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海藻復合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法與流程

文檔序號:12742190閱讀:448來源:國知局

本發(fā)明涉及一種中量元素液體水溶肥的生產方法。



背景技術:

海藻肥料以天然海藻為原料,經過特殊生化工藝處理,提取并保留海藻天然活性成分,精煉濃縮而形成的一種新型有機肥料。海藻肥料具有提高作物產量和品質,抵抗病蟲害及不良環(huán)境以及改良土壤保持水土的功效,其應用于農業(yè)生產有巨大的市場需求和良好的發(fā)展前景。但是,要保障海藻肥料的質量,就必須把握好海藻原料和提取工藝兩個關鍵環(huán)節(jié)。

首先,海藻肥料質量的優(yōu)劣取決于所用的原料。目前,海藻肥生產企業(yè)所用的原料主要以褐藻為主,包括泡葉藻、昆布、海帶、馬尾藻等。其他藻類如墨角藻、滸苔、石莼、卡帕藻等也有少數企業(yè)在用。國外海藻肥企業(yè)絕大多數使用褐藻為原料,其中尤以泡葉藻應用最為廣泛如Seasol、Maxicrop等知名品牌,實際作用效果也表明泡葉藻是優(yōu)質的海藻原料。但是,我國沿海沒有泡葉藻分布,國內企業(yè)采用的原料種類繁雜,品質參差不一,造成海藻肥產品質量良莠不齊,甚至有些廠家打著“海藻肥”的幌子,直接勾兌褐藻酸,黃腐酸、氮磷鉀等冒充海藻肥,影響了海藻肥質量,擾亂了海藻肥市場。

其次,決定海藻肥質量的第二個因素是提取工藝。不同的提取工藝對海藻肥活性成分的種類和含量影響巨大。目前,海藻活性成分的提取方法主要有化學法、物理法以及生物法。化學法主要是利用酸、堿及有機溶劑處理海藻細胞,使細胞消解或內源物質增溶,該方法操作簡單,容易實現,也是國內外絕大多數海藻肥生產企業(yè)采用的方法。但是,化學試劑對海藻細胞內的活性物質成分的破壞是相當大的,并且殘留的有機試劑對環(huán)境也是潛在的危害。物理法的原理是控制壓力,溫度等物理環(huán)境條件,利用機械力使海藻細胞破碎,內容物釋放。該方法雖然工藝清潔、環(huán)境友好,但是對于儀器設備的要求嚴苛,反應條件變化劇烈,成本較高,難以實現大規(guī)模生產。生物法包括酶法降解和微生物發(fā)酵兩種方法,其主要原理是破壞海藻細胞壁結構并降解大分子物質為植物容易吸收利用的小分子物質,該方法反應溫和,產物多元化,整個生產過程安全環(huán)保無污染,是理想的海藻肥生產方法。

利用微生物發(fā)酵法生產海藻肥料的研究相對較少,僅有的幾例研究是選用多種微生物對海藻原料進行類似堆肥發(fā)酵或好氧發(fā)酵處理,存在發(fā)酵過程可控性差,發(fā)酵周期長,目標產物不明確等問題,難以滿足工業(yè)化生產要求的統一,穩(wěn)定,可控的標準,產品的質量難以保障。

針對農業(yè)用微生物的評價指標主要包括菌劑的純度和單位質量中的菌劑數量。因此,作為現有技術的菌劑制備方法一般是:在微生物適宜生存的溫度和pH條件下進行一次發(fā)酵工藝,相當于溫室培養(yǎng)。

由于目前土壤板結酸化嚴重,外界氣溫變化無常,溫室培養(yǎng)的微生物菌劑直接投放到土壤中,因不能適應惡劣的土壤環(huán)境造成大量死亡,即使有少量存活因無法形成種群效應,也無法發(fā)揮微生物菌劑的效果。



技術實現要素:

本發(fā)明所要解決的技術問題是,提供一種海藻復合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,第一、采用性能優(yōu)良的產纖維素酶的巨大芽孢桿菌和降解海藻酸的嗜糖芽孢桿菌降解海藻,并模擬土壤自然生態(tài)環(huán)境,使發(fā)酵后的菌種在投入土壤后,能很快適應環(huán)境,確保存活率;第二、利用所述巨大芽孢桿菌和嗜糖芽孢桿菌發(fā)酵海藻液制備中量元素液體水溶肥,制備方法中發(fā)酵過程穩(wěn)定可控,發(fā)酵周期短,產物功效顯著,適于規(guī)?;a。

為了解決上述技術問題,本發(fā)明采用以下技術方案:

海藻復合分級發(fā)酵制備中量元素液體水溶肥的方法,其特征在于按照以下步驟進行:

1)、制備海藻粉末:將烘干后的海藻磨成粉末;

2)、制備產品A和種子液:海藻粉末與水按照質量比1~10∶100裝入發(fā)酵罐中,在100~150℃條件下滅菌15~35min,得到產品A;

將巨大芽孢桿菌活化與擴培,制備巨大芽孢桿菌種子液X;將嗜糖芽孢桿菌活化與擴培,制備嗜糖芽孢桿菌種子液Y;

3)、制備產品B:將種子液X接種到產品A中,種子液X用量為產品A質量的1%~10%,發(fā)酵溫度為30~37℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為5~8,發(fā)酵時間為8~24h,得到產品B;

4)、制備產品C:調整產品B的pH至4.0~5.5,發(fā)酵罐內溫度至0℃~5℃,保存2~5天,然后將溫度調整至20℃~35℃,得到產品C;

5)、制備產品D:將種子液Y接種到產品C中,種子液Y用量為產品C質量的1%~10%,發(fā)酵溫度為30~34℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為5~8,發(fā)酵時間為8~24h,得到產品D;

6)、制備產品E:調整產品D的pH至4.0~5.5,發(fā)酵罐內溫度至0℃~5℃,保存2~7天,然后將溫度調整至25℃~35℃,得到產品E;

7)、制備海藻提取液:將產品E壓濾得到海藻渣及濾液,其中濾液為海藻提取液;

8)、制備中量元素液體水溶肥:將步驟7)得到的海藻提取液與中量元素混合,攪拌至溶解完全,得到中量元素液體水溶肥;其中海藻提取液與中量元素的質量比為40~70∶30~60。

步驟1)中的海藻為銅藻、海帶、鼠尾藻和馬尾藻中的一種或者任意比例的兩種以上。

步驟2)中巨大芽孢桿菌的活化與擴培:液體培養(yǎng)基按照以下質量比配成:羧甲基纖維素鈉10份、胰蛋白胨10份、磷酸氫二鉀3份、磷酸二氫鈉3份、氯化鐵3份、氯化鈉0.5份和蒸餾水1000份;巨大芽孢桿菌YIC~BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為20h;

步驟2)中嗜糖芽孢桿菌的活化與擴培:液體培養(yǎng)基按照以下質量比配成:海藻酸鈉5份、硫酸銨5份、硫酸鎂1份、磷酸氫二鉀2份、硫酸亞鐵0.01份和蒸餾水1000份;嗜糖芽孢桿菌接種至液體培養(yǎng)基中,嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為20h。

步驟2)中所述海藻粉末和水的質量比為4∶100,滅菌溫度115℃,滅菌時間25min;

步驟4)中,調整產品B的pH至5.0,發(fā)酵罐內溫度至5℃,保存3天,然后將溫度調整至20℃。

步驟6)中,調整產品D的pH至5.0,發(fā)酵罐內溫度至5℃,保存3天,然后將溫度調整至25℃。

所述的酸堿調節(jié)劑為檸檬酸,草酸,醋酸,磷酸氫二鉀,碳酸鈉和醋酸鈉中的一種。

所述中量元素是七水硫酸鎂、四水硝酸鈣、乙二胺四乙酸二鈉鎂、乙二胺四乙酸二鈉鈣和七水硝酸鎂中的一種或任意比例的兩種以上。

所述巨大芽孢桿菌是巨大芽孢桿菌YIC~BM1,保藏號為CGMCC No.12156。

所述嗜糖芽孢桿菌是嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3,保藏號為CGMCC No.12155。

發(fā)明具有以下有益技術效果:

本發(fā)明采用的巨大芽孢菌株具有產纖維素酶的能力,能夠破壞海藻細胞壁結構促使海藻體內更多營養(yǎng)物質得以釋放。本發(fā)明采用的嗜糖芽孢桿菌具有降解褐藻酸的能力,一方面能夠降解褐藻酸生成小分子量的褐藻寡糖等易于植物吸收利用的營養(yǎng)成分,另一方面破壞海藻細胞壁結構促使海藻體內更多營養(yǎng)物質得以釋放。利用該菌株發(fā)酵處理銅藻、鼠尾藻、馬尾藻屬等海藻原料,發(fā)酵一定天數后,以此發(fā)酵液作為海藻肥母液,直接或者復配N、P、K,微量元素,氨基酸,有機質等有效成分用于農作物生長。肥效實驗表明,利用該方法獲得發(fā)酵液能夠明顯促進植物根系生長,改良土壤微環(huán)境,提高作物產量。

本發(fā)明還具有以下特點:

1、本發(fā)明采用巨大芽孢桿菌YIC~BM1以及嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3對海藻發(fā)酵,能夠破壞海藻細胞壁結構促使海藻體內更多營養(yǎng)物質得以釋放,發(fā)酵過程穩(wěn)定可控,發(fā)酵周期短,產物功效顯著,適于規(guī)?;a。

2、本發(fā)明采用復合菌種發(fā)酵,各類菌株發(fā)揮協同作用,效果肥效均明顯優(yōu)于單一的菌種發(fā)酵,而且純生物發(fā)酵,保證了海藻活性成分不受破壞。

3、本發(fā)明采用的復合菌種發(fā)酵不同于簡單的將不同的菌種種子液混合發(fā)酵,而是根據微生物的作用不同,按照先后次序依次分級發(fā)酵,避免了微生物菌群間的相互競爭拮抗,減少內耗,將各自菌群的作用發(fā)揮到最大化,保證了最好的效果。

4、本發(fā)明將微量元素與海藻中有效成分結合,可明顯提高作物抗逆、抗病性。易于植物吸收利用,同時海藻活性成分作為一種重要的信號分子,能夠參與植物的生長調節(jié)和誘導抗病過程促進植物的生長,提高植物對不良環(huán)境及病蟲害的抵抗力。

5、本發(fā)明通過調節(jié)發(fā)酵條件使發(fā)酵出的菌株具備適應惡劣的土壤環(huán)境的能力,有利于菌功能的發(fā)揮。

6、本發(fā)明通過緩慢的溫度調節(jié),使菌株適應溫度的變化,避免溫度變化過快,菌株不能適應而大量死亡。

具體實施方式

下面結合具體實例進一步說明本發(fā)明。

實施例1

將洗凈烘干后的新鮮鼠尾藻磨成50~60目粉末。

海藻粉末與水按照質量比4∶100裝入發(fā)酵罐中,在115℃條件下滅菌25min,得到產品A。

并制備種子液:

種子液X的制備實例:將產纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC~BM1接種至液體培養(yǎng)基,巨大芽孢桿菌YIC~BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為20h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液X;

種子液Y的制備實例:將嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3接種至液體培養(yǎng)基,嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為20h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液Y;

將種子液X加入到產品A中,其中種子液X與產品A的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品B;調整產品B的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品的溫度至20℃,得到產品C;然后補充種子液Y,補充的種子液Y與產品C的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品D;調整產品D的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品D的溫度至25℃,得到產品E;將產品E壓濾后得到含巨大芽孢桿菌YIC~BM1和嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3海藻提取液;將海藻提取液、七水硫酸鎂和四水硝酸鈣按照質量比60∶20∶20混合,攪拌溶解全完后,即為中量元素液體水溶肥。

實施例2

將洗凈烘干后的新鮮銅藻磨成50~60目粉末;

海藻粉末與水按照質量比4∶100裝入發(fā)酵罐中,在115℃條件下滅菌25min,得到產品A。

并制備種子液:

種子液X的制備實例:將產纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC~BM1接種至液體培養(yǎng)基,巨大芽孢桿菌YIC~BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液X;

種子液Y的制備實例:將嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3接種至液體培養(yǎng)基,嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液Y;

將種子液X加入到產品A中,其中種子液X與產品A的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品B;調整產品B的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品的溫度至20℃,得到產品C;然后補充種子液Y,補充的種子液Y與產品C的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品D;調整產品D的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品D的溫度至25℃,得到產品E;將產品E壓濾后得到含巨大芽孢桿菌YIC~BM1和嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3海藻濾液;將含菌海藻濾液、乙二胺四乙酸二鈉鎂、乙二胺四乙酸二鈉鈣和七水硝酸鎂按照質量比65∶10∶10∶15混合,攪拌溶解全完后,即為中量元素液體水溶肥。

實施例3

將洗凈烘干后的新鮮銅藻和新鮮馬尾藻按照質量比1∶1復配,磨成50~60目粉末;

海藻粉末與水按照質量比4∶100裝入發(fā)酵罐中,在115℃條件下滅菌25min,得到產品A。

并制備種子液:

種子液X的制備實例:將產纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC~BM1接種至液體培養(yǎng)基,巨大芽孢桿菌YIC~BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液X;

種子液Y的制備實例:將嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3接種至液體培養(yǎng)基,嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液Y;

將種子液X加入到產品A中,其中種子液X與產品A的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品B;調整產品B的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品的溫度至20℃,得到產品C;然后補充種子液Y,補充的種子液Y與產品C的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品D;調整產品D的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品D的溫度至25℃,得到產品E;將產品E壓濾后得到含巨大芽孢桿菌YIC~BM1和嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3海藻濾液;將含菌海藻濾液乙二胺四乙酸二鈉鎂、乙二胺四乙酸二鈉鈣和四水硝酸鈣按照質量比60∶15∶10∶15混合,攪拌溶解全完后,即為中量元素液體水溶肥。

實施例4

將洗凈烘干后的海帶磨成50~60目粉末;

海藻粉末與水按照質量比4:100裝入發(fā)酵罐中,在115℃條件下滅菌25min,得到產品A。

并制備種子液:

種子液X的制備實例:將產纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC~BM1接種至液體培養(yǎng)基,巨大芽孢桿菌YIC~BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液X;

種子液Y的制備實例:將嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3接種至液體培養(yǎng)基,嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3和培養(yǎng)基的體積比例為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h;活化之后按同樣操作步驟擴培,得到種子液Y;

將種子液X加入到產品A中,其中種子液X與產品A的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為32℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為6.5,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品B;調整產品B的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品的溫度至20℃,得到產品C;然后補充種子液Y,補充的種子液Y與產品C的質量比為5∶100,發(fā)酵溫度為30℃,用酸堿調節(jié)劑調節(jié)反應的pH值為7.2,溶氧控制在20%,轉速為200r/min,通氣量在800L/min,發(fā)酵罐壓應維持在0.03Mpa,發(fā)酵時間為24h,得到產品D;調整產品D的pH至5.0,并以每小時3℃的溫度變化調整溫度溫度至5℃,保存3天,以每小時3℃的溫度變化調整產品D的溫度至25℃,得到產品E;將產品E壓濾后得到含巨大芽孢桿菌YIC~BM1和嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3海藻濾液;將含菌海藻濾液與四水硝酸鈣、乙二胺四乙酸二鈉鈣、乙二胺四乙酸二鈉鎂和七水硫酸鎂按照質量比50∶15∶10∶10∶15混合,攪拌溶解全完后,即為中量元素液體水溶肥。

上述實施例中酸調節(jié)劑是檸檬酸,堿調節(jié)劑是碳酸鈉。

下面結合實驗數據進一步說明本發(fā)明有益效果:

針對市場上不同海藻活性成分提取方法收集的樣品,進行海藻多糖的檢測,檢測結果如表1。

表1不同提取方法所得樣品海藻多糖含量

由表1可以看出利用本方法中微生物發(fā)酵法提取海藻的活性成分,發(fā)酵液中海藻多糖含量最高,反應條件溫和對海藻有效成分破壞最少。主要原因在于發(fā)酵采用的兩株菌能夠降解海藻細胞壁,使藻體內營養(yǎng)物質得以釋放,同時嗜糖芽孢桿菌具有降解褐藻酸生成小分子量的褐藻寡糖的能力,使得多糖在含量和種類上都高于其他提取處理。

肥效試驗數據如下:

1材料與方法:

1.1試驗地點:五洲豐農業(yè)科技有限公司試驗基地,中性棕壤,中高肥力。土壤養(yǎng)分情況為:有機質79.3g/kg,堿解氮76.7mg/kg,有效磷84.6mg/kg,速效鉀80.2mg/kg,pH6.89。

1.2試驗供試材料:普通中量元素液體水溶肥樣品(除不加海藻提取液外,其它制備條件與本發(fā)明產品相同)與本發(fā)明產品;同樣管理的花生。

1.3試驗設計:

處理1(T1):實施例1所述海藻中量元素液體水溶肥;

處理2(T2):實施例2所述海藻中量元素液體水溶肥;

處理3(T3):實施例3所述海藻中量元素液體水溶肥;

處理4(T4):實施例4所述海藻中量元素液體水溶肥;

對照處理(CK1-4):處理T1-T4對應的對照普通中量元素液體水溶肥(除不加海藻提取液外,其它制備條件與本發(fā)明產品相同)。

各處理除了實驗肥料不同外,其他農藝管理措施均一致。每個處理3次重復,隨機區(qū)組排列,將1kg實驗肥料分別溶解于1000kg水中,根據作物生長情況沖施3次,小區(qū)面積100m2,,四周設保護行,南北向,行距45cm,株距15cm。

2結果與分析

2.1不同處理對花生性狀的影響

施用本發(fā)明產品的花生植株生育形狀較對照組有明顯的改善,根系發(fā)達,葉片墨綠,莖桿粗壯,抗逆性增強,抗病害能力增強,花生果仁大。

2.2不同處理對花生產量的影響

表2不同處理對產量的影響

由表2可以看出,施用本發(fā)明產品的花生產量明顯提高。

本發(fā)明所述巨大芽孢桿菌YIC~BM1的保藏號為CGMCC No.12156;保藏單位名稱是:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心;保藏單位地址是:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號;保藏日期:2016年3月2日;拉丁文分類命名為:Bacillus megaterium。

所述巨大芽孢桿菌YIC~BM1的生物特性如下:

YIC~BM1菌株在纖維素培養(yǎng)基平板上生長48h后,菌落圓形,白色,表面平整。顯微鏡觀察菌株為革蘭氏陽性,桿狀,能運動,產芽孢。生長溫度范圍20~40℃,PH范圍6-10,NaCl濃度范圍0~20%,菌株最適生長溫度37℃,最適生長pH 7.5。觸酶,氧化酶,半乳糖苷酶陽性,吲哚,VP實驗陰性,不還原硝酸;能夠利用葡萄糖,甘露糖,乳糖,棉子糖,蔗糖,阿拉伯糖,木糖,甘露醇,山梨醇。根據其生理生化特征,基因序列及系統發(fā)育樹信息,將該菌株鑒定為巨大芽孢桿菌Bacillus megaterium。

本發(fā)明所述嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3的保藏號為CGMCC No.12155;保藏單位名稱是:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心;保藏單位地址是:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號;保藏日期:2016年3月2日;拉丁文分類命名為:Bacillus halosaccharovorans。

所述嗜糖芽孢桿菌YIC~Alg3的生物特性如下:

YIC~Alg3菌株在褐藻酸唯一碳源平板上生長48h后,菌落不規(guī)則,淡黃色,中間不透明,邊緣半透明,表面褶皺。顯微鏡觀察菌株為桿狀,在末端或近末端可產生芽孢,革蘭氏陽性,能運動,生長后期菌體易聚集成團。生長溫度范圍20~45℃,PH范圍6~9,NaCl濃度范圍0~15%,菌株最適生長溫度37℃,最適生長pH 7.5。觸酶,氧化酶,VP試驗陽性,能夠利用葡萄糖,甘露糖,甘露醇,果糖,乳糖,半乳糖,淀粉;不能利用山梨醇,纖維素。根據其生理生化特征,基因序列及系統發(fā)育樹信息,將該菌株鑒定為嗜糖芽孢桿菌Bacillus halosaccharovorans。

注:+表示可以利用,~表示不能利用。

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