1.海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于按照以下步驟進(jìn)行:
1)、制備海藻粉末:將烘干后的海藻磨成粉末;
2)、制備產(chǎn)品A和種子液:海藻粉末與水按照質(zhì)量比1~10:100裝入發(fā)酵罐中,在100~150℃條件下滅菌15~35min,得到產(chǎn)品A;
將巨大芽孢桿菌活化與擴(kuò)培,制備巨大芽孢桿菌種子液X;將嗜糖芽孢桿菌活化與擴(kuò)培,制備嗜糖芽孢桿菌種子液Y;
3)、制備產(chǎn)品B:將種子液X接種到產(chǎn)品A中,種子液X用量為產(chǎn)品A質(zhì)量的1%~10%,發(fā)酵溫度為30~37℃,用酸堿調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH值為5~8,發(fā)酵時(shí)間為8~24h,得到產(chǎn)品B;
4)、制備產(chǎn)品C:調(diào)整產(chǎn)品B的pH至4.0~5.5,發(fā)酵罐內(nèi)溫度至0℃~5℃,保存2~5天,然后將溫度調(diào)整至20℃~35℃,得到產(chǎn)品C;
5)、制備產(chǎn)品D:將種子液Y接種到產(chǎn)品C中,種子液Y用量為產(chǎn)品C質(zhì)量的1%~10%,發(fā)酵溫度為30~34℃,用酸堿調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH值為5~8,發(fā)酵時(shí)間為8~24h,得到產(chǎn)品D;
6)、制備產(chǎn)品E:調(diào)整產(chǎn)品D的pH至4.0~5.5,發(fā)酵罐內(nèi)溫度至0℃~5℃,保存2~7天,然后將溫度調(diào)整至25℃~35℃,得到產(chǎn)品E;
7)、制備海藻提取液:將產(chǎn)品E壓濾得到海藻渣及濾液,其中濾液為海藻提取液;
8)、制備中量元素液體水溶肥:將步驟7)得到的海藻提取液與中量元素混合,攪拌至溶解完全,得到中量元素液體水溶肥;其中海藻提取液與中量元素的質(zhì)量比為40~70:30~60。
2.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:步驟1)中的海藻為銅藻、海帶、鼠尾藻和馬尾藻中的一種或者任意比例的兩種以上。
3.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:
步驟2)中巨大芽孢桿菌的活化與擴(kuò)培:液體培養(yǎng)基按照以下質(zhì)量比配成:羧甲基纖維素鈉10份、胰蛋白胨10份、磷酸氫二鉀3份、磷酸二氫鈉3份、氯化鐵3份、氯化鈉0.5份和蒸餾水1000份;巨大芽孢桿菌YIC~BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5:100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉(zhuǎn)速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應(yīng)維持在0.03Mpa,發(fā)酵時(shí)間為20h;
步驟2)中嗜糖芽孢桿菌的活化與擴(kuò)培:液體培養(yǎng)基按照以下質(zhì)量比配成:海藻酸鈉5份、硫酸銨5份、硫酸鎂1份、磷酸氫二鉀2份、硫酸亞鐵0.01份和蒸餾水1000份;嗜糖芽孢桿菌接種至液體培養(yǎng)基中,嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3和培養(yǎng)基的體積比例為5:100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉(zhuǎn)速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應(yīng)維持在0.03Mpa,發(fā)酵時(shí)間為20h。
4.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:步驟2)中所述海藻粉末和水的質(zhì)量比為4:100,滅菌溫度115℃,滅菌時(shí)間25min。
5.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:步驟4)中,調(diào)整產(chǎn)品B的pH至5.0,發(fā)酵罐內(nèi)溫度至5℃,保存3天,然后將溫度調(diào)整至20℃。
6.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:步驟6)中,調(diào)整產(chǎn)品D的pH至5.0,發(fā)酵罐內(nèi)溫度至5℃,保存3天,然后將溫度調(diào)整至25℃。
7.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:所述的酸堿調(diào)節(jié)劑為檸檬酸,草酸,醋酸,磷酸氫二鉀,碳酸鈉和醋酸鈉中的一種。
8.如權(quán)利要求1所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:所述中量元素是七水硫酸鎂、 四水硝酸鈣、 乙二胺四乙酸二鈉鎂、 乙二胺四乙酸二鈉鈣和七水硝酸鎂中的一種或任意比例的兩種以上。
9.如權(quán)利要求1至8之任意一項(xiàng)所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:所述巨大芽孢桿菌是巨大芽孢桿菌YIC~BM1,保藏號為CGMCC No.12156。
10.如權(quán)利要求1至8之任意一項(xiàng)所述的海藻復(fù)合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于:所述嗜糖芽孢桿菌是嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3,保藏號為CGMCC No.12155。