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用于治療奶牛乳房炎的藥物及其制法與檢測方法及用圖_2

文檔序號:9312778閱讀:來源:國知局
OmL,1次/d,連用5d為一個(gè)療程。
[0030] 對比藥物A治療組:對比藥物A 10g,用開水浸泡,冷卻后攪拌均勻,用投藥瓶進(jìn)行 灌服,每次100mL,1次/d,連用5d為一個(gè)療程。
[0031] 對比藥物B組:對比藥物B 10g,用開水浸泡,冷卻后攪拌均勻,用投藥瓶進(jìn)行灌 月艮,每次100mL,1次/d,連用5d為一個(gè)療程。
[0032] 對于試驗(yàn)?zāi)膛#瑢?shí)行統(tǒng)一的飼養(yǎng)管理,統(tǒng)一的飼料配方,不同藥物治療三個(gè)療程, 共計(jì)15d。三個(gè)療程后對三組奶牛進(jìn)行CMT檢測。
[0033] 3 結(jié)果 3.1乳房炎陽性奶牛 應(yīng)用加州乳房炎檢測法對400頭泌乳牛進(jìn)行檢測,"++"以上的陽性奶牛150頭,陽性 率達(dá)37. 5%,其中有紅、腫、熱、痛癥狀的100頭,占陽性奶牛66. 7%,100頭中選取90頭做臨 床試驗(yàn)。
[0034] 3.2不同藥物治療效果 三個(gè)療程后,對三組奶牛的治療效果進(jìn)行CMT檢測,并于第20天復(fù)檢是否復(fù)發(fā),結(jié)果 見表2。本發(fā)明藥物組、對比藥物A組和對比藥物B組奶牛乳房炎的治愈率分別是65. 2%、 38. 2%、41. 1%,有效率分別是 97. 8%、74. 1%、85. 5%,復(fù)發(fā)率分別是 I. 64%、12. 8%、11. 9% ; 表2 三組不同藥物治療效果對比試驗(yàn)結(jié)果
4結(jié)論 試驗(yàn)結(jié)果表明,本發(fā)明藥物組、對比藥物A組和對比藥物B組的治愈率、有效率、復(fù)發(fā)率 差異顯著(P〈〇. 05)。在治愈率方面本發(fā)明藥物組比對比藥物A組、對比藥物B組分別高27 個(gè)百分點(diǎn)和24個(gè)百分點(diǎn);在有效率方面,本發(fā)明藥物組比對比藥物A組、對比藥物B組分別 高23. 7個(gè)百分點(diǎn)和12. 3個(gè)百分點(diǎn),這充分證明本發(fā)明藥物的治療效果優(yōu)于對比藥物A和 對比藥物B。說明本發(fā)明藥物中藥味之間的配伍精良,藥味之間的組合產(chǎn)生了明顯的協(xié)同 增效作用。此外,本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)33. 3%的乳房炎患牛為隱性感染,未表現(xiàn)明顯的臨床炎癥病 變,建議養(yǎng)殖場高度重視隱性乳房炎的危害。
[0035] 實(shí)驗(yàn)二:本發(fā)明藥物的質(zhì)量檢測方法研究 1儀器與試藥 I. 1儀器 高效液相色譜儀(AgilentllO高效液相色譜儀及工作站,G1311Aquat栗,G1314紫外檢 測器)。
[0036] 1. 2 試藥 水楊苷(s a I i c i n )對照品(中國藥品生物制品檢定研究院);本發(fā)明中藥組合物;中藥材 (康濟(jì)連鎖藥店提供);甲醇(色譜醇,上海生化工助劑廠);其他試劑為分析純。
[0037] 2方法與結(jié)果 2. 1處方 紫葛500g,鋪地黍500g,馬齒莧250g。
[0038] 2. 2制備 取干燥的紫葛500g,鋪地黍500g,馬齒莧250g,第一次加IlOOOmL水浸泡1小時(shí),煎煮 1小時(shí),第二次加4000mL,煎煮1小時(shí),合并水煎液,濾過,濾液濃縮,干燥,即得。
[0039] 2. 3水楊苷的含量測定 2. 3. I HPLC色譜條件 采用HypersilDs (4. OmmX 125mm,5 y m)色譜柱;流動相:比例為30 :70的甲醇-〇? 15% 磷酸溶液;檢測波長:200nm ;柱溫:20°C ;流速:1.0 mL iin S進(jìn)樣量:10 y L ;在該色譜條件 下,對照品及樣品色譜峰良好,無鋪地黍陰性對照對測定無干擾。
[0040] 2. 3. 2對照品溶液的制備 精密稱取80°C干燥至恒重的水楊苷對照品適量,加甲醇制成每ImL含0. 2mg的溶液。
[0041] 2. 3. 3供試品溶液與陰性對照液的制備 精密稱取本發(fā)明藥物l〇g,加甲醇40mL,加熱回流4h,提取液回流溶劑并濃縮至干,殘 渣加水IOmL溶解,用水飽和的正丁醇振搖提取5次,每次20mL,合并正丁醇提取液,用氨試 液洗滌3次,每次15mL,正丁醇提取液回收溶劑至干,殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOmL容量瓶 中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,取濾液即得;另按處方比例制備不含鋪地黍的陰性對照品, 同法制成陰性對照液。
[0042] 2. 3. 4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取80°C干燥至恒重的水楊苷對照品適量,用甲醇制成10. 4, 20. 8,41. 6,83. 2, 166. 4 y gmL 1系列濃度的溶液,分別精密量取上述5種濃度溶液各10 y L,注入高效液相色 譜儀進(jìn)行測定。
[0043]以峰面積比值與濃度進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為:A=21.2763C-0. 1391, r=0. 9999。表明水楊苷在10. 4~166. 4 ygmL 1濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。
[0044] 2. 3. 5穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液10 y L,分別于0,1,2,4,8h進(jìn)樣,并計(jì)算水楊苷含量。結(jié)果8h內(nèi) RSD為0.45% (n=5)。表明樣品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。
[0045] 2. 3. 6重復(fù)性試驗(yàn) 按供試品溶液制備方法平行處理樣品5份,依法測定水楊苷含量并計(jì)算。結(jié)果測得水 楊苷平均含量為〇? 12mg ? g \ RSD為L 3%。
[0046] 2. 3. 7精密度實(shí)驗(yàn) 精密吸取水楊苷對照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣5次,依法測定峰面積。結(jié)果RSD為0. 23%(n=5)。 表明精密度較好。
[0047] 2. 3. 8回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取已知水楊苷含量的同一批號的樣品6份,按高、中、低濃度分別精密加入適 量的水楊苷對照品溶液,按樣品測定項(xiàng)下操作,依法測定,計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為 100. 3%,RSD 為 0? 45% (n=5)。
[0048] 2. 3. 9樣品含量測定 分別量取對照品溶液和供試品溶液適量,用微孔濾膜濾過,各進(jìn)樣10 y L,按上述色譜 條件測定3批樣品,平行測定5次。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品溶液水楊苷的含量。本 品含水楊苷應(yīng)為標(biāo)示含量的95%~105%,以每Ig樣品含水楊苷計(jì),不得少于0.12mg。3批 樣品含量分別為 100.8%(RSD=L2%),101. 7% (RSD=L 3%),99.2%(RSD=L1%)。
[0049]
【具體實(shí)施方式】: 實(shí)施例1,一種用于治療奶牛乳房炎的藥物,該藥物是由以下重量份的原料制成的:紫 葛1重量份,鋪地黍2重量份;馬齒莧0. 5重量份。
[0050] 實(shí)施例2,一種用于治療奶牛乳房炎的藥物,該藥物是由以下重量份的原料制成 的:紫葛2重量份,鋪地黍1重量份;馬齒莧1重量份。
[0051] 實(shí)施例3, 一種用于治療奶牛乳房炎的藥物,該藥物是由以下重量份的原料制成 的:紫葛1重量份,鋪地黍1重量份;馬齒莧0. 8重量份。
[0052] 實(shí)施例4, 一種用于治療奶牛乳房炎的藥物,,該藥物是由以下重量份的原料制成 的:紫葛1. 5重量份,鋪地黍1重量份;馬齒莧0. 7重量份。
[0053] 實(shí)施例1~4中任意一項(xiàng)所述的藥物,可以將該藥物按常規(guī)制法制備成片劑、丸 劑、散劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑。
[0054] 實(shí)施例5,實(shí)施例1~4中任意一項(xiàng)所述的藥物,該藥物采用如下方法制備:取紫 葛、鋪地黍、馬齒莧,混合,加入3~15倍量的水浸泡0. 5~2小時(shí),煎煮0. 5~2小時(shí),煎 煮2~4次,每次0. 5~2小時(shí),提取液合并,濾過,濾液濃縮,干燥,粉碎成細(xì)粉,加入輔料, 混勻,制成散劑,即得。
[0055] 實(shí)施例6,實(shí)施例1~4中任意一項(xiàng)所述的藥物,該藥物采用如下方法制備:取干 燥的紫葛、鋪地黍、馬齒莧,第一次加11倍量水浸泡1小時(shí),煎煮1小時(shí),第二次加4倍量水 煎煮1小時(shí),合并水煎液,濾過,濾液濃縮,干燥,粉碎成細(xì)粉,過篩,混勻,制成散劑,即得。
[0056] 實(shí)施例7,實(shí)施例5或6中任意一項(xiàng)所述的藥物,該藥物采用高效液相色譜法進(jìn)行 水楊苷的含量測定: (1) 色譜條件:采用HypersiIDs色譜柱;流動相:比例為20~40 :60~80的甲 醇-0? 15%磷酸溶液;檢測波長:190~210nm ;柱溫:15~25°C;流速:0? 5~I. 5mL .min S 進(jìn)樣量:5~20yL ; (2
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