鹽酸左旋多巴甲酯在制備防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物新用途技術(shù)領(lǐng)域，涉及鹽酸左旋多巴甲酯的藥物用途，具體涉及 鹽酸左旋多巴甲酯在制備防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoidarthritis，RA)是一種常見的以慢性、進行性、侵蝕 性關(guān)節(jié)炎為特點的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其主要侵犯手、腕、足等小關(guān)節(jié)，也可累及如心、 肺、神經(jīng)系統(tǒng)等其他器官或組織。RA基本病理改變是關(guān)節(jié)滑膜炎癥、血管翳形成、關(guān)節(jié)軟骨 和骨質(zhì)進行性破壞。患者在病程各階段可都有關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、僵硬和永久性關(guān)節(jié)破壞，如 未能及時控制，最終將會導(dǎo)致患者關(guān)節(jié)畸形和功能喪失，具有很高的致殘率，嚴(yán)重影響了患 者的生活質(zhì)量。RA在各個年齡階段均可發(fā)病，其發(fā)病高峰年齡集中在30~50歲，一般女性 患者多于男性。據(jù)統(tǒng)計，該病在全世界范圍內(nèi)發(fā)病率約為〇. 5%~1. 0%，在我國患病率約為 0. 32%~0. 36%。RA已經(jīng)成為造成人群勞動力喪失和殘疾的主要原因之一。
[0003]目前，RA治療目的是控制病情，使患者盡早達到疾病緩解狀態(tài)，改善關(guān)節(jié)功能，最 大程度的保持患者機體正常功能。RA的治療原則是早期治療、聯(lián)合用藥、治療方案個體化以 及功能鍛煉。臨床上對于RA的治療是以藥物治療為主，主要包括非留體抗炎藥、改善病情 的抗風(fēng)濕藥、生物制劑、糖皮質(zhì)激素和植物藥制劑等。雖然經(jīng)治療后RA病人的癥狀得到了 明顯的緩解，預(yù)后也有顯著的改善，但是仍然面臨著病情易反復(fù)、藥物不良反應(yīng)、藥物耐受 等問題，因此尋找新的RA治療藥物具有十分重要的意義。
[0004] 鹽酸左旋多巴甲酯（LDME)，化學(xué)名稱為L-3, 4-二羥基苯基丙氨酸甲酯鹽酸，其分 子式為C10H13N04.HCL，分子量為247. 68,CASNo?是1421-65-4,結(jié)構(gòu)如式（I)所示：
LDME是左旋多巴的前體藥物，水解為左旋多巴后，通過血腦屏障進入中樞，經(jīng)多巴脫羧 酶作用轉(zhuǎn)化成多巴胺，臨床上用于改善帕金森病癥狀。LDME易溶于水，易制成各種口服劑 型和注射劑給藥，吸收快，7-8分鐘血藥濃度達峰值，比左旋多巴起效快，療效肯定。近幾年 動物實驗研宄表明LDME對弱視也有治療作用。目前尚無研宄LDME與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān) 系，本發(fā)明由此而來。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 解決的技術(shù)問題：針對現(xiàn)有的研宄LDME與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān)系的缺乏，本發(fā)明 提供一種鹽酸左旋多巴甲酯在制備防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用，為防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié) 炎提供了一種新途徑。
[0006] 技術(shù)方案：鹽酸左旋多巴甲酯在制備防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物中的應(yīng)用，鹽酸左 旋多巴甲酯化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
[0007] 所述的藥物組合物包含藥學(xué)上有效劑量的鹽酸左旋多巴甲酯和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0008] 所述的將鹽酸左旋多巴甲酯制備成適用于胃腸道或非胃腸道給藥的藥物制劑。
[0009] 所述的將鹽酸左旋多巴甲酯制備成適用于胃腸道的藥物制劑，其制劑形式為常規(guī) 片劑、膠囊劑、控釋制劑或緩釋制劑。
[0010] 所述的在鹽酸左旋多巴甲酯制備成的藥物制劑中，鹽酸左旋多巴甲酯在制劑中的 含量為lwt%~99wt%。
[0011] 所述的在鹽酸左旋多巴甲酯制備成的藥物制劑中，鹽酸左旋多巴甲酯在制劑中的 含量為l〇wt%~90wt%。
[0012] 所述的藥物制劑的制備方法為將鹽酸左旋多巴甲酯直接做成制劑，或者分別或/ 和輔料混合后做成制劑，然后進行包裝即得。
[0013] 所述的藥物組合物的給藥劑量根據(jù)給藥對象、給藥途徑或藥物的制劑形式不同進 行變化，但以保證該藥物組合物在哺乳動物體內(nèi)能夠達到有效的血藥濃度為前提。
[0014] 鹽酸左旋多巴甲酯（LDME)，其分子式為CltlH13NO4.HCL，化學(xué)名稱為L-3, 4-二羥基 苯基丙氨酸甲酯鹽酸，分子量為247.68,CASNo?是1421-65-4,來源于Sigma-Aldrich Co.LLC.公司。
[0015] 本發(fā)明技術(shù)方案通過腹腔注射給藥法來研宄LDME能否對膠原誘導(dǎo)方法建立類 風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠（CIA)有治療作用，同時測定腫瘤壞死因子-a(TNF-a)，白介素-10 (IL-I)和IL-6等炎癥因子表達變化，以期為探討LDME治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎提供實驗依據(jù)。
[0016] 本發(fā)明通過40只DBA/lj小鼠被隨機分為5組，即正常組（Control)、模型組 (Vehicle)、陽性對照組（甲氨蝶呤，2mg/kg;MTX)、LDME高劑量組和LDME低劑量組，LDME高 劑量組的給藥劑量為l〇〇mg/kg，LDME低劑量組的給藥劑量為25mg/kg。于二次免疫前一天 (第20天）至第70天LDME組分別按100mg/kg和25mg/kg連續(xù)給藥，MTX組每2天按2mg/ kg給藥，Control和Vehicle組按10ml/kg給予飲用水。定期觀察各組實驗小鼠一般情況， 記錄小鼠足掌厚度、關(guān)節(jié)炎評分；各組于第70天處死動物保留血清和后肢關(guān)節(jié)標(biāo)本，分別 行影像學(xué)、組織學(xué)和分子生物學(xué)檢測。采用單因素方差分析對各組數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。
[0017] 本發(fā)明結(jié)果表明，Control組小鼠活動靈活，精神狀態(tài)良好，飲水和食量正常，關(guān)節(jié) 活動自如。Vehicle組小鼠精神萎靡，飲水和食量減少，關(guān)節(jié)活動有明顯障礙，四肢關(guān)節(jié)明 顯腫大、持續(xù)水腫、皮膚充血、皮溫升高，關(guān)節(jié)活動度小。LDME低劑量組小鼠精神狀態(tài)一般， 飲水和攝食情況好于Vehicle組，關(guān)節(jié)活動受限，部分關(guān)節(jié)紅腫，行走能力得到部分恢復(fù)。 LDME高劑量組和MTX組小鼠飲食情況明顯好于Vehicle組，精神狀態(tài)較好，關(guān)節(jié)稍有紅腫， 無明顯活動障礙。Vehicle組小鼠足掌初次免疫后第21天開始逐漸腫脹，至第42天時腫脹 程度達最高，與Control組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p〈0. 05)。LDME低劑量組，小鼠足掌腫 脹進展緩慢，初次免疫第42天后，小鼠足掌腫脹程度逐漸減輕，末次測量時，小鼠足掌腫厚 度與Vehicle組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p〈0. 05)。Vehicle組關(guān)節(jié)炎評分于第42天達到 高峰；MTX組在D38天關(guān)節(jié)炎評分顯著降低；LDME高劑量組和LDME低劑量組分別在第36、 第42天顯著抑制CIA小鼠關(guān)節(jié)病變。micro-CT掃描結(jié)果顯示，LDME低劑量組：骨質(zhì)表面 十分毛糙，關(guān)節(jié)間隙縮窄嚴(yán)重，關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞較嚴(yán)重，較Vehicle組稍有好轉(zhuǎn)；LDME高劑量 組和MTX組：骨質(zhì)表面基本完整，關(guān)節(jié)間隙幾乎正常，關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)清晰可見。組織學(xué)染色結(jié)果 顯示Control組關(guān)節(jié)軟骨排列規(guī)則，染色均勻；關(guān)節(jié)面完整，軟骨呈粉紅淡染色，骨質(zhì)呈深 紅色，關(guān)節(jié)間隙正常，滑膜組織結(jié)構(gòu)光滑，未見滑膜增生及炎性細(xì)胞浸潤現(xiàn)象。Vehicle組主 要表現(xiàn)為：滑膜組織顯著增生，出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤，新生血管明顯增多；軟骨細(xì)胞排列 紊亂，關(guān)節(jié)軟骨和骨質(zhì)被嚴(yán)重破壞，軟骨面毛糙凹凸不平，關(guān)節(jié)間隙消失。LDME高劑量組、 LDME低劑量組和MTX治療組可不同程度減輕以上病理變化，表現(xiàn)為滑膜組織輕度增生，炎 性細(xì)胞浸潤減少，新生血管減少，軟骨損傷程度明顯減輕。ELISA結(jié)果顯示LDME能降低CIA 小鼠血清中TNF-a、IL-I0和IL-6的含量，提示對炎癥因子的調(diào)節(jié)作用可能是LDME治療 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的重要機制。
[0018] 該動物實驗證實鹽酸左旋多巴甲酯（LDME)對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎有一定的防治作用，可 使關(guān)節(jié)破壞和炎癥反應(yīng)得到抑制，可作為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物干預(yù)的一種新手段。
[0019] 有益效果：本發(fā)明提供的鹽酸左旋多巴甲酯在制備防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物中的 應(yīng)用，具有以下優(yōu)點： 1. 鹽酸左旋多巴甲酯具有高效防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的用途，能夠顯著減輕癥狀，如關(guān)節(jié) 腫脹、關(guān)節(jié)炎評分，且能減輕關(guān)節(jié)破壞，降低炎性因子分泌； 2. 鹽酸左旋多巴甲酯對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎療效確切，為將鹽酸左旋多巴甲酯開發(fā)為新藥 提供了強有力的依據(jù)。
[0020] 3.本發(fā)明發(fā)掘了鹽酸左旋多巴甲酯新的藥