620ttgattgctt ttgtttctcc ccatcaaact tgccttccca cagacatgct gctctggctg13680gagcaatgac ttggccatct atccaagcat atggcacaga gcagctgcca gggcagggtg13740ggatggaggt gggggggcag cccagaagga gcctgcctga tgtctcccag ttgtggaggg13800cagtctcacc atgaggaatg ttggaggtgg gtcactgcag gtaccctggt gtgcacgtcc13860gtggagctgg ttgaaagtgg aggcccttgg aggccgggca ccattgcttc aagactctgg13920aaggaaccct cccccaggaa ttcccttgcc accccatgca ggtttctgta cctgcgatgt13980caccttctcc ctatgcacac ctgggtgggc tttgcctctt ctccttagga gaaacgtcgg14040gcagagcggg ccgagcagca gcgcatccgg aatgagcggg agaaggagcg gcagaaccgc14100ctggctgtga gtgaccccta gcccaggccc atggaggccc cccatgctcc cagctcctgc14160tgggccccca ggcccctctc tattcatcaa catgaatgaa atcagtcaag agacaatatt14220ggccgggtgc ggtggctcac gcctgtaatc ccagcacttt gggaggccaa ggcgggtaga14280tcacttgagg ttgggagttc gagaccatcc tgaccaacgg agaaaccctg tctctactaa14340aaatacaaaa ttagccaggc gtggtggcac atgccggtca tcctagctac tcaggaggct14400gaggcaggag aatcgcttga acccaggagg caaggttgca gtgagccgag gtcatgccat14460tgcactctag cctgggcaac aagagtgaaa ctccaactca aaaaaaaaaa aaaaggaaaa14520aaaagagaca atatcaatat caacctagga agtgctgggc attgtcttgg ctctgataat14580acatcagcaa acaagacaga aatgcctgcg tccttatgaa cgtgttattt tataagactc14640tccagccctc atcccttccc cagtgcagac ttcgtgggaa ccgaaggccc cgtagctctc14700ttcctgtgca gctgctgaag gcatttccag agcaacaggt cttccagggg cactcccagc14760ttaaggggat gacgagacct cacatttggg aatcaggacc tcattcaatc acgcagtcat14820ttctcagtca gtggactcct gtgggccagc actgtgctgg gagctaccct ctcagaaagc14880tccttgctga gcggagagaa agctgaactc acccataaag accacaagct tcagcccaga14940atcagggttt ccaatccttt cccctaattt gctttcttcc tccctgctgt aaatcaggaa15000gagagggctc gacgagagga ggaggagaac aggaggaagg ctgaggatga ggcccggaag15060aagaaggctt tgtccaacat gatgcatttt gggggttaca tccagaaggt aggtagggag15120cagcaggggt tgccaggaga tcctagtata gccctgagga atgaggtgtc cactgcagca15180
ggtagacttt aggtcaggtc ccaggaagag attcccagct gctgtgggtg gaagactgag15240gtctcctcat gcccagccct gagctggttt tcagcctgac cgcggcttgc actaggaggg15300gcttgctggg gtagggggct acaggcagag cctggggcac caatggtgcc ccccatgcct15360ggctccagca gtgctcagga gcccccaagg aggctgggtg cagctggaag agccttgtgc15420ctagagtcag agctctagtt ggagacccag ctctgccaca tacagttgtg tgaccttttg15480caacctctga gcctcggttt cctcaactgg cactcatatt gcctgccttg atgctttgag15540aagctcaaat gagctaccat ggaaagtgtc tatgtgccac acagatgtga ggttgtttgt15600tcctggaaac tcactctcga tccctaactt ttgtgcccca ttcctcctag gtcctccatt15660ctcgagggag gagggatatg tgaaattgat tttctctagg tagtgaagga atcaaaacat15720tttcttagat ttccagctta gtccctagct caggactagg ccaccccctg cctctgcccc15780catggtgacc acaccagcca agactttggc atcaaagtct tcatgctacc gaacagcccc15840tgctgtaacc ctcagaccca cgtcctagta aacccggctg actacagcga gtatctgaat15900cttctcttcc atgtctctcc ttgcctttgt cttcctgcct tctctctgtg tctctgttgc15960cgtcttggtc tttttctatg ggcctctctc tcatggtttc ccggtttagc aggcccaggt16020gggtaccaaa aacctcaagc cttcttcctc cccatagttt tggagagctc cctgggaggg16080gaaggcgcct tgctggaggg gaggagtgaa gagattgggc tggctgggga ggggggaagc16140tggtgagagg tgaaagagat tagttaggca aagaaggaag agactgacgt gatccttctt16200gcccctacct cagtttccct agggaataca tgtagttggt agttgggggg tgtggcagga16260agaagagcat aagaacctgg ccctcctgca ggccttgctc cacccccagg gggtttgggg16320agggttaggg gacagggagg gggcaatctg gccagtttac tctgcttccc acaccctcca16380gacagagcgg aaaagtggga agaggcagac tgagcgggaa aagaagaaga agattctggc16440tgagaggagg aaggtgctgg ccattgacca cctgaatgaa gatcagctga ggtgggggct16500gggaggaatg gtcctggggc actgcccgca tctgctctgg gaggggtcgg gccaagggca16560cttcttgctg tgagccacca gagggcagga ctgcctcaca tattttccca tggcaagttt16620ggtgggacca gagctgggcc ccagcaggtc gggccaactc ctttctgggc tttgctgatg16680gggaaagaga actgagcagg tgccccaccc ctctgagctt cacctaccca cctgcacacg16740ggtgtcagga caggggattg aactagatgc tctcctgcgc cagaagggct tctcctgctc16800cccgcttgtt cttggaactt tgccctggca gtccctggtg tccgttcctg agcactgggt16860gctgccgtct ggtccccagg ctgggtcagg cccagggggt gggctggggt acccttggca16920ggcctggagg tgggaaggag ggctgggatg ctgggggctg ggccgggacc aggacggagg16980cccaggaggg ccctttctta ctggacctcc ccattctcac ccttgcccgt gcagggagaa17040ggccaaggag ctgtggcaga cgatctataa cttggaggca gagaagttcg acctgcagga17100gaagttcaag cagcagaaat atgaggtggg ccgccatgct gtccccgccc agcatctcca17160tctcacactc ctcctggttc actgggtccg gtaatactgc tgcaggtccc tgggtccctg17220tccctattcc ccaacagccc ccttcagctc ctgcatctgc ccctgctgcc tggccttcag17280
cagtgttcca tgtccaccgc attgacgact gcttgctgga agtgtctgag agctcgctgg17340ggctgagcag agacactttc ctggtgttcc aaccctgggg gtctccaaca cgttgaggca17400gcagctcagt gatctgagct ggttacaagg accaggatgc accaagccag gacccccagt17460ggaaggggag tgctgccaac agagaggtgc ttctccccac atacacccaa ggtcctggtg17520tgggcacaat taggctgagc ctcaagctca cagtctttcg gagtcctatg tgcactaatg17580agggtcttag gtgaacagac accaggcaag gaaatggctt agaggacact gatgctgcat17640accggagctt agacctgggc gccagtcctt ccttacccac cacccccgag ccccggtccc17700agggcctctt tgctacctaa gggaagaatt cagcttcccc tggaaggtct cctttgctgc17760tcctgccaaa ccactcctcc ctgggcaaga agcccctcgc tgggcaggct caggctgcag17820tggctacagg gtactcccac ctcccaatac ggagagaggc tgtattgcct ggtgacagtg17880gcatggactt tggagccata atgcctgggt tgaatttcta cctgtgcccc tcactggctg17940tgtgacattg ggtgagttag tccactgttc cttgcctcca tttccacagg taacactaca18000atatacttca gagggtgatt gtgagggtta cagagataat actaattgtt attattgcta18060tagtgttcca accactgttc caagcatgtc ccatgtatta acttactatg ccctcatagc18120agccctatgg gttcatatct gggaaggtgc tcaggacaga gcctggcacc cactaaatgc18180tcagcaggtg tcagccattg ttatggcctc tctagtcctg tgccttccac ttttttctct18240ttttttggtt ccacactgaa ctctgcaccg gccaacagga cacagatttg ccaaactttg18300gggcagcacc ctgcaggggt ggtgcatggg gatgctactg ctcaaagggc acagcttccg18360ggatggtggg cagctgggca ggggtgcccc agaggggtct ggggctgggc tgctaggagg18420gctccatgac acagcctcca gctttgtgcc cagctctcag aggcccttct tatgggactc18480tcatatcctg aacctattat ggccctggga ccccacagtg ggaggcccat gaggcatcct18540ggaagcttct ccttggcttc tgcctgtggt acacgggccc ctcctgaccc ttaactatcc18600taacccctcc tactcttcca tgctcctcct tctcctcctg cactgctgca ctcagccccc18660ttctccccat ccccaggcca cctgggacct gagccagtca gctccagcgt tgctctttgt18720ccttcccact tttcttgcag atcaatgttc tccgaaacag gatcaacgat aaccagaaag18780tgtaagtgtc tgaggtcatt ctcgcctagc cctccccctg ccccctcctt ccctaccttc18840cagctatccc attcctcctt ggagggcccc aggctcccag cccttcctcc tctgcttcag18900cccacaggtt tccttctctg gctcctccgg ggcctcgtgc ttctctccct gtggcctctg18960cttgctggtg ggggtgaaat gtggggcgga gaagcttccc tccagcctca ggctgctgtc19020ctattctgcc cctggaggca gctccagcct gctcctctcc cctttggcac cccagtccta19080ccccagccgc atggtgacct actaccctgc ctgtgtctcc atgtcactgc gtcctgcttc19140ccctgcagct ccaagacccg cgggaaggct aaagtcaccg ggcgctggaa atagagcctg19200gcctccttca ccaaagatct gctcctcgct cgcacctgcc tccggcctgc actcccccag19260ttcccgggcc ctcctgggca ccccaggcag ctcctgtttg gaaatgggga gctggcctag19320
gtgggagcca ccactcctgc ctgcccccac acccactcca caccagtaat aaaaagccac19380cacacactga ctggcatttc tgtcacgtcc ccttcagaga gagagagaaa ctgaggcgag19440accctgctct cacaggtccc cggtgtctgc caagctctaa ggagctttcc cctgtctggt19500ctccctgctt gcctctagct ggggagaggg tggagggccc agggtgcagc ccaggaggca19560ggagcagtgg aaagggcttc agatcattgc tcctgggagt caccaaaaca gcacatggga19620aaagtgctgt tgagggggac agagtgttcc ctgcatgagt cactcactgg agaacaatgc19680aggactcttc ggatggttcc cgttctcttt ctcctcctag ccagggccct aggaaccagg19740tgtctgaggg acagggagct cttgaggaag gaaggaaggc cagttttatt gggcagctat19800tcaggcctga gttgttgaga ggtgtgggtt agtctgggtg cctcagtttc cccctcccat19860gatctgcaca tcctcgaggg cttaagtcac agggtcctga gctgaagagg acagcttggt19920ggcatggatt tcagttggca gaaagacaag gaaacgatga gagggcacca tcctcctctc19980cagaggagag cctgagacga cacattctct tgaccctcca ttcctttgtc aggcgtggaa20040tttcccccaa ttcctgattc cttcccttgg ctccccactt gccatccatc agcaagtgcc20100tcatgagctg tgtctggaaa ggcttcctgt ggtctcccag ccagagcaaa tccatttctg20160cttgctagag catgtgctgt cacagctatg ccatccaatg ccacactctg ttagacgggt20220ctcttcctgc aggcgtggct ctcatgctcc caggagacaa tgcagacatg ttatcctgtg20280ctgtatgcca agcactggga tccatgtagt gagagatgaa gaggaaatgg tccttgggcc20340acagggaggg gcttagcctg gggtctcggc ctcatttctt attcattcat tcgttcagtc20400attcaaatac ctcctgagca ccaactatgt gctagacact gtgttgggtg tggggtgctg20460tgatttaagc cagcacatcg ctcatggagc tcacagagct cacatccagc agcagggaga20520cagcaagcag aggtcccagc cctgggtgac aggggcgggt ggggggtgcg atgctgggga20580gaggcatagc cacgcaccac acctggccct ggcaggtggg aaggctttct ggaggaaaga20640gtgtctaggc cgagtaccag agggtgagga gggggaagtc aaggggaaga ggttgggggt20700ggggctggga acggcacata gaaagtttga gaagcaagag ccagcatggt gtgtttgaag20760agatatagtt attagcagaa tccaagcatc ttctggtggg gacaagaagg ctccatcata20820aatgccccca aaatggacag ggaggcagga cgcaggcctc aggcccaagg agggctgtca20880ccacgggctc tgggagaccc actggcagct cctggcacgc accagcccta ctatctcagt20940ttgccggata ggacagctgg ggcagtgccc tagcccctct ccccataaag gggcactgca21000cctctacccc cacctgccgc cttggctcca ccgcctatgc ctcagtgtct ccttggtgca21060acaagaggtc atgatgggcc gtgtgtctgg ggccctgtct cctgctcccc ctctcccagc21120agggtccttg tgaccatttc tctagtacag cggtccccaa cctttttggc accaaggacc21180agtttcttgg aagactattt ttccatggac aggggtgggg tggggaagaa aagtaggggt21240gggtgggtgg gggtggtttc aggatgaaac tattccactt cagatcgtca ggcaatagat21300tctcgtaagg agtatgcacc ctagatccct cgcatgcaca gttcacaata ggtttcacac21360tcctatgaga atctaatgct gctggctgct gatctgacaa gaggtggagc tcaggccgtc21420
atgctcgccc acccacagct cacctgctgt gcagcctggt tcataacagg ctatagactg21480gtagagtctg gtccacggtg cagaggttgg ggacccctgc tctagtagat gtggtctctc21540ttttaaaaat tgtgcccagg ccgagcgcgg tggctcatgc ctgtaatccc agcactttgc21600gaggccgagg caggcacatc atgaggtcag gagatcaagg ccatcctggg caacatggtg21660aaaccctgtc tttactgcac tccagcctgg caacagaacg agactccgtc tcaaaaaaaa21720aattagctgg gcatggtggc gcgtgcctgt agtagggctc gggaggctga ggcaggggaa21780tcgctcaaaa aaaaaaaaca actgtgccca gaggtgggca cagaagacac ccttgccctc21840cgactctgaa aagcccctaa gaccagatcc cacttaatct cttttctcct aaggtcacct21900ggtgttcagg aaagaacttc ggagtgtccc aggcgctgcc cccatggggg cctcacccag21960ttgaggtccc catcccatca tcttaagagg aacaccacag gttaacccaa gcgctgcctc22020taggcaggag atctgcagac acctggtctg catggaacct ggagcactaa tccataagtg22080gagcctggga aggggacctt gtcctatccc aggacagagg agaaagcaag tgagtgtcag22140ggtgcagggg cacacctggt ccatcagccc agtgcaggga gtcctgccaa tttcaaaagg22200caagggtggg ggcttcagac caagtggtcc tgtgctctcc ccataatatt gctagggaac22260agaaagatca tggatgtgtg cacagaacac actgagatag cttcacagat agggcctcca22320cacaccctcc tcagttcacc caccacttcc atcattcttg tgcttatgat ggtcctgaac22380caaacgttga aggtgcagca gtggccaaga gctgtcctgg gcctcctgac aactgaggag22440ctggatgcag cggggtgagt tgacgcccac ccagacactc tgacccccac tgtccccact22500gtcccctgca gggacctccc tctatgcctc tcagatccca tctcactgta ctttcgatcc22560atgacccatt gcctcatggg cctctcagca ccctgtgtac accaaatgct cagggaaaat22620tacttgcagg ctcttctcag ccctgagtca gaggtgaaga ctcttccgcc atcctgtcat22680cagattcgtt ctcctaacaa gctcgcatcc tgggcagagc ttgttcgtgt gatgcccact22740ttagaggtag agctgggaga gaacaaggtg ttcccccagg gctccttcgc ctgggaatcc22800agctcctcca gctggagccc cgatgctctg aagctagagc ctcactttct cccatcaaac22860tctggctctg ccccttccca gctctgggat tttggtcaaa ttccttgcct tctctgtgct22920gaagttcccc tatctaaaca atggggattg ttatgaaggc taaatgaaat aaacatgcag22980caactagcac agtgcttagt gcatagtgtg taatcagcac gagccactgc tactgccttt23040tggatgaaaa cacgttatta gcctttctca agggctcaag gtctgcagaa gaagagttca23100cccatgctgg gtctgggctg gctcctcctt gcctgtgtgg ttttagggaa cccttcaatg23160gctcctcttt cctcctggat tccacggcct ggtcttctcc ctcaccagat aggccaccag23220gggttggggg tgggtgggat ttgctgctac ggactgtccc tcctggcacg tggttcagcg23280tgtgccactg tctggatgga ggtgccagaa cttgttccca ggccaggctc cactccctac23340tctgcagctt gatttctggg aaaggtgggg cagggcctga gcttccaggg aacctgccct23400ggttggggga aatagctggg ctcagggata ggtctcaggg ccaggctctc taataggctc23460
ctgttgggta tggggcaggc tgggggtgca ggggagacca ggctggaccc catgttccca23520cagtgtagcc acgggcactc acttgcttct ctgggcttgg cttctcctct gaaagtccag23580tctgccctgt catccctacc aggaggaaga ctaagtgtga atttggggaa aatgctgctg23640atctgggtca gctcgtcttc tccccctgca cacataccct tcatgtgttt ctcgctctgc23700gccccccacg caggcactgg gccagctact ttacatatgt tctctccagc caaccatcca23760cagtccccag atcacaccgc atgttgcaga tgaggaaact gaggtacaga gagtttaggc23820aacatgccaa gggccattca gttagtaagt ggcaaagctg ggatttgaac ccaggtctat23880gtgacgccag agccaggatt cttcctaaca tgtggatctt gtagattgag gagcatccca23940aatctcccca gattgcagtg cttgggccag aatcagagcc tcccgtgggc tgacttgggg24000tgagggcaca gggcaggagt ccaggagctt gaccctctct gctgccctcc agctgcccac24060ctgggacctg acaggaggag atgtgctatg tctagcacat ggaggcggcc tctggaggga24120acagtagagg tggggttgag tggggctcta cccagggtgc aagagaatca ttggccagcc24180tcctccttct tgggagtaat tataccccat acctgtgtcc cagagtagtt ggggggatct24240gtgggtcatg gaagcacctg tcattacctt gtctgtgggt tacccctcga ctctgcaaag24300atagtgagta aacctcaggg tgggcagaat cctgggtcta gatgccagca gggcctatct24360ggctgttgtt gggggtggca gaggtgcttt agggaccctc tgcagtctac ctccagcctt24420acttttcagc caaatggagc tagctacttt tgtttctcca gcatgtccta tgctctccca24480cctctgcatg gctttttctt gcccttcttt ctgtctctgc ctatccaact gccctccgcc24540ttcctcaggg cctcgatgaa gtccctgttt ctccaagaag cctttgggac tccctcctga24600gcacctgggg cttcctgagc accagcgatg cctctggtga tgccttaaga gccgcacatt24660gaaggcccat tcactctggg cctcctgtgg ttcacagaaa ccaggactgg gtgcccagcc24720cagacctccc tgcctggcac tgttcccagg gcttcagccc cacccacctg ctcatcccag24780gttctcagct cccaccccag catctacagg aatttaaatt gctctcaaat gaagactcag24840gagaaaaatg tttccatact tgtgcagagc gccctgacct ggggcggggg ttgggggaag24900tagccccagc tccgccctgt ggccctgccc tcagtgctgg ccttggccac actggccaca24960cctgcagcac gccccaatcc caaagcagtt ttccccgtaa agccaggcct gagcaatgca25020aacctgaaga agcctggggc taggctgggg ctgctcttca ggaacgcagt gggcggggtg25080ggagaggtgg tgtgattccc aggctgagag gtgctgagat tgtgctgggt ttgctaaatg25140tgggacaggg agacctgttt aggatgagct gcctcacccc gtcctctccc cacccatccg25200taccctgcca attcccagaa gatgatgcca gctaggaatg caggttgatg aagataaagg25260cagaaggtca cttcacttct acctgggggc aatagacaaa gcagtgtttc cctctgaact25320tcacacagag actcctctgg ccccacatct cccacctgtt caggcccagg tgatgtggtg25380agcagtggtt tctgctggga gacacttggc ataatttgta agccagctac atgataatac25440taacaaatga tatttgcctc catatattag gcacctatcg tgtgccatat actatgttac25500gtaatttatg tccactctct aattacagta acatgcaaaa ttaggtccta tataataact25560
ccattttata cacaaggaaa ctgaggctca gagaagttag gtgactcatc caaggtcata25620cagggcagga tcctgattac tgtattttta ttacaatgtt aaaattattt gaatggtaca25680cttcctacca aatcaagtca ggcatctgat agaaacaaag aaaagcatat tttcaagaag25740tcccttctgt attttagcca acaaatattt gaataatttc tgattatata atgcaaagta25800cgagtgcatc gatccttatc atagaaaaac ttgtgtgaaa taatgttcaa atttgtctat25860tgcaaaaatt tgatcactca cctgggaaat ctggaattag gaatgtaaga tcttaccact25920gcctcttgct catataaagt ggcttgtgaa ttcacctagc cctcatccca ctcagttgcg25980gttggtggtt tcctcatctc tcccctacat ctagcctggg cacttcctgg gacctggggt26040cctgggttgt tcatccgtag atcccagtgg cctccatgca tgggaatgaa tacaggagaa26100aaatcattct caaattagat gatcttgttt aaggtttgat cttttaaata tcaaatatca26160gagagggaaa atatggcaaa ctaatcacat tagagttgca ttgtctttca cagttgtcaa26220agcactgtaa caagtccata ggatagtaac tttagaaaaa gaagaccttt gatcttggaa26280gggtcatacg tttacctcgc tcacatcata tcgatgcaag cattaaatct gcttgataac26340caatgtttct attagaaaat aggggtcact gacacattgg ttcagtcatt gtgtaaatcc26400aacacatatt tattaaacac atactctatt ctaggtactg gctagttatc agggttatac26460ctgaggacag accaagactg tttcctacct tcataaacaa gaggagaaaa gtattaaaca26520gacattagat cactggatag atagatagat gatagataga tagatagata gatagataga26580tagatagata gatagatagg agatagagat aggtgacaga tggatagatg gatagataga26640tagcagatag aaaagagata ggtagataga tgggaggaag gtagatagat agagataggt26700ggatacatac atgcatatat gcatagacac agacacatgt atgtacagat atagatatac26760atatgcagtg cctgggtctc aaattgtaaa aagagaaacc cagaggaaaa cagcagtgtg26820ctgtgaaaga gaacaggttg acataactta aacggagttt ggatgaggaa gcgtc 2687權(quán)利要求
1.一種分離的突變β-MHC基因或者其片段，其在對應(yīng)于Genbank登錄號giM57965.1列出的序列(SEQ ID NO1)中的下述位置處，含有選自下組的一個或多個突變10353G＞A，10429A＞C，10895A＞T，11811A＞C，13653A＞C，14449T＞C，14452G＞A，14557G＞A。
2.一種分離的突變cMYBPC基因或者其片段，其在對應(yīng)于Genbank登錄號giY10629列出的序列(SEQ ID NO2)中的下述位置處，含有選自下組的一個或多個突變4826G＞A，8697G＞A，8887G＞A，12101G＞A，13261G＞A，14262-14264de1AAG，14364de1G，18115-18116insGCAAG。
3.一種分離的突變cTnT基因或者其片段，其在對應(yīng)于Genbank登錄號giX90780列出的序列(SEQ ID NO3)中的下述位置處，含有選自下組的一個或多個突變4693C＞T，4769G＞A。
4.權(quán)利要求1-3中任一項的突變基因或片段，其中還包含額外的突變或核苷酸多態(tài)性。
5.由權(quán)利要求1-4任一項的突變基因或片段編碼的蛋白質(zhì)。
6.一種核酸，其可與權(quán)利要求1-4中任一項的突變基因或片段或者其互補序列特異性雜交，但不能與相應(yīng)的野生型基因或其互補序列的核酸雜交。
7.一種試劑盒，其中包含權(quán)利要求6所述的核酸，以及使用說明書。
8.一種檢測權(quán)利要求1-3中任一項所限定的突變的方法，包括應(yīng)用權(quán)利要求6所述核酸作為探針或引物檢測生物學(xué)樣品，或者應(yīng)用設(shè)計成在擴(kuò)增后將得到包含該突變的片段的引物對擴(kuò)增該生物學(xué)樣品并進(jìn)行檢測的步驟。
9.一種微陣列，其中包含權(quán)利要求6所定義的核酸。
10.一種篩選或評估藥物的方法，包括對攜帶權(quán)利要求1-4中任一項所述突變基因的細(xì)胞、組織、器官或動物個體給予一種或多種藥物，并評估其一個或多個指示肥厚型心肌病狀況的指標(biāo)，以指示疾病改善狀況。
全文摘要
本發(fā)明涉及一些肥厚型心肌病致病基因的新突變，以及它們在肥厚型心肌病治療和診斷方面的用途。
文檔編號C07K14/435GK1865440SQ20041010464
公開日2006年11月22日 申請日期2004年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月31日
發(fā)明者惠汝太, 宋雷, 鄒玉寶, 王虎, 宋曉東, 甄一松 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外心血管病醫(yī)院