一種治療肺纖維化的中藥組合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物及其制備方法，以及其治療肺纖維化等疾病的應(yīng) 用，屬于中藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 肺臟間質(zhì)組織由膠原蛋白、彈性素及蛋白聚糖構(gòu)成，膠原蛋白是肺組織中的主要 的細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix,ECM)蛋白，肺臟中的膠原蛋白與其他類型ECM成 分構(gòu)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，成為肺組織結(jié)構(gòu)的主要骨架，這些蛋白成分保持肺組織結(jié)構(gòu)的完整 性。并對(duì)維持肺上皮及內(nèi)皮細(xì)胞分化狀態(tài)起著十分重要的作用。當(dāng)肺纖維母細(xì)胞受到化學(xué) 性（例如博來霉素、變態(tài)源）或物理性（例如粉塵、放射線）傷害時(shí)，會(huì)分泌膠原蛋白進(jìn)行 肺間質(zhì)組織的修補(bǔ)，進(jìn)而造成肺臟纖維化。特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化（idiopathicpulmonary fibrosis，IPF)的基本過程是：肺臟早期損傷之后有肺泡炎，肺泡內(nèi)有漿液和細(xì)胞成分，肺 間質(zhì)內(nèi)有大量單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、肺泡巨噬細(xì)胞等炎癥免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，多種細(xì)胞 因子分泌，此時(shí)肺泡結(jié)構(gòu)尚完整，隨著炎癥免疫反應(yīng)的進(jìn)展，促纖維化因子生成增多或抗纖 維化因子產(chǎn)生相對(duì)不足，炎癥和異常修復(fù)導(dǎo)致肺間質(zhì)細(xì)胞增殖，導(dǎo)致肺纖維化過程的ECM 代謝異常，產(chǎn)生大量的ECM蛋白；進(jìn)入晚期，肺泡結(jié)構(gòu)為堅(jiān)實(shí)的膠原代替，肺泡壁、氣道和 血管最終纖維化，成纖維細(xì)胞、膠原等ECM分布在肺間質(zhì)中，肺泡上皮化生為鱗狀上皮，纖 維化肺最終形成；臨床表現(xiàn)為患者呼吸困難、呼吸衰竭而死亡。肺間質(zhì)纖維化的形成中有 炎癥免疫反應(yīng)參與，因此糖皮質(zhì)激素（如潑尼松）和免疫抑制劑（如環(huán)磷酰胺）是傳統(tǒng) 治療肺纖維化的藥物，截至目前，國際唯一得到普遍認(rèn)可且在部分國家獲批的是吡非尼酮 (prifenidone)。但化學(xué)藥物對(duì)肺纖維化的治療存在諸多副作用，它們可以抑制炎癥反應(yīng)和 免疫過程，減輕肺泡炎癥，從而延緩肺纖維化的進(jìn)程，但是由于其不良反應(yīng)，尋找新型的抗 肺纖維化藥物一直是藥學(xué)研究的重要課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物方劑，由當(dāng)歸、苦參和甘草組成，治療效果顯著，glj 作用小，安全可靠。
[0004] 甘草為豆科植物甘草（GlycyrrhizauralensisFisch.)、脹果甘草 (GlycyrrhizainflataBat.)或光果甘草（GlycyrrhizaglabralL.)的干燥根和根莖。具 有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛的功效。它的主要活性成分為甘草甜素，一種三 萜類化合物，具有抗病毒、抗炎癥、抗腫瘤、護(hù)肝解毒、調(diào)節(jié)免疫功能的作用，有利于肝炎、支 氣管炎等疾病的治療。
[0005] 苦參為豆科植物苦參（SophoraflavescensAit.)的干燥根。具有清熱燥濕，殺 蟲，利尿的功效。其中苦參堿是它的主要活性成分，臨床藥理發(fā)現(xiàn)它具有抗感染，免疫調(diào)節(jié)， 對(duì)肺部疾病具有調(diào)理改善的作用。
[0006] 當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸（Angelicasinensis(Oliv. )Diels.)的干燥根。具有補(bǔ) 血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便的作用。
[0007] 本發(fā)明提供了一種治療肺纖維化的中藥組合物配方，由當(dāng)歸、苦參和甘草組成，治 療效果顯著，副作用小，安全可靠。該組合物由以下原料藥組成：當(dāng)歸1-20重量份，苦參 1-10重量份，甘草5重量份。
[0008] 發(fā)明人在前期研究中發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)使用甘草、苦參、當(dāng)歸時(shí)，又或兩兩組合使用，對(duì)肺 纖維化疾病有些許改善作用，為了獲得具有臨床高效的中藥復(fù)合型組合物，并選擇國際認(rèn) 可的化藥吡非尼酮（prifenidone)作為陽性對(duì)照，進(jìn)行大量藥理、藥效學(xué)篩選，研究發(fā)現(xiàn)三 種中藥的特定比例組合物，對(duì)小鼠肺纖維化模型治療效果極其顯著，優(yōu)于吡非尼酮。這一突 破性研究成果滿足了臨床上對(duì)于創(chuàng)新性中藥組合物的需求，對(duì)治療肺纖維領(lǐng)域藥物領(lǐng)域具 有里程碑式意義。
[0009] 優(yōu)選的是，該配方的原料藥組成：當(dāng)歸5-15重量份，苦參3-7重量份，甘草5重量 份。這種重量比下，治療藥效得到進(jìn)一步改善。進(jìn)一步的發(fā)現(xiàn)在配方為苦參，甘草，當(dāng)歸的 重量比為1:1:2。效果趨于穩(wěn)定，并且藥物效果也有進(jìn)一步的提高。
[0010] 在本發(fā)明的研制過程中，發(fā)明人在現(xiàn)有技術(shù)和經(jīng)過大量摸索篩選的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的基 礎(chǔ)上，總結(jié)發(fā)現(xiàn)，甘草中的甘草甜素在抗肺纖維化疾病治療方面有著廣闊的應(yīng)用前景。甘 草甜素可通過多種機(jī)制逆轉(zhuǎn)肺纖維化，如降低肺組織TGF-β1表達(dá)和血清IL-4含量，上調(diào) IFN-γ表達(dá)，提高血清IFN-γ含量，從而減輕肺纖維化程度。
[0011] 發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，苦參中的苦參堿為主要有效成分，藥理研究發(fā)現(xiàn)苦參堿在具有抗 感染，免疫調(diào)節(jié)，抗心律失常，降壓，抗腫瘤抗過敏，抗病毒的作用的同時(shí)，還具有抗纖維化 的作用，而且實(shí)驗(yàn)表明，苦參堿對(duì)肺纖維化有明確的治療作用，其能減輕博來霉素誘導(dǎo)的大 鼠肺纖維化模型的肺泡炎和肺纖維化程度，并具有劑量依賴性，其作用機(jī)制可能是通過調(diào) 控Nrf2的表達(dá)，間接調(diào)控內(nèi)源性抗氧化酶γ-GCS的表達(dá)。
[0012] 發(fā)明人觀察當(dāng)歸對(duì)博來霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化程度的影響及對(duì)肺間質(zhì)成纖維 細(xì)胞的影響中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸可能通過降低纖維化肺組織中CTGFmRNA水平，間接地抑制成纖維 細(xì)胞的增殖分化，減輕纖維化程度。
[0013] 發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，苦參堿與甘草酸聯(lián)合用藥對(duì)肝纖維化具有較好療效，優(yōu)于 單獨(dú)使用甘草或苦參，分析機(jī)理可能是，苦參堿聯(lián)合甘草酸二胺注射液可升高血清IFN-γ 含量，抑制肝纖維化，同時(shí)還可抑制病毒復(fù)制，促進(jìn)HBV復(fù)制標(biāo)志物陰轉(zhuǎn)，降低轉(zhuǎn)氨酶，改善 肝功能。
[0014] 苦參、甘草及當(dāng)歸三味藥都具有良好的抗肺纖維化作用，但是發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)甘 草、苦參和當(dāng)歸三者聯(lián)合使用時(shí)，具有更好的抗纖維化作用，其抗纖維化的作用明顯優(yōu)于 單獨(dú)使用甘草、苦參或當(dāng)歸，也明顯優(yōu)于這三味藥的任意兩味的組合，例如，藥理藥效學(xué) 實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明的組合物，無論哪種劑型，抗肺纖維化的效果都優(yōu)于甘草和苦參組合的 苦參甘草湯，也優(yōu)于當(dāng)歸和苦參組合的當(dāng)歸苦參丸，發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的藥物 組合物，其對(duì)小鼠肺纖維化模型具有令人驚喜的療效，效果甚至顯著優(yōu)于西藥吡非尼酮 (prifenidone)〇
[0015] 根據(jù)臨床使用的需求，該中藥配方將進(jìn)一步制備成中藥制劑，不僅便于服用和攜 帶，還保證了服用的藥物質(zhì)量穩(wěn)定，滿足不同的臨床病癥需求。根據(jù)目前藥品制劑技術(shù)現(xiàn) 狀和發(fā)展趨勢(shì)，本配方可以被制成顆粒劑、片劑、硬膠囊、軟膠囊、丸劑、口服液、滴丸或者糖 漿。
[0016] 首先需要對(duì)該中藥組合物進(jìn)行工業(yè)提取制備，本發(fā)明提供了一種制備方法，包括 以下步驟：
[0017] 1)稱取原料藥；
[0018] 2)將1-20重量份的當(dāng)歸用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油備用，然后將殘留當(dāng)歸水液 減壓濃縮干燥，得浸膏；
[0019] 3)將上述當(dāng)歸藥渣和其浸膏，1-10重量份苦參，1-15重量份的甘草混合，再用 30% -85%的乙醇回流提取，減壓濃縮得浸膏，噴霧干燥得干粉；
[0020] 4)將提取的揮發(fā)油與干粉均勻混合，得藥粉。
[0021] 為了進(jìn)一步提高中藥組合物的制備得率，本發(fā)明還提供了更優(yōu)選的方法，包括以 下步驟：
[0022] 1)稱取原料藥當(dāng)歸、苦參、甘草，預(yù)先粉碎；
[0023] 2)將1-20重量份的當(dāng)歸用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油備用，然后將殘留當(dāng)歸水液 減壓濃縮干燥，得浸膏；
[0024] 3)將上述當(dāng)歸藥渣和其浸膏，1-10重量份苦參，1-15重量份的甘草混合，用 50% -70%的乙醇回流提取，提取3次，每次1小時(shí)，料液比為1:10:8:8,減壓濃縮得浸膏；
[0025] 4)步驟3)濃縮浸膏至相對(duì)密度為1. 10-1. 35。
[0026] 通過上述方法，可以更充分提取原料藥中的有效成分，提高得率，減少原料藥材的 浪費(fèi)。
[0027] 與此同時(shí)，本發(fā)明可將該提取出來的中藥化合物活性成分制成相應(yīng)的中藥制劑， 當(dāng)所述中藥制劑為硬膠囊時(shí)，包括以下步驟：
[0028] 在上述步驟4)之后，還包括以下步驟：
[0029]a)取環(huán)狀糊精（β-CD) 8.0g，加水60mL，加熱至40°C，于40kHz超聲波下緩慢滴加 上述當(dāng)歸揮發(fā)油溶液（1:1) 1.OmL，超聲60min，包合完成后置于冰箱冷藏24h，抽濾，加入少 量石油醚洗去未包合的揮發(fā)油，低溫真空干燥4h，得白色塊狀包合物，研細(xì)，過篩即得環(huán)狀 糊精當(dāng)歸揮發(fā)油包合物；
[0030]b)將提取藥粉L2份，0.36份包合物，加入微晶纖維素和微粉硅膠（比例為 1:1) 0. 4份，混勻，用90%乙醇制粒，干燥，裝入硬質(zhì)空心膠囊。制得該中藥組合物的硬膠囊 制劑；
[0031] 制劑為中藥組合物的劑型為軟膠囊，包括以下步驟：
[0032] 在所述的步驟