一種防治高尿酸血癥的八仙花醇提物及其提取方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥提取物，具體涉及一種防治高尿酸血癥的八仙花醇提物及其 提取方法和用途，屬于中藥材提取技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著生活節(jié)奏的加快，人們的生活水平在提1?，運(yùn)動(dòng)時(shí)間在減少，而1?尿酸血癥的 發(fā)病率則呈上升趨勢(shì)。高尿酸血癥的發(fā)病機(jī)理是由于嘌呤代謝紊亂而導(dǎo)致尿酸生成過(guò)多或 者腎臟發(fā)生排泄障礙而造成的，其嚴(yán)重的后果是可導(dǎo)致痛風(fēng)、尿酸性腎損害及心血管損害。 現(xiàn)有的用于治療高尿酸血癥或痛風(fēng)的藥物副作用比較多。相對(duì)于秋水仙堿、苯溴馬隆等藥 物，臨床使用的黃嘌呤氧化酶抑制劑別嘌呤醇相對(duì)安全，但仍有約2%的病人治療3周后可 見(jiàn)皮疹及皮膚瘙癢，繼續(xù)用藥會(huì)造成過(guò)敏綜合癥，需要終止治療。最新在美國(guó)批準(zhǔn)上市的另 一種黃嘌呤氧化酶抑制劑抗痛風(fēng)藥物非布索坦其安全性并沒(méi)有高于別嘌呤醇。因此從天然 草藥中尋找更為安全的抗痛風(fēng)替代藥物仍是藥學(xué)研究的熱點(diǎn)。 八仙花為落葉灌木，小枝粗壯，皮孔明顯。葉大而稍厚，對(duì)生，倒卵形，邊緣有粗鋸齒， 葉面鮮綠色，葉背黃綠色，葉柄粗壯?；ù笮停稍S多不孕花組成頂生傘房花序。花色多變， 初時(shí)白色，漸轉(zhuǎn)藍(lán)色或粉紅色。高1-4米；莖常于基部發(fā)出多數(shù)放射枝而形成一圓形灌叢； 枝圓柱形，粗壯，無(wú)毛，具少數(shù)長(zhǎng)形皮孔。葉紙質(zhì)或近革質(zhì)，近圓形或闊卵形，長(zhǎng)1. 4-2. 4厘 米，寬1-2. 4厘米，粉紅色、淡藍(lán)色或白色；孕性花極少數(shù)，具2-4毫米長(zhǎng)的花梗；萼筒倒圓 錐狀，長(zhǎng)1. 5-2毫米，與花梗疏被卷曲短柔毛，萼齒卵狀三角形，長(zhǎng)約1毫米；花瓣長(zhǎng)圓形，長(zhǎng) 3-3. 5毫米；雄蕊10枚，近等長(zhǎng)，不突出或稍突出，花藥長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)約1毫米；子房大半下位， 花柱3,結(jié)果時(shí)長(zhǎng)約1. 5毫米，柱頭稍擴(kuò)大，半環(huán)狀。蒴果未成熟，長(zhǎng)陀螺狀，連花柱長(zhǎng)約4. 5 毫米，頂端突出部分長(zhǎng)約1毫米，約等于蒴果長(zhǎng)度的1/3;種子未熟?；ㄆ?-8月。通過(guò)檢 索國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，尚沒(méi)有發(fā)現(xiàn)八仙花防治高尿酸血癥的文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了克服現(xiàn)有促進(jìn)尿酸排泄類(lèi)藥物的不足，本發(fā)明通過(guò)對(duì)傳統(tǒng)中藥材進(jìn)行深入研 究，提供一種防治高尿酸血癥的八仙花醇提物及其提取方法和用途。該八仙花醇提物作為 活性成分，其用于高尿酸血癥患者的治療時(shí)，具有促進(jìn)尿酸排泄降低尿酸的作用，療效確 切，毒副作用小。 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明人通過(guò)大量試驗(yàn)研究和不懈探索，最終獲得了如下技 術(shù)方案： 一種防治高尿酸血癥的八仙花醇提物，其中，所述的八仙花醇提物為八仙花葉的無(wú)水 乙醇浸提物。需要說(shuō)明的是，八仙花葉為虎耳草科植物繡球辦i/raflgea 的葉 子。
[0004] 本發(fā)明所述防治高尿酸血癥的八仙花醇提物，其中所采用的八仙花葉原料為八仙 花的新鮮嫩葉。
[0005] 另外，本發(fā)明還提供了上述八仙花醇提物的提取方法，采用該方法提取分離的八 仙花醇提物可顯著降低患者的血清尿酸、肌酐水平，從而用以防治高尿酸血癥。具體地，本 發(fā)明的提取分離方法具體為如下技術(shù)方案： 一種八仙花醇提物的提取方法，該方法包括如下步驟：將八仙花的新鮮嫩葉磨漿，所得 漿液中加無(wú)水乙醇進(jìn)行超聲浸提，提取溫度不高于55°C，所得浸提液離心，分離上清液，旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無(wú)醇味，干燥，得八仙花醇提物。
[0006] 對(duì)上述提取分離方法的工藝參數(shù)做進(jìn)一步的優(yōu)化，即：所述的八仙花醇提物的 提取方法，其中所述的超聲浸提步驟的超聲頻率為25-30kHz ;所述的離心步驟的轉(zhuǎn)速為 1500-2200rpm〇
[0007] 采用尿酸酶抑制劑氧嗪酸鉀鹽為化學(xué)誘導(dǎo)劑，抑制小鼠體內(nèi)尿酸分解造成小鼠高 尿酸血癥模型，用于研究痛風(fēng)發(fā)病的機(jī)制，評(píng)價(jià)不同藥物對(duì)痛風(fēng)的治療效果。本發(fā)明人通過(guò) 該動(dòng)物模型進(jìn)行試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，八仙花醇提物具有促進(jìn)尿酸排泄降低血清尿酸和肌酐的顯 著作用，表明八仙花醇提物具有一定的抗痛風(fēng)效果，同時(shí)能逆轉(zhuǎn)高尿酸血癥對(duì)小鼠腎臟造 成的損傷。另外，黃嘌呤氧化酶XOD是調(diào)控尿酸生成的最終環(huán)節(jié)，在高尿酸血癥的發(fā)病中占 有重要的地位；而腺苷脫氨酶ADA是腺苷酸分解代謝的重要酶之一，在嘌呤分解代謝中具 有重要作用。最新研究表明，ADA活性的增加會(huì)升高機(jī)體體內(nèi)黃嘌呤與次黃嘌呤的濃度，進(jìn) 而影響尿酸的代謝。在本發(fā)明的試驗(yàn)中，與模型組相比，八仙花不同劑量組均能在一定程度 上抑制高尿酸血癥小鼠肝臟XOD和ADA的活性。這表明，八仙花能通過(guò)抑制XOD和ADA的 活性減少體內(nèi)黃嘌呤與次黃嘌呤的生成量，進(jìn)而減少體內(nèi)尿酸生成?；谶@些研究成果，本 發(fā)明還提供一種制藥用途，即：八仙花醇提物在制備治療高血尿酸性疾病的藥物中的用途。 優(yōu)選所述的高血尿酸性疾病為痛風(fēng)，比如痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。
[0008] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明涉及的八仙花醇提物具有促進(jìn)尿酸排泄降低尿酸的作 用，同時(shí)能逆轉(zhuǎn)高尿酸血癥對(duì)患者腎臟造成的損傷，從而阻止或延緩高尿酸血癥的發(fā)生發(fā) 展，減少痛風(fēng)、腎臟疾病的發(fā)生。
【具體實(shí)施方式】
[0009] 以下是本發(fā)明八仙花醇提物的具體制備實(shí)施例及其對(duì)小鼠高尿酸血癥模型的防 治效果試驗(yàn)例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步作描述，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于這 些實(shí)施例。
[0010] 實(shí)施例1八仙花醇提物的制備 八仙花的新鮮嫩葉I. 3kg，清洗干凈，采用膠體磨磨漿，所得漿液中加入無(wú)水乙醇進(jìn)行 三次超聲浸提，乙醇的體積用量分別為八仙花葉質(zhì)量的1〇、8、6倍，每次提取2h，超聲頻率 為28kHz，熱水浴保證提取溫度在50°C左右，攪拌轉(zhuǎn)速為30rpm。過(guò)濾，合并三次所得提取 液，2000rpm離心，上清液以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮，溫度45°C，真空度0,1MPa，直到?jīng)]有乙醇 味為止，然后放入冷凍干燥箱進(jìn)行干燥，得到70. 07g干浸膏，得率為5. 39%，將干浸膏粉碎 成細(xì)粉，過(guò)100目篩，即為八仙花醇提物。
[0011] 實(shí)施例2八仙花醇提物對(duì)小鼠高尿酸血癥模型的防治試驗(yàn)研究 成年雄性SPF級(jí)KM小鼠48只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為如下四組：正常對(duì)照組、模 型對(duì)照組、八仙花醇提物高、低劑量組，每組12只。試驗(yàn)開(kāi)始后，各組小鼠以體質(zhì)量為基準(zhǔn) 按如下劑量灌胃給予相應(yīng)的受試物，連續(xù)給藥7d，每天一次，最后一次于造模Ih后給藥。
[0012] 正常對(duì)照組：生理鹽水0· 15ml/10g ; 模型對(duì)照組：生理鹽水〇. 15ml/10g ; 八仙花高劑量組：按實(shí)施例1制備的八仙花醇提物2. 88g/kg ; 八仙花低劑量組：按實(shí)施例1制備的八仙花醇提物I. 44g/kg。
[0013] 按如下方法建立高尿酸血癥小鼠模型：采用尿酸酶抑制劑氧嗪酸鉀為化學(xué)誘導(dǎo) 齊U，抑制小鼠體內(nèi)尿酸分解，造成小鼠高尿酸血癥模型。于最后一次給藥前l(fā)h，按照400mg/ kg的劑量，對(duì)小鼠腹腔注射氧嗪酸鉀。正常對(duì)照組腹腔注射相應(yīng)體積的生理鹽水溶液。最 后一次灌胃給藥接受Ih后，小鼠眼眶后靜脈叢采血，全血lOOOOr/min離心lOmin，離心后 上層血清作為樣本，采用尿酸測(cè)定試劑盒與肌酐測(cè)定試劑盒檢測(cè)血清尿酸與肌酐水平。另 夕卜，并于冰臺(tái)快速分取肝臟組織塊，稱(chēng)重后按體積比加9倍預(yù)冷的生理鹽水制成10%勻漿， 2500r/min離心10min，取上清按照試劑盒規(guī)定方法測(cè)定肝臟黃嘌呤氧化酶（XOD)及腺苷脫 氨酶（ADA)活性。
[0014] 表1各組小鼠血清尿酸與肌酐水平比較_^^
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種防治高尿酸血癥的八仙花醇提物，其特征在于，所述的八仙花醇提物為八仙花 葉的無(wú)水乙醇浸提物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述防治高尿酸血癥的八仙花醇提物，其特征在于，所述的八仙花 葉為八仙花的新鮮嫩葉。
3. -種八仙花醇提物的提取方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：將八仙花的新 鮮嫩葉磨漿，所得漿液中加無(wú)水乙醇進(jìn)行超聲浸提，提取溫度不高于55°C，所得浸提液離 心，分離上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無(wú)醇味，干燥，得八仙花醇提物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的八仙花醇提物的提取方法，其特征在于，所述的超聲浸提步 驟的超聲頻率為25-30kHz。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的八仙花醇提物的提取方法，其特征在于，所述的離心步驟的 轉(zhuǎn)速為 1500-2200rpm。
6. 八仙花醇提物在制備治療高血尿酸性疾病的藥物中的用途。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途，其特征在于，所述的高血尿酸性疾病為痛風(fēng)。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種防治高尿酸血癥的八仙花醇提物及其提取方法和用途，所述八仙花醇提物是將八仙花的新鮮嫩葉磨漿后，加無(wú)水乙醇后在低溫條件下浸提而得。本發(fā)明的八仙花醇提物具有促進(jìn)尿酸排泄降低尿酸的作用，同時(shí)能逆轉(zhuǎn)高尿酸血癥對(duì)患者腎臟造成的損傷，從而阻止或延緩高尿酸血癥的發(fā)生發(fā)展，減少痛風(fēng)、腎臟疾病的發(fā)生。
【IPC分類(lèi)】A61K36-185, A61P19-06, A61P13-12
【公開(kāi)號(hào)】CN104586906
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510090956
【發(fā)明人】陳學(xué)紅
【申請(qǐng)人】陳學(xué)紅
【公開(kāi)日】2015年5月6日
【申請(qǐng)日】2015年3月1日