羥基氯喹在治療或預(yù)防腫瘤中的用圖
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及羥基氯喹或其藥用鹽在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤的藥物中的用途,特別是在制備用于治療和/或預(yù)防肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺癌、宮頸癌或黑色素瘤的藥物中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
羥基氯喹在治療或預(yù)防腫瘤中的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及羥基氯喹羥基氯喹在治療或預(yù)防腫瘤中的用途,特別是在治療或預(yù)防 肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、宮頸癌或黑色素瘤中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 羥基氯喹(Hydroxychloroquine,HCQ)的結(jié)構(gòu)式如下:
[0003]
[0004] 最初羥基氯喹是用來(lái)治療瘧疾的,隨著研究深入,發(fā)現(xiàn)它具有穩(wěn)定細(xì)胞的作用,能 降低自身抗體對(duì)人細(xì)胞的破壞,因此被用來(lái)治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、原發(fā)性干 燥綜合征以及其他一些風(fēng)濕免疫科疾病,另外也被用于治療一些光線過(guò)敏類(lèi)的疾病。
[0005] 本發(fā)明人令人驚訝地發(fā)現(xiàn)羥基氯喹具有良好的抗腫瘤作用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 基于上述發(fā)現(xiàn),本發(fā)明涉及羥基氯喹或其藥用鹽在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤 的藥物中的用途。
[0007] 本發(fā)明中,所述的腫瘤為癌癥,包括但不限于肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺 癌、宮頸癌或黑色素瘤。
[0008] 本發(fā)明中,所述的羥基氯喹的藥用鹽為硫酸羥基氯喹。
[0009] 本發(fā)明中,所述的羥基氯喹或其藥用鹽可以單獨(dú)作為活性成分用于治療和/或預(yù) 防腫瘤,也可以與其他活性成分聯(lián)合用于治療和/或預(yù)防腫瘤。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述,但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì) 理解,下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明,而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體 條件者,按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為 可以通過(guò)市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0011] 下面實(shí)施例中用到的試劑和方法如下:
[0012] 細(xì)胞株:A549 (肺癌細(xì)胞株,廣州中醫(yī)藥大學(xué)青蒿研究中心提供)、!fepG2 (肝 癌細(xì)胞株)、K562(紅白血病細(xì)胞株)、HT-29(結(jié)腸腺癌細(xì)胞株,廣州中醫(yī)藥大學(xué)生化實(shí) 驗(yàn)室提供)、Hela(宮頸癌細(xì)胞株)和B16 (小鼠黑色素瘤細(xì)胞株),除了肺癌細(xì)胞株和 結(jié)腸腺癌細(xì)胞株,其它腫瘤細(xì)胞株均購(gòu)自美國(guó)菌種保藏中心(American Type Culture Collection, ATCC)〇
[0013] 藥品:硫酸羥基氯喹(HCQ,重慶康樂(lè)制藥有限公司,純度98. 7%,堿基含量 77.4%);順鉑(DDP,齊魯制藥有限公司,批號(hào)307023CF);紫杉醇(TAX0L,上海龍翔生物醫(yī) 藥開(kāi)發(fā)有限公司,批號(hào)120703)。
[0014] 方法:準(zhǔn)確稱(chēng)量硫酸羥基氯喹,將硫酸羥基氯喹溶于水直接用RPMI-1640培養(yǎng)基 溶解,配成20000 μ g/mL的母液于-20°C保存,使用時(shí)用新鮮的RPMI-1640培養(yǎng)基稀釋到相 應(yīng)濃度。
[0015] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞接種到96孔板中,細(xì)胞接種密度約為L(zhǎng)OX 105/mL,每孔 90 μ L,置于37°C、5 % CO2培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)。然后取出培養(yǎng)板,將前述配制好的 羥基氯喹母液用新鮮的RPMI-1640培養(yǎng)基稀釋到工作濃度后加入各孔,每孔加10 μ L藥液。 羥基氯喹的終濃度分別為76. 40、38. 20、19. 10、9. 55、4. 78 μ g/mL,具體濃度見(jiàn)表1至表6, 各濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔,并設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組(DDP或TAXOL藥液)、對(duì)照組(含有細(xì)胞的培養(yǎng)液) 和空白組(空白培養(yǎng)液),置于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)。
[0016] 羥基氯喹藥物處理后,每孔加入Cell Counting Kits-8(CCK-8, D0JIND0,批號(hào): EQ829)試劑10 yL,置于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中溫育4小時(shí),在酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)為450nm, 參考波長(zhǎng)為630nm的條件下檢測(cè)吸光度OD值。
[0017] 計(jì)算腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(%)時(shí),公式如下:
[0018] 抑制率IR( % )=(對(duì)照組平均OD值-給藥組平均OD值)/對(duì)照組平均OD 值 X 100% 〇
[0019] 應(yīng)用SPSS19. 0軟件,采用Logit法計(jì)算半數(shù)抑制濃度(ICJ。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 羥基氯喹對(duì)A549細(xì)胞作用48小時(shí)的抑制性試驗(yàn)(η = 5),結(jié)果見(jiàn)表1。 「00221 衷 1
[0024] 實(shí)施例2
[0025] 羥基氯喹對(duì)HEPG2細(xì)胞作用48小時(shí)的抑制性試驗(yàn)(η = 3),結(jié)果見(jiàn)表2。
[0026]表 2
[0028] 實(shí)施例3
[0029] 羥基氯喹對(duì)K562細(xì)胞作用48小時(shí)的抑制性試驗(yàn)(η = 3),結(jié)果見(jiàn)表3。
[0030] 表 3
[0032] 實(shí)施例4
[0033] 羥基氯喹對(duì)ΗΤ-29結(jié)腸腺癌細(xì)胞作用48小時(shí)的抑制性試驗(yàn)(η = 3),結(jié)果見(jiàn)表4。
[0034]表 4
[0036] 實(shí)施例5
[0037] 羥基氯喹對(duì)Hela宮頸癌細(xì)胞作用48小時(shí)的抑制性試驗(yàn)(η = 3),結(jié)果見(jiàn)表5。
[0038] 表 5
[0040] 實(shí)施例6
[0041] 羥基氯喹對(duì)Β16細(xì)胞作用48小時(shí)的抑制性試驗(yàn)(η = 3),結(jié)果見(jiàn)表6。
[0042] 表 6
[0043]
[0044] 由以上表1~6可知,羥基氯喹對(duì)A549(肺癌細(xì)胞株)、!fepG2(肝癌細(xì)胞株)、 K562(紅白血病細(xì)胞株)、HT-29(結(jié)腸腺癌細(xì)胞株)、Hela(宮頸癌細(xì)胞株)和B16(小鼠 黑色素瘤細(xì)胞株)均有一定的抑制作用,其半數(shù)抑制率(ICJ分別為26. 70、27.47、6.80、 5. 72、20. 21、13. 62 μ g/mL。其中羥基氯喹對(duì)紅白血病細(xì)胞株和結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的抑制作用 最為明顯。
[0045] 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:羥基氯喹能夠有效治療或預(yù)防腫瘤疾病,特別是在治療和/ 或預(yù)防肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺癌、宮頸癌或黑色素瘤等癌癥方面具有較好的應(yīng) 用前景。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 羥基氯喹或其藥用鹽在制備用于治療和/或預(yù)防腫瘤的藥物中的用途。2. 權(quán)利要求1的用途,其中所述的腫瘤為癌癥。3. 權(quán)利要求2的用途,其中所述的癌癥為肺癌、肝癌、紅白血病、腸癌、結(jié)腸腺癌、宮頸 癌或黑色素瘤。4. 權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的用途,其中所述的羥基氯喹的藥用鹽為硫酸羥基氯喹。5. 權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的用途,其中所述的羥基氯喹或其藥用鹽單獨(dú)作為活性成分, 或者,所述的羥基氯喹或其藥用鹽與其他活性成分聯(lián)合應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P35/02GK105982896SQ201510084787
【公開(kāi)日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年2月15日
【發(fā)明人】宋健平, 徐勤, 李國(guó)銘, 鄧長(zhǎng)生, 王振華, 周玖瑤, 關(guān)業(yè)枝, 王琪, 張紅英, 鄭紹琴, 高巖, 胡艷山, 黃博
【申請(qǐng)人】廣州中醫(yī)藥大學(xué)科技產(chǎn)業(yè)園有限公司