專利名稱：新的維生素d類似物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及迄今未知的一類化合物，它們在誘導某些細胞，包括皮膚細胞和癌細胞的分化和抑制不希望的增殖，以及免疫調節(jié)和抗炎作用方面顯示出強活性，還涉及含有這些化合物的藥物制劑，這些制劑的劑量單位，和它們在以非正常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病，諸如銀屑病和其他角化障礙，HIV相關皮膚病，傷口愈合，癌癥包括皮膚癌，以及免疫系統(tǒng)疾病或免疫系統(tǒng)失調，諸如宿主抗移植物和移植物抗宿主反應和移植排斥，和自身免疫病，如盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡，糖尿病和自身免疫型慢性皮膚病，例如硬皮病和普通天皰瘡，和炎性疾病，諸如類風濕性關節(jié)炎和哮喘，以及大量其他疾病狀態(tài)，包括甲狀旁腺功能亢進，特別是與腎衰竭相關的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進，識別力衰減或老年性癡呆(早老性癡呆)和其他神經變性疾病，高血壓，痤瘡，脫發(fā)，皮膚萎縮，例如類固醇所致皮膚萎縮，皮膚老化，包括光致老化的治療和/或預防中的用途，還涉及它們用于促進骨生成和治療/防止骨質疏松和骨軟化的用途。
本發(fā)明化合物構成了一類新的維生素D類似物，它們由通式Ⅰ代表
其中式Ⅹ是氫或羥基；R1和R2可以是相同或不同的，代表氫或C1-C3烷基；或者R1和R2與帶有基團X的碳原子一起可形成C3-C6碳環(huán)；R3代表C1-C3烷基，芳基或芳烷基，或代表YR4，其中Y代表基團-CO-S-,-CS-O-或-CS-S-，而R4代表C1-C3烷基或芳基或芳烷基；Q是(CH2)n,n為1-4。R1,R2和Q獨立地可任意被一個或多個氟原子取代。
R1和R2當分開考慮時，其實例包括(除了氫以外)但不限于甲基，三氟甲基，乙基，五氟乙基，及正、異和環(huán)丙基。
R1和R2當一起考慮時，其實例包括二、三、四和五亞甲基。
R3和R4的實例包括但不限于甲基，乙基，丙基，正、異和環(huán)丙基，苯基和芐基。
Q的最優(yōu)選的實例包括二和三亞甲基。
從式Ⅰ可以看出，依據(jù)R1,R2,R3,Q和X的不同含義，本發(fā)明化合物可包含數(shù)種非對映異構型(例如帶有基團R1,R2和X的碳原子的R或S構型)。本發(fā)明包括所有這些純形式的非對映異構體及其混合物。
特別是包括在標記為“22”的碳原子上具有兩種可能的構型的兩種非對映異構體(在下文中表示為“A”和“B”)。A是優(yōu)選的。
此外，還可包括Ⅰ的藥物前體，其中一個或多個羥基被掩蔽為能在體內再轉變?yōu)榱u基的基團。
其中X為氫的式Ⅰ化合物也可用作藥物前體，因為這些化合物在體外是相對無活性的，但對患者給藥后通過酶促羥基化而轉化為活性式Ⅰ化合物。
二十多年前就已知維生素D(D3/D2)是激素原，它在體內羥基化為活性激素1α,25-二羥基-維生素D3(1,25(OH)2D3或骨化三醇)。維生素D2在人體內的代謝方式與D3相同且與D3是生物等值的。
1,25(OH)2D3通過調節(jié)鈣腸吸收，鈣腎排泄和骨礦化/吸收而維持鈣(和磷酸鹽)穩(wěn)態(tài)。其他激素如甲狀旁腺激素(PTH)和降鈣素分別起著與1,25(OH)2D3一致的正反饋和負反饋鈣調節(jié)劑的作用[1],[2]。
這些知識已使得使用1,25(OH)2D3及其藥物前體1α-羥基-D3(阿法骨化醇，INN)來治療腎衰竭病人，這是由于重要的25-羥基維生素D的腎1α-羥基化作用已損傷，導致低鈣血，繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進和骨失礦質(腎性骨營養(yǎng)不良)[1]。
已顯示1,25(OH)2D3(VDR)的(核)受體不僅存在于腸，骨和腎中，而且存在于大量其他部位，諸如象甲狀旁腺，胰島，乳腺細胞，皮膚的角化細胞和成纖維細胞，循環(huán)單核細胞和(活化)淋巴細胞，以及許多其他正常細胞類型和組織中；此外VDR也存在于一些癌細胞系中[2],[3],[4]。
依照VDR的這種廣泛存在的情況，已用實驗證明1,25(OH)2D3對鈣調節(jié)具有相當和超越“傳統(tǒng)”作用的生物學功效。
有顯示表明1,25(OH)2D3能刺激細胞的分化和抑制過度細胞增殖[5]，這提示了其在例如銀屑病和癌癥的治療中的潛在的用途。還顯示1,25(OH)2D3能影響白細胞介素的作用和/或產生，指示了該化合物在免疫學疾病諸如自身免疫疾病和移植排斥的治療中的潛在用途。
還提出了用1,25(OH)2D3，或其藥物前體1α-OH-D3治療一些其他疾病狀態(tài)高血壓[7]，糖尿病[8]，脫發(fā)[9]，痤瘡[10]，骨質疏松[11]和神經變性疾病[12]。
1,25(OH)2D3對血管生成的抑制[13]指示了經減少新血管在腫瘤中生長而抑制腫瘤生長的可能性。
然而，1,25(OH)2D3對這些適應證的治療可能性極大地受到該激素對鈣代謝的有力作用的限制，因為由于高鈣血而產生的嚴重的副作用將使得為了得到對例如銀屑病或癌癥或免疫學疾病的治療作用則需要高劑量。
為了克服該問題已描述了大量維生素D類似物，這些中有一些顯示出與對鈣代謝的作用相比有利于誘導細胞分化/抑制細胞增殖活性的選擇性[3],[4],[14]。
這項工作已導致了維生素D類似物的治療應用或可能的應用。因此，維生素D3類似物-MC 903(鈣泊三醇，鈣泊三烯，INN，參見表1)是一種細胞分化的有力誘導物和細胞增殖的抑制劑，它在體內對鈣代謝僅顯示出中等活性[15]。
鈣泊三醇是市場上的一種用于治療皮膚的過度增殖疾病-銀屑病的安全而有效的藥物。鈣泊三醇對70-80％的患者提供了改善，沒有高鈣血[16],[17]。然而，利用體外研究這種選擇性是不相等的，這顯示鈣泊三醇對腸維生素D受體的結合象1,25(OH)2D3一樣好。鈣泊三醇對鈣代謝的低體內活性是由于該化合物的迅速代謝，由此限制了該化合物系統(tǒng)性使用的潛力[16]。
有一些維生素D類似物誘導癌細胞分化和抑制增殖的功效已在體外和體內得到證明，參見，例如[3],[4],[11],[14],[18],[19],[20],[21],[22],[23]。
一種這樣的令人感興趣的類似物是EB 1089[22],[24]，它抑制乳腺癌細胞在體外和體內的生長[4],[25]。其在體內的抗癌和高鈣血作用之間有肯定的選擇性，但該選擇性的分子基礎還未真正弄清楚[4]。EB1089正處于臨床研究中[26]。
一系列具有誘導分化和抗增殖活性的有前途的維生素D類似物是20-表-類似物[18],[27],[28]，其中側鏈中的碳-20的立體化學改變?yōu)椤胺翘烊坏摹?，所謂的20-表構型。這些20-表-類似物中研究最多的兩種是KH 1060(20-表-22-氧雜-25,26,27-三均-1,25(OH)2D3；lexacalcitol,INN)[18],[29]和MC 1288(20-表-1,25(OH)2D3；參見表1)[18],[30]。
已發(fā)現(xiàn)從20-“正常”變化為20-“表”構型具有深遠而有益的生物學意義。一般而言，這些類似物的最大活性的特點是它們的高，或者非常高的作為細胞生長和/或免疫應答的調節(jié)劑的效力；它們的高鈣血作用與1,25(OH)2D3相等，或更強數(shù)倍[18]。
一些維生素D類似物的免疫調制作用與高鈣血作用的分離也已得到證明[18],[27]。關于1,25(OH)2D3自身的免疫學作用的一些重要發(fā)現(xiàn)將由現(xiàn)有技術說明；在最近的論文中可以找到有關的原始記錄，例如[27],[31]和[32](特別是皮膚病學)。
1,25(OH)2D3刺激單核細胞向巨噬細胞分化并增強它們的抗菌活性，而且1,25(OH)2D3能在體內維生素D缺乏狀態(tài)下修復正常免疫功能。另一方面，1,25(OH)2D3對免疫系統(tǒng)的抗原介導的部分具有免疫抑制作用。活化T淋巴細胞的增殖受到細胞因子IL-2和INF-γ的負調節(jié)的抑制。在體外，這種負調節(jié)間接抑制了從B淋巴細胞形成抗體(IgM和IgG)。細胞毒性T細胞也受到了抑制而調節(jié)/抑制性T淋巴細胞受到激發(fā)。有些研究還報道了1,25(OH)2D3對從抗原激發(fā)的單核細胞/巨噬細胞的細胞因子如IL-1和TNF-α產生/釋放的負調節(jié)。
這些發(fā)現(xiàn)促成了1,25(OH)2D3在器官或細胞移植領域和在自身免疫疾病中的臨床應用，但是它的高鈣血作用嚴重地限制了其在臨床實踐中的使用。
不過，新的維生素D類似物[18],[27]在這個方向上顯示出一些前途，正如下文中的實施例將表明的那樣。
20-表-類似物MC 1288在心臟和小腸移植的大鼠模型中作為有效的免疫抑制劑，它能防止移植排斥[30]；血清鈣濃度適度升高。
20-表-和20-正常類似物KH 1060和CB 966延長了小鼠皮膚同種異體移植的存活時間[33]。KH 1060是最有力的免疫抑制劑，但卻最大程度地誘導了高鈣血，它也是最有效的藥劑。與這兩種試劑單獨使用相比，與環(huán)孢菌素A(CyA)結合治療是更有效的，且血清鈣只中度升高。在該試驗中，MC 1288和另兩種20-表-類似物也是非常有效的[34e]且比KH 1060的高鈣血作用小。
KH 1060在自身免疫疾病，I型糖尿病中是有效的免疫調節(jié)劑，這是用非肥大糖尿病(NOD)小鼠研究的[35]。與1,25(OH)2D3(也是有效的免疫調節(jié)劑)相比，它對鈣和骨的作用僅僅是輕微的。
在相關的研究中[36]，通過將胰島的MHC1-配對，或同系的β-相細胞完全地移植給NOD小鼠來研究自身免疫記憶的影響，KH 1060和CyA在延緩自身疾病復發(fā)方面均是非常有效的，但是二者在最有效的高劑量時均是有毒的。KH 1060和CyA結合以較低的無毒劑量給藥與它們各自高劑量給藥同等有效，而對鈣代謝的作用降低了。
有最新的證據(jù)[37]表明，與1,25(OH)2D3相比，20-表-類似物KH1060和MC 1288的有力的活性可與增強的轉錄活性相聯(lián)，但在體內有寬范圍的其他因素，諸如象吸收，轉運到靶細胞(結合蛋白)和代謝及細胞攝取性能，這可決定維生素D類似物的非傳統(tǒng)抗促鈣釋放(calcitropic)活性[11],[14](p.301).[20]，因此選擇潛在的用于臨床的選擇物時不能僅僅基于體外篩選。
從上面所描述的現(xiàn)有技術將看出，更新的維生素D類似物是非常有效的治療銀屑病的制劑，且它們有希望作為免疫抑制和抗癌劑，不過，仍然需要有改善的效能和在促鈣釋放副作用方面更高的安全比。
本發(fā)明化合物具有新的和意想不到的有益性能，這意味著它們是有前途的制劑，在治療1,25(OH)2D3或其類似物適用的病理學狀態(tài)時具有升高的效能，而對于它們的高鈣血(副)作用來說，它們具有降低的副作用。
關于維生素D類似物的化學結構與它們的生物學活性(體外或體內)之間的關系，這一論題已討論過，最近的評論參見，例如[3],[21]。對于更新的來自LEO的類似物，參見[34a-d]和[38a-d]；在這些研究中，系統(tǒng)結構變化已與抑制U 937白血病細胞的增殖和誘導其分化聯(lián)系起來，與對大鼠的高鈣血作用聯(lián)系起來，并與維生素D受體結合聯(lián)系起來。結構變化包括側鏈長度及分支[34a-d],[38a-d]，其不飽和情況[34a,b,c],[38c,d],C-20-立體化學[34a,b,c],[38b,c]，側鏈中的雜原子或芳環(huán)[34b],[38b]，以及在C-20[34d],C-22[34c]和C-24[38c]位上的羥基或烷氧基取代?？雌饋砑词故禽^小的結構改變，也時常有非常大的活性變化[34a,d],[38b,c]。在多數(shù)情況下，體外抗癌活性與體內高鈣血作用，或受體結合親和力之間沒有什么關系，有一些受體結合顯然需要細胞調節(jié)活性[27]，但是例如在20-和22-羥基/烷氧基取代的類似物的情況下，有力的抗癌活性與非常低的受體結合相容[34c,d]。結構和免疫學活性之間的關系也已討論過[18],[27]；發(fā)現(xiàn)有一些20-表類似物是有力的免疫抑制劑。
總結這些證據(jù)盡管在一組有限的聯(lián)系非常緊密的化合物中，有可能在一定范圍內將結構變化與由熟知的生物學測定得到的結果聯(lián)系起來，但不可能用新的測定而單從化學結構對活性作出預測。
令人驚奇的是，本發(fā)明化合物101和102在表1中所列的測定中具有新的和意想不到的生物學活性，其中該表中也包括一些關系密切的參考化合物的相應活性。文獻中已描述了參考化合物的高鈣血活性[15],[18],[34c]，和MC 1288的MLR數(shù)據(jù)[18]，但顯然不能從這些現(xiàn)有技術數(shù)據(jù)中推測出本發(fā)明化合物對皮膚細胞增殖和混合淋巴細胞反應的有力作用僅結合有中度的高鈣血作用。
1988年6月21日申請的歐洲專利申請0 296 800公開了一些化合物，它們是含有飽和全碳側鏈、在22位上被羥基或低級烷氧基取代的維生素D類似物，且這些化合物要求用于治療以鈣代謝不足為特征的或具有腫瘤細胞分化誘導活性的疾病狀態(tài)。在非專利文獻[39],[40]中還描述了類似的化合物。用大鼠測試它們的維生素D活性，它們不具有，即沒有顯著的高鈣血作用[39]，還測試了它們誘導HL-60癌細胞分化的能力。最具活性的化合物是22S-甲氧基-1,25(OH)2D3，在該測定中它的效力是1,25(OH)2D3的0.25倍。22S-甲氧基-1,25(OH)2D3的受體結合親和力是1,25(OH)2D3的0.03倍[40]。
本發(fā)明的式Ⅰ化合物因具有上面所提到的“非天然的”20-表-構型而不同于這些現(xiàn)有技術化合物。該構型也存在于幾種其他的更新的維生素D類似物中，其中一些公開在我們的在先國際專利申請?zhí)朠CT/DK90/00156，1990年6月19日申請，公開號WO91/00271，和國際專利申請?zhí)朠CT/DK93/00105,1993年3月23日申請，公開號WO93/19044，以及1994年5月10日的日本專利申請，公開號7-304733中。據(jù)稱這些20-表類似物具有細胞分化誘導活性等。
本發(fā)明化合物Ⅰ與PCT/DK90/00156和日本專利申請7-304733化合物的區(qū)別在于在側鏈的22位上有烷氧基或烷(芳)氧基羰氧基(或硫代-/二硫代-烷(芳)氧基羰氧基)取代基，代替了在這一位置上的氫原子或羥基或被護羥基，與在側鏈的23、24位上帶有碳-碳三鍵的PCT/DK93/00105化合物的區(qū)別在于在側鏈上僅有碳-碳單鍵。本發(fā)明化合物1與上述專利申請的相關20-表維生素D類似物的不同結構使得它可能產生新的和意想不到的優(yōu)點，正如在下文中提到的生物學測定中證明的那樣。
為了證明本發(fā)明式Ⅰ化合物的有效性，表1中的信息涉及特別是“HaCaT,rel.”,“HaCat,max.％”,“MLR,rel.”和“Calc.,rel.”列；下文中將解釋它們的含義。
測試化合物對皮膚細胞的抗增殖活性的能力，例如抗銀屑病作用的有用的測定是利用HaCaT，一種自發(fā)無限增殖化非致瘤性人皮膚角化細胞系進行的體外測定[41]，測量3H-胸苷的攝取。
用于測定測試化合物的免疫抑制效力的能力的體外試驗是混合淋巴細胞反應試驗，“MLR”，測量小鼠脾淋巴細胞的同種異體刺激用共培養(yǎng)的從BALB/c小鼠得到的5×106/ml細胞(反應者)和從CB6F1小鼠得到的7.5×106/ml細胞(誘導物)刺激從BALB/c和CB6F1小鼠的脾得到的淋巴細胞。淋巴細胞的混合培養(yǎng)物用測試化合物孵育72小時。通過在DNA中摻入3H-胸苷來評定細胞DNA合成。
一般說來，1,25(OH)2維生素D3對器官中的鈣平衡的傳統(tǒng)作用，包括鈣血和鈣尿作用，在本發(fā)明的維生素D類似物中是不需要的，通常需要的是對例如某些細胞的增殖的抑制和/或免疫抑制活性的選擇性。
如前描述用大鼠體內測定化合物的高鈣血活性[15]。在表1中列出了“Calc.rel.”，選定化合物的高鈣血活性(相對于1,25(OH)2D3)；如上所述，一般優(yōu)選的是本發(fā)明化合物具有較低值。
從表1來看，有兩個選擇的舉例化合物-化合物101和化合物102在HaCaT-測定(銀屑病模型)中比1,25(OH)2D3的效力高得多，而在10-7M的最大抑制與1,25(OH)2D3相同或更高。此外，其高鈣血活性僅是1,25(OH)2D3的約一半。
有關本發(fā)明式Ⅰ化合物的其他重要性能，它們的免疫抑制活性，可從表1中的“MLR,rel.”項看出選定化合物101和102具有有力作用，表中也有與現(xiàn)有技術參考化合物的對比。其中，化合物MC 1288是特別令人感興趣的，因為已在動物移植試驗中證明其具有重要的免疫抑制活性[30]。另外本發(fā)明化合物在相對MLR-效能和相對高鈣血活性之間顯示出有利的比率。
因此，當考慮免疫抑制性能時，有希望從本發(fā)明化合物Ⅰ能得到比表1中提到的現(xiàn)有技術中的那些化合物更小的高鈣血副作用的危險。
表1化合物Ⅰ和對照化合物的生物試驗
表1中的符號○其余分子與式Ⅰ中相同。22-OH/OMe/OEt化合物均為22A-異構體。
¤該值是相對于1,25(OH)2D3的；值大于1表明化合物在該測定中比1,25(OH)2D3更具活性。
計算為1,25(OH)2D3的IC50值與化合物的IC50值之間的比；IC50是與對照相比產生3H-胸苷摻入的50％抑制時的濃度。
·“HaCaT,max％”是指用較高濃度10-7M化合物可得到的對細胞增殖的最大抑制(最大效能)。*1,25=1,25(OH)2D3=1,25(OH)2-維生素-D3。# MC 903=鈣泊三醇(參見上文)。n.d.=未測定。
化合物Ⅰ可用維生素D衍生醛化合物1制備(路線1)；用已報道過的合成方法[42]，例如用路線1中描繪的途徑。
在本申請文件中使用以下標準簡寫Me=甲基；Et=乙基；Pr=正丙基；Bn=芐基；Ph=苯基；THP=四氫-4H-吡喃-2-基；TMS=三甲基甲硅烷基；DMAP=4-二甲氨基吡啶；PPTS=對甲苯磺酸吡啶鎓鹽；pet.ether=石油醚；THF=四氫呋喃；TBAF=四-(正丁基)-氟化銨；b.p.=沸點；PLC=制備性薄層色譜；HPLC=高效液相色譜。
路線1化合物Ⅰ的合成
X1=H,OH,OR5R5=醇保護基，例如三(低級烷基)-甲硅烷基或THPR1,R2,R3,Q和X與上文中含義相同。路線1的說明a)(Ⅰ)化合物1與有機金屬試劑R-Met-Hal或R-Met反應，諸如象RMgHal，其中Hal是Cl,Br或I，或RLi，它們可以用通式Ⅴ的側鏈結構單元RHal(參見下文)通過與合適的金屬諸如鎂或鋰反應而制備。
(ⅱ)將所得兩種C-22-表異構物的混合物ⅡA和ⅡB分離。
b)將Ⅱ型C-22-羥基化合物烷基化為相應的化合物Ⅲ，其中R3=C1-C10烴基，或者，任意地，將Ⅱ型化合物?；癁橄鄳幕衔铫螅渲蠷3=YR4；Y和R4含義如上所述。
c)在三重敏化劑例如蒽的存在下，利用紫外線將化合物Ⅲ異構化為相應的化合物Ⅳ。
d)化合物Ⅳ脫保護為相應的化合物Ⅰ，例如用TBAF，用HF，或用TBAF后再用PPTS，或反之亦然。
在特定的合成中如果認為需要或必要，可以任意地改變Ⅱ型或Ⅲ型化合物側鏈中的官能團。
在路線1中合成步驟的順序是a),b),c),d)，如果有任何合理的理由，可以重新排列為a),c),b),d)或a),b),d),c)。
通式Ⅴ的側鏈結構單元RHal是已知化合物，或者它們可以用專家已知的標準方法制備。
Ⅴ Hal-Q-CR1R2-X1其中Hal,Q,R1,R2和X1的含義同上。特別是，其適用于需用于制備例舉化合物(101-108,110-112,114-116和121)的通式Ⅴ的側鏈結構單元；表2中描述的了這些RHal。其他類似的RHal可以用類似于用于合成表2的化合物Ⅴ的那些方法制備。對于X1=O-THP的，參見，例如WO93/19044。
表2通式ⅤR-Hal的一些側鏈結構單元
醛1與從側鏈結構單元衍生的有機金屬試劑如RMgHal或RLi的反應可以用格利雅或鋰試劑對羰基化合物的親核加成的標準方法來完成；即RHal與鎂或鋰在合適的無水溶劑如乙醚和/或THF中反應生成有機金屬試劑，然后加入1，在常規(guī)的含水處理后(這一般意味著在所有路線1的反應中)后得到Ⅱ。一般該反應產物Ⅱ是兩種可能的C-22-表異構物的混合物，本文中表示為ⅡA和ⅡB。一般優(yōu)選將ⅡA和ⅡB表異構物分離，這可用色譜法方便地完成。
表3中給出了這些式Ⅱ化合物的非限制性說明。在該表中，這些化合物描述為分離的22-表異構物ⅡA或Ⅱb(制備1-5)?；衔铫駻比相應的化合物ⅡB的產率高，一般是以約95比5的比率。
通式Ⅱ的C-22-羥基化合物烷基化或?；玫较鄳氖舰蠡衔?，其中R3是C1-C3烷基，芳基或芳烷基或YR4，這一反應可以用技術人員熟知的標準方法完成。表3中列出了這類化合物的舉例，但是非限制性的。
在烷基化反應中優(yōu)選使用烷基化劑R3Z，其中Z代表良好的離去基團，諸如象Cl-,Br-,I-,CH3SO3-,p-CH3-C6H4-SO3-或CF3SO3-；使R3Z與利用合適的強堿如堿金屬烷氧化物，烷基堿金屬或堿金屬氫化物產生的合適的化合物Ⅱ或Ⅲ的陰離子反應(R3=H)。通法2中描述了一種有用的方法，在所包括的制備中有更詳細描述；合適的冠醚可以作為相轉移劑加入以加快烷基化過程。
在制備其中R3=YR4的化合物Ⅲ的?；磻校欣氖鞘褂脴藴术；椒ǎT如醇Ⅱ與?；然蛩狒姆磻?R4=YCl或(R4Y)2O)，或通過從相應的酸R4YOH就地形成?；瘎┖兔撍畡┗蚩s合劑，諸如象碳化二亞胺或助酸酐，形成中間混合醛。
另外，在?；^程中加入合適的堿如叔胺經常是有益的；在許多情況下，特定的雜環(huán)胺象DMAP的加入可大大加快?；M程。通法3中給出了?；磻膶嵗?br> 表3中還包括通式Ⅳ的光敏異構化的化合物的非限制性實例以及有關各化合物的制備信息。
應當注意，表3和4的制備及實施例僅僅是說明性的，各步驟的特定合成以及各步驟的順序可以進行較大變化。另外，基團R:-Q-C(R1)(R2)(X1)可以是任意地能在任何方便的后續(xù)階段(或在幾個階段中)轉化為此的基。因此在化合物Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ中的R并不需要在具體的合成順序中具有相同的含義。R向-Q-C(R1)(R2)(X1)的轉化可以涉及數(shù)個步驟，并可能涉及分子的敏感三烯系統(tǒng)的臨時保護。除了R3或在側鏈(R)中的任何需要的改變以外，Ⅲ向Ⅰ的轉化涉及光敏異構化步驟和脫保護步驟，類似于在其他維生素D類似物的合成的最后階段中所用的步驟(參見歐洲專利No.0 227 836)。
表3通式Ⅱ,Ⅲ&Ⅳ的中間體
<p>表3(續(xù))通式Ⅱ,Ⅲ&amp;Ⅳ的中間體
表3(續(xù))通式Ⅱ,Ⅲ&amp;Ⅳ的中間體
表3的說明1)類型參見路線12)Prep No.=制備序號3)Comp No.=化合物序號4)Gen.Proc=通法序號*顛倒路線1中的步驟b)和c)。因此，在化合物416a中，R3代表H表4中列出了本發(fā)明式Ⅰ化合物的例子和排列表，編號的實施例給出了作為參考的例舉的合成方法，和這些例舉化合物的光譜數(shù)據(jù)。
已排列好的化合物109,113,117-120和122-135的合成步驟的順序類似于用于制備例舉化合物101-108,110-112,114-116和121，實施例1-15時的順序；參見路線1和路線1的說明。
對于相應的已排列好的式Ⅰ化合物來說，在下文中，R4,R5,Hal,Z和Y含義如上，而Q,R1,R2和R3的含義與它們在表4中的相同?；衔?與合適的化合物Ⅴ,Hal-Q-CR1R2-OR5(合成化合物131時OR5被H代替)按照通法1(GP1)反應，得到相應的式Ⅱ化合物。
式Ⅱ化合物與合適的R3Z按照GP2反應，得到相應的式Ⅲ化合物，除了因改變順序而得到化合物134和135以外；其中合適的化合物Ⅱ(化合物201)按照GP3用合適的?；噭㏑4YCl或(R4Y)2O酰化，得到相應的式Ⅲ化合物。
式Ⅲ化合物按照GP 4光敏異構化，得到相應的式Ⅳ化合物。最后一個步驟，式Ⅳ化合物按照GP5,GP6或GP7脫保護，得到所研究的化合物Ⅰ。
表4通式Ⅰ化合物的舉例和排列表
<p>表4(續(xù))通式Ⅰ化合物的舉例和排列表
<p>表4的說明1)Exam No.=實施例序號2)Comp No.=化合物序號3)Isom C-22=側鏈的碳22的異構體4)Gen.Proc=通法序號*帶有R1和R2的碳的R-構型#帶有R1和R2的碳的S-構型本發(fā)明化合物可用于藥物組合物，該組合物可用于如上所述的人和獸醫(yī)疾病的局部或系統(tǒng)治療。
本發(fā)明化合物可與其他藥物或治療改進結合使用。在銀屑病的治療中，本發(fā)明化合物可以與例如類固醇結合使用或與其他治療方法例如光或紫外線治療或結合的PUVA-治療結合使用。在癌癥的治療中，本發(fā)明化合物可以與其他抗癌藥物或抗癌療法如放射治療結合使用。在移植排斥或移植物抗宿主反應的預防中，或在自身免疫疾病的治療中，本發(fā)明化合物可有利地與其他免疫抑制/免疫調節(jié)藥物或療法，例如與環(huán)孢菌素A結合使用。
當然，式Ⅰ化合物(下文中稱作活性成分)起治療作用所需的量將根據(jù)特定化合物，給藥途徑和所治療的哺乳動物而變化。本發(fā)明化合物可以通過胃腸外、關節(jié)內、腸道或局部途徑給藥。當通過腸道給藥時它們也能被較好地吸收，在治療系統(tǒng)性疾病時這是優(yōu)選的給藥途徑。在象銀屑病這樣的皮膚病或眼病的治療中局部或腸道給藥形式是優(yōu)選的。
盡管活性成分可能作為原化學藥品單獨給藥，但其優(yōu)選做成藥物制劑。合宜的是，該活性成分占制劑的0.1ppm到0.1％重量。
用于獸醫(yī)和人類醫(yī)學的本發(fā)明的制劑包含活性成分及相聯(lián)的藥學上可接受的載體和任意的其他治療成分。從與制劑的其他成分是相容的且不會損害其接受者這一意義上而言，載體必須是“可接受的”。
制劑包括例如適用于口服、眼、直腸、胃腸外(包括皮下、肌內和靜脈內)、經皮、關節(jié)內和局部、經鼻或頰給藥的那些。
術語“劑量單位”是指一個單元，即能給予患者的單劑量，它可容易地拿取和包裝，保持為包含活性成分或其與固體或液體藥物稀釋劑或載體的混合物的物理和化學穩(wěn)定的單位劑量。
該制劑可方便地以劑量單位形式存在并可用制藥領域中熟知的任何方法制備。所有方法都包括將活性成分加入相關的構成一種或多種輔助成分的載體中這一步驟。一般說來，該制劑是通過將活性成分均勻而緊密地加入相關的液體載體或精細分離的固體載體或二者中而制備的，然后，如果需要，將該產物塑造成預期制劑。
適于口服給藥的本發(fā)明的制劑可以是如膠囊、扁囊、片劑或錠劑這樣的分散單元的形式，各含有預定量的活性成分；也可以是粉末或顆粒形式；在含水液體或無水液體中的溶液或懸液的形式；或是水包油型乳劑或油包水型乳劑的形式?；钚猿煞诌€可以藥團、糖劑或糊劑的形式給藥。
用于直腸給藥的制劑可以是加入了活性成分和載體的栓劑的形式，或是灌腸劑的形式。
適于胃腸外給藥的制劑包含活性成分的無菌油性或含水制劑，活性成分優(yōu)選與接受者的血液是等滲的。經皮制劑可以是藥膏的形式。
適于關節(jié)內或眼部給藥的制劑可以是活性成分的無菌含水制劑的形式，活性成分可以是微晶形式的，例如，該制劑是含水微晶懸液的形式。脂質體制劑或可生物降解的聚合物系統(tǒng)也可用于包含活性成分以用于關節(jié)內和眼部給藥。
適于局部或眼部給藥的制劑包括液體或半固體制劑如搽劑，洗液，凝膠，涂劑，水包油或油包水型乳劑如霜劑，油膏或糊劑；或溶液或懸液如滴劑。
適于鼻腔或頰部給藥的制劑包括粉末，自推動式和噴霧制劑，如氣溶膠和噴霧劑。
除了上述成分以外，本發(fā)明的制劑還可包括一種或多種添加成分，如稀釋劑，粘合劑，防腐劑等。
該組合物可進一步含有其他常用于治療上述病理學情況的治療活性化合物，如在免疫學疾病的治療中的其他免疫抑制劑，或在皮膚病治療中的類固醇。
本發(fā)明還涉及患有上述疾病之一的患者的治療方法，所述方法包括給予需要治療的患者有效量的一種或多種式Ⅰ化合物，單獨給藥或與一種或多種其他常用于治療所述疾病的治療活性化合物結合給藥。用本發(fā)明化合物和/或另一種治療活性化合物的治療可以同時或間隔進行。
在系統(tǒng)性治療中日劑量是0.001-2μg/kg體重，優(yōu)選0.002-0.3μg/kg哺乳動物體重，例如給予0.003-0.3μg/kg式Ⅰ化合物，一般相應的成人的日劑量是0.2-25μg。在皮膚病的局部治療中，給藥的油膏、霜劑或洗液含有0.1-500μg/g，優(yōu)選0.1-100μg/g式Ⅰ化合物。對于眼科中局部使用的油膏、滴劑或凝膠來說，它們含有0.1-500μg/g，優(yōu)選0.1-100μg/g式Ⅰ化合物?？诜M合物優(yōu)選配制成片劑，膠囊或滴劑，每劑量單位含有0.05-50μg，優(yōu)選0.1-25μg式Ⅰ化合物。
現(xiàn)在將用以下通法、制備和實施例進一步描述本發(fā)明通法、制備和實施例通法表4中列出了例舉的化合物Ⅰ。
對于所列出的1H NMR(300MHz)和13C NMR(75.6MHz)譜化學位移值(δ)，除非另有說明，否則就是氘氯仿溶液相對于內四甲基硅烷(δ=0.00)或氯仿(對于1H NMR,δ=7.25)或氘氯仿(對于13C NMR,δ=76.81)。除非所給出的是一個范圍，否則所列出的多重峰的值，或者是一個近似中點的固定的值(雙峰(d)，三峰(t)，四重峰(q))，或者沒有(m)(s=單峰，b=寬峰)。
乙醚是二乙醚并用鈉干燥。THF用鈉-二苯酮干燥。石油醚是指戊烷部分。除非另有說明，反應是在室溫下進行。后處理過程指的是涉及用指定溶劑(或者有機反應溶劑)稀釋，用水和鹽水萃取，用無水硫酸鎂干燥，并真空濃縮得到殘余物。色譜法用硅膠進行。通法通法1化合物1與從側鏈結構單元Ⅴ(RHal)衍生的格利雅試劑RMgHal反應，得到化合物ⅡA和ⅡB(路線1，表3)(制備01-05)在氫氣氛下，向在干燥燒瓶中的0.12g鎂屑(格利雅質量)中邊攪拌邊滴加合適的化合物Ⅴ(5.0mmol)在無水THF和無水乙醚的1∶1混合物中的溶液(6ml)。繼續(xù)攪拌并加熱至回流45分鐘。將所得格利雅試劑再次冷卻到20℃，在5分鐘內，滴加醛-化合物1(0.57g；1mmol)在無水THF和無水乙醚的1∶1混合物中的溶液(2ml)，接著在20℃攪拌30分鐘。將該反應混合物倒入氯化銨的10％水溶液中并進行后處理(乙醚)得到含有化合物ⅡA和ⅡB的粗產物，將其分離并用色譜法純化(用乙醚和石油醚的混合物作為洗脫液)，得到制備的標題化合物。(如果需要，選定餾分再重復色譜法純化過程，可能使用石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯的混合物，例如80∶20∶2混合物作為洗脫液。方便地，該純化/分離可以PLC的形式進行或利用制備型HPLC設備進行)。
通法2Ⅱ或Ⅲ型C-22-羥基化合物烷基化為相應的化合物Ⅲ，其中R3=C1-C10烴基(路線1，表3)(制備06-13和22-23)在氬氣下，在20℃下攪拌的同時向合適的化合物Ⅱ或Ⅲ(0.25mmol)的無水THF溶液(4ml)中加入氫化鉀在礦物油中的20％懸液(0.1ml)，接著加入烷基化劑R3Z(0.75mmol)，該混合物攪拌5分鐘后加入18-冠醚-6(0.07g)。在20℃繼續(xù)攪拌1.5小時，之后該反應混合物進行后處理(乙醚)。粗產物用色譜法(乙醚和石油醚的混合物作為洗脫液)純化得到制備的標題化合物。
改進法通法2a進行通法2的過程，只是在上述的反應混合物攪拌1.5小時后，再加入另一份氫化鉀(礦物油中的20％懸液)(0.1ml)，烷基化劑R3Z(0.75mmol)和18-冠醚-6(0.07g)，該混合物再攪拌1.5小時。
通法3Ⅱ或Ⅲ型C-22-羥基化合物?；癁橄鄳幕衔铫螅渲蠷3=YR4(路線1，表3)(制備33)在氬氣下，在20℃下攪拌的同時向適宜的化合物Ⅱ或Ⅲ(0.25mmol)在合適的無水溶劑如二氯甲烷中的溶液中加入酰化試劑(R4YCl,(R4Y)2O或R4YOH)，優(yōu)選伴隨加入一種或兩種合適的堿，如三乙胺，吡啶和/或DMAP。在使用酸R4YOH的情況下，需要加入脫水劑或縮合劑如二環(huán)己基碳化二亞胺。然后該反應混合物在合適的溫度(從室溫直到溶劑的沸點)下攪拌足夠的時間(一般是1-4小時)。經合適的后處理后，粗產物用色譜法純化得到制備的標題化合物。
通法4化合物Ⅲ異構化為相應的化合物Ⅳ(路線1，表3)(制備14-21和27-35)在氬氣氛下，合適的化合物Ⅲ(0.3mmol)、蒽(120mg)和三乙胺(0.05ml)的二氯甲烷溶液(20ml)在派熱克斯玻璃燒瓶中用從TQ760Z2型(Hanau)高壓紫外線燈發(fā)出的紫外線在約10℃及攪拌條件下照射20分鐘。將該反應混合物真空濃縮并用石油醚(2×5ml)處理。過濾后，將濾液真空濃縮并用色譜法純化(用乙醚和石油醚的混合物作為洗脫液)，得到制備的標題化合物。
通法5化合物Ⅳ通過用四-正丁基-氟化銨處理而脫保護為相應的化合物Ⅰ(路線1，表4)(實施例1-5,9-11,12-13和15)在氬氣下，在60℃下攪拌的同時向合適的化合物Ⅳ(0.16mmol)的THF溶液(5ml)中加入四-正丁基-氟化銨(300mg)的THF溶液(5ml)。繼續(xù)在60℃下攪拌1小時，該反應混合物進行后處理(乙酸乙酯，再用含水碳酸氫鈉萃取)。蒸發(fā)后的殘余物用色譜法純化(用50％到0％石油醚的乙酸乙酯液作為洗脫液)得到實施例的標題化合物。
通法6化合物Ⅳ通過用HF處理而脫保護為相應的化合物Ⅰ(路線1，表4)(實施例6-8和14)在氬氣下，邊攪拌邊向合適的化合物Ⅳ(0.07mmol)的乙酸乙酯溶液(0.2ml)中加入乙腈(2ml)，再加入氫氟酸在乙腈∶水7∶1中的5％溶液(1.2ml)。繼續(xù)在20℃下攪拌45分鐘。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，該反應混合物進行后處理(乙酸乙酯)。殘余物用色譜法純化(用50％到0％石油醚的乙酸乙酯液作為洗脫液)得到實施例的標題化合物。
通法7化合物Ⅳ通過用四-正丁基-氟化銨處理后再用吡啶-對甲苯磺酸鹽處理2而脫保護為相應的化合物Ⅰ(路線1，表4)在氬氣下，在60℃下攪拌的同時向合適的化合物Ⅳ(0.16mmol)的THF溶液(5ml)中加入四-正丁基-氟化銨(300mg)的THF溶液(5ml)。繼續(xù)在60℃下攪拌1小時，該反應混合物進行后處理(乙酸乙酯，再用含水碳酸氫鈉萃取)。蒸發(fā)后的殘余物用色譜法純化(用50％到0％石油醚的乙酸乙酯液作為洗脫液)，然后溶于無水乙醇(2ml)。加入PPTS(2mg)，該混合物在氬氣下在50℃攪拌1小時。經過后處理(乙酸乙酯，再用含水碳酸氫鈉萃取)后，殘余粗產物用色譜法純化(用50％到0％石油醚的乙酸乙酯液作為洗脫液)得到實施例的標題化合物。
2或以相反的順序制備制備01化合物201和221方法通法1。
起始物Ⅴ化合物501色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR for 201:δ=0.06(m,12H),0.11(s,9H),0.54(s,3H),0.85(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.23(s,6H),1.20-2.15(m,19H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),380(m,1H),4.21(m,1H),4.52(m,1H),4.94(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).
13C NMR for 221:153.4,142.8,135.3,121.5,116.3,106.5,74.1,73.8,70.1,67.0,56.1,52.7,45.7,43.8,41.8,41.2,39.8,36.4,29.9,29.5,28.7,26.7,25.7,25.6,25.2,23.3,21.9,18.1,17.9,12.4,12.2,2.3,-5.0,-5.1,-5.1制備02化合物202方法通法1。起始物Ⅴ化合物502色譜法洗脫液5％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.05(m,12H),0.11(s,9H),0.54(s,3H),0.82(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.15-2.15(m,23H),2.31(m,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.77(m,1H),4.21(m,1H),4.52(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d.1H).制備03化合物203方法通法1。起始物Ⅴ化合物503色譜法洗脫液5％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.10(s,9H),0.55(s,3H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.20(s,6H),1.15-2.15(m,21H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.85(m,1H),4.21(m,1H),4.52(m,1H),4.94(m,1H),4.98(m,1H),5.83(d,1H),6.45(d,1H).制備04化合物204方法通法1。起始物Ⅴ化合物504色譜法洗脫液10％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.09(s,9H),0.55(s,3H),0.81(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.45(q,4H),1.15-2.15(m,21H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.85(m,1H),4.22(m,1H),4.53(m,1H),4.94(m,1H),4.98(m,1H),5.83(d,1H),6.45(d,1H).制備05化合物205方法通法1。起始物Ⅴ化合物505色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.05(m,12H),0.08(s,9H),0.54(s,3H),0.79(t,6H),0.83(d,3H),0.85(s,9H),0.89(s,9H),1.10-2.10(m,27H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.84(m,1H),4.21(m,1H),4.53(m,1H),4.94(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備06化合物301方法通法2a。烷基化劑R3Z甲基碘起始物Ⅱ化合物201色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.10(s,9H),0.51(s,3H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.20(s,3H),1.21(s,3H),1.25-2.10(m,18H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.18(m,1H),3.33(s,3H),4.21(m,1H),4.52(m,1H),4.94(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備07化合物302方法通法2a。起始物Ⅱ化合物201烷基化劑R3Z乙基碘色譜法洗脫液0％到3％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.05(m,12H),0.09(s,9H),0.50(s,3H),0.84(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.17(t,3H),1.20(s,3H),1.21(s,3H),1.10-2.10(m,18H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.20(m,1H),3.47(m,2H),4.22(m,1H),4.52(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.81(d,1H),6.45(d,1H).制備08化合物303方法通法2。起始物Ⅱ化合物202烷基化劑R3Z甲基碘色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.10(s,9H),0.52(s,3H),0.82(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.20-2.15(m,22H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.18(m,1H),3.33(s,3H),4.21(m,1H),4.53(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.46(d,1H).制備09化合物304方法通法2。起始物Ⅱ化合物203烷基化劑R3Z甲基碘色譜法洗脫液0％到2％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:8=0.06(m,12H),0.09(s,9H),0.52(s,3H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.19(s,3H),1.20(s,3H),1.10-2.15(m,20H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.22(m,1H),3.33(s,3H),4.21(m,1H),4.52(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備10化合物305方法通法2。起始物Ⅱ化合物204烷基化劑R3Z甲基碘色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:8=0.06(m,12H),0.10(s,9H),0.52(s,3H),0.81(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.15-2.10(m,24H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.21(m,1H),3.33(s,3H),4.21(m,1H),4.52(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備11化合物306方法通法2a。起始物Ⅱ化合物204烷基化劑R3Z乙基溴色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.08(s,9H),0.50(s,3H),0.81(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.17(t,3H),1.10-2.10(m,24H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.24(m,1H),3.47(m,2H),4.21(m,1H),4.53(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備12化合物307方法通法2。起始物Ⅱ化合物205烷基化劑R3Z甲基碘色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.09(s,9H),0.51(s,3H),0.80(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.44(q 4H),1.15-2.10(m,22H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.22(m,1H),3.33(s,3H),4.21(m,1H),4.53(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備13化合物308方法通法2a。起始物Ⅱ化合物205烷基化劑R3Z乙基溴色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.05(m,12H),0.09(s,9H),0.50(s,3H),0.80(t,6H),0.83(d,3H),0.86(s,9H),0.89(s,9H),1.17(t,3H),1.44(q,4H),1.15-2.10(m,22H),2.31(bd,1H),2.55(dd,1H),2.88(m,1H),3.22(m,1H),3.47(m,2H),4.21(m,1H),4.53(m,1H),4.93(m,1H),4.98(m,1H),5.82(d,1H),6.45(d,1H).制備14化合物401方法通法4。起始物Ⅲ化合物301色譜法洗脫液5％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.11(s,9H),0.50(s,3H),0.82(d,3H),0.87(s,18H),1.20(s,3H),1.21(s,3H),1.15-2.10(m,18H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.82(m,1H),3.18(m,1H),3.32(s,3H),4.18(m,1H),4.37(m,1H),4.86(m,1H),5.17(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備15化合物402方法通法4。起始物Ⅲ化合物302色譜法洗脫液2.5％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.10(s,9H),0.49(s,3H),0.83(d,3H),0.88(s,18H),1.17(t,3H),1.20(s,3H),1.21(s,3H),1.10-2.10(m,18H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.83(m,1H),3.20(m,1H),3.47(m,2H),4.18(m,1H),4.37(m,1H),4.86(m,1H),5.17(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備16化合物403方法通法4。起始物Ⅲ化合物303色譜法洗脫液0％到2％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.10(s,9H),0.50(s,3H),0.82(m,9H),0.87(s,9H),0.88(s,9H),1.20-2.10(m,22H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.82(m,1H),3.18(m,1H),3.32(s,3H),4.18(m,1H),4.38(m,1H),4.86(m,1H),5.18(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備17化合物404方法通法4。起始物Ⅲ化合物304色譜法洗脫液2％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.05(m,12H),0.09(s,9H),0.50(s,3H),0.81(d,3H),0.86(s,18H),1.19(s,3H),1.20(s,3H),1.15-2.07(m,20H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.82(m,1H),3.22(m,1H),3.32(s,3H),4.18(m,1H),4.37(m,1H),4.86(m,1H),5.17(m,1H),6.00(d,1H),6.23(d,1H).制備18化合物405方法通法4。起始物Ⅲ化合物305色譜法洗脫液0％到3％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.09(s,9H),0.51(s,3H),0.81(m,9H),0.88(s,18H),1.15-2.10(m,24H),2.21(dd,1H),2.43(dd,1H),2.82(m,1H),3.21(m,1H),3.32(s,3H),4.18(m,1H),3.37(m,1H),4.86(m,1H),5.17(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備19化合物406方法通法4。起始物Ⅲ化合物306色譜法洗脫液0％到2％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.08(s,9H),0.49(s,3H),0.81(t,6H),0.82(d,3H),0.87(s,18H),1.17(t,3H),1.10-2.10(m,24H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.82(m,1H),3.23(m,1H),3.47(q,2H),4.18(m,1H),4.37(m,1H),4.86(m,1H),5.18(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備20化合物407方法通法4。起始物Ⅲ化合物307色譜法洗脫液0％到2％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.09(s,9H),0.50(s,3H),0.80(t,6H),0.81(d,3H),0.87(s,18H),1.44(q,4H),1.10-2.10(m,22H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.83(m,1H),3.21(m,1H),3.32(s,3H),4.18(m,1H),4.36(m,1H),4.86(m,1H),5.17(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備21化合物408方法通法4。起始物Ⅲ化合物308色譜法洗脫液0％到2％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=0.06(m,12H),0.09(s,9H),0.49(s,3H),0.79(t,6H),0.80(d,3H),0.87(s,18H),1.17(t,3H),1.44(q,4H),1.07-2.10(m,22H),2.21(dd,1H),2.44(dd,1H),2.83(m,1H),3.22(m,1H),3.47(m,2H),4.18(m,1H),4.36(m,1H),4.86(m,1H),5.17(m,1H),6.01(d,1H),6.23(d,1H).制備22化合物310方法通法2。起始物Ⅱ化合物203烷基化劑R3Z乙基溴色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:153.4,143.3,135.1,121.6,116.1,106.4,82.6,73.8,70.1,67.0,64.2,55.6,50.7,46.1,44.9,43.8,39.2,36.4,35.0,31.1,29.7,29.6,28.9,25.7,25.6,25.0,23.2,22.1,21.1,18.1,17.9,15.6,12.8,12.7,2.4,-4.9,-5.0,-5.1,-5.1.制備23化合物311方法通法2。起始物ⅡWO91/00271中的化合物114j烷基化劑R3Z甲基碘色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:153.4,143.2,135.1,121.6,116.2,106.4,83.4,73.8,70.1,67.0,56.4,55.8,51.2,45.9,44.8,43.8,39.6,36.4,35.4,30.2,29.7,29.6,28.8,26.7,25.8,25.7,25.6,24.5,23.3,22.0,18.1,17.9,12.6,12.3,2.4,-4.9,-5.0,-5.1,-5.1制備24化合物312方法通法2。起始物ⅡWO91/00271中的化合物114j烷基化劑R3Z乙基溴色譜法洗脫液0％到20％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:153.4,143.3,135.1,121.6,116.1,106.4,82.5,73.8,70.1,67.0,64.2,55.7,50.8,46.1,44.8,43.8,39.2,36.4,35.1,30.8,29.7,29.6,28.9,26.9,25.7,25.6,25.1,24.5,23.3,22.1,18.1,17.9,15.6,12.8,12.6,2.4,-4.9,-5.0,-5.1,-5.1制備25化合物314方法通法2a。起始物Ⅱ化合物201烷基化劑R3Z正丙基溴色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:153.5,143.3,135.1,121.6,116.1,106.4,83.0,73.8,70.6,70.1,67.0,55.7,50.9,46.1,43.8,41.2,39.4,36.4,35.3,29.8,29.6,28.9,25.7,25.6,25.3,25.2,23.4,23.3,22.1,18.1,17.9,12.6,10.7,2.4,-4.9,-5.0,-5.1,-5.1制備26化合物315方法通法2。起始物Ⅱ化合物201烷基化劑R3Z芐基溴色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:153.4,143.2,138.1,135.1,128.0,127.4,127.0,121.6,116.2,106.4,82.7,73.7,70.4,70.1,67.0,55.7,51.1,46.0,43.8,41.2,39.5,36.4,35.5,29.8,29.6,28.8,25.7,25.6,25.5,25.2,23.2,22.0,18.1,17.9,12.6,12.5,2.4,-4.9,-5.0,-5.1,-5.1制備27化合物410方法通法4。起始物Ⅲ化合物310色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:148.1,140.9,134.7,123.0,117.6,111.0,82.7,73.8,71.8,67.3,64.2,55.5,50.7,46.0,45.8,44.9,44.6,39.2,35.0,31.2,29.7,29.6,28.8,25.7,25.6,25.0,23.2,22.0,21.1,18.1,18.0,15.6,12.9,12.6,2.4,-4.9,-5.0,-5.3制備28化合物411方法通法4。起始物Ⅲ化合物311色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:148.1,140.8,134.8,123.0,117.6,111.0,83.4,73.7,71.8,67.3,56.4,55.6,51.2,45.8,45.7,44.7,44.6,39.7,35.4,30.1,29.7,29.6,28.7,26.7,25.8,25.7,25.6,24.5,23.3,21.9,18.0,17.9,12.5,12.3,2.4,-4.9,-5.0,-5.3制備29化合物412方法通法4。起始物Ⅲ化合物312色譜法洗脫液0％到5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:148.1,140.9,134.7,123.0,117.6,111.0,82.6,73.8,71.8,67.3,64.2,55.5,50.7,46.0,45.8,44.8,44.6,39.3,35.1,30.8,29.7,29.6,28.8,26.9,25.7,25.7,25.6,25.1,24.5,23.2,22.0,18.1,15.6,12.8,12.6,2.4,-4.9,-5.0,-5.3制備30化合物414方法通法4。起始物Ⅲ化合物314色譜法洗脫液0％到1％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:148.1,140.9,134.7,123.0,117.6,111.0,83.0,73.8,71.8,70.6,67.3,55.6,50.9,45.9,45.8,44.6,41.2,41.2,39.5,35.3,29.8,29.6,27.5,25.7,25.6,25.3,25.2,23.4,22.4,20.2,19.2,14.1,12.6,10.7,2.4,-4.9,-5.0,-5.3制備31化合物415方法通法4。起始物Ⅲ化合物315色譜法洗脫液0％到1％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:148.1,140.8,139.3,134.8,128.0,127.2,127.0,123.0,117.6,111.0,82.7,73.7,71.8,70.4,67.3,55.6,51.1,45.9,45.8,44.6,41.2,39.5,35.5,29.8,29.6,28.7,25.7,25.6,25.5,25.2,23.2,21.9,18.1,18.0,12.6,12.5,2.4,-4.8,-4.9,-5.0,-5.3制備32化合物416a方法通法4。起始物Ⅱ化合物201色譜法洗脫液0％到10％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:148.1,140.6,134.9,122.9,117.8,111.0,73.9,73.0,71.9,67.3,56.0,52.3,45.8,45.3,44.6,41.6,40.0,39.8,29.8,29.7,29.6,28.7,27.2,25.7,25.6,23.2,21.8,18.0,17.9,12.2,11.2,2.4,-4.9,-5.0,-5.3制備33化合物416方法通法3。起始物Ⅳ化合物416a?；噭┞攘螋始姿岜锦?125mg)堿吡啶(0.2ml)；4-二甲氨基吡啶(115mg)溶劑二氯甲烷(4ml)反應溫度20℃反應時間7小時色譜法洗脫液5％乙醚的石油醚溶液。
13C NMR:194.3,153.1,148.2,140.4,135.0,129.2,126.2,122.9,121.9,117.8,111.0,89.2,73.3,71.8,67.3,55.5,51.3,45.8,45.6,44.6,40.2,39.1,34.9,29.9,29.4,28.7,25.7,25.6,25.4,24.3,23.1,21.9,18.1,18.0,12.6,12.4,2.4,-4.9,-5.0,-5.3制備34化合物321方法通法2。烷基化劑R3Z甲基碘起始物Ⅱ化合物221反應時間15分鐘色譜法洗脫液15％乙醚的石油醚溶液PLC。
1H NMR:δ=6.45(d,1H),5.83(d,1H),4.98(m,1H),4.93(m,1H),4.53(m,1H),4.22(m,1H),3.30(s,3H),3.24(m,1H),2.88(m,1H),2.55(dd,1H),2.31(m,1H),2.08-1.15(m,18H),1.22(s,3H),1.19(s,3H),0.89(s,9H),0.86(s,9H),0.81(d,3H),0.58(s,3H),0.10(s,9H),0.05(m,12H)制備35化合物421方法通法4。起始物Ⅲ化合物321色譜法洗脫液0％到1％乙醚的石油醚溶液。
1H NMR:δ=6.24(d,1H),6.03(d,1H),5.18(m,1H),4.87(m,1H),4.37(m,1H),4.19(m,1H),3.31(s,3H),3.24(m,1H),2.83(m,1H),2.45(dd,1H),2.22(dd,1H),2.07-1.00(m,18H),1.23(s,3H),1.20(s,3H),0.88(s,18H),0.83(d,3H),0.58(s,3H),0.11(s,9H),0.06(m,12H)實施例實施例11(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-甲氧基-4-羥基-4-甲基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物101)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物401。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.52(s,3H),0.84(d,3H),1.22(s,3H),1.23(s,3H),1.15-2.10(m,21H),2.31(dd,1H),2.59(dd,1H),2.84(m,1H),3.17(m,1H),3.34(s,3H),4.22(m,1H),4.42(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.37(d,1H).
實施例21(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-乙氧基-4-羥基-4-甲基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物102)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物402。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.51(s,3H),0.85(d,3H),1.19(t,3H),1.22(s,3H),1.23(s,3H),1.10-2.10(m,21H),2.31(dd,1H),2.60(dd,1H),2.85(dd,1H),3.19(m,1H),3.49(m,2H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.39(d,1H).
實施例31(S),3(R)-二羥基-20(R)-(4-乙基-4-羥基-1-甲氧基-1-己基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物103)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物403。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.52(s,3H),0.86(m,9H),1.20-2.10(m,25H),2.32(dd,1H),2.60(dd,1H),2.85(m,1H),3.16(m,1H),3.34(s,3H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.38(d,1H).
實施例41(S),3(R)-二羥基-20(R)-(5-羥基-1-甲氧基-5-甲基-1-己基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物104)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物404。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.52(s,3H),0.83(d,3H),1.22(s,6H),1.20-2.10(m,23H),2.32(dd,1H),2.60(dd,1H),2.85(m,1H),3.20(m,1H),3.34(s,3H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.38(d,1H).
實施例51(S),3(R)-二羥基-20(R)-(5-乙基-5-羥基-1-甲氧基-1-庚基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物105)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物405。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.52(s,3H),0.82(d,3H),0.86(t,6H),1.46(q,4H),1.20-2.15(m,23H),2.31(dd,1H),2.60(dd,1H),2.84(m,1H),3.20(m,1H),3.33(s,3H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.38(d,1H).
實施例61(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-乙氧基-5-乙基-5-羥基-1-庚基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物106)方法通法6。
起始物Ⅳ化合物406。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.51(s,3H),0.83(d,3H),0.86(t,6H),1.18(t,3H),1.46(q,4H),1.15-2.15(m,23H),2.31(dd,1H),2.60(dd,1H),2.85(m,1H),3.23(m,1H),3.48(m,2H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.38(d,1H).
實施例71(S),3(R)-二羥基-20(R)-(6-乙基-6-羥基-1-甲氧基-1-辛基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物107)方法通法6。
起始物Ⅳ化合物407。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.52(s,3H),0.82(d,3H),0.86(t,6H),1.46(q,4H),1.15-2.10(m,25H),2.31(dd,1H),2.60(m,1H),2.84(m,1H),3.21(m,1H),3.33(s,3H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.38(d,1H).
實施例81(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-乙氧基-6-乙基-6-羥基-1-辛基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物108)方法通法6。
起始物Ⅳ化合物408。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=0.51(s,3H),0.82(d,3H),0.85(t,6H),1.18(t,3H),1.46(q,4H),1.10-2.10(m,25H),2.31(dd,1H),2.60(dd,1H),2.84(m,1H),3.22(m,1H),3.47(q,2H),4.23(m,1H),4.43(m,1H),5.00(m,1H),5.33(m,1H),6.02(d,1H),6.38(d,1H).
實施例91(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-乙氧基-5-羥基-5-甲基-1-己基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物110)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物410。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
13C NMR:147.7,143.0,133.2,124.8,117.0,111.7,83.1,71.0,70.7,66.7,64.5,55.7,50.6,46.4,45.2,44.1,42.9,39.2,34.9,31.4,29.4,29.2,29.1,24.9,23.5,22.3,21.3,15.8,13.2,12.9
實施例101(S),3(R)-二羥基-20(R)-(6-羥基-1-甲氧基-6-甲基-1-庚基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物111)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物411。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
13C NMR:147.7,143.1,133.0,124.9,117.0,111.8,83.8,71.0,70.8,66.8,56.7,55.8,51.2,46.1,45.3,44.0,42.9,39.6,35.4,30.3,29.3,29.2,29.1,27.0,25.8,24.7,23.5,22.2,12.8,12.6實施例111(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-乙氧基-6-羥基-6-甲基-1-庚基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物112)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物412。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=6.38(d,1H),6.01(d,1H),5.33(m,1H),5.00(m,1H),4.43(m,1H),4.23(m,1H),3.48(q,2H),3.22(m,1H),2.84(dd,1H),2.60(dd,1H),2.32(dd,1H),2.08-1.09(m,25H),1.21(s,6H),1.18(t,3H),0.82(d,3H),0.51(s,3H)實施例121(S),3(R)-二羥基-20(R)-(4-羥基-4-甲基-1-正丙氧基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物114)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物414。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=6.39(d,1H),6.02(d,1H),5.33(m,1H),5.00(m,1H),4.43(m,1H),4.23(m,1H),3.38(m,2H),3.19(m,1H),2.84(dd,1H),2.60(dd,1H),2.32(dd,1H),2.10-1.13(m,23H),1.22(s,6H),0.92(t,3H),0.85(d,3H),0.51(s,3H)實施例131(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-芐氧基-4-羥基-4-甲基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物115)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物415。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=7.41-7.23(m,5H),6.38(d,1H),6.02(d,1H),5.33(m,1H),5.00(m,1H),4.53(m,2H),4.43(m,1H),4.23(m,1H),3.42(m,1H),2.83(dd,1H),2.60(dd,1H),2.31(dd,1H),2.11-1.13(m,21H),1.22(s,6H),0.90(d,3H),0.53(s,3H)實施例141(S),3(R)-二羥基-20(R)-(4-羥基-4-甲基-1-苯氧基硫代羰氧基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A(化合物116)方法通法6。
起始物Ⅳ化合物416。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=7.42(t,2H),7.29(t,1H),7.08(d,2H),6.39(d,1H),6.03(d,1H),5.34(t,1H),5.24(m,1H),5.01(m,1H),4.44(m,1H),4.24(m,1H),2.85(dd,1H),2.61(dd,1H),2.32(dd,1H),2.15-1.20(m,21H),1.26(s,6H),0.97(d,3H),0.54(s,3H)實施例151(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-甲氧基-4-羥基-4-甲基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體B(化合物121)方法通法5。
起始物Ⅳ化合物421。
色譜法洗脫液50％到0％石油醚的乙酸乙酯溶液。
1H NMR:δ=6.38(d,1H),6.03(d,1H),5.34(m,1H),5.00(m,1H),4.44(m,1H),4.24(m,1H),3.32(s,3H),3.30(m,1H),2.84(m,1H),2.61(dd,1H),2.32(dd,1H),2.16(s,1H),2.09-1.11(m,20H),1.22(s,3H),1.21(s,3H),0.82(d,3H),0.60(s,3H)實施例16含有化合物101的膠囊將化合物101溶于花生油，使終濃度為1μg化合物101/ml油。將10重量份明膠，5重量份甘油，0.08重量份山梨酸鉀和14重量份蒸餾水一起混合加熱并形成軟明膠膠囊。然后向每個膠囊中填充100μl化合物101的油溶液，由此每個膠囊含有0.1μg化合物101。
實施例17含有化合物102的皮膚病用乳膏將0.05mg化合物102溶于1g杏仁油。向該溶液中加入40g礦物油和20g自乳化蜂蠟。將該混合物加熱至液化。加入40ml熱水后，該混合物充分混合。所得乳膏含有約0.5μg化合物102/g乳膏。
在本申請中提到了以下科技論文和參考文獻，每一篇論文或文獻的整個內容均結合在此作為參考?？萍颊撐募皡⒖嘉墨I1．Chaney,S.G.，生物化學手冊(Devlin,T.M編)，第三版，Wiley-Liss，紐約，1992,1121-1124頁。
2．DeLuca,H.F.；Krisinger,J.；Darwish,H.，國際腎臟學，1990,38(增刊，29)，S2-S8。
3．Bouillon,R.；Okamura,W.H.；Norman,A.W.，內分泌評論，1995,16,200-257。
4．Colston,K.W.，內分泌相關癌癥，1995,2,187-201。
5．Abe,E.；Miyaura,C.；Sakagami,H.；Takeda,M.；Konno,K.；Yamazaki,T.；Yoshiki,S.；Suda,T.，美國國家科學院院報，1981,78,4990-4994。
6．Muller,K.；Svenson,M.；Bendtzen,K，免疫學快報，1988,17,361-366。
7．Lind,L.；Wengle,B.；Ljunghall,S.，斯堪的納維亞內科學報，1987,222,423-427。
8．Inomata,S.；Kadowaki,S.；Yamatani,T.；Fukase,M.；Fujita,T.,骨礦物質，1986,1,187-192。
9．Editorial，柳葉刀，1989,i,p.478。
10．Malloy,V.L.等人，實驗皮膚病學三大陸(tricontinental)會議，華盛頓，1989。
11．Bikle,D.D.；內分泌評論專論(Endocr.Rev.Monogr.),1995,4,77-83。
12．Carswell,S.，實驗神經病學，1993,124,36-42。
13．Oikawa,T.；Hirotani,K.；Ogasawara,H.；Katayama,T.；Nakamura,A.；Iwaguchi,T.；Hiragun,A.，歐洲藥理學雜志，1990,178,247-250。
14．Studzinski,G.P.；McLane,J.A.；Uskokovic,M.R.，真核生物基因表達鑒定性評論(Critical Revs.Eukar.Gene Express),1993,3,279-312。
15．Binderup,L.；Bramm,E.，生化藥物學，1988,37,889-895。
16．Kragballe,K.，藥理學與毒理學，1995,77,241-246。
17．Highton,A.；Quell,J.；和鈣泊三烯研究組，美國皮膚病學會雜志，1995,32,67-72。
18．Binderup,L.； Latini,S.；Binderup,E.；Bretting,C.；Calverley,M.；Hansen,K，生化藥物學，1991,42,1569-1575。
19．Bikle,D.D.；內分泌評論，1992,13,765-784。
20．Pols,H.A.P.；Birkenhger J.C.；van Leeuwen,J.P.T.M.，臨床內分泌學，1994,40,285-291。
21．Calverley,M.J.；Jones,G.，抗腫瘤類固醇中的“維生素D”(Blickenataff,R.T.編)；Academic Press:San Diego,1992,193-270頁。
22．Binderup,L.，生物有機醫(yī)藥化學快報，1993,3,1891-1896。
23．Jung,S.J.；Lee,Y.Y.；Pakkala,S.；de Vos,S.；Elatner,E.；Norman,A.W.；Green,J.；Uskokovic,M.；Koeffler,H.P.，白血病研究，1994,18,453-463。
24．Mathiasen,I.S.；Colaton,K.W.；Binderup,L.，甾類生物化學及分子生物學雜志(J.Steroid Biochem.Mol.Biol.),1993,46,365-371。
25．Colaton,K.W.；Mackay,A.G.；James,S.Y.；Binderup,L.；Chander,S.；Coombes,R.C.，生化藥物學，1992,43,1885-1892。
26．Binderup,L.，國際骨論壇，1993,52-55。
27．Binderup,L.，生化藥物學，1992,43,1885-1892。
28．Elstner,E.；Linker-Israeli,M.；Said,J.；Umiel,T.；de Vos,S.；Shintaku,I.P.；Heber,D.；Binderup,L.；Uskokovic,M.；Koeffler,H.P.,癌癥研究，1995,55,2822-2830。
29．Rabasseda,X.；Mealy,N.；Castaner,J.；藥物未來，1995,20,567-571。
30．Johnson,C.；Tufveson,G.，國際移植雜志(Transplant Int.),1994,7,392-397。
31．Bouillon,C.；Garmyn,M.；Verstuyf,A.；Segaert,S.；Casteels,K.；Mathieu,C.，歐洲內分泌學雜志，1995,133,7-16。
32．Schilli,M.B.；Paus,R.；Czarnetzki,B.M.；Reichrat,J.,Hautarzt,1994,45,445-452。
33．Veyron,P.；Pamphile,R.；Binderup,L.；Touraine,J-L.，移植術免疫學，1993,1,72-76。
34．a．Bretting,C.；Mφrk Hansen,C.；Rastrup Andersen,N.,73-74頁；b．Grue-Sφrensen,G.；Binderup,E.；Binderup,L.,75-76頁；c．Calverley,M.J.；Grue-Sφrensen,G.；Bretting,C.；Binderup,L.,85-86頁；d．Hansen,K.；Mφrk Hansen,C.,95-96頁；e．Veyron,P.；Pamphile,R.；Binderup,L.；Touraine,J-L.,922-929頁；維生素D一種多能類固醇激素結構研究，分子內分泌學及臨床應用(Norman,A.W.；Bouillon,R.；Thomasset,M.編)，Walter deGruyter,Berlin,1994。
35．Mathieu,C.；Waer,M.；Casteels,K.；Laureys,J.；Bouillon,R.,內分泌學，1995,136,866-872。
36．Mathieu,C.；Laureys,J.；Wouillon,R.，移植術會報，1994,26,3128-3129。
37．Peleg,S.；Sastry,M.；Collins,E.D.；Bisshop,L.E.；Norman,A.W.，生物化學雜志，1995,270,10551-10558。
38．a．Bretting,C.；Calverley,M.J.；Binderup,L.,159-160頁；b．Hansen,K.；Calverley,M.J.；Binderup,L.,161-162頁；c．Calverley,M.J.；Binderup,E.；Binderup,L.,163-164頁；d．Binderup,E.；Calverley,M.J.；Binderup,L.,192-193頁；維生素D基因調節(jié)，結構-功能分析及臨床應用(Norman,A.W.；Bouillon,R.；Thomasset,M.編)，Walter de Gruyter,Berlin,1991。
39．Ikekawa,N.,25-33頁；維生素D分子、細胞及臨床內分泌學(Norman,A.w.；Schaefer,K.；Grigoleit,H.-G.；Herrath,D.v.編)，Walter de Gruyter,Berlin,1988。
40．Eguchi,T.；Yoshida,M.；Ikekawa,N.，生物有機化學，1989,17,294-307。
41．Hansen,C.M.；Mathiasen,I.S.，和Binderup,L.，實驗皮膚病學雜志，專題討論會會報，1996,1,44-48。
42．Calverley,M.J.，四面體，1987,43,4609-4619。
權利要求
1．式Ⅰ化合物
其中式Ⅹ是氫或羥基；R1和R2可以是相同或不同的，代表氫或C1-C3烷基；或者R1和R2與帶有基團X的碳原子一起可形成C3-C6碳環(huán)；R3代表C1-C3烷基，芳基或芳烷基，或代表YR4，其中Y代表基團-CO-S-,-CS-O-或-CS-S-，而R4代表C1-C3烷基或芳基或芳烷基；Q是(CH2)n,n為1-4；R1,R2和Q獨立地可任意被一個或多個氟原子取代。
2．按照權利要求1的式Ⅰ化合物，其中Q是(CH2)n,n為2或3，其中X是羥基，R1和R2是甲基或乙基，且R3是甲基或乙基。
3．按照權利要求1和2任一項所述化合物的非對映異構體，其是純形式的，或是該非對映異構體的混合物。
4．按照權利要求3的化合物的非對映異構體，其在C-22位具有“A”構型。
5．按照權利要求1的化合物，它是1(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-甲氧基-4-羥基-4-甲基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A，或1(S),3(R)-二羥基-20(R)-(1-乙氧基-4-羥基-4-甲基-1-戊基)-9,10-斷-孕-5(Z),7(E),10(19)-三烯；異構體A。
6．權利要求1的式Ⅰ化合物的制備方法，其中a)1(S),3(R)-雙-(叔)-丁基二甲基甲硅烷氧基)-20(R)-甲酰-9,10-斷-孕-5(E),7(E),10(19)-三烯與有機金屬試劑R-Met-Hal或R-Met反應，其中Met是合適的金屬，如鎂或鋰，Hal是Cl,Br或I，而R是-Q-CR1R2-X1其中X1是H,OH或OR5,R5是醇保護基，而R1,R2和Q含義如上，形成兩種C-22-表異構物ⅡA和ⅡB的混合物
將這兩種表異構物分離；b)步驟a)的式ⅡA或ⅡB化合物烷基化為相應的化合物ⅢA或ⅢB，其中R和R3含義如上，或任意地?；癁橄鄳幕衔铫驛或ⅢB，其中R3=YR4,Y和R4如權利要求1中定義
c)步驟b)的式ⅢA或ⅢB化合物在三重敏化劑如蒽存在下利用紫外線異構化為相應的化合物ⅣA或ⅣB，
其中R和R3如上定義；d)式ⅣA或ⅣB化合物脫保護為相應的通式Ⅰ化合物。
7．按照權利要求6的方法，其中以相反的順序進行步驟b)和c)。
8．按照權利要求6的方法，其中以相反的順序進行步驟c)和d)。
9．一種藥物組合物，它含有有效量的一種或多種權利要求1-5的化合物，以及藥學上可接受的無毒的載體和/或輔助劑。
10．按照權利要求9的藥物組合物，它是劑量單位形式且含有占劑量單位0.1ppm到0.1％重量的式Ⅰ化合物。
11．治療和/或預防疾病的方法，這些疾病是大量以非正常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病，諸如銀屑病和其他角化障礙，HIV相關皮膚病，傷口愈合，癌癥包括皮膚癌，以及免疫系統(tǒng)疾病或免疫系統(tǒng)失調，諸如宿主抗移植物和移植物抗宿主反應和移植排斥，和自身免疫病，如盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡，糖尿病和自身免疫型慢性皮膚病，例如硬皮病和普通天皰瘡，和炎性疾病，諸如類風濕性關節(jié)炎和哮喘，以及大量其他疾病狀態(tài)，包括甲狀旁腺功能亢進，特別是與腎衰竭相關的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進，識別力衰減或老年性癡呆(早老性癡呆)和其他神經變性疾病，高血壓，痤瘡，脫發(fā)，皮膚萎縮，例如類固醇所致皮膚萎縮，皮膚老化，包括光致老化，還涉及它們用于促進骨生成和治療/防止骨質疏松和骨軟化的用途，其特征在于給予需要治療的患者有效量的按照權利要求9的藥物組合物。
12．權利要求1-5任一項所述的化合物在用于治療和預防大量以非正常細胞分化和/或細胞增殖為特征的疾病，諸如銀屑病和其他角化障礙，HIV相關皮膚病，傷口愈合，癌癥包括皮膚癌，以及免疫系統(tǒng)疾病或免疫系統(tǒng)失調，諸如宿主抗移植物和移植物抗宿主反應和移植排斥，和自身免疫病，如盤狀和系統(tǒng)性紅斑狼瘡，糖尿病和自身免疫型慢性皮膚病，例如硬皮病和普通天皰瘡，和炎性疾病，諸如類風濕性關節(jié)炎和哮喘，以及大量其他疾病狀態(tài)，包括甲狀旁腺功能亢進，特別是與腎衰竭相關的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進，識別力衰減或老年性癡呆(早老性癡呆)和其他神經變性疾病，高血壓，痤瘡，脫發(fā)，皮膚萎縮，例如類固醇所致皮膚萎縮，皮膚老化，包括光致老化的藥劑的制備中的用途，以及它們用于促進骨生成和治療/防止骨質疏松和骨軟化的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物,其中式X是氫或羥基;R
文檔編號A61P17/00GK1219928SQ97195020
公開日1999年6月16日 申請日期1997年5月15日 優(yōu)先權日1996年6月4日
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