專利名稱：α－酮酯和α－酮酰胺的?；┐佳苌锏闹谱鞣椒?br> 背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及α-酮酯和α-酮酰胺的?；┐佳苌?，它們是彈性蛋白酶抑制劑或是彈性蛋白酶抑制劑的前藥，應(yīng)用于各種生理性和產(chǎn)品用途。
據(jù)顯示人的嗜中性白細(xì)胞彈性蛋白酶是一種對(duì)與眾多炎性疾病，如慢性支氣管炎、膽囊纖維變性和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎有關(guān)的組織破壞有作用的物質(zhì)。J.L.Malech和J.O.Gallin，新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志，317(11)，687(1987)。彈性蛋白酶對(duì)包括彈性蛋白、纖連蛋白、膠原蛋白和蛋白聚糖的許多結(jié)締組織大分子具有廣泛的蛋白水解活性。彈性蛋白酶的存在與這些疾病的病理學(xué)相關(guān)。
正常血漿含有大量調(diào)節(jié)各種與結(jié)締組織更新和發(fā)炎有關(guān)的酶的蛋白酶抑制劑。例如α-1-蛋白酶抑制劑(α-1-PI)是一種阻斷彈性蛋白酶活性的絲氨酸蛋白酶抑制劑。α-1-PI由于其血漿水平降低至正常值的15％與肺氣腫的早期發(fā)展有關(guān)而十分引人注目。
除血漿產(chǎn)生的蛋白酶抑制劑外，分泌體液，包括支氣管、鼻、宮頸粘液均含有被稱為分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制劑(SLPI)的內(nèi)源性蛋白酶抑制劑，它們可使彈性蛋白酶失活并被認(rèn)為對(duì)在炎癥細(xì)胞蛋白酶的存在下的維持上皮細(xì)胞的完整性起重要作用。在某些病理狀態(tài)下，α-1-PI和SLPI通過嗜中性白細(xì)胞氧化機(jī)制而失活，該機(jī)制使嗜中性白細(xì)胞蛋白酶在基本不含抑制劑的環(huán)境中起作用。例如，發(fā)現(xiàn)在患呼吸緊張綜合征(ARDS)的成年患者的支氣管灌洗液中含有活性彈性蛋白酶和已經(jīng)氧化失活的α-1-PI。
除氧化機(jī)制外，嗜中性白細(xì)胞還通過抗蛋白酶經(jīng)非氧化機(jī)制產(chǎn)生抑制作用。慢性肉芽腫患者的嗜中性白細(xì)胞在過量α-1-PI的存在下可降解內(nèi)皮細(xì)胞基質(zhì)。存在大量體外證據(jù)，表明受刺激的嗜中性白細(xì)胞可與它們的底物緊密結(jié)合，從緊密的細(xì)胞-底物接觸的微環(huán)境中有效排除血清抗蛋白酶。大量嗜中性白細(xì)胞遷移到炎癥部位可導(dǎo)致該區(qū)域由于蛋白水解產(chǎn)生的明顯組織損傷。
本申請(qǐng)人先前已確認(rèn)彈性蛋白酶是應(yīng)答以嗜中性白細(xì)胞溶質(zhì)、純凈彈性蛋白酶和受激嗜中性白細(xì)胞降解軟骨基質(zhì)蛋白聚糖能力測定的軟骨基質(zhì)變性的主要嗜中性白細(xì)胞蛋白酶的一種。此外，許用作彈性蛋白酶抑制劑、表現(xiàn)出有價(jià)值的藥理活性的肽衍生物是本領(lǐng)域公知的。例如Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，37，4538(1994)和歐洲專利申請(qǐng)OPI第0529568號(hào)(發(fā)明人Peet等，
公開日1993年3月3日)公開了多種肽，如帶有不同N-保護(hù)基的纈氨酰脯氨酰纈氨酰五氟乙基酮是人嗜中性彈性蛋白酶(HNE)的體外和體內(nèi)抑制劑并且口服對(duì)HNE誘導(dǎo)的大鼠和倉鼠肺出血模型有活性。
而且，本領(lǐng)域公開了在該彈性蛋白酶抑制劑的P2、P3和P4位允許有多個(gè)不同的氨基酸以及在仍保持酶抑制活性的同時(shí)可取代有多個(gè)N-保護(hù)基，盡管僅說明了某些N-保護(hù)基的口服活性。例如，Skiles，J.W.等，藥物化學(xué)雜志，35，641(1992)公開多種在P1位帶有三氟甲基或芳基酮?dú)埢驮赑2位帶有N-取代甘氨酸殘基的三肽彈性蛋白酶抑制劑。據(jù)顯示在P2位甘氨酸上的取代基增大了體積和親脂性，其順序?yàn)镠、CH3、環(huán)戊基、外-降冰片烷基、2，3-二氫化茚基(2-indanyl)、環(huán)庚基、環(huán)辛基，還有哌啶基、芐基、3，4-二甲氧基苯乙基、四氫糠基和糠基，所觀察到的體外活性沒有太大變化。
同樣，1990年3月20日公告的Bergeson等的美國專利4910190和1993年3月16日公告的Edwards等的美國專利5194588及1986年9月24日公告的發(fā)明人為Michael Kolb等的歐洲專利申請(qǐng)第0195212號(hào)教導(dǎo)了在P3和P4位的氨基酸可允許有作為側(cè)鏈的多個(gè)烷基和取代烷基。并且，還具體包含典型N-保護(hù)基，如乙?；?、琥珀?；⑹宥⊙豸驶?、芐氧羰基和4-((4-氯代苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；鹊膹椥缘鞍酌敢种苿?。
Burkhart，J.P.等在藥物化學(xué)雜志，38，223(1995)公開了作為彈性蛋白酶抑制劑前藥的N-[4-(4-嗎啉甲?；?-苯甲酰基]-L-纈氨酰-N-[3，3，4，4，4-五氟-1-(1-甲基-乙基)-2-氧代丁基]-L-脯氨酰胺的幾種類似物，這些類似物的P1殘基不存在手性中心。本申請(qǐng)人最近發(fā)現(xiàn)了已知未氟化的彈性蛋白酶抑制劑的?；┐佳苌铮鼈兛捎米鲝椥缘鞍酌敢种苿┑那八幓虮旧碜鳛閺椥缘鞍酌敢种苿?。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及下式化合物或者其水合物或可藥用鹽
其中R1是(C1-C4)烷基；R2是(C1-C4)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基或環(huán)己基甲基；X 是-CO2R3或-CONHR3’，其中R3是(C1-C4)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基或環(huán)己基甲基并且R3’是氫、(C1-C4)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基或環(huán)己基甲基；P2Gly或Ala，其中α氨基的氮原子可任意被R基團(tuán)取代，其中R是(C1-C6)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C4-C11)雙環(huán)烷基、(C4-C11)雙環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C5-C9)雜芳基、(C5-C9)雜芳基(C1-C6)烷基、稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基、稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C12)環(huán)烷基或稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，或者P2是Pro、Aze、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Pro(4-OAc)、Pro(4-OH)；P3是Ala、bAla、Leu、Ile、Nle、Val、Nva、Lys或bVal；P4是Ala、bAla、Val、Nva、bVal、Pro或缺失；K 是氫、乙?；?、琥珀酰基、苯甲?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、丹?；?、異戊?；?、甲氧基琥珀?；?、1-金剛烷磺酰基、1-金剛烷乙?；?、2-羧基苯甲?；?、-C(O)N(CH3)2、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?、4-((4-溴苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?、4-(磺酰氨基羰基)苯甲?；蚴窍率降幕鶊F(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
(波浪線是與分子的其余部分，而不是與Z的相連處)R’ 是氫或(C1-C4)烷基；n 是零或者1或2的整數(shù)；它們可用作已知彈性蛋白酶抑制劑的前藥或以其本身的形式抑制彈性蛋白酶。式I或IA化合物在氣腫、囊性纖維變性、成人呼吸緊張綜合癥、敗血癥、播散性血管內(nèi)凝血、痛風(fēng)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性支氣管炎和腸炎的治療中表現(xiàn)出抗炎作用；或是表現(xiàn)這類作用的化合物的前藥。
發(fā)明詳述本文采用的術(shù)語“(C1-C4)烷基”意指1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和異丁基等。同樣，術(shù)語“(C1-C6)烷基”意指1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、正戊基、仲戊基、異戊基和正己基。術(shù)語“(C3-C12)環(huán)烷基”意指可被低級(jí)烷基取代的、由3-12元環(huán)構(gòu)成的環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、4-甲基環(huán)己基、4-乙基環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。術(shù)語“(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基”意指被(C3-C12)環(huán)烷基取代的(C1-C6)烷基，例如環(huán)己基甲基或環(huán)戊基乙基。術(shù)語“(C4-C11)雙環(huán)烷基”意指含一對(duì)橋頭碳原子的烷基，例如2-雙環(huán)[1.1.0]丁基、2-雙環(huán)[2.2.1]己基和1-雙環(huán)[2.2.2]辛烷。術(shù)語“(C4-C11)雙環(huán)烷基(C1-C6)烷基”意指被(C4-C11)雙環(huán)烷基取代的(C1-C6)烷基，如2-雙環(huán)己基甲基。術(shù)語“(C6-C10)芳基”意指有共軛碳原子的環(huán)狀的、芳香結(jié)構(gòu)，如苯基、1-萘基和2-萘基。術(shù)語“(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基”意指被(C6-C10)芳基取代的(C1-C6)烷基，如芐基、苯乙基和1-萘甲基。術(shù)語“(C3-C7)雜環(huán)烷基”意指非芳香的含碳環(huán)狀基團(tuán)，所述環(huán)狀基團(tuán)含1-3個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子，如嗎啉基和哌啶基。術(shù)語“(C3-C7)雜環(huán)烷基(C1-C6)烷基”意指被(C3-C7)雜環(huán)烷基取代的(C1-C6)烷基，例如嗎啉代甲基。術(shù)語“(C5-C9)雜芳基”意指有共軛碳原子并含1-3個(gè)氮、氧和硫原子的單環(huán)或雙環(huán)的芳香結(jié)構(gòu)，例如吡啶基、2-喹喔啉基和喹啉基。術(shù)語“(C5-C9)雜芳基(C1-C6)烷基”意指被(C5-C9)雜芳基取代的(C1-C6)烷基，如3-喹啉甲基。術(shù)語“稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基”意指一邊或多邊與“(C6-C10)芳基”共享的“(C3-C12)環(huán)烷基”，因此例如可包括通過苯和環(huán)戊烷稠合衍生的基團(tuán)，即2，3-二氫化茚基(2-indanyl)。術(shù)語“稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基”意指被稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基取代的(C1-C6)烷基。術(shù)語“稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C8)環(huán)烷基”意指一邊或多邊與(C3-C8)環(huán)烷基共享的(C5-C9)雜芳基，因此例如可包括通過環(huán)己烷和吡啶稠合衍生的基團(tuán)，即四氫喹啉。最后術(shù)語“稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C8)環(huán)烷基(C1-C6)烷基”意指被稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C8)環(huán)烷基基團(tuán)取代的(C1-C6)烷基。
術(shù)語“立體異構(gòu)體”是對(duì)所有僅是其原子空間取向不同的各種分子異構(gòu)體的通稱術(shù)語。它包括鏡像異構(gòu)體(對(duì)映體)、幾何異構(gòu)體(順/反式)異構(gòu)體和帶有不止一個(gè)彼此不成鏡像的手性中心的化合物異構(gòu)體(非對(duì)映體)。對(duì)于氨基酸，可采用IUPAC-IUB生物化學(xué)命名聯(lián)合委員會(huì)在歐洲生物化學(xué)雜志，1389-37(1984)中描述的L/D或R/S標(biāo)準(zhǔn)。
術(shù)語“可藥用鹽”是指為獲得所需效果的給藥劑量基本上無毒的并且不獨(dú)立具有明顯藥理學(xué)活性的那些鹽。該術(shù)語范圍內(nèi)包括的這些鹽是氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、甘醇酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、α-酮戊二酸鹽、谷氨酸鹽、天冬氨酸鹽、馬來酸鹽、羥基馬來酸鹽、丙酮酸鹽、苯乙酸鹽、苯甲酸鹽、對(duì)氨基苯甲酸鹽、氨茴酸鹽、對(duì)羥基苯甲酸鹽、水楊酸鹽、羥基乙磺酸鹽、乙磺酸鹽、鹵代苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、萘磺酸鹽、甲磺酸鹽和磺胺酸鹽等。
每種α-氨基酸都具有特征性“R-基”，與α-氨基酸的α-碳原子相連的R-基是側(cè)鏈、或殘基。例如谷氨酸的R-基側(cè)鏈?zhǔn)菤洌彼岬氖羌谆?、纈氨酸的是異丙基。特定α-氨基酸的R-基或側(cè)鏈參見A.L.Lehninger的生物化學(xué)教科書。
除非另有說明，這些肽酶底物類似物的α-氨基酸優(yōu)選是L構(gòu)型的；但是本申請(qǐng)人認(rèn)為式1的氨基酸化合物可以是D或L構(gòu)型的或者是D和L異構(gòu)體的混合物，包括外消旋混合物。表I列出了α-氨基酸的公知縮寫。
表I
通常，式I和IA化合物可采用類似于本領(lǐng)域公知的如方案A描述的普通化學(xué)反應(yīng)制備，其中術(shù)語K、P4、P3、P2、R1、R2和X如式I和IA中所定義。
方案A
通常，式I和IA的酰化烯醇可通過式4的肽與合適的對(duì)稱性酸酐2或合適的混合酸酐3(其中R2’和R2不同，但兩個(gè)R2基都如上所定義)在堿性胺，如叔胺三乙胺和N-甲基嗎啉，或芳香胺如4-二甲氨基吡啶以及甲基吡啶、可力丁和吡啶的存在下反應(yīng)形成。反應(yīng)物可在合適的有機(jī)溶劑，如乙腈和二氯甲烷等中接觸。該反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)間一般為約30分鐘至約48小時(shí)，反應(yīng)溫度為約-40℃-約85℃。通常，低于0℃的溫度可提供高比率的IA∶I，可通過色譜或重結(jié)晶分離出純凈形式的IA。通常，高于0℃的反應(yīng)溫度可提高I∶IA的比率，可通過色譜或重結(jié)晶分離I。
或者，式I和IA的?；┐伎赏ㄟ^式4肽與合適的式R2-C(＝O)X酰鹵(X＝F、Cl、Br、I)在弱堿性胺如甲基吡啶、可力丁或吡啶的存在下反應(yīng)形成。
式4化合物公開于歐洲專利申請(qǐng)公告第0195212號(hào)(其發(fā)明者是Michael Kolb等，
公開日為1986年9月24日)和藥物化學(xué)雜志，33394-407(1990)(Peet，N.P.等)中，這兩篇文獻(xiàn)均全文引入本文以供參考。
本文中定義的那些未公開于歐洲專利申請(qǐng)公告第0195212號(hào)(其發(fā)明者是Michael Kolb等，
公開日為1986年9月24日)或藥物化學(xué)雜志，33394-407(1990)(Peet，N.P.等)中的式4化合物可通過下述合成方法制備，這些方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知和清楚的。
通常，所有式4化合物可采用類似本領(lǐng)域公知的如方案B中描述的普通化學(xué)方法制備。
方案B
方案B表示了制備式4化合物的通用合成路線。
P2、P3和K-P4基可與結(jié)構(gòu)式5氨基酸衍生物的游離氨基相連。應(yīng)注意的是結(jié)構(gòu)式5表示其中游離羧酸基被如上定義的“X”部分取代的P1部分。P2、P3和K-P4可通過熟知的肽偶聯(lián)技術(shù)與未保護(hù)的游離氨基化合物(P1-X)相連。此外，P1、P2、P3和K-P4基可以任何先后順序連接在一起，只要最終化合物是K-P4-P3-P2-P1-X即可。例如可將K-P4與P3相連得到K-P4-P3，然后再與P2-P1-X相連；或者將K-P4與P3-P2相連，然后與適當(dāng)?shù)腃-末端保護(hù)的P1相連，再將C-末端保護(hù)基轉(zhuǎn)化為X。
一般來說，采用所述的方法，通過脫去N-末端殘基的α-胺的保護(hù)和通過肽連接偶聯(lián)下一個(gè)適當(dāng)N-保護(hù)的氨基酸延伸肽。重復(fù)進(jìn)行該脫保護(hù)和偶聯(lián)方法直至獲得所需序列。如方案B所述，偶聯(lián)可使用氨基酸成分以分步方式進(jìn)行，或通過縮合片斷(兩或數(shù)個(gè)氨基酸)，或結(jié)合兩種方法，或通過按照最早由Merrifield在美國化學(xué)會(huì)志，1963，85，2149-2154中描述的固相肽合成法進(jìn)行，該文獻(xiàn)全文引入本文以供參考。但采用固相合成法時(shí)，C-末端羧酸與一不溶性載體(通常是聚苯乙烯)相連。這些不溶性載體包含會(huì)與羧酸基反應(yīng)形成在延伸條件下穩(wěn)定、但隨后很容易裂解的鍵的基團(tuán)。它們的實(shí)例是氯甲基或溴甲基樹脂、羥甲基樹脂和氨甲基樹脂。這些樹脂中的許多有市售，它們帶有所需的容易結(jié)合的C-末端氨基酸。
此外，本發(fā)明的化合物可采用自動(dòng)肽合成儀合成。除上述外，肽合成法還記載在Stewart和Young的“固相肽合成法”，第二版，PierceChemical Co.，Rochford，IL(1984)；Gross，Meienhofer，Udenfriend，Eds.，“肽分析、合成和生物學(xué)”，第1、2、3、5和9卷，Academic Press，New York，1980-1987；Bodanszky，“肽化學(xué)實(shí)用教課書”，Springer-Verlag，New York(1988)；和Bodanszky等的“肽合成實(shí)踐”，Springer-Verlag，New York(1984)，這些文獻(xiàn)均全文引入本文以供參考。
兩個(gè)氨基酸之間、氨基酸與肽或兩個(gè)肽片斷之間的偶聯(lián)可采用普通的偶聯(lián)方法進(jìn)行，如疊氮法、混合碳酸-羧酸酐(氯甲酸異丁酯)法、碳化二亞胺(二環(huán)己基碳化二亞胺、二異丙基碳化二亞胺或水溶性碳化二亞胺)法、活潑酯(對(duì)硝基苯酯、N-羥基琥珀酰亞氨基酯)法、Woodward試劑K法、羰基二咪唑法、磷試劑如BOP-Cl法或氧化還原法。其中一些方法(尤其是碳化二亞胺法)可通過加入1-羥基苯并三唑得到促進(jìn)。這些偶聯(lián)反應(yīng)可以溶液(液相)或固相形式進(jìn)行。
在偶聯(lián)反應(yīng)期間，為避免形成不需要的鍵，氨基酸成分的官能團(tuán)通常須加以保護(hù)?？墒褂玫谋Ｗo(hù)基列于Greene的“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基”，JohnWiley & Sons，New York(1981)和“肽分析、合成和生物學(xué)”，第3卷，Academic Press，New York(1981)，這些文獻(xiàn)均全文引入本文以供參考。
C-末端殘基的α-羧基通常，但并不必須被酯基保護(hù)，酯保護(hù)基可裂解得到羧酸?？墒褂玫谋Ｗo(hù)基包括1)烷基酯，如甲基和叔丁基酯，2)芳基酯，如芐基和取代的芐基酯，或3)可通過溫和堿處理或溫和還原手段裂解的酯，如三氯乙基酯或苯甲酰甲基酯。
需偶聯(lián)到生長肽上的各氨基酸的α-氨基須加以保護(hù)?？墒褂帽绢I(lǐng)域公知的任何保護(hù)基。它們的實(shí)例包括1)?；?，如甲?；⑷阴；⑧彵蕉柞；蛯?duì)甲苯磺?；?)芳族氨基甲酸酯類，如芐氧羰基(Cbz或Z)和取代的芐氧羰基、1-(對(duì)聯(lián)苯基)-1-甲基乙氧羰基和9-芴基甲氧羰基(Fmoc)；3)脂族氨基甲酸酯類，如叔丁氧羰基(Boc)、乙氧羰基、二異丙基甲氧羰基和烯丙氧羰基；4)環(huán)烷基氨基甲酸酯類，如環(huán)戊氧羰基和金剛烷氧羰基；5)烷基類，如三苯甲基和芐基；6)三烴基甲硅烷，如三甲基甲硅烷；和7)含硫醇類，如苯硫羰基和二硫代琥珀?；?。優(yōu)選的α-氨基保護(hù)基是Boc或Fmoc，優(yōu)選Boc。許多用于肽合成的適當(dāng)保護(hù)的氨基酸衍生物有市售。
新加入的氨基酸殘基的α-氨基保護(hù)基在下一個(gè)氨基酸偶聯(lián)之前裂解。當(dāng)使用Boc基時(shí)，選擇的方法是三氟乙酸本身或三氟乙酸二氯甲烷溶液，或者鹽酸二噁烷或乙酸乙酯溶液。然后將所得的銨鹽在偶聯(lián)之前或就地用堿性溶液，如緩沖水溶液或叔胺的二氯甲烷或二甲基甲酰胺溶液中和。當(dāng)使用Fmoc基時(shí)，選擇的試劑是哌啶或取代哌啶的二甲基甲酰胺溶液，但也可使用仲胺或堿性水溶液。脫保護(hù)在0℃-室溫的溫度下進(jìn)行。
所有帶有側(cè)鏈官能團(tuán)的氨基酸在肽制備過程中須使用上述的基團(tuán)加以保護(hù)。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員都清楚用于這些側(cè)鏈官能團(tuán)的適當(dāng)保護(hù)基的選擇和利用取決于氨基酸和肽中存在的其它保護(hù)基。該類保護(hù)基的選擇的重要性在于在α-氨基的脫保護(hù)和偶聯(lián)過程中它不能被除去。
例如，當(dāng)使用Boc作為α-氨基保護(hù)基時(shí)，下列側(cè)鏈保護(hù)基是適用的可使用對(duì)甲苯磺?；Ｗo(hù)氨基酸如Lys和Arg的氨基側(cè)鏈；使用對(duì)甲基芐基、乙酰氨基甲基、芐基(Bzl)或叔丁基磺?；Ｗo(hù)氨基酸如半胱氨酸的含硫醚的側(cè)鏈；可使用芐基(Bzl)醚保護(hù)氨基酸如Ser或Thr的含羥基的側(cè)鏈。
當(dāng)使用Fmoc作為α-氨基保護(hù)基時(shí)，通常使用基于叔丁基的保護(hù)基。例如Boc可用于賴氨酸，叔丁基醚用于絲氨酸和蘇氨酸，而叔丁基酯用于谷氨酸。
一旦肽的延伸完成，則應(yīng)除去所有的保護(hù)基。當(dāng)采用液相合成法時(shí)，根據(jù)所選擇的保護(hù)基決定的方式除去保護(hù)基。這些方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。
當(dāng)采用固相合成法時(shí)，一般在脫去保護(hù)基的同時(shí)從樹脂上裂解下肽。當(dāng)在合成中使用Boc保護(hù)方案時(shí)，從樹脂上裂解肽的優(yōu)選方法是在0℃使用含無水HF的添加劑，如二甲基硫醚、茴香醚、茴香硫醚或?qū)妆椒犹幚?。肽的裂解也可使用其它酸性試劑，如三氟甲磺?三氟乙酸混合物完成。如果采用Fmoc保護(hù)方案，使用先前所述的試劑裂解N-末端的Fmoc基。使用三氟乙酸和各種添加劑如茴香醚等的溶液可從樹脂上裂解其它保護(hù)基和肽。
或者，式4化合物可采用類似于本領(lǐng)域公知的如方案C描述的普通化學(xué)反應(yīng)制備。
方案C
方案C給出了制備式4化合物的另一種通用合成方案。
如前面的方案B所述，P2、P3和K-P4基可與結(jié)構(gòu)式6的氨基醇衍生物的游離氨基相連得到結(jié)構(gòu)式7的肽醇。
然后，結(jié)構(gòu)式7肽醇的醇官能團(tuán)通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的技術(shù)和方法，例如使用草酰氯和二甲基亞砜的Swern氧化法氧化得到式4化合物。
方案B和C中使用的原料是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易得到的。例如其中K是氫的氨基酸P2、P3和K-P4有市售。此外，其中K是乙?；?、琥珀?；?、苯甲酰基、叔丁氧羰基芐氧羰基、丹?；?、異戊?；⒓籽趸牾；?、1-金剛烷磺酰基、1-金剛烷乙?；?-羧基苯甲?；?-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?-((4-溴苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?-(磺酰氨基羰基)苯甲酰基的氨基保護(hù)基K記載于1990年4月11日公開的歐洲專利申請(qǐng)公告第363284號(hào)和1990年3月20日公告的美國專利第4910190號(hào)，這兩篇文獻(xiàn)均全文引入本文以供參考。再有，其中K是-C(O)N(CH3)2或下式基團(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
R’是氫或(C1-C4)烷基；n是零或者1或2的整數(shù)；X是N或CH；的K基記載于Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，374538-4553(1994)和1993年3月3日公開的歐洲專利申請(qǐng)公告第529568號(hào)，以及1995年4月13日公開的PCT國際公告WO 95/09838；這三篇文獻(xiàn)均全文引入本文以供參考。將所述K基轉(zhuǎn)化為K-P4取代基的合成方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知和清楚的。
式5起始氨基化合物是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易得到的。例如其中X定義如上的某些式5被保護(hù)氨基化合物記載于1986年9月24日公開的歐洲專利申請(qǐng)公告第195212號(hào)中。該文獻(xiàn)全文引入本文以供參考。
此外，方案B和C中使用的其它原料可采用下面的合成方法制備，這些方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知和清楚的。
其中K是
其中B是-C(＝O)-基的取代氨基酸K-P4的制備方法概括在方案D中，其中P4和Z定義如上或是這些基團(tuán)的功能等同物。
方案D
具體地說，其中K是
其中B是-C(＝O)-基的氨基酸K-P4通過將其中K是氫的K-P4與結(jié)構(gòu)式8的酰氯在可用作鹵化氫接受劑的一至四摩爾當(dāng)量的適宜胺的存在下偶聯(lián)。用作鹵化氫接受劑的適宜胺是有機(jī)叔胺，例如三(低級(jí)烷基)胺，如三乙胺或芳族胺，如甲基吡啶、可力丁和吡啶。當(dāng)使用吡啶、甲基吡啶或可力丁時(shí)，它們可大大過量地使用，因此也可用作反應(yīng)溶劑。特別適合于反應(yīng)的N-甲基嗎啉(“NMM”)。偶聯(lián)反應(yīng)可通過將過量的，如1-5，優(yōu)選約4倍摩爾過量的胺，然后是結(jié)構(gòu)式8的酰氯加到其中K是氫的氨基酸K-P4的溶液中進(jìn)行。溶劑可以是任意適合的溶劑，例如石油醚；氯代烴如四氯化碳、氯化乙烯、二氯甲烷或氯仿；氯代芳族物質(zhì)例如1，2，4-三氯苯或鄰二氯苯；二硫化碳；醚類溶劑如二乙醚、四氫呋喃或1，4-二噁烷；或芳族溶劑如苯、甲苯或二甲苯。二氯甲烷是偶聯(lián)反應(yīng)的優(yōu)選溶劑。該反應(yīng)可進(jìn)行約15分鐘至約6小時(shí)，這取決于反應(yīng)物、溶劑、濃度和其它因素如溫度(可從0℃-60℃，方便地是室溫，即25℃)。其中K是
其中B是-C(＝O)-基的N-保護(hù)氨基酸K-P4可通過適當(dāng)技術(shù)如通過硅膠色譜從反應(yīng)混合物中分離。
其中K是
其中B不是-C(＝O)-基的取代氨基酸K-P4可類似地制備，不同僅是使用下式的合適中間體
其中B不是-C(＝O)-基，而A是Cl或OH(相應(yīng)的酸、酰氯或磺酰氯)替代方案D中的結(jié)構(gòu)式8化合物。
結(jié)構(gòu)式8的酰氯和下式的合適中間體
其中B不是-C(＝O)-基，而A是Cl或OH均有市售或可以采用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知或清楚的技術(shù)和方法方便地制備。
例如下式的合適中間體
可用方案E概括的方法制備，其中所有取代基均定義如上。
方案E
方案E給出了制備其中Z定義如上的下式的合適中間體的通用合成方法。
在a步中，使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知和清楚的技術(shù)和方法，將適當(dāng)?shù)?，5-吡啶二羧酸2-甲基酯10(Nippon Kagaku Zasshi，1967，88，563)的羧酸官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為其酰氯，如亞硫酰氯，得到相應(yīng)的6-甲酯基煙酰氯11。
在b步中，酰氯11通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的技術(shù)和方法用嗎啉12酰化，得到相應(yīng)的5-(嗎啉-4-羰基)-2-吡啶羧酸甲酯13。
在c步中，13的甲酯官能團(tuán)通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的技術(shù)和方法，例如用氫氧化鋰甲醇溶液水解，得到5-(嗎啉-4-羰基)-2-吡啶羧酸14。
此外，下式的適當(dāng)中間體
可如方案F中概括的方法制備，其中所有取代基均定義如上。
方案F
方案F給出了制備下式的適當(dāng)中間體的通用合成方法，
其中Z定義如上。
在a步中，使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知和清楚的技術(shù)和方法，將2，5-吡啶二羧酸2-甲基酯10(Nippon Kagaku Zasshi，1967，88，563)的游離羧酸官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為其叔丁酯，如用二環(huán)己基碳化二亞胺的叔丁醇加成化合物(Synthesis，1979，570)，得到相應(yīng)的2，5-吡啶二羧酸2-甲酯5-叔丁酯15。
例如，使2，5-吡啶二羧酸2-甲酯10與摩爾數(shù)過量的二環(huán)己基碳化二亞胺的叔丁醇加成化合物在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑如二氯甲烷中結(jié)合。該反應(yīng)一般在0℃-室溫的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行2-24小時(shí)。2，5-吡啶二羧酸2-甲酯5-叔丁酯15可通過本領(lǐng)域公知的普通萃取方法從反應(yīng)混合物中分離并可通過重結(jié)晶純化。
在b步中，15的甲酯官能團(tuán)用嗎啉12酰化，得到相應(yīng)的6-(嗎啉-4-羰基)煙酸叔丁酯16。
例如，2，5-吡啶二羧酸2-甲酯5-叔丁酯15與摩爾數(shù)過量的嗎啉在合適的有機(jī)溶劑如四氫呋喃中接觸。該反應(yīng)一般在室溫至回流溫度范圍內(nèi)進(jìn)行5小時(shí)至3天。6-(嗎啉-4-羰基)煙酸叔丁酯16可通過本領(lǐng)域公知的普通萃取方法從反應(yīng)混合物中分離并可通過重結(jié)晶純化。
在c步中，16的叔丁酯官能團(tuán)例如用鹽酸的硝基甲烷溶液水解，得到6-(嗎啉-4-羰基)煙酸17。
通常，式4或5化合物可采用類似于本領(lǐng)域公知的普通化學(xué)反應(yīng)制備。其中X是-CO2R3的式5或6化合物，即α-酮酯化合物可通過下述方法制備Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，33，11(1990)；Peet，N.P.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990)；Mehdi，S.等，生物化學(xué)和生物物理學(xué)研究通訊，166，595(1990)和歐洲專利申請(qǐng)OPI第0195212號(hào)(發(fā)明者M(jìn)ichaelKolb等，
公開日1986年9月24日)，這四篇文獻(xiàn)均全文引入本文以供參考。
其中X是-CONHR3的式4或5化合物，即α-酮酰胺化合物可按照1995年4月13日公開的PCT國際申請(qǐng)WO 95/09838中的描述制備，該文獻(xiàn)全文引入本文以供參考。其中X是-CONHR3的式4或5化合物也可按照方案G描述的方法制備。除非另有說明，所有取代基均定義如上。試劑和原料均是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員易得的。
方案G
所需的α-酮酯18原料可按照下述方法制備Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，33，11(1990)；Peet，N.P.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990)；Mehdi，S.等，生物化學(xué)和生物物理學(xué)研究通訊，166，595(1990)和歐洲專利申請(qǐng)OPI第0195212號(hào)(發(fā)明者M(jìn)ichael Kolb等，
公開日1986年9月24日)。術(shù)語“Pg”是指如前面詳細(xì)描述的適當(dāng)保護(hù)基。
在方案G的a步中，通過用適當(dāng)?shù)膲A處理將α-酮酯18選擇性水解為α-酮酸19。
例如，將適當(dāng)取代的α-酮酯18溶于適合的溶劑混合物中，如甲醇∶水(50∶50)中，用一當(dāng)量的適宜堿如氫氧化鋰處理。該反應(yīng)在約0℃-30℃的溫度下攪拌約1-10小時(shí)。然后通過本領(lǐng)域熟知的萃取技術(shù)分離α-酮酸19。例如反應(yīng)用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑如乙酸乙酯和等體積的水稀釋。分層。水層用稀鹽酸酸化并用合適的有機(jī)溶劑如乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)相經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到α-酮酸19。
在方案G的b步中，α-酮酸19與伯胺20在本領(lǐng)域公知的條件下偶聯(lián)，得到所需的α-酮酰胺21。
例如，將適當(dāng)取代的α-酮酸19溶于合適的有機(jī)溶劑，如二氯甲烷中。然后將該溶液用一當(dāng)量1-羥基苯并三唑、一當(dāng)量二異丙基乙基胺和過量伯胺20處理。加入一當(dāng)量的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽，使該反應(yīng)在約0℃-25℃的溫度下攪拌約2-10小時(shí)。然后通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)分離產(chǎn)物。例如，反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，用冷的0.5N鹽酸、飽和碳酸氫鈉漂洗，經(jīng)無水硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮，得到α-酮酰胺21。
在方案G的c步中，α-酮酰胺21在本領(lǐng)域熟知的條件下脫保護(hù)(如T.H.Green，“有機(jī)合成中的保護(hù)基”，John Wiley and Sons，1981，第7章)，得到脫保護(hù)的α-酮酰胺22。例如，當(dāng)“Pg”是叔丁氧羰基(Boc)時(shí)，將α-酮酰胺21溶于合適的溶劑，如乙酸乙酯中，用過量氯化氫氣處理并在約0℃-30℃攪拌約30分鐘至4小時(shí)。然后真空萃取溶劑，得到脫保護(hù)的鹽酸鹽形式的α-酮酰胺22。
隨后在方案B中描述的反應(yīng)條件下處理脫保護(hù)的α-酮酰胺22，得到式23的化合物。
下列實(shí)施例表示了代表性的合成。這些實(shí)施例僅是說明性的，而不旨在以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本文中采用的下述術(shù)語具有下列含義“g”是指克；“mmol”是指毫摩爾；“mL”是指毫升；“bp”是指沸點(diǎn)；“℃”是指攝氏度；“mm Hg”是指水銀的毫米數(shù)；“μL”是指微升；“μg”是指微克；以及“μM”是指微摩爾。實(shí)施例1N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-和(Z)-混合物(SEQ.ID NO.6)的制備
方案A往在N2下攪拌并冷卻到-20℃的吡啶(1.25ml)中加入MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-CO2CH3(156mg，0.30mmol)(Peet，N.p.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990)；或Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，33，11(1990))，數(shù)分鐘后加入乙酸酐(0.29ml，3.0mmol)。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋(30ml)并用0.3N HCl(2×20ml)洗滌，然后用鹽水(15ml)洗滌。干燥(MgSO4)，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。進(jìn)行快速層析法(4×14cm硅膠柱)，用丙酮的乙酸乙酯溶液梯度洗脫(25-50％)，得到無色油狀標(biāo)題化合物(88mg，53％，E∶Z異構(gòu)體比例≈9∶1)。1H-NMR(CDCl3，400Mhz)δ10.16(br s，0.9H，E異構(gòu)體的CONHC＝C)，8.23(br s，0.1H，Z異構(gòu)體的CONHC＝C)，7.49(br d，0.1H，Z異構(gòu)體的NH)，7.17(br d，0.9H，E異構(gòu)體的NH)，6.50(br d，0.1H，Z異構(gòu)體的NH)，6.43(brd，0.9H，E異構(gòu)體的NH)，4.18-4.72(m，1.1H，E異構(gòu)體中Ala的CH和Z異構(gòu)體中Ala的CH以及Z異構(gòu)體中Pro的CH)，4.64(t，0.1H，Z異構(gòu)體中Ala的CH)，4.58-4.48(m，1.8H，E異構(gòu)體中Ala的CH和E異構(gòu)體中Pro的CH)，3.76-3.63(m，2.7H，兩種異構(gòu)體的CH2N和Z異構(gòu)體的2個(gè)OCH3以及Z異構(gòu)體的CH)，3.42(七重峰，0.9H，E異構(gòu)體的CH)，3.68(s，2.7H，E異構(gòu)體的OCH3)，3.66(s，2.7H，E異構(gòu)體的OCH3)，2.68-2.60和2.53-2.45(pr m，4H，兩種異構(gòu)體的COCH2CH2CO)，2.22-1.95(m，4H，兩種異構(gòu)體的CH2CH2)，2.20(s，3H，兩種異構(gòu)體的CH3CO)，1.37(d，2.7H，Z異構(gòu)體中Ala的CH3)，1.32(d，2.7H，E異構(gòu)體中Ala的CH3)，1.27(d，0.3H，Z異構(gòu)體中Ala的CH3)，1.25(d，0.3H，Z異構(gòu)體中Ala的CH3)，1.14和1.13(pr d，5.4H，E異構(gòu)體中Val的2個(gè)CH3)，1.05和1.02(pr d，0.6H，Z異構(gòu)體中Val的2個(gè)CH3)。MS(CI，CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度)555(MH+，62)，354(38)，299(100)。HRMS C25H39N4O10(MH+)計(jì)算值555.2666，實(shí)測直555.2669。實(shí)施例2N-[4-[[[(4-氯苯基)磺酰基]氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
方案A將N-(4-((4-氯苯基)磺酰氨基羰基)苯基羰基-Val-Pro-Val-CO2CH3(135mg，0.20mmol)(Mehdi，S等，生物化學(xué)和生物物理學(xué)研究通訊，166，595(1990))用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC(用乙酸乙酯展開)，得到白色泡沫狀標(biāo)題化合物(23mg，16％)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ10.40(br s，1H，CONHC＝C)，8.11-8.05(m，2H，芳基)，7.78-7.71(m，2H，芳基)，7.71-7.63(m，2H，芳基)，7.55-7.49(m，2H，芳基)，7.24(br d，1H，NH ofVal)，4.98(dd，1H，CH)，4.46 (dd，1H，CH)，4.02-3.89和3.89-3.76(pr m，2H，CH2N)，3.68(s，3H，OCH3)，3.47(七重蜂，1H，CHC＝C)，2.39-1.96 (m，5H，CH2CH2和CH)，2.21(s，3H，CH3CO)，1.17和1.16 and 1.07和0.94(4個(gè)d，12H，4×CH3).
MS(CI，CH4)m/z(相對(duì)強(qiáng)度 )749(1)，747(M+C2H5-，2)，721(4)，719(M+H，10)，299(100).
HRMS C33H40ClN4O10S(MH+)計(jì)算值719.2154，實(shí)測值719.2146.實(shí)施例3N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲酰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-氨基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)N-(4-((4-氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?Val-Pro-Val-COOH的制備方案G，a步將N-(4-((4-氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?Val-Pro-Val-CO2CH3(677mg，1.0mmol)溶于THF∶甲醇∶水(1∶1∶1)的混合溶劑(30ml)中，用1.0N氫氧化鋰水溶液(2.2ml，2.2mmol)處理。將該反應(yīng)混合物在0℃攪拌3小時(shí)。然后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(100ml)稀釋，再用等體積水稀釋。分層后，緩慢地將1N鹽酸(3ml)加到水層，并用乙酸乙酯萃取(3×25ml)。合并的有機(jī)萃取液經(jīng)無水硫酸鎂干燥、過濾并展開濃縮，得到標(biāo)題化合物。b)N-(4-((4-氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?Val-Pro-Val-CONH2的制備方案G，b步將實(shí)施例3(a)的產(chǎn)物溶于二氯甲烷(20ml)。然后往該反應(yīng)混合物中加入1-羥基苯并三唑(68mg，0.5mmol)和二異丙基乙基胺(0.17ml，1.0mmol)并吹入三當(dāng)量的干燥氨(26mg，1.5mmol)。隨后往反應(yīng)混合物中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(96mg，0.5mmol)并在0℃攪拌4小時(shí)。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷(10ml)稀釋，用冷的0.5NHCl(15ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)漂洗。然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮，得到標(biāo)題化合物。c)N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲酰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-氨基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例3(b)的產(chǎn)物(141mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例4N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[1-(1-甲基乙基)-3-氧代-2-(乙酰氧基)-3-(苯氨基)-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a) N-(4-((4-氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?Val-Pro-Val-CONHC6H5的制備方案G，b步將苯胺(46μg，0.5mmol)與3(a)的產(chǎn)物以類似于實(shí)施例3(b)的方法進(jìn)行偶聯(lián)，得到標(biāo)題產(chǎn)物。b)N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[1-(1-甲基乙基)-3-氧代-2-(乙酰氧基)-3-(苯氨基)-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例4(a)的產(chǎn)物(156mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例5N-乙酰基-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a) 3-氨基-2-羥基-4-甲基戊酸乙酯·鹽酸鹽的制備將3-氨基-2-羥基-4-甲基戊酸(0.89g，6.05mmol)(Peet，N.P.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990))在CH3CH2OH中(先是25ml，然后是20ml)用氯化氫氣處理。濃縮并經(jīng)氫氧化鉀小丸干燥，得到標(biāo)題化合物。b)3-[(N-乙?；?L-纈氨酰-L-脯氨酰)氨基]-2-羥基-4-甲基戊酸乙酯的制備將NMM(0.22ml，2.00mmol)和Ac-Val-Pro-OH(531mg，2.00ml)的乙腈(20ml)溶液冷卻到-20℃并加入i-BuOCOCl(0.26ml，2.00mmol)。10分鐘后，加入實(shí)施例5(a)的產(chǎn)物(423mg，2.00mmol)和N-甲基嗎啉(0.22ml，2.0mmol)的氯仿(3ml)溶液并使該反應(yīng)混合物緩慢溫?zé)岬绞覝亍?.5小時(shí)后，用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用0.5N HCl(2×15ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(2×15ml)洗滌。硫酸鎂干燥、過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。進(jìn)行快速層析，得到標(biāo)題化合物。c)N-乙?；?L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備往冷卻到-60℃的攪拌的草酰氯(0.12ml，1.43mmol)的二氯甲烷(1.5ml)溶液中加入DMSO(0.20ml，2.86mmol)的二氯甲烷溶液(0.5ml)。5分鐘后，加入實(shí)施例5(b)產(chǎn)物(298mg，0.72mmol)的氯仿(1.5ml)溶液。繼續(xù)在-60℃攪拌25分鐘。加入三乙胺(0.50ml，3.58mmol)后，使該混合物溫?zé)岬绞覝夭⒅苯由峡焖賹游鲋?。合并并濃縮含產(chǎn)物的餾分，得到標(biāo)題化合物。d)N-乙?；?L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例5(c)的產(chǎn)物(83mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例6N-乙?；?L-脯氨酰-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體(SEO.ID NO.7)的制備
方案A將N-乙?；?L-脯氨酰-L-丙胺酰-N-[3-甲氧基-1-甲基-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺(88mg，0.20mmol)(Peet，N.P.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990))用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例7N-[4-(4-嗎啉甲?；?苯甲酰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)3-[(N-Boc-L-纈氨酰-L-脯氨酰)氨基]-2-羥基-4-甲基戊酸乙酯的制備將Boc-Val-Pro-OH(630mg，2.00mmol)與實(shí)施例5(a)的產(chǎn)物(423mg，2.00mmol)以類似于實(shí)施例5(b)描述的方法進(jìn)行偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物。b)N-Boc-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備將實(shí)施例7(a)的產(chǎn)物(338，g，0.72mmol)以類似于實(shí)施例5(c)描述的方法進(jìn)行氧化，得到標(biāo)題化合物。c) N-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺鹽酸鹽的制備往冷卻(0℃)的實(shí)施例7(b)的產(chǎn)物(0.94g，2.00mmol)的乙酸乙酯(50ml)溶液中吹入氯化氫氣5分鐘。將該反應(yīng)混合物在0℃攪拌1.5小時(shí)并真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，該化合物無需進(jìn)一步純化即可使用。d)N-[4-(4-嗎啉甲?；?苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備往攪拌的4-(4-嗎啉甲酰基)-苯甲酸(235mg，1.0mmol)(Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，37，4538(1994))和芐基三乙基氯化銨(2mg)的1，2-二氯乙烷(5ml)懸浮液中加入亞硫酰氯(88μl，1.2mmol)并加熱至回流。19小時(shí)后，使溶液冷卻到室溫并濃縮，得到亮橙色液體狀酰氯，該溶液無需純化即可進(jìn)一步使用。在分液燒瓶中，將攪拌的實(shí)施例7(c)的產(chǎn)物(406mg，1.0mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液冷卻到-20℃。加入NMM(0.33ml，3.0mmol)后，立即以使內(nèi)部反應(yīng)溫度保持不高于-13℃的速率加入所述酰氯的二氯甲烷(5ml)溶液。添加完畢后，使該反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝?。過2小時(shí)后，該反應(yīng)混合物用二氯甲烷(20ml)稀釋并用0.5N HCl(2×15ml)、飽和碳酸氫鈉(2×15ml)和鹽水(15ml)洗滌。干燥并濃縮，得到標(biāo)題化合物粗品。經(jīng)快速層析，得到標(biāo)題化合物。e)[4-(4-嗎啉甲?；?苯甲酰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例7(d)的產(chǎn)物(117mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例8N-(4-嗎啉甲?；?-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)N-(4-嗎啉甲?；?-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備往實(shí)施例7(c)的產(chǎn)物(406mg，1.0mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入4-嗎啉基甲酰氯(0.47ml，4.0mmol)和NMM(0.5ml，5.0mmol)。將該混合物攪拌2.5小時(shí)，濃縮溶劑并經(jīng)快速層析法純化殘余物，得到標(biāo)題化合物。b)N-[4-(4-嗎啉甲酰基)苯甲?；?L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例8(a)的產(chǎn)物(97mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例9N-(2-呋喃甲?；?-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)N-(2-呋喃甲?；?-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備以類似于實(shí)施例8(a)所述的方法，在NMM(0.33ml，3.0mmol)的存在下，使2-呋喃甲酰氯(0.10ml，1.0mmol)與實(shí)施例7(c)的產(chǎn)物偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物。b)N-(2-呋喃甲酰基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例9(a)的產(chǎn)物(93mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例10N-[(四氫-2H-吡喃-4-基)羰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)N-[(四氫-2H-吡喃-4-基)羰基]-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備往四氫-2H-吡喃-4-甲酸(130mg，1.0mmol)(Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，37，4538(1994))和DMF(0.1ml)在二氯甲烷中的混合物中加入草酰氯(1.0mmol，87μl)。在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)后，加入NMM(3.0mmol，0.33ml)和實(shí)施例7(c)的產(chǎn)物(406mg，1.0mmol)。將該混合物攪拌2.5小時(shí)后，傾入水中并用二氯甲烷萃取。合并、干燥(硫酸鎂)并濃縮該萃取液。經(jīng)快速色譜得到標(biāo)題化合物。b)N-[(四氫-2H-吡喃-4-基)羰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例10(a)的產(chǎn)物(96mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例11N-[3-(4-嗎啉基)-1，3-二氧代丙基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)N-[3-(4-嗎啉基)-1，3-二氧代丙基]-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備以類似于實(shí)施例10(a)所述的方法，在NMM(0.33ml，3.0mmol)的存在下，2-(4-嗎啉甲?；?乙酸(173mg，1.0mmol)(Angelastro，M.R.等，藥物化學(xué)雜志，37，4538(1994))用草酰氯(87μl，1.0mmol)活性并與實(shí)施例7(c)的產(chǎn)物(406mg，1.0mmol)偶聯(lián)。經(jīng)快速層析純化，得到標(biāo)題化合物。b)N-[3-(4-嗎啉基)-1，3-二氧代丙基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例11(a)的產(chǎn)物(105mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例12N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨酰-N-[3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-2，3-二氧代丙基]-L-脯氨酰胺的制備往3-(3-吡啶基)丙酸(302mg，2.0mmol)(Walker，F(xiàn).A.等，美國化學(xué)會(huì)志，102，5530(1980))的二氯甲烷(30ml)懸浮液中加入三乙胺(0.84ml，6.0mmol)并將形成的溶液冷卻到-22℃。加入IBCF(0.26ml，2.0mmol)并將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘。加入另外的三乙胺(0.28ml，2.0mmol)后，一次性加入實(shí)施例7(c)的產(chǎn)物(812mg，2.0mmol)。在-22℃攪拌4小時(shí)后，濃縮該反應(yīng)混合物并快速層析純化，到標(biāo)題化合物。b)N-[3-(3-吡啶基)丙酰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例12(a)的產(chǎn)物(101mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例13N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)-甘氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)CBZ-Val-N-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)Gly-Val(OH)-CO2CH3的制備以類似于實(shí)施例5(b)的方式，將N-(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)甘氨酸(425mg，1.0mmol)(Skiles，J.W.等，藥物化學(xué)雜志，35，641(1992))與3-氨基-2-羥基-4-甲基戊酸甲酯(161mg，1.0mmol)(Peet，N.P.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990))偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物。b)CBZ-Val-N-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)Gly-Val-CO2CH3的制備按照實(shí)施例5(c)所述的氧化方法，由實(shí)施例13(a)的產(chǎn)物(284mg，0.5mmol)制備該標(biāo)題化合物。c)N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)-甘氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例13(b)的產(chǎn)物(113mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例14N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-甲基-甘氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備
a)CBZ-Val-N-(甲基)Gly-Val(OH)-CO2CH3的制備以類似于實(shí)施例5(b)的方式，將N-(芐氧羰基)-L-纈氨酰-N-(甲基)甘氨酸(322mg，1.0mmol)(Skiles，J.W.等，藥物化學(xué)雜志，35，641(1992))與3-氨基-2-羥基-4-甲基戊酸甲酯(161mg，1.0mmol)(Peet，N.P.等，藥物化學(xué)雜志，33，394(1990))偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物。b)CBZ-Val-N-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)Gly-Val-CO2CH3的制備按照實(shí)施例5(c)所述的氧化方法，由實(shí)施例14(a)的產(chǎn)物(233mg，0.5mmol)制備該標(biāo)題化合物。c)N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-甲基-甘氨酰胺，(E)-異構(gòu)體的制備方案A將實(shí)施例14(b)的產(chǎn)物(93mg，0.20mmol)用乙酸酐(0.19ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例15N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-異構(gòu)體(SED.IDNO.8)的制備
方案A在氮?dú)夥障拢鶖嚢韬图訜峄亓飨碌倪拎?1.25ml)和MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-CO2CH3(156mg，0.30mmol)的溶液中滴加乙酸酐(0.29ml，3.0mmol)?；亓?0分鐘后，冷卻該反應(yīng)混合物，將該反應(yīng)混合物用二氯甲烷(30ml)稀釋并用0.3N HCl(2×20ml)，再用鹽水(15ml)洗滌。干燥(硫酸鎂)、過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。進(jìn)行快速層析，用丙酮的乙酸乙酯溶液梯度洗脫(25-50％)，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例16N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(1-氧代丙氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體(SED.IDNO.9)的制備
方案A將MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-CO2CH3(103mg，0.20mmol)用丙酸酐(0.26ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例17N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(2-甲基-1-氧代丙氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-異構(gòu)體(SED.ID NO.10)的制備
方案A將MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-CO2CH3(103mg，0.20mmol)用異丁酸酐(0.33ml，2.0mmol)的吡啶(1.0ml)溶液處理，然后以類似于實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行制備性TLC分離，得到標(biāo)題化合物。
本發(fā)明主題化合物的優(yōu)選實(shí)施方案在以下式I和IA化合物中得以實(shí)現(xiàn)，式I和IA化合物中R1是異丙基或正丙基；優(yōu)選異丙基；R2是(C1-C4)烷基或苯基；優(yōu)選(C1-C4)烷基；R3是(C1-C4)烷基或苯基；優(yōu)選(C1-C4)烷基；P2是Pro、Pip、Aze、Pro(4-OBzl)或Gly，其中α-氨基的氮原子被R基取代，其中R是(C1-C6)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基、環(huán)己基甲基、環(huán)辛基、2-雙環(huán)[2.2.1]己基、嗎啉基、哌啶基、吡啶基或四氫喹啉，優(yōu)選Pro；P3是Ile、Val或Ala；P4是Ala或缺失并且K是乙?；?、叔丁氧羰基、琥珀?；?、甲氧基琥珀?；?、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)-苯甲?；?，或者是下式的基團(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
優(yōu)選化合物的具體實(shí)例包括N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；(SEQ.ID NO.6)N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；(SEQ.ID NO.8)N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-異亮氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-丙基-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[4-[[[(4-氯苯基)磺酰基]氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；N-[4-[[[(4-氯苯基)磺酰基]氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-氨基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[4-[[[(4-氯苯基)磺酰基]氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-氨基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[1-(1-甲基乙基)-3-氧代-2-(乙酰氧基)-3-(苯氨基)-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-乙?；?L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-乙?；?L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；N-乙?；?L-賴氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-乙酰基-L-脯氨酰-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；(SEQ.ID NO.7)N-[4-(4-嗎啉甲?；?苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[4-(4-嗎啉甲?；?苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；N-(4-嗎啉甲?；?-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-(4-嗎啉甲?；?-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；N-(2-呋喃甲?；?-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[(四氫-2H-吡喃-4-基)羰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[3-(4-嗎啉基)-1，3-二氧代丙基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-[3-(3-吡啶基)丙?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-乙氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)-甘氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-(2，3-二氫-1H-茚-2-基)-甘氨酰胺，(Z)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-甲基-甘氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-甲基-甘氨酰胺，(Z)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-環(huán)戊基-甘氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-環(huán)辛基-甘氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-N2-芐基-甘氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(1-氧代丙氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(2-甲基-1-氧代丙氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-4-噻唑烷甲酰胺，(E)-；N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-4-噻唑烷甲酰胺，(E)-；N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉甲酰胺，(E)-；和N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-1，2，3，4-四氫-3-異喹啉甲酰胺，(E)-。
在另外的實(shí)施方案中，本發(fā)明還提供了一種治療患與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病的患者的方法，包括該所述患者施用治療有效量的式I化合物。術(shù)語“與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病”是指特征為嗜中性白細(xì)胞遷移到炎癥部位并參與生物基質(zhì)的水解降解的疾病或癥狀。特別適于使用式I化合物治療的與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病包括氣腫、囊性纖維變性、成人呼吸緊張綜合癥、敗血癥、播散性血管內(nèi)凝血、痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性支氣管炎和腸炎。特別優(yōu)選用于治療與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病的式I化合物包括N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；(SEQ.ID NO.6)N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-；(SEQ.ID NO.8)N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲酰基]-L纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-；和N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(Z)-。
本文中采用的術(shù)語“患者”是指處于特定炎癥疾病狀態(tài)的溫血?jiǎng)游?，如哺乳?dòng)物。應(yīng)該理解豚鼠、狗、貓、大鼠、小鼠、馬、牛、羊和人均是該術(shù)語所指范圍內(nèi)的實(shí)例。
術(shù)語“治療有效量”是指對(duì)患者施用單次或多次劑量有效提供與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病癥狀緩解的量。本文采用的呼吸道疾病的“癥狀緩解”是指疾病的程度比未進(jìn)行治療時(shí)所預(yù)期的嚴(yán)重程度有所減輕，而不必需是指癥狀全部消除或治愈該疾病。在確定治療有效量時(shí)，參與診斷者應(yīng)考慮多種因素，包括，但不限于哺乳動(dòng)物的種類；其大小、年齡和健康狀況；所涉及的特定疾?。患膊〉膰?yán)重程度；個(gè)體患者的反應(yīng)；所施用的特定化合物；給藥方式、給藥制劑的生物利用度特性；選擇的劑量方案；同時(shí)服用的藥物；以及其它有關(guān)情況。
式I化合物的治療有效量預(yù)計(jì)為每公斤患者體重每天約0.1毫克(mg/kg/天)-約100mg/kg/天。優(yōu)選量預(yù)計(jì)為約0.5毫克-約10mg/kg/天。
本發(fā)明的化合物是高效彈性蛋白酶，尤其是人嗜中性白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑的前藥，或者它們自身是彈性蛋白酶抑制劑。據(jù)信本發(fā)明的化合物是通過對(duì)彈性蛋白酶的抑制作用而發(fā)揮它們的抑制作用并由此緩解彈性蛋白酶介導(dǎo)的疾病，所述疾病包括，但不限于氣腫、囊性纖維變性、成人呼吸緊張綜合癥、敗血癥、播散性血管內(nèi)凝血、痛風(fēng)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性支氣管炎和腸炎。然而，應(yīng)該理解的是本發(fā)明并不受任何理論或建議機(jī)制的限制來解釋其應(yīng)用有效性。
在對(duì)患上述疾病的患者治療中，式I化合物可采用任何可以使有效量的式I化合物具有生物利用性的形式或方式給藥，包括口服、氣霧給藥或經(jīng)非胃腸途徑給藥。例如式I化合物可口服、通過氣霧化、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、透皮、經(jīng)鼻、經(jīng)直腸和局部給藥?？诜驓忪F給藥通常是優(yōu)選的。制備制劑的本領(lǐng)域普通專業(yè)人員很容易根據(jù)所選擇化合物的特定性質(zhì)、所治療的疾病、疾病的階段和其它相關(guān)情況選擇合適的形式和服藥方式。Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack PublishingCo.(1990)。
化合物可單獨(dú)給藥或以與可藥用載體或賦形劑組合的藥物組合物形式給藥，它們的比率和性質(zhì)取決于所選擇化合物的溶解度和化學(xué)性質(zhì)、選擇的給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐。本發(fā)明的化合物，雖然它們本身就有效，但仍可以可藥用鹽的形式配制和給藥，如由于穩(wěn)定性、易結(jié)晶性和提高溶解度等原因而使用酸加成鹽。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了含有式I化合物和與其混合或以其他方式結(jié)合的一種或多種惰性載體的組合物。這些組合物可用作測定標(biāo)準(zhǔn)、用作大量裝運(yùn)的方便手段或用作藥物組合物。式I化合物的可測量是很容易通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知和清楚的標(biāo)準(zhǔn)測定方法和技術(shù)測定的量。惰性載體是不降解式I化合物不與其共價(jià)反應(yīng)的任何物質(zhì)。適宜惰性載體的實(shí)例是水；緩沖水溶液，如常用于高壓液相(HPLC)分析中的那些；有機(jī)溶劑，如乙腈、乙酸乙酯、己烷等；以及可藥用載體或賦形劑。
更具體地說，本發(fā)明提供了含有治療有效量的式I化合物和與其混合或以其他方式結(jié)合的一種或多種可藥用載體或賦形劑的藥物組合物。
藥物組合物可采用藥學(xué)領(lǐng)域熟知的方式制備。載體或賦形劑可以是固體、半固體或液體材料，它們可用作活性成分的載體或介質(zhì)。適宜的載體或賦形劑是本領(lǐng)域公知的。藥物組合物可以片劑、膠囊、栓劑、溶液或懸浮液等形式口服、經(jīng)非胃腸或局部使用。
本發(fā)明的化合物可例如與惰性稀釋劑或與可食載體一起口服。它們可包封于膠囊中或壓制成片。為口服治療給藥，該化合物可與賦形劑結(jié)合，以片劑、含片、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑和嚼膠等形式使用。這些制劑應(yīng)含有至少4％的活性成分，即本發(fā)明化合物，但可以有所變化，這取決于特定的形式，該含量可方便地占單位制劑重量的4％-70％?；衔锎嬖谟诮M合物中的量應(yīng)是可獲得合適劑量的量。本發(fā)明的優(yōu)選組合物和制劑應(yīng)制備為口服單位劑型含有5.0-300毫克本發(fā)明化合物的劑型。
片劑、小丸、膠囊和含片等也可含有一種或多種如下的助劑粘合劑如微晶纖維素、西黃嗜膠或明膠；賦形劑如淀粉或乳糖；崩解劑如藻酸、Primogel、玉米淀粉等；潤滑劑如硬脂酸鎂或Sterotex；助流劑如膠態(tài)二氧化硅；和甜味劑如蔗糖或糖精；還可加入芳香劑如薄荷、水楊酸甲酯或橘精。當(dāng)單位劑型為膠囊時(shí)，除上述類型的物質(zhì)外，它還可含有液態(tài)載體如聚乙二醇或脂肪油。其它單位劑型可含有修飾單位劑型物理形式如包衣的其它各種物質(zhì)。因此，片劑或小丸可使用糖、蟲膠或其它腸溶衣材料包衣。除本發(fā)明化合物外，糖漿可含有作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、顏料和著色劑以及芳香劑。用于制備這類各種組合物的材料應(yīng)是藥學(xué)純的并且在其使用量時(shí)是無毒的。
為經(jīng)非胃腸治療給藥，可將本發(fā)明的化合物引入一種溶液懸浮液中。這些制劑應(yīng)含有至少0.1％的本發(fā)明化合物，但也可以在占制劑重量的0.1-50％之間變化。該類組合物中存在的本發(fā)明化合物的量應(yīng)可獲得合適劑量。應(yīng)制備本發(fā)明的優(yōu)選組合物和制劑使非胃腸劑量單位含5.0-100毫克本發(fā)明化合物。
本發(fā)明的式I化合物可也以通過氣霧劑給藥。術(shù)語氣霧劑是指從膠態(tài)性質(zhì)到包括加壓裝置組成的各種體系?？赏ㄟ^液化或壓縮氣體或者通過分散活性成分的合適的泵系統(tǒng)進(jìn)行輸送。為輸送活性成分，式I化合物的氣霧劑可以單相、雙相或三相體系輸送。氣霧劑的輸送包括必需的容器、活化劑、閥門和內(nèi)裝置等。優(yōu)選的氣霧劑可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員確定。
本發(fā)明的式I化合物還可局部給藥，當(dāng)進(jìn)行局部給藥時(shí)，載體可適當(dāng)?shù)睾腥芤?、軟膏或凝膠基質(zhì)。該制劑例如可含有一種或多種下述成分石蠟、羊毛脂、聚乙二醇、蜂蠟、礦物油、稀釋劑如水和醇以及乳化劑和穩(wěn)定劑。局部制劑可含有約0.1-約10％w/v(每單位體積的重量)的式I化合物或其可藥用鹽。
一些合適的透皮體系記載于美國專利3742951、3797494、3996934和4031894中。這些體系通常含有作為其一個(gè)表面的支持膜和作為其另一個(gè)表面的活性物質(zhì)可透過的粘性層，以及插入在兩個(gè)表面之間的至少一個(gè)含活性物質(zhì)的儲(chǔ)庫。或者，活性物質(zhì)可包含在均勻分布在整個(gè)可透過性粘性層的多個(gè)微囊中。在每一種情況下，活性物質(zhì)可從儲(chǔ)庫或微囊中透過膜連續(xù)釋放到活性物質(zhì)可透過的粘性層，該層與受治療者的皮膚或粘膜接觸。如果活性物質(zhì)透過皮膚吸收，控制的和預(yù)定流量的活性物質(zhì)可施用于受治療者。在微囊情況下，包囊物質(zhì)也可起膜的作用。
在另一種透皮給藥本發(fā)明化合物的體系中，藥物活性化合物包含在基質(zhì)中并從該基質(zhì)中以所需的逐步的、恒定的和控制的速率釋放。該基質(zhì)是可透過的，它通過擴(kuò)散和微孔流釋放化合物。該釋放是速率控制型的。這種不需要膜的體系記載于美國專利3921636中。在這些體系中，至少可有兩種釋放類型。藥物活性化合物自身溶于或擴(kuò)散于基質(zhì)中。當(dāng)藥物活性化合物轉(zhuǎn)運(yùn)到基質(zhì)孔中的液相時(shí)，通過微孔流的釋放就發(fā)生了。
溶液或懸浮液可包括一種或多種下述助劑無菌稀釋劑如注射用水、鹽水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如苯甲醇或?qū)αu苯甲酸甲酯；抗氧劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑如乙二胺四乙酸；緩沖劑如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽和調(diào)節(jié)滲透壓的物質(zhì)，如氯化鈉或葡萄糖。經(jīng)非胃腸給藥的制劑可包封在安瓿、一次性注射器或多次劑量(玻璃或塑料)瓶中。
在體內(nèi)，式I化合物通過彈性蛋白酶轉(zhuǎn)化為已知具有人彈性蛋白酶抑制劑活性的化合物。例如，式I化合物轉(zhuǎn)化為歐洲專利申請(qǐng)OPI第0195212號(hào)(1986年9月24日公開)和Peet N.P.等在藥物化學(xué)雜志，33394-407(1990)中公開的化合物，所述文獻(xiàn)全文引入本文以供參考。
化合物抑制彈性蛋白酶或作為彈性蛋白酶抑制劑的前藥的活性，以及式I和IA化合物在治療與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病的有用性在體外和體內(nèi)模型中均得到明確和可靠的證實(shí)。實(shí)施例18在MDL 104569和豬肝彈性蛋白酶的存在下體外測定彈性蛋白酶使用市售的生色底物N-MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-對(duì)硝基苯酰胺([S]＝0.20mM；Km＝0.16mM)測定彈性蛋白酶。測定技術(shù)類似于Mehdi等在生物化學(xué)和生物物理學(xué)研究通訊，166，595(1990)中所述。測定混合物由在0.1M HEPES(pH7.5)，0.5M NaCl，10％DMSO和0.1％Brij 35中的部分純化的彈性蛋白酶和底物(0.2mM)組成。反應(yīng)(1或2ml，在塑料比色杯中)保持在37℃，底物的水解在MDL 104569和5單位/ml的豬肝彈性蛋白酶(Sigma Chemical Co.，cat.no.E-3128)的存在下進(jìn)行。彈性蛋白酶是從人脾中分離的，雖然該酶最近已有市售。將不加抑制劑和前藥時(shí)底物的水解率定為100％。在1μM MDL 104569的存在下，測得81％的水解率；當(dāng)彈性蛋白酶(豬腎，Sigma Chemical Co.)也存在時(shí)，該水解率降低到24％。在濃度為10μM時(shí)，在彈性蛋白酶存在下，從測定的最終抑制程度觀察到的Ki值為130nM，相比之下獨(dú)立測得的母體化合物的Ki值為200nM。實(shí)施例19在MDL 105565和豬肝彈性蛋白酶的存在下體外測定彈性蛋白酶采用實(shí)施例18所述的技術(shù)和方法，在MDL 105565存在下體外測定彈性蛋白酶。使用濃度為10nM的MDL 105565，獲得的水解率為99％；當(dāng)加入彈性蛋白酶時(shí)，該水解率為76％。在濃度為45nM時(shí)，該水解率為94％(不加彈性蛋白酶)和37％(加彈性蛋白酶)。在此，計(jì)算游離藥物的Ki值為13nM，相比之下獨(dú)立測定的Ki值為2nM。實(shí)施例20HNE誘導(dǎo)的倉鼠肺出血使用肺出血模型測定由HNE誘導(dǎo)的急性肺損傷，所述模型描述，例如參見Fletcher，D.S.等，Am.Rev.Respir.Dis.，141672-677(1990)；Skiles，J.W.，藥物化學(xué)雜志，35642-662(1992)；Shah，S.K.等，藥物化學(xué)雜志，353745-3754(1992)或Durham，S.L.等，J.Pharm.Exp.Ther.，270185-191(1994)。如先前 Schranfnagel，D.等在 Am.Rev.Resp.Dis.，129A324(1984)中所述，將HNE(10-25μg/倉鼠，在0.05M乙酸鈉緩沖的鹽水中)滴注到二氧化碳麻醉的重75-125g的雄性Golden Syrian倉鼠(Charles River，Kingston，NY)中。使用定位在倉鼠喉處的纖維光源用均勻的20號(hào)的3英寸不銹鋼針插入氣管的氣管隆凸前的位置。HNE或載體的體積為約100μl。動(dòng)物通過用二氧化碳窒息1小時(shí)后安死，通過切割肝下的下腔靜脈放血。使氣管暴露并插入PE-100(Clay Adams，Parsippany，NJ)套管，通過輕輕滴注回收單一體積鹽水(0.04ml鹽水/g)三次，收集BAL液。使用分光光度儀測定BAL液中紅血球含量并相對(duì)Hgb標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。結(jié)果以毫克/毫升Hgb±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。
通過在滴注HNE之前或之后，經(jīng)口、靜脈或滴注給予一定劑量的式I或IA化合物測定對(duì)HNE誘導(dǎo)的肺出血的抑制。式I或IA化合物給藥的載體是20％依沫浮/水(經(jīng)口)、0.2％三乙胺/鹽水(靜脈)和10％二甲亞砜(滴注)。在所有的實(shí)驗(yàn)中均包括適當(dāng)?shù)妮d體對(duì)照。使用與1ml注射器(5ml/kg)相連的20號(hào)彎曲給藥針經(jīng)口給予倉鼠藥物或載體(5ml/kg)。使用與1ml注射器相連的26號(hào)1/2英寸針經(jīng)頸靜脈注射(2ml/kg)。藥物和載體的氣管內(nèi)施用如上在HNE滴注中所述。
序列表(1)一般信息(i)申請(qǐng)人(A)名稱Hoechst Marion Roussel，Inc.
(B)街道2110 E，Galbraith Rd.，P.O.Box 156300(C)城市Cincinnati(D)州Ohio(E)國家USA(F)郵政編碼(ZIP)45215-6300(G)電話513-948-6566(H)傳真513-948-7961或4681(I)電報(bào)214320(ii)發(fā)明題目α-酮酯和α-酮酰胺的?；┐佳苌?iii)序列數(shù)10(iv)計(jì)算機(jī)閱讀(A)介質(zhì)類型軟盤(B)計(jì)算機(jī)IBM PC兼容機(jī)(C)操作系統(tǒng)PC-DOS/MS-DOS(D)軟件PatentIn Releasse#1.0，#1.30版(EPO)(vi)在先申請(qǐng)日(A)申請(qǐng)?zhí)朥S 08/566,196(B)申請(qǐng)日1995年12月1日(2)SEO ID NO1的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽
(xi)序列描述SEQ ID NO1Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)SEO ID NO2的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO2Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)SEO ID NO3的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO3Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)SEO ID NO4的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸
(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO4Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)SEO ID NO5的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO5Xaa Xaa Xaa Xaa1(2)SEO ID NO6的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO6Ala Ala Pro Xaa1(2)SEO ID NO7的信息
(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO7Pro Ala Pro Xaa1(2)SEO ID NO8的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO8Ala Ala Pro Xaa1(2)SEO ID NO9的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO9
Ala Ala Pro Xaa1(2)SEO ID NO10的信息(i)序列特征(A)長度4個(gè)氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ii)分子類型肽(iii)序列描述SEQ ID NO10Ala Ala Pro Xaa權(quán)利要求
1.下式化合物或者其水合物或可藥用鹽
其中R1是(C1-C4)烷基；R2是(C1-C4)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基或環(huán)己基甲基；X 是-CO2R3或-CONHR3’，其中R3是(C1-C4)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基或環(huán)己基甲基并且R3’是氫、(C1-C4)烷基、苯基、芐基、環(huán)己基或環(huán)己基甲基；P2Gly或Ala，其中α氨基的氮原子可任意被R基團(tuán)取代，其中R是(C1-C6)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C4-C11)雙環(huán)烷基、(C4-C11)雙環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基、(C3-C7)雜環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C5-C9)雜芳基、(C5-C9)雜芳基(C1-C6)烷基、稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基、稠合(C6-C10)芳基(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C12)環(huán)烷基或稠合(C5-C9)雜芳基(C3-C12)環(huán)烷基(C1-C6)烷基，或者P2是Pro、Aze、Ind、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Pro(4-OAc)、Pro(4-OH)；P3是Ala、bAla、Leu、Ile、Nle、Val、Nva、Lys或bVal；P4是Ala、bAla、Val、Nva、bVal、Pro或缺失；K 是氫、乙?；㈢牾；?、苯甲?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、丹?；?、異戊酰基、甲氧基琥珀酰基、1-金剛烷磺?；?、1-金剛烷乙?；?、2-羧基苯甲?；?C(O)N(CH3)2、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲酰基、4-((4-溴苯基)磺酰氨基羰基)苯甲酰基、4-(磺酰氨基羰基)苯甲?；蚴窍率降幕鶊F(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
R’ 是氫或(C1-C4)烷基；n 是零或者1或2的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是甲基、丙基或異丙基；P2是Gly或Ala，其中α氨基的氮原子可任意被R基團(tuán)取代，其中R是(C1-C6)烷基、(C3-C12)環(huán)烷基、環(huán)己基甲基、環(huán)戊基乙基、2-雙環(huán)[1.1.0]丁基、2-雙環(huán)[2.2.1]己基、2-雙環(huán)-己基甲基、苯基、1-萘基、2-萘基、芐基、嗎啉基、哌啶基、嗎啉代甲基、吡啶基、2-喹喔啉基、喹啉基、3-喹啉基甲基、2，3-二氫化茚基或四氫喹啉，或者P2是Pro、Aze、Tic、Pip、Tca、Pro(4-OBzl)、Pro(4-OAc)或Pro(4-OH)；并且P3是Ala、Leu、Ile、Nle、Val、Nva或Lys；且K是氫、乙?；?、琥珀?；?、苯甲酰基、叔丁氧羰基、芐氧羰基、丹?；?、異戊?；⒓籽趸牾；?、1-金剛烷磺?；?、1-金剛烷乙?；?、2-羧基苯甲?；?、-C(O)N(CH3)2、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?、4-((4-溴苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?、4-(磺酰氨基羰基)苯甲酰基或是下式的基團(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
3.權(quán)利要求2的化合物，其中X是-CO2R3。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中X是-CONHR3。
5.權(quán)利要求3的化合物，其中P2是Gly或Ala，其中α氨基的氮原子可任意被R基團(tuán)取代，其中R是甲基、環(huán)戊基或2，3-二氫化茚基；或者P2是Pro、Aze或Tic；P3是Ile、Val或Ala；P4是Ala、Pro或缺失；且K是乙?；?、琥珀?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、甲氧基琥珀?；?C(O)N(CH3)2、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?-((4-溴苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；?、4-(磺酰氨基羰基)苯甲?；蚴窍率降幕鶊F(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
6.權(quán)利要求4的化合物，其中P2是Gly或Ala，其中α氨基的氮原子可任意被R基團(tuán)取代，其中R是甲基、環(huán)戊基或2，3-二氫化茚基；或者P2是Pro、Aze或Tic；P3是Ile、Val或Ala；P4是Ala、Pro或缺失；且K是乙酰基、琥珀?；?、叔丁氧羰基、芐氧羰基、甲氧基琥珀?；?、-C(O)N(CH3)2、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲酰基、4-((4-溴苯基)磺酰氨基羰基)苯甲酰基、4-(磺酰氨基羰基)苯甲?；蚴窍率降幕鶊F(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
7.權(quán)利要求5的化合物，其中R1是異丙基；P2是Pro；且K是乙?；⑹宥⊙豸驶?、琥珀?；⒓籽趸牾；?-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；蚴窍率降幕鶊F(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
8.權(quán)利要求6的化合物，其中R1是異丙基；P2是Pro；且K是乙?；?、叔丁氧羰基、琥珀?；?、甲氧基琥珀酰基、4-((氯苯基)磺酰氨基羰基)苯甲?；蚴窍率降幕鶊F(tuán)
其中Z是N或CH，B是下式的基團(tuán)
9.權(quán)利要求1的化合物，其中化合物是N-(4-甲氧基-1，4-二氧代丁基)-L-丙胺酰-L-丙胺酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中化合物是N-[4-[[[(4-氯苯基)磺?；鵠氨基]羰基]苯甲?；鵠-L-纈氨酰-N-[2-(乙酰氧基)-3-甲氧基-1-(1-甲基乙基)-3-氧代-1-丙烯基]-L-脯氨酰胺，(E)-。
11.含有權(quán)利要求1的化合物和載體的組合物。
12.含有權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體的組合物。
13.一種抑制患者中人嗜中性白細(xì)胞彈性蛋白酶的方法，所述方法包括給有此需要的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
14.一種治療與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病的患者的方法，所述方法包括給患所述疾病的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述的與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病是氣腫。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述的與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病是囊性纖維變性。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述的與嗜中性白細(xì)胞有關(guān)的炎癥疾病是慢性障礙性肺病。
全文摘要
本發(fā)明涉及α－酮酯和α－酮酰胺的?；┐佳苌?。本發(fā)明的化合物是已知彈性蛋白酶的前藥或者它們自身是彈性蛋白酶抑制劑,可用于治療各種炎癥疾病,包括囊性纖維變性和氣腫。
文檔編號(hào)A61P11/00GK1203602SQ96198733
公開日1998年12月30日 申請(qǐng)日期1996年11月4日 優(yōu)先權(quán)日1995年12月1日
發(fā)明者N·P·皮特, J·P·布克哈特, S·麥迪 申請(qǐng)人:赫徹斯特馬里恩魯斯公司