大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物材料領(lǐng)域，具體涉及大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 大鯢俗稱娃娃魚，隸屬于兩棲綱有尾目隱腮鯢科，包括2屬3種，即大鯢屬和隱腮 鯢屬，其中大鯢屬又可分為日本大鯢和中國大鯢，是世界現(xiàn)存最大、最珍貴的兩棲動(dòng)物，已 被聯(lián)合國列入瀕危物種保護(hù)名錄，是國家二類保護(hù)水生野生動(dòng)物。大鯢肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮 美，含有優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、豐富的氨基酸和微量元素，營養(yǎng)價(jià)值極高，被譽(yù)為"水中人參"和"軟黃 金"。當(dāng)大鯢皮膚受到外界刺激時(shí)，可分泌大量白色乳狀的、具有特殊氣味的粘液，經(jīng)研宄發(fā) 現(xiàn)分泌的粘液中主要成分為水（83-86% )、蛋白質(zhì)（12% )，含有少量的多糖（0.48% )，具 有抗菌、抗氧化和抗腫瘤等功效，目前主要應(yīng)用于化妝品領(lǐng)域。由于大鯢粘液的產(chǎn)量非常充 足，可重復(fù)大量采集，其利用率低。因此，亟待對(duì)大鯢粘液的附加產(chǎn)品進(jìn)一步開發(fā)，提高大鯢 的綜合價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 有鑒于此，本發(fā)明的目的之一在于提供了大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng) 用，開發(fā)了大鯢粘液的新用途，并為軟組織填充材料提供了新的材料。
[0004] 1、大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng)用。
[0005] 優(yōu)選的，所述軟組織為肌肉、脂肪、血管或內(nèi)臟。
[0006] 優(yōu)選的，所述內(nèi)臟為腸。
[0007] 優(yōu)選的，所述軟組織填充材料的制備方法為將大鯢粘液冷凍成固體，然后冷凍真 空干燥去除水分，再將干燥的大鯢粘液粉碎，滅菌，即得；
[0008] 或?qū)⒋篥F粘液于溫度不高于37°C的條件下真空干燥，再將干燥的大鯢粘液粉碎， 滅菌，即得。
[0009] 優(yōu)選的，所述冷凍的條件是在溫度不高于-20°c下冷凍。
[0010] 優(yōu)選的，所述冷凍的條件是在溫度為_80°C~-20°C下冷凍。
[0011] 優(yōu)選的，所述冷凍真空干燥的條件是在溫度小于_50°C、真空度小于20Pa條件下 冷凍干燥至少48小時(shí)。
[0012] 優(yōu)選的，所述粉碎為超微粉碎至粒徑為300~1000目。
[0013] 優(yōu)選的，所述滅菌為2~5X IO4Gy劑量的60C〇 γ射線照射滅菌。
[0014] 本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明公開了大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng) 用，該填充材料來源于大鯢粘液，成分天然，安全性好，能夠用作軟組織填充材料，如肌肉、 脂肪、血管或內(nèi)臟填充或堵孔，并且生物相容性好、無炎癥反應(yīng)，可降解、植入后無需取出， 在臨床上具有廣泛的應(yīng)用前景。
【附圖說明】
[0015] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果更加清楚，本發(fā)明提供如下附圖：
[0016] 圖1為檢測埋植部位的炎癥反應(yīng)結(jié)果（A :表面觀察；B :埋植部位切開）。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 下面將結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例中未注明具體 條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。
[0018] 大鯢粘液的采集采用皮膚直接刮檫法：具體為將鮮活大鯢用清水清洗體表，去除 蛻皮等雜質(zhì)，然后置于干燥盒子中，用扁平物刮取大鯢體表，直至大鯢體表分泌大量乳白色 粘液，刮取搜集到培養(yǎng)皿中，使培養(yǎng)皿中粘液厚度約lcm。大鯢粘液的采集也可以采用現(xiàn)有 的電刺激法或乙醚麻醉法采集，具體方法見公開號(hào)為104223121A和104206502A的中國專 利。
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 利用大鯢粘液制備軟組織填充材料的方法，包括如下步驟：將收集大鯢粘液的培 養(yǎng)皿置-80°C過夜使其冷凍成固體，然后用真空冷凍干燥機(jī)在真空度為19pa、溫度為-50°C 下冷凍真空干燥48小時(shí)；再將凍干的大鯢粘液搗碎后置低溫超微粉碎機(jī)粉碎至300目，最 后以5X104Gy劑量60C 〇Y射線照射滅菌，得軟組織填充材料，無菌包裝備用。其中低溫粉 碎的溫度低于37°C即可，加入液氮超微粉碎效果最佳。
[0021] 實(shí)施例2
[0022] 利用大鯢粘液制備軟組織填充材料的方法，包括如下步驟：將收集大鯢粘液的培 養(yǎng)皿置-20°C過夜使其冷凍成固體，然后用真空冷凍干燥機(jī)在真空度為10pa、溫度為-70°C 下冷凍真空干燥56小時(shí)；再將凍干的大鯢粘液搗碎后置低溫超微粉碎機(jī)粉碎至500目，最 后以2X104Gy劑量60C 〇Y射線照射滅菌，得軟組織填充材料，無菌包裝備用。其中低溫粉 碎的溫度低于37°C即可，加入液氮超微粉碎效果最佳。
[0023] 實(shí)施例3
[0024] 利用大鯢粘液制備軟組織填充材料的方法，包括如下步驟：將收集大鯢粘液的培 養(yǎng)皿直接置真空干燥箱中，在37°C真空下干燥48h，再將干燥的大鯢粘液搗碎后置低溫超 微粉碎機(jī)粉碎至1000目，最后以2 X IO4Gy劑量60C〇 γ射線照射滅菌，得軟組織填充材料， 無菌包裝備用。其中低溫粉碎的溫度低于37°C即可，加入液氮超微粉碎效果最佳。
[0025] 實(shí)施例4
[0026] 利用大鯢粘液制備軟組織填充材料的方法，包括如下步驟：將收集大鯢粘液的培 養(yǎng)皿直接置真空干燥箱中，在20°C真空下干燥48h，再將干燥的大鯢粘液搗碎后置低溫超 微粉碎機(jī)粉碎至800目，最后以2 X IO4Gy劑量60C〇 γ射線照射滅菌，得軟組織填充材料， 無菌包裝備用。其中低溫粉碎的溫度低于37°C即可，加入液氮超微粉碎效果最佳。
[0027] 實(shí)施例5
[0028] 對(duì)大鯢粘液制備的軟組織填充材料進(jìn)行體內(nèi)降解和生物相容性試驗(yàn)，具體如下： 取軟組織填充材料50mg置于生理50ml生理鹽水中，攪拌使其成凝膠狀，然后取KM小鼠6 只，將凝膠狀液體置于切口內(nèi)皮下，并遠(yuǎn)離切口，最后將切口縫合。7天后取樣檢測埋植部位 的炎癥反應(yīng)，結(jié)果如圖1所示。結(jié)果顯示，粘合劑在埋植部位無炎癥反應(yīng)。再檢測埋植部位 的降解情況，結(jié)果如表1所示。
[0029] 表1、埋植7天降解率
[0030]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述軟組織為肌肉、脂肪、血管或內(nèi)臟。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述內(nèi)臟為腸。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于：所述軟組織填充材料的制備 方法為將大鯢粘液冷凍成固體，然后冷凍真空干燥去除水分，再將干燥的大鯢粘液粉碎，滅 菌，即得；或?qū)⒋篥F粘液于溫度不高于37°C的條件下真空干燥，再將干燥的大鯢粘液粉碎， 滅菌，即得。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于：所述冷凍的條件是在溫度不高于-20°C下 冷凍。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述冷凍的條件是在溫度 為-80°C~-20°C下冷凍。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述冷凍真空干燥的條件是在溫度小 于-50°C、真空度小于20Pa條件下冷凍干燥至少48小時(shí)。
8. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述粉碎為超微粉碎至粒徑為300~ 1000 目。
9. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述滅菌為2~5 X 10 4Gy劑量的60C〇 y 射線照射滅菌。
【專利摘要】本發(fā)明公開了大鯢粘液在制備軟組織填充材料中的應(yīng)用，利用大鯢粘液的粘合性能，能夠在生理鹽水中形成凝膠狀，并且具有可降解和生物相容性好的優(yōu)點(diǎn)，可作為軟組織填充的植入材料，用于填充軟組織損傷或病變造成的空腔和缺損部位，并且該填充劑來源于大鯢粘液，為天然組分，安全性好，具有較好的應(yīng)用前景。
【IPC分類】A61L27-36
【公開號(hào)】CN104721882
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510154466
【發(fā)明人】商海濤, 王瑩, 陳兵, 茍強(qiáng), 魏泓, 邢孟秋, 葛良鵬, 周明輝
【申請(qǐng)人】重慶馗旭生物科技股份有限公司, 周明輝, 魏泓, 邢孟秋
【公開日】2015年6月24日
【申請(qǐng)日】2015年4月2日