專利名稱：：具有改進溶解性能的新的lhrh－拮抗劑的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及具有改進溶解性能的新的LHRH-拮抗劑、制備這些化合物的方法、包含這些化合物的藥物以及這些藥物治療激素依賴性腫瘤和激素影響的非惡性疾病如良性前列腺增生(BPH)和子宮內膜易位的用途。為定義肽應用的術語與IUPAC-IUB-委員會關于生物化學命名所解釋的術語相符(EuropeanJ.Biochem.1984，138，9-37)，其中與習慣的表示相符N-端的氨基在左邊，C-端的羧基在右邊。LH-RH-拮抗劑如按發(fā)明的肽包括天然存在的和合成的氨基酸，對此首先包括Ala，Val，Leu，IIe，Ser，Thr，Lys，Arg，Asp，Asn，Glu，Gln，Cys，Met，Phe，Tyr，Pro，Trp和His。每一氨基酸殘基的縮寫是基于氨基酸的普通名稱，它們是Ala＝丙氨酸，Arg＝精氨酸，Gly＝甘氨酸，Leu＝亮氨酸，Lys＝賴氨酸，Pal(3)＝3-(3-吡啶基)丙氨酸，Nal(2)＝3-(2-萘基)丙氨酸，Phe＝苯丙氨酸，Cpa＝4-氯苯丙氨酸，Pro＝脯氨酸，Ser＝絲氨酸，Thr＝蘇氨酸，Trp＝色氨酸，Tyr＝酪氨酸和Sar＝肌氨酸。如果無其它說明，所有這里描述的氨基酸都是L-系列。例如D-Nal(2)是3-(2-萘基)-D-丙氨酸的縮寫以及Ser是L-絲氨酸的縮寫。賴氨酸側鏈中ε-氨基的取代是通過Lys后置于括號中的標志、任選用縮寫表示。所用的其它縮寫是Ac乙?；鵄tz3-氨基-1，2，4-三唑-5-羰基B4-(4-脒基-苯基)-氨基-1，4-二氧代-丁基Boc叔丁基氧基羰基Bop苯并三唑-1-氧基-三-(二甲基氨基)-六氟磷酸鏻DCC雙環(huán)己基碳化二亞胺DCM二氯甲烷Ddz二甲氧基苯基-二甲基亞甲基氧基-羰基(二甲氧基二甲基-Z)DIC二異丙基碳化二亞胺DIPEAN，N-二異丙基乙胺DMF二甲基甲酰胺Fmoc芴基甲基氧基羰基HF氫氟酸HOBt1-羥基苯并三唑HPLC高壓液相色譜Me甲基TFA三氟乙酸Z芐基氧基羰基本發(fā)明的肽是黃體生成素釋放激素(LH-RH)的類似物的，該激素具有p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2，[LH-RH，戈那瑞林]的結構。在20多年中研究人員尋求LH-RH-十肽的選擇性高效拮抗劑[M.Karten和J.E.Rivier，EndocrineReviews7，44-66(1986)]。對這些拮抗劑的高度興趣是基于其在內分泌學、婦科學、避孕和癌癥領域的有益作用。已合成了大量潛在的LH-RH-拮抗劑化合物。至今發(fā)現(xiàn)的最令人感興趣的化合物是對LH-RH-結構進行修飾的那些。第一批高效的拮抗劑是通過在1，2，3和6或2，3和6位引入芳香氨基酸基團得到的。這些化合物的一般描述如下首先表明在LH-RH肽鏈中取代了原始存在的氨基酸的氨基酸，其中發(fā)生交換的位置通過數(shù)字上標標明。此外通過后置的符號″LH-RH″表明其涉及LH-RH-類似物，其中發(fā)生了交換。已知的拮抗劑是[Ac-D-Cpa1，2，D-Trp3，6]LH-RH(D，H.Coy等，在Gross，E.和Meienhofer，J.(編輯)Peptides；Proceedingsofthe6thAmericanPeptidSymposium，S.775-779，PierceChem.Co.，RockvilleIII.(1979)[Ac-Pro1，D-Cpa2，D-Nal(2)3，6]LH-RH(US-PatentNr.4.419.347)和[Ac-Pro1，D-Cpa2，D-Trp3，6]LH-RH(J.L.Pineda，等，J.Clin.Endocrinol.Metab.56，420，1983).為了改進拮抗作用后來引入堿性氨基酸，例如在6-位引入D-Arg。例如[Ac-D-Cpa1，2，D-Trp3，D-Arg6，D-Ala10]LH-RH(ORG-30276)(D.H.Coy，等，Endocrinology100，1445，1982)；和[Ac-D-Nal(2)1，D-Phe(4-F)2，D-Trp3，D-Arg6]LH-RH(ORF18260)(J.E.Rivier等，在VickeryB.H.Nestor，Jr.J.J.，Hafez，E.S.E(編輯).LHRHanditsAnalogs，S.11-22MTPPress，Lancaster，UK1984)。在WO92/19651、WO94/19370、WO92/17025、WO94/14841、WO94/13313、US-A5,300,492、US-A5,140,009、EP0413209A1和DE19544212A1描述了其它高效的LH-RH-拮抗劑。最近公開的具有6-位鳥氨酸-或賴氨酸構建單元修飾的化合物對應于如下分子式Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Xxx6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2，其中D-Xxx是式(VI)的氨基酸殘基其它已知的LH-RH-拮抗劑是Antarelix、Ganirelix和Cetrorelix。AntarelixAc-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2GanirelixAc-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-hArg(Et)26-Leu7-hArg(Et)28-Pro9-D-Ala10-NH2CetrorelixAc-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Cit6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2本發(fā)明的目的是提供具有提高的酶穩(wěn)定性和水溶性顯著改善的新的LH-RH-拮抗劑。這一目的通過下列通式(I)的化合物及其與可藥用酸的鹽，特別是乙酸鹽、雙羥萘酸鹽(Embonate)和三氟乙酸鹽得以實現(xiàn)，A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2(I)其中A為乙?；?-(4-氟苯基)-丙酰基，Xxx1為D-Nal(1)或D-Nal(2)，Xxx2-Xxx3為D-Cpa-D-Pal(3)或單鍵，Xxx4為Ser，Xxx5為N-Me-Tyr，Xxx6為D-Cit、D-Hci或通式(II)的D-氨基酸殘基其中n為數(shù)字3或4，R1為通式III的基團，-(CH2)p-CO-NR2R3(III)其中p為1到4的整數(shù)，R2為氫或烷基和R3為未取代或取代的芳基或雜芳基，或R1為3-氨基-1，2，4-三唑-5-羰基或R1為通式(IV)的環(huán)其中q為數(shù)字1或2，R4為氫原子或烷基，R5為氫原子或烷基和X為氧原子或硫原子，Xxx7為Leu或Nle，Xxx8為Arg或Lys(iPr)，Xxx9為Pro以及Xxx10為Ala或Sar。在本發(fā)明化合物中，其中Xxx6為D-[ε-N’-(咪唑烷-2-酮-4-基)-甲酰基]-Lys、D-(3-氨基-1，2，4，-三唑-3-羰基)-Lys，縮寫為D-Lys(Atz)或D-[ε-N’-4-(4-脒基苯基)-氨基-1，4-二氧代-丁基]-Lys，縮寫為D-Lys(B)的那些是特別優(yōu)選的。此外特別優(yōu)選的本發(fā)明化合物是Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2，Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(Atz)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2，Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2，Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2，Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-Ala10-NH2，Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-Sar10-NH2，Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-Sar10-NH2，3-(4-氟苯基)-丙酰基-D-Nal(1)1-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(Atz)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2，及其與上述可藥用酸的鹽。本發(fā)明化合物可用于治療激素依賴性腫瘤，特別是前列腺癌或乳腺癌以及其治療需要抑制LH-RH-激素的非惡性適應癥。為此將這些化合物與常規(guī)載體或助劑混合并制成藥物。式(I)化合物的合成既可通過傳統(tǒng)的片段縮合或者通過按Merrifield的方法經(jīng)固相合成，用側鏈中已經(jīng)用通式R1-COOH的羧酸酰化的D-賴氨酸順序合成，也可以通過十肽與相應的羧酸通過在D-賴氨酸6側鏈上的成酰胺反應進行。因此可在該方法的三個不同階段引入R1-CO-基在單一構建單元縮合到肽上之前，在賴氨酸或鳥氨酸嵌入肽鏈之后，但在下一個構建單元縮合之前或在所有構建單元縮合之后。式(I)化合物按已知方法合成，如通過純粹固相合成技術、部分固相合成技術(所謂片段縮合)、或通過傳統(tǒng)的溶液連接(參見M.Bodanszky，“PrinciplesofPeptideSynthesis”，SpringerVerlag1984)。例如固相合成法在教科書“SolidPhasePeptideSynthesis”J.M.Stewart和J.D.Young，PierceChem.Company，Rockford，III，1984和在G.Barany和R.B.Merrifield的“ThePeptides”，Ch.1，S.1-285，1979，AcademicPressInc.中有描述。傳統(tǒng)的溶液合成在“MethodenderOrganischenChemie(Houben-Weyl)，SyntheseyonPeptiden”E.Wünsch(Herausgeber)1974，GeorgThiemeVerlag，Stuttgart，BRD中詳細討論。逐級合成例如通過如下進行首先將其α-位的氨基被保護的羧基-端基氨基酸共價鍵連接到為此常用的不溶的載體上，脫去該氨基酸的α-氨基-保護基，在如此得到的游離氨基上連接下一個保護的氨基酸的羧基，按這種方式逐步將要合成肽的其余氨基酸按正確的順序連接，連接完所有氨基酸后將制好的肽從載體上解離下來并任選將其它存在的側功能保護基解離。逐級縮合通過用相應的、按常規(guī)方式保護的氨基酸按傳統(tǒng)的方式進行合成。單個氨基酸相互之間的連接按對此常規(guī)的方法進行，尤其考慮的方法是●在二環(huán)己基碳化二亞胺或二異丙基碳化二亞胺(DCC，DIC)的存在下的對稱酸酐法●普通碳化二亞胺法●碳化二亞胺-羥基苯并三唑法(參見ThePeptides，Volume2，Ed.E.Gross和J.Meienhofer編輯)。在片段偶聯(lián)中優(yōu)選應用無外消旋化作用的疊氮化物偶聯(lián)或DCC-1-羥基苯并三唑法，或DCC-3-羥基-4-氧代-3，4-二氫-1，2，3-苯并三嗪法。也可以使用片段的活性酯。N-保護的氨基酸的活性酯特別適合于氨基酸的逐步縮合，例如N-羥基琥珀酰亞胺酯或2，4，5-三氯苯基酯。氨解可很好的被具有大約乙酸酸性的N-羥基化合物，如1-羥基苯并三唑催化。作為中間的氨基保護基可使用可氫化除去的基團，例如芐基氧基羰基(＝Z-基團)或弱酸可解離基團。作為α-位氨基的保護基可考慮的有例如叔丁基氧基羰基，芴基甲基氧基羰基，芐酯基己及芐硫酯基(任選各具有對-溴或對-硝基-芐基)，三氟乙?；?，鄰苯二甲酰基，鄰-硝基苯氧基乙?；郊谆?，對-甲苯磺?；?，芐基，苯環(huán)上取代的芐基(對-溴或對-硝基芐基)和α-苯基乙基。對此也可參閱JesseP.Greenstein和MiltonWinitz，ChemistryofAminoAcids，NewYork1961，JohnWileyandSons，Inc.，Volume2，例如883頁和下列“PrinciplesofPeptideSynthesis”，SpringerVerlag1984，“SolidPhasePeptideSynthesis”J.M.Stewart和J.D.Young，PierceChem.Company，Rockford，III，1984，G.Barany和R.B.Merrifield“ThePeptides”，Ch.1，S.1-285，1979，AcademicPressInc.以及ThePeptides，Volume2，Ed.E.GrossandJ.Maienhofer，AcademicPress，NewYork。這些保護基基本也適合保護相應氨基酸的其它側功能基(OH-基，NH2-基)。存在的羥基(絲氨酸，蘇氨酸)優(yōu)選用芐基和類似基團保護。其它非α-位氨基(例如ω-位氨基，精氨酸的胍基)優(yōu)選正交保護。除經(jīng)R1-CO-基團修飾的賴氨酸或鳥氨酸外，單一的氨基酸構建單元可商購獲得。制備最后提及化合物的可能方法如下1.將α-羧基酰胺化。2.將ε-氨基用Z-基團保護。3.將α-氨基用Boc-基團保護，以使得到稍后去掉氨基保護基時的選擇性。4.將ε-氨基上的Z-基團脫掉。5.在ε-氨基上引入希望的R4-CO-基。6.將α-氨基上的Boc-基團脫掉。7.賦予α-氨基以Z-基團。對于通過賴氨酸的氨基與相應的羧酸反應引入R1-CO-基一般適用與上述氨基酸的連接相同的方法。但特別優(yōu)選的是應用碳化二亞胺，例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺和1-羥基苯并三唑的縮合。用于連接氨基酸的反應在對此常規(guī)的惰性的溶劑或懸浮劑(例如二氯甲烷)中進行，其中為改善溶解性可任選加入二甲基甲酰胺。不溶性聚合物適合用作合成載體，例如在有機溶劑中可溶脹的珠狀聚苯乙烯樹脂(例如聚苯乙烯和1％二乙烯基苯的共聚物)。在甲基二苯甲基酰胺樹脂(MBHA-樹脂，即具有甲基-二苯甲基酰胺基的聚苯乙烯樹脂)上合成保護的十肽酰胺可按下列流程圖進行，其在用HF從載體上解離后得到希望的肽C-端酰胺官能團流程圖肽合成法Nα-Boc-保護的氨基酸一般以三倍摩爾過量在二異丙基碳化二亞胺(DIC)和1-羥基苯并三唑(HOBt)的存在下于CH2Cl2/DMF中、90分鐘內偶聯(lián)，Boc-保護基與50％三氟乙酸(TFA)CH2Cl2溶液反應半小時脫掉。為驗證是否完全反應可用Christensen的氯醌試驗和Kaiser的茚三酮試驗。其它的游離氨基官能團通過在五倍過量的乙?；溥虻腃H2Cl2溶液中乙酰化保護。肽在樹脂上合成的反應步驟的順序如流程圖所示。為解離下樹脂結合的肽將固相合成的各終產(chǎn)物在真空下用P2O5干燥并在0℃下用500倍過量的HF/苯甲醚10∶1/V∶V處理60分鐘。在真空下蒸出HF和苯甲醚后將肽酰胺與無水乙醚攪拌得到白色固體，與沉淀出的聚合物載體的分離通過用50％的乙酸水溶液洗滌進行。通過在真空下小心的濃縮乙酸溶液可得到粘稠油狀的相應肽，這些粘稠油狀物在冷卻下加入無水乙醚轉化成白色固體。進一步的純化通過常用的制備高壓液相方法(HPLC)進行。將肽轉化成酸加成鹽可通過肽與酸按已知的方法完成。反之，游離肽可通過其酸加成鹽與堿反應得到。肽雙羥萘酸鹽可通過肽的三氟乙酸鹽(TFA-鹽)與游離的雙羥萘酸或雙羥萘酸相應的二鈉鹽反應制備。為此，將肽-TFA鹽的水溶液與雙羥萘酸二鈉鹽在極性、非質子傳遞介質，優(yōu)選二甲基乙酰胺中的溶液混合并分離出形成的亮黃色沉淀。下列實施例用于說明本發(fā)明，并不對本發(fā)明構成限制。Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2合成按流程圖進行(肽合成法，第9頁)，由4.0gMBHA-樹脂(負載密度為1.11mmol/g)，用DIC/HOBt-偶聯(lián)。在用HF從聚合物載體上解離后得到4.87g粗品肽，并用標準的制備HPCI方法純化。在冷凍干燥后得到0.93gHPLC純產(chǎn)物，該產(chǎn)物與4-脒基苯基氨基-4-氧代丁酸在BOP作為偶聯(lián)劑存在下反應得到希望的化合物。再次用HPLC純化得到148mg結構式為C85，H112，N17，O15，Cl的目標化合物，具有正確的ESI-MS1647.6(M+H+)，(計算值1645.8)和相應的1H-NMR譜。1H-NMR(500MHz，DMSO-d6，δ用ppm表示)10.4，s，1H和9.13，s，2H，和8.94，s，2H，4-脒基苯胺的NH；8.6-7.35，多個m，芳香H和NH；7.22和7.18，2d，4H，芳香H(對-Cl)Phe；6.95和6.58，2d，4H，芳香HTyr；5.2-3.5，多個m，Cα-H和脂族H；3.3-2.4，多個m，Cβ-H和N-CH3，2.1-1.1，多個m，其余的脂族H，1.68，s，3H，乙?；?；1.20，d，3H，Cβ-HAla；0.83，dd，6H，Cδ-HLeu研究了本發(fā)明式I化合物在其受體上的結合。研究方法主要依據(jù)Beckers等，Eur.J.Biochem.231，535-543(1995)中描述的方法。按上述公開的合成得到的Cetrorelix應用IodoGen-試劑(Pierce)用[125I](Amersham；比活性為80.5Bq/fmol)碘化。反應混合物經(jīng)反相高效液相色譜純化，由此得到不含未標記肽的單碘化的Cetrorelix。各約80％的[I125]-Cetrorelix和未標記的本發(fā)明化合物適合用于特異性受體結合?？梢杂孟率龇椒?和2測定本發(fā)明化合物的體外作用。對此測定了在用[I125]-Cetrorelix(方法1)的結合試驗中的結合親和性和用曲普瑞林作為激動刺激劑(方法2)的功能活性。方法1受體結合試驗按Beckers，T.，Marheineke，K.，Reilaender，H.，HilgardP.(1995)“具有穩(wěn)定超表達人類垂體受體促性腺激素釋放素(GnRH)的哺乳動物細胞系的選擇和表征(Selectionandcharacterizationofmammaliancelllineswithstableoverexpressionofhumanpituitaryreceptorsforgonadoliberin(GnRH))”Eur.J.Biochem.231，535-543.為研究受體結合，將Cetrorelix應用IodoGen-試劑(Pierce)用[125I](Amersham；比活性為80.5Bq/fmol)碘化，反應混合物經(jīng)高效液相色譜用交換相純化，由此得到不含未標記肽的單碘化的Cetrorelix。約80％的[125I]-Cetrorelix能夠用于特異性受體結合。受體結合試驗用完整的細胞在生理條件下進行(如Beckers等1995描述的方法)。將表達人類LHRH-受體的穩(wěn)定轉染的LTK-細胞的亞鋪滿培養(yǎng)物通過在NaCl/Pi(137mMNaCl，2.7mMKCl，8.1mMNa2HPO4，11.47mMKH2PO4)/1mMEDTA中培養(yǎng)而分離出并通過離心收集。將細胞再分散到結合緩沖液(無H2CO3的DMEM，含有4.5g/l葡萄糖，10mMHepespH7.5，0.5％(質量/體積)BSA，1g/l桿菌肽，0.1g/lSBTI，0.1％(質量/體積)NaN3)中。為進行競爭試驗將0.25×106細胞/100μl與約225pM的[125I]-Cetrorelix(比活性為5-10×105dpm/pmol)和不同濃度的未標記的本發(fā)明化合物作為競爭劑一起溫育。100μl結合介質中的細胞懸浮體在400μl的小試管中的200μl84Vol.-％硅油(MerckTyp550)/16Vol.-％石蠟油上分層。在37℃、慢慢不停的搖動下溫育1小時后通過9000rpm(RotortypHTA13.8；HeraeusSepatec，Osterode/Germany)離心2分鐘將細胞從溫育介質中分出。將包含細胞沉淀物的小管底部割下，然后用γ-射線計數(shù)分析細胞沉淀物和上清液。非特異性結合的量在包括未標記的Cetrorelix在內的情況下在最終濃度為1μM下測定，并且一般小于等于總結合的10％。結合數(shù)據(jù)的分析用EBDA/配體-分析軟件(BiosoftV3.0)進行。方法2確定拮抗效力的功能分析該試驗按修改過的如Beckers，T.，Reilaender，H.，Hilgard，P.(1997)在“基于靈敏細胞蟲熒光素酶報道基因試驗的促性腺激素-釋放激素類似物的表征(Characterizationofgonadotropin-releasinghormoneanalogsbasedonasensitivecellularluciferasereportergeneassay”，Analyt.Biochem.251，17-23(Beckers等.1997)描述的方法進行。每孔10,000個表達人類LHRH-受體和蟲熒光素酶-報道基因的細胞在微量滴定板中用含有添加劑和1％(v∶v)FCSi的DMEM培養(yǎng)24小時。然后用1nM[D-Trp6]LHRH刺激細胞6小時。在刺激前加入拮抗性的本發(fā)明化合物，最后為了定量細胞的Luc-活性將細胞溶解。由劑量-作用-曲線計算IC50-值通過用Hill-模型(ProgrammEDX2.0vonC.Grunwald，ArzneimittelwerkDresden)進行非線性回歸分析完成。Luc-活性的定量基本如(PromegaTechnicalBulletins#101/161)的描述用各蟲熒光素酶-測試體系(PromegaE4030)重復測定兩次。通過加入輔酶A(CoA)發(fā)生有益動力學的蟲熒光素(Luciferyl)-CoA的氧化。除去微孔滴定板中的培養(yǎng)介質后，加入100μl溶解緩沖液(25mMTris-磷酸鹽pH7.8，2mM二硫蘇糖醇，2mM1，2-二氨基環(huán)己烷-N，N，N’，N’-四乙酸(CDTA)，10％(v∶v)甘油，1％(v∶v)TritonX-100)將細胞溶解。在室溫下溫育15分鐘后將10μl細胞溶解液轉移到適合于發(fā)光檢測的白色微量滴定板(Dynatech)中。酶反應通過加入50μl測試緩沖液(20mMTricinpH7.8，1.07mM(MgCO3)4Mg(OH)2，2.67mMMgSO4，0.1mM乙二胺四乙酸(EDTA)，33.3mM二硫蘇糖醇，270μM輔酶A，470μM螢火蟲(PhotinusPyralis)-蟲熒光素，530μMrATPNa2)引發(fā)。1分鐘后用EG&GBertholdMicroLumatLB96P測定具有5分鐘信號半數(shù)時間的發(fā)光1秒鐘。用這種方式得到下列體外測定數(shù)據(jù)，其中KD為結合親和性和IC50為功能活性和pM表示每升皮摩爾n.b.＝未測定()＝彼此獨立試驗次數(shù)權利要求1.通式I的化合物及其與可藥用酸的鹽A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2(I)其中1A為乙酰基或3-(4-氟苯基)-丙?；?，Xxx1為D-Nal(1)或D-Nal(2)，Xxx2-Xxx3為D-Cpa-D-Pal(3)或單鍵，Xxx4為Ser，Xxx5為N-Me-Tyr，Xxx6為D-Cit，D-Hci或通式(II)的D-氨基酸殘基其中n為數(shù)字3或4，R1為通式III的基團，-(CH2)p-CO-NR2R3(III)其中p為1-4的整數(shù)，R2為氫或烷基和R3為未取代的或取代的芳基或雜芳基，或者R1為3-氨基-1，2，4-三唑-5-羰基或R1為通式(IV)的環(huán)其中q為數(shù)字1或2，R4為氫原子或烷基，R5為氫原子或烷基和X表示氧原子或硫原子，Xxx7為Leu或Nle，Xxx8為Arg或Lys(iPr)，Xxx9Pro及Xxx10為Ala或Sar。2.權利要求1的化合物，其中的鹽為乙酸鹽，三氟乙酸鹽，或雙羥萘酸鹽。3.權利要求1或2的化合物，其中Xxx6為D-[ε-N’-(咪唑烷-2-酮-4-基)-甲?；鵠-Lys，D-(3-氨基-1，2，4-三唑-3-羰基)-Lys，縮寫為D-Lys(Atz)，或D-[ε-N’-4-(4-脒基-苯基)-氨基-1，4-二氧代-丁基)-Lys，縮寫為D-Lys(B)。4.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH25.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(Atz)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2.6.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2.7.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2.8.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-Ala10-NH2.9.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-Sar10-NH2.10.權利要求1的下式化合物Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Nle7-Arg8-Pro9-Sar10-NH2.11.權利要求1的下式化合物3-(4-氟苯基)-丙?；?D-Nal(1)1-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(Atz)6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2。12.一種藥物組合物，其中包含權利要求1-11之任一項的化合物。13.制備權利要求1的通式I化合物的方法，其中按常規(guī)方法在固相上或溶液中合成由用合適保護基保護的構建單元Xxxm構成的片段，其中m為1-10的整數(shù)且Xxx1是乙?；?，然后將片段經(jīng)節(jié)段偶聯(lián)連接至固相上，偶聯(lián)完成后按常規(guī)方法在在構建單元Xxx10上酰胺化的情況下將通式I化合物從固相載體上解離。14.權利要求1-11的化合物在制備治療激素依賴性腫瘤，特別是前列腺癌或乳腺癌癥以及治療需要抑制LH-RH-激素的非惡性適應癥的藥物中的用途。15.制備藥物的方法，其中將權利要求1-11的化合物與常規(guī)載體和助劑混合并加工成藥物。全文摘要本發(fā)明涉及含有N－甲基化氨基酸構建單元并具有改善的水溶性的肽。含有根據(jù)本發(fā)明肽的藥物可用于治療激素依賴性腫瘤和受激素影響的非惡性疾病。文檔編號C07K1/08GK1348462SQ00806734公開日2002年5月8日申請日期2000年3月11日優(yōu)先權日1999年3月17日發(fā)明者M·伯恩德,B·庫特斯徹,E·岡瑟,P·羅梅斯,T·里斯曼,T·貝克爾斯申請人:贊塔里斯股份公司