一種越橘葉提取物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物提取物領(lǐng)域，具體涉及一種越橘葉提取物及其制備方法和醫(yī)藥用 途。
【背景技術(shù)】
[0002] 越橘葉為杜鵑花科植物越橘的葉。6月間開花時(shí)采葉，曬干，貯干燥處。又名熊果 葉（《新疆中草藥手冊(cè)》）。
[0003]原植物越橘，又名溫普（《盛京通志》)、紅豆、牙疙瘩，為常綠矮小灌木，高10~12厘米。莖直立，小枝細(xì)，灰褐色。單葉互生，革質(zhì)，橢圓形或倒卵形，長(zhǎng)1~2厘米，寬6~ 10毫米，先端圓鈍，基部楔形，全緣或近全緣，葉緣有細(xì)毛，上面暗綠色，下面淡綠，有腺點(diǎn)； 葉柄長(zhǎng)0. 5~3毫米，有白毛短總狀花序，生花數(shù)朵；萼短鐘狀，4裂；花冠鐘形，長(zhǎng)4~6毫 米，白色或帶粉紅色，裂片4,廣卵形；雄蕊8,花絲有毛；花柱絲狀，超出于花冠外。漿果近 球形，熟時(shí)橘紅色，徑5~7毫米?；ㄆ?~7月。果期8月。生于高山針葉林下或灌木叢 中。分布吉林、黑龍江、內(nèi)蒙古、新疆等地。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種越橘葉提取物，該提取物的制備方法和液相分析方 法，含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備抗抑郁的藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種越橘葉提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的越橘葉80~90份和干燥的黨參10~20 份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；（c)對(duì)步驟 (b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸 乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20~30%乙醇沖洗 7~9個(gè)柱體積除去多糖，再用55~65%乙醇洗脫9~11個(gè)柱體積，收集55~65%乙醇 洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。
[0008] 進(jìn)一步地，步驟（d)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。
[0009] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為65~75%。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70%。
[0011] 進(jìn)一步地，步驟（d)為用正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè) 柱體積除去多糖，再用60 %乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集60 %乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干 燥。
[0012] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次藥材制備的越橘葉提取物 批間差異，所述提取物的液相分析方法為：
[0013] 色譜柱：AgilentZorbaxSBC18 柱（4. 6mmX250mm，5μm);
[0014] 流動(dòng)相：A為乙腈，B為0. 1%磷酸水溶液；
[0015] 梯度洗脫程序：0 ~14min，A25 % ~35 % ;14 ~20min，A35 % ~50 % ;20 ~ 32min，A50% ;32 ~35min，A50%~25% ;35 ~40min，A25% ;
[0016] 流動(dòng)相流速：1.OmL·minS
[0017] 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm;
[0018] 柱溫：30Γ;
[0019] 進(jìn)樣量：10μL。
[0020] 藥物制劑，含有治療有效量的所述越橘葉提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0021 ] 所述的越橘葉提取物在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。
[0022] 所述的藥物制劑在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。
[0023] 本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0024] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明越橘葉提取物，其余為藥物學(xué)上可接受 的、對(duì)人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0025] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0026] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過對(duì)越橘葉藥材進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到抗抑 郁的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜，用于控制不 同批次藥材制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0027] 圖1為越橘葉提取物HPLC液相圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0029] 實(shí)施例1 :越橘葉提取物制備
[0030] 藥材來源：越橘葉和黨參購自亳州中藥材市場(chǎng)。經(jīng)鑒定越橘葉為杜鵑花科植物越 橘的葉。
[0031] 主要試劑：食品級(jí)乙醇購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級(jí)AB-8大孔樹脂購 自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級(jí)，購于TEDIA;85 %磷酸為HPLC級(jí)，購于TEDIA; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0032] 將8. 5kg干燥的越橘葉和1. 5kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液^L);對(duì)濃縮液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂 (2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫10個(gè)柱 體積（15L)，收集60 %洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得越橘葉提取物浸膏粉約155g。
[0033] 實(shí)施例2 :越橘葉提取物②制備（80份越橘葉，20份黨參）
[0034] 制備方法：將8. 0kg干燥的越橘葉和2. 0kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個(gè)柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得越橘葉提取物浸膏粉約155g。
[0035] 實(shí)施例3 :越橘葉提取物③制備（90份越橘葉，10份黨參）
[0036] 制備方法：將9. 0kg干燥的越橘葉和1. 0kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用25%乙醇沖洗8個(gè)柱體積（12L)，再用60%乙醇洗脫 10個(gè)柱體積（15L)，收集60%洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得越橘葉提取物浸膏粉約155g。
[0037] 實(shí)施例4 :越橘葉提取物④制備（75份越橘葉，25份黨參）
[0038] 制備方法：將7. 5kg干燥的越橘葉和2. 5kg干燥黨參混合粉碎，用70%乙醇熱回 流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液（6L);對(duì)濃縮液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大 孔樹脂（2kg，柱體積1. 5L)富集，先用2