過(guò)立體定向照明出現(xiàn)在選定樣本區(qū)域中。例如通過(guò)借助于樣本安裝在其上的、優(yōu)選地在所有三個(gè)空間方向上合適地可調(diào)節(jié)的移位臺(tái)移位樣本，樣本區(qū)域可以定位在中心。移位臺(tái)可以特別地配置成以機(jī)動(dòng)方式可調(diào)節(jié)。
[0091]可以在圖5至7中所示的轉(zhuǎn)向裝置的基礎(chǔ)上保證光學(xué)布置的通用性。與單獨(dú)的轉(zhuǎn)向元件的具體布置和配置無(wú)關(guān)，每個(gè)轉(zhuǎn)向裝置可以具體化為預(yù)包裝附件，特別是用于緊固到物鏡和/或檢測(cè)物鏡的預(yù)包裝附件。具有反射鏡元件布置的附件然后僅僅需要更換以便在不同應(yīng)用之間變化。
[0092]為了避免重復(fù)，關(guān)于根據(jù)本發(fā)明的光學(xué)布置的另外有利實(shí)施例，讀者參見(jiàn)描述的概括部分和附帶的權(quán)利要求。
[0093]最后，應(yīng)當(dāng)明確地注意上述的示例性實(shí)施例僅僅用于權(quán)利要求中的教導(dǎo)的論述，而不是將它限制到示例性實(shí)施例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種方法，其中用操作光操作樣本，并且其中借助于SP頂技術(shù)在用呈照明光片的形式的照明光、特別是用于熒光激發(fā)的激發(fā)光照明下成像樣本， 其中操作光和照明光都由下列聚焦: a.布置在物鏡工作位置的相同物鏡，或 b.相繼被帶到物鏡工作位置的不同物鏡； 并且其中在穿過(guò)所述物鏡之后，操作光和/或照明光借助于轉(zhuǎn)向裝置以這樣的方式轉(zhuǎn)向使得它相對(duì)于所述物鏡的光軸成不同于零度的角傳播。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中操作光和照明光從不同方向引導(dǎo)到樣本上。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中: a.所述照明光片是由連續(xù)地來(lái)回移動(dòng)的照明光束組成的準(zhǔn)光片，或 b.所述照明光片是由使用在偏轉(zhuǎn)角方面可調(diào)節(jié)的光束偏轉(zhuǎn)裝置連續(xù)地來(lái)回移動(dòng)的照明光束組成的準(zhǔn)光片，或 c.所述照明光片使用圓柱形光學(xué)器件生成。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的方法，其中用操作光和照明光同時(shí)照明樣本。5.根據(jù)權(quán)利要求1至3之一所述的方法，其中: a.首先用操作光并且然后用照明光在時(shí)間上連續(xù)地照明樣本；或 b.首先用照明光并且然后用操作光在時(shí)間上連續(xù)地照明樣本；或 c.用照明光和操作光交替地照明樣本。6.根據(jù)權(quán)利要求1至5之一所述的方法，其中一旦照明光已穿過(guò)所述物鏡，它以這樣的方式用所述轉(zhuǎn)向裝置轉(zhuǎn)向使得它相對(duì)于所述物鏡的光軸成不同于零度的角、特別地成大于10度的角、很特別地成直角傳播，而操作光在穿過(guò)所述物鏡之后照射樣本而不轉(zhuǎn)向。7.根據(jù)權(quán)利要求1至6之一所述的方法，其中照明光和/或操作光使用在偏轉(zhuǎn)角方面可調(diào)節(jié)的光束偏轉(zhuǎn)裝置引導(dǎo)到所述轉(zhuǎn)向裝置上。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7之一所述的方法，其中: a.所述轉(zhuǎn)向裝置包括多個(gè)轉(zhuǎn)向器件，特別是多個(gè)轉(zhuǎn)向鏡；和/或 b.所述轉(zhuǎn)向裝置包括多個(gè)不同的和/或不同布置的和/或不同對(duì)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)向器件，特別是多個(gè)轉(zhuǎn)向鏡。9.根據(jù)權(quán)利要求1至8之一所述的方法，其中: a.用操作光從多個(gè)不同方向照射樣本，特別是待操作的同一個(gè)樣本區(qū)域；和/或 b.用操作光同心地和/或立體定向地照射待操作的樣本區(qū)域；和/或 c.特別地使用光束偏轉(zhuǎn)裝置并且經(jīng)由在所述物鏡的下游的至少一個(gè)轉(zhuǎn)向裝置在錐形表面上移動(dòng)構(gòu)成操作光束的操作光；和/或 d.在操作期間和/或在光束偏轉(zhuǎn)期間修改操作光的功率水平。10.根據(jù)權(quán)利要求1至10之一所述的方法，其中: a.來(lái)自樣本的檢測(cè)光穿過(guò)聚焦照明光的物鏡和/或用聚焦照明光的物鏡準(zhǔn)直；或 b.來(lái)自樣本的檢測(cè)光穿過(guò)檢測(cè)物鏡和/或用檢測(cè)物鏡準(zhǔn)直，所述檢測(cè)物鏡不同于聚焦照明光和/或操作光的物鏡。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中聚焦照明光和/或操作光的所述物鏡的光軸和所述檢測(cè)物鏡的光軸彼此平行地和/或以共線方式對(duì)準(zhǔn)。12.根據(jù)權(quán)利要求5至11之一所述的方法，其中: a.所述轉(zhuǎn)向裝置和聚焦照明光和/或操作光的所述物鏡相對(duì)于彼此可移動(dòng)地布置；和/或 b.所述轉(zhuǎn)向裝置可移動(dòng)地緊固在聚焦照明光和/或操作光的所述物鏡上；和/或 c.所述轉(zhuǎn)向裝置可移動(dòng)地緊固在所述檢測(cè)物鏡上；和/或 d.所述轉(zhuǎn)向裝置可旋轉(zhuǎn)地圍繞所述檢測(cè)物鏡和/或圍繞所述檢測(cè)物鏡的光軸布置。13.根據(jù)權(quán)利要求1至12之一所述的方法，其中使用操作光和/或照明光引起雙光子激發(fā)。14.一種光學(xué)布置，其用于操作樣本并且用于借助于SP頂技術(shù)在用呈照明光片的形式的照明光、特別是用于熒光激發(fā)的激發(fā)光照明下成像樣本， 其中操作光和照明光都由下列聚焦: a.布置在物鏡工作位置的相同物鏡，或 b.相繼被帶到物鏡工作位置的不同物鏡； 并且其中轉(zhuǎn)向照明光和/或操作光的至少一個(gè)轉(zhuǎn)向裝置在位于物鏡工作位置的所述物鏡的下游。15.根據(jù)權(quán)利要求15所述的光學(xué)布置，其中照明光和操作光從不同方向照射樣本。16.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的光學(xué)布置，其中: a.所述照明光片是由連續(xù)地來(lái)回移動(dòng)的照明光束組成的準(zhǔn)光片，或 b.所述照明光片是由使用在偏轉(zhuǎn)角方面可調(diào)節(jié)的光束偏轉(zhuǎn)裝置連續(xù)地來(lái)回移動(dòng)的照明光束組成的準(zhǔn)光片，或 c.存在生成所述照明光片的圓柱形光學(xué)器件。17.根據(jù)權(quán)利要求14至16之一所述的光學(xué)布置，其中可以用操作光和照明光同時(shí)照明樣本。18.根據(jù)權(quán)利要求14至17之一所述的光學(xué)布置，其中: a.首先用操作光并且然后用照明光在時(shí)間上連續(xù)地照明樣本；或 b.首先用照明光并且然后用操作光在時(shí)間上連續(xù)地照明樣本；或 c.用照明光和操作光交替地照明樣本。19.根據(jù)權(quán)利要求1至4之一所述的光學(xué)布置，其中一旦照明光已穿過(guò)所述物鏡，它以這樣的方式用所述轉(zhuǎn)向裝置轉(zhuǎn)向使得它相對(duì)于所述物鏡的光軸成不同于零度的角、特別地成大于10度的角、很特別地成直角傳播，而操作光在穿過(guò)所述物鏡之后照射樣本而不轉(zhuǎn)向。20.根據(jù)權(quán)利要求14至19之一所述的光學(xué)布置，其中照明光和/或操作光使用在偏轉(zhuǎn)角方面可調(diào)節(jié)的光束偏轉(zhuǎn)裝置引導(dǎo)到所述轉(zhuǎn)向裝置上。21.根據(jù)權(quán)利要求14至20之一所述的光學(xué)布置，其中所述轉(zhuǎn)向裝置包括多個(gè)不同的和/或不同布置的和/或不同對(duì)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)向器件，特別是轉(zhuǎn)向鏡，以便轉(zhuǎn)向在位于物鏡工作位置的所述物鏡中聚焦的照明光和/或在位于物鏡工作位置的所述物鏡中聚焦的操作光。22.根據(jù)權(quán)利要求14至21之一所述的光學(xué)布置，其中: a.用操作光從多個(gè)不同方向照射樣本，特別是待操作的同一個(gè)樣本區(qū)域；和/或 b.用操作光同心地和/或立體定向地照射待操作的樣本區(qū)域；和/或 C.特別地使用光束偏轉(zhuǎn)裝置并且經(jīng)由在所述物鏡的下游的至少一個(gè)轉(zhuǎn)向裝置在錐形表面上移動(dòng)構(gòu)成操作光束的操作光；和/或 d.功率水平修改裝置在光束偏轉(zhuǎn)期間修改操作光的功率水平。23.根據(jù)權(quán)利要求14至22之一所述的光學(xué)布置，其中: a.來(lái)自樣本的檢測(cè)光穿過(guò)聚焦照明光的物鏡和/或用聚焦照明光的物鏡準(zhǔn)直；或 b.來(lái)自樣本的檢測(cè)光穿過(guò)檢測(cè)物鏡和/或用檢測(cè)物鏡準(zhǔn)直，所述檢測(cè)物鏡不同于聚焦照明光和/或操作光的物鏡。24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的光學(xué)布置，其中聚焦照明光和/或操作光的所述物鏡的光軸和所述檢測(cè)物鏡的光軸彼此平行地和/或以共線方式對(duì)準(zhǔn)。25.根據(jù)權(quán)利要求14至24之一所述的光學(xué)布置，其中: a.所述轉(zhuǎn)向裝置和聚焦照明光和/或操作光的所述物鏡相對(duì)于彼此可移動(dòng)地布置；和/或 b.所述轉(zhuǎn)向裝置可移動(dòng)地緊固在聚焦照明光和/或操作光的所述物鏡上；和/或 c.所述轉(zhuǎn)向裝置可移動(dòng)地緊固在所述檢測(cè)物鏡上；和/或 d.所述轉(zhuǎn)向裝置可旋轉(zhuǎn)地圍繞所述檢測(cè)物鏡和/或圍繞所述檢測(cè)物鏡的光軸布置。26.根據(jù)權(quán)利要求14至25之一所述的光學(xué)布置，其中: a.使用操作光和/或照明光引起雙光子激發(fā)；和/或 b.存在脈沖激光器、特別是飛秒或皮秒激光器，以便生成照明光和/或操作光。27.根據(jù)權(quán)利要求14至26之一所述的光學(xué)布置，其中通過(guò)改裝掃描顯微鏡、特別是共焦掃描顯微鏡產(chǎn)生根據(jù)本發(fā)明的光學(xué)布置所述光學(xué)裝置；和/或所述光學(xué)布置包含掃描顯微鏡，特別是共焦掃描顯微鏡。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種方法，其中用操作光操作樣本，并且其中借助于SPIM技術(shù)在用呈照明光片的形式的照明光、特別是用于熒光激發(fā)的激發(fā)光照明下成像樣本。方法的特征在于，操作光和照明光都由布置在物鏡工作位置的相同物鏡或由相繼被帶到物鏡工作位置的不同物鏡聚焦；并且在穿過(guò)物鏡之后，操作光和/或照明光借助于轉(zhuǎn)向裝置以這樣的方式轉(zhuǎn)向使得它相對(duì)于物鏡的光軸成不同于零度的角傳播。
【IPC分類】G02B21/36, G02B21/16, G02B21/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105283792
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201480029470
【發(fā)明人】W·克內(nèi)貝爾, W·福格, F·?？寺?
【申請(qǐng)人】徠卡顯微系統(tǒng)復(fù)合顯微鏡有限公司
【公開(kāi)日】2016年1月27日
【申請(qǐng)日】2014年3月20日
【公告號(hào)】DE102013213781A1, EP2976669A1, US20160048012, WO2014147207A1