Quantum Scientific),澳大利亞密爾頓）。然后從各孔中移除試驗(yàn)培養(yǎng)基。通過在 試驗(yàn)培養(yǎng)基中連續(xù)稀釋制備0. 〇9ng/mkl. 1化g/mL(0.24nM-2.9祉M)的9種3-乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異fl惡挫游離堿濃度，然后W各25化 L分別加入各孔中膜的基底側(cè)表面。陰性對(duì)照(250化試驗(yàn)培養(yǎng)基)加入各陰性對(duì)照孔。試驗(yàn) 板在潮濕的5 % C〇2氣體中33 °C解育過夜。
[0082] 然后在化iAirway?系統(tǒng)中組織的頂端表面每孔接種1.8X 105pfu(150化)HRV 14。 試驗(yàn)板在潮濕的5%C02氣體中33°C解育8小時(shí)，然后從各孔中組織的頂端表面移除12扣L培 養(yǎng)基。在由病毒產(chǎn)量降低試驗(yàn)定量前樣品存于-80°C。
[0083] 從化iAirway?系統(tǒng)中定量病毒效價(jià)
[0084] 200化試驗(yàn)培養(yǎng)基中的海拉俄亥俄化eLa Ohio)細(xì)胞W每孔1.Ox IO4細(xì)胞濃度種 于96孔板(康寧公司（Corning),目錄號(hào)3595)中，在潮濕的5%C0巧體中37°C解育過夜。解 育期后，所述細(xì)胞約50%融合。
[0085] 從化iAirway?系統(tǒng)的各孔內(nèi)組織的頂端表面收獲的病毒樣品中，各取10化在試驗(yàn) 培養(yǎng)基中1:100稀釋。將10化L體積的各稀釋液加入新試驗(yàn)板的屯個(gè)孔中的每一個(gè)，然后運(yùn) 些通過所述板連續(xù)稀釋3倍，產(chǎn)生總計(jì)12種不同病毒樣品濃度。12個(gè)孔僅含試驗(yàn)培養(yǎng)基（即 無病毒)且作為對(duì)照。板在潮濕的5 % C〇2氣體中33 °C解育5天，期間使之發(fā)生細(xì)胞病變效應(yīng) (C陽）。
[0086] 對(duì)單層細(xì)胞的病毒誘導(dǎo)CPE目測(cè)評(píng)分，并用Reed-Muench方法（Reed, L.J.和 Muench，H. ,Am. J.Hyg. (1938)27:493-7)測(cè)定病毒懸液的TCIDso。
[0087] 得到的3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d] 異口惡挫游離堿的TCIDso值表示為陰性對(duì)照TCIDso值的百分比。
[008引圖2顯示初步結(jié)果(n = l)，表明3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異囉挫游離堿能在源自正常供體(570ng/mL，190ng/mL)的組織和源 自哮喘（100011邑/1111，33011邑/1111^和(：0?0(1000雌/1111^，33011邑/1111^供體的組織中^200-100011邑/ mL的濃度降低感染病毒效價(jià)。ECso測(cè)定正在進(jìn)行中且將通過非線性回歸從陰性對(duì)照值結(jié)果 計(jì)算出值。
[0089] 實(shí)施例3
[0090] 2種劑量水平的3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基）-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異賓祭挫在有癥狀的人類鼻病毒感染的哮喘成人中的II期多中屯、、隨機(jī)、雙盲、安慰 劑對(duì)照、平行組研究
[0091] 本研究群體包括樣本大小為232-400個(gè)男性和女性對(duì)象，年齡為18-70歲，篩選前 至少2年被先診斷為具有穩(wěn)定的輕度到中度哮喘、參與前90天內(nèi)進(jìn)行預(yù)篩選且具有推測(cè)的 人鼻病毒(HRV)癥狀。所述對(duì)象隨機(jī)接雙安慰劑或兩種劑量的3-乙氧基-6-{2-[ 1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異g惡挫（1:1:1比例)之一。
[0092] 已鑒定和預(yù)篩選的哮喘患者在有癥狀的推測(cè)皿V感染發(fā)作24小時(shí)內(nèi)送至診所。合 格的對(duì)象隨機(jī)用安慰劑或日總劑量800mg(400mg BID)的活性成分治療6天，28天后進(jìn)一步 臨床隨訪。
[0093] 本研究中，主要終點(diǎn)和原理是基于第3天安慰劑和3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化 嗦-3-基）-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異峨挫之間威斯康星上呼吸道癥狀調(diào)查-21 (WURSS-21)嚴(yán)重性評(píng)分的均值差異(Walter,M.J.，等，Eur Resp J(2008)32:1548-1554)。 所有對(duì)象每天完成WURSS-21感冒癥狀評(píng)分，持續(xù)14天?；颊吒鶕?jù)藥物通常說明繼續(xù)維持哮 喘藥物，并記錄藥物細(xì)節(jié)如劑量和所有給藥事件的時(shí)間，例如記錄在日記卡上。所述日記卡 還可用于記錄哮喘緩解藥物如短效的敦動(dòng)劑的使用。
[0094] 二級(jí)終點(diǎn)可包括但不限于下述的任一或更多：（1)第1天-第14天呼氣流量峰值 (PEF)降低百分比的最大均值，作為針對(duì)病毒誘導(dǎo)的哮喘惡化的肺功能的測(cè)量；（2)臨床就 診時(shí)記錄的1秒用力呼氣量(FEVi),作為針對(duì)病毒誘導(dǎo)的哮喘惡化的肺功能的測(cè)量;和(3) 哮喘控制調(diào)查表（A C Q - 5 )，作為潛在哮喘控制程度的測(cè)量，W及哮喘生活質(zhì)量調(diào)查表 (AQLQS)評(píng)分，用于當(dāng)前哮喘水平對(duì)生活質(zhì)量的影響。
[0095] 從所有對(duì)象中收集鼻腔拭子用于病毒學(xué)研究。病毒學(xué)關(guān)鍵終點(diǎn)包括針對(duì)HRV在任 何時(shí)間點(diǎn)的PCR陽性樣品發(fā)生率，2-4天中陽性病毒培養(yǎng)物和鼻腔拭子中AUC病毒負(fù)荷的發(fā) 生率。3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異H惡挫的刺 激研究表明對(duì)病毒負(fù)荷的明顯劑量響應(yīng)。
[0096] 實(shí)施例4
[0097] 膠囊制劑
[009引
[0099] 除非另有說明，在本說明書和所附的權(quán)利要求書中，術(shù)語"包含"W及變化形式如 "包括"和"含有"應(yīng)理解為是指包括所述的整數(shù)或步驟或者多個(gè)整數(shù)或步驟的組，但是不排 除任何其它整數(shù)或步驟或者多個(gè)整數(shù)或步驟的組。
[0100] 在說明書中對(duì)任何在先出版物(或由此得到的資料)或任何已知事物的參考不作 為并且不應(yīng)被看作承認(rèn)或認(rèn)可或者W任何形式提示在先出版物(或由此得到的資料)或任 何已知事物形成本說明書設(shè)及的領(lǐng)域中的公知普通常識(shí)的一部分。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.3- 乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異曠挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于口服給藥W治療或緩解哮喘癥狀的藥物中的用途，其中所 述口服給藥的3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異 口惡挫或其藥學(xué)上可接受的鹽是固體形式。2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述藥物用于治療或緩解感染HRV的對(duì)象中 的哮喘癥狀。 3.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異〇惡挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于口服給藥W治療或緩解COPD癥狀的藥物中的用途，其中所 述口服給藥的3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異 口惡挫或其藥學(xué)上可接受的鹽是固體形式。4.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于，所述藥物用于治療或緩解感染HRV的對(duì)象中 的COPD癥狀。 5.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異囉挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于口服給藥W降低哮喘惡化發(fā)生率或防止其惡化的藥物中 的用途，其中所述口服給藥的3-乙氧基-6-{2-[ 1-(6-甲基-?達(dá)嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧 基}-苯并[d]異Β惡挫或其藥學(xué)上可接受的鹽是固體形式。6.如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，所述藥物用于降低有感染HRV風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象中 的哮喘惡化發(fā)生率或防止其惡化。 7.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異囉挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于口服給藥W降低COPD惡化發(fā)生率或防止其惡化的藥物中 的用途，其中所述口服給藥的3-乙氧基-6-{2-[ 1-(6-甲基-?達(dá)嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧 基}-苯并[d]異Β惡挫或其藥學(xué)上可接受的鹽是固體形式。8. 如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于，所述藥物用于降低有感染HRV風(fēng)險(xiǎn)的對(duì)象中 的COPD惡化發(fā)生率或防止其惡化。9. 如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述口服給藥是口服腸道給藥。10. 如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述固體形式是片劑或膠囊。11. 如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述藥物配制用于與至少一種 哮喘藥物分別、同時(shí)或依次聯(lián)合給予。 12.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異啜挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽用于W固體形式口服給藥W治療或緩解哮喘癥狀。 13.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異囉挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽用于W固體形式口服給藥W治療或緩解COPD癥狀。 14.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異日惡挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽用于W固體形式口服給藥W降低哮喘惡化發(fā)生率或防止其惡化。 15.3- 乙氧基-6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[(1]異曠挫或 其藥學(xué)上可接受的鹽用于W固體形式口服給藥W降低COPD惡化發(fā)生率或防止其惡化。16.-種含3-乙氧基-6-{2-[l-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異 口惡挫或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種哮喘藥物的口服藥物組合物，其中所述3-乙氧基- 6-{2-[1-(6-甲基-化嗦-3-基)-贓晚-4-基]-乙氧基}-苯并[d]異fl惡挫或其藥學(xué)上可接受的 鹽是固體形式。
【專利摘要】本發(fā)明涉及治療呼吸道病癥或疾病的化合物，具體涉及治療、緩解、防止或減輕哮喘或慢性阻塞性肺疾病(COPD)的癥狀或惡化，其中肺功能降低是典型癥狀。
【IPC分類】A61K31/501, A61P31/16, A61P11/06
【公開號(hào)】CN105560245
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510982692
【發(fā)明人】J·N·蘭伯特, J·瑞恩, J·M·威爾遜
【申請(qǐng)人】生物區(qū)科學(xué)管理控股有限公司
【公開日】2016年5月11日
【申請(qǐng)日】2011年4月14日
【公告號(hào)】CA2796207A1, CN102844032A, EP2558097A1, EP2558097A4, US20110257192, WO2011127538A1