低分子肝素在制備治療瘙癢藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種低分子肝素的新的醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 特應(yīng)性皮炎是一種慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病，可在任何年齡發(fā)病，主要發(fā)生 于兒童，特別是嬰幼兒期，是影響兒童生長發(fā)育和心理健康的常見疾病之一（參見文 獻(xiàn) I. Yosipovitch G，Greaves MW，Schmelz M[J]· Itch. Lancet, 2003, 361:690-694.; 2.Twycross Rj Greaves MWj Handwerker H，et al.Itch: scratching more than the surface[J]. QJM，2003, 96:7-26.)。特應(yīng)性皮炎患者的臨床表現(xiàn)主要是劇烈瘙癢，往往夜間 加重，瘙癢程度與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。目前特應(yīng)性皮炎的治療仍無特效方法，臨床主要 以皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)和局部UV照射治療為主，但由于其嚴(yán)重副作用無法長期用藥，治療 間斷后，瘙癢迅速復(fù)發(fā)。因此，特應(yīng)性皮炎瘙癢治療成為亟待解決的問題。
[0003] 近期研究顯示，組成表皮的角質(zhì)形成細(xì)胞（keratinocyte，KC)，參與構(gòu)成瘙癢 的"受體，'（參見文獻(xiàn) 3. Inoue K，Koizumi S，F(xiàn)uzuwara S，et al. Functional vanilloid receptors in cultured normal human epidermal keratinocytes[J]. Biochem Biophys Res Commun 2002;291:124-9)，角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)一系列的神經(jīng)肽調(diào)節(jié)分子和受體參 與瘙癢癥的發(fā)生，這些分子與受體包括類罌粟堿，神經(jīng)生長因子（NGF)，p物質(zhì)，野香子 蘭受體，蛋白酶活化受體-2(proteinase activated receptor_2，PAR-2)以及電壓門 控ATP通道，所有這些都具有指向神經(jīng)細(xì)胞的特征。所以表皮和深入表皮的C神經(jīng)纖維 也可以看做瘙癢的"受體"。蛋白酶活化受體（proteinase activated receptors，PARs) 屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族的成員，介導(dǎo)跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，目前已經(jīng)克隆出人和鼠的4種 蛋白酶活化受體，PARs在不同組織細(xì)胞包括皮膚均有表達(dá)，具有廣泛的生物學(xué)活性，參 與機(jī)體的固有免疫和天然防御（參見文獻(xiàn)4. Shpacovitch V，F(xiàn)eld M，Bunnett Nff，et al.Protease-activated receptors:novel PARtners in innate immunity[J]. Trend in Immunology,2007, 28:541-550. ；5.Steinhoff M，Buddenkotte Jj Shpacovitch V，et al.Proteinaseactivated receptors:transducers of proteinase-mediated signaling in inflammation and immune response [J]. Endocr Rev，2005, 1:1-43.) 〇 目前已發(fā)現(xiàn) PAR-2在病理生理方面和瘙癢相關(guān)（參見文獻(xiàn)6. Vergnolle N，F(xiàn)erazzini M，D'AndTea MR， et al. Proteinase-activated receptors ：novel signals for peripheral nerves[J]. Trends Neurosci，2003,26(9) :496-500.)。
[0004] 目前以PAR-2為靶點(diǎn)治療瘙癢的研究主要集中在直接干預(yù)PAR-2激活，包括抑 制胰蛋白酶活性，單克隆抗體封閉PAR-2受體，阻斷PRA-2活化的小分子化合物等方面 (參見文獻(xiàn) 7. Malcolm W Greaves. Recent Advances in Pathophysiology and Current Management of Itch[J].Ann Acad Med Singapore，2007;36:788-92)，但目前的研究進(jìn)展 距離實(shí)際應(yīng)用還很遙遠(yuǎn)。另外由于激活PAR-2的物質(zhì)并不單一；PAR-2分布的廣泛性導(dǎo)致 單克隆抗體潛在的副作用；僅發(fā)現(xiàn)的幾個小分子化合物因效價弱難以實(shí)際應(yīng)用；致使此方 面的研究舉步維艱。
[0005] 低分子肝素，英文名稱：Low Molecular Heparin,中文別名：低分子量肝素鈉、肝 保明、立及青，英文別名：Calcium-Heparine、Cale-Hepin、Minihep-Calcium，為低分子量 的硫酸氨基葡萄糖，平均分子量4000?8000,由普通肝素解聚制備而成的一類分子量較低 的肝素的總稱，根據(jù)分子量、鏈末端結(jié)構(gòu)和化合物結(jié)合鹽類的不同，可以分為不同的商品制 齊U，目前中國市場上使用的主要有達(dá)肝素鈉、依諾肝素鈉、阿地肝素鈉和那屈肝素鈣，均為 無色或淡黃色的澄明液體。目前，對于低分子肝素的研究多集中在其抗凝功能中，并具有明 顯而持久的抗血栓作用。
[0006] 目前有關(guān)低分子肝素在抗瘙癢中的作用尚無文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供低分子肝素的新的醫(yī)藥用途，具體是低分子肝素在制備治 療瘙癢藥物中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明提供了低分子量肝素 （Low molecular weight heparin,LMWH)在制備治療 瘙癢的藥物（抗瘙癢藥物）中的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明所述的低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，所述的藥物是以低分 子肝素作為唯一活性成份，或者包含低分子肝素的藥物組合物。
[0010] 所述的藥物中低分子肝素的含量為〇. l-99wt%，較優(yōu)的為0. 5-10wt%。
[0011] 所述的藥物可以為外用制劑，如乳劑、軟膏劑、橡膠硬膏、膠劑、膜劑、酊劑、酒劑、 露劑、海綿劑、離子透入劑，或透皮吸收劑等。較優(yōu)的為凝膠制劑或軟膏制劑。
[0012] 本發(fā)明的主要技術(shù)方案如下：
[0013] 利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化低分子肝素凝膠處方，在瘙癢動物模型中驗(yàn)證低分子肝素 凝膠是否具有抗瘙癢作用。
[0014] 依據(jù)上述技術(shù)方案，本發(fā)明的具體實(shí)施方法是：
[0015] 1、利用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化低分子肝素凝膠處方
[0016] I. ILMWH含量測定方法：
[0017] 以天青 A法（參見文獻(xiàn) 8. Jiao Y, Ubrich N, Marchand-Arvier M, et al, In vitro and in vivo evaluation of oral heparin-loaded polymeric nanoparticles in rabbits. Circulation, 2002. 105 (2) : p. 230-5. ；9. Song Y K and Kim C K1Topical delivery of low-molecular-weight heparin with surface-charged flexible liposomes. Biomaterials, 2006. 27(2) :p. 271-80.)檢測溶于 LMWH 含量。LMWH 與天青 A 混 合后于530nm波長處有最大吸收值。研究LMWH濃度與吸收度的線性關(guān)系，以及本方法的精 密度，準(zhǔn)確度，回收率；
[0018] L 2篩選建立LMWH凝膠處方
[0019] 配方篩選采用三因素三水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，按正交設(shè)計(jì)表L9(34)進(jìn)行擬水平試 驗(yàn)，考察凝膠處方中卡波姆、氮酮、低分子肝素的用量，以LMWH小鼠離體皮膚滲透率為檢測 指標(biāo)，確定最佳配方。
[0020] I. 3LMWH脂質(zhì)體軟膏的透皮吸收研究。
[0021] 利用改良的Franz擴(kuò)散池進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將小鼠去毛皮膚固定于釋放池的下口，角質(zhì) 層面向釋放池，釋放面積I. 13cm2。取一定量的LMWH脂質(zhì)體軟膏涂抹于皮膚上。接收液為 生理鹽水，恒溫37°C，恒速電磁攪拌。分別于1、2、4、6、8、1此從取樣口取樣，測定LMWH的含 量。根據(jù)公式
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 低分子量肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，其特征在于， 所述的藥物是以低分子肝素作為唯一活性成份，或者包含低分子肝素的藥物組合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，其特征在于， 所述的藥物中低分子肝素的含量為〇. l-99wt%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，其特征在于， 所述的藥物中低分子肝素的含量為〇. 5-lOwt%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2、3或4所述的低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，其特征 在于，所述的藥物為外用制劑。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2、3或4所述的低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，其特征 在于，所述的藥物為凝膠制劑或軟膏制劑。
7. -種低分子肝素凝膠制劑在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的低 分子肝素凝膠制劑是以低分子肝素作為唯一活性成份，按照藥劑領(lǐng)域常規(guī)方法制備凝膠制 劑。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種低分子肝素凝膠制劑在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用， 其特征在于，所述的低分子肝素凝膠制劑中各組分及其重量百分比為： 低分子肝素 0.5?10% 促透劑 0.5?30% 凝膠基質(zhì) 0.5?40% 水余量。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種低分子肝素凝膠制劑在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用， 其特征在于，所述的促透劑為月桂氮卓酮、N-甲基吡咯烷酮、薄荷醇、1，2_丙二醇中的一種 或兩種以上。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種低分子肝素凝膠制劑在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng) 用，其特征在于，所述的凝膠基質(zhì)為甲基纖維素、羥丙甲纖維素、卡波姆940,或卡波姆980 中的一種。
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供了低分子肝素在制備治療瘙癢的藥物中的應(yīng)用。進(jìn)一步地，本發(fā)明還提供了一種低分子肝素凝膠制劑，本發(fā)明的凝膠制劑通過動物瘙癢模型證明，其抗瘙癢優(yōu)于復(fù)方醋酸地塞米松乳膏組。本發(fā)明發(fā)掘了低分子肝素的新的醫(yī)療用途，也為臨床抗瘙癢治療提供了新治療手段。
【IPC分類】A61K9-06, A61K31-727, A61P17-04
【公開號】CN104606223
【申請?zhí)枴緾N201510026240
【發(fā)明人】胡晉紅, 李超
【申請人】中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年1月19日