一種升麻酚酸類有效成分的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種中藥有效成分的提取方法，具體設(shè)及一種綜合加權(quán)平均響應(yīng)面法 優(yōu)化升麻提取工藝的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 升麻是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥，具有發(fā)表透疹，清熱解毒，升舉陽(yáng)氣的功效。用于風(fēng)熱頭 痛，齒痛，口瘡，咽喉腫痛，麻疹不透，陽(yáng)毒發(fā)斑，脫肛，子宮脫垂。臨床應(yīng)用廣泛，資源豐富。 其中酪酸類成分經(jīng)現(xiàn)代藥理研究具有抗氧化，抗炎，抗血小板凝集，抗腫瘤，降低血糖等作 用，臨床藥效顯著。
[0003] 然而目前升麻提取物的加工生產(chǎn)，沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，仍舊采用陳舊的工藝，造成資 源的浪費(fèi)，加工質(zhì)量不穩(wěn)定，品質(zhì)較差。

【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0004] 發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，采用綜合加權(quán)平 均響應(yīng)面法優(yōu)化，優(yōu)選得到一種提取得率高，并且酪酸類有效成分含量高，工藝穩(wěn)定可靠， 可操作性強(qiáng)的升麻酪酸類有效成分的提取方法。
[000引技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)W上目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為：
[0006] -種升麻酪酸類有效成分的提取方法，其特征在于，包括W下步驟：
[0007] 取升麻藥材，粉碎，加升麻藥材重量6~14倍量體積的55~85 %乙醇溶劑，提取1~ 3次，每次50~300min，合并提取液，濃縮得到含有酪酸類成分的升麻提取物。
[0008] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，包括W下步驟：
[0009] 取升麻藥材，粉碎，加升麻藥材重量8倍量體積的70 %乙醇溶劑，提取2次，每次 220min，合并提取液，濃縮得到含有酪酸類成分的升麻提取物。
[0010] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，升麻提取物中含有 咖啡酸、阿魏酸和異阿魏酸。
[0011] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，升麻提取物中含有 重量百分比0.015~0.018%的咖啡酸、0.033~0.041 %的阿魏酸和0.229~0.263%的異阿 魏酸。
[0012] 作為優(yōu)選方案，W上所述的升麻酪酸類有效成分的提取方法，升麻提取物得率為 0.18 ~0.21%。
[001引工藝篩選實(shí)驗(yàn)；
[0014] 1、指標(biāo)性成分的測(cè)定方法：
[0015] 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定:精密稱定咖啡酸，阿魏酸，異阿魏酸對(duì)照品適量，加甲醇配制成 濃度分別為47.20，144.80，247.40mg ? L-I的混合對(duì)照品?；旌蠈?duì)照品溶液2，5，8，10，15，1祉 L，按色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，W峰面積(Y)對(duì)進(jìn)樣量(X)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)回歸，得咖啡酸，阿魏酸，異 阿魏酸的回歸方程分別為
[0016] Y = 273287X-1149084650(r = 0.9999)；
[0017] Y = 745351X+38143(r = 0.9999)
[0018] Y= 1000000X+283628(r = 0.9995) 〇
[0019] 根據(jù)W上回歸方程，采用HPLC測(cè)定升麻中酪酸類成分的含量。色譜條件為：色譜 柱：YMC-化ck-0DS-C4(250 X4.6mm，5皿）；流動(dòng)乙臘-0.1 % 甲酸溶液（0~12min，5%~13% A;12~23min，13%~18%A;23~30min，18%~5%A);流速：1.0血?min-l;柱溫:30°C;檢測(cè) 波長(zhǎng)：320nm;進(jìn)樣量：10化。
[0020] 2、指標(biāo)性成分的提?。?br>[0021 ]升麻酪酸類成分的提取：取升麻經(jīng)粉碎后過2號(hào)篩，精確稱取10 . Og升麻粉末于 250mL平底燒瓶中，加乙醇，在水浴鍋中回流提取，過濾即得。
[0022] 3、單因素及響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
[0023] 3.1不同乙醇濃度對(duì)升麻酪酸類成分提取率的影響
[0024] 本發(fā)明采用20%~80%不同體積濃度的乙醇提取升麻，由圖1可知，溶媒比10:1， 提取時(shí)間120min的條件下，隨著乙醇體積濃度增加，總酪酸的峰面積緩緩上升，當(dāng)乙醇體積 濃度達(dá)到70%時(shí)，峰面積達(dá)到最大值，W后明顯下降，表明采用體積濃度70%乙醇提取升麻 中酪酸類成分教佳。
[0025] 3.2不同溶媒比(mL/g)對(duì)升麻酪酸類成分提取率的影響
[0026] 本發(fā)明采用乙醇體積和升麻藥材重量比分別為5~16倍進(jìn)行提取升麻，由圖2可 知，在乙醇體積濃度為70%，提取時(shí)間120min的條件下，隨著溶媒比增加，總酪酸的峰面積 升高，當(dāng)乙醇體積(mL)和升麻藥材重量(g)比為別寸，總酪酸的峰面積達(dá)到最大，之后峰面積 明顯下降。W上結(jié)果表明：當(dāng)酪酸成分未飽和時(shí)，隨著溶劑量的增加而增加，防止溶液處于 過飽和時(shí)，則阻止了有效成分的溶出。
[0027] 3.3不同提取時(shí)間對(duì)升麻酪酸類成分提取率的影響
[0028] 本發(fā)明通過50~300分鐘不同提取時(shí)間提取升麻，圖3可知，在乙醇體積70%，溶媒 比8:1的條件下，隨著提取時(shí)間的增加，總酪酸的提取率逐漸升高，當(dāng)時(shí)間為240min時(shí)，提 取率達(dá)到最大，但時(shí)間過長(zhǎng)時(shí)，提取對(duì)細(xì)胞膜破碎作用也加大，隨之雜質(zhì)也溶出過多，影響 有效成分的提取。
[0029] 4、響應(yīng)面法優(yōu)化實(shí)驗(yàn)：
[0030] 在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，本發(fā)明選取對(duì)酪酸類成分影響較大的因素，根據(jù)Box-Benhnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，設(shè)計(jì)S因素S水平的響應(yīng)面分析試驗(yàn)，研究乙醇體積分?jǐn)?shù)、液料比 和提取時(shí)間及其交互作用對(duì)升麻指標(biāo)性成分提取率的影響；
[0031 ]單因素及響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)包括如下：
[0032] A、乙醇體積分?jǐn)?shù)(55-85%)對(duì)升麻指標(biāo)性成分的影響
[0033] B、液料比（6:1-10:1)對(duì)升麻指標(biāo)性成分的影響
[0034] C、回流提取時(shí)間（180-270min)對(duì)升麻指標(biāo)性成分的影響。
[0035] 查閱文獻(xiàn)和預(yù)試驗(yàn)，設(shè)定綜合評(píng)分滿分為100分，根據(jù)升麻中有效成分含量及藥效 影響，咖啡酸，阿魏酸，異阿魏酸，浸出物權(quán)重系數(shù)分別為20,30,40，10，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行總 加權(quán)評(píng)分，利用綜合評(píng)分值(P)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析：WY表示試驗(yàn)中指標(biāo)成分的測(cè)定值，W 各指標(biāo)的最大值(Ymax)作為參照對(duì)同一指標(biāo)各數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，C表示試驗(yàn)中該指標(biāo)成 分的測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)(C = Y/Ymax)，綜合評(píng)分P = Cb細(xì)酸X 20+〇55|嫩X 30+蝴夠嫩X 40+C漬胸 X 10。根據(jù)Box-Behnken中屯、組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，綜合單因素影響試驗(yàn)結(jié)果，選取溶媒比 (Xi)、乙醇濃度(X2)和提取時(shí)間（X3)作為考察對(duì)象，采用Design Expert 8.0統(tǒng)計(jì)分析軟件 的響應(yīng)面分析法安排試驗(yàn)，W獲取最適工藝參數(shù)。
[0036] 本發(fā)明采用表1綜合加權(quán)平均響應(yīng)面法優(yōu)化升麻提取工藝的試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果
[0037] 表1:響應(yīng)面法優(yōu)化升麻提取工藝的