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從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):3581926閱讀:552來源:國(guó)知局
專利名稱:從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及食品、醫(yī)藥領(lǐng)域,特別是涉及一種從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
現(xiàn)有技術(shù)中,已經(jīng)有人從菠菜、蠶砂、荷葉等不同植物葉片中提取葉綠素及其鹽類,但是利用甘草地上資源提取并制備葉綠素及其鹽類的技術(shù)尚未見報(bào)道;甘草地上部分(葉和葉莖)中還含有豐富的黃酮類生物活性成分,甘草葉黃酮有很好的抗癌、抗氧自由基、消炎、軟化血管等功效,特別是甘草葉黃酮中含有豐富的帶有異戊烯基的異黃酮,具有雌性激素樣活性,能預(yù)防和治療婦女更年期綜合癥,延緩婦女衰老;目前,國(guó)外僅有各種單體異黃酮的實(shí)驗(yàn)室分離、結(jié)構(gòu)鑒定及性質(zhì)研究,但從甘草地上部分提取分離異黃酮的生產(chǎn)工藝還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從甘草地上部分即從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供從甘草莖葉部分連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法所得到的葉綠素鋅鈉鹽的應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征在于以干燥、粉碎后的甘草莖葉為原料,首先加入乙醇回餾提取,所得提取液減壓蒸餾,回收溶劑,待料液變得粘稠時(shí),拌入聚酰胺,真空干燥,然后上大孔樹脂柱,(1)用水、乙醇梯度洗脫,收集陽性洗脫液,減壓濃縮,回收溶劑,即得粗異黃酮;(2)將乙醇洗脫后的大孔樹脂滲漉柱用二氯甲烷滲漉,濃縮,回收二氯甲烷后得墨綠色乙醇溶液,即為葉綠素,其中聚酰胺的添加量以能夠?qū)⒘弦喊鑴驗(yàn)橹?;上述用水、乙醇洗脫所得的粗異黃酮用乙醇溶解后,拌入硅膠,真空干燥后,上硅膠柱,用正己烷、氯仿、丙酮混合溶劑梯度洗脫后,減壓濃縮,干燥,即得甘草葉異黃酮產(chǎn)品,其中硅膠的添加量以能夠?qū)⑷芙庖喊鑴驗(yàn)橹?;上述滲漉后所得的墨綠色乙醇溶液,用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值到10-11,加熱回餾,冷卻至室溫,用石油醚萃取雜質(zhì)后,再用鹽酸調(diào)PH至2,加入硫酸鋅溶液,加熱回餾,鋅代后,加入水,攪拌,靜置分層,取上層液并將其用丙酮溶解后,再用醇鈉溶液調(diào)至堿性,蒸出溶劑,真空干燥,即得葉綠素鋅鈉鹽產(chǎn)品,其中硫酸鋅的濃度為5-15%;一種從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法得到的葉綠素鋅鈉鹽的應(yīng)用,即將其與甘草酸三鉀和木糖醇適當(dāng)調(diào)配,制成甘草葉保健飲料。
本發(fā)明得到的一種產(chǎn)品是甘草葉異黃酮,為黃褐色,該產(chǎn)品經(jīng)硅膠薄層展開,MgOAc顯色,在紫外燈下顯特征熒光,產(chǎn)品中含有帶異戊烯基的異黃酮(如下圖),有雌性激素樣活性,能預(yù)防和治療婦女更年期綜合癥,延緩婦女衰老,并具有消炎、抗癌、抗氧自由基等藥理功能,是一種價(jià)值昂貴的醫(yī)療保健品原料,在歐美等國(guó)有很好的銷售市場(chǎng)。
Gancaonin B結(jié)構(gòu)式本發(fā)明得到的另一產(chǎn)品葉綠素鋅鈉鹽,是一種墨綠色粉末,易溶于水,水溶液色澤翠綠透亮,穩(wěn)定性好,特別是本產(chǎn)品因含有甘草中的萜類、黃酮類和甘草甜素類化合物,有獨(dú)特的清香味和甜味,是一種具有清熱、解毒、潤(rùn)肺、保肝、補(bǔ)鋅等保健功能的綠色飲品。也可作為食品著色劑,化妝品添加劑及醫(yī)療保健品添加劑等。固體葉綠素鋅鈉經(jīng)甘草酸三鉀和木糖醇適當(dāng)調(diào)味,配成一種翠綠色,有特殊清香味的甘草葉保健飲料,將有很好的市場(chǎng)前景。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1稱取100g干燥的甘草莖葉,用800ml 95%乙醇,回餾3h,重復(fù)三次,合并提取液,減壓蒸餾回收溶劑至近干,拌入15g 80-100目聚酰胺,70℃真空干燥;大孔樹脂(HPD-100型大孔樹脂)用乙醇溶脹處理后裝柱(柱5×25,帶滲漉回流管,樹脂高12cm)。將拌了樣品的聚酰胺上大孔樹脂柱;
(1)分別用200mL蒸餾水、400mL40%乙醇,800mL90%乙醇洗脫,薄層層析法(TLC)跟蹤檢測(cè),收集陽性洗脫液,減壓濃縮,回收溶劑,得到5g粗異黃酮。將粗品用乙醇溶解,拌入5g 300-400目硅膠,70℃真空干燥后,上硅膠柱(3×20),樹脂高8cm。分別用100mL(正己烷∶氯仿=8∶2);100mL(正己烷∶氯仿=9∶1);300mL氯仿;100mL(氯仿∶丙酮=99∶1)洗脫,每份收集25mL,TLC跟蹤,合并陽性流出液,減壓濃縮,真空干燥,得甘草葉異黃酮產(chǎn)品,染料木素作標(biāo)準(zhǔn),UV法測(cè)定產(chǎn)品中異黃酮含量為20%左右,收率約2%。
(2)乙醇洗脫后的大孔樹脂滲漉柱用二氯甲烷滲漉,濃縮,回收二氯甲烷后得墨綠色乙醇溶液。以10%NaOH調(diào)PH值至11左右,加熱回餾。冷卻至室溫,用石油醚萃取葉黃素等雜質(zhì)后,再用HCl調(diào)至PH2,加入10%ZnSO4溶液20毫升,加熱回流,鋅代后,加入2倍體積水,攪拌,靜置分層,取上層葉綠素鋅酸層于三口瓶中,用丙酮溶解后,用醇鈉溶液調(diào)至堿性,蒸出溶劑,真空干燥,得葉綠素鋅鈉鹽產(chǎn)品一種墨綠色粉末,產(chǎn)品收率約2%,下部醇層回收乙醇。產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可借鑒GB3202-82標(biāo)準(zhǔn)以鋅換銅執(zhí)行。
實(shí)施例2稱取500g干燥的甘草莖葉,用4000ml 95%乙醇,水浴中回餾3h,重復(fù)三次,合并提取液,減壓蒸餾回收溶劑至近干,拌入60g 80-100目聚酰胺,70℃真空干燥;大孔樹脂(HPD-100型大孔樹脂)用乙醇溶脹處理后裝柱(柱6×30,帶滲漉回流管,樹脂高18cm)。將拌了樣品的聚酰胺上大孔樹脂柱;(1)分別用蒸餾水;40%乙醇;90%乙醇洗脫,TLC跟蹤檢測(cè),收集陽性洗脫液,減壓濃縮,回收溶劑,得到11.2g粗異黃酮。將粗品用乙醇溶解,拌入15g 300-400目硅膠,稱5g濕法上硅膠柱,分別用100mL(正己烷∶氯仿=8∶2);100mL(正己烷∶氯仿=9∶1);300mL氯仿;100mL(氯仿∶丙酮=99∶1)洗脫,每份收集25mL,TLC跟蹤,合并陽性流出液,減壓濃縮,真空干燥,得甘草葉異黃酮產(chǎn)品,染料木素作標(biāo)準(zhǔn),UV法測(cè)定產(chǎn)品中異黃酮含量為22%左右,收率為2.3%。
(2)乙醇洗脫后的大孔樹脂滲漉柱用二氯甲烷滲漉,濃縮,回收二氯甲烷后剩余墨綠色乙醇溶液,再以10%NaOH調(diào)PH值至11左右,加熱回餾。冷卻至室溫,用石油醚萃取葉黃素等雜質(zhì)后,再用HCl調(diào)至PH2,加入10%ZnSO4溶液20毫升,加熱回流,鋅代后,加入2倍體積水,攪拌,靜置分層,取上層葉綠素鋅酸層于三口瓶中,用丙酮溶解后,用醇鈉溶液調(diào)至堿性,蒸出溶劑,真空干燥,得葉綠素鋅鈉鹽產(chǎn)品一種墨綠色粉末,產(chǎn)品收率約2%,下層醇層回收乙醇,產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可借鑒GB3202-82標(biāo)準(zhǔn)以鋅換銅執(zhí)行。
實(shí)施例3稱取120mg甘草葉綠素鋅鈉溶于1升水中,用45-50mg甘草酸三鉀和3.2-3.6mg木糖醇適當(dāng)調(diào)節(jié)味道,即得一種翠綠色,有特殊清香味,甘甜可口的保健飲料。該飲料具有清熱、解毒、止咳、化痰、保肝、補(bǔ)鋅、防治心腦血管疾病等功效,特別適合兒童和中老年人、肥胖和糖尿病人飲用。若將木糖醇改成等量的白砂糖,可適合一般人群使用。
權(quán)利要求
1.從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征在于以干燥、粉碎后的甘草莖葉為原料,首先加入乙醇回餾提取,所得提取液減壓蒸餾,回收溶劑,待料液變得粘稠時(shí),拌入聚酰胺,真空干燥,然后上大孔樹脂柱,(1)用水、乙醇梯度洗脫,收集陽性洗脫液,減壓濃縮,回收溶劑,即得粗異黃酮;(2)將乙醇洗脫后的大孔樹脂滲漉柱用二氯甲烷滲漉,濃縮,回收二氯甲烷后得墨綠色乙醇溶液,即為葉綠素。
2.按照權(quán)利要求3所述的從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征是上述聚酰胺的添加量以能夠?qū)⒘弦喊鑴驗(yàn)橹埂?br> 3.按照權(quán)利要求1所述的從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征在于上述用水、乙醇洗脫所得的粗異黃酮用乙醇溶解后,拌入硅膠,真空干燥后,上硅膠柱,用正己烷、氯仿、丙酮混合溶劑梯度洗脫后,減壓濃縮,干燥,即得甘草葉異黃酮產(chǎn)品。
4.按照權(quán)利要求3所述的從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征是上述硅膠的添加量以能夠?qū)⑷芙庖喊鑴驗(yàn)橹埂?br> 5.按照權(quán)利要求1所述的從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征在于上述滲漉后所得的墨綠色乙醇溶液,用氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值到10-11,加熱回餾,冷卻至室溫,用石油醚萃取雜質(zhì)后,再用鹽酸調(diào)PH至2,加入硫酸鋅溶液,加熱回餾,鋅代后,加入水,攪拌,靜置分層,取上層液并將其用丙酮溶解后,再用醇鈉溶液調(diào)至堿性,蒸出溶劑,真空干燥,即得葉綠素鋅鈉鹽產(chǎn)品。
6.按照權(quán)利要求3所述的從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法,其特征是上述硫酸鋅的濃度為5-15%。
7.一種從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法得到的葉綠素鋅鈉鹽的應(yīng)用,即將其與甘草酸三鉀和木糖醇適當(dāng)調(diào)配,制成甘草葉保健飲料。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從甘草莖葉中連續(xù)提取葉綠素和異黃酮的方法及其應(yīng)用,該方法以干燥、粉碎后的甘草莖葉為原料,首先加入乙醇回餾提取,所得提取液減壓蒸餾,回收溶劑,待料液變得粘稠時(shí),拌入80-100目聚酰胺,真空干燥,然后上大孔樹脂柱,(1)用水、乙醇梯度洗脫,收集陽性洗脫液,減壓濃縮,回收溶劑,即得粗異黃酮;(2)將乙醇洗脫后的大孔樹脂滲漉柱用二氯甲烷滲漉,濃縮,回收二氯甲烷后得墨綠色浸膏,即為葉綠素。本發(fā)明所生產(chǎn)的甘草葉異黃酮是一種價(jià)值昂貴的醫(yī)療保健品原料,在歐美等國(guó)有很好的銷售市場(chǎng),所生產(chǎn)葉綠素鋅鈉鹽穩(wěn)定性好,是一種具有清熱、解毒、潤(rùn)肺、保肝、補(bǔ)鋅等保健功能的綠色飲品。
文檔編號(hào)C07D211/36GK1660808SQ200410010529
公開日2005年8月31日 申請(qǐng)日期2004年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月21日
發(fā)明者劉鋼, 雍曉靜, 張境, 匡銀虎 申請(qǐng)人:寧夏大學(xué)
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