專利名稱::清潔用酶和臭味預防的制作方法
技術領域:
:本發(fā)明提供了包含酰基轉(zhuǎn)移酶和?;D(zhuǎn)移酶的醇底物的組合物。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,組合物可用于生產(chǎn)芳香酯。在一些其它實施方式中,組合物可用于洗衣洗滌劑,以清潔含有至少一種甘油三酯的污漬。在另外一些實施方式中,組合物用于生產(chǎn)具有清潔性質(zhì)的化合物(例如表面活性酯)。
背景技術:
:當用含有脂肪酶的洗衣洗涂劑來清洗衣物,特別是5f皮奶制品(例如,奶、冰淇淋或黃油)玷污的衣物時,衣物干燥后,通常會從織物中散發(fā)出類似嬰兒"嘔咳物"或變質(zhì)黃油的不愉悅的味道。人們認為,這種臭味是脂肪酶催化水解存在于織物和/或洗滌衣物中的短鏈甘油三酯(例如,含C4至C12的甘油三酯)產(chǎn)生的。這種水解反應產(chǎn)生了具有不愉悅的味道、揮發(fā)性并且導致持續(xù)臭味的短鏈脂肪酸(例如,丁酸)。盡管在臭味預防和/或向衣物添加愉人香味方面進行了很多研究,但是本領域中仍需要解決該問題的洗衣組合物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了包含?;D(zhuǎn)移酶和?;D(zhuǎn)移酶的醇底物的組合物。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,組合物可用于生產(chǎn)芳香酯。在一些其它實施方式中,組合物可用于洗衣洗滌劑,以清潔含有至少一種甘油三酯的污漬。在另外一些實施方式中,組合物用于生產(chǎn)具有清潔性質(zhì)的化合物(例如表面活性酯)。本發(fā)明提供了包含?;D(zhuǎn)移酶以及酰基轉(zhuǎn)移酶的醇底物的清潔組合物,其中,所述?;D(zhuǎn)移酶和醇底物以在清潔組合物與?;w組合時能有效產(chǎn)生可檢測到的酯的量存在。在一些實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶是SGNH?;D(zhuǎn)移酶。在一些其它實施方式中,清潔組合物還包含?;w和作為酰基轉(zhuǎn)移酶催化的醇底物和?;w之間的反應結果產(chǎn)生的酯。在又一些實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶是SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶,特別是AcT。在還一些實施方式中,酯是織物護理劑。在另一些實施方式中,織物護理劑是酯表面活性劑。在又一些實施方式中,酯是芳香酯。在一些實施方式中,酰基供體存在于物體上的污漬中。在一些其它實施方式中,含有?;w的物體被?;w弄臟了。在還一些實施方式中,?;w是C1至C18的?;w。在一些其它實施方式中,清潔組合物不包含脂肪酶,而在一些備選的實施方式中,清潔組合物還包含脂肪酶。在一些其它實施方式中,清潔組合物還包含蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、纖維素酶、角質(zhì)酶、果膠酸裂合酶、甘露聚糖酶或氧化還原酶。在一些其它實施方式中,清潔組合物還包含至少一種表面活性劑、助洗劑、聚合物、鹽、漂白活化劑、漂白系統(tǒng)、溶劑、緩沖劑或香料。本發(fā)明還提供了下述用于清潔的方法,所述方法包括將酰基轉(zhuǎn)移酶、?;D(zhuǎn)移酶的醇底物和?;w組合起來,其中,?;D(zhuǎn)移酶催化?;鶊F從酰基供體轉(zhuǎn)移到醇底物上,產(chǎn)生織物護理產(chǎn)物。在又一些實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶是SGNH?;D(zhuǎn)移酶。在一些實施方式中,SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶是AcT。在還一些實施方式中,酯是織物護理劑。在另一些實施方式中,織物護理劑是酯表面活性劑。在又一些實施方式中,酯是芳香酯。本發(fā)明還提供了包含SGNH?;D(zhuǎn)移酶和SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶的醇底物的清潔組合物,其中,SGNH?;D(zhuǎn)移酶和醇底物以在清潔組合物與?;w接觸時能有效產(chǎn)生可檢測到的酯的量存在。在一些實施方式中,清潔組合物還包含含有?;w的物體以及作為SGNH?;D(zhuǎn)移酶催化的醇底物和?;w之間的反應結果產(chǎn)生的酯。在又一些實施方式中,?;w是C1至C18或C1至C10的?;w。在額外的實施方式中,酰基供體是含有?;w的物體。在再一些實施方式中,含有?;w的物體被?;w弄臟了。在一些優(yōu)選的實施方式中,物體被乳制品玷污。在另一些實施方式中,清潔組合物不包含脂肪酶,而在一些備選的實施方式中,清潔組合物還包含脂肪酶或至少一種脂肪酶。在又一些其它實施方式中,清潔組合物是水性組合物。在一些優(yōu)選的實施方式中,水性組合物除任何固體組分之外包含至少90%的水。在另一些實施方式中,酯是酯表面活性劑或芳香酯。在一些其它實施方式中,清潔組合物還包含至少一種表面活性劑。在另一些實施方式中,清潔組合物還包含過氧化物來源。在一些其它實施方式中,本發(fā)明提供了還包含至少一種蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、纖維素酶、角質(zhì)酶、果膠酸裂合酶、甘露聚糖酶和/或氧化還原酶或其混合物的清潔組合物。在再一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物包含至少一種表面活性劑、助洗劑、聚合物、鹽、漂白活化劑、漂白系統(tǒng)、溶劑、緩沖劑和/或香料或其混合物。本發(fā)明還提供了下述用于清潔的方法,所述方法包括將SGNH?;D(zhuǎn)移酶、SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶的醇底物和被含?;w的物質(zhì)弄臟的物體組合起來,其中,SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶能催化酰基基團從?;w轉(zhuǎn)移到醇底物上,從而產(chǎn)生酯。在一些實施方式中,酯是C4至C6的羧酸酯。在一些優(yōu)選的實施方式中,酯是丁酸酯或丁酸千酯。在還一些實施方式中,酯是伯醇和C4至C6脂肪酸的酯。在另一些實施方式中,物體是織物。在一些優(yōu)選的實施方式中,織物被含油物質(zhì)弄臟了。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,織物被含三酰甘油的物質(zhì)弄臟了。在還一些實施方式中,含三酰甘油的物質(zhì)含有C4-C18三酰甘油。在另外一些實施方式中,SGNH?;D(zhuǎn)移,化?;鶊F從織物上存在的酰基供體轉(zhuǎn)移到醇底物上,從而產(chǎn)生芳香酯。在再一些實施方式中,SGNH?;D(zhuǎn)移酶的醇底物還作為表面活性劑或乳化劑發(fā)揮作用。在又一些實施方式中,SGNH?;D(zhuǎn)移酶催化?;鶊F從?;w轉(zhuǎn)移到表面活性劑或乳化劑上,從而產(chǎn)生酯。在一些其它實施方式中,所述方法還包括將過氧化物來源與SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶組合起來,所述方法導致產(chǎn)生過酸。本發(fā)明提供了包含?;D(zhuǎn)移酶(例如SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶)和?;D(zhuǎn)移酶的醇底物的清潔組合物。在這些實施方式中的一些中,酰基轉(zhuǎn)移酶和醇底物以在清潔組合物與含?;w的物體接觸時能有效產(chǎn)生可檢測到的酯的量存在。在一些實施方式中,清潔組合物還包含含?;w的物體和作為?;D(zhuǎn)移酶催化的醇底物與?;w之間的反應的結果產(chǎn)生的酯。在一些優(yōu)選的實施方式中,酰基供體是Cl至C10的?;w。在一些其它實施方式中,清潔組合物還包含加入的與醇底物反應的?;w(例如甘油三酯、脂肪酸酯等)。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,組合物產(chǎn)生的酯是芳香酯、表面活性酯、表面活性劑或織物護理劑或它們的組合。在一些實施方式中,含?;w的物體被?;w弄臟了。在一些優(yōu)選的實施方式中,?;w是油性物質(zhì),例如動物脂肪、植物脂肪、奶制品等。在另一些優(yōu)選的實施方式中,酰基供體和醇底物的組合導致芳香酯、表面活性酯、水溶性酯或織物護理劑或其任何組合的產(chǎn)生。事實上,本發(fā)明意欲提供益處的組合。在一些實施方式中,清潔組合物還包含至少一種脂肪酶。在一些其它實施方式中,清潔組合物還包含至少一種表面活性劑和/或至少一種過氧化物來源。在一些實施方式中,清潔組合物的表面活性劑或乳化劑作用于醇底物,用于酰基轉(zhuǎn)移。在另一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物還包含至少一種額外的酶,它們包括但不限于半纖維素酶、過氧化物酶、蛋白酶、纖維素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角質(zhì)酶、果膠酶、果膠酸裂合酶、淀粉酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、還原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木質(zhì)素酶、支鏈淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanases、p-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、軟骨素酶、漆酶和淀粉酶或其混合物。在一些實施方式中,使用包含常規(guī)可應用的酶(例如蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶和/或纖維素酶)與酰基轉(zhuǎn)移酶的酶組合(即"混合物")。9在另一些實施方式中,清潔組合物還包含至少一種表面活性劑、助洗劑、聚合物、鹽、漂白活化劑、溶劑、緩沖劑或香料等,如本文更詳細描述的。在一些實施方式中,清潔組合物是水性組合物。在一些優(yōu)選的實施方式中,清潔組合物除了任何固體組分之外包含至少大約90%的水。本發(fā)明還提供了利用本文提供的清潔組合物的清潔方法。這些方法通常包括將酰基轉(zhuǎn)移酶(例如,SGNH?;D(zhuǎn)移酶)、?;D(zhuǎn)移酶的醇底物和被含?;w的物質(zhì)弄臟的物體(例如織物)組合,其中,?;D(zhuǎn)移酶能催化?;鶊F從?;w轉(zhuǎn)移到醇底物上,從而產(chǎn)生酯。在一些實施方式中,物體凈皮含油物質(zhì)(例如,含三酰甘油的物質(zhì),例如,含C4-C18三酰甘油的物質(zhì))弄臟。在一些優(yōu)選的實施方式中,含油物質(zhì)與醇組合,產(chǎn)生的酯是芳香酯,而在一些其它實施方式中,產(chǎn)生是非芳香酯,在又一些實施方式中,產(chǎn)生了表面活性劑或其它織物護理劑或這些酯的組合。在這些實施方式中的一些中,使用?;D(zhuǎn)移酶,通過與脂肪酶協(xié)同工作,增加從三酰甘油去除?;湹乃俾?;和/或?qū)Ⅴ;溑c醇底物連起來,由此形成酯產(chǎn)物而非揮發(fā)性脂肪酸,從而降低甘油三酯水解通常產(chǎn)生的臭味的量。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,本發(fā)明還提供了用于產(chǎn)生芳香酯的組合物。在一些實施方式中,組合物包含酰基轉(zhuǎn)移酶(例如,SGNH?;D(zhuǎn)移酶)、?;D(zhuǎn)移酶的醇底物和酰基供體,其中,?;D(zhuǎn)移酶能在水性環(huán)境中催化酖基基團從酰基供體轉(zhuǎn)移到醇底物,從而產(chǎn)生芳香酯。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,醇底物和酰基供體被用來產(chǎn)生特別的芳香酯。在一些實施方式中,組合物是還包含芳香酯的水性組合物。在一些其它實施方式中,組合物是脫水的組合物,其中在隨后對組合物進行再水化時產(chǎn)生芳香酯。在一些實施方式中,酰基供體向醇底物提供C1至C10的?;?。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,用于產(chǎn)生芳香酯的組合物是清潔組合物。在一些實施方式中,酰基轉(zhuǎn)移酶被固定到固相支持體上。在另一些實施方式中,組合物包含食品。在一些其它實施方式中,組合物是清潔組合物。在再一些實施方式中,組合物還含有至少一種表面活性劑。本發(fā)明還提供了利用本文提供的組合物來產(chǎn)生至少一種芳香酯的方法。通常,這些方法包括將?;D(zhuǎn)移酶(例如SGNH?;D(zhuǎn)移酶)、?;D(zhuǎn)移酶的醇底物和?;w組合起來,其中,酰基轉(zhuǎn)移酶催化酰基基團從?;w轉(zhuǎn)移到醇底物上,從而產(chǎn)生芳香酯。在一些實施方式中,醇底物和?;w產(chǎn)生了特別的芳香酯。在組合物被脫水的一些實施方式中,所述方法包括在組合之后對組分進行再水化的步驟。在一些實施方式中,通過加入任何合適的水性介質(zhì),包括水、奶或唾液來進行再水化。因此,在一些實施方式中,在咀嚼期間發(fā)生再水化,以釋放芳香酯。在一些其它實施方式中,醇底物和?;w在水性環(huán)境中組合。附圖簡述當參考附圖閱讀時,能最好地理解下文詳細描述的內(nèi)容的某些方面。應當強調(diào),根據(jù)通常的實踐,附圖的多個特征并不代表量度。相反,為清楚而言,多個特征的尺寸可任意擴大或縮小。圖l提供的圖顯示了用甘油三丁酸酯(tributyrin)和兩種?;D(zhuǎn)移酶時順-3-己烯醇、2-苯基乙醇和2-甲基-l-丁醇向其各自的丁酰酯的轉(zhuǎn)化。圖2提供的圖顯示了在10、30和120分鐘時?;D(zhuǎn)移酶(AcT)的游離和溶膠-凝膠包裹形式用于用甘油三乙酸酯來對順-3-己烯醇的酯化的比較。圖3提供了LC/MS數(shù)據(jù)的組圖,其顯示了在洗滌劑背景中使用甘油三丁酸酯和AcT對四甘醇的酯交換。圖4提供了LC/MS數(shù)據(jù)的組圖,其顯示了在洗滌劑背景中使用甘油三丁酸酯和AcT對"C-U-甘油的酯交換。脂肪酶和AcT時從乳脂和苯甲醇產(chǎn)生丁酸千酯。圖6提供了對用于從乳脂生產(chǎn)芳香酯的一種示例性方法的闡述。圖7提供了對來自蛋黃/山梨糖醇與1)KLM3突變體pLA231和2)對照溫育的脂類TLC分析。在該圖中,"PE"是磷脂酰乙醇胺,"PC,,是磷脂酰膽堿。圖8提供了經(jīng)KLM3,pLA231處理的樣品2467-112-1:蛋黃/山梨糖醇的GLC色i普圖。圖9提供了對樣品2467-112-2:蛋黃/山梨糖醇對照樣品的GLC色傳圖。圖10提供了從GrindstedSMO鑒定的山梨糖醇單油酸酯的GLC/MS鐠和在用KLM3pLA231處理的蛋黃/山梨糖醇(2467-112-1)中鑒定的峰的MSi脊。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了包含酰基轉(zhuǎn)移酶和?;D(zhuǎn)移酶的醇底物的組合物。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,組合物可用于生產(chǎn)芳香酯。在一些其它實施方式中,組合物可用于洗衣洗滌劑,以清潔含有至少一種甘油三酯的污漬。在另一些實施方式中,組合物被用于生產(chǎn)具有清潔性質(zhì)的化合物(例如,表面活性酯)。除非另有指明,本發(fā)明的某些方面的實踐涉及分子生物學、微生物學、蛋白質(zhì)純化、蛋白質(zhì)工程、蛋白質(zhì)和DNA測序以及重組DNA領域中的常用的常規(guī)技術,它們是本領域技術人員已知的。本文提到的所有專利、專利申請、文章和公開文獻,包括上文和下文中提到的,都通過引用明確并入本文。此外,本文提供的標題并非是對本發(fā)明的多個方面或?qū)嵤┓绞降南拗?,可參照作為整體的說明書而得到所述標題。因此,下文示出的術語將參照作為整體的說明書進行更詳細地定義。但是,為方便對本發(fā)明的理解,下文對多個術語進行了定義。定義除非另有指明,本文使用的所有技術和科學術語都具有與本發(fā)明所屬領域的普通技術人員通常的理解相同的含義。雖然與本文的描述相似或等同的任何方法和材料都可用于本文所述的實踐,但本文仍描述了示例性的方法和材料。在本文中使用時,除非上下文另有清楚指示,單數(shù)術語"一個/種"和"這個/種"("a"、"an"和"the")也包括復數(shù)指代。除非另有指明,分別地,核酸是按照5,至3,的方向從左到右書寫的;氨基酸是按照氨基到羧基的方向從左到右書寫的。應當理解,本發(fā)明并不限于所述的具體方法、方案和試劑,它們可根據(jù)本領域技術人員使用它們的背景而有所改變。應當注意,本說明書通篇中給出的每個最大數(shù)值限制包括每一個更低的數(shù)值限制,就好像在本文中明確給出了這些更低的數(shù)值限制。本說明書通篇中給出的每個最小數(shù)值限制也將包括每一個更高的數(shù)值限制,就好像在本文中明確給出了這些更高的數(shù)值限制。本說明書通篇中給出的每個數(shù)值范圍也將包括落在此類較寬數(shù)值范圍內(nèi)的每一個較窄的數(shù)值范圍,這就好像在本文中明確給出了這些較窄的數(shù)值范圍。在本文中使用時,術語"?;鶊F"表示式(RC=0-)的有機基團。在本文中使用時,術語"?;?表示將?;?RCO-)基團從一個分子("?;w")轉(zhuǎn)移到另一個分子("底物")上的化學反應,通常這通過用?;鶊F取代底物-OH基團的氫來實現(xiàn)。在本文中使用時,術語"?;w"指在酰基轉(zhuǎn)移反應中提供?;鶊F的分子。在本文中使用時,術語"醇底物,,指包含與碳原子結合的反應活性羥基(-OH)的任何有機分子。該術語不包括多糖和蛋白質(zhì)。水不是醇底物。示例性的醇底物包括但不限于脂肪族醇、脂環(huán)族醇和芳香族醇、薛烯醇和多元醇(包括單體、二聚、三聚和四聚多元醇)。在一些實施方式中,醇含有一個以上羥基。醇底物能在下文所述的?;D(zhuǎn)移反應中接受?;?3團。在一些實施方式中,醇是伯醇、仲醇或叔醇。在本文中使用時,術語"轉(zhuǎn)移酶"指能催化官能化合物向一系列底物轉(zhuǎn)移的酶。術語"酰基轉(zhuǎn)移酶"在本文中使用時指通常被分類為E.C.2丄l.x的酶,它們能將酰基基團從?;w(例如脂類)轉(zhuǎn)移到醇底物上。在本文中使用時,術語"GDSX?;D(zhuǎn)移酶"指具有含GDSX序列基序(其中X通常是L)(通常在N-末端附近)的區(qū)分性活性位點的?;D(zhuǎn)移酶。GDSX酶具有5條共有序列(I-V)。這些酶是已知的(見,例如,Upton"ff/"TrendsBiochem.Sci,20:178-179[1995和Akoh"/.,Prog.LipidRes"43:534-52[2004)。GDSX?;D(zhuǎn)移酶的一個亞組在共有序列中含有保守的SG和H殘基。這些GDSX?;D(zhuǎn)移酶被稱為"SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶"。在本文中使用時"SGNH?;D(zhuǎn)移酶"指SGNH水解酶家族的?;D(zhuǎn)移酶,其中,SGNH水解酶家族的成員含有SGNH水解酶類型的酯酶結構域,其具有三層的a/p/a結構,其中,p-片層由五條平行鏈構成。含有該結構域的酶作為酯酶、脂肪酶和酰基轉(zhuǎn)移酶發(fā)揮作用,但是與典型脂肪酶僅有極少的序列同源性(見Akoh"",Prog.LipidRes.,43:534-552[2004J和Wei"Nat.Struct.Biol"2:218-221995)。已在多個物種中發(fā)現(xiàn)了含SGNH水解酶類型的酯酶結構域的蛋白,這包括但不限于來自瘡痂病鏈霉菌(A^pto/wyc^"fl^ey)的酯斷見SheffieldProteinEng.,14:513-519[2001)、來自流感C病毒、冠狀病毒和環(huán)狀病毒的病毒血細胞凝集素酯酶表面糖蛋白的酯酶(見,MolgaardWfl/.,ActaCrystallogr.D58:111-119[2002]);哺乳動物乙酰水解酶(見,Lo"a/.,J.Mol.Biol.,330:539-551[2003);真菌鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙酰酯酶(見,MolgaardW"/.,Structure8:373-383[2000)和來自大腸桿菌的多功能酶碌u酯酶I(TAP)(見,Molgaard"a/.,ActaCrystallogr.D60:472-478[2004)。SGNH水解酶類型的酯酶結構域含有獨特的氬鍵網(wǎng)絡,其穩(wěn)定它們的催化中心。在一些優(yōu)選的實施方式中,它們含有保守的Ser/Asp/His催化三聯(lián)體。SGNH?;D(zhuǎn)移酶還以檢錄號cd01839.3被描述于GENBANK⑧數(shù)據(jù)庫(通過引用并入本文)的保守結構域數(shù)據(jù)庫中。SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶在與?;w接觸時形成?;?酶中間體,并將?;鶊F轉(zhuǎn)移到除了水之外的受體上。在本文中使用時,術語"典型脂肪酶"指具有脂肪酶活性以及標志性GXSXG基序(其含有活性位點絲氨酸)的酶(見,例如,DerewendaWa/.,BiochemCellBiol.,69:842-1991)。在一些實施方式中,典型脂肪酶是三酰甘油酯脂肪酶,其具有針對三酰甘油酯的和s"3位置的特異性。SGNH?;D(zhuǎn)移酶和GDSL酰基轉(zhuǎn)移酶具有相似的結構,兩者都在結構上與典型脂肪酶不同。術語"酯交換"在本文中使用時指酶催化的酰基基團從脂類供體(非游離脂肪酸)轉(zhuǎn)移到?;荏w(非水)上。在本文中使用時,術語"醇解,,指酶催化的通過與醇ROH的反應來對酸衍生物的共價鍵進行的切割,使得產(chǎn)物之一與醇的H組合,另一產(chǎn)物與醇的OR基團組合。在本文中使用時,術語"水解"指酶催化的?;鶊F從脂類轉(zhuǎn)移至水分子的OH基團。在本文中使用時,術語"水性"用于短語"水性組合物"和"水性環(huán)境"中時指由至少大約50%的水構成的組合物。在一些實施方式中,水性組合物包含至少大約50%的水,至少大約60%的水,至少大約70%的水,至少大約80%的水,至少大約卯%的水,至少大約95%的水或者至少大約97%的水。在一些實施方式中,水性組合物的剩余部分的一部分包含至少一種醇。在一些優(yōu)選的實施方式中,術語"水性"指較之蒸餾水而言具有至少大約0.75,至少大約0.8,至少大約0.9或者至少大約0.95的水活度(Aw)的組合物。在本文中使用時,術語"芳香酯"指具有愉人香氣或味道的酯。該術語包括芳香酯和香p未酯(flavorsomeesters)。這些酯是本領域中公知的。在本文中使用時,術語"織物護理劑"指具有清潔性質(zhì)和/或給織物帶來益處的化合物。此類化合物包括表面活性劑和乳化劑。在一些實施方式中,織物護理劑賦予軟化、織物手感的改進、消除起球、顏色駐留等益處。在本文中使用時,術語"表面活性酯"指具有表面活性劑性質(zhì)的酯,其中,表面活性劑是降低液體表面張力的化合物。在本文中使用時,術語"可檢測到的香味,,指可由人的鼻子或味蕾檢測到的芳香酯的量。以僅可通過質(zhì)語儀而非人的鼻子或味蕾檢測到的量存在的芳香酯并非可檢測到的香味。在本文中使用時,術語"物體"指待清潔的物體。其意欲表示,本發(fā)明包括適于清潔的任何物體,這包括但不限于織物(例如,衣物)、內(nèi)飾、地毯、硬表面(例如,工作臺、地板等)或餐具(例如,盤、杯、碟、碗、刀叉、銀器等)。在本文中使用時,術語"玷污,,或"弄臟"表示物體臟了。對于被玷污的物體來說,污漬并不必肉眼看見。例如,被玷污或弄臟的物體指含有來自動物(例如奶制品)、植物、人汗液等的脂肪物質(zhì)的物體(例如織物)。在本文中使用時,術語"奶制品"指奶(例如,全脂、低脂、脫脂奶或酪乳)或者由其制得的產(chǎn)品,例如,任何類型的奶酪(例如,奶油奶酪、硬奶酪、軟奶酪等)、黃油、酸奶和冰淇淋。事實上,本發(fā)明并不限于任何特定奶制品的,任何基于奶的產(chǎn)品都被該定義所包括。在本文中使用時,術語"含?;w的物體"指包含酰基供體的物體(例如,甘油三酯)。在一些實施方式中,酰基供體作為污漬存在。在本文中使用時,術語"固定的"在固定的酶的上下文中表示酶被固定(例如束縛)到基質(zhì)(例如固體或半固體的支持體)上,而非在溶液中游離。在本文中使用時,術語"在溶液中"指并沒有固定到基質(zhì)上并且在液體組合物中游離的分子(例如酶)。在本文中使用時,術語"有效......的量"和"有效量"在短語"有效產(chǎn)生可檢測到的酯的量"的上下文中指在所使用的條件下產(chǎn)生想要的產(chǎn)品的組分(例如,酶、底物、?;w或其任何組合)的量。在本文中使用時,術語"過氧化氫來源,,包括過氧化氫以及能自發(fā)或酶促產(chǎn)生過氧化氫作為反應產(chǎn)物的系統(tǒng)的組分。在本文中使用時,"個人護理產(chǎn)品"指用于毛發(fā)、皮膚、頭皮和牙齒的清潔、漂白和/或消毒的產(chǎn)品,其包括但不限于洗發(fā)水、潤膚露、沐浴露、局部保濕劑、牙膏和/或其它局部清潔劑。在一些特別的實施方式中,這些產(chǎn)品用于人類,在一些其它實施方式中,這些產(chǎn)品可用于非人類的動物(例如,獸用應用中)。在本文中使用時,"清潔組合物"和"清潔制劑"指可用于從待清潔的物體(例如織物、餐具、隱形眼鏡、其它固體基質(zhì)、毛發(fā)(洗發(fā)水)、皮膚(肥皂和霜劑)、牙齒(漱口水、牙膏)等)去除不想要的化合物的組合物。該術語包括針對想要的特定類型的清潔組合物和產(chǎn)品形式(例如,液體、凝膠劑、粒劑或噴霧組合物)選擇的任何材料/化合物,只要組合物與酰基轉(zhuǎn)移酶和組合物中存在的任何其它酶和/或組分相容即可。考慮到待清可容易地對清潔組合物材料加以特別的選擇。所述術語還指適于對任何物體和/或表面進行清潔、漂白、消毒和/或滅菌的任何組合物。所述術語意欲包括但不限于洗滌劑組合物(例如,液體和/或固體洗衣洗滌劑和精細織物洗滌劑,適于清潔玻璃、木材、陶f:和金屬臺面和窗戶等的硬表面清潔制劑;地毯清潔劑;爐灶清潔劑;織物清新劑(fresheners);織物軟化劑和紡織品和洗衣預去漬劑以及餐具洗滌劑)。事實上,除非另有指明,術語"清潔組合物"在本文中使用時包括粒劑或粉劑形式的所有用途的或重負荷洗滌劑,尤其是清潔洗滌劑;液體、凝膠劑或糊劑形式的所有用途的洗滌劑,尤其是重負荷液體(HDL)類型的;液體精細織物洗滌劑;手洗餐具洗滌劑或輕負荷餐具洗滌劑,尤其是高泡沫類型的那些;機洗餐具洗滌劑,包括多種片狀、顆粒、液體和漂洗輔助類型的,用于家庭和公共機構的;液體清潔和消毒劑,包括抗細菌的洗手類型的、清潔條塊(cleaningbars)、漱口水、口齒清潔劑、車或地毯清洗劑、浴室清潔劑;洗發(fā)水和染發(fā)液;沐浴露和泡沫浴露以及金屬清潔劑;以及清潔用助劑例如漂白添加劑和"污漬貼"、"預處理"和/或"預洗滌"類型的。在本文中使用時,用術語"洗滌劑組合物"和"洗滌劑制劑"表示意欲用于清潔被弄臟的物體的洗滌介質(zhì)中的混合物。在一些實施方式中,在提到對織物和/或衣服進行洗滌時使用該術語(例如"洗衣洗滌劑")。在一些備選的實施方式中,該術語指其它洗滌劑,例如用于清潔餐具、銀器、刀叉等的洗滌劑(例如"餐具洗滌洗滌劑")。本發(fā)明不欲受到任何特別的洗涂劑制劑或組合物的限制。事實上,除了酰基轉(zhuǎn)移酶之外,該術語還包括含有表面活性劑、其它轉(zhuǎn)移酶、水解酶和其它酶、氧化還原酶、助洗劑、漂白劑、漂白活化劑、藍色試劑和焚光染料、結塊抑制劑、掩蔽劑、酶活化劑、抗氧化劑和增溶劑的洗涂劑。在本文中使用時,術語"硬表面清潔組合物"指用于清潔硬表面,例如地板、臺面、櫥拒、墻壁、瓷磚、浴室和廚房設備等的洗漆劑組合物。此類組合物以任何形式提供,其包括但不限于固體、液體、乳液等。在本文中使用時,"餐具洗滌組合物"指用于清潔餐具和用于食物消費和/或食物操作的其它器具的所有形式的組合物,其包括但不限于凝膠劑、粒劑和液體形式。在本文中使用時,"織物清潔組合物,,指用于清潔織物的所有形式的洗滌劑組合物,其包括但不限于凝膠劑、粒劑、液體和棒劑形式。在本文中使用時,"紡織品"指機織織物以及適于轉(zhuǎn)化為或用作為紗線、機織物、編織品和非機織織物的短纖維(staplefibers)和纖絲(filament)。該術語包括從天然以及合成(例如人造)纖維制造的紗線。在本文中使用時,"紡織品材料"是用于纖維、紗線中間物、紗線、織物和從織物制造的產(chǎn)品(例如衣服和其它產(chǎn)品)的一般性術語。在本文中使用時,"織物"包括任何紡織品材料。因此,該術語意欲包括衣服以及織物、紗線、纖維、非機織材料、天然材料、合成材料以及任何其它紡織品材料。在本文中使用時,術語"相容,,表示在正常使用情況下,清潔組合物材料不將酰基轉(zhuǎn)移酶的酶促活性降低到?;D(zhuǎn)移酶不能像所期待的那樣有效的程度。在下文中詳細示例了一些特定的清潔組合物材料。在本文中使用時,"酶的有效量"表示實現(xiàn)特定應用(例如個人護理產(chǎn)品、清潔組合物等)中需要的除&活性所必需的酶的量。此類有效量是本領域普通^R術人員易于確定的,它們基于很多因素,例如所使用的具體的酶或變體,清潔應用,清潔組合物的特定組成以及是否需要液體、凝膠或干的(例如顆粒、條形)組合物等。在本文中使用時,"非織物清潔組合物"包括硬表面清潔組合物、餐具洗滌組合物、個人護理清潔組合物(例如口腔清潔組合物、口齒清潔組合物、個人清潔組合物等)以及適用于紙漿和造紙工業(yè)的組合物。在本文中使用時,術語"酶促轉(zhuǎn)化,,指通過將底物或中間產(chǎn)物與酶相接觸將底物改變?yōu)橹虚g產(chǎn)物或?qū)⒅虚g產(chǎn)物改變?yōu)榻K產(chǎn)物。在一些實施方式中,通過將底物或中間產(chǎn)物直接暴露給合適的酶來進行接觸。在一些其它實施方式中,接觸包括將底物或中間產(chǎn)物暴露給表達和/或分泌所述酶,和物。在本文中使用時,"目的蛋白質(zhì),,指被分析、鑒定和/或修飾的蛋白質(zhì)(例如酶或"目的酶,,)。天然存在的目的蛋白質(zhì)和重組蛋白都可用于本發(fā)明。在本文中使用時,"蛋白質(zhì)"指由氨基酸組成并被本領域技術人員識別為蛋白質(zhì)的任何組合物。術語"蛋白質(zhì)"、"肽"和多肽在本文中可互換使用。其中肽是蛋白質(zhì)的一部分的情況下,本領域技術人員理解上下文中所述術語的使用。在本文中使用時,功能上和/或結構上相似的蛋白質(zhì)被認為是"相關蛋白質(zhì)"。在一些實施方式中,這些蛋白質(zhì)源于不同的屬和/或種,包括生物的綱之間的差異(例如,細菌蛋白質(zhì)和真菌蛋白質(zhì))。在一些實施方式中,這些蛋白質(zhì)源于不同的屬和/或種,包括生物的綱之間的差異(例如,細菌酶和真菌酶)。在另外一些實施方式中,提供了來自相同物種的相關蛋白19質(zhì)。事實上,本發(fā)明并不限于來自任何特別來源的相關蛋白質(zhì)。此外,術語"相關蛋白質(zhì)"包括三級結構同源物和一級序列同源物.在另一些實施方式中,該術語包括有免疫交叉反應性的蛋白質(zhì)。在本文中使用時,術語"衍生物"是指通過在C-和N-末端之一或二者添加一個或多個氨基酸,在氨基酸序列的一個或多個不同位點取代一個或多個氨基酸,和/或在蛋白質(zhì)的一端或兩端或氨基*列的一個或多個位點缺失一個或多個氨基酸,和/或在氨基酸序列的一個或多個位點插入一個或多個氨基酸而從該蛋白質(zhì)獲得的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)衍生物的制備可通過對編碼天然蛋白質(zhì)的DNA序列加以修飾,將該DNA序列轉(zhuǎn)化進合適的宿主以及表達經(jīng)修飾的DNA序列以形成衍生蛋白質(zhì)來實現(xiàn)。相關(以及衍生)蛋白質(zhì)包含"變體蛋白質(zhì)"。在一些實施方式中,變體蛋白質(zhì)與親本蛋白質(zhì)不同,互相之間有少量的氨基酸殘基差異。有差異的氨基酸殘基的數(shù)量可以是一個或多個(例如大約l、大約2、大約3、大約4、大約5、大約IO、大約15、大約20、大約30、大約40、大約50或更多個)氨基酸殘基。在一些實施方式中,變體之間不同氨基酸的數(shù)量在大約1至大約IO個之間。在一些特別的實施方式中,相關蛋白質(zhì)以及特別是變體蛋白質(zhì)包含至少大約35%,大約40%,大約45%,大約50%,大約55%,大約60%,大約65%,大約70%,大約75%,大約80%,大約85%,大約90%,大約95%,大約97V。,大約98%或大約99%的氨基酸序列同一性。此外,本文中使用的相關蛋白質(zhì)或變體蛋白質(zhì)指在顯著區(qū)域的數(shù)量方面與另一相關蛋白質(zhì)或親本蛋白質(zhì)有所不同的蛋白質(zhì)。例如,在一些實施方式中,變體蛋白質(zhì)具有與親本蛋白質(zhì)不同的大約l、大約2、大約3、大約4、大約5或大約IO個相應的顯著區(qū)域。本領域已知有若干方法適于產(chǎn)生本發(fā)明的酶的變體,所述方法包括但不限于位點飽和誘變、掃描誘變、插入誘變、隨機誘變、定點誘變和定向進化以及多種其它重組方法。在一些實施方式中,對同源蛋白質(zhì)進行工程改造,以產(chǎn)生具有想要的活性的酶。在一些實施方式中,經(jīng)工程改造的蛋白質(zhì)被包括在SGNH水解20酶蛋白質(zhì)家族中。在一些實施方式中,經(jīng)工程改造的蛋白質(zhì)包含下述保守殘基中的至少一個或其組合L6、W14、W34、L38、R56、D62、L74、L78、H81、P83、M90、K97、GllO、LI14、L135、F180、G205。在一些備選的實施方式中,這些經(jīng)工程改造的蛋白質(zhì)包含GDSL-GRTT和/或ARTT基序。在另一些實施方式中,酶是多聚體,其包括但不限于二聚體、八聚體和四聚體。在一些實施方式中,為建立一級結構的同源性,將?;D(zhuǎn)移酶的氨基酸序列與酰基轉(zhuǎn)移酶的一級氨基酸序列以及與在序列已知的所有?;D(zhuǎn)移酶中已知不變的一組殘基直接相比較。對保守殘基加以比對之后(其中允許必要的插入和缺失以保持比對(即,避免由于任意缺失和插入導致保守殘基消除)),與?;D(zhuǎn)移酶一級序列中特定氨基酸等同的殘基被確定。在一些實施方式中,對保守殘基的比對確定了100%的等同殘基。但是,對超過大約75%或者低至大約50%的保守殘基的比對也足以確定等同殘基。在一些實施方式中,催化性的絲氨酸和組氨酸殘基的保守性被保持。在一些實施方式中,保守殘基可用于確定其它?;D(zhuǎn)移酶(例如,來自分枝桿菌屬(j的物種以及任何其它生物的酰基轉(zhuǎn)移酶)中包皮垢分枝桿菌(Ms/we^mi似9?;D(zhuǎn)移酶的相應等同氨基酸殘基。在本發(fā)明的一些實施方式中,WO05/056782中提供的編碼包皮祐分枝桿菌?;D(zhuǎn)移酶的DNA序列被修飾。在一些實施方式中,下述殘基被修飾Cys7、AsplO、Serll、Leul2、Thrl3、Trpl4、Trpl6、Pro24、Thr25、Leu53、Ser54、Ala55、Thr64、Asp65、Arg67、Cys77、Thr91、Asn94、Asp95、Tyr99、Val125、Pro138、Leul40、Pro146、Pro148、Trpl49、Phel50、IIel53、Phel54、Thrl59、Thrl86、Ilel92、Ilel94和Phel96。然而,本發(fā)明并不欲限于在這些位置被修飾的序列。事實上,本發(fā)明意欲包括多種修飾和修飾的組合。在一些其它實施方式中,通過在其三級和四級結構已通過x4t線晶體學確定的酰基轉(zhuǎn)移酶的三級和四級結構水平上確定同源性來定義等同殘基。就該上下文來說,"等同殘基,,被定義為這樣的殘基比對后,羰基水解酶和包皮垢分枝桿菌酰基轉(zhuǎn)移酶的特定氨基酸殘基的兩個或多個主鏈原子的原子坐標在大約0.13nm和大約0.1nm內(nèi)(N對N、CA對CA、C對C以及O對O)。在最佳模型被定向及定位,以實現(xiàn)所討論的酖基轉(zhuǎn)移酶與包皮垢分枝桿菌?;D(zhuǎn)移酶非氫的蛋白質(zhì)原子的原子坐標的最大重疊之后,達成比對。如本領域所已知的,最佳模型是在可獲得的最高分辨率下針對實驗衍射數(shù)據(jù)實現(xiàn)最低R因子的晶體模型。功能上和/或結構上與包皮垢分枝桿菌?;D(zhuǎn)移酶的特定殘基類似的等同殘基被定義為優(yōu)先采用下述構象的?;D(zhuǎn)移酶的那些氨基酸,所述構象它們改變、修飾或調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)結構,從而以確定的并且歸因于包皮垢分枝桿菌?;D(zhuǎn)移酶的特定殘基的方式實現(xiàn)底物結合和/或催化的改變。此外,它們是以下述程度占據(jù)類似位置的?;D(zhuǎn)移酶的殘基(在已通過x-射線晶體學獲得三級結構的情況下),所述程度使得雖然給定殘基的主鏈原子基于占據(jù)同源位置并不滿足等同性的標準,但是殘基的至少兩個側鏈原子的原子坐標位于包皮垢分枝桿菌酰基轉(zhuǎn)移酶的相應側鏈原子的0.13nm之內(nèi)。包皮垢分枝桿菌?;D(zhuǎn)移酶的三維結構的坐標被確定,并且示于WO05/056782的實施例14中,并可按照上文所概括的,用于在三級結構水平上確定等同殘基。對野生型和突變蛋白質(zhì)的表征是通過任何合適的手段來完成的,其優(yōu)選基于對目的性質(zhì)的評估。例如,在本發(fā)明的一些實施方式中,測定pH和/或溫度以及洗滌劑穩(wěn)定性和/或氧化穩(wěn)定性。事實上,預期可使用在這些特征(pH、溫度、蛋白水解穩(wěn)定性、洗滌劑穩(wěn)定性和/或氧化穩(wěn)定性)的一個或多個方面具有多種穩(wěn)定性程度的酶。在本文中使用時,"對應于"指蛋白質(zhì)或肽中列舉的位置上的殘基,或與蛋白質(zhì)或肽中列舉的殘基類似、同源或等同的殘基。在本文中使用時,"相應區(qū)域,,通常指沿著相關蛋白質(zhì)或親本蛋白質(zhì)的類似位置。術語"編碼……的核酸分子"、"編碼......的核酸序列"、"編碼......的DNA序列"和"編碼......的DNA"指沿著脫氧核糖核酸鏈的脫氧核糖核苦酸的順序或序列。這些脫氧核糖核苷酸的順序決定了沿著多肽(蛋白質(zhì))鏈的氨基酸的順序。DNA序列由此編碼氨基酸序列。在本文中使用時,術語"類似序列"指蛋白質(zhì)中提供與目的蛋白質(zhì)(典型地,最初目的蛋白質(zhì))相似的功能、三級結構和/或保守殘基的序列。例如,在含有a螺旋或p折疊結構的表位區(qū)域中,在類似序列中替換氨基酸能保持相同的特定結構。該術語還指核苷酸序列和氨基酸序列。在一些實施方式中,開發(fā)這樣的類似序列,使得替換氨基酸導致顯示相似或改進功能的變體酶。在一些優(yōu)選的實施方式中,目的蛋白質(zhì)中氨基酸的三級結構和/或保守殘基位于目的區(qū)段或片段上或附近。因此,在目的區(qū)段或片段含有例如a螺旋或p折疊結構時,替換氨基酸保持該特定結構。在本文中使用時,"同源蛋白質(zhì)"指具有與目的蛋白質(zhì)(例如來自另一來源的?;D(zhuǎn)移酶)相似作用和/或結構的蛋白質(zhì)(例如?;D(zhuǎn)移酶)。同源物并不必須在進化上相關。因此,該術語意欲包括從不同物種獲得的相同或相似的酶(即,在結構和功能方面)。在一些優(yōu)選的實施方式中,人們想要鑒定出具有與目的蛋白質(zhì)相似的四級、三級和/或一級結構的同源物,因為用來自同源物的類似區(qū)段替換目的蛋白質(zhì)中的區(qū)段或片段將降低改變的破壞性。在一些實施方式中,同源蛋白質(zhì)能誘導與目的蛋白質(zhì)相似的免疫應答。在本文中使用時,"同源基因"指來自不同物種的至少一對基因,所述基因互相對應,并且所述基因互相相同或非常相似。該術語包括通過物種形成(即,新物種的發(fā)展)分離的基因(例如,直向同源基因)以及已通過遺傳復制分離的基因(例如,共生同源基因)。這些基因編碼"同源蛋白質(zhì)"。在本文中使用時,"直向同源物"和"直向同源基因"指通過物種形成從共同祖先基因(即,同源基因)進化出的不同物種中的基因。典型地,直向同源物在進化期間保留了相同的功能。對直向同源物的鑒定可用于在新測序的基因組中可靠地預測基因功能。在本文中使用時,"共生同源物"和"共生同源基因"指通過在基因組中復制而相關的基因。盡管直向同源物在進化過程中保留了相同的功能,但是共生同源物則進化出新的功能,即使一些功能通常與原來的功能相關。共生同源基因的例子包括編碼胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶和凝血酶的基因,它們都是絲氨酸蛋白酶并且在同一物種中一起存在。在本文中使用時,"野生型"、"天然"和"天然存在的"蛋白質(zhì)是自然界中發(fā)現(xiàn)的那些。術語"野生型序列"和"野生型基因"在本文中可互換使用,它們表示在宿主細胞中是天然的或天然存在的序列??砂凑毡绢I域技術人員已知的一般性方法來獲得編碼天然存在的蛋白質(zhì)的基因。所述方法通常包括合成具有編碼目的蛋白質(zhì)區(qū)域的推定序列的經(jīng)標記探針,從表達該蛋白質(zhì)的生物制備基因組文庫,以及通過與所述探針的雜交從文庫篩選目的基因。然后可對陽性雜交克隆進行作圖和測序??墒褂帽绢I域已知的任何合適方法來確定序列間的同源性程度(見,例如,SmithandWaterman,Adv.Appl.Math.,2:482[1981;NeedlemanandWunsch,J.Mol.Biol"48:443[1970;PearsonandLipman,Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:2444[1988;程序,例如WisconsinGenetics軟件包(GeneticsComputerGroup,Madison,WI)中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA以及Devereux"fl/"Nucl.AcidRes.,12:387-395[1984)。在本文中使用時,"百分比(%)核酸序列同一性,,被定義為候選序列中與序列的核苷酸序列相同的核苷酸殘基的百分比。在本文中使用時,術語"雜交"表示核酸鏈與互補鏈通過堿基配對相連的過程,這是本領域已知的。在本文中使用時,短語"雜交條件"表示雜交反應進行的條件。典型地,通過條件的"嚴緊性"程度來對這些條件加以歸類,其中在所述條件下測量雜交。嚴緊性程度可基于例如核酸結合復合體或探針的解鏈溫度(Tm)。例如,"最大嚴緊度"典型地大約Tm-5°C時(比探針的Tm低5。C)下發(fā)生;"高嚴緊度"比Tm低大約5-10。;"中等嚴緊度"比探針的Tm低大約10-20。;"低嚴緊度,,比Tm低大約20-25°。備選或額外地,雜交條件基于雜交和/或一次或多次嚴緊洗滌的鹽或離子強度條件。例如,6xSSC=非常低的嚴緊度;3xSSC=低至中等的嚴緊度;lxSSC-中等嚴緊度;以及O.SxSSC-高嚴緊度。功能上,最大嚴緊度條件可用于鑒定具有與雜交探針有嚴格同一性或接近嚴格同一性的核i^列;而高嚴緊度條件用于鑒定與探針具有大約80%或更高的序列同一性的核酸序列。對于需要高選擇性的應用而言,在一些實施方式中,可能想要使用相對嚴緊的條件來形成雜交體(例如,使用相對低的鹽和/或高溫度條件)。在提到至少兩條核酸或多肽時,短語"實質(zhì)性相似"和"實質(zhì)性同一,,通常表示多核苷酸或多肽包含較之參照(即野生型)序列而言具有至少大約40。/。同一性,至少大約50%同一性,至少大約60%同一性,至少大約75%同一性,至少大約80%同一性,至少大約90%同一性,至少大約95%同一性,至少大約97%同一性,一些時4矣多達大約98%和大約99%序列同一性的序列。可使用已知的程序,例如BLAST、ALIGN和CLUSTAL,采用標準參數(shù)來確定序列同一性(見,例如,Altschul,"《r/.,J.Mol.Biol.215:403-410[1990]、HenikoffCW"Proc.Natl.Acad,Sci.USA89:109119891、Karinfl/.,Proc.Natl.Acad.SciUSA90:581993和Higginsetal,Gene73:237-244[1988])。用于進行BLAST分析的軟件是公眾可通過NationalCenterforBiotechnologyInformation獲4尋的。jt匕夕卜,可寸吏用FASTA來檢索數(shù)據(jù)庫(Pearson""/"Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:2444-2448[1988)。兩條多肽實質(zhì)性同一的一種指征是第一條多肽與第二條多肽有免疫交叉反應性。典型地,由于保守氨基酸取代而有所不同的幾條多肽具有免疫交叉反應性。因此,當兩條肽不同僅在于保守取代時,該多肽與笫二多肽實質(zhì)性同一。兩條核^列實質(zhì)性同一的指征是兩條分子能在嚴緊條件(例如在中等至高度嚴緊度范圍內(nèi))下互相雜交。術語"回收的"、"分離的"和"分開的,,在本文中使用時表示從中除去了至少一種與之天然相關聯(lián)的組分的蛋白質(zhì)、細胞、核酸或氨基酸。在某些情況下,經(jīng)分離的蛋白質(zhì)是分泌進培養(yǎng)基然后從該培養(yǎng)基回收的蛋白質(zhì)。術語"重組"表示在宿主細胞中不天然存在的多核苷酸或多肽。重組分子可以含有兩種或多種天然發(fā)生的序列,它們以不天然發(fā)生的方式連接在一起。重組細胞含有重組多核苷酸或多肽。使用重組方法生產(chǎn)的蛋白質(zhì)是用正常情況下不生產(chǎn)這些蛋白質(zhì)的宿主細胞來生產(chǎn)的。術語"異源,,表示正常情況下并不相互關聯(lián)的元件。例如,如果宿主細胞生產(chǎn)異源蛋白質(zhì),該蛋白質(zhì)是正常情況下并不在該宿主細胞中生產(chǎn)的。類似地,與異源編碼序列有效連接的啟動子是與編碼序列有效連接的啟動子,所述啟動子在野生型宿主細胞中通常并不與該編碼序列有效連接。在提到多核苷酸或蛋白質(zhì)表達時,術語"同源,,指在表達其的宿主細胞中天然存在的多核苷酸或蛋白質(zhì)。在本文中使用時,"宿主細胞"通常是使用本領域已知的重組DNA技術構建的載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染過的原核或真核宿主。經(jīng)轉(zhuǎn)化的宿主細胞能復制編碼蛋白質(zhì)變體的載體或表達想要的蛋白質(zhì)變體。在編碼蛋白質(zhì)變體的前或前原形式的載體的情況下,典型地,此類變體表達的時候從宿主細胞分泌進宿主細胞培養(yǎng)基。在一些實施方式中,本發(fā)明涉及某些?;D(zhuǎn)移酶高效催化水性環(huán)境中?;鶊F從?;w(例如C2至C20的酯)向醇底物轉(zhuǎn)移的活性。如本文中更詳細描述的,在一些實施方式中,這些酶的這種活性;陂用于制備具有愉人香味或風味的酯。在一些其它實施方式中,這些酶的活性優(yōu)選用于在清潔應用中減少臭味。并不限于任何具體的酶、醇底物或?;w,以及僅僅是為了幫助對本文所述的方法的一些實施方式的理解,下文闡迷了通過本發(fā)明方法的一些實施方式進行的反應,其中"AcT"代表"?;D(zhuǎn)移酶"。ooIIACTIIX—OH+R——C——O—Y——^-R—C——Q—X醇底物?;w、酯產(chǎn)物Y—OH例如,并且再次不受限于任何具體的酶、醇底物或酰基供體,以及僅僅是為了幫助對本文所述的方法的一些實施方式的理解,利用酰基轉(zhuǎn)移酶來將?;鶊F從合適的?;w(例如甘油三酯,例如甘油三丁酸酯或甘油三乙酸酯)轉(zhuǎn)移到萜烯醇例如香葉醇或香茅醇上,從而產(chǎn)生芳香酯。類似地,在其它實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶用于降低油類污漬的臭味。在一些26特別優(yōu)選的實施方式中,油類污漬是奶制品污漬。在這些臭味降低/預防的實施方式中,利用AcT酶來降低甘油三酯的水解產(chǎn)生的氣味不悅的揮發(fā)性脂肪酸(例如丁酸)的量。在一些實施方式中,跣基轉(zhuǎn)移酶與至少一種脂肪酶協(xié)同工作,以增加從三酰甘油酯去除?;湹乃俾?,而在其它實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶通過將?;溸B接到醇底物上產(chǎn)生酯產(chǎn)物(而非揮發(fā)性脂肪酸)來發(fā)揮作用。在一些實施方式中,酰基轉(zhuǎn)移酶以上述兩種方式工作。在一些實施方式中,來自三酰甘油酯的?;溑c醇底物相連,從而產(chǎn)生芳香酯。在這些實施方式中,芳香酯(而非氣味不悅的揮發(fā)性脂肪酸)作為副產(chǎn)物產(chǎn)生。該實施方式在圖6中被示意性闡述。下文更詳細地描述這些實施方式以及其它很多實施方式。在下文詳細描述之前,需要注意,本文所討論的方法可使用多種不同的酶,所述酶具有催化酰基基團從?;w轉(zhuǎn)移到醇底物上從而產(chǎn)生酯的能力。此類酶包括但不限于典型的脂肪酶、?;?CoA依賴性轉(zhuǎn)移酶、磷脂酶、角質(zhì)酶、GDSX水解酶、SGNH水解酶、絲氨酸蛋白酶和酯酶以及在與?;w接觸時能形成酰基-酶中間產(chǎn)物并將?;鶊F轉(zhuǎn)移到非水的受體上的任何酶。在一些實施方式中,酶是野生型酶,而在一些其它實施方式中,酶具有經(jīng)修飾的氨基酸序列,這使得酶較之野生型酶而言具有改變的底物特異性或增加的?;D(zhuǎn)移酶活性。在進一步描述的這些實施方式中,提供了可用于本發(fā)明的額外組分。酰基轉(zhuǎn)移酶如上文所述,本發(fā)明提供了產(chǎn)生酯的組合物,其含有至少一種?;D(zhuǎn)移酶,還提供了使用所述酶的方法。預期本發(fā)明組合物的?;D(zhuǎn)移酶包含能催化酰基基團從?;w轉(zhuǎn)移至醇底物的任何酶。如上文所述,若干種類型的酶可用于本發(fā)明的方法。在一些實施方式中,所利用的酶對醇底物的特異性比水高。在這些實施方式中的一些中,酶展示出相對低的水解活性(即,在存在水時相對較差的水解?;w的能力)以及相對高的?;D(zhuǎn)移酶活性(即,在水性環(huán)境中存在醇時更高的水解?;w的能力),其中,醇解:水解的比例超過大約1.0,至少大約1.5的比例或者至少大約2.0。在一些實施方式中,酰基轉(zhuǎn)移酶對過氧化物的特異性也比水高,這導致產(chǎn)生了過酸清潔劑(例如,過氧化物水解:水解的比例超過大約1.0,至少大約1.5的比例或者至少大約2.0)。在一些實施方式中,可使用GDSX酰基轉(zhuǎn)移酶,特別是SGNH?;D(zhuǎn)移酶??捎糜诒景l(fā)明的示例性SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶包括在NCBI的GENBANK⑧數(shù)據(jù)庫中以檢錄號YP_890535(GID:11846860;還見WO05/056782;包皮垢分枝桿菌);NP_436338.1(GID:16263545;W"油.油.薩膨脂/);ZP—01549788.1(GID:118592396;5"鄉(xiāng)/;,Vi);NP066659.1(GID:10954724;發(fā)才艮土壤桿菌(/^ra6""eW"附Wi&叩e"M));YP_368715.1(GID:78065946;伯克霍爾德氏菌屬(必w/^/^^teWfls/.));YP一674187.1(GID:110633979;3f^o/^&M/"附W.)和NP_532123.1(GID:17935333;才艮瘤土壤桿菌(/^ra6"cteW"附^i附e/fl"'e附))保藏的野生型SGNH?;D(zhuǎn)移酶,其野生型直向同源物和同源物,及其具有下述氨基酸序列的變體,所述M酸序列與那些野生型酶中任一種有至少大約70%同一性,至少大約80%同一性,至少大約卯%同一性,至少大約95%同一性或者至少大約98%同一性。這些GENBANK⑧檢錄號通過整體引用并入本文,包括其中的核酸和蛋白質(zhì)序列以及對這些序列的注釋。通過使用本領域已知的標準序列比較方法(例如BLAST等),對NCBI的GENBANK⑧數(shù)據(jù)庫進行基于同源性的序列檢索,來獲得此類酶的其它一些例子。在一些實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶具有與GENBANK⑧條目YP—890535(GID:11846860;包皮垢分枝桿菌;還見WO05/056782)所示的氨基酸序列至少大約70%同一性的氨基#列。其它示例性的SGNH?;D(zhuǎn)移酶包括下述這些,它們通過其物種和GENBANK⑧檢錄號被引用發(fā)根土壤桿菌(Q9KWA6)、發(fā)根土壤桿菌(Q9KWB1)、根瘤土壤桿菌(Q8UFG4)、根瘤土壤桿菌(Q8UAC0)、28根瘤土壤桿菌(Q9ZI09)、根瘤土壤桿菌(ACA)、P^w汰"oM"er(RVM04532)、百樂財艮根瘤菌(及Ai'zM/"附)(Q98MY5)、苜藉根瘤菌(/.挑e/,7o"J(Q92XZ1)、苜蓿根瘤菌(Q9EV56)、發(fā)根根瘤菌(及.rAi^ge"as)(NF006)、發(fā)根根瘤菌(NF00602875)、及.so/"wflcemr"附(Q8XQI0)、S/wwW^^/w附附e/"W/(RSM02162)、5".RSM05666)、百樂M艮中間根瘤菌(M^^/^M/"附/W)(RMLO00301)、發(fā)根土壤桿菌(Q9KWA6)、發(fā)根土壤桿菌(Q9KWB1)、根瘤土壤桿菌(AAD02335)、百脈根中間根瘤菌(Q98MY5)、百脈根中間根瘤菌(ZP00197751)、/a/stow/"so/"冊ceflrM附(Q8XQI0)、及a/s^w,Vxe旨o/;/rflr(ZP00166901)、A^jmxe//"6ov/s(AAK53448)、洋蔥伯克霍爾德氏菌(丑w/^/^WeWflrce/mc/")(ZP00216984)、青紫色素桿菌(Or/wwo6acfeW"附v/o/flcew附AQ7NRP5)、小小梨形菌屬(/^>e//"to印.>(NP_865746)、創(chuàng)傷貝內(nèi)克氏菌(vw/"訴c"s,(AA007232)、鼠傷寒軒菌(iSVi/wio/jc//"妙/f/附w/77/wij(AAC38796)、57/1orA/zo6/M附附e/i7W(SMal993)、57朋由^6/附附W/W/(Q92XZ1)和S,"wAi'^Wm附me似ori(Q9EV56)。本著所有目的而言,這些蛋白質(zhì)的氨基酸序列、序列比對和與上文所述相關的所有其它信息都通過引用從WO05/056782并入本文。WO05/056782中對此類酶的若干例子進行了結晶,并且描迷了對保留或改變了其活性的變體酶提供了很多示例性M酸取代,該文獻并入本文作為參考。WO05/056782的表10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8和10-9中示出了數(shù)百種氨基酸取代的列表,這些取代被耐受并且在一些實施方式中可用于改變包皮垢分枝桿菌過水解酶的水解活性、過水解活性、過酸降解活性和/或穩(wěn)定性??紤]到SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶的結構相似性,WO05/056782中描述的氨基酸取代易于轉(zhuǎn)移至SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶家族的其它成員。WO05/056782中描述的每個氨基酸取代以及通過這些取代產(chǎn)生的氨基酸序列被并入本文作為參考。在一些實施方式中,本文所用的酰基轉(zhuǎn)移酶不是乙酰CoA依賴性的酶。在一些備選的實施方式中,用于本發(fā)明方法中的GDSX或SGNH酰2008基轉(zhuǎn)移酶是野生型?;D(zhuǎn)移酶近平滑假絲酵母(CVim^i/mm/w7卵&)、杜氏氣單胞菌(y4^v附owfls/rj;rffvp/^7fl)或殺鮭氣單胞菌(y4ew附卵assfl/附om'c^/a),而在一些其它實施方式中,酰基轉(zhuǎn)移酶是與其至少大約95%同一性的變體。使用本領域已知的常規(guī)方法來生產(chǎn)和分離用于本發(fā)明中的酰基轉(zhuǎn)移酶。在一些實施方式中,使用重組方法和非天然宿主來完成?;D(zhuǎn)移酶的生產(chǎn),所述宿主在細胞內(nèi)產(chǎn)生?;D(zhuǎn)移酶或分泌?;D(zhuǎn)移酶。在一些實施方式中,向酶加上信號序列,其通過分泌進周質(zhì)(如,革蘭氏陰性生物,例如大腸桿菌中)或細胞外空間(如,革蘭氏陽性生物,例如芽孢桿菌(5flf"7/"s)和放線菌(^"i'"owy;c"^J中)或真核宿主(例如,木霉屬(7Wc/^flfe尸附aJ、曲霉屬(y4s/e尸gi7/oy,、酵母屬(5^ccA"ro,cesJ和畢赤酵母屬(Pic似ff))來協(xié)助酶的表達。本發(fā)明的任何方面并不欲限于這些具體的宿主,因為很多其它生物可在本發(fā)明中用作為表達宿主。例如,公知芽孢桿菌的細胞是表達細胞外蛋白質(zhì)(例如蛋白酶)的合適宿主。蛋白質(zhì)的細胞內(nèi)表達較少被公知。酶蛋白質(zhì)在枯草芽孢桿菌CBfldW附sn6說Zs)細胞內(nèi)的表達通常在不存在該基因的5,末端信號序列時用多種啟動子來進行,所述啟動子包括但不限于pVeg、pSPAC、pAprE或pAmyE。在一些實施方式中,表達是從復制型質(zhì)粒(高或低拷貝數(shù))實現(xiàn)的,而在一些備選的實施方式中,表達是通過將想要的構建體整合進染色體來實現(xiàn)的。整合可在任何基因座進行,包括但不限于印r五、或/>戸基因座。在一些實施方式中,從整合的構建體的一個或多個拷貝來表達酶。在一些備選的實施方式中,通過整合能擴增的構建體(例如,與抗生素盒相連,側翼有正向重復序列)或通過將多個拷貝連接起來并隨后整合進染色體,來獲得多個整合的拷貝。在一些實施方式中,在合適的培養(yǎng)物中,用pNB活性測定法來監(jiān)測用復制型質(zhì)?;蛘系臉嫿w進行的酶的表達。和用芽孢桿菌一樣,在一些實施方式中,使用復制型質(zhì)粒來完成酶在革蘭氏陽性宿主鏈霉菌中的表達,而在一些其它實施方式中,通過栽體向鏈霉菌染色體中的整合來完成酶的表達。能在鏈霉菌中被識別的任何啟動子都可用于驅(qū)動酶基因的轉(zhuǎn)錄(例如,葡萄糖異構酶啟動子,A4啟動子)。復制型質(zhì)粒,無論是穿梭載體或僅鏈霉菌均可用于本發(fā)明進行表達(例如pSECGT)。在一些其它實施方式中,在其它一些宿主細胞中生產(chǎn)酶,所述宿主細胞包括但不限于真菌宿主細胞(例如,畢赤酵母屬CPZdiViw.)、曲霉屬(v45/w7/附5p.)或木霉屬(7WcAorfe簡fls/;.)宿主細胞等)。在一些實施方式中,酶從宿主細胞分泌,使得可從培養(yǎng)宿主細胞的培養(yǎng)基中回收酶。一旦分泌進培養(yǎng)基,可通任何合適的和/或方便的方法(例如通過沉淀、離心、親和性、親和層析、離子交換層析、疏水相互作用層析兩相分配、乙醇沉淀、反相HPLC、硅膠層析或陽離子交換樹脂(例如DEAE)上層析、層析聚焦、SDS-PAGE、疏酸銨沉淀、凝膠過濾(例如SephadexG-75)、過濾和本領域已知的任何其它方法)來回收酶。事實上,本領域技術人員已知多種合適的方法。在一些備選的實施方式中,不從培養(yǎng)基的其它組分純化而直接使用酶。在這些實施方式的一些中,對培養(yǎng)基進行簡單濃縮,不進一步針對生長培養(yǎng)基的組分對蛋白質(zhì)加以純化就加以使用,而在一些其它實施方式中,不進行任何進一步的改變就^f吏用。醇底物可用于本發(fā)明的醇底物包括含有與碳原子結合的反應性羥基基團的任何有機分子,但這不包括含羥基的多糖和蛋白質(zhì)。在一些實施方式中,醇底物是下式的醇底物Z-OH,其中Z是任何帶支鏈的、直鏈的、環(huán)狀的、芳香族的或線性的有機基團或者其任何取代形式。在一些實施方式中,Z是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的含有2-30個碳原子的烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基雜芳基或雜芳基。在另一些實施方式中,Z是脂肪族部分、被脂環(huán)族或芳香族部分(例如碎)取代的脂肪族部分。在一些其它實施方式中,醇底物是多元醇,例如含二醇的分子(例如,四甘醇、聚乙二醇、聚丙二醇或聚四氫呔喃)。合適的醇底物包括單體多元醇(例如甘油)以及二聚、三聚或四聚多元醇以及糖醇,例如赤蘚醇、異麥芽糖醇、乳糖醇、麥芽糖醇、甘露醇、山梨醇和木糖醇。在一些實施方式中,多元醇是式(Z^OH)n或Z-(OH)n的分子,其中,n是至少大約l、大約2、大約3、大約4、大約5或大約6(例如其中n是l-4)。在一些實施方式中,醇作為表面活性劑或乳化劑的一部分存在(例如,高線性度的伯醇,例如NEODOLTM洗滌劑)。在一些實施方式中,用于下文所述的芳香酯生產(chǎn)方法中的醇底物是式Z-OH的分子,其中Z是脂環(huán)族或芳香族的部分或者例如薛??捎糜诒景l(fā)明的方法中的示例性的醇底物包括但不限于乙醇、甲醇、甘油、丙醇、丁醇和下表l-3所示的醇底物。酰基供體用于本發(fā)明方法中的?;w包含含有可轉(zhuǎn)移的酰基基團的任何有機分子。在一些實施方式中,典型的?;w是式I^C(-0)OI^的酯,其中,W和W獨立地是任何有機部分,雖然也可使用其它分子。在一些實施方式中,合適的?;w是單體形式的,而在一些其它實施方式中,它們是多聚形式的,包括二聚體、三聚體和更高級的多元醇酯。在本文中使用時,"短鏈?;w"是式I^C(-0)ORZ的酯,其中,R1是含有至少1至9個碳原子的鏈的任何有機部分,W是任何有機部分。在一些實施方式中,短鏈酰基酯含有2-10個碳原子的?;?即,Qrdo碳鏈)。示例性的長鏈酰基酯含有C6、C7、C8、C9、Cm碳鏈。示例性的長鏈?;ズ幸阴;⒈?、丁基、戊基或己基基團等。"長鏈?;w,,是式1^<:(=0)0112的酯,其中,Rt是含有至少10個碳原子的鏈的任何有機部分,RZ是任何有機部分。例如,在一些實施方式中,長鏈酰基供體含有C、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20、(:21或(:22酰基鏈??捎糜诒景l(fā)明的示例性的酯包括下式的那些R1。,[(R2)m(Rp其中,Ri是選自H或經(jīng)取代或未經(jīng)取代的烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基雜芳基和雜芳基構成的組的部分。在一些實施方式中,R1包含大約1至大約50,000個碳原子,大約1至大約10,000個碳原子或者甚至大約2至大約100個碳原子;其中,每個RZ是任選被取代的烷氧基化物部分(在一些實施方式中,每個W獨立地是乙氧基化物、丙氧基化物或丁氧基化物部分);Rs是具有下式的酯形成部分R4CO-,其中"R是H、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基雜芳基和雜芳基(在一些實施方式中,W是包含5至22或更多個碳原子的經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的直鏈或支鏈的烷基、烯基或炔基部分,包含5至12或更多個碳原子的芳基、烷基芳基、烷基雜芳基或雜芳基部分,或者R"是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的Cs-do或更長的烷基基團部分,或者R"是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的C"-C22或更長的烷基部分);當R'是H時,x是l;當W不是H時,x是等于或小于R1中碳原子數(shù)的整數(shù);p是等于或小于x的整數(shù);m是0至50的整數(shù)、0至18的整數(shù)或0至12的整數(shù),n為至少l。在本發(fā)明的一些實施方式中,包含酯部分的分子是具有式R力x[(ie)m(R、p的烷基乙氧基化物或丙氧基化物,其中R1是C2-C32經(jīng)取代或未經(jīng)取代的烷基或雜烷基部分;每個W獨立地是乙氧基化物或丙氧基化物部分;R"是具有下式的酯形成部分R4CO-,其中"R""是H、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基雜芳基和雜芳基,在一些實施方式中,R"是包含5至22或更多個碳原子的經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的直鏈或支鏈的烷基、烯基或炔基部分,包含5至12或更多個碳原子的經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的芳基、烷基芳基、烷基雜芳基或雜芳基部分,或者W是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的C5-C10或更長的烷基基團部分,或者W是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的Cs-C22或更長的烷基部分;x是等于或小于R1中碳原子數(shù)的整數(shù);P是等于或小于x的整數(shù);m是l至12的整數(shù),以及n為至少1。在本發(fā)明的一些實施方式中,包含酯部分的分子具有下式我[(R2)m(R3)np其中,W是H或包含伯胺、仲胺、7k胺或季胺部分的部分,其中,所述W部分包含選自經(jīng)取代或未經(jīng)取代的烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基雜芳基和雜芳基部分構成的組的胺部分。在一些實施方式中,R1包含大約1至大約50,000個碳原子,大約1至大約IO,OOO個碳原子或者甚至大約2至大約100個碳原子;每個W是烷氧基化物部分(在一些實施方式中,每個W獨立地是乙氧基化物、丙氧基化物或丁氧基化物部分);Rs是具有下式的酯形成部分R4CO-,其中"R"是H、經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的烷基、烯基、炔基、芳基、烷基芳基、烷基雜芳基和雜芳基(在一些實施方式中,RA是包含5至22個碳原子的經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的直鏈或支鏈的烷基、烯基或炔基部分),包含9至12或更多個碳原子的經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、烷基芳基、烷基雜芳基或雜芳基部分,或者R"是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的C5-Cw或更長的烷基部分,或者W是經(jīng)取代或未經(jīng)取代的C『C22或更長的烷基部分;當W是H時,x是l;當W不是H時,x是等于或小于R'中碳原子數(shù)的整數(shù);p是等于或小于x的整數(shù);m是0至12的整數(shù)或者甚至1至12的整數(shù),n為至少1。合適的?;w包括任何類型的甘油三酯,包括源于動物的甘油三酯,奶制品甘油三酯,源于植物的甘油三酯和合成的甘油三酯,其包括但不限于甘油三乙酸酯和甘油三丁酸酯分別提供乙?;?、丁酰基和更長鏈的?;鶊F的更長鏈的分子。二酰甘油、單酰甘油、磷脂、溶血磷脂、糖脂也可用于本發(fā)明。在一些實施方式中,二酰甘油和三酰甘油含有相同的脂肪酸鏈,而在一些其它實施方式中,它們含有不同的脂肪酸鏈。其它合適的酯包括顏色形成酯,例如,對硝基酚酯。其它酯包括脂肪族的酯(例如丁酸乙酯)、類異戊二烯酯(例如乙酸香茅酯)和芳香族的酯(例如乙酸苯曱酯)。在本發(fā)明的一些清潔實施方式中,?;w存在于物體上(例如作為物體上的污漬)。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,通過本發(fā)明的組合物原位對酰基供體脫?;T谝恍嵤┓绞街?,本文更詳細描述的芳香酯生產(chǎn)方法中的一些需要轉(zhuǎn)移短鏈(例如C2-C10)酰基基團,例如乙?;投□;鶊F。清潔組合物本發(fā)明還提供了清潔組合物,其包含至少一種酰基轉(zhuǎn)移酶和至少一種?;D(zhuǎn)移酶的醇底物。在一些實施方式中,清潔組合物^皮配制為-皮?;w分子(例如,甘油三酯)原位玷污的清潔物體。因此,在一些實施方式中,酰基轉(zhuǎn)移酶和醇底物以能在清潔組合物與含?;w的物體接觸時產(chǎn)生可檢測到的酯的量存在。在一些實施方式中,與含?;w的物體接觸時,清潔組合物還包含含?;w的物體以及作為?;D(zhuǎn)移酶催化的醇底物和?;w之間的反應的結果產(chǎn)生的酯。如上文所提到的,在一些實施方式中,酰基轉(zhuǎn)移酶是SGNH?;D(zhuǎn)移酶。在一些其它實施方式中,清潔組合物含有醇底物和?;w組合,使得來自酰基供體的?;鶊F通過酰基轉(zhuǎn)移酶^L轉(zhuǎn)移至醇底物時,產(chǎn)生織物護理劑(例如,表面活性酯)。在一些實施方式中,醇固體是雙目的分子,因為其還作為清潔組合物中存在的表面活性劑或乳化劑發(fā)揮功能。此類醇底物的例子包括但不限于脂肪醇(例如,C8-C18線性或支鏈的脂肪醇),例如鯨蠟醇(例如,十六烷-l-醇),源于脂肪醇的脂肪醇乙氧基化物(例如,NEODOLTM乙氧基化物)以及多元醇乙氧基化物(例如甘油乙氧基化物),它們通常用于清潔組合物中。如下文更為詳細地描述的,本發(fā)明的清潔組合物以任何合適的形式提供,包括固體(例如,酶和醇底物被吸附到固體材料上)、液體和凝膠。在一些優(yōu)選的實施方式中,組合物以濃縮形式提供。在一些其它實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物原樣使用,在另一些實施方式中,它們用作為噴霧劑或預洗滌組合物。使用中,清潔組合物的工作形式(例如,清潔組合物的溶解或稀釋形式)是水性的,并因此含有至少大約50%的水,在很多情況下,含有大約50%至大約99.99%的水。在一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物中醇底物的工作濃度為大約0.0001%至大約50%(v/v或w/v),小于大約1%,小于大約0.1%,小于大約0.01%或者小于大約0.001%的醇。在一些實施方式中,在清潔組合物中本發(fā)明?;D(zhuǎn)移酶的工作濃度為大約0.01ppm(百萬分之,w/v)至大約1000ppm,大約0.01ppm至大約0.05ppm,大約0.05ppm至大約0.1ppm,大約0.1ppm至大約0.5ppm,大約0.5ppm至大約1ppm,大約1ppm至大約5ppm,大約5ppm至大約10ppm,大約10ppm至大約50ppm,大約50ppm至大約100ppm,大約100ppm至大約500ppm,或者大約500ppm至大約1000ppm。在一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物還包含至少一種脂肪酶(例如,具有才艮據(jù)IUBMB酶命名系統(tǒng)定義為EC3.1.1.3的活性的三酰甘油脂肪酶)。在一些實施方式中,脂肪酶是如上文所述的典型脂肪酶。預期?;D(zhuǎn)移酶和脂肪酶協(xié)同作用以從物體上的?;视头肿?例如三酰甘油)除去酰基鏈。但是,本發(fā)明并不受限于任何具體的作用機制。在一些實施方式中,清潔組合物包含過氧化物的來源,其可以是過氧化氫本身或產(chǎn)生作為反應產(chǎn)物的過氧化氫的組合物。合適的產(chǎn)生過氧化氬作為反應產(chǎn)物的過氧化氫來源包括但不限于過氧(peroxygen)來源,其選自(i)大約0.01至大約50,大約0.1至大約20,大約1至10重量百分比的過酸鹽、有機過氧酸、過氧化氫尿素及其混合物;(ii)大約0.01至大約50,大約0.1至大約20或者大約1至10重量百分比的碳水化合物和大約0.0001至大約1,大約0.001至大約0.5,大約0.01至大約0.1重量百分比的碳水化合物氧化酶;以及(iii)它們的混合物。合適的過酸鹽包括但不限于過硼酸堿金屬鹽、過碳酸堿金屬鹽、過磷酸堿金屬鹽、過硫酸堿金屬鹽及其混合物。在一些實施方式中,糖選自單糖、二糖、三糖、寡糖(例如碳水化合物)及其混合物。合適的糖包括但不限于選自D-阿拉伯糖、L-阿拉伯糖、D-纖維二糖、2-脫氧-D-半乳糖、2-脫氧-D-核糖、D-果糖、L-果糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘油-D-古洛-庚糖、D-乳糖、D-來蘇糖、L-來蘇糖、D畫麥芽糖、D-甘露糖、松三糖、L-蜜二糖、帕拉金糖、D-蜜三糖、L-鼠李糖、D-核糖、L-山梨糖、水蘇糖、蔗糖、D-海藻糖、D-木糖、L-木糖及其混合物的糖。合適的碳水化合物氧化酶包括但不限于選自醛糖氧化酶(IUPAC分類EC1,1.3.9)、半乳糖氧化酶(IUPAC分類EC1.1.3.9)、纖維二糖氧化瞰IUPAC分類EC1.1.3.25)、吡喃糖氧化斷IUPAC分類EC1.1.3.10)、山梨糖氧化酶(IUPAC分類EC1.1.3.11)和/或己糖氧化酶(IUPAC分類EC1.1.3.5)、葡萄糖氧化酶(IUPAC分類EC1.1.3.4)及其混合物的碳水化合物氧化酶。在一些實施方式中,被清潔組合物清潔的含?;w物體被油性物質(zhì)(例如,含有三酰甘油酯等的物質(zhì))玷污。在一些實施方式中,物體(例如織物),皮奶制品玷污。雖然對于下文所述的方法的實施并非必要,但在一些實施方式中,選擇能在與酰基供體反應時產(chǎn)生芳香酯的醇底物。下文中更詳細地描述了芳香酯。在一些實施方式中,清潔組合物是織物清潔組合物(即,洗衣洗滌劑)、表面清潔組合物或者餐具清潔組合物或者自動餐具洗滌機洗涂劑組合物。示例性清潔組合物的配方在WO0001826中有更為詳細的描述,其通過引用并入本文。在一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物含有大約1%至大約80%,大約5%至大約50%(按重量計)的至少一種表面活性劑(例如非離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、陰離子表面活性劑或兩性離子表面活性劑或它們的任何混合物)。示例性的表面活性劑包括但不限于烷基恭晴酸鹽(ABS)(包括線性烷基苯磺酸鹽)和線性烷基磺酸鈉、烷基苯氧基聚乙氧乙醇(例如,壬基苯氧基乙氧基化物或壬基苯酚)、二乙醇胺、三乙醇胺和單乙醇胺。可用于洗滌劑(特別是洗衣洗滌劑)中的示例性表面活性劑包括美國專利號3,664,961、3,919,678、4,222,905和4,239,659中描述的那些。在一些實施方式中,洗滌劑是固體,而在一些其它實施方式中,其是液體,在另一些實施方式中,其是凝膠。在一些優(yōu)選的實施方式中,洗滌劑還包含緩沖劑(例如碳酸鈉或碳酸氫鈉)、洗滌劑助洗劑、漂白劑、漂白活化劑、額外的酶、酶穩(wěn)定劑、起泡強化劑、阻遏劑、防黯劑、防蝕劑、污物懸浮劑、污物釋放劑、殺菌劑、pH調(diào)節(jié)劑、非助洗劑堿度來源、螯合劑、有機或無機填充劑、溶劑、水溶助長劑、熒光增白劑、染料和/或香料。在一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物包含一種或多種其它的酶(例如,膠質(zhì)裂合酶、內(nèi)切糖苷酶、半纖維素酶、過氧化物酶、蛋白酶、纖維素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角質(zhì)酶、果膠酶、果膠酸裂合酶、淀粉酶、甘露聚糖酶、角蛋白酶、還原酶、氧化酶、氧化還原酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木質(zhì)素酶、支鏈淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、malanases、P-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明質(zhì)酸酶、軟骨素酶、漆酶和淀粉酶)或其混合物。在一些實施方式中,使用包含常規(guī)可應用的酶(例如蛋白酶、脂肪酶、角質(zhì)酶和/或纖維素酶)與?;D(zhuǎn)移酶的酶組合(即"混合物")。本文組合物中還提供了可用于洗滌劑清潔組合物中的多種其它成分,它們包括其它活性成分、載體、水溶助長劑、加工助劑、染料或色素、用于液體配制的溶劑等。在希望額外增加起泡的實施方式中,組合物中摻入起泡強化劑,例如C『d6的alkolamides,典型地,大約1%至大約10%的水平。在一些實施方式中,洗滌劑組合物含有水和其它溶劑作為載體。低分子量的伯醇或仲醇(例如曱醇、乙醇、丙醇和異丙醇)是合適的。單羥基醇優(yōu)選用于溶解表面活性劑,但是多元醇,例如,含有大約2至大約6個碳原子以及大約2至大約6個羥基的那些(例如1,3-丙二醇、乙二醇、甘油和1,2-丙二醇)也可使用。在一些實施方式中,組合物含有大約5%至大約90%,典型大約10%至大約50%的此類載體。在一些實施方式中,將本文提供的洗滌劑組合物配制為使得在水性清潔操作中使用時,洗滌用水的pH在大約6.8至大約11.0之間。因此,典型地,終產(chǎn)物被配制為該范圍內(nèi)。用于在推薦的使用水平下控制pH的技術包括使用緩沖劑、堿金屬、酸等,并且是本領域技術人員公知的。在一些實施方式中,清潔組合物包含工作pH在大約pH9.0至大約pH11.5,大約pH9.0至大約pH9.5,大約pH9.5至大約pH10.0,大約pH10.0至大約pH10.5,大約pH10.5至大約pH11.0或大約pH11.0至大約pH11.5的范圍內(nèi)的自動餐具洗滌洗滌劑。在一些其它實施方式中,清潔組合物包含工作pH在大約pH7.5至大約pH8.5,大約pH7.5至大約pH8.0,或大約pH8.0至大約pH8.5的范圍內(nèi)的液體洗衣洗滌劑。在一些其它實施方式中,清潔組合物包含工作pH在大約pH9.5至大約pH10.5,大約pH9.5至大約pH10.0或大約pH10.0至大約pH10.5的范圍內(nèi)的固體洗衣洗滌劑。多種漂白化合物,例如過碳酸鹽、過硼酸鹽等也可用于本發(fā)明的組合物,典型地,以按重量計大約1%至大約15%的水平使用。如所希望的,此類組合物還含有漂白活化劑,例如,四乙酰乙二胺、壬酰氧基苯磺酸鹽等,它們也是本領域公知的。使用水平典型地在按重量計大約1%至大約10%的范圍內(nèi)。多種污物釋》欠劑(尤其是陰離子寡酯類型的)、多種螯合劑(尤其是氨基膦酸鹽和乙二胺二琥珀酸鹽)、多種粘土去除劑(尤其是乙氧基化的四亞乙基五胺)、多種分散劑(尤其是聚丙烯酸鹽和聚天冬氨酸鹽)、多種增白劑(尤其是陰離子增白劑)、多種起泡阻遏劑(尤其是聚硅氧烷和仲醇)、多種織物軟化劑(尤其是蒙脫石粘土)等都可以按重量計大約1%至大約35%范圍內(nèi)的水平用于本發(fā)明組合物的多種實施方式中。標準配方是本領域技術人員公知的。酶穩(wěn)定劑也可用于本發(fā)明清潔組合物的一些實施方式中。此類穩(wěn)定劑包括但不限于丙二醇(優(yōu)選大約1%至大約10%)、曱酸鈉(優(yōu)選大約0.1%至大約1%)以及甲酸鉀(優(yōu)選大約0.1%至大約1%)。在又一些實施方式中,本發(fā)明的清潔組合物還包含至少一種助洗劑。在一些優(yōu)選的實施方式中,助洗劑以按重量計大約5%至大約50%的水平存在于組合物中。典型的助洗劑包括1-10微米的沸石、聚羧酸鹽(例如檸檬酸鹽和氧聯(lián)二琥珀酸鹽)、層狀硅酸鹽、磷酸鹽等。其它常規(guī)的助洗劑在標準配方手冊中列出,并且是本領域技術人員公知的。其它任選的成分包括螯合劑、粘土去除/抗再沉積劑、聚合物分散劑、漂白劑、增白劑、起泡阻遏劑、溶劑和美,見劑(aestheticagent)。本發(fā)明還提供了使用本文提供的清潔組合物的方法。在一些實施方式中,清潔方法包^^:將至少一種?;D(zhuǎn)移酶、?;D(zhuǎn)移酶的至少一種醇底物以及被含酰基供體的物質(zhì)弄臟的物體組合,其中,所述酰基轉(zhuǎn)移酶催化?;鶊F從?;w轉(zhuǎn)移到醇底物上,從而產(chǎn)生酯。在一些實施方式中,對醇底物加以選擇,使得產(chǎn)生所得的芳香酯。在一些其它實施方式中,?;鶊F轉(zhuǎn)移至表面活性劑或乳化劑,或者上文列出的其它試劑中的一種或多種上。在一些實施方式中,清潔組合物還包含除了產(chǎn)生香味之外不提供其它清潔功能的?;w(即,不用作為表面活性劑、乳化劑、氧化劑等)。此類?;w包括但不限于甘油三乙酸酯和甘油三丁酸酯。在一些備選的實施方式中,本發(fā)明的清潔方法包括產(chǎn)生具有清潔性質(zhì)的酯(例如,酯表面活性劑或酯乳化劑,其在洗滌期間具有清潔活性)的步驟。在一些實施方式中,物體可以是織物(包括但不限于,衣物、室內(nèi)裝飾、地毯、寢具等)或硬表面(包括但不限于廚房表面、浴室表面、資磚等)或餐具。在一些實施方式中,織物被含油物質(zhì)(例如含三酰甘油的物質(zhì))弄臟。在一些實施方式中,含油物質(zhì)包含至少一種C4-C18三酰甘油酯(例如奶制品)Q在一些實施方式中,清潔方法利用含有乙酰轉(zhuǎn)移酶但是不含脂肪酶(例如典型脂肪酶)的清潔組合物。在一些備選的實施方式中,本發(fā)明的清潔方法利用含有本發(fā)明乙酰轉(zhuǎn)移酶和脂肪酶(例如LipolaseTM、LipozymTM、LipomaxTM、LipexTM、AmanoTM脂肪酶、Toyo誦Joz。tm脂肪酶、MeitoTM脂肪酶或DiosynthTM)的清潔組合物。在一些實施方式中,使用特定的?;D(zhuǎn)移酶-脂肪酶組合比單獨使用脂肪酶的方法導致明顯更少的臭味。但是預期本發(fā)明并不限于任何具體機制或理論。然而,預期?;D(zhuǎn)移酶和脂肪酶協(xié)同工作,以從三酰甘油酯(例如,含丁酸的三酰甘油酯)除去酖基基團,以降低臭味。因此,在一些實施方式中,在清潔組合物中使用酰基轉(zhuǎn)移酶使得較之不含?;D(zhuǎn)移酶的等同的清潔組合物而言,致臭味的脂肪酸降低超過大約10%,致臭味脂肪酸降低大約20%,致臭味脂肪酸降低超過大約30。/。,致臭味脂肪酸降低超過大約50%,致臭味脂肪酸降低超過大約70%,致臭味脂肪酸降低超過大約80%,或者致臭味脂肪酸降低超過大約90%。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,在清潔組合物中使用本發(fā)明的酰基轉(zhuǎn)移酶不產(chǎn)生臭味。用于生產(chǎn)芳香酯的組合物如上文所述,本發(fā)明提供了生產(chǎn)芳香酯的組合物和方法。在一些實施方式中,組合物包含至少一種?;D(zhuǎn)移酶、?;D(zhuǎn)移酶的醇底物以及酖基供體。在這些實施方式的一些中,?;D(zhuǎn)移酶在水性環(huán)境中催化酰基基團從?;w轉(zhuǎn)移至醇底物,從而產(chǎn)生芳香酯。在一些實施方式中,該組合物是基本上干的(例如脫水的)組合物,其中,芳香酯僅在組合物重新水化時產(chǎn)生。在一些其它實施方式中,組合物是水性組合物,其還包含芳香酯。在很多實施方式中,對組合物的醇底物和?;w加以選擇,以產(chǎn)生特定的芳香酯。使用本發(fā)明組合物產(chǎn)生的示例性芳香酯列于下表l-3中,還列出了用于生產(chǎn)這些酯的醇底物和?;w的合適的組合。其它一些芳香酯是已知的,在給出了此類芳香酯的分子結構的情況下,存在本發(fā)明的?;D(zhuǎn)移酶時可組合的醇底物和酯是顯而易見的。在這些表中,"AcT"是包皮垢分枝桿菌的野生型酰基轉(zhuǎn)移酶,"KLM3"是氣單胞菌(y4era附卵肪W(wǎng).)的?;D(zhuǎn)移酶,如WO04/064987中所述,LipomaxTM是來自產(chǎn)堿假單胞菌(jPseM^/o附ow"sflf/cfltZ/gewes)的月旨肪酵(Genencor)。表l:脂族醇的酯交換<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>在一些實施方式中,SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶被固定到基質(zhì)(例如固體或半固相支持體),例如柱或凝膠上,以允許通過從酶洗去醇底物和?;w來終止反應。產(chǎn)生芳香酯的方法上文所述的組合物可用于多種芳香酯生產(chǎn)方法,所述方法通常包括將至少一種?;D(zhuǎn)移酶、?;D(zhuǎn)移酶的至少一種醇底物以及至少一種酰基供體組合起來,其中,在水性環(huán)境中,?;D(zhuǎn)移酶催化?;鶊F從酰基供體轉(zhuǎn)移到醇底物上,從而產(chǎn)生芳香酯。在一些實施方式中,所述方法包括在它們組合之后對組分進行再水化。在一些備選的實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶、醇底物和?;w在水性環(huán)境中組合。如上文所提到的,在一些備選的實施方式中,?;D(zhuǎn)移酶是SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶。這些方法可用于想獲得芳香酯的多種工藝中。例如,在一些實施方式中,將組合物摻入食品中,以改進或產(chǎn)生消費期間的風味或香味,或者將組合物用于清潔方法,如上文所述。在另一些實施方式中,組合物^皮用于制造酯的方法。在一個實例中,產(chǎn)生芳香酯的組合物以干燥形式(例如,吸附到基質(zhì)上)摻入食品(例如口香糖或糖果)中。對食品的再水化(例如咀嚼期間或通過加入含水液體,例如水或奶)啟動了?;D(zhuǎn)移酶反應,從而原位產(chǎn)生芳香酯。類似地,在一些實施方式中,用所述方法來制造用于食物、香料和/或清潔工業(yè)的大量芳香酯。在一些實施方式中,醇底物本身是芳香醇。這樣,在一些實施方式中,上文所述的反應的氣味隨著時間改變(例如,從芳香醇底物的氣味變成該醇的酯的氣味)。在另一些實施方式中,使用長?;?例如長鏈脂肪酸)來對芳香醇進行酯交換,以生產(chǎn)無香味的酯。在這些實施方式中的一些中,無香味的酯隨著時間自發(fā)水解或在存在水解酶時水解,重新產(chǎn)生芳香醇。用于原位產(chǎn)生表面活性酯的方法在一些實施方式中,使用含有?;D(zhuǎn)移酶、磷脂和山梨醇的顆粒來進行對脂類的原位修飾。在一些實施方式中,顆粒包括通過納米嚢化、微嚢化、片劑制造、造粒和/或通過WAX酯包衣生產(chǎn)(如本領域技術人員已知的"Bariere系統(tǒng)"所指出的)的形式。在一些實施方式中,還通過溫度保護技術(TPT)系統(tǒng)提供了進一步的包衣。在一些實施方式中,脂類底物——磷脂和受體分子——山梨醇的濃度在洗滌工藝中都非常低,這由此限制了綠色洗滌劑的生產(chǎn)。在一些實施方式中,通過將底物和受體分子與KLM3酶一起包括進封閉的區(qū)室確保了反應物的濃度足夠高以進行快速的生物轉(zhuǎn)化工藝。在一些實施方式中,在特定的溫度和濕度條件下貯藏期間,KLM3原位催化修飾過程,由此產(chǎn)生溶血-PC和山梨醇-?;ァ榱盍字?PC)完全轉(zhuǎn)化,將PC和山梨醇之間的比例優(yōu)化為大約1:2,大約1:5,大約1:10,大約1:50,或者最優(yōu)選地,大約1:100(對于PC:山梨醇而言)。在一些實施方式中,為提供最好的洗滌劑組合物,所有磷脂都被轉(zhuǎn)化為溶血磷脂衍生物和等同量的山梨醇-酰基酯。采用最優(yōu)的KLM3?;D(zhuǎn)移酶突變體,S^Pl反應僅產(chǎn)生溶血磷脂和山梨醇-?;?,而沒有顯著量的游離脂肪酸。為實現(xiàn)洗滌劑的強大效力,所有磷脂都^L轉(zhuǎn)化為溶血磷脂衍生物。在一些實施方式中,生物化學反應在嚢化之后發(fā)生,在一些實施方式中,這需要額外的保質(zhì)期。當反應完成時,向洗滌粉中加入顆粒。顆粒在洗滌過程期間溶解,洗滌劑被釋放出來??梢允褂脤挿秶膬煞N底物(脂肪酸的甘油三酯、甘油二酸酯、甘油單酸酯、磷脂、半乳糖脂、乙烯酯、曱酯等)。類似地,大量受體分子也是合適的。這些受體包含山梨醇,木糖醇,葡萄糖,麥芽糖,蔗糖,多元醇和長鏈、中鏈和短鏈的醇,多糖,例如,果膠、淀粉、半乳甘露聚糖、藻酸、鹿角菜膠、殼聚糖、經(jīng)水解的殼聚糖以及源于這些多糖的寡糖。在另外一些實施方式中,受體分子是多糖和肽。為了所有目的,WO05/056782的完全公開內(nèi)容,包括但不限于對?;D(zhuǎn)移酶、氨基酸改變、晶體結構、測定方法、使用方法、序列、同源物、直向同源物、序列比對、圖、表、清潔組合物等,都通過引用并入本文。實驗下述實施例^L提供來展示和進一步闡述本發(fā)明的某些優(yōu)選的實施方式和方面,并且不將它們理解為限制本發(fā)明的范圍。PCT公開文本W(wǎng)O05/056782涉及對?;D(zhuǎn)移酶的鑒定和使用。PCT公開文本W(wǎng)O05/05678的實施例1-27中每個都各自通過引用并入本文,用于公開本文公開的所有方法,這些方法包括但不限于制備酰基轉(zhuǎn)移酶的方法、鑒定酰基轉(zhuǎn)移酶的方法、測試?;D(zhuǎn)移酶的方法、?;D(zhuǎn)移酶多核苷酸和多肽序列,使用?;D(zhuǎn)移酶的方法和其中可使用?;D(zhuǎn)移酶的組合物。實施例l:對順-3-己烯醇、2-苯基乙醇和異戊醇的?;瘜?3-己烯醇、2-苯基乙醇和異戊醇的?;谒杏酶视腿∷狨ズ涂扇苄怎;D(zhuǎn)移酶來進行。在一種典型步驟中,用?;D(zhuǎn)移酶(包皮垢分枝桿菌;AcT)(34ppm)或KLM3,(20卯m)在45。C對200mM磷酸鹽緩沖液pH7(500uL)中的醇(2uL)和甘油三丁酸酯(2uL)進行40分鐘的處理。然后向每個管中加入二氯甲烷(500uL),接著渦旋攪動(IO秒),并離心,以分離有機層和水性層。然后移出有機層,通過GC/MS分析。使用30mx0.25mm(0.25um的膜)HP-5MS柱,用Agilent68卯GC/MS進行該分析。GC/MS方法利用氦作為栽氣(1cc/分鐘),注射器端口溫度為250°C,采用20:1的分流比。烘箱溫度程序以60。C保持1分鐘開始,并以30。C/分鐘升溫至300°C,總運行時間為10分鐘。質(zhì)量檢測儀在注射后2分鐘時起始,從30至400AMU掃描。圖l表明,在這些實驗的每項中,一部分醇被轉(zhuǎn)化為其各自的丁酸酯。對于AcT來說,該量顯著高于KLM3'。實施例2:對香茅醇和香葉醇的?;褂酶视腿宜狨ズ透视腿∷狨プ鳛轷;w,評估作為?;D(zhuǎn)移酶AcT和KLlVO,底物的辟烯醇香茅醇(1)和香葉醇(2)。'OH香茅醇(l)香葉醇(2)用AcT(34ppm)或KLM3,(20ppm)在45。C處理50raM磷酸鹽緩沖液pH7(500uL)中的辟烯醇(2uL)和甘油三乙酸酯或甘油三丁酸酯(2nL)40分鐘。然后從每種反應中移出等分試樣(50uL),稀釋進曱醇/二氯曱烷(1:3,500uL),通過GC/MS來分析酯產(chǎn)生的證據(jù)。結果提供于表4中。表4:采用兩種酖基轉(zhuǎn)移酶,香茅醇和香葉醇轉(zhuǎn)化為其各自乙酰和丁酰酯的程度<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table>實施例3:用織物I上吸附的?;D(zhuǎn)移酶對水中醇的酰基化向正方形的棉織布(10x10cm)片中央加入1mL的?;D(zhuǎn)移酶溶液(100ppm,處于5mMHEPES緩沖液,pH8中)的等分試樣,讓布過夜風干。將處于50mM磷酸鈉緩沖液(pH7)中的含苯曱醇(1%v/v)和甘油三乙酸酯(1%v/v)的溶液的等分試樣加入到具有吸附的AcT以及沒有酶對照的布樣上。在含AcT酶的織物上,2分鐘內(nèi)即產(chǎn)生了乙酸苯甲酯的特征性氣味,相比,對照沒有產(chǎn)生任何能被注意到的氣味。實施例4:用固定到織物II上的?;D(zhuǎn)移酶對水中醇的酰基化將棉織織物樣布(20x20cm)放到塑料片上,用AcT(1ml12mg/mL)、聚乙烯亞胺(500uL的20%w/v溶液)和去離子水(1mL)處理。令織物在環(huán)境條件下干燥過夜,之后從塑料片上移出,浸泡于50mM磷酸鈉緩沖液(400mL,pH7)中,并緩慢攪拌過夜。然后用自來水徹底漂洗棉布樣,令其滴干。按照上文所述的方法,制備第二塊棉布樣,但是不同之處在于應用到織物上的酶混合物除了含有上文列出的組分之外還含有膠乳懸浮液(1mLAIRFLEXTM423,AirProducts,Allentown,PA)。并排放置兩份布樣,用50mM磷酸鈉緩沖液(40mL,pH7)中的苯甲醇(2%v/v)和甘油三乙酸酯(2%v/v)水溶液來處理它們。與對照布樣相比,來自兩份布樣的乙酸苯曱酯的氣味是明顯的。還用丁酸對硝基苯酯的溶液(200uL,水中10mM)對布樣進行了處理,以觀察結合的AcT的水解活性。在該情況下,只有用AcT/PEI處理的棉布樣產(chǎn)生了可注意到的顏色。實施例5:通過吸附到淀粉上的甘油三乙酸酯/醇混合物的再7JC化對水中的苯甲醇進行?;瘜⒈綍醮?0.5mL)和甘油三乙酸酯(0.5mL)加入到10g麥芽糊精(GrainProcessingCorp.,IA)中,接著進行劇烈的機械攪動,以產(chǎn)生沒有或極少氣味的自由流動粉末。將一部分該混合物(1g)放進培養(yǎng)亞,然后用AcT溶液(1ppm)對其加以處理,導致乙酸苯甲酯特有的氣味在5分鐘內(nèi)產(chǎn)生。用水進行了對照實驗,并且在l小時內(nèi)沒有產(chǎn)生乙酸苯曱酯。實施例6:用硅溶膠-凝膠中固定的AcT進行酯交換在硅溶膠凝膠中固定?;D(zhuǎn)移酶(AcT),并與可溶形式的酶比較在水性條件下產(chǎn)生芳香酯的能力。i)AcT的溶膠凝膠嚢化將硅酸鈉(27%Si02,14%NaOH,SigmaAldrichCorp"WI)和曱基硅酸(siliconate)鈉(水中30%,Gelest,NJ)的1:1混合物的等分試樣(2.2mL)在攪拌下加入磷酸(4mL,1.5mM)中。然后加入酖基轉(zhuǎn)移酶的溶液(1mL,12mg/mL),混合物在室溫下靜置直到確保膠凝化。然后用50mM磷酸鹽緩沖液pH7(50mL)對得到的凝膠洗滌兩次,在密封容器中過夜固化。ii)順-3-己烯醇的酯化將上文所述的濕潤溶膠-凝膠的一部分(0.66g,等同于1mgAcT)與順-3-己烯醇(20uL)和甘油三乙酸酯UOuL)在50mM磷酸鈉緩沖液,pH7中一起溫育。將順-3-己烯醇向乙酰酯的轉(zhuǎn)化與含可溶AcT(0.5mgAcT)的對照相比。在10、30和120分鐘時從兩個反應物中取等分試樣(10uL),通過GC/MS加以分析。結果示于圖2。雖然清楚表明,固定化的酶以比游離的酶更低的速率形成乙酰酯(停留時間4.5分鐘),但是酶的固定化形式的去除防止了芳香酯的隨后水解,這在游離酶的情況下在30分鐘和120分鐘的時間點時是明顯的。實施例7:使用AcT對醇和芳香酯進行酯交換用AcT(10ppm)在室溫對50mM磷酸鉀緩沖液pH7中的苯甲醇和乙酸香茅酯的混合物(每種l%v/v)進行處理。數(shù)分鐘內(nèi),乙酸苯甲酯和香茅醇的特征性氣味變得明顯.使用實施例1所述的方法,通過GC/MS來驗證這些化合物的存在。實驗結果表明同時從具有較不明顯氣味的前體產(chǎn)生兩種香味的可能性。實施例8:從被黃油弄臟的織物產(chǎn)生芳香酯向6塊編織棉樣品(每塊250-300mg)應用熔化的黃油(40-50mg),令其冷卻至室溫。對樣品進4亍稱重,用LIPOMAX或AcT或這兩種酶的組合進行處理(表5)。將每塊樣品加入至含有苯曱醇(10uL,0.005%v/v)和這些酶的20mL5mMHEPES緩沖液pH7中。室溫下攪動20分鐘后,移出樣品,由兩組人員在干燥前后評估氣味。干燥后還測量了重量的總減輕。結果概括于表6中。表5:從被黃油弄臟的棉織物樣品除去黃油的程度<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>AcT=包皮垢分枝桿菌酰基轉(zhuǎn)移酶;LM-LIPOMAXtm脂肪酵。表6:酶處理之后被黃油弄臟的樣品的臭味形成程度<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>實施例9:測定酯交換與水解的比例將甘油三丁酸酯(10uL)加入含有4%乙醇的緩沖液(1mL)中,用AcT或KLM3,以及不含酶的對照在40°C處理超過2小時。從每份樣品取等分試樣(100uL),稀釋進二氯甲烷(900uL)中,接著進行GC/MS分析。針對每種條件記錄丁酸乙酯與丁酸的量和比例。對照沒有顯示底物的?;D(zhuǎn)移或水解。經(jīng)AcT處理的樣品顯示出甘油三丁酸酯的完全消化以及1:2的丁酸與丁酸乙酯的比例。經(jīng)KLM3,處理的樣品則僅顯示出甘油三丁酸酯的部分消化,但是丁酸與丁酸乙酯的比例為1:5。實施例10:-使用可溶的和固定化形式的AcT實現(xiàn)同時產(chǎn)生過酸和香味AcT、甘油三乙酸酯、稀釋的過氧化氫水溶液(50至500ppm)和苯曱醇(10-50ppm)的組合導致過乙酸和香味乙酸苯曱酯均產(chǎn)生。用30%過氧4匕氬(100uL)和75ppm的?;D(zhuǎn)移酶溶液(100uL)處理苯甲醇(50uL)、三乙酸甘油(甘油三乙酸酯,100uL)和染料氯化頻哪氰醇(50uL,1mg/mL,80%丙酮中)的溶液在1至2分鐘內(nèi)檢測苯甲醇的特征香味。在10分鐘內(nèi)染料完全脫色。香味幾乎掩蓋了過乙酸的不'lt氣p木。用環(huán)己基甲醇(50uL)重復實驗,導致染料漂白以及香味乙酸環(huán)己基曱酯的形成。省略了AcT的對照實驗沒有導致顯著的香味形成或染料漂白。向小的編織棉樣品(5x5cm)加入?;D(zhuǎn)移酶溶液(1mL,10ppm),讓其干燥。加入苯甲醇(50uL)、三乙酸甘油(甘油三乙酸酯,100uL)、30%過氧化氫(100uL)和染料氯化頻哪氰醇(50uL,1mg/mL,80%丙酮中)的l-2mL溶液,導致香味乙酸苯甲酯的產(chǎn)生和染料的漂白。加入順序可以顛倒,其中,向織物樣品加入苯曱醇(50uL)、三乙酸甘油(甘油三乙酸酯,100uL)和染料氯化頻哪氰醇(50uL,lmg/mL,處于80%丙酮)的l-2mL溶液,并允許干燥。隨后加入AcT(lmL,10卯m)和過氧化氫(lmL,3%),導致10分鐘之內(nèi)染料就從紫色漂白為無色,并且產(chǎn)生乙酸苯甲酯的氣味。實施例11:洗滌劑背景中用甘油三丁酸酯對多元醇的酰化A)通過徹底渦旋混合制備5mMHEPES緩沖液pH7.8(含有1.5g/LAATCCHDL)中的甘油三丁酸酯(l%v/v)和四甘醇(l%v/v)乳液。通過加入至1.8mL5mMHEPES緩沖液pH7.8(含有1.5g/LAATCCHDL)將上述混合物的等分試樣(200uL)稀釋10倍,在室溫攪拌下用AcT(10ppm)進行處理。在給定的時間點取小的等分試樣(S0uL),并稀釋進20%含水乙腈中,接著進行LC/MS分析。在與以正電噴霧(+veESI)模式運行的QuantumTSQ三重四Mi普儀(ThermoFisher,SanJose,CA)相接的SurveyorHPLC系統(tǒng)上進行LC/MS分析。所用的HPLC柱是AgilentZorbaxSB-AqC18柱(100x2,1mm)。對化合物進行梯度洗脫,使用的梯度從溶劑A(H20中的25mM曱酸銨)開始,在10分鐘內(nèi)逐漸增加溶劑B(卯%曱醇+10%溶劑A)的量,再回到溶劑A。最初,僅觀察到兩種起始材料,四甘醇以212的m/z在3.9分鐘時洗脫,甘油三丁酸酯以320的m/z在6.9分鐘時洗脫。兩種化合物都給出了它們的銨離子加合物的預計m/z比。加入AcT酶之后,在5.8分鐘時觀察到了m/z為282的新的峰,對應于四甘醇的單丁酰酯(圖3)。過夜攪拌后,丁酸氣味非常明顯。B)使用"C-均勻標記的甘油("C-U-甘油)和甘油三丁酸酯來重復上述實驗。經(jīng)同位素標記的底物允許區(qū)分源于甘油三丁酸酯?;w的甘油(m/z110)、甘油一丁酸酯(m/z180)和甘油二丁酸酯(m/z250)與經(jīng)標記的甘油?;荏w(m/zl13)的?;纬傻亩∷狨?對甘油一丁酸酯和甘油二丁酸酯來說分別是m/zl83和253)。過夜溫育之后對混合物進行的LC/MS分析(圖4)顯示,除了未經(jīng)標記的類似物之外,形成了經(jīng)標記的甘油一丁酸酯和甘油二丁酸酯。實施例12:在洗衣條件下從被乳脂弄臟的織物產(chǎn)生香味在洗衣條件下,在存在脂肪酶和/或?;D(zhuǎn)移酶(AcT)加受體醇時,在Terg-O-tomer(U.S.Testing,Co.Inc.Hoboken,N.J.)中洗滌被乳脂弄臟的棉樣品,目的是降低游離短鏈脂肪酸(C4至C8)的量和產(chǎn)生味道愉人的短鏈脂肪酸酯。不用月旨肪酶、用Lipex(Novozymes)(1.2ppm)或Lipomax(Genencor)基轉(zhuǎn)移酶(AcT)(2ppm)(處于重負荷液體洗滌劑(AATCCHDL)背景(1.5g/L)中)在5mMHEPES緩沖液pH7.8(硬度6gpg)中處理4皮乳脂弄臟的樣品(CFTCS-IO,TestFabrics,Inc.WestPittston,PA,USA)。在77。F進行30分鐘洗滌期之前,向每個盆中加入苯曱醇(lg/L)。在15和30分鐘的時間點,從每個盆中取等分試樣(8mL),用己烷(2mL)萃取。在離心機中將己烷層與水性乳液分開,向氣相色語(GC)管加入1mL。用30mx0.25mm(0.25um膜)HP-5MS柱,用Agilent6890GC/MS進行GC/MS分析。GC/MS方法利用氦作為載氣(1cc/分鐘),注射器端口溫度為250。C,分流比為20:1。烘箱溫度程序以60°C保持1分鐘開始,并以20。C/分鐘升溫至240。C,總運行時間為10分鐘。質(zhì)量檢測儀在注射后2分鐘時開始,從30至400AMU掃描。圖5和下表7顯示了GC/MS結果。在對照(盆1)或?qū)φ?AcT(盆2)盆中沒有檢測到丁酸節(jié)酯。僅Lipex和Lipomax產(chǎn)生了一定的丁酸千酯,Lipex在兩個時間點產(chǎn)生的更多。對兩種脂肪酶而言,加入AcT都增強了產(chǎn)生的丁酸爺酯的量,但是對Lipomax來說效果要大得多,這表明了強協(xié)同作用。表7:洗衣條件下從被乳脂弄臟的棉布形成丁酸節(jié)酯<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>實施例13:在洗衣條件下從被乳脂弄臟的織物降低臭味實施例12描述的洗滌實驗之后,對棉樣品干燥過夜,主觀地評估臭味,結果概括于表8中。表8:洗滌之后,在被黃油弄臟的棉布上的臭味評估<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>最糟糕的臭P未與Lipex處理的樣品相關。Lipomax處理的樣品的不悅氣味略低,雖然比對照更糟。在Lipomax加AcT處理的樣品中,相對于僅Lipomax而言,臭味有顯著降低。實施例14:用KLM3,從山梨醇和蛋黃產(chǎn)生一油酸山梨酯通過在含有蛋黃和山梨醇的系統(tǒng)中于40。C溫育4小時來測試脂類?;D(zhuǎn)移酵KLM3突變體pLA231。用有機溶劑萃取反應產(chǎn)物,通過HPTLC和GLC/MS來分析經(jīng)分離的脂類。結果證實了KLM3突變體pLA231能夠從山梨醇和蛋黃產(chǎn)生一油酸山梨醇酯。在洗滌劑工業(yè)中,已知在不同制劑中使用山梨醇。還已知,織物通常含有包括脂肪/油和蛋的脂肪污漬。該研究的一個目的是研究KLM3突變體在山梨醇和蛋黃混合物中產(chǎn)生用于清潔目的的表面活性劑的效果。材料和方法KLM3變體pLA231:突變W122A、A236E、L31F(活性:1.6TlPU/ml)山梨醇,70%(Danisco)蛋黃經(jīng)巴氏滅菌的蛋黃,來自Hedegaard,DK9560Hadsund。一油酸山梨酯參照組分,鑒定自GrindstedSMOitemno.452454。HPTLC上樣器CAMAG上樣器AST4。HPTLC板20x10cm(Merckno.1.05641)在使用前通過在烘箱中于160。C干燥20-30分鐘來活化板。上樣使用AST4上樣器,將溶解于氯仿:甲醇(2:1)中的經(jīng)萃取的脂類上樣到HPTLC板上。運行緩沖液4:氯仿:甲醇:水(74:26:4)上樣/洗脫時間16分鐘。展開液體16%H3P04中的6%Cupriacetate。洗脫之后,在160°C于烘箱中對板進行10分鐘的千燥,冷卻,并浸入展開液體中,再在160°C干燥額外6分鐘。對板進行視覺評估并掃描(CamagTLC掃描儀)。GLC分析裝備有WCOT融合珪膠柱12.5mx0.25mmIDx0.1n膜厚5%苯基國甲基-珪酮(來自Chrompack的CPSil8CB)的PerkinElmerAutosystem卯00毛細氣相色i普。載氣氦注射器。PSSI冷分流注射(起始溫度為50°C,加熱至385。C),體積為1.0pi檢測儀FID:395°C烘箱程序123烘箱溫度90280350等溫,時間,分鐘1010溫度速率,。C/分鐘154樣品制備將從樣品提取的脂類溶解于0.5ml庚烷吡啶(2:1,含有內(nèi)標十七烷,0.5mg/ml)中。將300nl樣品溶液轉(zhuǎn)移到巻曲管(crimpvial)中,加入300piMSTFA(N-曱基-N-三曱基甲硅烷基-三氟乙酰胺),在60。C反應20分鐘。實驗按照表9所列出的方案,用底物蛋黃和山梨醇測試KLM3pLA231。表9Jour.2467-11212蛋黃g0.670.67山梨醇,70%g0.330.33KLM3,pLA231,1TlPU/mlml0.1水ml0.1步驟在dramglass中用磁力攪拌器來混合蛋黃和山梨醇,并加熱至50。C。加入酶,并在50。C溫育4小時。通過加入7,5ml氯仿曱醇2:1并在Whirley上混合來終止反應。在Rotamix(25rpm)上對脂類進行30分鐘的提取,樣品在700g下離心10分鐘。取1ml溶劑相用于TLC和GLC/MS分析。結果來自樣品1和2的脂類的HPTLC分析示于圖7。HPTLC色鐠圖表明極性組分的形成,其預計是山梨醇的酯。為進一步鑒定,通過GLC/MS分析樣品。經(jīng)酶處理過的樣品(1)和對照樣品(2)的GLC色語圖示于圖8和9中。圖8中標記一油酸山梨醇酯的峰的MS鐠顯示于圖10中,并將其與一油酸山梨醇酯的MS謙進行比較。對反應產(chǎn)物的HPTLC分析顯示,在溫育期間已形成了極性組分。GLC/MS分析證實形成了一油酸山梨醇酯。一油酸山梨醇酯是具有表面活性性質(zhì)的極性組分,其將在水系統(tǒng)中作為表面活性劑發(fā)揮作用。本說明書中提到的所有專利和出版物都表明本發(fā)明所屬領域技術人員的水平。所有專利和出版物都通過引用并入本文,其程度就好像每份各自的出版物被特別和各自指明通過引用并入一樣。已經(jīng)描述了本發(fā)明的一些實施方式,本領域普通技術人員顯而易見的是,可對公開的實施方式進行多種修改,這些修改也將落在本發(fā)明的范圍內(nèi)。技術人員易于認識到,本發(fā)明易于被改造以實施目標并得到所提到的結果和優(yōu)點以及其中固有的那些。本文提到的組合物和方法是代表性的實施方式,是示例性的,并且不意在作為對本發(fā)明范圍的限制。對本領域技不會偏離本發(fā)明的范圍和精神。本文闡述性描述的本發(fā)明可以在缺少本文沒有具體公開的任何一種或多種要素、一種或多種限制的情況下實施。使用的術語和表達僅用作為描述而非限制性的術語,并且此類術語和表達的使用并不欲排除顯示和描述的特征的任何等同特征或其部分,而應當認識到,多種修改在要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。因此,應當理解,雖然已參考一些實施方式和任選特征對本發(fā)明進行了具體公開,但是本領域技術人員可采取本文公開的概念的修改和變化,此類修改和變化也被認為在所附權利要求所定義的本發(fā)明的范圍內(nèi)。本文已經(jīng)廣義地一般性描述了本發(fā)明。落在該一般性公開內(nèi)容中的每個更窄的種類和次一般性的組別也是本發(fā)明的一部分。這包括用從該類中排除任一主題的前提或否定性限制對本發(fā)明進行一般性描述,而不管排除的材料是否在本文中被特別提及。權利要求1.清潔組合物,其包含a)酰基轉(zhuǎn)移酶,和b)所述?;D(zhuǎn)移酶的醇底物;其中,所述酰基轉(zhuǎn)移酶和醇底物以在所述清潔組合物與?;w組合時有效產(chǎn)生可檢測到的酯的量存在。2.權利要求l的組合物,其中所述?;D(zhuǎn)移酶是SGNH?;D(zhuǎn)移酶。3.權利要求1的清潔組合物,還包含c)?;w,以及d)所述?;D(zhuǎn)移酶催化的所述醇底物和所述?;w之間的反應所產(chǎn)生的酯。4.權利要求3的組合物,其中所述?;D(zhuǎn)移酶是SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶。5.權利要求3的清潔組合物,其中所述酯是織物護理劑。6.權利要求5的清潔組合物,其中所述織物護理劑是酯表面活性劑。7.權利要求3的方法,其中所述酯是芳香酯。8.權利要求l的清潔組合物,其中所述?;w存在于物體上的污漬中。9.權利要求l的清潔組合物,其中所述含有?;w的物體被所述?;w弄臟。10.權利要求1的清潔組合物,其中所述?;w是Cl至C18?;w。11.權利要求l的清潔組合物,其中所述清潔組合物不包含脂肪酶。12.權利要求l的清潔組合物,其中所述清潔組合物還包含脂肪酶。13.權利要求1的清潔組合物,其中所述清潔組合物還包含蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、纖維素酶、角質(zhì)酶、果膠酸裂合酶、甘露聚糖酶和/或氧化還原酶。14.權利要求1的清潔組合物,其中所述清潔組合物還包含表面活性劑、助洗劑、聚合物、鹽、漂白活化劑、漂白系統(tǒng)、溶劑、緩沖劑和/香料。15.清潔方法,其包括將a)?;D(zhuǎn)移酶b)所述?;D(zhuǎn)移酶的醇底物,和c)?;w組合,其中所述酰基轉(zhuǎn)移酶催化?;鶊F從所述?;w轉(zhuǎn)移到所述醇底物上以產(chǎn)生織物護理產(chǎn)物。16.權利要求15的方法,其中所述?;D(zhuǎn)移酶是SGNH?;D(zhuǎn)移酶。17.權利要求15的方法,其中所述織物護理產(chǎn)物是酯表面活性劑或芳香酯。18.清潔組合物,其包含a)SGNH?;D(zhuǎn)移酶,以及b)所迷SGNH?;D(zhuǎn)移酶的醇底物;其中,所述SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶和醇底物以在所述清潔組合物與?;w接觸時有效產(chǎn)生可檢測到的酯的量存在。19.權利要求18的清潔組合物,還包含c)含酰基供體的物體,以及d)所述SGNH?;D(zhuǎn)移酶催化的所述醇底物和所述?;w之間的反應所產(chǎn)生的酯。20.權利要求18的清潔組合物,其中所述?;w是C1至C18的?;w。21.權利要求18的清潔組合物,其中所述跣基供體是含?;w的物體。22.權利要求21的清潔組合物,其中所述含酰基供體的物體被所述?;w弄臟。23.權利要求21的清潔組合物,其中所述物體被乳制品玷污。24.權利要求18的清潔組合物,其中所述清潔組合物不包含脂肪酶。25.權利要求18的清潔組合物,其中所述清潔組合物還包含脂肪酶。26.權利要求18的清潔組合物,其中所述清潔組合物是水性組合物。27.權利要求26的清潔組合物,其中所述清潔組合物除任何固體組分之外包含至少90%的水。28.權利要求18的清潔組合物,其中所述酯是芳香酯。29.權利要求18的清潔組合物,其中所述清潔組合物還包含至少一種蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、纖維素酶、角質(zhì)酶、果膠酸裂合酶、甘露聚糖酶或氧化還原酶或其混合物。30.權利要求18的清潔組合物,其中所述清潔組合物還包含至少一種表面活性劑、助洗劑、聚合物、鹽、漂白活化劑、漂白系統(tǒng)、溶劑、緩沖劑或香料。31.清潔方法,所述方法包括將a)SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶b)所述SGNH?;D(zhuǎn)移酶的醇底物,和c)被含?;w的物質(zhì)弄臟的物體到所述醇底物上以產(chǎn)生酯。32.權利要求31的方法,其中所述酯是C4至C6羧酸酯。33.權利要求31的方法,其中所述酯是丁酸酯或丁酸千酯。34.權利要求31的方法,其中所迷酯是伯醇和C4至C6脂肪酸的酉旨。35.權利要求31的方法,其中所述物體是織物。36.權利要求35的方法,其中所述織物被含油物質(zhì)弄臟。37.權利要求35的方法,其中所述織物被含三酰甘油酯的物質(zhì)玷污。38.權利要求37的方法,其中所述含三酰甘油酯的物質(zhì)含有C4-C18三酰甘油酉旨。39.權利要求31的方法,其中所述SGNH酰基轉(zhuǎn)移酶催化?;鶊F從所述織物上存在的酰基供體轉(zhuǎn)移到所述醇底物上以產(chǎn)生芳香酯。40.權利要求31的方法,其中所述SGNH?;D(zhuǎn)移酶的所述醇底物還作為表面活性劑或乳化劑。41.權利要求40的方法,其中所述SGNH?;D(zhuǎn)移酶催化酰基基團從所述?;w轉(zhuǎn)移到所述表面活性劑或乳化劑上以產(chǎn)生酯。42.權利要求31的方法,其中所述方法還包括將過氧化物的來源與所述SGNH?;D(zhuǎn)移酶組合,并且所述方法導致產(chǎn)生過酸。全文摘要本發(fā)明提供了包含?;D(zhuǎn)移酶和酰基轉(zhuǎn)移酶的醇底物的組合物。在一些特別優(yōu)選的實施方式中,組合物可用于生產(chǎn)芳香酯。在一些其它實施方式中,組合物可用于洗衣洗滌劑,以清潔含有至少一種甘油三酯的污漬。在另外一些實施方式中,組合物用于生產(chǎn)具有清潔性質(zhì)的化合物(例如表面活性酯)。文檔編號C11D3/386GK101622335SQ200880006302公開日2010年1月6日申請日期2008年2月27日優(yōu)先權日2007年2月27日發(fā)明者A·J·保羅斯,J·B·瑟,J·C·麥考利夫,J·D·米克爾森申請人:丹尼斯科美國公司