馬尾藻多糖在制備用于治療或預(yù)防腸病毒71型感染的組合物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種馬尾藻多糖在制備用于治療或預(yù)防腸病毒71型感染的組合物中 的用途，其中該組合物典型地可作為醫(yī)藥組合物、食品添加物及清潔衛(wèi)生用品的添加物。
【背景技術(shù)】
[0002] 腸病毒71型屬于小核糖核酸病毒科（Picornaviridae),腸病毒屬 (Enterovirus),是目前已知的腸病毒中最后被發(fā)現(xiàn)的一種。腸病毒71型感染腦髓及腦干 造成突發(fā)性中樞神經(jīng)的病癥，如：昏睡、急躁、呼吸困難、腦炎、無(wú)菌性腦膜炎、手足口癥、皰 疹性咽峽炎以及心臟衰竭休克，容易造成兒童重癥，對(duì)兒童危害極大。
[0003] 在物理化學(xué)特性上，腸病毒71型病毒顆粒不易受酸堿影響，故其感染力在酸性環(huán) 境下，可被穩(wěn)定的保留下來(lái)。由于腸病毒71型不具由脂質(zhì)所形成的外套膜（envelope)結(jié) 構(gòu)，屬于種裸病毒，故對(duì)乙醇具有耐受性，使得酒精無(wú)法發(fā)揮抑制作用。此外，一般家庭常用 的清潔劑對(duì)腸病毒71型亦無(wú)殺菌效果。目前也沒(méi)有藥物或疫苗可以有效的對(duì)抗腸病毒71 型所引起的感染。
[0004] 馬尾藻（Sargassum)是褐藻中的一類海藻，屬褐藻門，鹿角菜目、馬尾藻科，其分布 在世界許多海域，在臺(tái)灣可見(jiàn)于北部、東北部沿岸海域以及澎湖、綠島、蘭嶼等區(qū)域，特別于 滲湖海域具有相當(dāng)多的產(chǎn)量。馬尾藻多糖（Sargassum polysaccharide)是從馬尾藻中萃 取的一種易溶于水、黏度較高的多糖類物質(zhì)。有報(bào)導(dǎo)顯示馬尾藻多糖具有增強(qiáng)免疫力、抑制 腫瘤細(xì)胞、抗氧化和抗病毒等藥理活性，但對(duì)于抗病毒的藥理機(jī)制尚不明確，尤其針對(duì)腸病 毒少有深入探討。
[0005] 因此，針對(duì)腸病毒71型，仍有需要找出可有效對(duì)抗其感染的活性成分，特別是來(lái) 自日常生活的天然食材，不但可達(dá)治療功效，亦有無(wú)毒及容易取得的優(yōu)點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供了一種馬尾藻多糖在制備用于治療或預(yù)防腸病毒71型感染的組合物 中的用途。
[0007] 在部分具體實(shí)施例中，本發(fā)明的馬尾藻多糖可經(jīng)硫酸化處理，使得處理后的馬尾 藻多糖中，硫酸根含量達(dá)10% (w/w)以上、20% (w/w)以上、40% (w/w)以上、或60% (w/w) 以上。在一特定具體實(shí)施例中，本發(fā)明的馬尾藻多糖中，硫酸根含量達(dá)60-70% (w/w)。
[0008] 具體而言，本發(fā)明的組合物可增加對(duì)于腸病毒71型感染的抑制率，例如，降低細(xì) 胞感染腸病毒71型的比例、抑制腸病毒71型的RNA合成以及抑制腸病毒71型引起的細(xì)胞 病變及細(xì)胞凋亡。
[0009] 本發(fā)明的各個(gè)具體實(shí)施例的細(xì)節(jié)說(shuō)明如后。本發(fā)明的其他特征將會(huì)經(jīng)由以下各個(gè) 具體實(shí)施例中的詳細(xì)說(shuō)明及權(quán)利要求而清楚呈現(xiàn)。
[0010] 無(wú)須進(jìn)一步的闡述，相信本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域中的技術(shù)人員基于前述說(shuō)明即可利 用本發(fā)明至最廣的程度。因此，可以理解以下的說(shuō)明僅僅是作為例示說(shuō)明之用，而非以任何 方式限制其余的揭露內(nèi)容
【附圖說(shuō)明】
[0011] 圖1顯示馬尾藻多糖的HPLC圖譜，其中圖I (A)為馬尾藻多糖標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC圖 譜，及圖I (B)為硫酸化馬尾藻多糖的HPLC圖譜。
[0012] 圖2顯示不同濃度的馬尾藻多糖標(biāo)準(zhǔn)品及硫酸化馬尾藻多糖對(duì)于腸毒病71型的 抑制效果。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 本發(fā)明分析馬尾藻多糖，首次證實(shí)其針對(duì)腸病毒71型的感染有良好的抑制效果， 尤其是增加硫酸根含量的馬尾藻多糖，可進(jìn)一步提高其抑制腸病毒71型的效果。馬尾藻多 糖無(wú)毒且容易取得，相較于有毒性且昂貴的化學(xué)藥物接受度高，特別是針對(duì)高危險(xiǎn)的嬰幼 兒而言。因此，本發(fā)明對(duì)于腸病毒71型所引起的疾病的治療及防治做出了巨大貢獻(xiàn)。
[0014] 除非另有指明，所有在此處使用的技術(shù)性和科學(xué)性術(shù)語(yǔ)具有如同本發(fā)明所屬領(lǐng)域 技術(shù)人員一般所了解的意義。
[0015] 本文所使用的"一"一詞，如未特別指明，是指至少一個(gè)(一個(gè)或一個(gè)以上）的數(shù)量。
[0016] 在一方面，本發(fā)明是揭示一種馬尾藻多糖在制備用于治療或預(yù)防腸病毒71型感 染的組合物中的用途。
[0017] 馬尾藻多糖是由馬尾藻萃取而得的多糖，從化學(xué)上來(lái)說(shuō)，它是一種以"巖藻糖"為 主的多糖體，是由巖藻糖（fucose)及硫酸鹽（sulphate)組成的水溶性雜聚多糖成分，其中 巖藻糖以α-(1 - 2)、α-(1 - 3)或α-(1 - 4)互相鍵結(jié)成主鍵，而硫酸鹽結(jié)合在C-2或 C-4的還原端上。具體而言，其具有的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下式（I):
[0019] 馬尾藻多糖可由商業(yè)上獲得，也可通過(guò)常規(guī)方法從馬尾藻萃取而得，例如，以熱水 浸泡藻體使其軟化(例如，浸泡于約l〇(TC左右的熱水約1-3小時(shí)),經(jīng)酵素或酸化步驟處 理，然后離心、過(guò)濾，收集上清液。萃取后取得的上清液可進(jìn)一步冷凍干燥，以利保存。在部 分具體實(shí)施例中，本發(fā)明使用的馬尾藻多糖，其分子量范圍為50kDa至1，OOOkDa、250kDa至 950kDa、或450kDa至850kDa。在一特定具體實(shí)施例中，本發(fā)明使用的馬尾藻多糖具分子量 約 800kDa。
[0020] 較佳地，可進(jìn)行增加硫酸根含量的步驟，以增加馬尾藻多糖的硫酸根含量。在部 分具體實(shí)施例中，本發(fā)明可采用化學(xué)方法添加硫酸根，例如，加入氯磺酸-二甲基甲酰胺 (Chlorsulfonic acid-N, N-dimethylformamide，HC1S03/DMF)試劑進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)后以喊 (如NaOH)中和，然后離心、過(guò)濾，收集上清液。在部分具體實(shí)施例中，本發(fā)明的馬尾藻多糖 中硫酸根含量達(dá)10% (w/w)以上、20% (w/w)以上、40% (w/w)以上、或60% (w/w)以上。在 一特定具體實(shí)施例中，本發(fā)明使用的馬尾藻多糖中硫酸根含量達(dá)60-70% (w/w)。
[0021] 本發(fā)明的組合物可依傳統(tǒng)上的常規(guī)方法，與任何一種或多種載體調(diào)配而成。例如， 將馬尾藻多糖與適當(dāng)載體混合，再將其制成所需劑型。
[0022] 本文所使用的"載體"一詞意指用以攜帶馬尾藻多糖形成所欲調(diào)配物形式的非活 性成分，包括任何標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)上可接受的載體，其可與調(diào)配物的活性成分相容，且對(duì)欲施用的 個(gè)體無(wú)害，例如，水、生理鹽水、甘油、乙醇、葡萄糖水、葡聚糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、其類似物 或以上的組合。
[0023] 本發(fā)明的組合物尚可包括黏結(jié)劑、潤(rùn)滑劑、抗氧化劑、填充劑及保藏劑。可用的黏 結(jié)劑包括阿拉伯膠、海藻酸鈉、乙基纖維素、洋菜、明膠、淀粉、羥基纖維素、羥丙基纖維素、 其類似物或以上的組合?？捎玫臐?rùn)滑劑包括硬脂酸、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、氫化油、臘、 其類似物或以上的組合?？捎玫目寡趸瘎┌ㄉ?、二丁基羥基甲苯、丁基羥基甲氧苯、 抗壞血酸、其類似物或以上的組合?？捎玫奶畛鋭┌ㄎ⒕Юw維素、乳糖、甘露醇、其類似物 或以上的組合。可用的保藏劑包括苯甲酸及其鹽類、山梨酸及其鹽類、對(duì)羥基苯甲酸酯類、 去水醋酸鈉、過(guò)氧化氫、次氯酸鈉、其類似物或以上的組合。
[0024] 在一具體實(shí)施例中，本發(fā)明的組合物是作為醫(yī)藥組合物，其可依投與途徑調(diào)配成 各種劑型。舉例而言，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可調(diào)配成為膠囊或錠劑，以進(jìn)行口服投藥。膠囊 可含有任何標(biāo)準(zhǔn)的醫(yī)藥可接受性物質(zhì)，例如，明膠或纖維素。錠劑可根據(jù)常規(guī)方法，將組合 物與固態(tài)載體及潤(rùn)滑劑共同壓制而調(diào)配。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物亦可調(diào)配成注射劑型，所使 用的載體包括水溶液、等張鹽水或葡萄糖液或是其他熟知的醫(yī)藥可接受性載體。本發(fā)明的 醫(yī)藥組合物尚可調(diào)配成乳膏、油劑、凝膠、乳液或噴霧劑，供局部施用。
[0025] 在另一具體實(shí)施例中，本發(fā)明的組合物是作為食品添加物。馬尾藻多糖取自天然 食材，不具毒性，可直接添加至食品或營(yíng)養(yǎng)品中，簡(jiǎn)單達(dá)成預(yù)防保健的功效，例如，添加至奶 粉或其他乳制品中提供嬰幼兒食用。
[0026] 在又一具體實(shí)施例中，本發(fā)明的組