] 上述中藥組合物的制備:將上述重量的牡蠣、海帶、桃仁、赤小豆、薏苡仁清洗、干 燥、粉碎、混合后,加入混合物六倍量的水,并調節(jié)其PH值為5,于50°C浸提三小時得過濾 液,濃縮至過濾液體積的二分之一得濃縮液,將上述重量的川芎油溶解于濃縮液中即得本 發(fā)明中藥組合物bl。
[0043] 實施例3
[0044] 本實施例一種包含川芎油的中藥組合物,其包括下述重量的原料:牡蠣45g、海帶 35g、桃仁35g、赤小豆25g、薏該仁25g、川考油6g。
[0045] 上述中藥組合物的制備:將上述重量的牡蠣、海帶、桃仁、赤小豆、薏苡仁清洗、干 燥、粉碎、混合后,加入混合物六倍量的水,并調節(jié)其PH值為6,于50°C浸提三小時得過濾 液,濃縮至過濾液體積的二分之一得濃縮液,將上述重量的川芎油溶解于濃縮液中即得本 發(fā)明中藥組合物cl。
[0046] 對比例1
[0047] 本對比例中藥組合物,其包括下述重量的原料:牡_36g、海帶22g、桃仁22g、赤小 豆15g、薏該仁15g、川考油3g。
[0048] 上述中藥組合物的制備:將上述重量的牡蠣、海帶、桃仁、赤小豆、薏苡仁清洗、干 燥、粉碎、混合后,加入混合物六倍量的水,并調節(jié)其PH值為8,于50°C浸提三小時得過濾 液,濃縮至過濾液體積的二分之一得濃縮液,將上述重量的川芎油溶解于濃縮液中即得中 藥組合物a2。
[0049] 對比例2
[0050] 本對比例中藥組合物,其包括下述重量的原料:牡 20g、海帶19g、桃仁6g、赤小 豆8g、薏該仁8g、川考油lg。
[0051] 上述中藥組合物的制備:將上述重量的牡蠣、海帶、桃仁、赤小豆、薏苡仁清洗、干 燥、粉碎、混合后,加入混合物六倍量的水,并調節(jié)其PH值為5,于50°C浸提三小時得過濾 液,濃縮至過濾液體積的二分之一得濃縮液,將上述重量的川芎油溶解于濃縮液中即得中 藥組合物a3。
[0052] 對比例3
[0053] 本對比例中藥組合物,其包括下述重量的原料:牡 46g、海帶25g、桃仁39g、赤小 豆30g、薏該仁30g、川考油9g。
[0054] 上述中藥組合物的制備:將上述重量的牡蠣、海帶、桃仁、赤小豆、薏苡仁清洗、干 燥、粉碎、混合后,加入混合物六倍量的水,并調節(jié)其PH值為6,于50°C浸提三小時得過濾 液,濃縮至過濾液體積的二分之一得濃縮液,將上述重量的川芎油溶解于濃縮液中即得中 藥組合物c2。
[0055] 對比例4
[0056] 本對比例中藥組合物,其包括下述重量的原料:牡_36g、海帶22g、桃仁22g、赤小 豆15g、薏該仁15g。
[0057] 上述中藥組合物的制備:將上述重量的牡蠣、海帶、桃仁、赤小豆、薏苡仁清洗、干 燥、粉碎、混合后,加入混合物六倍量的水,并調節(jié)其PH值為5,于50°C浸提三小時得過濾 液,濃縮至過濾液體積的二分之一即得中藥組合物a4。
[0058] 實施例4去繭膏的制備
[0059] 將實施例1-3所制得的中藥組合物:al、bl、cl和和對比例1-4所制得的中藥組合 物:a2、a3、c2、a4制備成去繭膏,分別編號為M、N、0、P、Q、R、S,M0、N0、00為空白對照組, 相應去繭膏的組成及其重量百分比見表1-表4。
[0060] 表1去繭膏Μ的組成及其重量百分比
[0063] 表2去繭膏P、Q、R、S的組成及其重量百分比
[0064]
[0072] 上述表1-表4去繭膏按照現(xiàn)有技術膏霜的制備方法制備即可。
[0073] 實施例5本發(fā)明組方中川芎油的促透效果評價
[0074] 一、實驗目的
[0075] 通過對比分析評價本發(fā)明組方中川芎油的促透作用。
[0076] 二、實驗方法
[0077] 1、實驗材料和儀器
[0078] 樣品和試劑:本發(fā)明組方中的川芎油、氮酮、氫氧化鈉(分析純);
[0079] 儀器:756型紫外分光光度計(上海第三分析儀器廠);ZD85型氣浴恒溫振蕩器 (常州市國華儀器廠);
[0080] 動物:昆明種小白鼠,體重為20~24g,雄性,普通級,由廣州醫(yī)科大學實驗動物中 心提供。
[0081] 2、實驗步驟
[0082] (1)離體鼠皮的制備:用自制的脫毛劑去小鼠腹部的毛清水洗凈皮膚表面,繼續(xù) 飼養(yǎng),24h后處死小鼠,剝取腹部皮膚,剪除損傷的皮膚,去掉皮下脂肪,置一 40°C保存?zhèn)?用;
[0083] (2)釋放液的制備:對比例4所制得的中藥組合物a4,用50%的乙醇溶解成1 %的 溶液;接收液的制備:用〇. lmol/L的氫氧化鈉為接收液;
[0084] (3)取上述鼠皮,常溫下解凍,在透皮裝置上進行試驗,釋放
[0085] 液用量為1ml,接收液為10ml,擴散面積為0. 5cm2,試驗溫度為37±0. 5°C,每次取 液lml,同時補加 lmlO. lmol/L的NaOH液,在300nm波長處測量吸收度,用吸收系數(shù)(E^) 為260求出各個取樣時間的藥物濃度;
[0086] (4)實驗結果處理:因接收室內連續(xù)取樣,并每次補加新的NaOH液,測得數(shù)值較真 值為小,故按下式進行校正:
[0087] Dn= VCn' = VCn+V' Σ n JCn !
[0088] 式中D#校正后接收池中中藥組合物a4的量,Cn'為第n次樣品的校正濃度 (mg · ml Cn為第η次樣品的實測濃度,V為接收室內溶液的體積,V'為每次取樣量。
[0089] 三、實驗結果
[0090] 表5不同釋放液中中藥組合物a4滲透系數(shù)
[0091]
[0092] 與 A 組比較:*P < 0· 05*1 P < 0· 01
[0093] 結果分析:由表5可知,本發(fā)明組方中的川芎油隨著用量增加,促透作用明顯增強 (P < 0. 05),但當川芎油的用量超過6g時,即用量為8g時,其促透作用反而下降;當本發(fā)明 組方中的川芎油與氮酮的用量皆為3g時,促透作用無明顯差異,但當本發(fā)明組方中的川芎 油與氮酮的用量皆為6g時,氮酮的促透作用明顯低于本發(fā)明組方中的川芎油的促透作用, 由此說明本發(fā)明組方中的川芎油對重要組合物a4的促透作用比氮酮強,且當本發(fā)明組方 中的川芎油用量范圍不在本發(fā)明特定范圍內時,促透效果顯著下降,綜上本發(fā)明中藥組合 物中具有特定配比的川芎油對方中有效成分具有促進皮膚吸收的作用,本發(fā)明中藥組合物 易被皮膚吸收。
[0094] 實施例6安全性評價
[0095] 一、實驗目的
[0096] 通過對比分析評價實施例所制得的中藥組合物的安全性。
[0097] 二、實驗方法--紅細胞溶血實驗
[0098]實驗方法參照ECVAM-DB-ALM :INVITT0X protocol :Red Blood Cell Test System INVITT0X Test System的基本原理:如果原料對血紅細胞細胞膜有刺激,會使血 紅細胞細胞膜破裂,產生一定程度的溶血現(xiàn)象。因此,在530nm下測量吸光度,吸光度越大, 說明細胞溶血率越高,原料的刺激性越強。
[0099] 1、實驗樣品:實施例1-3制得的泡腳液al、b2、c3 ;
[0100] 2、實驗試劑:Na2HP04、KH2P0 4、NaCl、葡萄糖、檸檬酸三鈉、檸檬酸、十二烷基硫酸鈉 (SDS)、雞血,以上試劑均購自購自廣州化學試劑公司,雞血為市售產品;
[0101] 3、試劑配制
[0102] 磷酸鹽緩沖液(PBS):精密稱取 Na2HP0415 . 90 2g,ΚΗ2Ρ041· 524g,NaCl 14. 426g, C6H206 ·Η20 3. 963g,置于2L的容量瓶中,加超純水溶解,定容至刻度線,得PBS'溶液。磷酸 鹽緩沖液(PBS)pH = 7.4,在4°C下儲存,一周內用完;
[0103] 檸檬酸:按照檸檬酸三鈉:梓檬酸=66:44mmol/L的比例,精密稱取檸檬酸三鈉 9. 7053g,檸檬酸4. 6231g,置于500mL的容量瓶中,加超純水溶解,定容至刻度線,在每次屠 宰場取血前配制;
[0104] 標準表面活性劑溶液:精密稱取十二烷基硫酸鈉(SDS) 0. 5g,置于500mL的容量瓶 中,加 PBS緩沖液溶解,定容至刻度線,濃度為lg/L,配制成0. 1%濃度的SDS ·溶液,用于測 試SDS溶血標準曲線;
[0105] 所測試樣品:在pH控制下,精密稱取原料0. 05g,置于50mL的容量瓶中,加 PBS溶 解,定容至刻度線,配制成濃度為0. 1 %的測試原料樣品,即lg/L ;
[0106] 血紅細胞(RBC)的準備和儲存:屠宰場取新鮮三黃雞血10mL,盛裝于聚乙烯塑料 容器中,與5mL檸檬酸緩沖液混勻。立即將混勻血樣保溫于保溫箱中,溫度為21-22Γ。30 分鐘內運于實驗室,若血樣沒有受到污染,時間可延長至1小時。
[0107] RBC 的分離:
[0108] ①用10mL聚乙稀無