雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物在制備抗補體藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬中藥制藥領(lǐng)域，涉及紫花地丁中雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物在制備抗 補體藥物中的新用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 報道顯示，系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性呼吸窘迫綜合征等多種重大疾 病起因為補體系統(tǒng)的過度激活所引發(fā)?？寡a體藥物研究多年來一直是世界藥學(xué)研究的熱 點和重點之一，然而目前對此類疾病尚缺乏較為理想的治療藥物，因此臨床上急需高效、低 毒、專一的新型補體抑制劑。從天然產(chǎn)物中研究開發(fā)補體抑制劑是近年來一個受到越來越 多關(guān)注的重要研究領(lǐng)域，其具有成本低、毒性低等特點。國內(nèi)外學(xué)者已從包括海洋生物等在 內(nèi)的多種天然產(chǎn)物中分離得到大量具有補體系統(tǒng)抑制作用的單體化合物，為抗補體藥物的 研究與開發(fā)提供了廣闊的前景。
[0003] 中藥紫花地丁為堇菜科植物紫花地?。╒iolayedoensisMakino)的干燥全草。其 性苦、辛、寒；歸心、肝經(jīng)；具有清熱解毒，涼血消腫的功效；用于黃疸內(nèi)熱、疔瘡腫毒、喉痹 腫痛等癥的治療。前人對紫花地丁的藥理研究僅集中在抗病毒和抗菌等方面，化學(xué)成分研 究發(fā)現(xiàn)了一些黃酮類、香豆素類、生物堿類和環(huán)肽類化合物，但迄今為止，尚未見有關(guān)雙環(huán) 吉馬烷型倍半萜類化合物具有補體抑制作用的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供新的具有抗補體活性的物質(zhì)，具體涉及紫花地丁中 雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物，尤其是紫花地丁中雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物 isobicyclogermacrenal(1)和madolinY(2)〇
[0005]本發(fā)明的進一步目的是提供上述紫花地丁中雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物在制 備抗補體藥物中的用途。
[0006]本發(fā)明應(yīng)用現(xiàn)代藥理篩選方法，對分離得到的物質(zhì)進行抗補體活性評價研究。從 紫花地?。╒iolayedoensis)干燥全草乙醇提取物的石油醚萃取部位分離得到2個倍半萜 類物質(zhì)，并證實所述的兩個化合物對補體系統(tǒng)經(jīng)典途徑和旁路途徑均有不同程度的抑制作 用。
[0007]本發(fā)明的活性雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物具有式I的化學(xué)結(jié)構(gòu)：
[0008]
[0009] 本發(fā)明所述的雙環(huán)吉馬燒型倍半廠類化合物優(yōu)選isobicyclogermacrenal(1)和 madolinY(2)。其中，各取代基及化合物如表1所示。
[0010] 表 1
[0011]
[0012] 本發(fā)明中，當(dāng)雙鍵為A_，R1為H，R2為H時，化合物為 isobicyclogermacrenal(l);;當(dāng)雙鍵為A1Q(15),R1為〇H，R2為OH時，化合物為madolin Y⑵。
[0013] 本發(fā)明所述的雙環(huán)倍半萜類化合物通過下述方法制備：
[0014] 取干燥的紫花地丁全草20kg，粉碎，用95 %乙醇室溫冷浸提?。?0LX5次）， 合并提取液并濃縮至無醇味，浸膏加水稀釋至2. 5L，依次以等體積石油醚^0-9(TC)、 乙酸乙酯、正丁醇萃?。ǜ?. 5LX3次），合并石油醚萃取液并濃縮至干，即得石油醚萃 取物323g。石油醚萃取部位（200g)經(jīng)硅膠柱色譜分離，依次以石油醚-乙酸乙酯（石 油醚，50:1，30:1，20:1，10:1，5:1，1:1)梯度洗脫，得到7個流份（Fr.A-G)，其中流份 Fr.E(22. 2g)再經(jīng)硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯為洗脫劑，30:1，20:1，15:1，10:1,5:1) 和SephadexLH-20(氯仿-甲醇，1:1)反復(fù)純化，最后通過半制備HPLC[甲醇-水（65:35) 為洗脫劑]分離得到2個倍半廠類化合物，分別為isobicyclogermacrenal(l, 19mg)和 madolinY(2,31mg)〇
[0015] 本發(fā)明中，
[0016] 化合物I(isobicyclogermacrenal):無色油狀液；[a]D25 =-29。（c0.IOmg/ ml,acetone) ； 1H-NMR(400MHz,acetone-d6) 8 ：9. 30 (1H,s,H-15),6. 33 (1H,d,J= 10. 2Hz,H-5),5. 02 (1H,dd,J= 9. 4, 6. 8Hz,H-l),2. 65 (H,m,H-3a),2. 44 (1H,m,H-2b),2. 24 (1H,ddd,J= 12. 6, 3. 6, 3. 1Hz,H-9b), 2. 13 (H,m,H-3b),I. 99 (1H,ddd,J= 12. 9, 12. 2, 3. 2H z,H-9a),I. 95 (1H,m,H-8a),I. 93 (1H,m,H-2a),I. 62 (3H,s,H-14) ,1.21 (3H,s,H-12),I.I 3 (1H,dd,J= 9. 6, 4. 9Hz,H-6)，I. 10 (3H,s,H-13)，I. 00 (1H,m,H-8b)，0? 55 (1H,m,H-7); 13C-NMR(K)OMHz,acetone-d6)S: 193.I(C-15)，156. 3 (C-5)，143. 7 (C-4)，134. 3 (C-IO)，124 ? 3 (C-I)，40. 0 (C-9)，38. 5 (C-7)，29. 7 (C-6)，28. 5 (C-13)，27. 5 (C-2)，23. 6 (C-8)，23. 4 (C-3 )，21. 3(C-11)，17. 4(C-14)，16. 4(C-12) ;ESI-MS:m/z241[M+Na]+。
[0017] 化合物 2(madolinY):無色油狀液體；[a]D25 = +104 ° (c0.IOmg/ ,5. 04(1H,s,H-15a), 4. 94(1H,s,H-15b), 4. 57(1H,d,J= 11. 2Hz,H-l), 3. 99 (1H,J= 11. 2Hz,H-12b), 3. 87 (1H,d,J= 11. 2Hz,H-12a), 2. 73 (1H,m,H-3b), 2. 45 (1H,m,H-3a), 2. 4 3 (1H,m,H-2b), 2. 32 (1H,m,H-7), 2. 27 (1H,m,H-9b), 2. 16 (1H,m,H-2a), 2. 14 (1H,m,H-9a)，2 ? 05(2H，m，H-8)，1.86(lH，m，H-6)，1.26(3H，s，H-13) ;13C-NMR(100MHz，CDC13)S:194.0(CH0 )，151. 8 (C-5)，146.I(C-4)，145. 6 (C-IO)，117. 6 (C-15)，88. 5 (C-I)，73.O(C-12)，36.I(C-9 )，33. 2 (C-Il)，28.O(C-3)，27. 3 (C-2)，25. 4 (C-6)，21. 9 (C-8)，21.O(C-7)，11. 4 (C-13)。
[0018] 上述倍半萜類化合物通過經(jīng)典途徑和旁路途徑體外抗補體活性試驗測定，結(jié)果表 明，上述倍半萜類化合物對補體系統(tǒng)的經(jīng)典途徑和旁路途徑均有抑制作用（如表2所示）， 表2.化合物1和2對補體系統(tǒng)經(jīng)典途徑和旁路途徑的抑制作用（mean土SD，n= 3)
[0019]
[0020] 本發(fā)明的雙環(huán)吉馬烷型倍半萜類化合物可用于制備抗補體藥物。
[0021] 本發(fā)明的倍半萜類化合