山蠟梅葉片在制備抑制嗜鉻細胞瘤細胞pc-12細胞增殖藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域,具體設(shè)及一種山蠟梅葉片在制備抑制嗜銘細胞瘤細胞 PC-12細胞增殖藥物中的應(yīng)用及山蠟梅葉片的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 山蠟梅葉片標準號WS-11310(ZD-1310)-2002,記載于國家中成藥標準匯編內(nèi)科內(nèi) 科肺系(一)分冊。由山蠟梅葉1500g作為原料藥制成,具有辛涼解表,清熱解毒的功效。用于 風熱感冒,發(fā)熱,惡寒,咽痛。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中,尚未有山蠟梅葉片在在制備抑制大鼠嗜銘細胞瘤細胞PC-12細胞增 殖藥物中的應(yīng)用的報道,也未見有山蠟梅葉片提取制備方面采用超臨界萃取的報道,而水 煎煮、水蒸氣蒸饋法提取揮發(fā)油的方法,工藝粗糖、落后,雜質(zhì)多,導(dǎo)致患者用量過大,不方 便服用,嚴重影響了本品在臨床上應(yīng)用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 發(fā)明目的:本發(fā)明的目的在于提供一種山蠟梅葉片在制備抑制嗜銘細胞瘤細胞 PC-12細胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[000引本發(fā)明的另一個目的在于提供一種山蠟梅葉片的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過如下的方案實現(xiàn)的: 山蠟梅葉片在制備抑制嗜銘細胞瘤細胞PC-12細胞增殖藥物中的應(yīng)用,所述山蠟梅葉 片由山蠟梅葉1500g作為原料藥制成,所述山蠟梅葉片的制備方法由下列步驟組成:取山蠟 梅葉,加入到C〇2超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為 4-6%,萃取壓力 15-30MPa,溫度30-50°C,C〇2流量l-3ml/g生藥· min,萃取時間700-800min, 得超臨界萃取物,將超臨界萃取物加入淀粉,70%乙醇制顆粒,干燥,壓片,制成500片,每片 重0.35邑。
[0007] 優(yōu)選的,上述的山蠟梅葉片在制備抑制嗜銘細胞瘤細胞PC-12細胞增殖藥物中的 應(yīng)用,所述山蠟梅葉片的制備方法由下列步驟組成:取山蠟梅葉,加入到C〇2超臨界萃取器 中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%,萃取壓力25MPa,溫度40°C, 0)2流量2ml/g生藥· min,萃取時間750min,得超臨界萃取物,將超臨界萃取物加入淀粉, 70%乙醇制顆粒,干燥,壓片,制成500片,每片重0.35g。
[0008] 現(xiàn)有技術(shù)中,山蠟梅葉片日服,一次6~7片,一日3次。山蠟梅葉片服藥量大。采用 本發(fā)明方法制備成的山蠟梅葉片每片重〇.35g,每次僅需3片,一日服用3次。在具有更多活 性成分的條件下大大減少了服用量。此結(jié)論可W通過下述試驗證明。
[0009] 試驗一、不同方法制備的山蠟梅葉片中搬皮素和山奈素含量的比較 1、儀器及試藥本發(fā)明山蠟梅葉片:按實施例1方法制備,使用1500g原料藥,經(jīng)提取制成 500片,每片重0.35g。原山蠟梅葉片,按照WS-11310 (ZD-1310) -2002標準方法制備。 Agilentl200高效液相色譜儀;METTLER AE240電子分析天平;搬皮素和山奈素對照品(中國 藥品生物制品檢定所)。
[0010] 2、方法 照高效液相色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI D)測定。
[0011] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-0.5%憐 酸溶液(45:55)為流動相;檢測波長為365nm。理論板數(shù)分別按搬皮素、山奈素峰計算均應(yīng)不 低于1500。
[0012] 對照品溶液的制備精密稱取搬皮素、山奈素對照品適量,分別加甲醇制成每1ml 含化g、8yg的溶液,即得。
[0013] 供試品溶液的制備取本發(fā)明山蠟梅葉片10片,精密稱定,研細,取0.60g,精密稱 定,加甲醇加熱回流2次巧0ml、50ml),每次1小時,濾過,合并濾液,殘渣加甲醇適量洗涂,濾 過,洗液并入濾液中,蒸干,殘渣加水30ml使溶解,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3~4,加醋酸乙醋振 搖提取5次,每次30ml,合并醋酸乙醋液,蒸干,殘渣加甲醇適量使溶解,轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中, 加甲醇至刻度,搖勻,即得。
[0014] 對照產(chǎn)品供試品溶液的制備取對照的山蠟梅葉片20片,精密稱定,研細,取 1.2g,精密稱定,加甲醇加熱回流2次巧0ml、50ml),每次1小時,濾過,合并濾液,殘渣加甲醇 適量洗涂,濾過,洗液并入濾液中,蒸干,殘渣加水30ml使溶解,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3~4, 加醋酸乙醋振搖提取5次,每次30ml,合并醋酸乙醋液,蒸干,殘渣加甲醇適量使溶解,轉(zhuǎn)移 至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
[0015] 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液、對照產(chǎn)品供試品溶液各扣1,注 入液相色譜儀,測定,即得。
[0016] 3、結(jié)果 結(jié)果表明,本發(fā)明山蠟梅葉片中搬皮素和山奈素的含量為220-36化g /片;而原山蠟梅 葉片中搬皮素和山奈素的含量為3化g /粒,每次服用量3片的搬皮素和山奈素含量為原片 劑6粒含量的3-5倍,在服用量減少的情況下,搬皮素和山奈素含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明,采用本發(fā)明制備方法制備的山蠟梅葉片,有效成分含量遠遠高于 WS-11310 (ZD-1310) -2002標準記載的方法制備的山蠟梅葉片。
【具體實施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作更進一步的說明,W便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解 本發(fā)明,但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于W下的實例,凡基于本發(fā)明上述 內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0019] 實施例1 取山蠟梅葉1500g,加入到C〇2超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑 的體積百分比為5%,萃取壓力25MPa,溫度40°C,C02流量2ml/g生藥· min,萃取時間750min, 得超臨界萃取物,將超臨界萃取物加入淀粉,70%乙醇制顆粒,干燥,壓片,制成500片,每片 重0.35邑。
[0020] 經(jīng)檢測,成品中搬皮素和山奈素的含量為36化g /片。
[0021] 實施例2 取山蠟梅葉1500g,加入到C〇2超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑 的體積百分比為4%,萃取壓力15MPa,溫度30°C,C〇2流量Iml/g生藥· min,萃取時間SOOmin, 得超臨界萃取物,將超臨界萃取物加入淀粉,70%乙醇制顆粒,干燥,壓片,制成500片,每片 重0.35邑。
[0022] 經(jīng)檢測,成品中搬皮素和山奈素的含量為22化g /片。
[0023] 實施例3 取山蠟梅葉1500g,加入到C〇2超臨界萃取器中,乙醇作為夾帶劑,夾帶劑占總萃取溶劑 的體積百分比為6%,萃取壓力30MPa,溫度60°C,C02流量3