專利名稱：用作抗病毒劑的黃素衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗病毒劑和它們在治療人和動物患者，以及緩解或治療由病毒特別是HIV感染引起的疾病中的應(yīng)用。為估計它們對抗幾種HIV-1病毒株感染的效力，已深入研究了本發(fā)明的化合物。這些化合物在對抗急性和慢性感染之細胞中的HIV方面具有相似的活性。這是一種僅僅偶而與目前用于治療HIV感染的其他化合物相關(guān)聯(lián)的雙重特性，但可用早期作用于HIV復(fù)制周期的阻止vDNA螯合劑宿主染色體內(nèi)的化合物治療細胞的重新(急性)感染。正是這種整合作用指明感染進入慢性階段。因此在HIV整合后發(fā)揮作用的化合物即為受慢性感染之細胞的抑制劑。例如齊多夫定(Zidovudine，AZT)只有抗HIV急性感染的活性而沒有明顯的抗慢性細胞的活性。因此HIV(其為正鏈RNA病毒)之基因表達的抑制劑應(yīng)是在HIV慢性感染的細胞中有活性的。
HIV是感染人的正鏈RNA病毒。病毒顆粒吸附到CD4表面受上后病毒即附著于細胞膜上。然后病毒顆粒穿透通過細胞膜并進入細胞胞質(zhì)中。然后病毒顆粒在胞質(zhì)中脫包被，從而病毒被膜和基因組的蛋白質(zhì)外被將病毒RNA釋放到胞質(zhì)中。在其中從宿主細胞遺傳材料逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生雙鏈DNA轉(zhuǎn)錄特。該轉(zhuǎn)錄物侵入宿主細胞核并與宿主細胞染色體DNA整合。轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生vRNA復(fù)制品，進而在胞質(zhì)中被翻譯以產(chǎn)生新的病毒蛋白。然后病毒蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)表面上與vRNA組裝以產(chǎn)生可從宿主細胞中釋放出的新的病毒顆粒。
HIV正常情況下是與初始的無癥狀期相聯(lián)系的。在出現(xiàn)早期HIV疾病征象之前，這種初始無癥狀期可持續(xù)數(shù)年。
已提出了許多引起細胞死亡的觀點。編程性細胞死亡即是其中之一。其為一種涉及許多生理學(xué)和病理學(xué)過程的不同形成的編性細胞死亡，其中力圖保持適當(dāng)?shù)募毎麅?nèi)氧化劑一抗氧化劑平衡的細胞過程。T細胞的細胞死亡是與這種平衡過程密切關(guān)聯(lián)的。認為HIV感染逐擾亂有利于細胞死亡的平衡。確定細胞是否將以正常方式生長和分裂的另一個關(guān)鍵因素是細胞內(nèi)ATP濃度。低細胞內(nèi)ATP水平與局部缺血性死亡有關(guān)。T淋巴細胞對耗減細胞內(nèi)ATP水平是特別易受損害的。HIV感染可干擾細胞氧化磷酸化這一對細胞內(nèi)ATP水平負責(zé)的細胞過程。不管細胞死亡原因如何最終都將導(dǎo)致細胞減少到誘發(fā)艾滋病(ADIS)的水平。
在抗病毒研究領(lǐng)域，目前大量的工作是涉及及靶向特異性病毒編碼的酶。之一研究發(fā)現(xiàn)的化合物原則上都應(yīng)是對細胞過程低毒性的。在治療HIV感染的臨床試用中長期使用這些化合物并沒有達到原來預(yù)期的效果，而需要進行新的研究。
核黃素是有下列不同名稱的已知化合物E101；乳黃素；核黃素(Riboflavin，Riboflavium)；維生素B2；維生素G；7，8-三甲基-10-(1′-D-核糖醇基)異咯嗪；和
3，10-二氫-7，8-二甲基-10-(D-核糖-2，3，4，5四羥戊基)苯并喋啶-2，4-二酮。
核黃素可作為基本身或其磷酸鈉或四丁酸鹽，特別是作為前者的二水合物鹽從市場上購得。也可以作為與其他維生素的各種混合物得到之，所有這些產(chǎn)品基本上都是用于治療維生素B缺乏。在這樣的混合物中，核黃素的劑量在0.5和10mg之間，最大推薦用量為每天30mg。
尚未報導(dǎo)過使用核黃素引起的不良作用。但大劑量核黃素可使尿呈亮黃色從而可干擾某些實驗室檢驗。
人的核黃素需求常常與能量攝入有關(guān)，但似乎與靜止代謝需要量關(guān)系及密切。推薦每天食物中核黃素的攝入量約為1.3至1.8mg，即是說推薦的核黃素基本攝入量為每4200kj(1000Kcal)食物500mg(參見Report of a Joint FAO/WHO ExpertGroup，Tech.Rep.Ser.Wld 111th Org.No.362，1967)。
估計的可接受的核黃素每天攝入量高達每kg體重500mg(參見Thirteenth Report of FAO/WHO Expert Committee on FoodAdditives，Tech.Rep.Ser.WHO.No.445，1971)。
作為水溶性維生素的核黃素，其對于食品能量的利用是必不可分的?；钚缘?，磷酸化形式的核黃素，即黃素單核苷酸和黃素腺嘌呤二核苷酸作為輔酶參于氧化/還原代謝反應(yīng)。
各種其他黃素和其衍生物也是已和的，并主要是用作調(diào)味劑。
現(xiàn)已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，以遠比從前使用的或推薦的劑量更高劑量投用核黃素及其他黃素和其衍生物，可以十分有效地控制和治療病毒特別是HIV感染。該化合物結(jié)構(gòu)表明其參于細胞內(nèi)的氧化磷酸化過程。本發(fā)明的化合物有可能優(yōu)先擊中如HIV的同樣靶目標(biāo)，從而對抗或防止出現(xiàn)包括病毒之產(chǎn)生能力在內(nèi)的感染征象。
因此，本發(fā)明的一個方面是涉及使用黃素，特別是核黃素或其衍生物制造用于控制和治療病毒感染的藥物。
再者，就尚不知道某些黃素其衍生物可以作為藥物來說-甚至在一般意義上的核黃素也是這樣(也知為一種酶輔助因子維生素)，所以本發(fā)明在第二個和更寬的方面涉及這些黃素或其衍生物作為抗病毒劑的應(yīng)用。
在按照本發(fā)明的應(yīng)用中，可以作為本身或衍生物來使用，核黃素或其他黃素，并且黃素衍生物可以是對人或動物使用安全的任何衍生物。但在使用核黃素的情況下，衍生物較好是核黃素鹽，更好是核黃素磷酸鈉或核黃素四丁酸鹽。黃素或其衍生物最好是高純度的，并且避免假成分的污染。
一般說來，用于本發(fā)明的黃素或衍生物可限定為式(I)的化合物，即 其中
X是 (核黃素-5 ′-磷酸鈉鹽二水合物) (黃素腺嘌呤二核苷酸)或CH3(光黃素)另外，在如上式(I)中基團X可以是烷基，或H或芳香基團或其他環(huán)烴基團。
因此，可用黃素或下示衍生物實現(xiàn)本發(fā)明的應(yīng)用(A)下式的光色素 (B)下式的玫瑰黃素 (C)B-羥基黃素、咯嗪及其其他衍生物 其中R是核糖醇基、烷基或H；X是OH、Br、Cl、-SH、OAlk或SAlk。
上述化合物的某些例子是 R＝烷基核糖或rib-P(8-羥基-FMN) R＝Rib-P-AMP(8-羥基-FAD)
其中R的定義同上。
(D)8α-N(3)-組氨酰黃素 其中R代表核黃素衍生物的核糖醇基側(cè)鏈。
(E)8αN(1)-組氨酰黃素 其中R代表核黃素衍生物的核糖醇基側(cè)鏈。
(F)8α-半胱氨酰黃素硫酯(G)6-S-半胱氨酰黃素硫酯(H)光黃素 其中光黃素本身的R1＝R4＝H，R2＝R3＝CH3。
(I)5-脫氮雜黃素這類化合物的例子是 其中取代基限定如下R1R2R3H CH3HH C2H5HH n-C3H7HH n-C4H9HCH3CH3HCH3C2H5HCH3n-C3H7HCH3n-C4H9H
H CH37，8-(CH3)2H D-核糖醇基 7，8-(CH3)2H C2H57CH3CH3C2H57-CH3CH3D-核糖醇基 7，8-(CH3)3且其衍生物例如有 (J)核黃素、FMN和FAD的5-碳酰-5-脫氮雜和1-碳酰-1-脫氮雜類似物。
這類化合物的例子是核黃素類似物(X)、5-碳酰-5-脫氮雜核黃素類似物(XI)和1-碳酰-1-脫氮雜核黃素類似物，即 (K)黃素1，N6-亞乙烯腺嘌呤二核苷酸 (L)裂殖黃素和衍生物 7，8-二甲基-異咯嗪7，8-二甲基-異咯嗪7，8-二甲基異咯嗪核黃素SF2 SF1如上所示的是裂殖黃素的化學(xué)結(jié)構(gòu)，并顯示它們從核黃素的生成。SF2和SF1可以分別鑒定為7，8-二甲基-10-(2，3，4-三羥基-4-甲酰丁基)異咯嗪和7，8-二甲基-10-(2，3，4-三羥基-4-羧丁基)異咯嗪。
可以作為舉例的其他黃素有3-羧甲基核黃素3-羧甲基FMN7-氨基-10-(1′-D-核醇基)異咯嗪8-氨基-7，10-二甲基異咯嗪8α(S-巰基丙酸)核黃素8α(S-巰基丙酸)FMN8α(N-氨己基)FMN9-偶氮苯甲?；鵉MN10-(W-羧基烷基)-7，8-二甲基異咯嗪在根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用中，較好以比目前使用或推薦的劑量明顯高的劑量水平使用黃素如核黃素或其衍生物。在本發(fā)明中，以至少每天每公斤體重大約1至100mg或更多(例如10mg或更多)的劑量使用核黃素或其他臨床試用的黃素。另外，按照本發(fā)明的應(yīng)用較好是作為口服給藥劑型，特別是膠囊劑(如兩部分的膠囊)用藥。
本發(fā)明還包括用于控制和治療病毒感染的和單位劑量形式的醫(yī)藥和獸藥組合物，該組合物包括至少約35mg如50mg或更多(如50至300mg，50至200mg或50至100mg)的單位劑量的本文所描述或限定的黃素如核黃素或其他衍生物，連同醫(yī)藥或獸藥上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體。
根據(jù)本發(fā)明的組合物較好是其中單位劑量為大約35mg至1000mg，更好是大約250mg至500mg。
此外，根據(jù)本發(fā)明的組合物優(yōu)選為口服劑型或注射劑型。其中優(yōu)選的組合物是以無菌水溶液的形式存在。
發(fā)明也包括制備用于控制和治療病毒感染的藥物的方法，該方法包括配制黃素如核黃素或其衍生物如四丁酸鹽用于抗病毒。
應(yīng)認識到，根據(jù)以上定義的方法可以用本文所述的一個或多個附加的特征來實現(xiàn)。
另外，本發(fā)明包括一種用于抗病毒治療的同時、分別或相繼給藥的結(jié)合制劑，其中含有作為抗病毒劑的黃素如核黃素或其衍生物，連同另一種具有抗病毒活性的化合物。
另外，根據(jù)上述定義的產(chǎn)品可以是包括本文限定之本發(fā)明的一個或多個其他具體特征的產(chǎn)品。
本發(fā)明進一步包括治療病毒感染的方法，該方法包括口服或胃腸道外給予有效量的黃素如核黃素或其衍生物。
在本發(fā)明的方法中，給藥量較好為每公斤患者體重1至100(如至少10)mg。
再者，當(dāng)病毒是人免疫缺陷病毒HIV時，該方法特別有用。
還有，本發(fā)明的方法可包括一個或多個本文限定的本發(fā)明的其他具體特征。
最好用一種或多種核黃素、核黃素磷酸鈉、黃素腺嘌呤二核苷酸、光色素、光黃素，或特別是有下文結(jié)構(gòu)式的核黃素四丁酸完成本發(fā)明 體外試驗使用下述體外試驗法研究本發(fā)明的化合物抗HIV的抗病毒活性1.急性感染試驗1.1標(biāo)準(zhǔn)急性試驗用添加10％胎牛血清的RPMI 1640作為生長培養(yǎng)基，在H9細胞中生長人免疫缺陷病毒HIV-1的高滴度儲備毒株(HTLV-IIIB)。經(jīng)低速離心除去細胞碎片并將上清液貯存于-70℃下備用。在一典型試驗中，將C8166 T…淋巴母細胞樣細胞與10TCID50HIV1于37℃一起保溫90分鐘，然后用磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)洗三次。將2×105個細胞的等分樣品重新懸浮在加于6ml培養(yǎng)管內(nèi)的1.5ml生長培養(yǎng)基中，并立即加入從0.2至200μM對數(shù)稀釋度的試驗化合物。將試驗化合物溶解在70％乙醇中并使培養(yǎng)物中乙醇的終濃度小于1％。將培養(yǎng)物置于5％CO2保持溫箱中37℃保溫72小時。從各培養(yǎng)物中取20μl上清液，使用等同識別所有核心抗原的商品ELISA(Coulter Electronics Ltd.，Luton，UK)，并測定450nm光密度以檢測各培養(yǎng)物的HIV p24核心抗原(Kinchington etal.，1989，Roberts et al.，1990)。為了確定IC50值，從含＜1％乙醇的未經(jīng)處理的培養(yǎng)物繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用AZT和ddc作為內(nèi)部對照。以一式兩份樣品完成試驗。
1.2耗竭培養(yǎng)基試驗在標(biāo)準(zhǔn)試驗系統(tǒng)中，收集細胞培養(yǎng)物，均分并在開始試驗前約18至24小時供入新鮮培養(yǎng)基。加入新鮮培養(yǎng)基刺激細胞進入對數(shù)生長期。為了研究在耗竭了培養(yǎng)基的條件下細胞達到匯合的影響，在用于標(biāo)準(zhǔn)急性試驗前-72、48和24小時供入新鮮培養(yǎng)基并等分之。
1.3光曝露試驗將新溶解的試驗化合物樣品對分成兩等份。將其置于月光下或黑暗處2小時，然后進行標(biāo)準(zhǔn)急性試驗。
1.4預(yù)保溫試驗將靶細胞與有00至0.2μM對數(shù)稀釋度的試驗化合物預(yù)保溫18/24小時，然后感染HIV-1。按標(biāo)準(zhǔn)急性試驗中所述個別處理各不同濃度的樣品。
2.慢性感染細胞的試驗2.1標(biāo)準(zhǔn)慢性試驗用培養(yǎng)基將用HIV-1rf(h9rf)慢性感染的細胞洗3次以除去細胞外病毒，并與試驗化合物(200至0.2μM)一起保溫3天。然后用如標(biāo)準(zhǔn)急、性感染試驗所述的方法，檢測450nm光密度以確定p24抗原量。為了確定IC50值從含1％乙醇的未處理的培養(yǎng)物所得數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用RO 31-8959(Roche蛋白酶抑制劑)作為內(nèi)部對照。試驗以一式兩份方式進行。
2.2耗竭培養(yǎng)基試驗在標(biāo)準(zhǔn)試驗中收獲細胞培養(yǎng)物，均分并于試驗前約18至24小時供入新鮮培養(yǎng)基。加入新鮮培養(yǎng)基刺激細胞進入對數(shù)生長期。為了研究在耗竭培養(yǎng)基條件下達到匯合之細胞的影響，在用于標(biāo)準(zhǔn)急性試驗之前72、48和24小時在細胞培養(yǎng)物中供入新鮮培養(yǎng)基并等分之。
2.3光曝露試驗將新溶解的試驗化合物樣品分成兩等份。將其置于日光下或暗處2小時，然后進行標(biāo)準(zhǔn)慢性試驗。
3.毒性試驗為了試驗化合物毒性，將2×105個未感染細胞的等分樣品與同樣對數(shù)稀釋度的試驗化合物保溫72小時(參見1.1和2.1節(jié))。然后用培養(yǎng)基洗細胞并重新懸浮在200μl含有C14蛋白質(zhì)水解物的生長培養(yǎng)基中。5或20小時后收獲細胞并檢測C14摻入量。使用來經(jīng)處理的細胞作為對照。
下列表1中驗明了所試驗的化合物表1編號化合物F1核黃素5′磷酸鹽F2核黃素F3黃素腺嘌呤二核苷酸F4光黃素F5光色素F6核黃素四煙酸F7核黃素四丁酸開始進行與表2中提到的各種化合物相關(guān)的試驗以獲得初步結(jié)果。表2中給出的2C50結(jié)果是為進一步證實初步結(jié)果；它們與至今進行的重復(fù)試驗不相符合。試驗結(jié)果示于形成下述附圖的曲線圖和下示表不至10中

圖1化合物F2、F4(第一次抗原試驗)和F5在450nm的抗原光密度(OD)對濃度(μM)曲線。OD 0.371處的破折線代表IC50(活性的)。
圖2化合物F1和F3在450nm處的抗原光密度(OD)對濃度(μM)曲線。OD 0.371處的破折線代表IC50(有活性的)。
圖3化合物F2、F3、F4(第一次毒性試驗)和F5的C14攝入(dpm)對濃度的毒性曲線。6035dpm處的破折線代表CC50(非毒性的)。
圖4化合物F1的C14攝入(dpm)對濃度的毒性曲線。6035dpm處的破折線代表CC50(非毒性的)。
圖5化合物F4(第二次抗原試驗)在450nm處的抗原光密度(OD)對濃度(μM)的曲線。OD 0.371處的破折線代表IC50(有活性的)。
圖6作為C14攝入(dpm)對化合物F4(第二次毒性試驗)之濃度(μM)的毒性曲線。6035dpm處的破折線代表CC5(非毒性的)。
圖7化合物F6和F7在450nm處的抗原光密度(OD)對濃度(μM)的曲線。OD 0.371處的破折線代表IC50(有活性的)。
圖8作為C14攝入(dpm)對化合物F6和F7之濃度(μM)的毒性曲線。6035dpm處的破折線代表CC50(非毒性的)。
圖9抗原對照(ddc)。
如表中所示，估計試驗化合物抗HIV急性和慢性感染之細胞的活性?？共《?IC50)和毒性(CC50)數(shù)據(jù)顯示如下。在另一實驗系列中，在感染前72、48和24小時加入新鮮培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)物中試驗各化合物。進行該實驗以研究化合物對于活性分裂和靜止階段之細胞的影響。該數(shù)據(jù)表明，當(dāng)在靜止期時細胞可能對試驗化合物更為敏感。還研究了光照對穩(wěn)定性、預(yù)保溫靶細胞和抗非州人HIV-1分離物之活性的影響。曝光兩小時對化合物的活性沒有影響。與靶細胞預(yù)保溫提高了其活性，并顯示其有顯著的抗非洲人HIV-1分離物的活性。
表2(圖1-4)-急性感染標(biāo)準(zhǔn)試驗(1.1)化合物編號/IC50CC50SI試驗編號 圖1和2圖3和4F1/1 1至20 ＞200 -F1/2 ＜0.4 ＞400 ＞1000F1/3 0.1(圖2) ＞800(圖4) ＞8000F23(圖1)＞200(圖3) ＞60F3 0.8(圖2) ＞200(圖3)＞200F4 1(圖1) 150(圖3) 150F5 3(圖1) ＞200(圖3)＞60表3(圖7和8)-急性感染標(biāo)準(zhǔn)試驗(1.1)化合物編號/試驗編號IC50CC50SIF7/1 27(圖1)130 (圖8) 5F7/2 57 ＞200 ＞4F7/3 10 707F7/4 25 140 6表4-慢性感染標(biāo)準(zhǔn)試驗(2.1)化合物編號/試驗編號IC50CC50SIF7/1 0.2 735F7/2 ＞20＞20 -F7/3 10 ＞200＞20F7/4 4 75 19F7/5 26 ＞200＞7表5-急性感染耗竭培養(yǎng)基試驗(1.2)化合物號72小時 48小時 24小時IC50CC50IC50CC50IC50CC50F710160 21 100 110 160表6-慢性感染耗竭培養(yǎng)基試驗(2.2)化合物號72小時 48小時 24小時IC50CC50IC50CC50IC50CC50F7407590 250 60 101表7-急性感染光照曝露試驗化合物 日光 黑暗IC50CC50IC50CC50F760 ＞200 60 ＞200表8-急性感染預(yù)保溫試驗(1.4)感染前靶細胞與試驗化合物預(yù)保溫24小時化合物號IC50 CC50 SIF7 5 120 24
表9(圖5至8)-急性感染標(biāo)準(zhǔn)試驗(1.1)化合物編號 IC50CC50 SIF4 13(圖5)150(圖6)12F6 30-60(圖7) ＞200(圖8) 最小3-6表10-急性感染標(biāo)準(zhǔn)試驗用于非洲HIV分離物感染的C8166細胞(HTLV轉(zhuǎn)化的和天限增殖化的T淋巴母細胞樣細胞)的試驗化合物編號 IC50CC50SIF7 4 150 37.5表11(圖10至12)-急性感染標(biāo)準(zhǔn)試驗(1.1)化合物編號 IC50CC50SIF7 32 200 6.3ddc(對照)0.2用化合物F7觀察到的終點時出現(xiàn)的變化可能是由于靶淋巴母細胞樣細胞的性質(zhì)造成的。即使在同步培養(yǎng)物中也可能有細胞亞群之代謝狀況的極細微的改變。這種情況反映在各試驗中觀察到的成對的抗病毒和毒性值的終點移動上(表3)。表5和表6中所列示的結(jié)果表明，活性期或靜止期的細胞培養(yǎng)物對試驗化合物可能有不同的敏感性。
患者治療對35名患者進行治療。對其30人進行了臨床隨診。
I)患者的一般狀況隨診的30名患者中有20名患者的一般狀況得到改善。這些患者大部分是身體不適、食欲及體重增加方面的改善。兩名患者皮疹改善同時皮膚損傷好轉(zhuǎn)，而一名患者在治療期間沒有發(fā)生新的皮膚損傷。一名患者陽萎(在治療開始前已存在三個月)情況改善，而另兩名終止了長期持續(xù)的感腎。
ii)患者隨診少數(shù)患者來診所進行不定期隨診1.一名患者復(fù)發(fā)了仍堅持治療的膿腫及膿毒性關(guān)節(jié)炎。
2.兩名患者在第二周治療期間再發(fā)了下呼吸道感染并有一人發(fā)展了癥狀明顯的支氣管肺炎。反復(fù)涂片檢查AAFBS持續(xù)為陰性。
3.兩名患者有非定位征象的發(fā)熱，反復(fù)血涂片檢查瘧原蟲均為陰性并且在血液培養(yǎng)物上沒有顯著生長。某中一名患者對羥氨芐霉毒素反應(yīng)良好并且現(xiàn)在已不發(fā)燒。
4.一名患者在治療的第三周里發(fā)生胃腸炎。
5.兩名患者有口和陰門-陰道念珠菌病，并在使用制霉菌素陰道栓劑和片劑之后很快再發(fā)陰門-陰道念珠菌病。
6.兩名患者還報告有生殖器單純瘡疹反復(fù)發(fā)作。
iii)毒性多數(shù)病例報告在前兩周治療期間發(fā)生毒性并且是短暫的。
兩名患者在治療的第一周經(jīng)歷平均四天的瘙癢，并在沒作任何對癥治療情況下自然消失。
報告四名患者在前兩周治療期間有中度腹瀉，平均持續(xù)四天。這是一各處于副作用或HIV感染之自然征象之間的難以歸因的癥狀。但基于其在治療第一周出現(xiàn)的一致性，和其短暫性質(zhì)而有理由支持其為一種副作用。
一名患者報告有倦睡表觀，另一患者報告尿色發(fā)暗。MSU正常。
兩名患者報告腹部不適。
iV)實驗室結(jié)果在治療的第二至第三周三名患者有肝臟酶的短暫升高，沒有肝病的臨床征象。但酶水平已經(jīng)回復(fù)正常。
上述臨床試用報告是目前已使用化合物F7進行了幾周的臨床試用的初步結(jié)果，其中以膠囊形式(如下文實施例4中所述的膠囊)口服給藥的化合物F7劑量為劑量水平1每天每公斤體重1mg，分兩次口服給藥劑量水平2每天每公斤體重2mg，分兩次口服給藥劑量水平3每天每公斤體重10mg，分兩次口服給藥劑量水平4每天每公斤體重15mg，分兩次口服給藥劑量水平5每天每公斤體重20mg，分兩次口服給藥劑量水平6每天每公斤體重30mg，分兩次或三次口服給藥劑量水平7每天每公斤體重40mg，分兩次或三次口服給藥劑量水平8每天每公斤體重50mg，分兩次或三次口服給藥劑量水平9每天每公斤體重100mg，分兩次或三次口服給藥下列具體實施例說明按照本發(fā)明配制的組合物
實施例1由下列成分配制組合物核黃素-5′-磷酸 10mg無菌水 2ml以提供用于治療病毒感染的每天一次給藥的10mg單位劑量的核黃素。
實施例2由下列成分配制組合物核黃素-5′-磷酸 30mg無菌水 2ml以提供用于治療病毒感染的每天一次給藥的30mg單位劑量的核黃素。
實施例3可在2ml或5ml單位量元菌水中并基于活性成分核黃素-5′-磷酸、核黃素、黃素腺嘌呤二核苷酸、光黃素、光色素或其混合物，制備劑量為每毫升10mg、每毫升25mg和每毫升50ng的與實施例1和2中所述者相似的組合物。
實施例4配制下列膠囊規(guī)格25mg、50mg、100mg、200mg、400mg類型2部分硬明膠組合物化合物F7與微晶纖維素Ph.Eur166.4/156.7/118.6/108.7/50mg混合，給出膠囊重量為191.4/206.7/218.6/308.7/450mg的膠囊。
權(quán)利要求
1.應(yīng)用黃素、黃素衍生物或包括其中兩種或多種成分的混合物制造用于預(yù)防或治療由病毒感染引起的疾病的所述藥物。
2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中黃素衍生物是核黃素或核黃素衍生物。
3.權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其中核黃素衍生物是核黃素鹽。
4.權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其中核黃素鹽是核黃素磷酸鈉或核黃素四丁酸鹽。
5.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中黃素或黃素衍生物是有下列結(jié)構(gòu)通式的化合物 其中R是氫或烷基；R1和R4各自是氫、烷基、羥基、鹵素、烷氧基、烷基硫代、硫代或可被取代的芳族或非芳族氮雜環(huán)，且X是(I)氫、核糖醇基、烷基、氫或芳族或非芳族碳環(huán)；(ii)下列通式的基團-CH2-(CHOH)n-Y其中n是正整數(shù)3或4，Y是-CH2OH1-COOH或…COH或下列通式的基團 其中R是氫或烷基；且其中W1和W2各自是烷基、羥基、鹵素、烷氧基、烷基硫代、硫代或可被取代的芳族或非芳族氮雜環(huán)。
6.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中黃素或黃素衍生物是有下列通式的化合物 其中X是(i)氫、核糖醇基、烷基、氫或芳族或非芳族碳環(huán)，(ii)下列通式的基團-CH2-(CHOH)n-Y其中n是正整數(shù)3或4，Y是-CH2OH1-COOH或…CHO或下列通式的基團 其中R是氫或烷基；且其中W1和W2各自是烷基、羥基、鹵素、烷氧基、烷基硫代、硫代或可被取代的芳族或非芳族氮雜環(huán)。
7.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中黃素或黃素衍生物是有下列通式的化合物 其中R1是氫或烷基基團，R2是烷基基團或核糖醇基基團，且R3代表氫或用烷基基團單或二取代的外碳環(huán)。
8.權(quán)利要求1中所述的應(yīng)用，其中黃素或黃素衍生物是光色素、玫瑰黃素、羥基黃素、咯嗪或其衍生物、8α-N(3)-組氨酰黃素、8α-N(1)-組氨酰黃素、8α-半胱氨酰黃素硫酯、6α-S-半胱氨酰黃素硫酯、光黃素、5-脫氮雜黃素、核黃素，F(xiàn)MN或FAD的5-碳酰-5-脫氮雜或1-碳酰-1-脫氮雜類似物、黃素-1，N6-亞乙烯基腺嘌呤二核苷酸、9-甲基黃素、9-苯基黃素、9-芐基黃素、9-環(huán)己基黃素、6，9-二甲基黃素、6，7，9-三甲基黃素、9-羥乙基黃素、9-二羥丙基黃素、6，8，9-三甲基黃素、乳黃素、黃素-9-羧酸、6，7-二甲基黃素-9-羧酸或裂殖黃素(Schizaflavin)。
9.前列權(quán)利要求任何一項所述的應(yīng)用，用藥劑量為每天每公斤體重至少約10mg。
10.前列權(quán)利要求任何一項所述的應(yīng)用，其中藥物是可注射形式的。
11.用于制造可預(yù)防或治療因病毒感染引起之疾病的藥物的黃素或黃素衍生物。
12.如權(quán)利要求11中所述的并如權(quán)利要求2至8的任何一項中限定的黃素或黃素衍生物。
13.用于預(yù)防或治療因病毒感染引起之疾病的藥物組合物，其特征是包含黃素或黃素衍生物。
14.權(quán)利要求13中所述的組合物，其中黃素或黃素衍生物是如權(quán)利要求2至8的任何一項中限定的。
15.權(quán)利要求12或13中所述的組合物，該組合物包括單位劑量至少約35mg的黃素或黃素衍生物連同醫(yī)藥或獸藥上可接受的稀釋劑，賦形劑或載體。
16.權(quán)利要求15中所述的組合物，其中單位劑量為大約35mg至大約100mg。
17.權(quán)利要求16中所述的組合物，其中單位劑量是大約250至500mg。
18.權(quán)利要求15至地7中任何一項所述的組合物，其為可注射形式的。
19.權(quán)利要求18中所述的組合物，其為在無菌水中的溶液形式的。
20.給藥之前容納藥物的容器，所說的容器在給藥過程中是可由醫(yī)務(wù)工作人員操作的，并含有從容器排入患者體內(nèi)或給藥裝置的黃素或黃素衍生物，且所說的容器帶有一使用黃素或黃素衍生物作為預(yù)防或治療因病毒感染引起之疾病的藥物的說明書。
21.下述部分的組合(a)為醫(yī)藥應(yīng)用而配制的黃素或黃素衍生物，和(b)使用所說的配制的黃素或黃素衍生物制造用于預(yù)防或治療因病毒感染引起之疾病的藥物或其應(yīng)用于所說治療的說明書。
22.權(quán)利要求21的組合，其中治療是說明書中提到的，并且是治療HIV感染。
23.權(quán)利要求22的組合，其中HIV感染是慢性感染。
24.制造用于控制和治療病毒感染之藥物的方法，該方法包括配制抗病毒使用的黃素或黃素衍生物。
25.作為抗病毒劑的黃素或黃素衍生物，連同另一種具有抗病毒活性的化合物，作為在抗病毒治療中同時、分別或相繼使用的聯(lián)合制劑。
26.預(yù)防或治療因病毒感染引起之疾病的方法，該方法包括給患有這種疾病的患者治療投用有效量的黃素或黃素衍生物，或給有感染危險的患者預(yù)防投用有效量的黃素或黃素衍生物。
27.權(quán)利要求26中所述的方法，其中給藥量是每公斤患者體重至少約1至10mg或更多。
28.使用不知道有任何醫(yī)藥實用性的黃素或黃素衍生物作為抗病毒劑。
29.用于預(yù)防或治療因病毒感染引起之疾病的黃素或黃素衍生物。
30.如權(quán)利要求9中所述的并如權(quán)利要求1-8中任何一項所限定的黃素或黃素衍生物。
31.用于治療至少處于慢性感染階段之哺乳動物對象的HIV感染的抗病毒劑，該抗病毒劑具有細胞靶及可能也有病毒靶，并且是黃素或黃素衍生物，其于細胞內(nèi)作用于受HIV慢性或急性感染之哺乳動物細胞中的細胞代謝，以阻斷或抵消病毒感染對病毒感染的無癥狀期及無癥狀后階段之細胞的影響。
32.權(quán)利要求31中所述的抗病毒劑，其為核黃素衍生物。
33.體外診斷測定方法，該方法包括在以給有HIV感染的哺乳動物患者投用黃素或黃素衍生物以治療患者后，采集該患者的細胞，并對外部的并從患者體內(nèi)分離的細胞樣品進行試驗，以確定病毒感染的活性和/或進程。
全文摘要
公開了作為抗病毒劑用于哺乳動物的各種黃素衍生物。給出了可作為優(yōu)選的特定實例的核黃素及核黃素衍生物。
文檔編號A61P31/00GK1140992SQ94194350
公開日1997年1月22日 申請日期1994年10月19日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月19日
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