專利名稱：具有抗菌活性的紅霉素a9-0-肟衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有抗菌活性的紅霉素A衍生物，它被用于治療感染性疾病，更具體地，本發(fā)明涉及具有抗革蘭氏陽性和革蘭氏陰性微生物活性的紅霉素A9-
衍生物。
紅霉素A(The Merck Index，XI Ed.，No.3626)是眾所周知的天然具有抗菌活性的大環(huán)內(nèi)酯類化合物，其結(jié)構(gòu)如下
除了具有抗一些非細菌微生物如立克次體和支原體活性外，紅霉素A還具有主要抗革蘭氏陽性微生物如鏈球菌，葡萄球菌和肺炎球菌，但它也可以有效地抗一些革蘭氏陰性微生物如流感嗜血桿菌，淋病奈瑟菌和百日咳桿菌。
除了具有已知的抗上述原核生物活性外，近來在文獻中還指出紅霉素A和其它大環(huán)內(nèi)酯抗菌素具有抗真核寄生蟲活性[P.A.Lartey等人，藥物學的發(fā)展(Advance in Pharmacology)，28，307-343(1994)]。
另外，同其它抗菌藥物一樣，紅霉素A對一些菌株有耐藥現(xiàn)象。
特別是，隨著長期紅霉素A給藥可以在治療由葡萄球菌引起的感染性疾病時觀察到這一現(xiàn)象[A.Kucers和N.Mck.Bennett，The use ofantibiotics，A Comprehensive Review with Clinical Emphasis，WilliamHeinemann Medical，IV Ed.，(1987)851-882]。
對大環(huán)內(nèi)酯抗菌素的興趣來源于它們在一些感染性疾病如呼吸道感染，胃腸道感染，尿道感染和外部器官如皮膚，眼睛和耳朵感染治療方面的臨床應(yīng)用和獸醫(yī)治療。
由于它在酸性環(huán)境中極不穩(wěn)定，例如，口服給藥后在胃腸道中紅霉素A被不可逆地轉(zhuǎn)變成沒有抗菌性的衍生物，這種很差的生物利用度鑒于其活性機理[H.A.Kirst，藥物化學年度報告(Annual Report in MedicinalChemisty)，25，119-128(1989)]。
為了克服上述缺陷，對保持良好抗菌性的紅霉素A進行了研究，結(jié)果表明它對酸有超常的穩(wěn)定性，并有較好的藥物動力學性能，如極好的口服生物利用度，血濃度，組織滲透性和半衰期。
在本領(lǐng)域中我們可以例舉一個紅霉素A或紅霉素A9-0-肟的氨基甲酸酯和碳酸酯的例子，如在歐洲專利申請0216169和0284203(兩個均是Beecham Group PLC的)和歐洲專利申請0033255(Roussel-Uclaf)所述這些化合物的例子。
特別是歐洲專利申請0033255描述了下式紅霉素A9-0-肟衍生物，R-A-O-N＝Ery其中，Ery代表紅霉素A殘基，其中的肟基(-N＝Ery)取代了在9位的羰基(O＝Ery)；A代表有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基；R尤其代表任意取代的有1-6個碳原子的烷氧基或基團[-N(R1)R2]，其中R1和R2可以相同或不同，代表氫原子或任意取代的有1-6個碳原子的烷基。
歐洲專利申請0033255所述的化合物，如紅霉素A9-
肟]， 已知國際專利非商標名(InternationalNonproprietary Name)羅紅霉素(Roxithromycin)[The Merck Index，XI Ed.，No.8253]，紅霉素A9-
肟]和紅霉素A9-
肟]與紅霉素A比較具有體外活性譜，而且具有對酸優(yōu)良的穩(wěn)定性和較好的藥物動力學性能。
因此，所說化合物表現(xiàn)出對革蘭氏陽性細菌如葡萄球菌，鏈球菌和肺炎球菌，和對革蘭氏陰性細菌如流感嗜血桿菌和百日咳嗜血桿菌的抗菌活性。
現(xiàn)在我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，化合物紅霉素A9-0-肟衍生物，尤其是化合物紅霉素A9-
衍生物部分地包括在歐洲專利申請0033255但沒有在歐洲專利申請0033255例舉的化合物，這些化合物與在上述歐洲專利申請中所述的化合物相比，對革蘭氏陽性微生物，尤其是革蘭氏陰性微生物具有更廣范圍抗菌活性，并且改進了藥物動力學性能，例如，優(yōu)良的作用期和優(yōu)良的在組織中消失的半衰期。
因此，本發(fā)明的目的是下式化合物及其可藥用鹽，
其中A是苯基或含有1或多個選自氮，氧和硫雜原子的5或6員雜環(huán)，它們可任意被1-3個相同或不同的選自下列的基團取代直鏈或支鏈C1-C4烷基或烷氧基，C1-C2亞烷基二氧基，C1-C4烷基磺酰基，苯基，苯氧基，羥基，羧基，硝基，鹵素和三氟甲基；R1和R2相同或不同，代表氫原子或直鏈或支鏈C1-C4烷基；n是1或2；m是1-8之間的整數(shù)；
其中R3是氫原子或甲基。
式(I)的肟可以有Z或E構(gòu)型。
因此，本發(fā)明的目的是具有Z或E構(gòu)型的式(I)化合物，并優(yōu)選后者。
由于式(I)化合物具有抗菌活性和對酸有高穩(wěn)定性和良好的藥物動力學性質(zhì)等特點，因此被用于人類和畜禽感染性疾病的治療，例如，中樞神經(jīng)系統(tǒng)，上、下呼吸道，胃腸道，尿道，牙組織和外部器官如皮膚，眼睛和耳朵的感染性疾病的治療。
除非另有說明，否則在本說明書中術(shù)語C1-C4烷基指直鏈或支鏈C1-C4烷基，如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基和叔丁基；術(shù)語C1-C4烷氧基指直鏈或支鏈C1-C4烷氧基，如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，仲丁氧基和叔丁氧基；術(shù)語C1-C2亞烷基二氧基指亞甲基二氧基或亞乙基二氧基。
術(shù)語含有一或多個氮，氧和硫雜原子的5或6員雜環(huán)指雜環(huán)并優(yōu)選吡啶，吡咯，吡咯烷，呋喃，四氫呋喃和噻吩。
優(yōu)選的的化合物是其中A代表苯基或選自吡啶和呋喃的雜環(huán)，它們可任意被1-3個下列基團取代羥基，甲氧基，亞甲基二氧基，正丁氧基，苯氧基，苯基，甲磺?；?，硝基，鹵素和三氟甲基；R1和R2相同或不同，代表氫原子或甲基；R3代表氫原子的式(I)化合物。
更優(yōu)選的化合物是其中A代表任意被一個苯氧基，硝基或三氟甲基取代的苯基；R1和R2相同或不同，代表氫原子或甲基；n等于1；m等于6；r等于2；R3代表氫原子的式(I)化合物。
式(I)化合物的可藥用鹽是與有機或無機酸如鹽酸，氫溴酸，氫碘酸，硝酸，硫酸，磷酸，乙酸，酒石酸，檸檬酸，苯甲酸，琥珀酸和戊二酸形成的鹽。
優(yōu)選的式(I)化合物的具體實例有紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
戊基]肟]；紅霉素A(E)-9-
丙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
丙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]。
本發(fā)明目的之一的式(I)化合物的制備可以根據(jù)下述合成方法進行。
該方法包括，首先，將式(II)適當?shù)陌被崤c式(III)的酰氯縮合，
其中R1和m如上所述；A-(CH2)n-1-COCl(III)其中A和n如上所述。
根據(jù)常規(guī)技術(shù)，縮合反應(yīng)在惰性溶劑中在堿如堿金屬氫氧化物存在下進行，得到式(IV)化合物，
其中A，R1，n和m如上所述。
如此得到的N-?；被崾?IV)依照常規(guī)技術(shù)進一步與式(V)的氨基酯縮合，得到式(VI)化合物，
其中R2和r如上所述；R4代表甲基或乙基；
其中A，R1，R2，R4，n，m和r如上所述。
根據(jù)常規(guī)技術(shù)式(VI)化合物接著在酸，氫化鋁鋰，二甲基硫醚-甲硼烷存在下，被，例如硼氫化鈉，還原或催化氫解成相應(yīng)的式(VII)的氨基醇，
其中A，R1，R2，n，m和r如上所述。
然后，例如，用甲磺酰氯或?qū)妆交酋Ｂ葘⑹?VII)氨基醇轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的式(VIII)的磺?；苌铩＝又?，與用均可由式(IX)表示的紅霉素A9-0-肟或6-0-甲基紅霉素A9-0-肟縮合，得到式(I)化合物，
其中A，R1，R2，n，m和r如上所述；R3代表甲磺?；蚣妆交酋；?。
式(VIII)化合物與式(IX)肟的反應(yīng)在惰性有機溶劑如四氫呋喃，乙醚或1，2-二甲氧基乙烷中，在四丁基鉀和作為絡(luò)合劑的18-冠-6醚存在下進行。
本領(lǐng)域熟練人員都很清楚，當磺?；磻?yīng)用其中R1和R2取代基之一或二者均代表氫原子的式(VII)化合物進行時，在磺?；磻?yīng)之前對氮原子進行保護是必要的。
在這種情況下，這樣得到的N-保護磺?；苌锱c式(IX)肟的縮合反應(yīng)類似于上面所述，然后根據(jù)常規(guī)方法進行脫保護，得到R1和R2取代基之一或二者均代表氫原子的式(I)化合物。
關(guān)于胺保護反應(yīng)參考書參見[T.W.Greene和P.G.M.Wute，有機合成中的保護基(Protective groups in organic synthesis)，John Wiley ＆ Sons，Inc.，2nd.Ed.，(1991)，309-405]。
式(II)，(III)和(V)化合物是已知的或很容易用已知方法制備。
式(IX)肟也是已知化合物，并且能夠根據(jù)已知方法制備，如紅霉素A或6-0-甲基紅霉素A與羥胺鹽酸反應(yīng)。
根據(jù)另一種合成法可以任意制備式(VI)酯，該方法包括，首先，式(II)的適當氨基酸與式(V)的氨基酯縮合，得到式(X)化合物，
其中R1，R2，R4，m和r如上所述。
本領(lǐng)域熟練人員都很清楚，在進行式(II)氨基酸與式(V)的氨基酯縮合反應(yīng)之前，根據(jù)上述磺酰化反應(yīng)對式(II)氨基酸的氨基部分進行適當保護是必要的。
式(X)化合物與式(III)化合物的進一步縮合則根據(jù)已知技術(shù)進行，并任選脫保護，得到式(VI)化合物。
其中至少兩個R1和R2取代基之一選自乙基，正丙基，正丁基和異丁基的式(I)化合物可根據(jù)下面所述另一種合成法制備。
首先，所說方法包括將其中R1和R2取代基之一或二者均代表氫原子的式(VII)的氨基醇中的氮原子?；?。例如，用其中R1和R2取代基二者均代表氫原子的式(VII)根據(jù)常規(guī)技術(shù)在適當酰氯(RCOCl)存在下處理，可能得到式(XI)化合物，
其中A，n，m和r如上所述；R代表直鏈或支鏈C1-C3烷基。
式(XI)化合物的還原反應(yīng)根據(jù)常規(guī)方法進行，得到式(XII)化合物，
其中A，n，m和r如上所述；R1和R2代表乙基，正丙基，正丁基或異丙基；然后它被轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的磺?；苌?，并與式(IX)肟縮合，得到式(I)化合物，
其中A，M，n，m和r如上所述；R1和R2代表乙基，正丙基，正丁基或異丁基。
本發(fā)明的目的之一的上述式(I)化合物制備的另一種合成法如下所述。
所說方法包括首先將適當N-保護的氨基醇如式(XIII)的N-芐氧基羰基-氨基醇在次氯酸鈉和游離基2，2，6，6-四甲基哌啶子基氧基(TEMPO)存在下，在惰性有機溶劑中進行氧化反應(yīng)，得到式(XIV)化合物，
其中M如上所述；Z代表保護基。
適用于氧化反應(yīng)的惰性有機溶劑的實例有二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，1，2-二氯乙烷，乙酸乙酯，苯和甲苯。
這樣所得的醛的胺化反應(yīng)在適當式(XV)的氨基醇存在下進行，然后，上述中間體的還原反應(yīng)例如在硼氫化鈉存在下進行，得到式(XVI)氨基醇，
其中Z，m和r如上所述。
式(XVI)化合物中氨基上氮的進一步保護以這樣的順序進行，先將其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的磺?；苌?，然后與式(IX)肟縮合，并用類似上面所述方法對氮原子脫保護，得到式(XVII)化合物，
其中Z，m和r如上所述。
中間體式(XVII)肟與式(XVIII)適當?shù)娜┛s合，然后通過催化氫化還原，得到式(I)化合物，
其中A，M，n，m和r如上所述。
式(XIII)，(XV)和(XVIII)化合物是已知的或可根據(jù)已知方法很容易地制備。
根據(jù)上述方法之一制備的其中R1和R2取代基之一或二者均代表氫原子的式(I)化合物可根據(jù)常規(guī)方法對二氨基部分的氮原子任意烷基化，該方法包括，例如，與適當?shù)娜┛s合，然后對得到的中間體進行還原。
其中R1和R2，相同或不同，代表直鏈或支鏈C1-C4烷基的式(I)化合物就是這樣得到的。
具有Z或E構(gòu)型的式(I)化合物的制備是根據(jù)上述合成方法之一，通過使用具有所需構(gòu)型的式(IX)肟實現(xiàn)的[J.C.Gasc等人，抗菌素雜志(TheJournal of Antibiotics)，44，313-330，(1991)]。
式(I)化合物具有對幾種革蘭氏陽性和革蘭氏陰性微生物的抗菌性，并且被用于患有下列一些感染性疾病的臨床和獸醫(yī)治療，例如，中樞神經(jīng)系統(tǒng)，上、下呼吸道，胃腸道，尿道，牙組織和外部器官如皮膚，眼睛和耳朵的感染性疾病治療。
而且，所說化合物對臨床上感興趣的并對紅霉素A，更普遍地說，對具有大環(huán)內(nèi)酯抗菌特性的14或15員巨內(nèi)酯有抗藥性的幾種革蘭氏陽性微生物有活性。
式(I)化合物對革蘭氏陽性微生物如釀膿鏈球菌，肺炎雙球菌，糞(faecalis)腸球菌和金黃色葡萄球菌，以及對革蘭氏陰性微生物如大腸桿菌和肺炎桿菌的抗菌活性要通過體外試驗進行評價，該試驗要適合測定出能夠抑制細菌生長的抗菌素的最小濃度(MIC)(實施例23)。用羅紅霉素和甲氧基紅霉素作為參考化合物[分別為The Merck Index，XI Ed.，No.8253和2340]。
式(I)化合物對革蘭氏陽性微生物的抗菌性實際上完全可與羅紅霉素和甲氧基紅霉素這兩種具有體外高抗菌性的大環(huán)內(nèi)酯比較(表1)。
對于革蘭氏陽性微生物，特別是對腸菌如大腸桿菌和肺炎桿菌，式(I)化合物明顯地比兩種參考化合物更有活性(表2)。
進而，指出本發(fā)明式(I)化合物比上面歐洲專利申請0033255所述的羅紅霉素更有活性，而且選其作為對于其它幾種衍生物如紅霉素A9-
肟][J.C.Gasc等人，抗菌素雜志(The Journalof Antibiotics)，44，313-33-，(1991)]的選擇化合物是有意義的。
而且，式(I)化合物在體內(nèi)也具有活性(表3)。
表示為平均保護劑量PD50(mg/kg)的式(I)化合物的體內(nèi)抗菌活性是通過將釀膿鏈球菌引入鼠體引起肺部感染的實驗來測定的(實施例23)。
通過對體內(nèi)活性數(shù)據(jù)的研究，證明式(I)化合物具有延長作用期和延長在組織中消失的半衰期的特性。
事實上，在給小鼠腹膜內(nèi)給藥之后，式(I)化合物迅速及廣泛地分布于整個機體，在組織內(nèi)的含量比血液中高。這一結(jié)果尤其被感染前或1小時后式(I)化合物給藥24小時的PD50值所證實。
事實上，感染前或1小時后，式(I)化合物給藥24小時后的PD50值基本無變化。
對于釀膿鏈球菌(傳統(tǒng)引起呼吸疾病的病原體)誘導小鼠產(chǎn)生肺部感染的實驗中，式(I)化合物腹膜內(nèi)給藥24-48小時后其有效濃度仍保持在肺部。相反，參考化合物羅紅霉素和甲氧基紅霉素在感染前給藥24小時后已失去活性。
因此，式(I)化合物還具有肺部選擇性，將其用于呼吸道感染的治療是非常有利的。
另外，本發(fā)明式(I)化合物對細菌微生物的上述抗菌活性同樣適用于抵抗真核病原體。特別是它們對原生動物如惡性瘧原蟲具有顯著活性，惡性瘧原蟲是眾所周知的瘧原蟲。因此，式(I)化合物對治療瘧疾非常有用。
除了上述對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性微生物以及原生動物具有廣譜抗菌性的特性之外，本發(fā)明式(I)化合物還對酸有良好的穩(wěn)定性以及良好的藥物動力學性能，在小鼠體內(nèi)有與羅紅霉素可比的急性毒性。
因此，鑒于其使用的高安全特性，式(I)化合物可很好地用于人類和禽獸治療。
式(I)化合物優(yōu)選采用適當?shù)乃幬镄问接糜诳诜?，非腸道，栓劑或表面給藥。
因此，本發(fā)明另一個目的是含有治療有效量的一種或多種式(I)化合物及與其混合可藥用載體的藥物組合物。
所說藥物形式包括片劑，膠囊，糖漿，備用或通過稀釋凍干粉后使用的注射液，栓劑，溶液，乳膏，油膏和眼睛洗液。
對于獸醫(yī)使用，除了上述組合物外，還可以制成固體或液體濃縮物，然后稀釋到飼料或飲水中。
根據(jù)組合物的類型，除了含有治療有效量的一種或多種式(I)化合物外，它們還含有藥物或獸醫(yī)所用的固體或液體賦形劑，以及任選其它通常制劑時所用的添加劑，如增稠劑，聚集劑(aggregant)，潤滑劑，分散劑，調(diào)味劑和調(diào)色劑。
為了治療特定的感染，式(I)化合物還可以與其它有效量的活性成分結(jié)合使用。
式(I)化合物的有效量取決于多種因素，如感染的嚴重程度和階段，受影響的器官或系統(tǒng)，宿主類型的特性，引起感染的細菌種類的敏感性，以及所選擇的給藥途徑。
治療的劑量一般為0.5-100mg/kg體重/天；可以每日單劑量或多劑量形式給藥。
為了說明而非限制本發(fā)明，我們給出下列實施例。
制備過程中，式(I)化合物以及合成的中間體用1H-NMR或13C-NMR譜儀測定。進一步的中間體和式(I)化合物的有意義的信號值在后面給出。實施例1N-苯甲酰基-6-氨基己酸的制備將苯甲酰氯(0.18mol)的乙醚(160ml)溶液和1N氫氧化鈉溶液(180ml)同時加到在0-5℃攪拌的6-氨基己酸(0.15mol)的乙醚(150ml)溶液和氫氧化鈉(0.15mol)水(200ml)溶液的混合物中。加入完成后將反應(yīng)混合物升至室溫，然后攪拌4小時。分離各相，水相用乙醚(200ml)洗滌，用濃鹽酸酸化成茶紅色。用乙酸乙酯(3×200ml)萃取，收集的有機相用氯化鈉飽和水溶液(200ml)洗滌，硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)，得到N-苯甲?；?6-氨基己酸用于下步反應(yīng)。
用類似方法制備下列化合物N-苯甲?；?3-氨基丙酸；N-苯甲酰基-甘氨酸；N-苯甲?；?8-氨基辛酸；N-苯甲?；?4-氨基丁酸；N-苯乙?；?6-氨基己酸；N-苯乙?；?甘氨酸；N-苯甲酰基-N-異丙基-4-氨基丁酸；N-苯甲?；?N-異丙基-6-氨基己酸。實施例2N-[6-(苯甲酰氨基)己酰基]甘氨酸乙酯的制備將二環(huán)己基碳化二亞胺(112mmol)的無水四氫呋喃(44ml)溶液逐漸加到在0℃攪拌的實施例1制備的N-苯甲?；?6-氨基己酸(93.5mmol)，甘氨酸乙酯鹽酸鹽(112mmol)，三乙胺(112ml)和無水1-羥基苯并三唑(112mmol)的四氫呋喃(330ml)懸浮液中。將反應(yīng)混合物升至室溫并攪拌16小時。結(jié)束后過濾除去產(chǎn)生的沉淀，減壓蒸發(fā)濾液。用乙酸乙酯(300ml)收集剩余物，依次用5％鹽酸溶液(2×100ml)，氯化鈉飽和溶液(100ml)，5％碳酸氫鈉溶液(2×100ml)和氯化鈉飽和溶液(100ml)洗滌。有機相用硫酸鈉干燥并減壓蒸發(fā)至干，得到N-[6-(苯甲酰氨基)己?；鵠甘氨酸乙酯用于下步反應(yīng)。
用類似方法制備下列化合物N-[(苯甲酰氨基)乙?；鵠甘氨酸乙酯；N-[6-(苯乙酰氨基)己?；鵠甘氨酸乙酯；N-[(苯乙酰氨基)乙?；鵠甘氨酸乙酯；6-[6-(苯甲酰氨基)己酰氨基]己酸乙酯；N-[5-(苯甲酰氨基)戊?；鵠甘氨酸甲酯；6-[5-(苯甲酰氨基)戊酰氨基]己酸甲酯；N-[7-(苯甲酰氨基)庚酰基]甘氨酸甲酯；5-[6-(苯甲酰氨基)己酰氨基]戊酸甲酯；6-[(苯甲酰氨基)乙酰氨基]己酸甲酯；3-[6-(苯甲酰氨基)己酰氨基]丙酸甲酯；6-[N-異丙基-(苯乙酰氨基)乙酰氨基]己酸乙酯；6-[4-(苯甲酰氨基)丁酰氨基]己酸甲酯；4-[N-異丙基-4-(N-苯甲酰氨基)丁酰氨基]丁酸甲酯。實施例3N-(6-氨基己酰基)甘氨酸乙酯的制備a)依次將6-氨基己酸(100g；0.762mol)和碳酸二-叔丁酯(168g；0.762mol)的甲醇(140ml)溶液加到氫氧化鈉(33.54g；0.831mol)的水(840ml)和甲醇(400ml)的混合溶液中。將反應(yīng)混合物保持在室溫攪拌4小時。之后，再加入碳酸二-叔丁酯(17.5g；0.08mol)，并在室溫攪拌16小時。反應(yīng)混合物用己烷(2×400ml)洗滌，用硫酸氫鉀溶液酸化至pH1.5，用乙酸乙酯(3×450ml)萃取。收集的有機相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到6-(叔丁氧羰基氨基)己酸為油(163g)。b)用類似實施例2所說方法，將6-(叔丁氧羰基氨基)己酸(163g)直接與甘氨酸乙酯鹽酸鹽(118g；0.845mol)縮合，得到N-[6-(叔丁氧羰基氨基)己?；鵠甘氨酸乙酯(285g)為用于下步反應(yīng)的粗產(chǎn)物。m.p76-77℃(異丙醚)c)將6N鹽酸(150ml)的乙酸乙酯(150ml)溶液加到在室溫攪拌的N-[6-(叔丁氧羰基氨基)己?；鵠甘氨酸乙酯(285g)的乙酸乙酯(500ml)溶液中。24小時后濾出沉淀，分別用乙酸乙酯和乙醚洗滌，真空爐(50℃)中干燥，得到N-(6-氨基己?；?甘氨酸乙酯(93g)為用于下步反應(yīng)的粗產(chǎn)物。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝10∶2∶1)Rf＝0.2。實施例4N-[6-[(4-氟苯甲?；?氨基]己?；鵠甘氨酸乙酯的制備將4-氟苯甲酰氯(47.4mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液逐漸加到在0℃攪拌的實施例3制備的N-(6-氨基己酰基)甘氨酸乙酯(39.5mmol)和三乙胺(87mmol)的二氯甲烷(150ml)懸浮液中。在所得混合物中斷續(xù)加入三乙胺(2ml)，升至室溫并在此溫度下攪拌。1小時后，將反應(yīng)混合物分別用5％鹽酸溶液(2×100ml)和氯化鈉飽和溶液(3×100ml)洗滌。分離的有機相用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干，得到N-[6-[(4-氟苯甲?；?氨基]己?；鵠甘氨酸乙酯為用于下步反應(yīng)的粗產(chǎn)物。m.p121-122℃(乙酸乙酯)TLC(乙酸乙酯)Rf＝0.3用類似方法制備下列化合物N-[6-(2-糠酰氨基)己?；鵠甘氨酸乙酯m.p104-106℃(乙腈/異丙醚)TLC(二氯甲烷∶甲醇＝95∶5)Rf＝0.3。實施例5N-[6-[(4-甲氧基苯甲?；?氨基]己?；鵠甘氨酸乙酯的制備采用類似實施例2所述方法，并用4-甲氧基苯甲酸(33mmol)和實施例3制備的N-(6-氨基己?；?甘氨酸乙酯(39.5mmol)，得到N-[6-[(4-甲氧基苯甲?；?氨基]己?；鵠甘氨酸乙酯為用于下步反應(yīng)的粗產(chǎn)物。m.p106-107℃TLC(二氯甲烷∶甲醇＝90∶10)Rf＝0.46用類似方法制備下列化合物N-[6-[(3，4-亞甲基二氧基苯甲酰基)氨基]己?；鵠甘氨酸乙酯TLC(二氯甲烷∶甲醇＝90∶10)Rf＝0.39N-[6-[(4-甲磺?；郊柞；?氨基]己?；鵠甘氨酸乙酯m.p124-126℃TLC(二氯甲烷∶甲醇＝96∶4)Rf＝0.31；N-[6-[(3-三氟甲基苯甲?；?氨基]己酰基]甘氨酸乙酯m.p102-104℃TLC(二氯甲烷∶甲醇＝95∶5)Rf＝0.38。買施例62-[6-(苯甲氨基)己氨基]乙醇的制備將96％硫酸(33ml)和乙醚(100ml)混合而成的6N硫酸的乙醚(40.9ml；700mmol)逐漸加到在15-20℃之間攪拌的實施例2制備的N-[6-(苯甲酰氨基)己?；鵠甘氨酸乙酯(46.8mmol)和硼氫化鈉(700mmol)的無水四氫呋喃(200ml)懸浮液中。將反應(yīng)混合物升至沸騰溫度24小時，再冷卻至0℃。攪拌的同時加入甲醇(150ml)。減壓蒸發(fā)溶劑，用6N氫氧化鈉溶液(200ml)收集剩余物，并將反應(yīng)混合物保持在沸騰溫度24小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用四氫呋喃(2×100ml)萃取，蒸發(fā)有機相至干。用乙酸乙酯收集，并用硫酸鈉干燥。用鹽酸的醚溶液酸化，得到的沉淀為2-[6-(苯甲氨基)己氨基]乙醇的鹽酸鹽。所得產(chǎn)物用于下步反應(yīng)。
用類似方法制備下列化合物2-[2-(苯甲氨基)乙氨基]乙醇；2-[6-(2-苯乙氨基)己氨基]乙醇；6-[6-(苯甲氨基)己氨基]己醇；2-[5-(苯甲氨基)戊氨基]乙醇；2-[8-(苯甲氨基)辛氨基]乙醇；5-[6-(苯甲氨基)己氨基]戊醇；6-[3-(苯甲氨基)丙氨基]己醇；3-[6-(苯甲氨基)己氨基]丙醇；3-[4-(苯甲氨基)丁氨基]丙醇；6-[2-(苯甲氨基)乙氨基]己醇；6-[N-異丙基-4-(苯甲氨基)丁氨基]己醇；2-[6-[(4-氟苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(4-甲氧基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(3，4-亞甲基二氧基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(3-三氟甲基苯基)甲氨基]己氨基]乙醇；2-[6-[(4-甲磺?；交?甲氨基]己氨基]乙醇；4-[N-異丙基-4-(N-異丙基-N-苯甲氨基)丁氨基]丁醇。實施例7乙酸6-[N-乙?；?6-(N-乙酰基-N-苯甲氨基)己氨基]己酯的制備將三乙胺(1.95ml；14mmol)和乙酰氯(0.62ml；8.69mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液逐漸加到在0℃攪拌的實施例6制備的6-[6-(苯甲氨基)己氨基]己醇(1g；2.6mmol)的二氯甲烷(15ml)懸浮液中。在0℃攪拌1小時后將反應(yīng)混合物升至室溫，并再攪拌16小時。反應(yīng)混合物分別用10％鹽酸(10ml)和氯化鈉飽和溶液洗滌。分離各相后有機相用硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)至干，得到油狀乙酸6-[N-乙?；?6-(N-乙?；?N-苯甲氨基)己氨基]己酯(1.18g)，用于下步反應(yīng)。
用類似方法制備下列化合物乙酸2-[N-乙?；?6-[N-乙?；?N-(2-苯乙基)氨基]己氨基]乙酯。實施例86-[N-乙基-6-(N-乙基-N-苯甲氨基)己氨基]己醇的制備采用實施例6所述方法，用實施例7制備的乙酸6-[N-乙?；?6-(N-乙?；?N-苯甲氨基)己氨基]己酯，制得6-[N-乙基-6-(N-乙基-N-苯甲氨基)己氨基]己醇。
用類似方法制備下列化合物2-[N-乙基-6-[N-乙基-N-(2-苯乙基)氨基]己氨基]乙醇。實施例92-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙醇的制備將1N氫氧化鈉(44.5ml)溶液和甲苯中50％氯甲酸芐酯(44.5mmol)的乙酸乙酯(33ml)溶液同時逐漸加到在0℃攪拌的實施例6制備的2-[6-(苯甲氨基)己氨基]己醇二鹽酸鹽(18.5mmol)的1N氫氧化鈉(37.1ml)和乙酸乙酯(40ml)溶液中。添加結(jié)束時將反應(yīng)混合物升至室溫，并攪拌24小時。分離各相后水相用乙酸乙酯(2×50ml)洗滌。收集的有機相用氯化鈉飽和溶液(50ml)洗滌，硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)至干，得到油狀2-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙醇，用于下步反應(yīng)。TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.20。
用類似方法制備下列化合物2-[N-芐氧羰基-2-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)乙氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)Rf＝0.25；6-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]己醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.27；6-[N-芐氧羰基-5-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)戊氨基]己醇；2-[N-芐氧羰基-5-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)戊氨基]乙醇；2-[N-芐氧羰基-8-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)辛氨基]乙醇；5-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]戊醇；6-[N-芐氧羰基-3-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)丙氨基]己醇；3-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]丙醇；3-[N-芐氧羰基-4-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)丁氨基]丙醇；6-[N-異丙基-2-[N-芐氧羰基-N-(2-苯乙基)氨基]乙氨基]己醇TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.33；6-[N-芐氧羰基-4-(N-異丙基-N-2-苯甲氨基)丁氨基]己醇TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.42；2-[N-芐氧羰基-6-[N-芐氧羰基-N-[(4-氟苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)Rf＝0.35；2-[N-芐氧羰基-6-[N-芐氧羰基-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.2；2-[N-芐氧羰基-6-[N-芐氧羰基-N-[(3，4-亞甲基二氧基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝60∶40)Rf＝0.26；2-[N-芐氧羰基-6-[N-芐氧羰基-N-[(3-三氟甲基苯基)甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝50∶50)Rf＝0.25；2-[N-芐氧羰基-6-[N-芐氧羰基-N-[(4-甲磺?；交?甲基]氨基]己氨基]乙醇TLC(乙酸乙酯∶己烷＝90∶10)Rf＝0.36。實施例10甲磺酸2-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙酯的制備將甲磺酰氯(3.16mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液逐漸加到在0℃攪拌的實施例9制備的2-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙醇(2.6mmol)的含有三乙胺(0.44ml；3.16mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中。將反應(yīng)混合物升至室溫，并攪拌5小時，再加入5％鹽酸溶液(20ml)。分離各相后有機相分別用5％鹽酸(10ml)和氯化鈉飽和溶液(3×10ml)洗滌。有機相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到甲磺酸2-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙酯，用于下面實施例的反應(yīng)。實施例11紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]的制備將紅霉素A(E)-9-0-肟(627mg；0.84mmol)，18-冠-6醚(220mg；0.84mmol)和實施例10制備的甲磺酸2-[N-芐氧羰基-6-(N-芐氧羰基-N-苯甲氨基)己氨基]乙酯(0.84mmol)的無水四氫呋喃(5ml)溶液分別加到氮氣下室溫攪拌的叔丁酸鉀(103mg；0.92mmol)的無水四氫呋喃(5ml)懸浮液中。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌20小時，然后減壓蒸發(fā)。剩余物用乙酸乙酯(10ml)收集，得到的混合物用氯化鈉飽和溶液(10ml)洗滌。水相用乙酸乙酯(×10ml)萃取，收集的有機相用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到的紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]用于下步反應(yīng)。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶9∶1)Rf＝0.58質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝1250；1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-7.10(m，15H，芳香)；5.18-5.10(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.81(t，3H，CH3CH2).
用類似方法制備下列化合物紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.51H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.11-6.97(m，15H，芳香)；5.18-4.97(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.61H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.27-6.96(m，15H，芳香)；5.05-4.92(m，4H，2CH2Ph)；3.17(s，3H，OCH3)；2.13(s，6H，2NCH3)；0.70(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.65質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝1194；1H-NMR(200 MHz，CDCl3)δ(PPm)7.39-7.01(m，15H，芳香)；5.17-5.02(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.27(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
戊基]肟]；紅霉素A(E)-9-
丙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
丙基]肟]；紅霉素A(E)-9-
乙氨基]己基]肟]m.D.74-76℃質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝11721H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-7.03(m，10H，茅香)；5.13-5.03(m，2H，CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；紅霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物1)m.p.80-82℃(乙腈)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝109413C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.20；171.35；140.06；128.86；128.07；126.62；102.96；96.27；53.54；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物2)TLC(氯仿∶己烷∶三乙胺＝45∶45∶10)Rf＝0.2質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝10521H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.26-7.04(m，5H，芳香)；3.22(s，3H，OCH3)；2.20(s，6H，2NCH3)；0.79(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
己基]肟]m.p.75-77℃1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.47-7.12(m，10H，芳香)；5.18-4.97(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.621H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-6.88(m，15H，芳香；5.17-5.03(m，2H，CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2 NCH3)；0.81(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝45∶45∶10)Rf＝0.31H-NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)；7.40-7.23(m，10H，2PhCH2O)；7.20-6.75(m，4H，PhOCH3)；5.52-5.17(m，4H，2CH2Ph)；3.77(s，3H，PhOCH3)；3.29(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.311H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.38-7.22(m，10H，2PhCH2O)；6.78-6.55(m，3H，aromatics)；5.90(s，2H，OCH2O)；5.15-5.02(m，4H，2CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1)Rf＝0.651H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.54-7.15(m，14H，芳香)；5.20-5.03(m，4H，2CHB2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
氨基]己氨基]乙基]肟]TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5)Rf＝0.51H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.90-7.79(m，4H，PhSO2CH3)；7.48-7.15(m，10H，2PhCH2O)；5.19-5.03(m，4H，2CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；3.02(s，3H，CH3SO2)；2.27(s，6H，2NCH3)；0.82(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
丁基]肟](化合物3)m.p.83-85℃(己烷)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝10661H-NMR(200 MHz，CDCl3)δ(ppm)7.37-7.10(m，5H，芳香)；3.50(s，2H，CH2Ph)；3.30(s，3H，OCH3)；2.26(s，6H，2NCH3)；0.82(t.3H，CH3CH2).實施例12紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]的制備(化合物4)將10％鈀炭(750mg)加到實施例11制備的紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](5.9mmol)的乙醇(150ml)溶液中。將所得混合物置于裝有氫氣(1bar)的Parr氫化器中，并保持在室溫攪拌。7小時后濾除催化劑，將醇溶液蒸發(fā)至干。剩余物用硅膠色譜法純化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1洗脫)，得到紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]。質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝98213C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)140.48；128.39；128.11；126.88.
用類似方法制備下列化合物紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物5)13C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)176.51；172.36；140.96；129.08；128.95；127.67；103.84；96.86；53.35；紅霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物6)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝103813C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.24；171.31；140.33；128.37；128.13；126.89；102.92；96.27；54.01；紅霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物7)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝99513C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.15；171.37；140.41；128.38；128.09；126.89；102.92；96.27；54.04；紅霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物8)1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.35-7.15(m，5H，芳香)；3.75(s，2H，CH2Ph)；2.25(s，6H，2 NCH3)；0.81(t，3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-[p-[2-[8-(苯甲氨基)辛氨基]乙基]肟](化合物9)1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.40-7.15(m，5H，芳香)；3.75(s，2H，CH2Ph)；3.29(s，3H，OCH3)；2.25(s，6H，2 NCH3)；0.82(t.3H，CH3CH2)；紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物10)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)174.96；172.00；140.31；128.39；128.14；126.93；103.16；96.20；53.98；紅霉素A(E)-9-
戊基]肟](化合物11)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.24；171.24；140.41；128.38；128.13；126.88；102.97；96.28；54.06；紅霉素A(E)-9-
丙基]肟](化合物12)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.23；171.46；140.45；128.39；128.13；126.88；102.99；96.29；50.06；紅霉素A(E)-9-
丙基]肟](化合物13)13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.22；171.45；140.35；128.39；128.13；126.90；102.98；96.26；53.94；紅霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物14)m.p.93-95℃質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝103813C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)174.92；170.96；139.71；128.42；128.10；125.79；102.62；95.94；50.93；紅霉素A(E)-9-
己基]肟](化合物15)m.p.78-80℃質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105213C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.47；171.30；140.95；128.61；128.02；126.70；116.87；102.94；53.94；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物16)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝999.513C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)161.88；136.06；129.65；115.14；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物17)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝101113C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)158.57；132.58；129.31；113.76；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物18)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝102513C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)147.65；146.44；134.39；121.18；108.66，108.06；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物19)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105013C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)141.57；131.40；130.63；128.76；124.22；124.72；123.56；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物20)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105913C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)147.23；138.97；128.79；127.49.實施例13N-芐氧羰基-6-氨基己醇的制備將氯甲酸芐酯(50％在甲苯中；84.8ml；0.256mol)的乙酸乙酯(171ml)和1N氫氧化鈉(256ml)溶液同時逐漸加到在0℃攪拌的6-氨基己醇(25g；0.21mol)的乙酸乙酯(250ml)和水(200ml)的混合物中。將反應(yīng)混合物(pH9)升至室溫，并攪拌5小時。分離各相后水相用乙酸乙酯(200ml)洗滌。收集的有機相用氯化鈉飽和溶液(150ml)洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干。用乙醚(300ml)收集剩余物，濾出形成的沉淀并在50℃真空干燥，得到N-芐氧羰基-6-氨基己醇(44.5g)。m.p.80-82℃。實施例14N-芐氧羰基-6-氨基己醛的制備將溴化鉀(1.81g；16mmol)的水(31ml)溶液加到含有游離基2，2，6，6-四甲基哌啶子基氧基(TEMPO)(0.248g；1.6mmol)的實施例13制備的N-芐氧羰基-6-氨基己醇(40g；0.159mol)的二氯甲烷(600ml)溶液中。為了達到pH8.7，將7％次氯酸鈉(240ml)溶液與碳酸氫鈉(4.22g)和5％鹽酸(5ml)混合制成的次氯酸鈉溶液(215ml)逐漸加到在10℃攪拌的反應(yīng)混合物中。添加結(jié)束時分離各相，之后有機相用二氯甲烷(2×200ml)洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到N-芐氧羰基-6-氨基己醛(39.45g)為油。TLC(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)Rf＝0.41。實施例152-[6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙醇的制備將N-芐氧羰基-6-氨基己醇(35g；0.14mol)和2-氨基乙醇(51.3g；0.84mol)的乙醇(250ml)的混合物在分子篩(3A)存在下在室溫攪拌2小時。反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過濾，然后加入硼氫化鈉(6.33g；0.168mol)。室溫下攪拌4小時后真空蒸發(fā)反應(yīng)溶劑。用水(500ml)和乙酸乙酯(500ml)收集剩余物。分離各相后水相用乙酸乙酯(200ml)萃取。收集的有機相用氯化鈉飽和溶液(250ml)洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干，得到2-[6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙醇(38.36g)。TLC(乙酸乙酯∶甲醇∶氨＝10∶2∶1)Rf＝0.4。實施例162-[N-芐氧羰基-6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙醇的制備采用類似實施例9所述方法，并用實施例15制備的2-[6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙醇(38.3g；0.13mol)，得到油狀2-[N-芐氧羰基-6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙醇。TLC(乙酸乙酯∶己烷＝65∶35)Rf＝0.45實施例17甲磺酸2-[N-芐氧羰基-6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙酯的制備采用類似實施例10所述方法，并用實施例16制備的2-[N-芐氧羰基-6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙醇(30g；47.8mmol)，得到油狀甲磺酸2-[N-芐氧羰基-6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙酯，可用于下步反應(yīng)。實施例18紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]的制備采用類似實施例11所述方法，并用實施例17制備的甲磺酸2-[N-芐氧羰基-6-(芐氧羰基氨基)己氨基]乙酯(24.25g；47.8mmol)，硅膠色譜純化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5洗脫)后得到紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](36.1g)。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5)Rf＝0.51H-NMR(200MHz，CDCl3)δ(ppm)7.39-7.22(m，10H，a芳香5)；5.14-5.05(m，4H，2CH3Ph)；3.29(5，3H，OCH3)；2.25(5，6H，2NCH3)；0.80(t，3H，CH3CH2).實施例19紅霉素A(E)-9-
肟]的制備采用類似實施例12所述方法，并用實施例18制備的紅霉素A(E)-9-
乙基]肟]，硅膠色譜純化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5洗脫)后得到紅霉素A(E)-9-
肟]。TLC(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5)Rf＝0.213C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)175.18；171.26；102.96；96.28.實施例20紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟]的制備(化合物21)將2-三氟甲基苯甲醛(0.4g)和分子篩(4.5g；3A)加到室溫攪拌的實施例19制備的紅霉素A(E)-9-
肟](2g；2.24mmol)的乙醇(50ml)溶液中。2小時后濾除分子篩，并加入10％鈀炭(0.2g)。將反應(yīng)混合物置于充有氫氣(1bar)的Parr氫化器中。1小時后，氫化結(jié)束時濾除催化劑，并蒸發(fā)溶劑。剩余物經(jīng)硅膠色譜純化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝95∶5∶0.5洗脫)，得到紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](2g)。質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105013C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)139.14；131.88；130.38；127.58；126.81；125.82.
用類似方法制備下列化合物紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物22)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝98213C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)149.66；148.39；135.81；123.40；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物23)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105013C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)144.73；128.23；125.25；124.26；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物24)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝99713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)158.37；128.60；128.19；122.54；118.88；116.32；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物25)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝99713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.28；140.46；129.56；119.70；115.55；114.89；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物26)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)158.27；131.65；129.40；114.40；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物27)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝107313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.32；157.28；142.69；129.72；129.64；123.16；122.91；118.84；118.52；117.29；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物28)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝99713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)156.49；130.00；128.87；115.88；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物29)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝107313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.43；156.05；135.43；129.69；129.49；123.07；118.92；118.72；118.67；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物30)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝105713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)140.94；139.86；139.40；128.74；128.58；127.13；127.03；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物31)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝97113C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)153.92；141.73；110.08；106.81.實施例21紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物32)將分子篩(6g；3A)和3，5-二氯-2-羥基苯甲醛(0.535g；2.8mmol)加到實施例19制備的紅霉素A(E)-9-
肟](2.5g；2.8mmol)的無水乙醇(100ml)溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌，2小時后濾除分子篩，并分批加入硼氫化鈉(0.106g；2.89mmol)。攪拌3小時后減壓蒸發(fā)溶劑，剩余物經(jīng)硅膠色譜純化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝85∶15∶1.5洗脫)，得到紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](2.2g)。
質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝106613C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)153.43；128.43；126.42；124.41；122.91；121.61.
用類似方法制備下列化合物紅霉素A(E)-9-
己氨氨基]乙基]肟](化合物33)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝102713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)149.14；135.79；133.13；131.26；127.87；124.70；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物34)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝102713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)148.37；142.87；134.17；129.22；122.81；121.96；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物35)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝102713C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)148.41；147.00；128.59；123.60；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物36)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝104313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)157.29；137.40；134.05；128.01；125.23；121.70；紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物37)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝104313C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)155.50；151.98；132.51；125.13；119.67；118.59；實施例22紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](化合物38)依次將37％甲醛(2ml；26.6mmol)水溶液和10％鈀炭(0.82g)加到室溫攪拌的實施例12制備的紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](2g；2mmol)的乙醇∶水＝1∶1(20ml)的混合溶液中。將反應(yīng)混合物放入充有氫氣(1 bar)的Parr氫化器中。2小時后過濾反應(yīng)混合物以濾除催化劑，將所得溶液蒸發(fā)至干。剩余物經(jīng)硅膠色譜純化(二氯甲烷∶甲醇∶氨＝90∶10∶1洗脫)，得到紅霉素A(E)-9-
乙基]肟](1.8g)。質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝100913C-NMR(50 MHz，CDCl3)δ(ppm)139.20；129.04；128.17；126.86.
用類似方法制備下列化合物紅霉素A(E)-9-
己氨基]乙基]肟](化合物39)質(zhì)譜(C.I.)(M+H)+＝107813C-NMR(50MHz，CDCl3)δ(ppm)143.65；129.12；129.03；125.10；124.29.實施例23藥理活性a)體外抗菌活性對于革蘭氏陽性和革蘭氏陰性菌的最小抑制濃度(MIC)的測定是用Mueller Hinton Broth(MHB)作為培養(yǎng)基通過雙序列肉湯梯度稀釋的微方法實現(xiàn)的[National Committee for Clinical Laboratory Standards，1990；對細菌有氧生長進行稀釋抗微生物敏感性試驗的方法；指定標準M7-A2-NCCLS，
Pa.]。
對于要求苛刻的細菌，是將5％馬血清(肺炎雙球菌和釀膿鏈球菌)加到培養(yǎng)基中。羅紅霉素和甲氧基紅霉素[分別為The Merck Index，XI Ed.，No.8253和2340]被用作參考大環(huán)內(nèi)酯。37℃下在微量盤中培養(yǎng)18小時后測定MIC(用μg/ml表示)，以評價能夠抑制細菌生長的最低抗菌濃度。b)體內(nèi)抗菌活性用平均保護劑量(PD50)表示的所研究的式(I)化合物的療效是通過用釀膿鏈球菌C203引起小鼠肺部感染的實驗來測定的。
Charles River白化(albin)小鼠(菌株CD1)的體重在23g到35g之間，6只一組地放于籠中，并用標準食物和水隨意正常喂養(yǎng)。
將于胰蛋白酶肉湯(0.05ml)中的釀膿鏈球菌C203的懸浮液(相當于108UFC)灌入每個用乙醚和氯仿麻醉的小鼠鼻內(nèi)。
被測化合物在感染前24小時或感染后1小時以0.2％Tween懸浮液的單劑量形式進行腹膜內(nèi)給藥。從感染時起一直觀察小鼠的死亡率10天。通過概率分析計算PD50(表示為mg/kg)。
對于一些有代表性的式(I)化合物，其對革蘭氏陽性微生物和革蘭氏陰性微生物的體外抗菌活性分別列于表1和表2，其體內(nèi)抗菌活性值列于表3，詳述如下。
表1化合物2，4-12，16-19，21，23-38和參考化合物羅紅霉素和甲氧基紅霉素對革蘭氏陽性微生物如肺炎雙球菌BS3，肺炎雙球菌BS4，釀膿鏈球菌A26，釀膿鏈球菌C203，糞腸球菌ATCC29212和金黃色葡萄球菌PV14的體外抗菌活性以最小抑制濃度MIC(μg/ml)表示。
p><p>上面的數(shù)據(jù)清楚地表明本發(fā)明式(I)化合物對于革蘭氏陽性微生物具有基本上可與甲氧基紅霉素和羅紅霉素比較的抗菌活性。
表2化合物2，4-12，16-19，21，23-38和參考化合物羅紅霉素和甲氧基紅霉素對革蘭氏陰性微生物如大腸桿菌ATCC25922和肺炎桿菌ZC2的體外抗菌活性最小抑制濃度MIC(μg/ml)表示。
<p>式(I)化合物對于革蘭氏陰性微生物如大腸埃希桿菌和肺炎桿菌的抗菌活性具有比兩個參考化合物明顯高得多的抗菌活性。
表3化合物4，10，16-19，21，23，26-27，29-30，33-35和38及參考化合物羅紅霉素和甲氧基紅霉素在用釀膿鏈球菌C203引起的小鼠肺部感染實驗24小時前和1小時后的體內(nèi)抗菌活性用平均保護劑量PD50(mg/kg)表示。
式(I)化合物在體內(nèi)是活性的，而且它們的活性基本上表明所說化合物表現(xiàn)出的活動期和在組織內(nèi)消失的半衰期明顯高于兩個參考化合物。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物及其可藥用鹽，
其中A是苯基或含有1或多個選自氮，氧和硫的雜原子5或6員雜環(huán)，它們可任意被1-3個相同或不同的選自下列的基團取代直鏈或支鏈C1-C4烷基或烷氧基，C1-C2亞烷基二氧基，C1-C4烷基磺?；?，苯基，苯氧基，羥基，羧基，硝基，鹵素和三氟甲基；R1和R2相同或不同，代表氫原子或直鏈或支鏈C1-C4烷基；n是1或2；m是1-8之間的整數(shù)；r是2-6之間的整數(shù)；M代表下式，
其中R3是氫原子或甲基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其有E構(gòu)型。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A代表苯基或選自吡啶和呋喃的雜環(huán)，它們可任意被1-3個下列基團取代羥基，甲氧基，亞甲基二氧基，正丁氧基，苯氧基，苯基，甲磺酰基，硝基，鹵素和三氟甲基；R1和R2彼此相同，代表氫原子或甲基；R3代表氫原子。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中A代表任意被苯氧基，硝基或三氟甲基取代的苯基；R1和R2彼此相同，代表氫原子或甲基；n等于1；m等于6；r等于2；R3代表氫原子。
5.一種藥物組合物，含有治療有效量的一種或多種式(I)化合物及與其混合的可藥用載體。
6.一種治療人類和禽獸感染性疾病的方法，包括施用治療有效量的權(quán)利要求1化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，用于治療瘧疾。
全文摘要
本發(fā)明描述了式(Ⅰ)化合物,其制備方法以及將其作為活性成分的藥物組合物。式(Ⅰ)化合物被用于治療感染性疾病。其中A,R
文檔編號A61P31/04GK1169727SQ95196779
公開日1998年1月7日 申請日期1995年12月7日 優(yōu)先權(quán)日1994年12月13日
發(fā)明者F·比拉茨尼, G·施奧帕卡斯, E·阿勒比尼, D·伯塔, S·羅馬納諾, F·薩塔格洛 申請人:薩寶集團公司