基于磁性金屬有機框架材料的雙靶向藥物載體的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種基于磁性金屬有機框架材料的雙靶向藥物載體的制備方法，屬于生物醫(yī)藥功能材料制備技術(shù)領(lǐng)域；本發(fā)明首先對四氧化三鐵進行了改性形成四氧化三鐵包裹多巴胺，緊接著通以四氧化三鐵包裹多巴胺(Fe3O4@PDA)為基質(zhì)材料制備了磁性金屬有機框架材料的雙靶向藥物載體；進行一系列處理后得到吸附劑，并將用于水溶液中阿霉素的選擇性識別和分離；本發(fā)明制備的磁性金屬有機框架材料的雙靶向藥物載體具有較好的熱穩(wěn)定性，非常大的載藥容量，具有酸堿效應(yīng)以及控制釋放藥物的功能。
【專利說明】
基于磁性金屬有機框架材料的雙卽向藥物載體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方法，屬于 生物醫(yī)藥功能材料制備技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)的認(rèn)識不斷深入，新的治療方法和治療手段也不 斷涌現(xiàn)，癌癥的治療研究已經(jīng)取得了相當(dāng)大的進步，其中腫瘤的祀向治療成為了一個新的 熱點。目前，大多數(shù)藥物載體只具備單一的載藥性能，沒有識別癌細(xì)胞的性能。祀向性藥物 載體可W防止藥物局部濃度過高，減少藥物的損失及降解、降低其副作用，提高利用效率， 達(dá)到緩釋、控制釋放、祀向給藥的目的。目前，研究表明用于藥物載體的祀向體系包括血蛋 白、微乳液、納米磁祀向、主動靴向、被動祀向等。其中主動靴向，它的作用原理就是在藥物 載體上修飾與癌細(xì)胞組織可W特異性受體相結(jié)合的配體，從而實現(xiàn)載體與特異性受體的親 和，達(dá)到借助祀向藥物來抑制甚至滅殺腫瘤，提高生存質(zhì)量，減輕藥物積聚帶來的副作用。
[0003] 通常藥物載體具有W下幾個缺點，尺寸太大不容易被細(xì)胞吞隧，影響治療效果，其 次，藥物在正常的生理條件下不穩(wěn)定，載藥量不大，藥物載體分散性不好，容易造成團聚，導(dǎo) 至義'治療效果不佳（Jia Zhuan邑，Chun-Hon邑 Kuo,Lien-Yang Chou,De-Yu Liu,Eranthie Weerapana,and Chia-Kuang Tsung,Optimized metal organic framework nanospheres for drug delivery:evaluation of small-molecule encapsulation,ACSNANO 2014(8) 2812-2819.)〇
[0004] 唾液酸(Sialic acid)存在于癌細(xì)胞表面的物質(zhì)，由于唾液酸包含二徑基結(jié)構(gòu)，從 而吸引了很大的科研興趣，它可W可W棚酸基結(jié)構(gòu)發(fā)生共價鍵作用。棚親和作用是棚酸基 配體與二徑基結(jié)構(gòu)在中性或者堿性條件下可W生成五元環(huán)結(jié)構(gòu)，同時在酸性條件下五元環(huán) 結(jié)構(gòu)發(fā)生解離?？蒞達(dá)到很好簡化識別/脫離的流程。金屬有機框架材料最近引起了科研的 高度關(guān)注，它的構(gòu)成由金屬離子和有機配體結(jié)合而成，金屬離子作為連接點，有機配體作為 支架。功能型金屬有機框架材料已經(jīng)被大量用于催化，傳感，載藥，吸附，生物分離等領(lǐng)域。
[0005] 因此，本發(fā)明利用磁性金屬有機框架引入棚酸基配體，而后通過多孔結(jié)構(gòu)載上抗 癌藥物阿霉素(D0X)，然后再接上聚乙二醇(PEG)達(dá)到控制延緩釋放的目的；最后通過磁性 金屬有機框架材料識別癌細(xì)胞表面的唾液酸，并通過磁祀向作用達(dá)到癌細(xì)胞表面抑制癌細(xì) 胞的生長。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)缺陷，通過雙重祀向作用制備磁性 功能型棚酸基金屬有機框架長期緩釋藥物載體。
[0007] 首先，合成四氧化Ξ鐵(Fe3〇4)，將六水合Ξ氯化鐵、醋酸鋼加入到乙二醇中，通過 高溫般燒合成出Fe3〇4;其次，把磁性Fe3〇4納米顆粒泡在生物殼層溶液鹽酸多己胺中，并通 過Ξ徑基甲基氨基甲燒的緩沖溶液調(diào)節(jié)抑，合成出Fe3〇4@PDA，然后將3，5-二簇基苯基棚酸 (B抓C)和1，3,5-苯Ξ甲酸(BTC)作為有機配體，N，N-二甲基甲酯胺(DMF)和無水乙醇作為溶 劑，金屬離子化作為連接點，在四化3^@PDA表面長出金屬有機框架殼層;然后載上抗癌藥 物阿霉素，在堿性條件下浸泡PEG溶液;最后在37°C真空干燥，并將所得到的磁性功能型棚 酸基金屬有機框藥物載體系統(tǒng)用于識別并滅殺癌細(xì)胞的研究。
[0008] 為達(dá)到W上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案具體如下：
[0009] (1)四氧化Ξ鐵(Fe3〇4)的制備：
[0010] 具體操作參照文獻（Yijie Yin,Jianming Pan,Jun Cao,Yue Ma,Guoqing 化η, Runrun Wu,Xiaohui Dai,Minjia Meng,Yongsheng Yan,Rationally designed hybrid molecularly imprinted polymer foam for highly efficient λ-cyhalothrin recognition and uptake via twice imprinting strategy,Chemical Engineering Journal ,2016(286) ,485-496):將六水合Ξ氯化鐵、醋酸鋼和乙二醇加入lOOmL的燒瓶中， 并超聲分散，混合物在氮氣保護下160°C攬拌比，隨后轉(zhuǎn)入50mL反應(yīng)蓋，在200°C下反應(yīng)lOh， 然后冷卻至室溫，得到黑色的磁性化3化，用無水乙醇洗涂數(shù)次并烘干，最后在60°C下真空烘 干。
[00川其中，六水合；氯化鐵，醋酸鋼和乙二醇的加入比例是4.0-4. Ig :7.1-7.3g :35- 45mL。
[001^ (2)四氧化Ξ鐵包裹多己胺(Fe 304@PDA )的制備：
[OOU]首先用蒸饋水配制Ξ徑基甲基氨基甲燒的水溶液，將鹽酸多己胺加入Ξ徑基甲基 氨基甲燒的水溶液中；然后將步驟（1)得到的化3〇4加入到上述反應(yīng)體系，并機械攬拌2也最 后用蒸饋水清洗多次并在60°C下真空烘干12h。
[0014] 其中，所述Ξ徑基甲基氨基甲燒和蒸饋水的比列是0.3-0.4g:240-260ιΛ;
[0015] 所述鹽酸多己胺和蒸饋水的比列是0.3-0.4g: 240-260ιΛ;
[0016] 所述Fe3〇4和蒸饋水的比例是0.19-0.21g: 240:260血。
[0017] (3)磁性金屬有機框架化e3〇4@PDA@MOF)(fourth time)的制備：
[001引將步驟（2)得到的Fe304@PDA、六水合硝酸鋒、無水乙醇和N，N-二甲基甲酯胺(DMF) 加入到聚四氣乙締的反應(yīng)蓋當(dāng)中，并在水浴振蕩器里振蕩化，然后加入3,5-二簇基苯基棚 酸(B抓C)和1，3，5-苯Ξ甲酸(BTC)，并在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)120°C下干燥1 Oh，然后冷卻到室溫， 用無水乙醇清洗多次，最后在60°C下真空烘干，將得到的產(chǎn)品化304@PDA@M0F) (f irst time) 繼續(xù)和六水合硝酸鋒、無水乙醇和N，N-二甲基甲酯胺(DMF)加入到聚四氣乙締的反應(yīng)蓋當(dāng) 中，然后重復(fù)上述步驟(3)四次。
[0019] 單元磁性棚酸基金屬有機框架材料Fe3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF (second time) JesCkSPDASMOFUhird time)分別為重復(fù)步驟一次，二次，Ξ次。
[0020] 其中，所述化304@PDA、六水合硝酸鋒、無水乙醇、Ν，Ν-二甲基甲酯胺(DMF)的加入比 例是 4〇-5〇mg: SS-GOmg: S-Gn止：A-Sni;
[0021] 所述 BBDC，BTC 和 DMF 的加入比例為 6-9mg:6-9mg:4-8mL。
[0022] (4)磁性金屬有機框架藥物載體(Fe3〇4@PDA@MOF@DOX@WG(fodh time)的制備：
[0023] 首先用蒸饋水配制鹽酸阿霉素溶液，然后將步驟(3)得到的Fe3〇4@PDA@MOF(fourth time)加入阿霉素溶液中，靜置2地，將得到的化304@PDA@M0F@D0X(f oudh time)用蒸饋水清 洗3次。
[0024] 用PBS緩沖液配制聚乙二醇溶液，然后將化304@PDA@M0F咖0X(foudh time)加入到 聚乙二醇溶液中浸泡5分鐘，用蒸饋水清洗2遍；最后將得到的Fe3〇4@PDA@MOF@DOX@PEG (forth time)在40°C下真空烘干24h。
[0025] 其中，所述鹽酸阿霉素(DOX)和蒸饋水的比列是3-6mg:3-20mL
[0026] 所述。63〇4@?04@]\?)。^〇腳地。1116)和鹽酸阿霉素質(zhì)量比是8-20:3-6;
[0027] 所述聚乙二醇和PBS溶液(pH=8.5)的加入比例是5-15mg:5-15mL
[002引化304@PDA@MOF@DOX(foudh time)和聚乙二醇溶液的加入比列是5-15mg:5-15血。
[0029] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較，具有W下優(yōu)勢：
[0030] (1)本發(fā)明所述的磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體具有均一的納米結(jié) 構(gòu)，通過高溫高壓水熱反應(yīng)制備而成，通過改變水熱反應(yīng)次數(shù)能有效改變載藥容量和藥物 載體中3,5-二簇基苯基棚酸(B抓C)的含量，并且實驗中使用具有生物兼容性的聚合層聚乙 二醇(PEG)來進一步修飾藥物載體，增強了藥物載體的緩釋性能；
[0031] (2)本發(fā)明所述的磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體具有雙重祀向能力， 可W同時高效特異性識別癌細(xì)胞并抑制癌細(xì)胞的生長；
[0032] (3)本發(fā)明所述的磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體制備過程中，開創(chuàng)性 的制備引入了帶棚酸的基體片段作為有機配體來進一步功能化磁性金屬有機框架材料。
【附圖說明】
[0033] 圖 1 為實施例 1 中制備的Fe3〇4，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF (second time),Fe3〇4@PDAiMOF(third time),Fe3〇4@PDAiMOF(fou;rth time)拉曼光譜圖， 圖中從下到上依次為Fe3〇4、Fe3〇4@PDAiMOF(first time),Fe3〇4@PDAiMOF(second time)， Fe3〇4@PDAiMOF(third time)、Fe3〇4@PDAiMOF(forth time)。
[0034] 圖2為實施例1中制備的化304(A1、A2)和化304@PDA(B1、B2)的透射電鏡圖。
[0035] 圖3為實施例 1 中制備的Fe3〇4，F(xiàn)e3〇4@PDA，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF(foudh time)的紅外光 譜圖，圖中曲線自上而下依次為化3〇4，F(xiàn)e3〇4@PDA，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(fourth time)。
[0036] 圖4為實施例 1 中制備的Fe3〇4@PDA@MOF(first time)(al，a2)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF (second time) (bl，b2)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(third time) (cl，c2)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(fou;rth time)(dl，d2)的透射電鏡圖。
[0037] 圖5為實施例l中制備的化304，化304@PDA，化304@PDA@M0F(firsttime)，化304@PDA@ M0F(second time),Fe3〇4@PDAiMOF(third time),F'e3〇4@PDA@MOF(fou;rth time)的X射線衍 射光譜圖。
[003引圖6為實施例1中制備的Fe304@PDA@MOF(foudh time)的高分辨透射電鏡圖。
[0039] 圖7為本發(fā)明制備的化3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF(second time)， 化304@PDA@M0F(third time)，（Fe3〇4@PDA@MOF) (fourth time)的磁性金屬有機框架藥物載 體吸附阿霉素的效果對比圖，圖中，自左至右依次為Fe3〇4@PDA@MOF(f irst time)，F(xiàn)e3〇4@ PDA@M0F(second time),化3〇4@?0人@10尸（1:11山(1 time),(化3〇4@?0人@10尸）（fourth time)。
[0040] 圖8為磁性金屬有機框架藥物載體緩釋阿霉素效果圖。
【具體實施方式】
[0041 ]下面結(jié)合具體實施實例對本發(fā)明做進一步說明。
[0042] 實施例1:
[0043] (1)四氧化Ξ鐵(Fe3〇4)的制備：
[0044] 將4.0g六水合；氯化鐵，7. Ig醋酸鋼和35mL乙二醇加入lOOmL的燒瓶中，并超聲分 散，混合物在氮氣保護下160°C攬拌比，隨后轉(zhuǎn)入50mL反應(yīng)蓋，在200°C下反應(yīng)lOh，然后冷卻 至室溫，黑色的磁性化地4用無水乙醇洗涂數(shù)次并烘干，最后在真空60°C下烘干。
[0045] (2)四氧化Ξ鐵包裹多己胺(Fe3〇4@PDA)的制備：
[0046] 先把0.3g的Ξ徑基甲基氨基甲燒加在240mL的蒸饋水溶液中配制Ξ徑基甲基氨基 甲燒的水溶液，在Ξ徑基甲基氨基甲燒水溶液中加入0.3g的鹽酸多己胺，然后將0.19g的 化地4加入進上述反應(yīng)體系，并機械攬拌24h，最后用蒸饋水清洗多次并在真空60 °C下烘12h。
[0047] (3)磁性金屬有機框架(Fe3〇4@PDA@MOF)(fourth time)的制備：
[004引 40mg的化304@PDA，55mg的六水合硝酸鋒，2血的無水乙醇，4血的N，N-二甲基甲酯胺 (DMF)加入到聚四氣乙締的反應(yīng)蓋中，并在水浴振蕩器里振蕩化，然后加入6mg的BBDC和6mg 的BT巧幡四氣乙締的反應(yīng)體系當(dāng)中并在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)在120°C干燥lOh，然后冷卻到室溫， 用無水乙醇清洗多次，最后在真空60°C下烘干，然后重復(fù)上述步驟四次。
[0049] 單元磁性棚酸基金屬有機框架材料Fe3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF (second time)，化3〇4@?04@10。(third time)分別為重復(fù)上述步驟(3) -次，二次，Ξ次。
[00加](4)磁性金屬有機框架藥物載體(Fe3〇4@PDA@MOF@DOX@WG (fodh t ime)的制備：
[0051]先把3mg的鹽酸阿霉素加入到3mL的蒸饋水溶液中配制鹽酸阿霉素溶液，然后將 8mg的Fe3〇4@PDAiMOF(foudh time)加入進去靜置24h，然后Fe3〇4@PDAiMOFiDOX(foudh time)用蒸饋水洗3次。再把5mg的聚乙二醇加入到5mL的PBS溶液(pH=8.5)配制聚乙二醇溶 液，然后把5mg的化3^@PDA@M0F@D0X(foudh time)加入到聚乙二醇溶液中泡5分鐘，然后水 蒸饋水洗2遍。最后得到的化304@PDA@M0F咖0X@PEG(forth time)在真空40°C烘干2地。
[0化2]圖 1 為實施例 1 中制備的Fe3〇4，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF (second time),Fe3〇4@PDAiMOF(third time),Fe3〇4@PDAiMOF(fou;rth time)拉曼光譜圖， 從圖中可W得出，F(xiàn)e3^@PDA麵OF(foudh time)的簇基峰很強，說明3，5-二簇基苯基棚酸 (B抓C)和1，3，5-苯Ξ甲酸(BTC)已經(jīng)成功修飾到基體材料表面。
[0053] 圖2為實施例1中制備的Fe3〇4(A)和Fe3〇4@PDA(B)的透射電鏡圖，從圖中可W得出 化地4@PDA表面包裹了一層聚合層，說明成功接上了多己胺。
[0化4]圖3為實施例 1 中制備的Fe3〇4(a)，F(xiàn)e3〇4@PDA(b)Je3〇4@PDA@MOF(fourth time)的 紅外光譜圖，從圖中可W得出，在1700cnfi出現(xiàn)一個明顯的特征峰說明3,5-二簇基苯基棚酸 (B抓C)和1，3，5-苯Ξ甲酸(BTC)已經(jīng)成功接到基體材料表面。
[0化5]圖4為實施例 1 中制備的Fe3〇4@PDA@MOF(first time)(al，a2)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF (second time) (bl，b2)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(third time) (cl，c2)，F(xiàn)e3〇4@PDA@MOF(fou;rth time) (dl，d2)的透射電鏡圖，從圖中可W得出F'e3〇4@PDA@MOF(fou;rth time)包裹的聚合物 越來越厚，說明金屬有機框架材料已經(jīng)成功枝接到表面。
[0化6]圖 5 為實施例 1 中制備的 Fe3〇4，F(xiàn)e3〇4@PDA，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF(firsttime)，F(xiàn)e3〇4@PDA@ M0F(second time),Fe3〇4@PDAiMOF(third time),F'e3〇4@PDA@MOF(fou;rth time)的X射線衍 射光譜圖，從圖中可W得出Fe3^@PDA@M0F(foudh time)表面已經(jīng)成功枝接上金屬有機框 架材料。
[0化7] 圖6為實施例1中制備的化3〇4@PDA@MOF(fourth time)的高分辨透射電鏡圖，從圖 中可W得出，高分辨透射直接檢測到有化，0表明合成Fe3〇4成功，有N元素存在，表明Fe3〇4表 面已經(jīng)成功修飾上多己胺，同時Zn，B的元素存在，表明Fe3〇4表面已經(jīng)成功長上金屬有機框 架材料。
[0化引實施例2:
[0化9] (1)四氧化二鐵(Fe3化)的制備：
[0060]將4. Ig六水合Ξ氯化鐵，7.：3g醋酸鋼和45mL乙二醇加入lOOmL的燒瓶中，并超聲分 散，混合物在氮氣保護下160°C攬拌比，隨后轉(zhuǎn)入50mL反應(yīng)蓋，在200°C下反應(yīng)lOh，然后冷卻 至室溫，黑色的磁性化地4用無水乙醇洗涂數(shù)次并烘干，最后在真空60°C下烘干。
[0061 ] (2)四氧化Ξ鐵包裹多己胺(Fe 304@PDA )的制備：
[0062] 先把0.4g的Ξ徑基甲基氨基甲燒加在260mL的蒸饋水溶液中配制Ξ徑基甲基氨基 甲燒的水溶液，在Ξ徑基甲基氨基甲燒的水溶液中加入0.4g的鹽酸多己胺，再將0.21g的 化地4加入進上述反應(yīng)體系，并機械攬拌24h，最后用蒸饋水清洗多次并在真空60 °C下烘12h。
[0063] (3)磁性金屬有機框架(Fe3〇4@PDA@MOF)(fourth time)的制備：
[0064] 50mg的化304@PDA，60mg的六水合硝酸鋒，6血的無水乙醇，8血的N，N-二甲基甲酯胺 (DMF)加入到聚四氣乙締的反應(yīng)蓋中并在水浴振蕩器里振蕩化，然后加入9mg的BBDC和9mg 的BT巧幡四氣乙締的反應(yīng)體系當(dāng)中并在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥lOh化20°C，然后冷卻到室溫， 用無水乙醇清洗多次，最后在真空60°C下烘干，然后重復(fù)上述步驟四次。
[00化]單元磁性棚酸基金屬有機框架材料Fe3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF (second time)，化3〇4@?04@10。(third time)分別為重復(fù)上述步驟(3) -次，二次，Ξ次。
[0066] (4)磁性金屬有機框架藥物載體(Fe3〇4@PDA@MOF@DOX@WG(fodh time)的制備：
[0067] 先把6mg的鹽酸阿霉素加入到20mL的蒸饋水溶液中中配制鹽酸阿霉素溶液，然后 將20mg的Fe3〇4@PDA@MOF(foudh time)加入進去靜置2地，然后Fe3〇4@PDA@MOF@DOX(foudh time)用蒸饋水洗3次。再把15mg的聚乙二醇加入到15ml的PBS溶液(pH=8.5)，然后把15mg 的Fe3〇4@PDA@MOF@DOX(fourth time)加入到聚乙二醇的溶液中泡5分鐘，然后水蒸饋水洗2 遍。最后得到的化304@PDA@M0F咖0X@PEG(forth time)在真空40 °C烘干2地。
[006引實施例3:
[0069] (1)四氧化Ξ鐵(Fe3〇4)的制備：
[0070] 將4.05g六水合Ξ氯化鐵，7.?醋酸鋼和40mL乙二醇加入lOOmL的燒瓶中，并超聲 分散，混合物在氮氣保護下160°C攬拌化，隨后轉(zhuǎn)入50mL反應(yīng)蓋，在200°C下反應(yīng)lOh，然后冷 卻至室溫，黑色的磁性化地4用無水乙醇洗涂數(shù)次并烘干，最后在真空60°C下烘干。
[0071] (2)四氧化Ξ鐵包裹多己胺(Fe3〇4@PDA)的制備：
[0072] 先把0.3g的Ξ徑基甲基氨基甲燒加在250mL的蒸饋水溶液中配制Ξ徑基甲基氨基 甲燒的水溶液，在Ξ徑基甲基氨基甲燒的水溶液中加入〇.3g的鹽酸多己胺，然后將0.2g的 化地4加入進上述反應(yīng)體系，并機械攬拌24h，最后用蒸饋水清洗多次并在真空60 °C下烘12h。
[0073] (3)磁性金屬有機框架(Fe3〇4@PDA@MOF)(fourth time)的制備：
[0074] 將45mg的化304@PDA，58mg的六水合硝酸鋒，4血的無水乙醇，6血的N，N-二甲基甲酯 胺(DMF)加入到聚四氣乙締的反應(yīng)斧當(dāng)中并在水域振蕩器里搖晃化，然后加入7.8mg的BBDC 和7.8mg的BT巧喊四氣乙締的反應(yīng)體系當(dāng)中并在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥lOh化20°C，然后冷卻 到室溫，用無水乙醇清洗多次，最后在真空60°C下烘干，然后重復(fù)上述步驟四次。
[0075] 單元磁性棚酸基金屬有機框架材料Fe3〇4@PDA@MOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF (second time)，化3〇4@?04@10。(third time)分別為重復(fù)上述步驟(3) -次，二次，Ξ次。
[0076] (4)磁性金屬有機框架藥物載體(Fe3〇4@PDA@MOF@DOX@WG(fodh time)的制備：
[0077] 先把5mg的鹽酸阿霉素加入到5mL的蒸饋水溶液中中配制鹽酸阿霉素溶液，然后將 lOmg的Fe3〇4@PDAiMOF(foudh time)加入進去靜置24h，然后Fe3〇4@PDAiMOF@DOX(foudh time)用蒸饋水洗3次。再把lOmg的聚乙二醇加入到lOmL的PBS溶液(pH=8.5)，然后把lOmg 的Fe3〇4@PDA@MOF@DOX(fourth time)加入到聚乙二醇的溶液中泡5分鐘，然后水蒸饋水洗2 遍。最后得到的化304@PDA@M0F咖0X@PEG(forth time)在真空40 °C烘干2地。
[0078] 上述技術(shù)方案中所述的阿霉素吸附負(fù)載和長期緩釋行為測試方法具體為：
[0079] 試驗例1:吸附負(fù)載性能研究：
[0080] lOmg的Fe3〇4@PDAiMOF(first time)，F(xiàn)e3〇4@PDAiMOF(second time)，F(xiàn)e3〇4@PDA@ M0F(third time)，（Fe3〇4@PDA@MOF)(fou;rth time)的磁性金屬有機框架藥物載體加入5mL Img/mL阿霉素溶液，在PBS溶液中進行吸附負(fù)載(pH = 6.5)，30°C恒溫下攬拌24h。負(fù)載阿霉 素后的磁性金屬有機框架藥物載體通過磁鐵收集，然后用蒸饋水洗2次溶液去除表面的物 理吸附的D0X殘留。最后，采用紫外可見分光光度計在480nm檢測藥物含量。根據(jù)結(jié)果，計算 出磁性金屬有機框架藥物載體的封裝效率化E)和承載能力化C):
[0083] 結(jié)果表明：磁性金屬有機框架藥物載體吸附阿霉素的能力很強，封裝效率達(dá) 78.14%，承載能力達(dá)65.07%。
[0084] 試驗例2:長期緩釋阿霉素行為研究：
[0085] 磁性金屬有機框架藥物載體（lOmg)在25血不同抑值的緩沖溶液中測定(pH=3,5， 7.4)緩釋阿霉素能力，37°C下恒溫水浴中輕度抖動（150轉(zhuǎn)/分）。在預(yù)定的時間間隔，收集 0.1 mL的緩沖溶液并加入0.1 mL新鮮釋放緩沖液。通過紫外-可見分光光度法測定藥物的釋 放量，在0-0. 〇5mg/mL濃度范圍內(nèi)的阿霉素的標(biāo)準(zhǔn)校正圖來確定釋放的D0X濃度。根據(jù)結(jié)果， 計算累積阿霉素釋放量：
[0086]
[0087] 其中Mt是阿霉素在時間t是的釋放量，Μ是阿霉素總的釋放量。
[0088] 結(jié)果表明：阿霉素在磁性金屬有機框架藥物載體中的釋放隨pH的降低而增大，而 且呈現(xiàn)優(yōu)良的長期釋放能力。抑=5.0的緩沖溶液中磁性金屬有機框架藥物載體在前1個小 時只釋放7.8 %阿霉素，并且在化后達(dá)到緩釋平衡。
【主權(quán)項】
1. 一種基于磁性金屬有機框架材料的雙靶向藥物載體，其特征在于，所述藥物載體為 通過雙重靶向作用制備的磁性功能型硼酸基金屬有機框架長期緩釋藥物載體。2. 如權(quán)利要求1所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙靶向藥物載體的制備方 法，其特征在于，按照如下步驟進行： ⑴制備四氧化三鐵(Fe3O4); (2) 四氧化三鐵包裹多巴胺(Fe3O4OPDA)的制備： 首先用蒸餾水配制三羥基甲基氨基甲烷的水溶液，將鹽酸多巴胺加入三羥基甲基氨基 甲烷的水溶液中；然后將步驟（1)得到的Fe3O4加入到上述反應(yīng)體系，并機械攪拌24h，最后用 蒸餾水清洗多次并在60 °C下真空烘干12h; (3) 磁性金屬有機框架(Fe3〇4@PDA@MOF)(fourth time)的制備： 將步驟(2)得到的Fe3O4OPDA、六水合硝酸鋅、無水乙醇和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)加入 到聚四氟乙烯的反應(yīng)釜當(dāng)中，并在水浴振蕩器里振蕩2h，然后加入3，5_二羧基苯基硼酸 (BBDC)和1，3，5-苯三甲酸(BTC)，并在鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)120 °C下干燥IOh，然后冷卻到室溫，用 無水乙醇清洗多次，最后在60°C下真空烘干，將得到的產(chǎn)品Fe3〇4@PDA@MOF) (first time)繼 續(xù)和六水合硝酸鋅、無水乙醇和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)加入到聚四氟乙烯的反應(yīng)釜當(dāng)中， 然后重復(fù)上述步驟(3)四次得到Fe3〇4@PDA@MOF(fourth time); (4) 磁性金屬有機框架藥物載體(Fe3〇4@PDA@MOF@DOX@PEG(forth time)的制備： 首先用蒸餾水配制鹽酸阿霉素溶液，然后將步驟（3)得到的Fe3〇4@PDA@MOF(f〇urth t ime)加入阿霉素溶液中，靜置24h，將得到的Fe3〇4@PDA@MOF@DOX (f ourth t ime)用蒸餾水清 洗； 用PBS緩沖液配制聚乙二醇溶液，然后將Fe3〇4@PDA@MOF@DOX(fourth time)加入到聚乙 二醇溶液中浸泡5分鐘，用蒸餾水清洗后將得到的Fe3〇4@roA@MOF@DOX@PEG(f orth t ime)在 40°C下真空烘干24h。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟（2)中所述三羥基甲基氨基甲烷和蒸餾水的比列是0.3-0.4g: 240-260mL;所述鹽酸多巴胺和蒸餾水的比列是0.3-0.4g: 240-260mL。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟(2)中所述Fe3O 4和蒸餾水的比例是0.19-0.2 Ig: 240:260mL。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟（3)中所述Fe3O 4OPDA、六水合硝酸鋅、無水乙醇、N，N-二甲基甲酰胺 (DMF)的加入比例是40-50mg: 55-60mg: 2-6mL: 4-8mL。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟(3)中所述BBDC，BTC和DMF的加入比例為6-9mg: 6-9mg: 4-8mL。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟(4)中所述鹽酸阿霉素(DOX)和蒸餾水的比列是3-6mg:3-20mL。8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟(4)中所述Fe3〇4@PDA@MOF(fourth time)和鹽酸阿霉素質(zhì)量比是8-20: 3-6 〇9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體的制備方 法，其特征在于，步驟（4)中所述聚乙二醇和PBS溶液(pH = 8.5)的加入比例是5-1511^:5-15mL; Fe3O4OPDAiMOFODOX(fourth time)和聚乙二醇溶液的加入比列是5-15mg: 5-15mL。10.如權(quán)利要求1所述的一種基于磁性金屬有機框架材料的雙祀向藥物載體用于搭載 抗癌藥物阿霉素。
【文檔編號】A61K47/34GK105879043SQ201610204643
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年4月1日
【發(fā)明人】劉樹成, 潘建明, 朱恒佳, 周永超, 苑東
【申請人】江蘇大學(xué)