一種組合物及其在抗急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 痛風(fēng)（gouty)，又稱痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（goutyarthritis)，是體內(nèi)噪呤代謝紊亂所致 的疾病，表現(xiàn)為血中尿酸過多，易于使尿酸鹽（MSU)在關(guān)節(jié)等組織析出結(jié)晶。痛風(fēng)的急性發(fā) 作是由于沉積在關(guān)節(jié)的MSU引起中性粒細(xì)胞局部浸潤和炎性反應(yīng)。
[0003] 西藥在痛風(fēng)急性發(fā)作期選用三種藥：秋水仙堿、非留體抗炎藥和腎上腺皮質(zhì)激素。 秋水仙堿的作用機(jī)制是與中性粒細(xì)胞的微管蛋白結(jié)合，從而妨礙粒細(xì)胞的活動(dòng)，抑制粒細(xì) 胞浸潤。非留體抗炎藥如吲哚美辛，抑制環(huán)氧酶（C0X)活性而發(fā)揮抗炎作用，以及選擇性 C0X2抑制藥。它們雖然消炎止痛作用快，但毒副作用也相當(dāng)明顯，如秋水仙堿的有效劑量與 產(chǎn)生腹瀉等胃腸道癥狀的劑量相近，非留體抗炎藥在有活動(dòng)性消化性潰瘍、胃腸道出血情 況下絕對禁用，而保泰松用藥短至3周也可致嚴(yán)重的粒細(xì)胞減少癥或再生障礙性貧血。
[0004] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0005] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（AyumiOhsakietal.，2011. SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfromSalviaprzewalskii. TetrahedronLetters52(2011) 1375 - 1377)的化合物，我們對化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾， 獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合 物并對該組合物抗抗急性痛風(fēng)活性進(jìn)行了評價(jià)，其具有抗急性痛風(fēng)活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為20%和80%。
[0007]
[0008] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0009] 本發(fā)明用尿酸鈉（MSU)致人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)損傷的急性痛風(fēng)模型評價(jià)顯 示，本發(fā)明組合物對MSU致HUVEC損傷具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)，可用于制備治療 急性痛風(fēng)炎癥藥物。本發(fā)明的目的在于提供本發(fā)明組合物在醫(yī)學(xué)中的新用途，具體地說是 涉及本發(fā)明組合物在制備治療急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明的目的是通過以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：
[0011]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理研究說明，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是MSU引起中性粒細(xì)胞局部浸潤 和炎性反應(yīng)，急性痛風(fēng)產(chǎn)生的本質(zhì)是中性粒細(xì)胞（PMN)-血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)黏 連增強(qiáng)(TerkeltaubR，etal.Themurinehomologoftheinterleukin-8 receptorcxcr-2isessentialfortheoccurrenceofneutrophilicinflammation inairpouchmodelofacuteuratecrystal-inducedgoutysynovitis.Arthritis Rheum, 1998, 41 (5) :900-909.)，HUVEC損傷，其分子生物學(xué)基礎(chǔ)在于PMN與HUVEC表面黏 附分子的相互作用(FujiwaraY,etal.Interleukin_8stimulatesleukocytemigration acrossamonolayerofculturedrabbitNF_a，IL-1β，IL-8,andIL-1rainMonosodium UrateCrystalinducedrabbitarthritis.Labinvest, 19998, 78 (5): 559-569·)，其中細(xì) 胞間黏附分子-l(ICAM-l)與粘附功能關(guān)系最密切，是急性痛風(fēng)炎癥的重要指標(biāo)之一（張 春，唐怡，劉軍，等.痛風(fēng)靈方對尿酸鈉致大鼠模型關(guān)節(jié)軟組織ICAM-1表達(dá)的影響，重慶醫(yī) 學(xué)，2002, 31 (12) :1211-1213.)。
[0012] 因此，針對急性痛風(fēng)MSU致HUVEC損傷，ICAM-1表達(dá)增多的病理特征，本發(fā)明用 MSU致HUVEC損傷的體外急性痛風(fēng)模型（楊妍華，尹蓮，王明艷，等.尿酸鈉誘導(dǎo)HUVEC損傷 的急性痛風(fēng)模型研究，中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010, 28(3) :592-594.)，評價(jià)本發(fā)明組合物抗急性 痛風(fēng)炎癥活性。MSU致人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)損傷的急性痛風(fēng)模型評價(jià)顯示，本發(fā)明組合 物對MSU致HUVEC損傷具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)。
[0013] 有益效果
[0014] 研究結(jié)果表明，用MSU致HUVEC損傷的急性痛風(fēng)模型評價(jià)顯示，本發(fā)明組合物可保 護(hù)MSU致HUVEC損傷，減少細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞活性，抑制ICAM-1表達(dá)，具有抗急性痛風(fēng)炎 癥的活性，本發(fā)明組合物可用于制備治療急性痛風(fēng)炎癥藥物。
[0015] 以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 實(shí)施例1化合物SalviskinoneA的制備
[0017] 化合物Salviskinone A(I)的制備方法參照Ayumi Ohsaki等人發(fā)表的文獻(xiàn) (Ayumi Ohsaki et al., 2011.Salviskinone A, a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii. Tetrahedron Letters52 (2011) 1375 - 1377)的方法。
[0018]
[0019] 實(shí)施例2SalviskinoneA的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0020] 將化合物I(312mg，1.OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（3. 760g，20.OOmmol)和6mL的50 %氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5 攝氏度攪拌12h。12h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相 溶液。然后對有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌4次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動(dòng)相為：石油醚/丙酮 =100:1.5,v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末（327mg， 78% ) 〇
[0021] 4匪1?(5001抱，0150-(16)5 6.63(8，1!1)，6.37(8，1!1)，5.81(8，1!1)，4.51(8,2!1)，3· 84 (s, 1H), 3. 79 (s, 2H), 2. 15 (s, 1H), 2. 04 (s, 1H) ,1-91 (s, 1H), 1. 65 (s, 1H), 1. 39 (s, 3H), 1. 08 (s, 6H), 0. 99 (s, 6H).
[0022] 13C NMR (125MHz, DMS0-d6) δ 188. 07 (s)，183. 70 (s)，154. 38 (s)，147. 57 (s)，140. 2 1 (s), 136. 40 (s), 134. 71 (s), 131. 25 (s), 128. 40 (s), 118. 83 (s), 72. 12 (s), 45. 49 (s), 37. 5 4 (s),33. 58 (s),31. 78 (s),26. 17 (s),25. 12 (s),24. 66 (s),23. 51 (s),23. 17 (s),22. 65 (s).
[0023] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for C22H28Br03:4 1 9. 12 2 2 ；found 419. 1220.
[0024]
[0025] 實(shí)施例3SalviskinoneA的0-(四氫吡咯基）乙基衍生物（III)的合成
[0026] 將化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于20mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀 (34511^，2.5_31)，碘化鉀（8411^，0.5_31)和吡略燒（142〇11^，20_31)，混合物加熱回流 8h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取3次，合并有機(jī)相。依次用水和 飽和食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗 品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動(dòng)相為：石油醚/丙酮=100:1. 0,v/V)，收集棕色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的黃色粉末（131. 6mg，65% )。
[0027] 4 NMR (500MHz，DMS0-d6) δ 6. 57 (s，1H)，6. 29 (s，1H)，5. 82 (s，1H)，4. 25 (s，2H)，3. 86 (s, 1H), 3. 10 (s, 2H), 2. 55 (s, 4H), 2. 16 (s, 1H), 2. 07 (s, 1H), 1. 893 (s, 1H), 1. 73 (s, 4H), 1 .70 (s, 1H), 1. 38 (s, 3H), 1. 09 (s, 6H), 1. 02 (s, 6H).
[0028] 13CMMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.10(s)，183.71(s)，154.37(s)，147.57(s)，140· 19 (s), 136. 41 (s),