Il-33拮抗劑和其用圖
【專利說明】IL-33拮抗劑和其用途 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及能夠拮抗IL-33的抗原結(jié)合分子，和其使用方法。
[0002] 背景
[0003] 白介素-33 (IL-33)為ST2的配體，一種與輔助蛋白IL-IRAcP (accessory protein)相關(guān)聯(lián)的toll樣/白介素-1受體超家族成員（就回顧文獻(xiàn)，參見，例如Kakkar 和 Lee，Nature Reviews-Drug Discovery 7(10) :827-840 (2008)，Schmitz 等人，Immunity 23:479-490(2005) ;Liew 等人，Nature Reviews-Immunology 10:103-110(2010) ;US 2010/0260770 ;US 2009/0041718)。當(dāng) ST2/IL-lRAcP 被 IL-33 激活時，通過下游分子例如 MyD88 (髓樣分化因子88)和TRAF6 (TNF受體相關(guān)因子6)觸發(fā)信號傳遞級聯(lián)，從而尤其導(dǎo) 致NFk B(核因子-K B)的激活。IL-33信號傳遞已意味著成為牽涉各種疾病和病癥的因子 (Liew 等人，Nature Reviews-Immunology 10:103-110(2010))。
[0004] 發(fā)明簡述
[0005] 本發(fā)明提供白介素-33(IL_33)拮抗劑。
[0006] 在一個方面，本發(fā)明提供IL-33詰抗劑，所述IL-33詰抗劑包含第一 IL-33結(jié)合結(jié) 構(gòu)域（Dl)和多聚結(jié)構(gòu)域（M)。
[0007] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑包含連接至多聚結(jié)構(gòu)域（M)的第一 IL-33結(jié)合 結(jié)構(gòu)域（Dl)，其中Dl包含ST2蛋白的IL-33結(jié)合部分。
[0008] 在某些實施方案中，IL-33拮抗劑還包含一個或多個另外的IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域（例 如，D2、D3、D4 等）。
[0009] 根據(jù)某些實施方案，IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域（D1、D2、D3、D4等）包含ST2蛋白的IL-33 結(jié)合部分、IL-IRAcP蛋白的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域或其它IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域。
[0010] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑還包含連接至Dl和/或M的第二IL-33結(jié)合結(jié) 構(gòu)域（D2)，其中D2包含IL-IRAcP蛋白的細(xì)胞外部分。在一個實施方案中，Dl連接至M的 N-端。在一個實施方案中，Dl連接至M的C-端。在一個實施方案中，D2連接至M的N-端。 在一個實施方案中，D2連接至M的C-端。在一個實施方案中，Dl連接至D2的N-端，并且 D2連接至M的N-端。
[0011] 多聚結(jié)構(gòu)域（M)可為具有N-端和C-端的肽或多肽。IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域組分可連 接至M的N-端或C-端。根據(jù)某些實施方案，Dl、D2和M組分以串聯(lián)方式連接，以使得Dl 連接至D2的N-端，并且D2連接至M的N-端。在本發(fā)明的范圍內(nèi)涵蓋Dl、D2和M組分的 眾多布置和配置，本文中描述所述布置和配置的實例。
[0012] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約SOpM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合人白介素33(IL-33)，和/或如以表面等離子 體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以小于約400pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合 人白介素33(IL-33)。
[0013] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約60pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合人白介素33(IL-33)，和/或如以表面等離子 體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以小于約1.0 pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（Kd)結(jié)合 人白介素33(IL-33)。
[0014] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約60pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合猴白介素33(IL-33)，和/或如以表面等離子 體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以小于約200pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合 猴白介素33(IL-33)。
[0015] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約1.0 pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（Kd)結(jié)合猴白介素33(IL-33)，和/或如以表面等離 子體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以小于約1.0 pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（Kd)結(jié) 合猴白介素33(IL-33)。
[0016] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約IlOpM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合小鼠白介素33(IL-33)，和/或如以表面等 離子體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以小于約IOOpM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d) 結(jié)合小鼠白介素33 (IL-33)。
[0017] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約IOpM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合小鼠白介素33 (IL-33)，和/或如以表面等離 子體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以小于約5pM的結(jié)合解離平衡常數(shù)（K d)結(jié)合 小鼠白介素33(IL-33)。
[0018] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以大于或等于約9分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié)合人白介素33(IL-33)，和/或如以表面 等離子體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以大于或等于約4分鐘的解離半衰期 (tl/2)結(jié)合人白介素33(IL-33)。
[0019] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以大于或等于約30分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié)合人白介素33(IL-33)，和/或如以表面 等離子體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以大于或等于約1000分鐘的解離半衰期 (tl/2)結(jié)合人白介素33(IL-33)。
[0020] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以大于約40分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié)合猴白介素33(IL-33)，和/或如以表面等離子體 共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以大于或等于約10分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié) 合猴白介素33(IL-33)。
[0021] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以大于約1000分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié)合猴白介素33(IL-33)，和/或如以表面等離子 體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以大于或等于約1000分鐘的解離半衰期（tl/2) 結(jié)合猴白介素33 (IL-33)。
[0022] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以大于約25分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié)合小鼠白介素33 (IL-33)，和/或如以表面等離子 體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以大于約30分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié)合小 鼠白介素33(IL-33)。
[0023] 在一個實施方案中，如以表面等離子體共振測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以大于約500分鐘的解離半衰期（t 1/2)結(jié)合小鼠白介素33 (IL-33)，和/或如以表面等離 子體共振測定在37°C下所測量，IL-33拮抗劑以大于約1000分鐘的解離半衰期（tl/2)結(jié) 合小鼠白介素33(IL-33)。
[0024] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑阻斷IL-33與ST2的相互作用。
[0025] 在一個實施方案中，如以體外受體/配體結(jié)合測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約115pM的IC 5。值阻斷IL-33與ST2的相互作用。
[0026] 在一個實施方案中，如以體外受體/配體結(jié)合測定在25°C下所測量，IL-33拮抗劑 以小于約20pM的IC 5。值阻斷IL-33與ST2的相互作用。
[0027] 在一個實施方案中，Dl包含SEQ ID NO :5或6的氨基酸序列，或具有與所述氨基 酸序列至少90 %同一性的氨基酸序列。
[0028] 在一個實施方案中，D2包含SEQ ID NO :7或8的氨基酸序列，或具有與所述氨基 酸序列至少90 %同一性的氨基酸序列。
[0029] 在一個實施方案中，多聚組分包含SEQ ID NO :9或10的氨基酸序列，或具有與所 述氨基酸序列至少90 %同一性的氨基酸序列。
[0030] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑包含連接至第一多聚結(jié)構(gòu)域（Ml)的第一 IL-33 結(jié)合結(jié)構(gòu)域（Dl)，和連接至第二多聚結(jié)構(gòu)域（M2)的第二IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域（D2)，其中Dl 結(jié)構(gòu)域和/或D2結(jié)構(gòu)域包含選自由ST2和IL-IRAcP組成的組的受體的IL-33結(jié)合部分。
[0031] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑包含連接至Dl或Ml的第三IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (D3)，并且其中D3包含選自由ST2和IL-IRAcP組成的組的受體的IL-33結(jié)合部分。
[0032] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑包含連接至D2或M2的第四IL-33結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (D4)，并且其中D4包含選自由ST2和IL-IRAcP組成的組的受體的IL-33結(jié)合部分。
[0033] 在一個實施方案中，Dl連接至Ml的N-端，并且D2連接至M2的N-端。
[0034] 在一個實施方案中，D3連接至Dl的N-端。
[0035] 在一個實施方案中，D3連接至Ml的C-端。
[0036] 在一個實施方案中，D4連接至D2的N-端。
[0037] 在一個實施方案中，D4連接至M2的C-端。
[0038] 在一個實施方案中，D3連接至Dl的N-端，Dl連接至Ml的N-端；D4連接至D2的 N-端，并且D2連接至M2的N-端。
[0039] 在一個實施方案中，D3與D4相同或?qū)嵸|(zhì)上相同，并且D1與D2相同或?qū)嵸|(zhì)上相同。
[0040] 在一個實施方案中，D3和D4各自包含ST2蛋白的IL-33結(jié)合部分；并且Dl和D2 各自包含IL-IRAcP蛋白的細(xì)胞外部分。
[0041] 在一個實施方案中，IL-33拮抗劑包含選自由SEQ ID NO :1、2、3、4和13組成的組 的氨基酸序列。
[0042] 本發(fā)明的第二方面提供使用本文所述的IL-33拮抗劑來治療炎性疾病或病癥或 與炎性疾病或病癥相關(guān)聯(lián)的至少一種癥狀的方法，所述方法包括向有需要的患者施用本發(fā) 明的一種或多種IL-33拮抗劑，或含有本發(fā)明的一種或多種IL-33拮抗劑的藥物組合物，其 中所述炎性疾病或病癥的嚴(yán)重度、持續(xù)時間和/或發(fā)生頻率得以減輕或減少，或與炎性疾 病或病癥相關(guān)聯(lián)的至少一種癥狀的嚴(yán)重度、持續(xù)時間和/或發(fā)生頻率得以減輕或減少。
[0043] 在一個實施方案中，可用本發(fā)明的任何一種或多種IL-33拮抗劑治療的炎性疾病 或病癥可選自由以下組成的組：哮喘、異位性皮炎、慢性阻塞性肺?。–OPD)、炎性腸病、多 發(fā)性硬化、關(guān)節(jié)炎、過敏性鼻炎、嗜酸細(xì)胞性食道炎和牛皮癬。
[0044] 在一個實施方案中，可用本發(fā)明的任何一種或多種IL-33拮抗劑治療的炎性疾病 或病癥是哮喘。哮喘可為嗜酸細(xì)胞性或非嗜酸細(xì)胞性哮喘。哮喘可為類固醇抗性或類固醇 敏感性哮喘。
[0045] 在一個實施方案中，可用本發(fā)明的任何一種或多種IL-33拮抗劑治療的炎性疾病 或病癥是異位性皮炎。
[0046] 在一個實施方案中，可用本發(fā)明的任何一種或多種IL-33拮抗劑治療的炎性疾病 或病癥是慢性阻塞性肺?。–OPD)。在一個實施方案中，慢性阻塞性肺病可由香煙煙霧產(chǎn)生， 或可部分地由香煙煙霧引起。
[0047] 在相關(guān)實施方案中，本發(fā)明提供用于治療對過敏原顯現(xiàn)敏感性的患者的方法，所 述方法包括向有需要的患者施用有效量的本發(fā)明的IL-33拮抗劑中的一種或多種，或包含 本發(fā)明的IL-33拮抗劑中的一種或多種的藥物組合物，其中所述患者在施用抗體或包含抗 體的組合物后，對過敏原顯現(xiàn)降低的敏感性，或針對過敏原減少的過敏性反應(yīng)，或不會經(jīng)歷 對過敏原的任何敏感或過敏（allergic)反應(yīng)，或過敏性（anaphylactic)反應(yīng)。
[0048] 在相關(guān)實施方案中，本發(fā)明提供用于治療炎性疾病或病癥的包含本發(fā)明的IL-33 拮抗劑中的一種或多種的藥物組合物，其中炎性疾病或病癥選自由以下組成的組：哮喘、過 敏癥、過敏性反應(yīng)、異位性皮炎、慢性阻塞性肺?。–OPD)、炎性腸病、多發(fā)性硬化、關(guān)節(jié)炎、過 敏性鼻炎、嗜酸細(xì)胞性食道炎和牛皮癬。
[0049] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供制造用于治療炎性疾病或病癥的藥物的包括本發(fā) 明的IL-33拮抗劑中的一種或多種的藥物組合物，其中炎性疾病或病癥選自由以下組成的 組：哮喘、過敏癥、過敏反應(yīng)、異位性皮炎、慢性阻塞性肺病（COPD)、炎性腸病、多發(fā)性硬化、 關(guān)節(jié)炎、過敏性鼻炎、嗜酸細(xì)胞性食道炎和牛皮癬。
[0050] 在某些實施方案中，本發(fā)明提供通過以下方式治療炎性疾病或病癥的方法：施用 本發(fā)明的IL-33拮抗劑中的一種或多種與有效量的第二治療劑的組合，所述第二治療劑適 用于減輕炎性疾病或病癥或炎性疾病或病癥的至少一種癥狀，或減少對過敏原的過敏反 應(yīng)。
[0051] 在一個實施方案中，第二治療劑可選自由以下組成的組：非類固醇消炎藥 (NSAID)、皮質(zhì)類固醇、支氣管擴張劑、抗組織胺、腎上腺素、去充血劑、胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生 成素（TSLP)拮抗劑、IL-13拮抗劑、IL-4拮抗劑、IL-4/IL-13雙拮抗劑、IL-5拮抗劑、IL-6 拮抗劑、IL-12/23拮抗劑、IL-22拮抗劑、IL-25拮抗劑、IL-17拮抗劑、IL-31拮抗劑、PDE4 抑制劑和另一 IL-33拮抗劑或IL-33的不同抗體。
[0052] 本發(fā)明的第三方面提供包含本文所述的IL-33拮抗劑中的任何一種或多種和藥 學(xué)上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物，和包括向有需要的受試者施用這類藥物組合物 的治療方法。在某些實施方案中，另外的治療活性組分與本發(fā)明的IL-33拮抗劑一起配制 或組合施用。
[0053] 根據(jù)確認(rèn)詳述的論述，其它的實施方案將變得顯而易見。
[0054] 附圖簡述