辣椒堿在制備人乙?；D(zhuǎn)移酶激活劑方面的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及辣椒堿在制備人乙?；D(zhuǎn)移酶hMOF激 活劑方面的應(yīng)用，進(jìn)而用于制備治療及預(yù)防與乙酰基轉(zhuǎn)移酶（hMOF)活力過低或低表達(dá)相 關(guān)疾病的食品、藥物或食品及藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 組蛋白修飾是表觀遺傳學(xué)中的重要調(diào)節(jié)機(jī)制之一，它主要包括組蛋白的乙?；?化，甲基化，磷酸化，泛素化和ADP-核糖基化等。大量的研宄已經(jīng)證明組蛋白乙?；?基因的轉(zhuǎn)錄，DNA的復(fù)制和損傷修復(fù)中起著重要的調(diào)控作用。裸露在核小體外的組蛋白N 末端常被不同的酶所修飾。如組蛋白H4的N末端上有多個(gè)賴氨酸位點(diǎn)，如K5,K8,K12和 K16位點(diǎn)，可被多種不同的乙?；D(zhuǎn)移酶所催化。組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶可根據(jù)其催化結(jié)構(gòu) 與性質(zhì)大致歸類為如下兩大類：一是GNAT(GCN-relaedN-acetyltransferase)家族，包 括GCN5和p300/CBP，二是MYST(Moz-Ybf2/Sas2-Tip60)家族，這一家族成員都具有高度 保守的MYSTdomain特征。MOF(Malesabsent迎thefirst)是MYST組蛋白乙?；D(zhuǎn) 移酶家族成員之一，最初是在果蠅中作為雄性X染色體的劑量補(bǔ)償系的重要組成成分而被 發(fā)現(xiàn)（HilfikerA,Hilfiker-KleinerD,PannutiA,andLucchesiJC.Mof,aputative acetyltransferasegenerelatedtotheTip60andMOZhumangenesandtothe SASgenesofyeast,isrequiredfordosagecompensationinDrosophila.EMBO J，1997, 15:2054-60.)。人源hMOF是果蠅dMOF蛋白的直系同源，在體內(nèi)普遍存在和被表達(dá)。 目前的研宄結(jié)果顯示，如果去除人細(xì)胞中的M0F不僅引起廣范圍的H4K16乙?；臏p少， 進(jìn)而導(dǎo)致DNA修復(fù)反應(yīng)異常，而且還可以導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定，染色體畸變，細(xì)胞周期失調(diào)以 及核形態(tài)改變等（ReaS，XouriG,andAkhtarA.Malesabsentonthefirst(M0F):from fliestohuman.Oncogene, 2007, 26:5385-94.)。最近還發(fā)現(xiàn)在人的乳腺癌或髓母細(xì)胞 瘤中，M0F無論是在mRNA水平還是在蛋白表達(dá)量上與正常組織相比都有明顯降低，而且 組蛋白H4K16的乙?；潭扰cM0F的蛋白表達(dá)量成正比（PfisterS，ReaS，Taipale M,MendrzykF,StraubB,IttrichC,Thuerigen0,SinnHP,AkhtarA,andLichterP.The histoneacetyltransferasehMOFisfrequentlydownregulatedinprimarybreast carcinomaandmedulloblastomaandconstitutesabiomarkerforclinicaloutcome inmedulloblastoma.Int.J.Cancer, 2008, 122:1207-13.)，由此說明MOF的蛋白表達(dá)量及 其酶活性可能與這些腫瘤的發(fā)生有著密切的關(guān)系。
[0003] 現(xiàn)階段的研宄表明（CaoL,ZhuL,YangJ,SuJ,NiJ,DuY,LiuD,WangY,Wang F,JinJ,CaiY.CorrelationoflowexpressionofhMOFwithclinicopathological featuresofcolorectalcarcinoma,gastriccancerandrenalcellcarcinoma.Int. J.Oncol, 2014, 44:1207-14. )，hMOF在多種腫瘤組織中呈現(xiàn)低表達(dá)，而且其所修飾的組蛋白 H4K16的乙酰基化水平也有明顯降低。這種hMOF的基因表達(dá)低下與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、惡性 程度和患者的生存期等密切相關(guān)。因此，能提高h(yuǎn)MOF基因的表達(dá)量并使其酶活性增高的藥 物極具治療相關(guān)腫瘤的潛在性和臨床意義。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的是提供辣椒堿在用作人乙?；D(zhuǎn)移酶（hMOF)激活劑方面的新用 途。
[0005] 由于hMOF在多種腫瘤細(xì)胞中處于低表達(dá)狀態(tài)，導(dǎo)致其所修飾的組蛋白H4K16的乙 ?；矫黠@降低，因此國內(nèi)外的很多研宄人員一直都在試圖篩選選擇性的hMOF激活 劑并通過恢復(fù)腫瘤細(xì)胞中hMOF的正常功能從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞生長的目的。我們從對(duì) 一些腫瘤細(xì)胞株有細(xì)胞毒作用的中藥有效成分單體著手，篩選hMOF的激活劑，得到了在細(xì) 胞水平和體外酶活性實(shí)驗(yàn)中對(duì)hMOF有較強(qiáng)激活作用的單體成分-辣椒堿。本發(fā)明進(jìn)一步 利用293T(-種轉(zhuǎn)染了腺病毒E1A基因且同時(shí)表達(dá)SV40大T抗原的永生化人源腎胚上皮 細(xì)胞株）和胃癌細(xì)胞株為研宄材料，通過細(xì)胞內(nèi)瞬轉(zhuǎn)并結(jié)合免疫印跡實(shí)驗(yàn)，雙熒光報(bào)告基 因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)以及體外試管內(nèi)乙酰基轉(zhuǎn)移酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)等手段確定辣椒堿對(duì)hMOF有高效 專一的激活作用。
[0006] 辣椒堿，其化學(xué)名稱為：（反）-N-[(4-羥基-3-甲氧基苯基）-甲基]-8-甲 基_6_壬稀基酰胺，化學(xué)式：C18H27N03，分子量305. 41，其結(jié)構(gòu)式如下所不。辣椒堿是一種 香草酰胺類生物堿，是辣椒果實(shí)中辛辣成分的主要來源并因其具有多種藥物功能而被稱為 "軟黃金"，是一種極具應(yīng)用前景的化學(xué)物質(zhì)。辣椒堿在醫(yī)藥領(lǐng)域目前主要應(yīng)用于鎮(zhèn)痛和止 癢，其鎮(zhèn)痛作用具有持久性和無成癮性等優(yōu)點(diǎn)，辣椒堿軟膏制劑已經(jīng)收入美國藥典，廣泛用 于治療關(guān)節(jié)炎、肌肉疼痛、背痛、運(yùn)動(dòng)扭傷和帶狀皰瘆后遺留神經(jīng)痛等疾病。
[0007]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 辣椒堿（I)在制備乙酰基轉(zhuǎn)移酶激活劑方面的應(yīng)用，
2. 如權(quán)利要求1所述的辣椒堿（I)在制備乙?；D(zhuǎn)移酶激活劑方面的應(yīng)用，其特征在 于：用于制備治療和預(yù)防與乙酰基轉(zhuǎn)移酶活力過低或低表達(dá)相關(guān)疾病的食品、藥物或食品 及藥物組合物。
【專利摘要】辣椒堿在制備人乙?；D(zhuǎn)移酶hMOF激活劑方面的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。實(shí)驗(yàn)證明，5-20μg/ml的辣椒堿能顯著促進(jìn)人源胚胎腎細(xì)胞293T和人源胃癌細(xì)胞MGC-803的hMOF蛋白表達(dá)量及其所修飾的組蛋白H4第16位賴氨酸位點(diǎn)(H4K16)的乙酰基化水平，0.1～25.6μg/ml的辣椒堿能夠提高h(yuǎn)MOF報(bào)告基因在293T細(xì)胞中的活性，0.3～24.3μg/ml的辣椒堿能夠提高體外實(shí)驗(yàn)中的hMOF酶活性。
【IPC分類】A23L1-29, A61P35-00, A61K31-165
【公開號(hào)】CN104523669
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410767158
【發(fā)明人】蔡勇, 金景姬, 曹玲玲, 王飛, 趙佳瑤, 朱琳
【申請(qǐng)人】吉林省金塔實(shí)業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司
【公開日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年12月12日