干眼癥治療用滴眼劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的在于，提供一種用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的干眼癥治療用滴眼劑。本發(fā)明涉及一種干眼癥治療用滴眼劑，其包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，且用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。
【專利說明】
干眼癥治療用滴眼劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及干眼癥治療用滴眼劑。
【背景技術(shù)】
[0002]干眼癥是由各種因素引起的淚液和角結(jié)膜上皮的慢性疾病，且是伴隨有眼睛的不適感、視功能異常的疾病。干眼癥是在歐美和日本10?20%的成年人罹患的主要眼疾病，隨著顯示器屏幕的使用時(shí)間增加、由空調(diào)設(shè)備造成的空氣干燥、隱形眼鏡的使用等，患者數(shù)量有增加傾向。
[0003]干眼癥是由如下情況引起的:淚腺中的淚液的分泌量減少；因淚液中的脂質(zhì)、黏蛋白的異常而促進(jìn)水分量的蒸發(fā)，導(dǎo)致淚液的量減少。由于淚液的減少，會(huì)產(chǎn)生角膜表面和結(jié)膜表面的慢性刺激、炎癥，從而導(dǎo)致患者的生活品質(zhì)下降。一直以來，為了抑制炎癥并治療干眼癥而使用留體試劑，但對(duì)于安全性來說不能說是充分的，也存在產(chǎn)生副作用的傾向。作為代替留體試劑來抑制炎癥的藥劑，已知有雙氯芬酸、溴芬酸等非留體類抗炎癥藥(NSAID)。專利文獻(xiàn)I公開了包含雙氯芬酸作為有效成分的抗炎癥滴眼劑。
[0004]作為干眼癥的治療方法，已知有基于炎癥抑制作用的治療方法，但作為干眼癥的病因，除了炎癥以外，還懷疑與年齡增加、激素的變化、環(huán)境因素、自身免疫等相關(guān)，需要基于除了抗炎癥以外的作用機(jī)理的干眼癥治療方法。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0006]專利文獻(xiàn)
[0007]專利文獻(xiàn)I:日本特開昭58-174310號(hào)公報(bào)
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008]發(fā)明要解決的問題
[0009]本發(fā)明的課題在于，提供一種用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的干眼癥治療用滴眼劑。
[0010]用于解決問題的方案
[0011]本發(fā)明涉及一種干眼癥治療用滴眼劑，其包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，且用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。
[0012]優(yōu)選的是，以0.01?0.7重量/容量％的濃度包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的土卜
ΠΤΤ.0
[0013]優(yōu)選的是，雙氯芬酸的藥學(xué)上可接受的鹽為雙氯芬酸鈉。
[0014]優(yōu)選的是，還包含聚山梨酯80、硼砂或聚乙烯吡咯烷酮。
[0015]發(fā)明的效果
[0016]本發(fā)明的干眼癥治療用滴眼劑通過包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，可以抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡，從而有效地治療干眼癥。
【附圖說明】
[0017]圖1A為示出實(shí)施例1和比較例I的結(jié)果的圖。
[0018]圖1B為示出實(shí)施例1和比較例I的結(jié)果的圖。
[0019]圖2A為示出實(shí)施例2和比較例2的結(jié)果的圖。
[0020]圖2B為示出實(shí)施例2和比較例2的結(jié)果的圖。
[0021 ]圖3A為示出實(shí)施例3和比較例3的結(jié)果的圖。
[0022]圖3B為示出實(shí)施例3和比較例3的結(jié)果的圖。
[0023]圖3C為示出實(shí)施例3和比較例3的結(jié)果的圖。
[0024]圖4A為示出實(shí)施例4和比較例4的結(jié)果的圖。
[0025 ]圖4B為示出實(shí)施例4和比較例4的結(jié)果的圖。
[0026]圖4C為示出實(shí)施例4和比較例4的結(jié)果的圖。
[0027]圖5A為示出實(shí)施例5和比較例5的結(jié)果的圖。
[0028]圖5B為示出實(shí)施例5和比較例5的結(jié)果的圖。
[0029]圖5C為示出實(shí)施例5和比較例5的結(jié)果的圖。
[0030]圖為示出實(shí)施例5和比較例5的結(jié)果的圖。
[0031 ]圖5E為示出實(shí)施例5和比較例5的結(jié)果的圖。
[0032]圖6為示出實(shí)施例6和比較例6的結(jié)果的圖。
[0033]圖7為示出實(shí)施例7和比較例7的結(jié)果的圖。
[0034]圖8為示出實(shí)施例8和比較例8的結(jié)果的圖。
[0035]圖9為示出實(shí)施例9和比較例9的結(jié)果的圖。
[0036]圖10為示出實(shí)施例10和比較例10的結(jié)果的圖。
【具體實(shí)施方式】
[0037]本發(fā)明涉及一種干眼癥治療用滴眼劑，其包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，且用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。
[0038]雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽在滴眼劑中的濃度優(yōu)選為0.01?0.7重量/容量％、更優(yōu)選為0.05?0.5重量/容量％。在低于0.01重量/容量％時(shí)，存在治療效果變差的傾向。在超過0.7重量/容量％時(shí)，存在難以制備組合物的傾向。
[0039]作為雙氯芬酸的藥學(xué)上可接受的鹽，可舉出:雙氯芬酸鈉、雙氯芬酸鉀。
[0040]滴眼劑的pH優(yōu)選為6.0?8.5、更優(yōu)選為7.0?8.0。在pH低于6.0時(shí)，存在眼刺激無法得到緩解的傾向，在pH超過8.5時(shí)，會(huì)變得偏離生理的pH。
[0041]滴眼劑的滲透壓比優(yōu)選為0.9?1.4。需要說明的是，此處的滲透壓比是指與生理鹽水相比較時(shí)的滲透壓比。
[0042]本發(fā)明的滴眼劑除了雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，還可以含有緩沖劑、等滲劑、防腐劑、增稠劑、增溶劑、清洗劑。
[0043]作為緩沖劑，可舉出:磷酸與磷酸鹽的組合、硼酸與硼砂的組合、有機(jī)酸與有機(jī)酸鹽的組合等。其中，優(yōu)選硼酸與硼砂的組合。滴眼劑中的緩沖劑的含量優(yōu)選為0.01?10重量/容量％、更優(yōu)選為0.I?3重量/容量％。在低于0.0I重量/容量％時(shí)，存在難以充分取得本發(fā)明的效果的傾向。在超過1重量/容量％時(shí)，存在產(chǎn)生眼刺激的傾向。
[0044]作為等滲劑，可舉出:葡萄糖等糖類、丙二醇、甘油、氯化鈉、氯化鉀、甘露醇、山梨糖醇、木糖醇等糖醇等。其中，優(yōu)選氯化鈉、氯化鉀。滴眼劑中的等滲劑含量優(yōu)選為0.01?10
重量/容量％、更優(yōu)選為0.1?3重量/容量％。
[0045]作為防腐劑，可舉出:苯扎氯銨、芐索氯銨和葡萄糖酸氯己定(chlorhexidinegluconate)等轉(zhuǎn)化阜(invert soap)類;對(duì)輕基苯甲酸甲酯、對(duì)輕基苯甲酸乙酯、對(duì)輕基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯甲酸丁酯等對(duì)羥基苯甲酸酯類;氯丁醇、苯乙醇和芐醇等醇類。其中，優(yōu)選氯丁醇。滴眼劑中的防腐劑含量優(yōu)選為0.001?0.5重量/容量％。
[0046]作為增稠劑，可舉出:聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥丙基纖維素等。其中，優(yōu)選聚乙烯吡咯烷酮。
[0047]作為增溶劑，可舉出:聚山梨酯80(聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯、商品名Tween80)、聚氧乙稀輕基硬脂酸三甘油酯(polyoxyethyleneoxystearic acidtriglyceride)、聚乙二醇、α或β-環(huán)糊精等。其中，優(yōu)選聚山梨酯80。
[0048]為了緩解眼刺激可以含有鈣鹽或鎂鹽。作為這種鹽，例如可舉出:泛酸鈣、氯化鈣、丙酸鈣、乙酸鈣、乳酸鈣、葡萄糖酸鈣等鈣鹽、或相應(yīng)的鎂鹽。其中，優(yōu)選泛酸鈣、氯化鈣、氯化鎂。
[0049]對(duì)于本發(fā)明的滴眼劑，為了增強(qiáng)抑制由高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的效果，在前述組合使用成分中，優(yōu)選包含聚山梨酯80、硼砂或聚乙烯吡咯烷酮。
[0050]為了增強(qiáng)抑制由高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的效果，滴眼劑中的聚山梨酯80的濃度優(yōu)選為0.1?5.0重量/容量％、更優(yōu)選為0.3?3.0重量/容量％。
[0051]為了增強(qiáng)抑制由高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的效果，滴眼劑中的硼砂的濃度優(yōu)選為
0.1?20.0重量/容量％、更優(yōu)選為0.3?15.0重量/容量％。
[0052]為了增強(qiáng)抑制由高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的效果，滴眼劑中的聚乙烯吡咯烷酮的濃度優(yōu)選為1.0?15.0重量/容量％、更優(yōu)選為2.0?1.0重量/容量％。
[0053]本發(fā)明的滴眼劑涉及在滴眼劑當(dāng)中用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡的干眼癥治療用滴眼劑。通常，對(duì)于干眼癥來說，淚液減少，淚液的滲透壓上升。隨著該滲透壓上升，水分從細(xì)胞內(nèi)排出，從而暴露于細(xì)胞縮小這樣的滲透壓應(yīng)力。與此相對(duì)，將外部的鈉離子等攝取到細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)的離子強(qiáng)度上升，細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞凋亡。作為產(chǎn)生細(xì)胞凋亡的眼組織，可舉出:角膜、結(jié)膜、淚腺。更具體而言，作為產(chǎn)生細(xì)胞凋亡的細(xì)胞，可舉出:角膜上皮細(xì)胞、結(jié)膜上皮細(xì)胞、淚腺細(xì)胞。
[0054]本發(fā)明的滴眼液中使用的雙氯芬酸通過促進(jìn)NFAT5(Nuclear Factor ofActivated T-cells 5;活化T細(xì)胞核因子5)基因的表達(dá)和核內(nèi)移動(dòng)，即使在淚液的高滲透壓條件下也能夠抑制細(xì)胞凋亡。NFAT5基因產(chǎn)物能夠?qū)GT_l(betaine/GABA transporter-1;甜菜堿/GABA轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1)基因等活化。其結(jié)果如下:對(duì)于滲透壓應(yīng)力，細(xì)胞能夠通過不會(huì)影響離子強(qiáng)度的有機(jī)性滲透壓調(diào)節(jié)物質(zhì)向細(xì)胞內(nèi)的攝取來對(duì)應(yīng)。由于能夠避免細(xì)胞內(nèi)的離子強(qiáng)度上升，因此可認(rèn)為:即使在淚液的高滲透壓條件下也能夠抑制細(xì)胞凋亡。本發(fā)明的滴眼劑起到抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的角膜、結(jié)膜、淚腺中的細(xì)胞凋亡的效果。更具體而言，起到抑制角膜上皮細(xì)胞、結(jié)膜上皮細(xì)胞、淚腺細(xì)胞的細(xì)胞凋亡的效果。
[0055]使用本發(fā)明的滴眼劑時(shí)，每次對(duì)單眼的滴眼量優(yōu)選為I?3滴、更優(yōu)選為I?2滴。此夕卜，以容量表示每次對(duì)單眼的滴眼量時(shí)，優(yōu)選為10?300yL、更優(yōu)選為20?200yL、進(jìn)一步優(yōu)選為30?lOOyL。本發(fā)明的滴眼劑的給藥間隔優(yōu)選為I天I?6次、更優(yōu)選為I天I?3次。
[0056]實(shí)施例
[0057]實(shí)施例中，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體說明，但本發(fā)明并不僅限制于這些。
[0058](實(shí)施例1)高滲透壓條件下的細(xì)胞障礙的抑制效果
[0059]將HCE細(xì)胞(人角膜上皮細(xì)胞)在含有雙氯芬酸的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。對(duì)于培養(yǎng)基，通過150mM的NaCl、280mM的葡萄糖或280mM的山梨糖醇而形成高滲透壓條件。利用MTT法測定活細(xì)胞的數(shù)量，算出相對(duì)于對(duì)照(等滲壓條件)的吸光度的相對(duì)值。將結(jié)果示于圖1厶和圖18。數(shù)值為平均±5.0.(11 = 3)、撲〈0.05;*樸〈0.01。
[0060](比較例I)
[0061]使用其他的非留體性抗炎癥藥(NSAID)代替雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例1相同的操作。將結(jié)果示于圖1A。
[0062]確認(rèn)到:非留體性抗炎癥藥(NSAID)當(dāng)中，特別是雙氯芬酸在高滲透壓條件下的細(xì)胞障礙的抑制效果高。
[0063](實(shí)施例2)高滲透壓條件下的細(xì)胞凋亡抑制和細(xì)胞增殖效果
[0064]將HCE細(xì)胞在含有雙氯芬酸和150mM的NaCl的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。使用熒光肽基質(zhì)測定6小時(shí)培養(yǎng)后的半胱天冬酶3樣活性活性，將結(jié)果示于圖2A。此外，在12小時(shí)培養(yǎng)后，通過BrdU摻入試驗(yàn)研究細(xì)胞增殖，將其結(jié)果以相對(duì)于對(duì)照(等滲壓條件)的吸光度的相對(duì)值的形式記載。將結(jié)果示于圖28。數(shù)值為平均±3.0.(11 = 3)、撲〈0.05;*撲〈0.01。
[0065](比較例2)
[0066]使用溴芬酸代替雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例2相同的操作。將結(jié)果示于圖2A?圖2B。
[0067]確認(rèn)到:雙氯芬酸抑制高滲透壓條件下的細(xì)胞凋亡，還起到細(xì)胞增殖效果。
[0068](實(shí)施例3)對(duì)COX-阻礙的非依賴性
[0069]將HCE細(xì)胞在含有雙氯芬酸、150mM的NaCl和/或PGE2的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)培養(yǎng)。利用MTT法測定活細(xì)胞的數(shù)量，以相對(duì)于對(duì)照(等滲壓條件)的吸光度的相對(duì)值的形式記載。將結(jié)果示于圖3A和圖3C。
[0070]此外，將HCE細(xì)胞在含有雙氯芬酸的培養(yǎng)基中進(jìn)行30分鐘前培養(yǎng)，進(jìn)而在含有ΙΟμΜ的花生四烯酸和雙氯芬酸的培養(yǎng)基中進(jìn)行30分鐘培養(yǎng)。需要說明的是，花生四烯酸是用于誘導(dǎo)PGE2而添加的物質(zhì)。通過EIA測定培養(yǎng)液中所含的PGE2的量。將結(jié)果示于圖3Β。數(shù)值為平;t^±S.D.(n = 3)、*P〈0.05;#P〈0.01。
[0071](比較例3)
[0072]使用溴芬酸代替雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例3相同的操作。將結(jié)果示于圖3A?圖3C。
[0073]圖3A中，S卩使添加PGE2，活細(xì)胞數(shù)量也未發(fā)生變化。圖3B和圖3C中，為了減少PGE2而需要的雙氯芬酸的濃度為0.1nM，而圖3C中，為了減少由高滲透壓引起的細(xì)胞障礙而需要的濃度為ΙΟΟηΜ。一般來說，已知炎癥是通過環(huán)氧合酶(COX)增強(qiáng)前列腺素E2(PGE2)的生產(chǎn)而產(chǎn)生的，因此，由圖3A?圖C的結(jié)果確認(rèn)到:雙氯芬酸的效果是基于與阻礙COX而減少PGE2的表達(dá)量的作用分別獨(dú)立的作用而實(shí)現(xiàn)的。
[0074](實(shí)施例4)NFAT5的表達(dá)提高和核內(nèi)移行促進(jìn)效果
[0075]將HCE細(xì)胞在含有雙氯芬酸和150mM的NaCl的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行6小時(shí)(圖4A和圖4C)或I小時(shí)(圖4B)培養(yǎng)。使用相對(duì)于NFAT5、肌動(dòng)蛋白或核纖層蛋白B的抗體，通過免疫印跡法對(duì)全細(xì)胞粉碎液(圖4A和圖4B)或核抽提液(圖4B)進(jìn)行分析。測定NFAT5的帶的強(qiáng)度，以對(duì)于對(duì)照(不含有雙氯芬酸的等滲壓條件)的相對(duì)值的形式記載(圖4A和圖4B)。通過實(shí)時(shí)RT-PCR測定bgtlmRNA的相對(duì)表達(dá)量，并將通過肌動(dòng)蛋白的表達(dá)量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化而得到的數(shù)值以相對(duì)于對(duì)照(不含雙氯芬酸的等滲壓條件)的相對(duì)值的形式記載(圖4C)。數(shù)值為平均±
S.D.(n = 3)、*P〈0.05;**P〈0.01。
[0076](比較例4)
[0077]使用溴芬酸代替雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例4相同的操作。將結(jié)果示于圖4A?圖4C。
[0078]確認(rèn)到:雙氯芬酸通過NFAT5的表達(dá)提高和核內(nèi)移行促進(jìn)的作用，在高滲透壓條件下抑制了細(xì)胞凋亡。
[0079](實(shí)施例5)大鼠的角膜表面障礙治療效果
[0080]去除大鼠的淚腺，制作干眼癥模型。在去除淚腺的I?5周后，I天3次給予含有雙氯芬酸(0.1%、3.1mM)的眼藥(5μ1)。通過棉線試驗(yàn)測定淚液量，將結(jié)果示于圖5A。將用熒光素染色而成的角膜的圖像示于圖5Β。算出熒光素的得分，并示于圖5C。在去除淚腺的5周后制作眼組織的切片，進(jìn)行TUNEL試驗(yàn)和DAPI染色，將結(jié)果示于圖5D(比例尺為50μπι)。將TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)量示于圖5E。數(shù)值為平均±S.E.M.、*P〈0.01，n.s.是指不顯著(notsignificant)。
[0081 ](比較例5)
[0082]使用溴芬酸代替雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例5相同的操作。將結(jié)果示于圖5A?圖5E。
[0083]確認(rèn)到:雙氯芬酸起到治療干眼癥模型的角膜表面障礙的效果。
[0084](實(shí)施例6)雙氯芬酸與聚山梨酯80的組合使用
[0085]將HCE細(xì)胞在含有Oyg/ml、lyg/ml或10yg/ml的聚山梨酯80的培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)前培養(yǎng)。進(jìn)而，在含有ΙμΜ的雙氯芬酸、150mM的NaCl和與前培養(yǎng)相同濃度的聚山梨酯80的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)培養(yǎng)。利用MTT法測定活細(xì)胞的數(shù)量，并將結(jié)果示于圖6。
[0086](比較例6)
[0087]未使用雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例6相同的操作，將結(jié)果示于圖6。
[0088]確認(rèn)到:通過組合使用聚山梨酯80能夠提高雙氯芬酸的效果。
[0089](實(shí)施例7)雙氯芬酸與硼砂的組合使用
[0090]將HCE細(xì)胞在含有0yg/ml、4yg/ml或40yg/ml的硼砂的培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)前培養(yǎng)。進(jìn)而，在含有ΙμΜ的雙氯芬酸、150mM的NaCl和與前培養(yǎng)相同濃度的硼砂的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)培養(yǎng)。利用MTT法測定活細(xì)胞的數(shù)量，將結(jié)果示于圖7。
[0091](比較例7)
[0092]未使用雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例7相同的操作，將結(jié)果示于圖7。
[0093]確認(rèn)到:通過組合使用硼砂能夠提高雙氯芬酸的效果。
[0094](實(shí)施例8)雙氯芬酸與聚乙烯吡咯烷酮的組合使用
[0095]將HCE細(xì)胞在含有0yg/ml、10yg/ml或100yg/ml的聚乙烯吡咯烷酮的培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)前培養(yǎng)。進(jìn)而，在含有ΙμΜ的雙氯芬酸、150mM的NaCl和與前培養(yǎng)相同濃度的聚乙烯吡咯烷酮的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)培養(yǎng)。利用MTT法測定活細(xì)胞的數(shù)量，將結(jié)果示于圖8。
[0096](比較例8)
[0097]未使用雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例8相同的操作，將結(jié)果示于圖8。
[0098]確認(rèn)到:通過組合使用聚乙烯吡咯烷酮能夠提高雙氯芬酸的效果。
[0099](實(shí)施例9)由組合使用硼砂、硼酸、氯丁醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚山梨酯80而得到的滴眼藥(以下，稱為組合使用滴眼液)產(chǎn)生的效果
[0100]將HCE細(xì)胞在含有l(wèi)yg/ml的組合使用滴眼藥的培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)前培養(yǎng)。進(jìn)而，在含有3μΜ的組合使用滴眼藥、150mM的NaCl的高滲透壓培養(yǎng)基中進(jìn)行24小時(shí)培養(yǎng)。利用MTT法測定活細(xì)胞的數(shù)量。此外，使用雙氯芬酸代替組合使用滴眼藥進(jìn)行相同操作。將結(jié)果示于圖9。需要說明的是，組合使用滴眼液為配方例3的組成的滴眼藥。
[0101](比較例9)
[0102]未使用雙氯芬酸或組合使用滴眼藥(CTRL)、或使用了緩沖液(溶劑對(duì)照(vehicle))，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例9相同的操作，將結(jié)果示于圖9。
[0103]確認(rèn)到:通過組合使用硼砂、硼酸、氯丁醇、聚乙烯吡咯烷酮和聚山梨酯80能夠提高雙氯芬酸的效果。
[0104](實(shí)施例10)
[0105]去除大鼠的淚腺，制作干眼癥模型。在去除淚腺的I周后，以I天3次給予含有雙氯芬酸(0.05 %、1.55mM或0.1 %、3.1mM)的眼藥(5μ1)。給藥4周后用熒光素將淚液染色并算出其得分。將結(jié)果示于圖10。
[0106](比較例10)
[0107]使用緩沖液(溶劑對(duì)照)代替雙氯芬酸，除此之外，進(jìn)行與實(shí)施例10相同的操作，將結(jié)果示于圖10。
[0108]確認(rèn)到:通過0.05%的雙氯芬酸能夠治療干眼癥模型的角膜表面障礙。
[0109](配方例I)
[Ο? ?0] 將10mg的雙氯芬酸鈉、573mg的硼砂、868mg的硼酸、290mg的氯化鈉、和10mg的β-環(huán)糊精溶解于約80ml的蒸餾水中，向其中添加150mg的乳酸鈣并使其溶解，用蒸餾水稀釋定量為100ml，進(jìn)行除菌過濾而得到滴眼劑。
[0111](配方例2)
[0112]將10mg 的雙氯芬酸鈉、200mg 的 NaH2POK 無水)、710mg 的 Na2HPOK 無水)、300mg 的氯化鈉和1 O Omg的β-環(huán)糊精溶解于約8 Om I的蒸饋水中，向其中添加15 Omg的泛酸I丐并使其溶解，用蒸餾水稀釋定量為100ml，進(jìn)行除菌過濾而得到滴眼劑。
[0113](配方例3)
[Ο? Μ] 將10mg的雙氯芬酸鈉、450mg的硼砂、1500mg的硼酸、500mg的氯丁醇、3000mg的聚乙烯吡咯烷酮K25和500mg的聚山梨酯80(TWeen80)在滅菌純化水中溶解并將總量設(shè)為100ml，從而得到滴眼劑。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種干眼癥治療用滴眼劑，其包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，且用于抑制由淚液的高滲透壓導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的滴眼劑，其以0.0l?0.7重量/容量％的濃度包含雙氯芬酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的滴眼劑，其中，雙氯芬酸的藥學(xué)上可接受的鹽為雙氯芬酸鈉。4.根據(jù)權(quán)利要求1?3中任一項(xiàng)所述的滴眼劑，其還包含聚山梨酯80、硼砂或聚乙烯吡咯烷酮。
【文檔編號(hào)】A61K47/02GK105848651SQ201480070890
【公開日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2014年12月25日
【發(fā)明人】高橋佑次, 水島徹
【申請(qǐng)人】日本株式會(huì)社Ltt生物醫(yī)藥