專利名稱：：硝酸銨在制藥、食品和保健品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及硝酸銨的用途，尤其涉及在制藥、食品和保健品領(lǐng)域中的用途。本發(fā)明是硝酸銨的醫(yī)藥用途、食品用途和保健品用途發(fā)明。硝酸銨是已經(jīng)公開了的化合物，其化學(xué)分子式為NH4NO3，分子量為80．4。硝酸銨為無色斜方或單斜晶體，熔點169．6℃，密度1．725克／厘米3(25℃)，極易溶于水。硝酸銨在工業(yè)上由硝酸與氫氧化銨作用制得，目前用于制造炸藥、煙火、冷凍劑、氧化氮吸收劑、無堿玻璃等。本發(fā)明的目的在于提供硝酸銨的醫(yī)藥用途、食品用途和保健品用途，即在制藥、食品和保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明所采用的硝酸銨均為分析純產(chǎn)品，從化學(xué)試劑商店購買。實際上，本發(fā)明涉及硝酸銨作為制備治療或預(yù)防肝癌、胃癌、肺癌、肉瘤、子宮頸癌等多種腫瘤疾病的藥中的應(yīng)用。涉及硝酸銨作為制備治療或預(yù)防心、腦血管疾病藥中的應(yīng)用。還涉及硝酸銨作為制備治療或預(yù)防人體衰老藥中的應(yīng)用。還涉及硝酸銨作為制備治療腫瘤的藥中增效劑的應(yīng)用。還涉及硝酸銨作為制備治療腫瘤的藥中減毒劑的應(yīng)用。還涉及硝酸銨作為制備抗衰老和增強免疫的食品和保健品中的應(yīng)用。為了更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面將用硝酸銨的藥理和毒理試驗及結(jié)果來說明其在制藥領(lǐng)域中的用途。取硝酸銨晶體適量，用醫(yī)用蒸餾水為溶煤，制成0．3％硝酸銨溶液，裝入瓶中密封，消毒制成注射液產(chǎn)品備用。1．硝酸銨對小鼠移植性腫瘤的作用。硝酸銨對小鼠H22(肝癌)、FC(胃癌)、U14(子宮頸癌)荷瘤小鼠動物，20ml／kg與10ml／kg腹腔注射，每天一次，連續(xù)用藥11天。對H22及FC抑瘤率分別為37．1％和48．0％。對U14及H22荷瘤小鼠生命延長率與對照組比較有顯著差異。結(jié)果表明硝酸銨對肝癌、胃癌、子宮頸癌有治療作用。2．硝酸銨對腫瘤細胞體外實驗。采用3H-TdR同位素摻入法，觀察了五種不同濃度(藥物濃度為0．3、0．6、0．9、1．2、1．5ml／ml細胞懸液)對小鼠LA795(肺腺癌)和HOSTE85(人類成骨肉瘤)細胞的增殖和形態(tài)的影響。結(jié)果表明，硝酸銨溶液1．5ml／ml細胞懸液對LA795有明顯的抑制生長作用。藥物作用48小時后與對照組比較，可見細胞代謝廢物增多，經(jīng)兩周可見細胞數(shù)目明顯減少，形態(tài)也有改變。1．5ml／ml細胞懸液對HOSTE85，于48小時細胞形態(tài)發(fā)生改變，細胞中產(chǎn)生大量空泡，作用兩周后可見細胞死亡，代謝廢物增加。結(jié)果表明硝酸銨對肺癌、肉瘤有治療作用。3．硝酸銨急性毒性試驗。按改進寇氏法，觀察小鼠一次靜脈或腹腔注射硝酸銨溶液所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況。以0．05g／20g體重，一日3次腹腔注射，總給藥量7．5g／kg，連續(xù)觀察7天，動物末出現(xiàn)中毒反應(yīng)或死亡。計算出一日最大耐受量相當于臨床用藥量的250倍，表明硝酸銨毒性甚低，臨床用藥是安全的。4．硝酸銨長期毒性試驗。1．5g／kg和0．75g／kg，每天分別腹腔注射，連續(xù)3個月。大鼠一般狀況、攝食、飲水、糞便形狀、體重增長；外周血象；肝、腎功能生化檢查；重要臟器系數(shù)和病理組織學(xué)與對照組動物差別無顯著意義。部分大鼠停藥后，作3周可逆性觀察，其肝、腎功能生化及組織學(xué)均未見異常改變，表明硝酸銨在此劑量范圍內(nèi)，長期使用是安全的。5．硝酸銨對荷瘤動物化療增效作用實驗研究。A．硝酸銨與環(huán)磷酰胺合用的抑瘤作用。取小鼠40只，隨機分為4組，每組10只。4組動物皆于右前肢腋后皮下接種EAC細胞2×106個，造成荷瘤動物模型。接種后第二天，除空白對照組腹腔注射等容量生理鹽水、化療組腹腔注射環(huán)磷酰胺0．005g／kg外；其他兩組腹腔注射環(huán)磷酰胺0．005g／kg，分別與硝酸銨0．06g／kg、0．03g／kg合用，每天一次，連續(xù)7天。末次給藥24小時處死小鼠稱體重，剝離瘤體，稱重，并計算腫瘤抑制率，實驗重復(fù)三批。三批結(jié)果均表明硝酸銨與環(huán)磷酰胺合用，對EAC瘤體的抑制有明顯的增效作用，實驗數(shù)據(jù)見表1。表1硝酸銨與環(huán)磷酰胺合用對荷瘤動物的抑制作用<tablesnum="001"><table>組別劑量(g／kg)體重變化(g)瘤重(g)抑制率(％)荷瘤鼠+生理鹽水等容量+5．60±0．814．72±0．63荷瘤鼠+環(huán)磷酰胺0．005+3．70±0．743．11±0．4834．12(P＜0．01)荷瘤鼠+環(huán)磷酰胺+硝酸銨0．005+0．06+4．20±0．461．56±0．4567．00(P＜0．01)荷瘤鼠+環(huán)磷酰胺+硝酸銨0．005+0．03+4．20±0．720．94±0．3380．00(P＜0．01)</table></tables>B．硝酸銨與呋氟尿嘧啶合用的抑瘤作用。取小鼠40只，隨機分為4組，每組10只。4組動物皆于右前肢腋后皮下接種S180細胞1×106個，造成荷瘤動物模型。接種后第二天，除空白對照組腹腔注射等容量生理鹽水、化療組腹腔注射呋氟尿嘧啶0．05g／kg外；其它兩組腹腔注射呋氟尿嘧啶0．05g／kg，分別與硝酸銨0．06g／kg、0．03g／kg合用，每天一次，連續(xù)7天。末次給藥24小時處死小鼠，稱體重，剝離瘤體，稱重，并計算瘤重抑制率。實驗重復(fù)三批。三批結(jié)果表明硝酸銨與呋氟尿嘧啶合用對S180瘤體的抑制有明顯的增效作用，見表2。表2硝酸銨與呋氟尿嘧啶合用對荷瘤動物的抑瘤作用<tablesnum="002"><table>組別劑量(g／kg)體重變化(g)瘤　重(g)抑制率(％)荷瘤鼠+生理鹽水等容量+4．28±0．786．10±0．81荷瘤鼠+呋氟尿嘧啶0．005+3．04±0．764．74±0．7622．30(P＜0．05)荷瘤鼠+呋氟尿嘧啶+硝酸銨0．005+0．06+3．02±0．843．58±1．0141．32(P＜0．01)荷瘤鼠+呋氟尿嘧啶+硝酸銨0．005+0．03+2．87±0．692．69±0．5855．91(P＜0．01)</table></tables>本實驗研究證明，硝酸銨0．06g／kg、0．03g／kg，腹腔注射可增強環(huán)磷酰胺和呋氟尿嘧啶對EAC與S180荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤作用，其對腫瘤抑制率分別為67-80％和41．32-55．91％。說明本發(fā)明物質(zhì)與化療藥合用能夠明顯提高化療藥抗腫瘤作用，硝酸銨具有增效劑的作用。6．硝酸銨對荷瘤動物和正常動物化療毒副作用的減毒實驗。對正常和H22(肝癌)荷瘤小鼠給予化療藥物環(huán)磷酰胺，同時給予不同劑量的硝酸銨注射液，以肝腎功能、白細胞記數(shù)和骨髓有核細胞記數(shù)為指標，觀察硝酸銨對化療藥物環(huán)磷酰胺的減毒作用。實驗結(jié)果表明硝酸銨可部分對抗環(huán)磷酰胺化正常小鼠和荷瘤小鼠的外周血白細胞和骨髓有核細胞的減少，對抗血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高，這說明本發(fā)明硝酸銨具有治療腫瘤的藥品中減毒劑的作用。具體結(jié)果參見表3-表8表3硝酸銨對環(huán)磷酰胺化正常小鼠體重的影響(X±SD，n=10)<tablesnum="003"><table>組別治療前體重(g)治療后體重(g)正常對照組20．07±1．4820．14±1．59環(huán)磷酰胺組20．26±1．8518．48±2．52環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液20ml20．18±1．4018．36±1．54環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液10ml21．70±1．5320．67±2．98環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液5ml21．79±1．5119．64±1．45</table></tables>注正常對照組生理鹽水每天15ml／kg；環(huán)磷酰胺組環(huán)磷酰胺每天100mg／k8，給兩天。硝酸銨溶液濃度為0．3％表4硝酸銨對環(huán)磷酰胺化正常小鼠肝腎功能的影響(X±SD，n=10)<tablesnum="004"><table>組別谷丙轉(zhuǎn)氮酶(U)血清尿素氮(mmol／L)肌酐(umol／L)正常對照組24．23±10.941．31±0．1540．40±12．37環(huán)磷酰胺組32．41±9．571．53±0．2652．75±9．45環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液20ml28．67±10．831．56±0．1556．27±15．18環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液10ml29．37±1．761．40±0．2935．66±11．86環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液5ml28．17±8．251．61±0．3649．07±24．56</table></tables>注正常對照組生理鹽水每天15ml／kg；環(huán)磷酰胺組環(huán)磷酰胺每天100mg／kg，給兩天。硝酸銨溶液濃度為0．3％表5硝酸銨對環(huán)磷酰胺化正常小鼠外周血白細胞及骨髓有核細胞計數(shù)的影響(X±SD，n=10)<tablesnum="005"><table>組別白細胞計數(shù)(個×109／L)骨髓有核細胞計數(shù)(個×104／L)正常對照組11．71±2．63613．13±149．62環(huán)磷酰胺組4．23±1．32455．00±182．07環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液20ml5．72±1．89974．17±262．89環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液10ml5．26±1．121213．57±431．85環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液5ml5．10±1．05529．44±174．36</table></tables>注正常對照組生理鹽水每天15ml／kg；環(huán)磷酰胺組環(huán)磷酰胺每天100mg／kg，給兩天。硝酸銨溶液濃度為0．3％表6硝酸銨對環(huán)磷酰胺治療荷瘤小鼠體重的影響(X=SD，n=10)<tablesnum="006"><table>組別治療前體重(g)治療后體重(g)荷瘤組20．64±1．3825．59±2．38環(huán)磷酰胺組21．14±1．4220．12±5．87環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液20ml21．44±1．0520．27±1．19環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液10ml21．57±1．0120．84±1．79環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液5ml21．74±1．1521．53±1．10</table></tables>注荷瘤組生理鹽水每天15ml／kg；環(huán)磷酰胺組環(huán)磷酰胺每天100mg／kg，給兩天。硝酸銨溶液濃度為0．3％表7硝酸銨對環(huán)磷酰胺治療荷瘤小鼠肝腎功能的影響(X±SD，n=10)<tablesnum="007"><table>組別谷丙轉(zhuǎn)氨酶(U)血清尿素氮(mmol／L)肌酐(umol／L)荷瘤組26．66±5．471．91±0．2440．40±12．37環(huán)磷酰胺組37．85±7．302．01±0．2552．75±9．45環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液20ml28．93±8．321．80±0．2056．27±15．18環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液10ml28．57±7．761．84±0．1635．66±11．86環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液5ml26．02±10．821．72±0．1049．07±24．56</table></tables>注荷瘤組生理鹽水每天15ml／kg；環(huán)磷酰胺組環(huán)磷酰胺每天100mg／kg，給兩天。硝酸銨溶液濃度為0．3％表8硝酸銨對環(huán)磷酰胺治療荷瘤小鼠外周血白細胞及骨髓有核細胞計數(shù)的影響(X±SD，n=10)<tablesnum="008"><table>組別白細胞計數(shù)(個×109／L)骨髓有核細胞計數(shù)(個×104／L)荷瘤組13．71±1．27878．89±273．25環(huán)磷酰胺組3．43±1．31609．28±296．16環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液20ml4．76±1．23814．44±181．46環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液10ml4．33±1．00620．56±400．70環(huán)磷酰胺組+硝酸銨溶液5ml4．53±1．42781．46±277．55</table></tables>注荷瘤組生理鹽水每天15ml／kg；環(huán)磷酰胺組環(huán)磷酰胺每天100mg／kg，給兩天。硝酸銨溶液濃度為0．3％7．硝酸銨抗氧化作用實驗。取家兔39只，隨機分為13組，每組3只，經(jīng)耳緣靜脈連續(xù)給藥14天，用鄰苯三酚法測紅細胞中SOD酶活性(U／ml血)，用硫代巴比妥酸(TBA)法測定血清中MDA含量(umol／L)。共測定上述指標三次，既給硝酸銨前、給硝酸銨7天和給硝酸銨第14天。實驗結(jié)果說明硝酸銨能增加血中SOD酶活性，降低血清中脂質(zhì)過氧化物生成作用，具有明顯的抗氧化、抗衰老作用。這說明硝酸銨可用于制造抗衰老和增強免疫的食品和保健藥品。從以上結(jié)果可以得出，本發(fā)明的優(yōu)點在于(1)本發(fā)明對已知化合物硝酸銨發(fā)掘了醫(yī)藥用途，開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。(2)本發(fā)明的硝酸銨安全無毒，藥理作用強，預(yù)示著很好的藥用前景。(3)本發(fā)明的物質(zhì)原料來源豐富、價廉、未見毒副作用，制備工藝簡單，并可制成口服劑型、注射劑型、片劑等，使用方便，注射液可作靜脈注射。(4)本發(fā)明的物質(zhì)配制成的藥物具有治療胃癌、肝癌、肺癌、子宮頸癌、肉瘤等多種癌癥的作用。(5)本發(fā)明的物質(zhì)配置成的藥物無毒副作用，具有提高機體免疫功能的作用，非常適合晚期腫瘤病人或惡液質(zhì)腫瘤病人使用。(6)本發(fā)明的物質(zhì)配置成的藥物具有增強化療藥療效的作用，可廣泛用于臨床治療，療效顯著。(7)本發(fā)明的物質(zhì)配置成的藥物具有降低化療藥毒性的作用，為化療藥加大使用劑量和增加使用周期提供了依據(jù)，提高了腫瘤病人對化療藥的耐受強度，提高了療效。(8)本發(fā)明的物質(zhì)配置成的藥物具有清除人體血液雜質(zhì)，降低血脂，增強人體細胞活性的作用，能夠抗人體衰老，治療心、惱血管疾病。下面將描述本發(fā)明的幾個實施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。實施例1采用硝酸銨分析純產(chǎn)品30g，溶于常溫醫(yī)用蒸餾水10000ml中，待充分溶解后過濾、灌裝、密封、消毒制成0．3％注射液產(chǎn)品，亦可作口服液使用。實施例2采用硝酸銨分析純產(chǎn)品40g，溶子常溫醫(yī)用蒸餾水10000ml中，待充分溶解后過濾、灌裝、密封、消毒制成0．4％產(chǎn)品，用于靜脈滴注使用，亦可作口服液使用。實施例3按本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備硝酸銨粉針，規(guī)格0．2g-1．5g／支，臨床使用時再用醫(yī)用蒸餾水溶解配制成濃度為0．1-0．6％的注射液，供腫瘤病人注射使用。實施例4按本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備硝酸銨片劑，以成人每日用量0．2g-1．5g的規(guī)格制備。實施例5用實施例1的方法得到的硝酸銨0．3％注射液產(chǎn)品1瓶(500ml)。取環(huán)磷酰胺粉針1支(200mg)溶于0．3％的500ml硝酸銨溶液中，待充分溶解后即可用于腫瘤病人靜脈滴注，具有增效減毒作用。權(quán)利要求1．硝酸銨在制備治療或預(yù)防肝癌、胃癌、肺癌、肉瘤、子宮頸癌等多種腫瘤疾病藥中的應(yīng)用。2．硝酸銨在制備治療或預(yù)防心、腦血管疾病藥中的應(yīng)用。3．硝酸銨在制備治療或預(yù)防抗衰老藥中的應(yīng)用。4．硝酸銨在制備治療或預(yù)防腫瘤藥中增效劑的應(yīng)用。5．硝酸銨在制備治療或預(yù)防腫瘤藥中減毒劑的應(yīng)用。6．硝酸銨在制備治療或預(yù)防腫瘤的藥中與化療藥組合使用的應(yīng)用。7．硝酸銨在制備抗衰老和增強免疫保健藥品中的應(yīng)用。8．硝酸銨在制備抗衰老和增強免疫食品中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及硝酸銨的用途,開創(chuàng)了硝酸銨在制藥、食品和保健品領(lǐng)域中的用途。該物質(zhì)對消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)及婦科等腫瘤有良好療效。對荷瘤動物抑瘤率達37.1%－48%,生命延長率與對照組比較有顯著差別,體外實驗表明對癌細胞的增殖有明顯抑制作用,細胞形態(tài)明顯改變。此外該藥有增強免疫系統(tǒng)功能作用,對荷瘤動物有明顯的增強巨噬細胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子和自然殺傷細胞活性。另外該藥與化療藥合用尚可協(xié)同抑殺癌細胞,增效作用顯著,并能明顯降低化療藥產(chǎn)生的毒性。急性和長期毒性試驗未見任何毒副作用。具有清除血液中雜質(zhì),增加血中SOD酶活性,降低血清中脂質(zhì)過氧化物生成作用,抗機體衰老。文檔編號A61P9/10GK1292266SQ9912171公開日2001年4月25日申請日期1999年10月9日優(yōu)先權(quán)日1999年10月9日發(fā)明者王玉璞申請人:蘭州凱瑞中藥科技開發(fā)有限公司