專利名稱：：左旋氧氟沙星類似物的合成及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及左旋氧氟沙星及其類似物的化學(xué)合成以及它們的生物活性，更具體地說(shuō)是左旋氧氟沙星的制備方法及左旋氧氟沙星類似物的制備和用途。氟喹諾酮化合物以其高效、廣譜、低毒的抗菌特性，在臨床抗感染治療方面取得了巨大成功，日本第一制藥公司開(kāi)發(fā)的左旋氧氟沙星(I)就是一個(gè)例子。該藥物抗菌譜廣，毒性低。它的抗菌活性為氧氟沙星的兩倍，水溶性增大10倍，但其合成路線十分復(fù)雜EP309789(1989)左旋氧氟沙星的合成主要有以下幾種方法1.拆分法包括高壓液相析分EP206283(1986)和酶法析分(K.Sakano，AgniaBiol.Chem.1987，51，1265)。該法不宜大規(guī)模制備。2.以(S)-2-氨基丙醇為手性起始原料，由四氟苯甲酸開(kāi)始經(jīng)7步反應(yīng)制得左旋氧氟沙星U.S.P.4777253，(1988)，該法比拆分法更適于工業(yè)生產(chǎn)，但起始原料四氟苯甲酸及(S)-2-氨基丙醇不易獲得。3.從三氟硝基苯和(R)-1，2-丙二醇及2-羥基保護(hù)的衍生物為原料，經(jīng)多步反應(yīng)制得EP368410(1990)，EP273399(1988)。該方法同樣存在手性原料不易獲得的問(wèn)題。不具實(shí)際意義。4.生物轉(zhuǎn)化的方法，此方法較為復(fù)雜。(TetrahedronLetters，1996，9317.)可以看出，以上方法對(duì)于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)高光學(xué)純度左旋氧氟沙星均存在各種各樣的限制，給工業(yè)化生產(chǎn)帶來(lái)一定的困難。本發(fā)明的一個(gè)目的是尋找出能工業(yè)化生產(chǎn)左旋氧氟沙星的方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是對(duì)左旋氧氟沙星進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，以發(fā)現(xiàn)效果更佳的新藥物。本發(fā)明左旋氧氟沙星衍生物可用下列通式表示其中R7為R1＝H，C1-C5的烷基；m＝1，2R2＝H，C1-C5的烷基R3＝C1-C5的直鏈或支鏈烷基，CH2PhR4＝H，C1-C5的烷基，吡啶，嘧啶，CO(CH2)nXX＝鹵素，n＝1，2R5＝H，NH2R6＝烷基或取代苯基本發(fā)明左旋氧氟沙星及其衍生物可由D-甘露醇為原料主要通過(guò)下列步驟制得a.三氟硝基苯在相轉(zhuǎn)移催化條件下與(S)-4縮合得縮合物(S)-5；b.(S)-5脫去保護(hù)基得(R)-6，(R)-6用醋酸-氫溴酸進(jìn)行溴乙酰化得(R)-7和(S)-7；c.(R)-7和(S)-7在甲醇鈉甲醇溶液中環(huán)化得環(huán)化物(R)-8；d.(R)-8用鈀/碳還原，還原物與EMME縮合得縮合物(R)-10，(R)-10經(jīng)環(huán)化，酸水解得關(guān)鍵中間體(S)-13；e.(S)-13與HR7在適當(dāng)?shù)臒o(wú)水溶劑中縮合得7-位被取代的上述左旋氧氟沙星及其衍生物；f.(S)-13在5-位引入氨得23，23與HR7在適當(dāng)?shù)娜軇┲锌s合得5-胺基取代的上述左旋氧氟沙星衍生物。g.烷基氨基氯甲酸酯，烷基或取代苯基磺酰氯，α-鹵代乙酰氯和7-位有仲氮結(jié)構(gòu)的左旋氧氟沙星衍生物縮合，得化合物29-60。本發(fā)明左旋氧氟沙星及其衍生物的制造方法具有手性起始原料豐富易得，反應(yīng)條件溫和，總收率高，光學(xué)純度高，制造成本低廉等優(yōu)點(diǎn)?？傊緦＠姆椒ㄝ^之文獻(xiàn)方法更適合于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明更詳細(xì)地通過(guò)以下反應(yīng)步驟實(shí)施a.KOH/K2CO3/甲苯b.HCl/CH3COCH3c.HBr/ACOHd.KOH/H2Oe.Pd/C/H2f.EMME/加熱g.Ph3P/DAD/THFh.PPE/加熱i.ACOH/HCl加熱在路易斯酸如無(wú)水氯化鋅，無(wú)水氯化鋁等催化下D-甘露醇經(jīng)丙酮保護(hù)后，用高碘酸鈉在極性非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷，三氯甲烷或醇類溶劑如甲醇，乙醇等中氧化，再用負(fù)氫離子還原劑如鉀硼氫，鈉硼氫等還原得手性化合物(S)-4。三氟硝基苯在非質(zhì)子溶劑中如甲苯，苯，鹵代烴等，相轉(zhuǎn)移催化條件下與(S)-縮合得(S)-5，酸催化脫掉保護(hù)基后，用醋酸-氫溴酸溴乙?；?，采用無(wú)機(jī)堿如氫氧化鈉，氫氧化鉀或有機(jī)堿如甲醇等環(huán)化得(R)-8，(R)-8用Pd/C或鉑/碳在醇類溶劑中催化還原，然后與乙氧甲叉丙二酸二乙酯縮合得(R)-10，(R)-10經(jīng)環(huán)化酸水解得關(guān)鍵中間體(S)-13。(S)-13與甲基哌嗪及其衍生物反應(yīng)得左旋氧氟沙星及其衍生物。7-位取代基對(duì)喹諾酮類化合物的抗菌活性有很大影響，它與藥物對(duì)細(xì)菌細(xì)胞膜的滲透能力及對(duì)DNA親合力有關(guān)，所以改變7-位取代基可能出現(xiàn)抗菌性能更理想的藥物，故以(S)-13與HR7在無(wú)水非質(zhì)子極性溶劑如吡啶，二甲基甲酰胺，二甲基亞砜等中縮合得7-位被取代的左旋氧氟沙星類似物14-21。其中R7為R1＝H，C1-C5的烷基；R2＝H，C1-C5的烷基；R3＝C1-C5的直鏈或支鏈烷基，CH2Ph，CH2X，X為鹵素R4＝H，C1-C5的烷基或取代氨基，吡啶，嘧啶，CO(CH2)nXX＝鹵素，n＝1，2R6＝烷基或取代苯基m＝1，2通常喹諾酮5-位引入取代基可改變喹諾酮的生物活性。引入氨基的方法是在(S)-13的5-位用硝酸鹽-濃硫酸硝化，硝酸鹽可用鉀鹽及鈉鹽等。然后催化還原，催化劑可用阮內(nèi)(Raney)鎳，鈀/碳，鉑/碳等。再與HR7在無(wú)水非質(zhì)子極性溶劑如吡啶，二甲基甲酰胺，二甲基亞砜等縮合得5-氨基取代的左旋氧氟沙星的衍生物24-28。7-位烷氧羰基取代喹諾酮的合成comp.29-487-位磺?；〈Z酮的合成comp.49-54喹諾酮-烷化劑衍生物的合成本發(fā)明涉及的化合物結(jié)構(gòu)式見(jiàn)表1。表1化合物1，14-60結(jié)構(gòu)式注1、15、16為參考化合物。生物活性測(cè)定1.抗菌活性測(cè)定抗菌活性的測(cè)定采用由世界衛(wèi)生組織推薦的對(duì)一般細(xì)菌最適宜的Mueller-Hinto(M-H)肉湯培養(yǎng)基，加入1.6％瓊脂粉，作為藥物稀釋的基質(zhì)。實(shí)驗(yàn)菌在M-H肉湯培養(yǎng)基中過(guò)夜培養(yǎng)并稀釋使接種量控制為5×103-5×104CFU，藥物濃度采用連續(xù)倍數(shù)稀釋法，加入到50-60℃的培養(yǎng)基中混合均勻后制備雙碟培養(yǎng)皿，最高濃度12.5μg/ml，最低濃度0.025，因各種樣品溶解性能不同，為方便比較以DMF、乙醇作為助溶劑，用無(wú)菌生理鹽水稀釋，最終助溶劑濃度DMF≤5.0％，乙醇≤2.5％，經(jīng)空白對(duì)照不影響各試驗(yàn)菌生長(zhǎng)。試驗(yàn)菌懸液用多頭接種儀接種于上述含各種化合物及不同濃度的培養(yǎng)皿中。將培養(yǎng)皿在35-37℃培養(yǎng)16-18小時(shí)，肉眼觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，繼續(xù)培養(yǎng)至42-44小時(shí)，再觀察其結(jié)果。抑制試驗(yàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度為最低抑菌濃度(MIC)，左旋氧氟沙星衍生物的體外抗菌活性(MIC，μg/ml)見(jiàn)表2。表2目標(biāo)化合物和參考化合物的抗菌活性(MICμg/ml)**ND表示沒(méi)有測(cè)定該化合物的MIC值2.抗腫瘤活性測(cè)定Microculturetetrozolium(MTT)代謝法微量培養(yǎng)四氮試驗(yàn)將一定量的癌細(xì)胞接種到96孔培養(yǎng)板內(nèi)，用含10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液稀釋至90μl，每孔加入10μl藥液，最終濃度分別為10-4、10-5、10-6Mol/ml，每組3個(gè)復(fù)孔。37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)72小時(shí)。加入20μl/孔MTT(5mg/ml)液，于37℃，5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-5小時(shí)后，加入100μl/孔三聯(lián)液(SDS-異丁醇-鹽酸)。然后在CO2培養(yǎng)箱中過(guò)夜。用酶標(biāo)儀中測(cè)定其OD值，與對(duì)照組相比，計(jì)算出抑制腫瘤生長(zhǎng)率(％)。見(jiàn)表3。表3部分化合物抑瘤率％(110r、10r、1r3.抗支原體活性測(cè)定抗支原體活性測(cè)定采用常規(guī)方法。培養(yǎng)基組成如下1∶1牛心消化液，0.5％氯化鈉，0.15％磷酸二氫鉀，10％自制新鮮酵母浸出液，0.002酚紅，10％小牛血清。UU4添加0.1％尿素，pH＝6.0±0.5。Mh、Mo、Ms添加0.1％精氨酸，pH＝6.8～7.0。Mg、Mp添加1％的葡萄糖血清增到15％，pH＝7.6～7.8。螺原體添加10％蔗糖，pH＝7.2～7.4。最低抑制支原體藥物濃度MIC(μg/ml)采用連續(xù)倍數(shù)稀釋法測(cè)定。MIC測(cè)定值見(jiàn)表4。表4部分化合物抗支原體*活性MIC(μg/ml</tables>*UU4-解脲脲原體；Mh-人型支原體；Mo-口腔支原體；Ms-唾液支原體；Mp-肺炎支原體；Mg-生殖支原體；Sc-柑枯僵化病螺原體；CH-1-蜜蜂螺原體；CR-1-油菜花螺原體。下面進(jìn)一步用實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明，它不限制本發(fā)明。核磁共振譜在我所分析室BrukerAM-400及AC-100上測(cè)定，質(zhì)譜在MAT-95型質(zhì)譜儀上進(jìn)行。元素分析由中科院上海有機(jī)化學(xué)研究所分析室完成。熔點(diǎn)儀型號(hào)為BUeHI510型，溫度計(jì)未經(jīng)校正。柱層析用硅膠，未加說(shuō)明均為200-300目，青島海洋化工廠生產(chǎn)。最佳實(shí)施例實(shí)驗(yàn)11，2，5，6-二縮丙酮-D-甘露醇D-2將無(wú)水氯化鋅22.9g(0.167mol)在機(jī)械攪拌下加到132毫升干燥丙酮中，降溫到15℃以下，加入D-甘露醇11.5g。在20℃攪拌反應(yīng)13hr，于0℃放置過(guò)夜，過(guò)濾，濾液攪拌5min.，將溶有23gK2CO3的23ml水溶液在劇烈攪拌下一次傾入反應(yīng)混合物中，立刻有大量白色沉淀生成，繼續(xù)攪拌30min，過(guò)濾，濾渣用氯仿洗(3×25ml)。濾液中加入氨水堿化，蒸去丙酮及水，得白色固體，四氯化碳重結(jié)晶，得針狀晶體D-2(9.0g)。收率58.0％。mp120℃。實(shí)驗(yàn)2(S)-1，2-縮丙酮甘油(S)-47.0gD-2溶于7mlpH＝6的磷酸緩沖液和40mlTHF的混合溶液中，攪拌下于20-25℃分批加入6.8gNaIO4。很快產(chǎn)生大量白色沉淀，1hr小時(shí)后用5N的NaOH調(diào)節(jié)到pH＝8。過(guò)濾，濾渣用氯仿洗二次。蒸掉THF，加入50ml甲醇，冷卻到10℃以下，過(guò)濾，濾液用1.6gKBH4還原，分批加入，使溫度不超過(guò)10℃。加完后，冰浴中反應(yīng)30min.，室溫反應(yīng)1hr后過(guò)濾，蒸去甲醇，加入20ml水，用氯仿萃取。氯仿干燥，脫去溶劑，減壓蒸餾得4.2g(S)-4。96-98℃/25mmHg。收率60.8％。實(shí)驗(yàn)3(S)-3，4-二氟-2-(1，2-縮丙酮丙基氧)硝基苯(S)-50.44g(S)-4溶解在2ml甲苯中，慢慢滴加到冰浴冷卻的含有0.56gKOH，0.45gK2CO3，0.53g三氟硝基苯的10ml甲苯混合物中，加入四正丁基氯化銨20mg，冰冷下攪拌0.5hr，室溫?cái)嚢?hr，TLC(RAC/石油醚＝1∶5)檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)。反應(yīng)畢，加入10ml水，分出甲苯，水相以甲苯萃取(2×20ml)，合并甲苯相，干燥，蒸去甲苯，得(S)-50.86g，收率100％。[α]D20＝-7.36。MSm/e＝274(M+-15)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.42-1.46(6H，m)，3.20-4.40(5H，m)，7.00(1H，m)，7.62(1H，m)。實(shí)驗(yàn)4(S)-3，4-二氟-2-(1，2-二羥基丙基氧)硝基苯(R)-62.60g(S)-5溶解在10ml丙酮中，加7ml1N鹽酸，在60℃水解反應(yīng)1hr。蒸去丙酮，殘留物用氯仿萃取(5×20ml)，干燥、濃縮，得(R)-6(2.25g)，收率100％。[α]D20＝13.34。1H-NMR(CDCl3)δppm3.68-3.88(2H，2×m，J＝5)，4.12(1H，b)，4，28-4.47(2H，m，2×m，J＝6)，7.05(1H，m，J＝8)，7.05(1H，m，J＝2)。實(shí)驗(yàn)5(S)-3，4-二氟-2-(1-溴-2-乙酰氧基丙基氧)硝基苯和(R)-3，4-二氟-2-(1-乙酰氧基-2-溴)硝基苯(S)-7和(R)-71.91g(97.67mmol)(R)-6和4.68g醋酸-氫溴酸在冰浴冷卻下攪拌5min.，在室溫繼續(xù)反應(yīng)30-40min.，。加入5ml水，用5N的NaOH調(diào)節(jié)到pH＝7，乙醚萃取(3×20ml)，乙醚溶液干燥，蒸去乙醚，得(S)-7和(R)-7(2.70g)，收率100％。MSm/e＝274(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm2.12(3H，s)，3.55-3.75(2H，m，2×m，J＝6Hz)，4.50(2H，m)，5.30(1H，m)，7.05(1H，m，J＝8Hz)，7.70(1H，m，J＝2Hz)。實(shí)驗(yàn)6(R)-3，4-二氟-2-(1，2-環(huán)氧丙基氧)硝基苯(R)-81.60g(S)-7和(R)-7用3N的KOH溶液10ml環(huán)化，在0-40℃攪拌10min，反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，醚層水洗，干燥，脫去溶劑，得(R)-8，收率100％。[α]D20＝11.93(0.0237，CDCl3)。MSm/e＝231(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm2.65-2.90(2H，m，2×m，J＝4Hz)，3.40(1H，b)，4.15-4.48(2H，m，2×m，J＝6Hz)，5.30(1H，m)，7.02(1H，m，J＝8Hz)，6.78(1H，m，J＝3Hz)。實(shí)驗(yàn)7(R)-3，4-二氟-2-(2-羥基丙基氧)苯胺(R)-91.00(R)-8溶解于60ml無(wú)水乙醇中，加入10％的Pd/C0.48g，在常壓常溫下氫化3.5hr，過(guò)濾掉催化劑。蒸去乙醇得(R)-9，收率100％。不用純化直接用于下一步反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)8(R)-3，4-二氟-2-(2-羥基丙基氧)-1-(2，2-二乙氧羰基乙烯基氨基)苯(R)-100.76g(R)-9和0.82gEMME在140-145℃反應(yīng)1.5hr，然后減壓抽掉生成乙醇，繼續(xù)反應(yīng)0.5hr，冷卻，用石油醚/乙酸乙酯＝1∶4重結(jié)晶得(R)-10，收率95％。MSm/e＝375(M+)。mp52-54℃。1H-NMR(CDCl3)δppm1.22-1.45(9H，m)，3.45(1H，d，J＝4.0Hz)，3.88-4.43(7H，m)，6.78-7.08(2H，m)，8.48(1H，d，J＝14Hz)。實(shí)驗(yàn)9(S)-二乙基-(7，8-二氟-3-甲基-3，4-二氫-2H-[1，4]苯并噁嗪-4)亞甲基丙二酸酯(S)-110.67gDAD和0.78gPh3P溶于12ml無(wú)水THF中，于0℃攪拌20min.，0.79g(R)-10溶解在2ml無(wú)水THF中，慢慢滴加到上述混合物中，加完后室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。蒸掉溶劑，殘留物柱層析，洗脫劑RAC/石油醚＝1∶3，得(S)-11，收率90％。1H-NMR(CDCl3)δppm1.20-1.24(9H，m)，3.90-4.40(7H，m)，6.71-6.78(2H，m)，7.76(1H，s)。實(shí)驗(yàn)10乙基(S)-(-)-9，10-二氟-2，3-二氫-3-甲基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酯酯(S)-121.33(S)-11和5gPPE在140-145℃反應(yīng)1.5hr，減壓下繼續(xù)反應(yīng)0.5hr冷卻到室溫，傾入冰水中，用氯仿萃取(3×30ml)，氯仿用5％碳酸鈉溶液洗(3×20ml)，水冼(1×20ml)，干燥，趕盡溶劑，固體物質(zhì)用乙醇洗到灰白得(S)-12，收率85％。不須進(jìn)一步純化，直接用于下步反實(shí)驗(yàn)11(S)-(-)-9，10-二氟-2，3-二氫-3-甲基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸(S)-130.73g(S)-12與濃鹽酸2.27ml，冰醋酸8.7ml回流3hr，冷卻，有無(wú)色針狀晶體析出，過(guò)濾，沉淀依次用水，乙醇，乙醚洗，干燥，得(S)-13(0.56g)，收率98％。mp＞300℃。[α]D20＝-64.7(0.01，DMSO)。MSm/e＝281(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.85(3H，d，2×m，J＝7Hz)，4.60-4.48(2H，2×m)，5.25(1H，m)，7.87(1H，d)，9.40(1H，s)。實(shí)驗(yàn)12(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸(I)Levoflloxacin。84.3mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，加入0.13mlN-甲基哌嗪，反應(yīng)混合物在120℃回流攪拌20hr，冷卻，趕盡吡啶，加入10ml氯仿和5ml乙醚溶解殘留物，混合液用水洗，干燥，除去氯仿，殘留物乙醇重結(jié)晶，得左旋氧氟沙星(80mg)，收率80％。mp238-240℃。[α]D20＝-77.9℃(c＝0.2，0.05NNaOH)。MSm/e361(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.45(3H，d，J＝7Hz)，2.30(3H，s)，2.50(4H，m)，3.30(4H，m)，4.35-4.58(2H，dd，J＝7Hz)，4.90(1H，d，J＝6Hz)，7.58(1H，m，J＝13Hz)，8.89(1H，s)。實(shí)驗(yàn)13(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-氨基甲基哌啶基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸14112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入4-氨基甲基哌啶68.5mg。反應(yīng)混合物在120-130℃回流過(guò)夜，蒸盡吡啶，殘留物加入乙醇溶解，減壓蒸盡乙醇，膊D留物加入丙酮，過(guò)濾掉不溶物，蒸掉部分丙酮，放置結(jié)晶，得120mg產(chǎn)物，收率80％。mp175-178℃。MSm/e＝375(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.05-1.55(5H，m)，1.45(3H，d，J＝7Hz)，2.45(2H，d)，2.95-3.30(4H，m)，4.32-4.55(2H，dd)，4.88(H，d)，7.60(1H，d，)，8.80(1H，s)。實(shí)驗(yàn)14(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸15448mg(S)-13溶解在10ml吡啶中，在攪拌下加入208mg哌嗪。反應(yīng)混合物在120-130℃回流過(guò)夜，蒸盡吡啶，殘留物加入乙醇溶解，減壓蒸盡乙醇，殘留物用乙醇重結(jié)晶，得360mg產(chǎn)物，收率65％。mp＞250℃。MSm/e＝347(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.48(3H，d，J＝7Hz)，2.50(4H，m)，3.32(4H，m)，4.38-4.60(2H，dd)，4.92(H，d，J＝7Hz)，7.58(1H，d，)，8.89(1H，s)。實(shí)驗(yàn)15(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸16112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入60mg2-甲基哌嗪。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。殘留物丙酮-水重結(jié)晶，得產(chǎn)物57.2mg，收率40％。mp225-228℃。MSm/e＝361(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.00(3H，d，J＝6Hz)，1.48(3H，d，J＝6Hz)，2.50(3H，m)，3.30(4H，m)，4.53-4.60(2H，dd)，4.92(H，d，J＝7Hz)，7.60(1H，d，)，8.89(1H，s)。實(shí)驗(yàn)16(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2-氨基乙基)哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸17112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入103mg1-(2-氨基乙基)哌嗪。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。殘留物加水析出白色固體，過(guò)濾，水重結(jié)晶，得產(chǎn)物80mg，收率51％。mp203-228℃。MSm/e＝390(M+)。1H-NMR(DMSO-D6)δppm1.48(3H，d，J＝6Hz)，2.32-2.27(8H，m)，3.35(4H，m)，4.35-4.55(2H，dd)，7.60(1H，d，J＝13Hz)，8.89(1H，s)。實(shí)驗(yàn)17(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2-吡啶基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸18112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入260mg1-(2-吡啶基)哌嗪。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。乙醇重結(jié)晶得18，收率41.3％。mp245-247℃。MSm/e＝424(M+)。1H-NMR(CDCl3)δpmm1.68(3H，d，J＝6Hz)，3.45(4H，m)，3.90(4H，m)，4.30～4.52(3H，m)，6.80(2H，m)，7.31(1H，d)，8.76(1H，m)，8.30(1H，d)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)18(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2-嘧啶哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸19112mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入264mg1-(2-嘧啶基)哌嗪。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。氯仿-丙酮重結(jié)晶，得產(chǎn)物85mg，收率50％。mp290-292℃。MSm/e＝425(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.48(3H，d，J＝6Hz)，3.25(4H)，3.90(4H，m)，4.40～4.62(2H，m，)，4.95(H，d)，6.71(1H，d)，7.61(1H，d，J＝11Hz)，8.40(2H，d)，9.00(1H，s)。實(shí)驗(yàn)19(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3，5-二甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸2084.1mg(S)-13溶解在3ml吡啶中，在攪拌下加入60mg3，5-二甲基哌嗪。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。殘留物乙醇-丙酮重結(jié)晶，得產(chǎn)物30mg，收率27％。mp240-243℃。MSm/e＝375(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm2.20(6H，d)，2.50(3H，d)，4.28(3H，m)，4.58(4H，m)，5.31～5.48(2H，dd)，5.78(H，d)，8.72(1H，d)，9.95(1H，s)。實(shí)驗(yàn)20(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-高哌嗪基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸21112mg(S)-13溶解在5ml吡啶中，在攪拌下加入60mg高哌嗪。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。DMF-乙醇重結(jié)晶，得82mg產(chǎn)物，收率57％。mp＞280℃。MSm/e＝347(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.70(3H，d)，2.53(2H，m)，3.60-.4.00(8H，m)，4.50-4.72(2H，dd)，5.50(1H，d)，7.95(1H，d)，9.18(1H，s)。實(shí)驗(yàn)21(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-硝基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸22200mg(S)-13溶解在4ml濃硫酸中，在內(nèi)溫低于5℃時(shí)加入400mgKNO3，加畢反應(yīng)30min，在室溫反應(yīng)1hr。反應(yīng)混合物倒入冰水中，析出物過(guò)濾，水洗，干燥，用氯仿-乙醇重結(jié)晶得0.21mg產(chǎn)物，收率91％。實(shí)驗(yàn)22(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸230.22g22和180mg乙醇及20mgPd/C(10％)，在常壓下氫化3hr。反應(yīng)畢，加熱使其溶解，趁熱過(guò)濾掉催化劑，稍冷析出沉淀。除去乙醇，得產(chǎn)物0.14g，收率78％。mp＞280℃。MSm/e＝296(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.48(3H，d，J＝7Hz)，4.25-4.51(2H，dd)，4.81(1H，d)，8.98(1H，s)。實(shí)驗(yàn)23(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸24100mg23和40mgN-甲基哌嗪溶解在5ml吡啶中。反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。DMF-乙醇重結(jié)晶，得產(chǎn)物70mg，收率55％。mp＞260℃分解。MSm/e376(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.61(3H，d)，3.05(3H，s)，3.28-3.78(8H，m)，4.40-4.60(2H，dd)，4.78(1H，d)，8.98(1H，s)。實(shí)驗(yàn)24(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-哌嗪基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸25100mg23和117mg無(wú)水哌嗪反應(yīng)，反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。得65mg產(chǎn)物，收率53％。mp215℃分解。MSm/e＝362(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.75(3H，d)，3.60-4.00(8H，m)，4.48-4.72(2H，dd)，4.90(1H，d)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)25(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸26100mg23和136mg2-甲基哌嗪反應(yīng)，反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。水重結(jié)晶得50mg產(chǎn)物，收率39％。mp215℃分解。MSm/e＝376(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.85(3H，d)，2.00(3H，d)，3.80～4.20(7H，m)，4.48～4.72(2H，dd)，4.90(1H，d)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)26(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-氨基-10-(4-(2-氨基乙基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸27100mg23和176mg1-(2-氨基乙基)哌嗪反應(yīng)，反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)14。用鹽酸酸化到pH＝1，放置，過(guò)濾，丙酮-水重結(jié)晶得40mg27，收率27％。mp236-237℃。MSm/e405(M+)。1H-NMR(D2O)δppm1.56(3H，d)，3.50-4.00(12H，m)，4.28-4.45(2H，dd)，4.65(1H，d)，8.50(1H，s)。實(shí)驗(yàn)27(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-高哌嗪基-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸28120mg23和85mg高哌嗪反應(yīng)，操作實(shí)驗(yàn)14。DMF-乙醇重結(jié)晶得100mg28，收率66％。mp＞230℃分解。MSm/e376(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.65(3H，d)，2.30(2H，m)，3.50-3.80(8H，m)，4.38-4.62(2H，dd)，4.80(1H，d)，7.00(1H，s)。實(shí)驗(yàn)28(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-乙氧基羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸29和15等摩爾的苯甲酸溶解在20ml無(wú)水四氫呋喃中，冷卻到-15℃，加入三乙胺42μl，再加14μl氯甲酸乙酯，在-15℃反應(yīng)1hr后，加入52mg15，繼續(xù)反應(yīng)30min.，TLC檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)。反應(yīng)畢，用1N鹽酸酸化到pH＝3-4，蒸掉THE，殘余物用氯仿萃取，干燥，除去溶劑，固體用乙酸乙酯重結(jié)晶得30mg29，收率48％。mp235-237℃。MSm/e419(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.3(3H，m，J＝7Hz)，1.58(3H，d)，3.35(4H，m)，3.65(4H，m)，4.18(2H，m)，4.35-4.51(3H，d)，7.75(1H，d，J＝13Hz)，8.62(1H，s)。實(shí)驗(yàn)29(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基-4-乙氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3040mg16懸浮于15ml鈉干四氫呋喃中，加入0.032ml三乙胺，在冰冷下滴加0.011ml氯甲酸乙酯的5mlTHF溶液，加完后攪拌2-3hr，然后在室溫反應(yīng)2-3hr，TLC檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)。反應(yīng)完，用1N鹽酸調(diào)到酸性(pH＝3-4)，蒸掉THF，殘留物柱層(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝25∶1)。得30mg30，收率63％。mp252-253℃。MSm/e＝433(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.35(6H，m，)，1.65(3H，d)，3.15-3.55(7H，m)，4.0(1H，m)，4.18(2H，m)，4.40(2H，m)，7.70(1H，d，J＝12Hz)，8.62(1H，s)。實(shí)驗(yàn)30(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-異丁氧羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3150mg15(0.144mmol)溶解在碳酸氫鈉飽和溶液中，冷卻到0℃滴加38μl氯甲酸異丁酯的2ml乙二醇二甲醚溶液，加完繼續(xù)反應(yīng)1hr，在18-20℃反應(yīng)2hr。酸化到pH＝3-4，過(guò)濾，沉淀干燥，甲醇重結(jié)晶得25mg31，收率39％。mp252-253℃。MSm/e＝447(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.95(6H，2×s，)，1.59(3H，d，J＝6Hz)，1.95(1H，m)，3.35(4H，m)，3.60(4H，m)，3.89(2H，d，J＝2Hz)，4.40-4.51(3H，m)，7.75(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)31(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-甲基氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3260mg(0.173mmol)15懸浮于15ml鈉干四氫呋喃中，加入0.048ml三乙胺，在冰冷下滴加0.027ml(0.35mmol)氯甲酸甲酯的5mlTHF溶液。操作同實(shí)驗(yàn)29。殘留物柱層析，洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得20mg32，收率29％。mp237-239℃。MSm/e405(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d，J＝6Hz)，3.30(4H，m)，3.60(4H，m)，3.70(3H，s)，4.40-4.60(3H，m)，7.70(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)32(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-異丁氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3350mg25(0,138mmol)和等摩爾的氯甲酸異丁酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30，柱層析(洗脫劑乙酸己酯/石油醚＝1.5∶1)。得產(chǎn)物25mg，收率39％。mp260-262℃。MSm/e462(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.95(6H，2×s，)，1.55(3H，d，J＝6Hz)，1.98(1H，m)，3.32(4H，m)，3.65(4H，m)，3.90(2H，d，J＝2Hz)，4.18-4.35(3H，m)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)33(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-乙氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3450mg25(0,138mmol)和0.026ml氯甲酸乙酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30。乙醇重結(jié)晶，得35mg產(chǎn)物，收率61％。mp281-282℃。MSm/e＝434(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.36(3H，m，J＝8Hz)，1.60(3H，d，J＝6Hz)，3.30(4H，m)，3.50(4H，m)，4.20(2H，m)，4.35-4.50(3H，m)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)34(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-乙氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3550mg26(0.138mmol)和0.026ml氯甲酸乙酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30。乙醇重結(jié)晶，得30mg。收率50％。mp240-242℃。MSm/e448(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.30(3H，m)，1.48(3H，d)，3.15-3.45(7H，m)，3.95(2H，m)，4.05-4.40(3H，m)，8.40(1H，s)。實(shí)驗(yàn)35(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-異丁基氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3650mg26(0,133mmol)和0.038ml氯甲酸異丁酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30，柱層析(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1)。得產(chǎn)物43mg，收率68％。mp224-226℃。MSm/e476(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.95(6H，2×s，)，1.35(3H，m)，1.95(1H，m)，3.15-3.50(7H，m)，3.95(2H，m)，4.40(3H，m)，8.50(1H，s)。實(shí)驗(yàn)36(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基-4-異丁基氧羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3750mg26(0,138mmol)和0.036ml氯甲酸異丁酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30。乙醇重結(jié)晶得40mg37，收率63％。mp205-206℃。MSm/e461(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm0.98(6H，2×s)，1.45(3H，m)，1.53(3H，d)，1.95(1H，m)，3.15-3.50(7H，m)，3.90(2H，m)，4.35-4.55(3H，m)，7.65(1H，d，12)，8.60(1H，s)。實(shí)驗(yàn)37(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-甲氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3850mg25(0,138mmol)和0.021ml(0.27mmol)氯甲酸甲酯及0.038ml三乙胺反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)29。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得15mg38，收率26％。mp286-288℃。MSm/e420(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.45(3H，m)，3.28(4H，m)，3.50(4H，m)，3.75(3H，s)，4.15-4.40(3H，m)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)38(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基4-甲氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸3950mg16(0.138mmol)和0.021ml(0.27mmol)氯甲酸甲酯及0.038ml三乙胺反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)29。展開(kāi)劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得20mg產(chǎn)物，收率35％。mp195-198℃。MSm/e419(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.30(3H，m)，1.68(3H，d)，3.10-3.45(7H，m)，3.65(3H，m)，4.30-4.55(3H，m)，7.70(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)39(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-甲氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4050mg26(0,133mmol)和0.021ml(0.27mmol)氯甲酸甲酯及0.038ml三乙胺反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)29。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1。得產(chǎn)物25mg，收率43％。mp＞280℃分解。MSm/e434(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.28(3H，m)，1.55(3H，d)，3.10-3.50(7H，m)，3.75(3H，m)，4.10-4.45(3H，m)，8.49(1H，s)。實(shí)驗(yàn)40(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-三氯乙基氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4150mg15(0.144mmol)和0.020ml(0.15mmol)氯甲酸三氯乙酯及0.038ml三乙胺反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)29。展開(kāi)劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1。得37mg41，收率49％。mp238-240℃分解。MSm/e521(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.51(3H，d)，3.35(4H，m)，3.60(4H，m)，4.30-4.55(3H，m)，4.95(2H，s)，7.72(1H，d)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)41(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-三氯乙氧基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4250mg25(0.138mmol)和0.020ml(0.15mmol)氯甲酸三氯乙酯及0.020ml三乙胺反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)29。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1。得23mg42，收率31％。mp＞260℃分解。MSm/e536(M+)。1H-NMR(CDCl3)5ppm1.55(3H，d，J＝6Hz)，3.35(4H，m)，3.70(4H，m)，4.15-4.20(2H，dd)，4.40(1H，d)，4.80(2H，s)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)42(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4350mg21和0.025ml氯甲酸乙酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30。洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝10∶1。得40mg43，收率67％。mp203-205℃分解。MSm/e433(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.28(3H，m)，1.65(3H，d)，2.10(1H，m)，3.45(4H，m)，3.65(4H，m)，4.25(2H，m)，4.30-4.45(2H，dd)，4.52(1H，d)，7.70(1H，d)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)43(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-甲氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4450mg21(0.138mmol)用4mlDMF加熱溶解，冷卻后加入0.048ml三乙胺，然后用針筒加入0.022ml氯甲酸甲酯，冷卻下反應(yīng)30min.，然后室溫反應(yīng)3hr，壓減抽凈DMF，殘留物二氯甲烷用溶解。柱層析(二氯甲烷-甲醇＝30∶1)，得40mg44，收率77％。mp210-211℃分解。MSm/e419(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d)，1.95(2H，d)，3.25-3.65(8H，m)，3.70(3H，s)，4.30-4.45(3H，m)，7.65(1H，d)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)44(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-三氯乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4550mg21(0.138mmol)用4mlDMF加熱溶解，冷卻后加入0.048ml三乙胺，用針筒加入0.022ml氯甲酸三氯乙酯，冷卻下反應(yīng)30min.。然后室溫反應(yīng)3hr，油泵壓減抽凈DMF，殘留物二氯甲烷用溶解。柱層析(二氯甲烷-甲醇＝20；1)。得20mg產(chǎn)物，收率27％。mp215-217℃。MSm/e535(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d)，2.05(2H，d)，3.45(4H，m)，3.75(4H，m)，4.30-4.55(3H，m)，4.78(2H，s)，7.65(1H，d)，8.61(1H，s)。實(shí)驗(yàn)45(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4640mg28(0.106mmo1)，0.036ml三乙胺，0.019ml氯甲酸乙酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30。柱層析(洗脫劑氯仿-甲醇＝30∶1)，然后乙醇重結(jié)晶，得25mg2產(chǎn)物，收率53％。mp240-241℃。MSm/e448(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.25(3H，d)，1.62(3H，d)，2.05(2H，d)，3.45(4H，m)，3.65(4H，m)，4.20(2H，m)，4.30(1H，m)，8.35(1H，s)。實(shí)驗(yàn)46(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-三氯乙氧基羰基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4740mg28(0.106mmol)，0.020ml三乙胺，0.011mmol氯甲酸三乙酯反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)30。柱層析(洗脫劑，氯仿-甲醇＝30∶1)，然后乙醇-氯仿重結(jié)晶，得35mg產(chǎn)品。收率60％。mp＞280℃分解。MSm/e551(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.55(3H，d，J＝6Hz)，2.00(1H，m)，3.50(4H，m)，3.70(4H，m)，4.15-4.30(2H，dd)，4.35(1H，d)，4.80(2H，s)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)47(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-芐氧羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4840mg15(0.115mmol)和0.024ml氯甲酸芐酯(0.12mmol)及0.035ml三乙胺反應(yīng)，操作同實(shí)驗(yàn)29。柱層析(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝30∶1)。得46mg產(chǎn)物，收率83％。mp218-220℃。MSm/e481(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.65(3H，d)，3.30(4H，m)，3.65(4H，m)，4.13-4.30(2H，dd)，4.45(1H，d)，5.15(2H，s)，7.27-7.35(5H，m)，7.75(1H，d，J＝11Hz)，8.60(1H，s)。實(shí)驗(yàn)48(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-對(duì)氨基苯磺?；?1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸4950mg15(0.144mmol)溶解在4ml0.1N的氫氧化鈉溶液中，在0℃時(shí)加入對(duì)硝基苯磺酰氯35mg(0.15mmol)，加完繼續(xù)反應(yīng)30分鐘，室溫再反應(yīng)3-4小時(shí)，用1N的鹽酸酸化到pH＝3-4，冷卻過(guò)濾，沉淀水洗，干燥。DMF-乙醇重結(jié)晶，得50mg淡黃色晶體，收率65％。取40mg上述晶體用甲醇加熱溶解，20mgPd/C(10％)催化氫化8小時(shí)，過(guò)濾掉催化劑，蒸去甲醇，殘留物用乙醇重結(jié)晶，得16mg產(chǎn)物，收率42％。mp＞260℃分解。MSm/e502(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.65(3H，d，J＝7Hz)，3.38(4H，m)，3.75(4H，m)，4.45-4.62(2H，dd)，4.95(1H，d)，7.80(1H，d，J＝9Hz)，7.85-8.00(4H，m)，9.15(1H，s)。實(shí)驗(yàn)49(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-對(duì)氨基苯基磺?；哙?-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪嗪-6-羧酸5050mg25和35mg對(duì)硝基苯磺酰氯反應(yīng)操作同實(shí)驗(yàn)48。得16mg產(chǎn)物，收率22％(兩步合算)。mp＞280℃分解。MSm/e＝517(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.55(3H，d，J＝6Hz)，3.30(4H，m)，3.60(4H，m)，4.45-4.62(2H，dd)，4.75(1H，d)，7.75-8.00(4H，dd)，8.95(1H，s)。實(shí)驗(yàn)50(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基10-(4-甲基磺?；?1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5150mg15(0.144mmol)和MsCl(0.15mmol)反應(yīng)，操作實(shí)驗(yàn)48。氯仿-甲醇重結(jié)晶得產(chǎn)物31mg，收率50％。mp＞250℃分解。MSm/e425(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.75(3H，d)，3.00(3H，s)，3.51-4.10(8H，m)，4.59-4.75(2H，m)，5.10(1H，d)，7.95(1H，d)，9.25(1H，s)。實(shí)驗(yàn)51(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-苯磺?；?1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5250mg15(0.144mmol)和苯磺酰氯(0.15mmol)反應(yīng)，操作實(shí)驗(yàn)48。收率55％。mp＞250℃分解；MSm/e487(M+)；1H-NMR(CF3COOD)δppm1.68(3H，d)，3.51-4.10(8H，m)，4.50-4.25(2H，m)，5.10(1H，d)，7.55-8.00(5H，m)，9.15(1H，s)。實(shí)驗(yàn)52(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-對(duì)甲苯磺?；?1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5350mg15(0.144mmol)和對(duì)甲苯磺酰氯(0.15mmol)反應(yīng)，操作實(shí)驗(yàn)48，收率70％。mp＞260℃分解。MSm/e501(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.65(3H，d)，2.39(3H，s)，3.45(4H，m)，4.00(4H，m)，4.51-4.72(2H，m)，5.10(1H，d)，7.74-7.90(4H，3×d)，9.25(1H，s)。實(shí)驗(yàn)53(S)-(-)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-對(duì)乙酰胺基苯磺?；?1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5450mg15(0.144mmol)和對(duì)乙酰胺基磺酰氯(0.15mmol)反應(yīng)，操作同上，收率64％。mp205-207℃分解。MSm/e544(M+)。H-NMR(CF3COOD)δppm1.45(3H，d)，2.10(3H，s)，3.00(4H，m)，3.30(4H，m)，4.30～4.55(2H，dd)，4.90(1H，m)，7.58～7.75(4H，2×d，)，7.85(1H，d)，8.95(1H，s)。實(shí)驗(yàn)54(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-(2溴乙基羰基)哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5550mg15(0.144mmol)溶解在飽和NaHCO3溶液中，冷卻到0℃，滴加30mgβ-溴丙酸酰氯的2ml乙二醇二甲醚溶液，加完之后，繼續(xù)反應(yīng)1hr，在18-20℃反應(yīng)3hr，反應(yīng)畢，用1N鹽酸調(diào)到pH＝3-4，過(guò)濾，烘干沉淀，用甲醇重結(jié)晶，得35mg55，收率50％。mp221-223℃。MSm/e482(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm2.55(3H，d，J＝7Hz)，4.10(2H，m)，4.50(2H，m)，4.50-5.00(8H，m)，5.45-5.55(2H，dd)，5.58(1H，dd)，8.80(1H，d)，10.00(1H，s)。實(shí)驗(yàn)55(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-氯甲基羰基哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5650mg15溶解在3ml干燥DMF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙二醇二甲醚溶液，加完之后，繼續(xù)反應(yīng)3hr，過(guò)濾掉三乙胺鹽酸鹽，蒸干DMF，乙醇重結(jié)晶得50mg產(chǎn)物，收率82％。mp202-204。MSm/e423(M+)。1H-NMR(CF3COOD)δppm1.48(3H，d)，2.48(4H，m)，3.25(4H，m)，3.60(2H，s)，4.40-4.60(2H，dd)，4.95(1H，dd)，7.65(1H，d)，9.00(1H，s)。實(shí)驗(yàn)56(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(3-甲基-4-氯甲基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5750mg16溶解在20ml干燥THF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙醇二甲醚溶液，加完之后，繼續(xù)反應(yīng)3hr，過(guò)濾掉三乙胺鹽酸鹽，蒸于THF，乙醇重結(jié)晶，得產(chǎn)物30mg，收率50％。mp164-165℃。MSm/e437(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.60(3H，m)，1.65(3H，m)，3.20(4H，m)，3.40(4H，m)，4.10(2H，s)，4.35-4.55(3H，m)，7.75(1H，d，J＝12Hz)，8.65(1H，s)。實(shí)驗(yàn)57(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(3-甲基-4-氯甲基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5850mg26溶解在3ml干燥DMF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙醇二甲醚溶液，加完之后，繼續(xù)反應(yīng)3hr。操作同實(shí)驗(yàn)56。柱層析(洗脫劑三氯甲烷/甲醇＝30∶1)。得產(chǎn)物42mg，收率34％。mp269-270℃。MSm/e452(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.35(3H，d)，1.55(3H，d)，3.20-3.60(7H，m)，4.10(2H，s)，4.15-4.40(3H，m)，8.45(1H，s)。實(shí)驗(yàn)58(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-8-氨基-10-(4-氯甲基羰基哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸5950mg25溶解在3ml干燥DMF中，加入0.020ml三乙胺，冷卻到0℃，滴加氯乙酰氯0.012ml的2ml乙醇二甲醚溶液，加完之后，繼續(xù)反應(yīng)3hr。操作同實(shí)驗(yàn)56。乙醇-水重結(jié)晶，得產(chǎn)物30mg，收率50％。mp＞280℃分解。MSm/e438(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.48(3H，d，J＝7Hz)，3.45(4H，m)，3.80(4H，m)，4.20(2H，s)，4.21-4.48(3H，m)，8.48(1H，s)。實(shí)驗(yàn)59(S)-9-氟-2，3-二氫-3-甲基-10-(4-氯甲基高哌嗪)-7-氧代-7H-吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪-6-羧酸6040mg21(0.11mmol)，0.020ml三乙胺，氯乙酰氯0.010ml。操作同實(shí)驗(yàn)56。柱層析(洗脫劑二氯甲烷/甲醇＝20∶1)。得21mg產(chǎn)物，收率44％。mp217-217℃。MSm/e437(M+)。1H-NMR(CDCl3)δppm1.62(3H，d)，2.00(1H，m)，3.45(4H，m)，3.70(4H，m)，4.10(2H，s)，4.30-4.55(3H，m)，7.55(1H，d)，8.65(1H，s)。權(quán)利要求1.一種結(jié)構(gòu)式如下的左旋氧氟沙星衍生物其中R7為R1＝H，C1-C5的烷基；m＝1，2R2＝H，C1-C5的烷基R3＝C1-C5的直鏈或支鏈烷基，CH2PhR4＝H，C1-C5的烷基，吡啶，嘧啶，CO(CH2)nXX＝鹵素，n＝1，2R5＝H，NH2R6＝烷基或取代苯基2.根據(jù)權(quán)利要求1所述左旋氧氟沙星及其衍生物，其特征在于它們通過(guò)下列中間體(S)-5，(R)-6，(S)-7，(R)-7制備獲得3.根據(jù)權(quán)利要求1所述左旋氧氟沙星及其衍生物，其特征在于它的制備方法a三氟硝基苯在相轉(zhuǎn)移催化條件下與(S)-4縮合得縮合物(S)-5；b(S)-5脫去保護(hù)基得(R)-6，(R)-6用醋酸-氫溴酸進(jìn)行溴乙?；?R)-7和(S)-7；c.(R)-7和(S)-7在甲醇鈉甲醇溶液中環(huán)化得環(huán)化物(R)-8；d(R)-8用鈀/碳還原，還原物與EMME縮合得縮合物(R)-10，(R)-10經(jīng)環(huán)化，酸水解得關(guān)鍵中間體(S)-13；e.(S)-13與HR7在適當(dāng)?shù)臒o(wú)水溶劑中縮合得7-位被取代的上述左旋氧氟沙星及其衍生物；f.(S)-13在5-位引入氨得23，23與HR7在適當(dāng)?shù)娜軇┲锌s合得5-胺基取代的上述左旋氧氟沙星衍生物。g.烷基氨基氯甲酸酯，烷基或取代苯基磺酰氯，α-鹵代乙酰氯和7-位有仲氮結(jié)構(gòu)的左旋氧氟沙星衍生物縮合，得化合物29-60。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述左旋氧氟沙星衍生物，其特征在于它們具有抗革蘭氏陰、陽(yáng)性菌的作用，可作為抗菌藥物應(yīng)用。5根據(jù)權(quán)利要求1所述左旋氧氟沙星衍生物，其特征在于它們具有抗腫瘤活性，可作為抗抗腫瘤藥物應(yīng)用。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述左旋氧氟沙星衍生物，其特征在于它們具有抗支原體活性，可作為抗支原體藥物應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明左旋氧氟沙星及其類似物的制造方法,采用起始原料豐富易得,反應(yīng)條件溫和,總收率高,光學(xué)活性純度高,更適合工業(yè)化生產(chǎn),本發(fā)明在左旋氧沙星的5位和7位進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造并經(jīng)抗菌、抗腫瘤等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)它們具有明顯的抗菌和抗腫瘤活性。文檔編號(hào)A61K31/535GK1181381SQ97106728公開(kāi)日1998年5月13日申請(qǐng)日期1997年11月18日優(yōu)先權(quán)日1997年11月18日發(fā)明者楊玉社,嵇汝運(yùn),陳凱先,蔣華良申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所