一種重組甘精胰島素注射液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種胰島素制劑，尤其涉及一種含 有重組甘精胰島素的注射液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 重組甘精胰島素是一種通過基因重組技術(shù)獲得并用于治療I、II型糖尿病的長效 胰島素類生物制品，其持續(xù)控制血糖的原理為：皮下注射后甘精胰島素分子立即聚合，因而 溶解度降低，形成甘精胰島素沉淀物，機體吸收延遲，其降糖作用的時間也被延長。重組甘 精胰島素是當前治療I、II型糖尿病十分方便和有效的藥物，與普通胰島素的不同之處在 于，A鏈羧基端21位的最后一個天門冬氨酸被甘氨酸所取代，B鏈羧基端30位蘇氨酸后 的31和32位連接了兩個精氨酸，分子式為C267H404N72078S6，分子量6063,以此改造 后的活性胰島素即甘精胰島素。重組甘精胰島素可在糖尿病患者體內(nèi)平穩(wěn)發(fā)揮藥效24小 時以上，并且無明顯的血藥高峰值和低峰值，很適合用于低基礎(chǔ)胰島素的替代治療。
[0003] 重組甘精胰島素的等電點約為7. 0,在pH7. 0左右時其在水中溶解度最小，而在酸 性條件下溶解度較好。因此，現(xiàn)有甘精胰島素制劑均為酸性溶液的形式注射使用。但甘精胰 島素在酸性溶液體系中不穩(wěn)定，隨著放置時間的延長，其有關(guān)蛋白和高分子蛋白數(shù)值會逐 漸升高，因而其貯藏條件為2_8°C。然而，胰島素類制劑通常需要安裝在特定的裝置內(nèi)經(jīng)專 用的注射系統(tǒng)給藥，一旦開始使用（通?？煞磸?fù)注射)，其通常會不定時地被佩戴在身體上， 暴露于體熱或運動中。現(xiàn)有的重組甘精胰島素制劑在這些條件下僅具有有限的穩(wěn)定性，因 此通過采取一定的方式增強其長期物理穩(wěn)定性就顯得十分必要。
[0004] 現(xiàn)有技術(shù)中有關(guān)重組甘精胰島素注射液加入穩(wěn)定劑來增強其運輸、存儲和應(yīng)用過 程中的穩(wěn)定性。CN1662252A中公開了通過加入吐溫-20等表面活性劑增強酸性胰島素注 射液的穩(wěn)定性；CN1498113A公開了一種通過加入表面活性劑(乳化劑)等制備穩(wěn)定的無鋅 或低鋅離子胰島素注射液。眾所周知，吐溫類表面活性劑用于注射劑，易發(fā)生過敏、溶血等 不良反應(yīng)，其安全性一直存在爭議。CN1266371A中描述了用TRIS或精氨酸緩沖液作為穩(wěn) 定劑的胰島素注射液；CN102319422A公開了一種包含200~lOOOU/ml的甘精胰島素的含 水藥物制劑及其用途，US5866538公開了通過含有濃度為5~IOOmM的甘油和NaCl使其 穩(wěn)定性增強的胰島素注射液；US5948751公開了通過加入甘露醇或類似的糖獲得物理穩(wěn)定 性增強的胰島素制劑；CN102188367A公開了通過加入PEG和枸櫞酸來提高甘精胰島素注 射液的穩(wěn)定性。上述專利技術(shù)對于胰島素制劑穩(wěn)定性的研究多是針對其中的賦形劑，雖然 取得了一定的成果，但是其穩(wěn)定性仍然不能滿足制劑在長期放置后穩(wěn)定性的要求，從而造 成注射劑的保存周期縮短，臨床用藥存在安全隱患。
[0005] 另外，CN101573133A公開了一種PEG化延長的胰島素，其提到在將胰島素以特定 的方式PEG化后，可以改變其溶解性能，在中性pH值時是可溶的，期待能提高生物利用度， 延長作用時間，達到可肺部給藥的效果，其穩(wěn)定性也得到一定的提高。但其并未提到PEG與 胰島素未以共價鍵結(jié)合對胰島素制劑的穩(wěn)定性作用，且其PEG化制備步驟過于復(fù)雜，設(shè)備 條件要求高，生產(chǎn)成本高，難以實現(xiàn)大生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 鑒于重組甘精胰島素在酸性水溶液中穩(wěn)定性差的問題，以及現(xiàn)有技術(shù)通過加入一 些表面活性劑解決其穩(wěn)定性的同時增加了致過敏反應(yīng)等問題，本發(fā)明的目的在于提供一種 質(zhì)量穩(wěn)定、安全性好的新型重組甘精胰島素注射液及其制備方法。
[0007] 由于甘精胰島素在等電點附近的穩(wěn)定性最好，因此注射液的pH值若接近等電點， 則必然具有更好的穩(wěn)定性，即保證甘精胰島素在較高PH條件下的溶解度顯得尤為重要?；?于此研究思路，發(fā)明人考慮到在注射液中加入磺丁基-β -環(huán)糊精作為增溶劑，然而按照常 規(guī)用量加入磺丁基-β-環(huán)糊精后，甘精胰島素的溶解度沒有明顯改變。在一次試驗中發(fā)明 人意外地發(fā)現(xiàn)，將磺丁基-β -環(huán)糊精的添加量降低至常規(guī)用量的十分之一時，甘精胰島素 在水溶液中的溶解度有了非常顯著的提高，從而實現(xiàn)了本發(fā)明的目的。具體地，本發(fā)明的技 術(shù)方案為： 一種重組甘精胰島素注射液，該注射液中含有重組甘精胰島素、磺丁基-β-環(huán)糊精、 鋅鹽和防腐劑，其中的重組甘精胰島素在注射液中的濃度為50-200IU/mL，磺丁基-β -環(huán) 糊精在注射液中的濃度為0. 01-0. 05g/mL。
[0008] 為了更好地試驗本發(fā)明的目的，發(fā)明人對所述重組甘精胰島素注射液的技術(shù)參數(shù) 做了進一步的優(yōu)選，具體為： 所述的重組甘精胰島素在注射液中的濃度為l〇〇IU/mL，磺丁基-β -環(huán)糊精在注射液 中的濃度為〇. 02-0. 03g/mL。該注射液采用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)pH值為5. 0-5. 5。
[0009] 在本發(fā)明的一個最優(yōu)選的實施例中，所述的重組甘精胰島素在注射液中的濃度為 100IU/mL，磺丁基-β -環(huán)糊精在注射中的質(zhì)量體積百分數(shù)為3. 0%，該注射液采用pH調(diào)節(jié)劑 調(diào)pH值為5. 5。
[0010] 另外，本發(fā)明所述的重組甘精胰島素注射液，其中的防腐劑為間甲酚，鋅鹽為氯化 鋅。優(yōu)選間甲酚的用量為2.5-3. Omg/ml ;鋅鹽的用量為25-3(^g/ml。
[0011] 本發(fā)明還提供了上述重組甘精胰島素注射液的制備方法，該方法包括如下步驟： (1) 將磺丁基-β -環(huán)糊精加入到30-80%全量的注射用水中攪拌使溶解，加入甘精胰島 素，于0-5°C并攪拌的條件下放置12~24h，備用； (2) 將鋅鹽和防腐劑加入到余量的注射用水中，攪拌使溶解，備用； (3) 將步驟（1)配制的溶液在攪拌條件下加入到步驟（2)配制的溶液中，混合均勻，加 入PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)藥液pH值至5. 0-5. 5,過濾除菌，灌裝，得重組甘精胰島素注射液。
[0012] 在上述重組甘精胰島素注射液的制備方法中，所述的pH調(diào)節(jié)劑為0. lmol/L鹽酸； 如果在條件pH過程中鹽酸滴加過多導(dǎo)致pH低于目標值，則可以用0. lmol/L氫氧化鈉溶液 調(diào)商。
[0013] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明涉及的重組甘精胰島素注射液及其制備工藝具有以下優(yōu) 點和顯著的進步性： (1)穩(wěn)定性好：磺丁基-β -環(huán)糊精能提高重組甘精胰島素的溶解度，保證胰島素在較 高PH條件下溶解度能夠符合制備注射液的要求。由于甘精胰島素在更接近等電點的pH條 件下的穩(wěn)定性較好，因此提高注射液的PH值能夠保證更好的穩(wěn)定性。
[0014] (2)刺激性小，安全性高：磺丁基-β -環(huán)糊精為美國FDA批準的可用于注射給藥 的輔料，其現(xiàn)有注射液中的用量為60%左右，而在本發(fā)明中的最大用量僅為5%，因此刺激性 更小,安全性更高。
[0015] (3)制備工藝簡單，易于工業(yè)化大生產(chǎn)。
[0016]
【具體實施方式】
[0017] 現(xiàn)通過以下實施例來進一步描述本發(fā)明制劑的制備過程和實施效果，但本發(fā)明的 保護范圍并不局限于以下實施例。需要說明的是，以下實施例中的