本發(fā)明涉及碳納米點(diǎn)的制備方法和作為熒光探針檢測三價(jià)鐵離子的應(yīng)用,屬于納米-熒光傳感器領(lǐng)域。
背景技術(shù):
近年來,碳納米點(diǎn)作為一種新型的熒光材料備受關(guān)注。它的表面除了含有豐富的羥基和羧基等水溶性官能團(tuán),還具有熒光強(qiáng)度高、光穩(wěn)定性好、耐光漂白等優(yōu)良的光學(xué)性能。因此具有低毒性和良好的水溶性的碳納米點(diǎn)有較好的生物相容性,在細(xì)胞標(biāo)記、細(xì)胞成像等方面有著廣泛的應(yīng)用前景。
重金屬對身體和人體健康有很大危害。鐵是其中的元素之一,并且廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)和日用產(chǎn)品,最終將被釋放到環(huán)境中。因此研究Fe3+與重要生物活性物質(zhì)的相互作用,建立新的Fe3+檢測方法,對于生物、化學(xué)、環(huán)境及醫(yī)學(xué)等都有著特殊意義。
碳納米點(diǎn)的制備方法已經(jīng)被廣泛研究。其中主要包括電化學(xué)制備法、強(qiáng)酸氧化法、激光輔助制備法、電弧放電法、高溫?zé)峤夥?、水熱合成法、微波法、超聲法等。目前大多?shù)方法都側(cè)重于水熱處理,雖然所用的原材料廉價(jià)易得,但是耗時(shí)較長。因此需要尋找一種以純天然綠色廉價(jià)的自然資源為碳源,且制備簡單、耗時(shí)較短的碳納米點(diǎn)的制備方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明是要解決現(xiàn)有的碳納米點(diǎn)的制備方法耗時(shí)較長的技術(shù)問題,而提供基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備方法及其作為熒光探針檢測三價(jià)鐵離子的應(yīng)用。該方法利用純天然綠色水果山竹來制備碳納米點(diǎn),并建立一種新的熒光檢測Fe3+的方法,該碳納米點(diǎn)的制備操作簡單、原料綠色、廉價(jià)易得。
本發(fā)明的基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備方法,按以下步驟進(jìn)行:
(1)將山竹去殼后,取山竹果肉放入坩堝焙燒,去除水分,得到固體;
(2)再將坩堝放置在電熱爐上加熱,直至固體的顏色由白色變成黃棕色,冷卻,粉碎,得到黃棕色粉末;
(3)將黃棕色粉末用超純水溶解,磁力攪拌,超聲,離心提取上清液;
(4)將上清液用0.45μM的微孔濾膜過濾,再用透析袋透析,將得到的碳納米點(diǎn)溶液真空干燥、粉碎,即得到碳納米點(diǎn)粉末(MCDs)。
上述制備的碳納米點(diǎn)粉末可作為熒光探針檢測三價(jià)鐵離子,鐵離子為水溶液中的鐵離子或生命體中的鐵離子。
其中,定性檢測三價(jià)鐵離子的方法具體是:
(1)將碳納米點(diǎn)(MCDs)溶于超純水中,形成MCDs水溶液,測定溶液的熒光光譜;
(2)上述的MCDs水溶液與待測水溶液混合,并調(diào)節(jié)至pH值6.0~8.3之間,測定其熒光光譜,如果混合溶液的熒光強(qiáng)度顯著減弱,則可判定待測水溶液中含有三價(jià)鐵離子。
定量檢測水溶液中鐵離子的方法為標(biāo)準(zhǔn)曲線法,具體如下:
(1)配制不同濃度的含F(xiàn)e3+的標(biāo)準(zhǔn)系列樣品,分別加入MCDs溶液,并調(diào)節(jié)至pH值6.0~8.3之間,并測試溶液的熒光光譜,讀出最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值,以鐵離子的濃度為橫坐標(biāo)、以最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)作圖,繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)將MCDs水溶液與待測水溶液混合,再將pH值調(diào)節(jié)至與標(biāo)準(zhǔn)樣品相同,測定其熒光光譜,讀出最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出待測水溶液中Fe3+濃度。
生命體中的鐵離子的定性檢測方法,如下:
將待測的生命體放置到含有MCDs水溶液中培養(yǎng)1~6h,然后用熒光顯微鏡檢測生命體的活細(xì)胞,再把用MCDs培養(yǎng)后的生命體放入含有三價(jià)鐵離子的水溶液中培養(yǎng)1~6h后,用熒光顯微鏡檢測生命體的活細(xì)胞。
本發(fā)明我們利用綠色廉價(jià)的山竹制備了一種熒光碳納米點(diǎn),并利用熒光光譜法研究了碳納米點(diǎn)(MCDs)與Fe3+的相互作用,使MCDs熒光猝滅并形成MCDs-Fe3+復(fù)合物,從而建立了一種基于山竹的碳納米點(diǎn)作為熒光探針熒光猝滅檢測Fe3+的方法,而且檢測不受其它常見金屬陽離子的明顯干擾。本發(fā)明的基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備和作為熒光探針檢測三價(jià)鐵離子的方法。不僅可以用于檢測水溶液中的鐵離子,而且還可以通過細(xì)胞成像,檢測生命體中的鐵離子。
附圖說明
圖1為實(shí)施例1中MCDs、MCDs/Fe3+的透射電鏡(TEM)圖;
圖2為實(shí)施例1中MCDs的激發(fā)和發(fā)射光譜圖;
圖3為實(shí)施例1中的濃度對MCDs熒光發(fā)射光譜的影響;
圖4為實(shí)施例1的MCDs對常見金屬離子的熒光響應(yīng)圖;
圖5為實(shí)施例1的其它常見金屬離子與Fe3+競爭時(shí),MCDs的熒光變化圖;
圖6為實(shí)施例1中MCDs和不同濃度的Fe3+的混合溶液的熒光光譜圖;
圖7為實(shí)施例1中Fe3+濃度對MCDs的最大熒光發(fā)射峰強(qiáng)度的影響。
具體實(shí)施方式
具體實(shí)施方式一:本實(shí)施方式的基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備方法,按以下步驟進(jìn)行:
(1)將山竹去殼后,取山竹果肉放入坩堝焙燒,去除水分,得到固體;
(2)再將坩堝放置在電熱爐上加熱,直至固體的顏色由白色變成黃棕色,冷卻,粉碎,得到黃棕色粉末;
(3)將黃棕色粉末用超純水溶解,磁力攪拌,超聲,離心提取上清液;
(4)將上清液用0.25~0.45μM的微孔濾膜過濾,再用透析袋透析,將得到的碳納米點(diǎn)溶液真空干燥、粉碎,即得到碳納米點(diǎn)粉末(MCDs)。
具體實(shí)施方式二:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是步驟(1)中焙燒溫度為100~120℃,焙燒時(shí)間為10min~30min。其它與具體實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施方式三:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一或二不同的是步驟(2)中粉碎后的黃棕色粉末的粒徑為2~5nm。其它與具體實(shí)施方式一或二相同。
具體實(shí)施方式四:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一至三之一不同的是步驟(4)中透析袋的截留分子量(MWCO)為3000~4000道爾頓。其它與具體實(shí)施方式一至三之一相同。
具體實(shí)施方式五:具體實(shí)施方式一制備的碳納米點(diǎn)粉末可作為熒光探針檢測三價(jià)鐵離子,鐵離子為水溶液中的鐵離子或生命體中的鐵離子。
具體實(shí)施方式六:本實(shí)施方式的定性檢測三價(jià)鐵離子的方法具體是:
(1)將碳納米點(diǎn)(MCDs)溶于超純水中,形成MCDs水溶液,測定溶液的熒光光譜;
(2)上述的MCDs水溶液與待測水溶液混合,并調(diào)節(jié)至pH值6.0~8.3之間,測定混合液的熒光光譜,如果混合溶液的熒光強(qiáng)度顯著減弱,則可判定待測水溶液中含有三價(jià)鐵離子。
具體實(shí)施方式七:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式六不同的是步驟(2)中所述的熒光強(qiáng)度顯著減弱是指熒光強(qiáng)度降至原來的50%以下。其它與具體實(shí)施方式六相同。
具體實(shí)施方式八:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式六或七不同的是步驟(2)中所述的熒光強(qiáng)度顯著減弱是指熒光強(qiáng)度降至原來的40%以下。其它與具體實(shí)施方式六或七相同。
具體實(shí)施方式九:本實(shí)施方式的定量檢測水溶液中鐵離子的方法為標(biāo)準(zhǔn)曲線法,具體如下:
(1)配制不同濃度的含F(xiàn)e3+的標(biāo)準(zhǔn)系列樣品,分別加入MCDs溶液,并調(diào)節(jié)至pH值6.0~8.3之間,并測試溶液的熒光光譜,讀出最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值,以鐵離子的濃度為橫坐標(biāo)、以最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)作圖,繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)將MCDs水溶液與待測水溶液混合,再將pH值調(diào)節(jié)至與標(biāo)準(zhǔn)樣品相同,測定其熒光光譜,讀出最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出待測水溶液中Fe3+濃度。
具體實(shí)施方式十:本實(shí)施方式的生命體中的鐵離子的定性檢測方法,如下:
將待測的生命體放置到含有MCDs水溶液中培養(yǎng)1~6h,然后用熒光顯微鏡檢測生命體的活細(xì)胞,再把用MCDs培養(yǎng)后的生命體放入待測水溶液中培養(yǎng)1~6h后,用熒光顯微鏡檢測生命體的活細(xì)胞,如果出現(xiàn)熒光顯著減弱,則可判定待測生命體中含有三價(jià)鐵離子。
為使本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)一步理解本發(fā)明,下面結(jié)合實(shí)施例和附圖進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1:本實(shí)施例的基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備方法,按以下步驟進(jìn)行:
(1)將新鮮的山竹去殼后,取三瓣山竹果肉放入坩堝焙燒干燥10min;
(2)將坩堝放置在電熱爐上加熱,直至固體的顏色由白色變成黃棕色,自然冷卻;
(3)將黃棕色粉末用100mL超純水溶解,磁力攪拌,超聲,離心提取上清液;
(4)將上清液用0.45μM的微孔濾膜過濾,再用MWCO=3500的透析袋透析,將得到的碳納米點(diǎn)溶液真空干燥,即得到碳納米點(diǎn)粉末(MCDs)。
將本實(shí)施例的碳納米點(diǎn)粉末(MCDs)加入到Fe3+溶液中,得到絡(luò)合物MCDs/Fe3+,測試MCDs、MCDs/Fe3+的透射電鏡(TEM)圖如圖1所示,其中圖1A)為MCDs的TEM圖,從圖1A)可以看出MCDs的粒徑大約為2-5nm左右,當(dāng)TCDs溶液與Fe3+混合之后,形成的絡(luò)合物MCDs/Fe3+的粒徑變大,大約為25nm(如圖1B所示)。
圖2為本實(shí)施例1中的MCDs的激發(fā)和發(fā)射光譜圖;其中曲線A為MCDs的激發(fā)光譜圖,在260nm和365nm處有兩個(gè)峰。其中曲線B為MCDs的發(fā)射光譜圖,其最大熒光發(fā)射峰在440nm。
測試不同濃度的碳納米點(diǎn)(MCDs)的熒光光譜變化,具體步驟如下:
稱取300mg本實(shí)施例制備的MCDs于100mL容量瓶中,用超純水溶解,振蕩超聲,定容至刻度,靜置,其濃度為3mg/mL。移取不同體積的上述溶液于不同的5mL容量瓶中,用超純水定容至刻度,激發(fā)波長為330nm,室溫條件下,利用熒光光譜儀,測定了不同濃度的MCDs水溶液的最大熒光發(fā)射峰強(qiáng)度;濃度對MCDs熒光發(fā)射光譜的影響圖如圖3所示,圖中的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10分別代表MCDs的濃度為0.001mg/mL、0.005mg/mL、0.01mg/mL、0.04mg/mL、0.07mg/mL、0.1mg/mL、0.3mg/mL、0.7mg/mL、1mg/mL、3mg/mL。從圖中可以看出,隨著濃度的增加,MCDs的最大發(fā)射峰發(fā)生紅移。最大發(fā)射峰熒光強(qiáng)度分別為21.10、22.74、27.04、70.15、100.6、135.7、213.6、168.8、114.6、18.66.可以看出,當(dāng)MCDs的濃度為0.3mg/mL時(shí),其熒光強(qiáng)度最大。
再測試本實(shí)施例制備的MCDs對不同金屬離子的熒光響應(yīng)情況,具體步驟如下:
MCDs濃度為0.3mg/mL時(shí),向MCDs的Tirs緩沖水溶液(pH=7.3)中分別加入400μmoL/L Fe3+和其它常見的金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Al3+),激發(fā)波長為330nm,測定了MCDs對不同金屬離子的熒光響應(yīng);得到的不同金屬離子的熒光響應(yīng)圖如圖4所示,從圖4可以看出,當(dāng)pH=7.3時(shí),MCDs對不同金屬離子的熒光響應(yīng)不同,發(fā)現(xiàn)MCDs可以高選擇性識別Fe3+,且大多數(shù)金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Co2+、Ni2+、Cd2+、Zn2+、Pb2+、Al3+)均不猝滅MCDs溶液的熒光光譜,僅有Fe3+顯著猝滅MCDs的熒光強(qiáng)度,Cu2+稍微猝滅了MCDs的熒光。其中:縱坐標(biāo)表示最大熒光發(fā)射峰的熒光強(qiáng)度值,橫坐標(biāo)表示金屬離子種類。
測試其它金屬離子對MCDs-Fe3+熒光光譜的影響,其具體步驟如下:
MCDs濃度為0.3mg/mL時(shí),向MCDs的Tirs緩沖水溶液(pH=7.3)中再加入400μmoL/L Fe3+和400μmoL/L的其它常見的金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Al3+),F(xiàn)e3+與其它金屬離子共存、其它金屬離子濃度與Fe3+濃度相同的條件下,在激發(fā)波長330nm下,測定了其它金屬離子對MCDs-Fe3+熒光光譜的影響。得到的其它常見金屬離子與Fe3+競爭時(shí)MCDs的熒光變化圖如圖5所示,從圖5可以看出其它常見的金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Al3+)對MCDs/Fe3+的熒光光譜均無明顯干擾,僅Cu2+輕微的猝滅了MCDs/Fe3+的熒光強(qiáng)度,使MCDs/Fe3+在440nm處的熒光強(qiáng)度從61減弱到53。
將3mg本實(shí)施例制備的MCDs溶解于10mL中性純水中,并加入1mL,濃度為0.1mol/L的Tris緩沖溶液,用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH=7.3,此時(shí)MCDs的濃度為0.3mg/mL,Tris濃度為0.01mol/L。之后再向該溶液中加入不同體積的0.05mol/L的Fe3+,在激發(fā)波長330nm下,測定Fe3+濃度在0-1635μmol/L范圍內(nèi)MCDs熒光光譜,得到的MCDs和不同濃度的Fe3+的混合溶液的熒光光譜圖如圖6所示,從圖6可以看出,隨著混合溶液中Fe3+濃度的增加,MCDs在440nm處的熒光峰強(qiáng)度逐漸減弱,從而可以實(shí)現(xiàn)MCDs對Fe3+的熒光檢測。以Fe3+濃度為橫作標(biāo)、以最大熒光發(fā)射峰強(qiáng)度為縱作標(biāo)作圖,得到的Fe3+濃度對MCDs的最大熒光發(fā)射峰強(qiáng)度的影響曲線圖如圖7所示,從圖7的插圖可知,F(xiàn)e3+濃度在15-175μmol/L范圍時(shí),MCDs在440nm處的熒光強(qiáng)度與Fe3+濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系(線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9803),對空白樣進(jìn)行20次平行測定,按3σ/K(σ為空白樣的標(biāo)準(zhǔn)偏差,K為線性方程的斜率)并計(jì)算出檢出限為5.25×10-8mol/L,說明本實(shí)施例制備的MCDs可以高靈敏的檢測Fe3+。
將酵母細(xì)胞在本實(shí)施例制備的MCDs溶液(0.3mg/mL)中37℃下培養(yǎng)2h,然后用400μM Fe3+溶液在37℃下處理上述酵母細(xì)胞,并且卵化2h,分別用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)MCDs在酵母細(xì)胞中的熒光成像,呈現(xiàn)明亮的藍(lán)色熒光;而用400μM Fe3+溶液卵化的酵母細(xì)胞,其熒光顯著猝滅。說明本實(shí)施例制備的基于山竹的碳納米點(diǎn)可以在細(xì)胞生命體內(nèi)檢測Fe3+。
實(shí)施例2:本實(shí)施例的基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備方法,按以下步驟進(jìn)行:
(1)將新鮮的山竹去殼后,取三瓣山竹果肉放入坩堝焙燒干燥20min;
(2)將坩堝放置在電熱爐上加熱,直至固體的顏色由白色變成黃棕色,自然冷卻;
(3)將黃棕色粉末用150mL超純水溶解,磁力攪拌,超聲,離心提取上清液;
(4)將上清液用0.45μM的微孔濾膜過濾,再用透析袋(MWCO=3500)透析,將得到的碳納米點(diǎn)溶液真空干燥,即得到碳納米點(diǎn)粉末(MCDs)。
本實(shí)施例制備的MCDs濃度為0.3mg/mL時(shí),向MCDs的HEPES緩沖水溶液(pH=7.3)中分別加入400μmoL/L Fe3+和其它常見的金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Al3+),激發(fā)波長為330nm,測定了MCDs對不同金屬離子的熒光響應(yīng);發(fā)現(xiàn)MCDs高選擇性識別Fe3+,且大多數(shù)金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Co2+、Ni2+、Cd2+、Zn2+、Pb2+、Al3+)均不猝滅MCDs溶液的熒光光譜,僅有Fe3+顯著猝滅MCDs的熒光強(qiáng)度。
將3mg本實(shí)施例制備的MCDs溶解于10mL中性純水中,并加入1mL,濃度為0.1mol/L的HEPES緩沖溶液,用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH=7.3,此時(shí)MCDs的濃度為0.3mg/mL,HEPES濃度為0.01mol/L。之后再向該溶液中加入不同體積的0.05mol/L的Fe3+,在激發(fā)波長330nm下,測定Fe3+濃度在0-1000μmol/L范圍內(nèi)MCDs熒光光譜,發(fā)現(xiàn)隨著混合溶液中Fe3+濃度的增加,MCDs在440nm處的熒光峰強(qiáng)度逐漸減弱,從而可以實(shí)現(xiàn)MCDs對Fe3+的熒光檢測。而且Fe3+濃度在0-150μmol/L范圍時(shí),MCDs在440nm處的熒光強(qiáng)度與Fe3+濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系(線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9902),對空白樣進(jìn)行20次平行測定,按3σ/K(σ為空白樣的標(biāo)準(zhǔn)偏差,K為線性方程的斜率)并計(jì)算出檢出限為5.22×10-8mol/L,說明本實(shí)施例制備的MCDs可以高靈敏的檢測Fe3+。
實(shí)施例3:本實(shí)施例的基于山竹的碳納米點(diǎn)的制備方法,按以下步驟進(jìn)行:
(1)將新鮮的山竹去殼后,取三瓣山竹果肉放入坩堝焙燒干燥30min;
(2)將坩堝放置在電熱爐上加熱,直至固體的顏色由白色變成黃棕色,自然冷卻;
(3)將黃棕色粉末用150mL超純水溶解,磁力攪拌,超聲,離心提取上清液;
(4)將上清液用0.45μM的微孔濾膜過濾,再用MWCO=3500的透析袋透析,將得到的碳納米點(diǎn)溶液真空干燥,即得到碳納米點(diǎn)粉末(MCDs)。
本實(shí)施例制備的MCDs濃度為0.3mg/mL時(shí),向MCDs的HEPES緩沖水溶液(pH=7.3)中分別加入400μmoL/L Fe3+和其它常見的金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Al3+),激發(fā)波長為330nm,測定了MCDs對不同金屬離子的熒光響應(yīng);發(fā)現(xiàn)MCDs高選擇性識別Fe3+,且大多數(shù)金屬離子(Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cr3+、Co2+、Ni2+、Cd2+、Zn2+、Pb2+、Al3+)均不猝滅MCDs溶液的熒光光譜,僅有Fe3+顯著猝滅MCDs的熒光強(qiáng)度。
將3mg本實(shí)施例制備的MCDs溶解于10mL中性純水中,并加入1mL,濃度為0.1mol/L的HEPES緩沖溶液,用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH=8.0,此時(shí)MCDs的濃度為0.3mg/mL,HEPES濃度為0.01mol/L。之后再向該溶液中加入不同體積的0.05mol/L的Fe3+,在激發(fā)波長330nm下,測定Fe3+濃度在0-1250μmol/L范圍內(nèi)MCDs熒光光譜,發(fā)現(xiàn)隨著混合溶液中Fe3+濃度的增加,MCDs在440nm處的熒光峰強(qiáng)度逐漸減弱,從而可以實(shí)現(xiàn)MCDs對Fe3+的熒光檢測。而且Fe3+濃度在0-125μmol/L范圍時(shí),MCDs在440nm處的熒光強(qiáng)度與Fe3+濃度呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系(線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9943),對空白樣進(jìn)行20次平行測定,按3σ/K(σ為空白樣的標(biāo)準(zhǔn)偏差,K為線性方程的斜率)并計(jì)算出檢出限為5.20×10-8mol/L,說明本實(shí)施例制備的MCDs可以高靈敏的檢測Fe3+。
將酵母細(xì)胞在本實(shí)施例制備的MCDs溶液(0.3mg/mL)中37℃下培養(yǎng)2h,然后用400μM Fe3+溶液在37℃下處理上述酵母細(xì)胞,分別用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)MCDs在酵母細(xì)胞中的呈明亮的藍(lán)色熒光;而用Fe3+溶液處理的上述酵母細(xì)胞的藍(lán)色熒光顯著減弱。說明本實(shí)施例制備的基于山竹的碳納米點(diǎn)可以在細(xì)胞生命體內(nèi)檢測Fe3+。