一種半枝蓮提取物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥材提取技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種半枝蓮提取物及其制備方 法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 人類皰疹病毒根據(jù)其生物學(xué)特征可分為α、β和Y三種亞型，其中EB病毒 (Epstein-Barr virus)屬于γ亞型，也稱為4型人類皰疹病毒（HHV-4)。EB病毒是1964 年Epstein和Barr最先從非洲兒童惡性淋巴瘤（Burkitt lymphoma)體外培養(yǎng)的淋巴瘤細(xì) 胞系中，用電鏡發(fā)現(xiàn)的一種新的皰疹病毒，并命名為EB病毒。EBV的基因組為線性雙鏈DNA， 長(zhǎng)度172kb，編碼約100個(gè)基因。與人類皰疹病毒一樣，EBV有兩種生活周期，潛伏期和裂解 期。在潛伏期EBV只表達(dá)少量的基因以逃逸宿主的殺傷；而在裂解期EBV表達(dá)幾乎全部的 基因，病毒進(jìn)行大量復(fù)制以維持其生命活動(dòng)并使疾病進(jìn)展。EBV編碼的早期基因 ZTA和RTA 表達(dá)可以啟動(dòng)下游大量基因表達(dá)，使EBV由潛伏期進(jìn)入裂解期。EBV可以感染人類的B淋 巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞和NK/T細(xì)胞等。與EBV相關(guān)的人類疾病有傳染性單核細(xì)胞增多癥、慢性 活動(dòng)性EBV感染、EBV相關(guān)嗜血淋巴組織細(xì)胞增生癥、Burkitt' s淋巴瘤、何杰金病、鼻咽癌 等。雖然已經(jīng)證實(shí)EBV感染可以引起上述疾病，但目前還沒(méi)有一種針對(duì)于γ皰疹病毒的特 效藥。目前醫(yī)藥界迫切需要針對(duì)EBV感染疾病的特效藥，從而改善γ型人類皰疹病毒相關(guān) 惡性疾病的治療效果。從中草藥中發(fā)現(xiàn)天然抗皰疹病毒活性化合物或先導(dǎo)物是目前國(guó)內(nèi)外 研究的重要的方面和非?；钴S的領(lǐng)域。至今發(fā)現(xiàn)的一些天然化合物具有抗EBV活性，分屬 于倍半萜、三萜、黃酮、木質(zhì)素類等。目前約有近百個(gè)品種正在進(jìn)行臨床前研究和臨床實(shí)驗(yàn)。 中草藥半枝蓮為唇形科黃芩屬植物半枝蓮的干燥全草，在我國(guó)分布廣泛，資源豐富。該植物 具有突出的抗菌、消炎、抗病毒及抗腫瘤等功能，現(xiàn)多單用或者與其他藥組成復(fù)方，治療肝 癌、肺癌、乳腺癌、肝硬化等疾病。目前從半枝蓮全草中發(fā)現(xiàn)的化合物主要是黃酮化合物和 一系列具有細(xì)胞毒性的新克羅烷型二萜類化合物。但現(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)有半枝蓮提取物及其 新克羅烷型二萜成分的抗EBV病毒裂解復(fù)制活性的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供半枝蓮提取物在制備防治EB病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
[0004] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種新的來(lái)源于半枝蓮新克羅烷型二萜類化合物。
[0005] 本發(fā)明的另一目的在于提供所述的半枝蓮提取物的制備方法。
[0006] 本發(fā)明通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，半枝蓮提取物對(duì)EB病毒復(fù)制有良好的抑制作用，因此，本 發(fā)明要求保護(hù)半枝蓮提取物在制備防治EB病毒感染藥物中的應(yīng)用。
[0007] 所述半枝蓮提取物的制備方法為，將半枝蓮（Scutellaria barbata)全草，曬干， 粉碎，用95%乙醇室溫浸提三次，每次24小時(shí)，合并濃縮液，分別用石油醚、乙酸乙酯和正 丁醇萃取，減壓濃縮回收溶劑，得到乙酸乙酯部分，乙酸乙酯部分先過(guò)大孔樹(shù)脂（DlOl)，以 乙醇/水梯度洗脫，得到6個(gè)餾分。各餾分再分別過(guò)硅膠柱，反相C 18柱和半制備液相色譜 柱，反復(fù)分離得到。
[0008] 其中，所述的乙醇/水體系中乙醇和水的體積比為：0:100、10:90、20:80、30:70、 40:60、50:50、60:40、70:30、80:20:、95:5、100:0。
[0009] 本發(fā)明從半枝蓮提取物中分離得到3種新結(jié)構(gòu)的化合物和4種已知結(jié)構(gòu)的化合 物，這七種化合物對(duì)EB病毒復(fù)制有良好的抑制作用，這七種化合物的結(jié)構(gòu)分別如下：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 半枝蓮提取物在制備防治EB病毒感染藥物中的應(yīng)用。
2. 權(quán)利要求1所述半枝蓮提取物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟，將半枝蓮全 草，曬干后粉碎，用95%乙醇室溫浸提三次，每次24小時(shí)，合并濃縮液，分別用石油醚、乙酸 乙酯和正丁醇萃取，得到乙酸乙酯部分，乙酸乙酯部分過(guò)大孔樹(shù)脂，以乙醇/水過(guò)柱，餾分 再經(jīng)反復(fù)分離得到。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的乙醇/水體系中乙醇和水的體 積比為：0:100、10:90、20:80、30:70、40:60、50:50、60:40、70:30、80:20:、95:5、100:0。
4. 一種從半枝蓮提取物中分離的新克羅烷型二萜類化合物，其特征在于，具有式（I ) 所示結(jié)構(gòu)： 式（I )。
5. 從半枝蓮提取物中分離的結(jié)構(gòu)式如式（II)所示的化合物在制備防治EB病毒感染藥 物中的應(yīng)用， 式（II)。
6. 防治EB病毒感染的藥物，其特征在于，含有有效量權(quán)利要求1所述的半枝蓮提取物 和/或藥學(xué)上可接受的載體。
7. 防治EB病毒感染的藥物，其特征在于，含有有效量式（II)所示化合物中的一種或多 種和/或藥學(xué)上可接受的載體。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥材提取技術(shù)領(lǐng)域，具體公開(kāi)了一種半枝蓮提取物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明從半枝蓮提取物中分離得到3種新結(jié)構(gòu)的化合物和4種已知結(jié)構(gòu)的化合物，這7種化合物對(duì)EB病毒復(fù)制有良好的抑制作用，且毒副作用低，因此，這7種化合物在制備防治EB病毒感染的藥物中具有很大的應(yīng)用前景。
【IPC分類】A61P31-22, A61K31-365, C07D307-58, A61K36-539
【公開(kāi)號(hào)】CN104644744
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410566949
【發(fā)明人】顧瓊, 吳泰宗, 徐峻, 袁巖, 王倩, 王彥
【申請(qǐng)人】中山大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2014年10月21日