自身免疫性疾病的治療的制作方法
【專利說明】
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)
[0002] 本申請(qǐng)要求2013年3月15日提交的美國專利申請(qǐng)No. 61 /800，354的權(quán)益;本申請(qǐng)的 全部教導(dǎo)以引用的方式并入本文中。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 主題技術(shù)總體上涉及用于治療自身免疫性疾病或病癥，特別是導(dǎo)致毛發(fā)脫落如脫 毛癥的自身免疫性疾病或病癥的組合物和方法。
【背景技術(shù)】
[0004] 脫毛癥是毛發(fā)脫落的病癥。脫毛癥中的毛發(fā)的脫落不僅局限于頭發(fā)，而且可發(fā)生 于身體的任何部位。盡管通常不會(huì)危急生命，但由于其外觀相關(guān)問題而伴隨嚴(yán)重的精神損 害，因此期望存在針對(duì)脫毛癥的優(yōu)異預(yù)防劑和治療劑。另外，由于脫毛癥通常伴隨有毛發(fā)顏 色的褪色，因此期望存在針對(duì)伴隨毛發(fā)顏色褪色的脫毛癥的預(yù)防劑和治療劑。此外，由于脫 毛癥通常伴隨諸如毛發(fā)變細(xì)或毛發(fā)變短的發(fā)質(zhì)劣化，因此期望存在針對(duì)發(fā)質(zhì)劣化伴隨的脫 毛癥的預(yù)防劑和治療劑。
[0005] 就脫毛癥的類型而言，存在斑禿癥、雄激素性脫毛癥、絕經(jīng)后脫毛癥、女性型脫毛 癥、皮脂溢性脫毛癥、糠秕性脫毛癥、老年性脫毛癥、癌化療藥物誘發(fā)的脫毛癥、輻射暴露引 起的脫毛癥、拔毛發(fā)癖、廣后脫毛癥等。
[0006] 這些類型的脫毛癥具有相同的毛發(fā)脫落癥狀，但基于不同的原因，因此療法也各 不相同。具體而言，基于雄性激素作用的雄激素性脫毛癥和疑似免疫疾病的斑禿癥是差異 較大的疾病。另外，認(rèn)為產(chǎn)后脫毛癥、女性型脫毛癥、皮脂溢性脫毛癥、糠秕性脫毛癥、老年 性脫毛癥、癌化療藥物誘發(fā)的脫毛癥、輻射暴露引起的脫毛癥具有各自不同的原因，有效的 療法幾乎不存在。
[0007] 斑禿癥是在多數(shù)情況下無任何自覺癥狀或前驅(qū)癥狀等而突然產(chǎn)生硬幣大小的環(huán) 狀至斑狀的輪廓清晰的光禿區(qū)域，這些光禿區(qū)域隨后在未自愈的情況下面積逐漸擴(kuò)大而變 得具有頑固性的脫毛癥。斑禿癥疑為自身免疫性疾病，但其病因尚未揭示，也還未知明確的 治療方法。
[0008] 已知斑禿癥與以下疾病相關(guān)：自身免疫性疾病，例如以橋本氏?。℉ashimoto's di sease)為代表的甲狀腺疾病、白癜風(fēng)、全身性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、或重癥肌無力， 或例如支氣管哮喘、特應(yīng)性皮炎、或變應(yīng)性鼻炎的特應(yīng)性疾病。
[0009] 雄激素性脫毛癥(AGA)是雄性激素作用于雄性激素敏感性毛囊而形成毫毛的脫毛 癥，其發(fā)生于約半數(shù)的男性以及10%_20%的女性中。據(jù)認(rèn)為遺傳傾向性是雄激素性脫毛癥 的重要因素;在男性雄激素性脫毛癥中，額區(qū)和頭頂?shù)念^發(fā)變細(xì)變短二變成毫毛，最終前額 的發(fā)際線后退而頭頂?shù)念^發(fā)消失。另一方面，在女性雄激素性脫毛癥中，通常發(fā)際線不會(huì)改 變，但整個(gè)頭部，特別是頭頂和額區(qū)的毛發(fā)變細(xì)。在男性雄激素性脫毛癥中，非那雄胺 (Finasteride)使得僅約1/4患者得到改善，并且由于禁忌對(duì)女性施用非那雄胺，因此非那 雄胺不可用于女性的雄激素性脫毛癥。
[0010] 產(chǎn)后脫毛癥是通過雌激素而維持生長期的毛發(fā)因分娩而突然進(jìn)入靜止期并且毛 發(fā)脫落增加的脫毛癥。產(chǎn)后脫毛癥的毛發(fā)脫落通常從分娩后大約2個(gè)月開始并且持續(xù)到分 娩后大約6個(gè)月；除非是晚育的情況，否在其通常在1年內(nèi)恢復(fù)，因此在大多數(shù)情況下無需特 殊治療，但是也存在毛發(fā)無法自然恢復(fù)的情況。
[0011] 女性型脫毛癥被認(rèn)為是由于雌性激素的雌激素的量相對(duì)于血流內(nèi)的雄激素的量 減少而產(chǎn)生的脫毛癥。其多在絕經(jīng)后發(fā)生，在該情況下也被稱為絕經(jīng)后脫毛癥。女性型脫毛 癥可通過激素替代療法而得以改善，但在大多情況下是頑固性的。
[0012] 皮脂溢性脫毛癥是由頭皮皮脂分泌過量而引起的毛孔被堵塞從而引起毛孔周圍 或發(fā)根產(chǎn)生炎癥、毛發(fā)掉落的脫毛癥。皮脂溢性脫毛癥可通過利用洗發(fā)去除皮脂而在某種 程度上得以改善，但其容易復(fù)發(fā)并且表現(xiàn)出頑固性。
[0013] 糠批性脫毛癥是頭皮肩堵塞毛孔而引起炎癥所導(dǎo)致的脫毛癥?？放悦撁Y通常 是由過度引起;通過減少洗發(fā)次數(shù)或使用洗滌能力弱的洗發(fā)劑來進(jìn)行緩解，但其容易復(fù)發(fā) 并且具有頑固性。
[0014]拔毛發(fā)癖是由于拔毛發(fā)障礙而導(dǎo)致的脫毛癥。拔毛發(fā)癖是病理性焦慮所導(dǎo)致的癥 狀，可通過行為療法或心理療法進(jìn)行治療。
[0015] 老年性脫毛癥是由于與性別無關(guān)的衰老而使得包括全部頭發(fā)在內(nèi)的全身體毛逐 漸變薄的脫毛癥。這被認(rèn)為是大多數(shù)人群中由于衰老而表現(xiàn)出的自然現(xiàn)象，目前并非需要 特別治療的對(duì)象。然而，期望進(jìn)行改善，因?yàn)殡S著平均壽命的延長，改善老年人生活質(zhì)量的 社會(huì)需求也在增加。
[0016] 癌化療藥物誘發(fā)的脫毛癥是作為癌化療藥物進(jìn)行抗癌治療的副作用的脫毛癥。不 僅包括頭部的毛發(fā)，而且包括眉毛、睫毛、鼻毛、腋下毛和陰毛在內(nèi)的所有區(qū)域的毛發(fā)脫落 會(huì)給患者以沉重的打擊，即便是在事先說明的情況下。由于這還妨礙實(shí)施癌化療，因此對(duì)其 具有高的治療需求。類似地，輻射暴露伴隨的脫毛癥也是在通過抑制細(xì)胞分裂而選擇性地 殺死癌細(xì)胞方面、基于與癌化療藥物誘發(fā)的脫毛癥相同機(jī)理而產(chǎn)生的脫毛癥。因此，可治療 癌的化療伴隨的脫毛癥的藥物也可治療輻射暴露伴隨的脫毛癥。
[0017] 此外，已知諸如抗甲狀腺藥、抗凝血藥、銘、精神藥物或β-阻斷劑的藥物的副反應(yīng) 引起的脫毛癥;真菌類引起的脫毛癥;諸如垂體功能障礙、甲狀腺機(jī)能減退或甲狀腺機(jī)能亢 進(jìn)的內(nèi)分泌素亂引起的脫毛癥;諸如營養(yǎng)失調(diào)、低白蛋白血癥、惡病質(zhì)、缺鐵性貧血、缺梓 癥、高胱氨酸尿癥或肝硬化的代謝紊亂引起的脫毛癥；中毒性脫毛癥;高熱、分娩、大手術(shù)、 體重急劇降低或嚴(yán)重疾病引起的脫毛癥;等等，這些脫毛癥可通過消除各自的病因原因而 得以解決。
[0018] 在這些類型的脫毛癥中，女性型脫毛癥、皮脂溢性脫毛癥和糠秕性脫毛癥可通過 消除各自的病因在某種程度上得以解決，但它們?nèi)菀讖?fù)發(fā)并且具有頑固性。另外，盡管認(rèn)為 女性型脫毛癥的病因與激素平衡有關(guān)，由于激素替代療法的適應(yīng)癥為更年期障礙、骨質(zhì)疏 松癥和高脂血癥，而女性型脫毛癥并非適應(yīng)癥；由于還存在激素替代療法引起致癌的可能 性，因此進(jìn)行激素替代療法的目的并不在于治療女性型脫毛癥。另外，就雄激素性脫毛癥而 言，尚無適當(dāng)?shù)寞煼?，并且就斑禿癥而言，甚至對(duì)其病因也知之甚少。
[0019] 如上所述，在所有的脫毛癥類型中，難以治療的脫毛癥類型為斑禿癥和雄激素性 脫毛癥，并且特別對(duì)于斑禿癥而言，幾乎不存在有效的治療方法。此外，對(duì)于產(chǎn)后脫毛癥、女 性型脫毛癥、糠秕性脫毛癥、老年性脫毛癥和癌化療藥物誘發(fā)的脫毛癥而言，幾乎無任何療 法。
[0020] 需要開發(fā)治療毛發(fā)脫落的治療劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0021] 發(fā)明概述
[0022] 主題技術(shù)總體上涉及治療毛發(fā)脫落或刺激毛發(fā)生長的組合物和方法。
[0023] 發(fā)明詳述
[0024] 1.概述
[0025] 主題技術(shù)總體上涉及治療毛發(fā)脫落或刺激毛發(fā)生長的組合物和方法。
[0026] 如本文所描述和例證，毛發(fā)脫落，例如斑禿癥，是通?？蓺w因于靶向毛囊的自身免 疫性疾病的病癥。通過遞送促凋亡蛋白（例如，至炎癥部位或毛發(fā)脫落部位），通過促凋亡蛋 白誘導(dǎo)毛囊的致耐受性凋亡。因此，產(chǎn)生含自身抗原的雕亡小囊，其轉(zhuǎn)而誘導(dǎo)對(duì)毛囊有特異 性的調(diào)節(jié)反應(yīng)。調(diào)節(jié)反應(yīng)誘導(dǎo)對(duì)自身抗原的免疫耐受性，從而減少攻擊毛囊細(xì)胞的異常自 身免疫反應(yīng)。
[0027] 2.定義
[0028] 除非另外明確指出，本申請(qǐng)中指定的各個(gè)范圍內(nèi)的數(shù)值的使用規(guī)定為近似值，如 同在規(guī)定范圍內(nèi)的最小和最大值前均加上詞"約"一樣。高于和低于規(guī)定范圍的細(xì)微變化可 用于獲得與所述范圍內(nèi)的值基本上相同的結(jié)果。范圍的公開旨在作為包括介于所述最小值 和最大值之間的每個(gè)值的連續(xù)范圍以及可由此類值形成的任何范圍。因此，技術(shù)人員將認(rèn) 識(shí)到許多此類比例、范圍和比例范圍可明確地由本文提出的數(shù)據(jù)和數(shù)字得到并且全部代表 主題技術(shù)的各個(gè)實(shí)施方案。
[0029]正如本領(lǐng)域中的技術(shù)人員關(guān)于本公開將理解的那樣，如本公開中所使用的，術(shù)語 "自身抗原"意指并包括如同在自身免疫反應(yīng)中，刺激自身抗體生成的內(nèi)源性抗原，以及此 類內(nèi)源性抗原的一部分，或引起與完整內(nèi)源性抗原相同的反應(yīng)的經(jīng)修飾內(nèi)源性抗原。例如， 在本公開的上下文中，碳酸酐酶Π 、嗜鉻粒蛋白、膠原蛋白、CYP2D6(細(xì)胞色素 P450、家族2、 亞科Device 400、多肽6)、谷氨酸脫羧酶、分泌型谷氨酸脫羧酶55、hCDRl、HSP60、IA2、IGRP、 胰島素、髓鞘堿性蛋白、hNinein、Ro 60kDa、S0X-10(含基因10的SRY盒）、ZnT8等為自身抗 原。還涵蓋前述自身抗原中任一種的抗原片段。
[0030] 術(shù)語"約"，如此處所使用，指值的+/-5%。
[0031] 術(shù)語蛋白質(zhì)的"功能片段"指為全長蛋白的一部分，并具有基本上相同的生物活 性，或執(zhí)行與全長蛋白基本上相同的功能(例如，執(zhí)行相同酶促反應(yīng))的肽片段。例如，促凋 亡蛋白的功能片段可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
[0032]術(shù)語"高甲基化"（有時(shí)可縮寫為"甲基化"）在關(guān)于DNA使用時(shí)，意指至少約30% (優(yōu) 選至少約35 %、或至少約40 %、或至少約45 %、至少約50 %、至少約55 %、至少約60 %、至少 約65 %、至少約70 % )的CpG二核苷酸被甲基化。例如，其中所有CpG的60 %至90 %被甲基化 的哺乳動(dòng)物DNA是高甲基化的。
[0033]術(shù)語"低甲基化"（有時(shí)縮寫為"未甲基化"）在關(guān)于DNA使用時(shí)，意指約15%或更少 (優(yōu)選約10 %或更少、約7.5 %或更少、約5 %或更少、或約3 %、或約I %或更少）的CpG二核苷 酸被甲基化。例如，其中所有CpG的5 %至15 %被甲基化的細(xì)菌DNA是低甲基化的。
[0034] "甲基化"水平，在關(guān)于DNA使用時(shí)，指DNA分子的總CpG二核苷酸中的甲基化CpG二 核苷酸的百分比。
[0035]術(shù)語"控制"意指"可操作地連接"，指核酸序列在另一核酸片段上的締合，使得一 個(gè)的功能受另一個(gè)的影響。例如，當(dāng)啟動(dòng)子能夠影響編碼序列的表達(dá)時(shí)，則編碼序列受啟動(dòng) 子"控制"（即，編碼序列受啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄控制）。編碼序列可在有義或反義方向上與調(diào)控序 列可操作地連接。
[0036] 3.編碼促凋亡蛋白的多核苷酸
[0037] 在一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種多核苷酸，其包含編碼促凋亡蛋白或其功能片段的 序列，并且其中所述多核苷酸的約30%至約60%的CpG二核苷酸被甲基化。
[0038] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種多核苷酸，其包含編碼促凋亡蛋白或其功能片 段的序列，并且其中所述多核苷酸的CpG二核苷酸的甲基化水平相較于野生型大腸桿菌 (E. coli)基因組中CpG二核苷酸的平均甲基化水平為約2倍至約4倍。
[0039] A.甲基化水平
[0040]脊椎動(dòng)物中DNA甲基化通常在CpG位點(diǎn)發(fā)生。這種甲基化導(dǎo)致胞嘧啶轉(zhuǎn)化為5-甲基 胞嘧啶。Me-CpG的形成受到酶DNA甲基轉(zhuǎn)移酶催化。在哺乳動(dòng)物中所有CpG的60%至90%被 甲基化。人類DNA的約80 % -90 %的CpG位點(diǎn)被甲基化。
[00411細(xì)菌DNA與哺乳動(dòng)物DNA相比含有低水平的甲基化CpG二核苷酸。哺乳動(dòng)物免疫系 統(tǒng)利用這種細(xì)菌DNA特征作為鑒別外源