專利名稱:造影劑及其改進(jìn)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及新型的造影劑,更具體地說(shuō)涉及用于超聲影象診斷的新造影劑。
超聲顯象是根據(jù)超聲波(如頻率范圍為1—10MHz)經(jīng)由振子透入人體或動(dòng)物體內(nèi),超聲波與人體組織和體液的界面發(fā)生的相互作用為基礎(chǔ)。超聲影象的反差來(lái)自超聲波在上述界面上不同的反射/吸收;采用多普勒技術(shù)可以增強(qiáng)反射信號(hào),也可采用彩色多普勒技術(shù)來(lái)判斷血液流動(dòng)。
早已認(rèn)識(shí)到采用造影劑有利于增強(qiáng)不同組織/體液的聲學(xué)性質(zhì)的差異。并從1968年碘代花菁綠作為首先試用的超聲造影劑以來(lái),已對(duì)許多其它可能的造影劑進(jìn)行了試驗(yàn)。其中包括乳狀液、固體微粒、水溶性化合物、無(wú)氣泡的和各類包封著的含氣體系。通常認(rèn)為,可壓縮的低密度造影劑由于其產(chǎn)生超聲背景散射,所以是特別有效的;因此含氣體的和產(chǎn)生氣體的體系比其它類型造影劑具有更好的效果。
目前在市場(chǎng)上可購(gòu)得的或近來(lái)臨床開(kāi)發(fā)的超聲造影劑有三種它們是以含氣體的半乳糖微晶為主要成分的EchovistR;含氣體的以脂肪酸包殼的半乳糖微晶的LevovistR;及由部分變性的人體血清蛋白包封的氣泡構(gòu)成的AlbunexR。這些造影劑由于它們?cè)煊鞍胨テ谳^短(即它們?cè)隗w內(nèi)缺少穩(wěn)定性)和有限的儲(chǔ)存期,因而在臨床應(yīng)用上受到限制。因此繼續(xù)需要兼有良好的儲(chǔ)存穩(wěn)定性與體內(nèi)穩(wěn)定性的超聲造影劑,特別是用于心臟和非心臟灌注的研究時(shí),最好是在心臟內(nèi)注射情況下可供至少幾個(gè)循環(huán)流通的超聲造影劑。
微細(xì)粒子超聲造影劑如Echovist和Levovist的另一個(gè)缺點(diǎn)是必須在給藥前配制,如添加適當(dāng)?shù)妮d持液體并用搖動(dòng)方法拌和。由此不可避免地會(huì)引起某些延誤,因此需要改進(jìn)超聲造影劑,使其能以“隨時(shí)可用”的形態(tài)儲(chǔ)存相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間(如至少12個(gè)月,最好2—3年)。
本發(fā)明是以我們研究結(jié)果為基礎(chǔ)的,通過(guò)采用在分散的油相中含凝聚態(tài)或溶解態(tài)的油溶性氣體/流體或氣體前體的水包油型乳狀液造影劑,可以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的。
因此,根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面是提供一種與生物相容的水包油型乳狀液超聲造影劑,其中油相含油溶性氣體/流體或氣體前體。
本發(fā)明造影劑的特征是它們?cè)诮o藥前的儲(chǔ)存狀態(tài)實(shí)際上完全沒(méi)有氣泡/微泡,但在給藥后,如通過(guò)靜脈或動(dòng)脈內(nèi)注射可隨之迅速產(chǎn)生微氣泡,或者在給藥前如按下文更詳細(xì)敘述的方法直接誘導(dǎo)產(chǎn)生微氣泡。在這方面,本發(fā)明的產(chǎn)品可以與現(xiàn)有的超聲造影劑作一對(duì)比,現(xiàn)有的造影劑通常在儲(chǔ)存狀態(tài)含游離氣體,該游離氣體可存在于晶體結(jié)構(gòu)的空穴中和/或粘附在細(xì)微粒材料的表面(如Echovist和Levovist)或以被包封的形態(tài)存在于材料中(如Albunex)。本發(fā)明造影劑采用的氣體,優(yōu)選具有較低水溶性,以保證它們?cè)谌闋钜河H油相中有更好的溶解度,并提高在靜脈或動(dòng)脈內(nèi)注射造影劑后在血流的含水環(huán)境中所產(chǎn)生的微泡的穩(wěn)定性。但是,顯而易見(jiàn),氣體在油相中的溶解度,優(yōu)選不應(yīng)高到給藥后會(huì)抑制微泡產(chǎn)生的程度。雖然,在這種情況下,如果必要,仍可通過(guò)如給藥前預(yù)熱乳狀液的方法來(lái)增加微泡的形成,如在后面所更詳細(xì)敘述的。因此,適用的氣體包括例如惰性氣體(如氦、氖、氬、氪或氙)、烴類(如甲烷、乙炔或3—甲基—1—丁烯)、鹵代烴(包括鹵代鏈烷烴如溴代甲烷、C1—4氫氟代鏈烷烴如六氟丙烷以及更優(yōu)選全氟代鏈烷烴如全氟甲烷或全氟丁烷)及硫的鹵化物(如六氟化硫)等。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“氣體”,包括在正常人體溫度37℃下的任何氣態(tài)物質(zhì),因此包括在環(huán)境溫度如20—25℃下為液體的各種油溶性物質(zhì)??蛇m用的、被認(rèn)為能與乳狀液油相相混合、在本文中是溶于油相的物質(zhì)的實(shí)例包括必要時(shí)鹵化和/或其它取代的烴類、脂族和環(huán)醚類、硅烷類、胂及硫的鹵化物,實(shí)例如下物質(zhì) 沸點(diǎn)(℃)4—甲基—1,3—二氧戊環(huán)—2—酮24.2二溴二氟甲烷 24.51—硝基七氟戊烷 25.0四甲基硅烷26.52—丁炔 27.02—甲基丁烷 27.8十氟化二硫29.0全氟—1—戊烯 29—301—戊烯 30.01,2—二氟乙烷30.72—甲基—1—丁烯 31.2呋喃 31.4正丁基氟化物 32.5甲基異丙基醚 32.5三個(gè)三氟甲基胂 33.32—甲基丁—1,3—二烯 34.1氧化丙烷 34.2二乙醚 34.5異丙基氯 35—36戊烷 36.12—戊烯(反式、順式)36.3—36.9本文中所采用的術(shù)語(yǔ)“流體”表示揮發(fā)性有機(jī)物質(zhì),優(yōu)選是沸點(diǎn)不超過(guò)60℃的有機(jī)物質(zhì)。顯而易見(jiàn),上述的低水溶性并最好是(但要求不過(guò)度)油溶性的要求,對(duì)于這類流體應(yīng)是指其具有溶混性,而能溶解于乳狀液的油相中,應(yīng)是指其可與油相相混合的。
這類流體的實(shí)例包括1,1—二氯乙烯、2—甲基—2—丁烯、3,3—二甲基—1—丁炔、二甲氨基丙酮、全氟戊烷、環(huán)戊烷、環(huán)戊烯及2,3—戊二烯。顯而易見(jiàn),這類沸點(diǎn)超過(guò)37℃的流體在給藥后一般不產(chǎn)生氣體微泡。然而,它們會(huì)產(chǎn)生流體微泡,流體微泡會(huì)因流體密度較低而產(chǎn)生超聲造影作用。
油溶性氣體前體的實(shí)例包括有機(jī)碳酸鹽類,如下式的化合物RO·CO·OM其中R是親油有機(jī)基團(tuán)、M是生理上可接受的陽(yáng)離子。這類物質(zhì)在pH約7或低于7時(shí),如在靜脈或動(dòng)脈內(nèi)給藥后在血流中含量較高的條件下會(huì)產(chǎn)生二氧化碳。采用依賴于pH活化的這類前體有利于離子載體(如尼日利亞菌素)混入乳狀液中以促進(jìn)通過(guò)油相的質(zhì)子轉(zhuǎn)移。
其它的氣體前體包括能產(chǎn)生氮的物質(zhì),如吡唑啉、吡唑、三唑啉、重氮酮、重氮鹽、四唑、疊氮化物及疊氮化物/碳酸鹽混合物,它們可用輻射進(jìn)行活化,如在給藥前直接用紫外光活化。在光解時(shí)會(huì)產(chǎn)生二氧化碳的物質(zhì)(如某類環(huán)酮、內(nèi)酯及碳酸鹽)同樣也可采用。
產(chǎn)生氧的氣體前體包括過(guò)酸類如過(guò)苯甲酸。
在給藥后靠人體熱量來(lái)活化的可熱降解的氣體前體,也可被采用。這類物質(zhì)的實(shí)例是可熱降解的羧酸如2—甲基乳酸。
還有一類氣體前體包括在體內(nèi)可被酶降解并伴隨產(chǎn)生氣體的物質(zhì)。其實(shí)例包括可為普通酯酶裂解而能放出二氧化碳的亞甲基二酯(如采用WO—A—9317718和WO—A—9318070中所述技術(shù)制備的,該兩篇文獻(xiàn)的內(nèi)容在此列入本文作為公開(kāi)內(nèi)容的一部分)。另一種可用的物質(zhì)是過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫可溶于親油介質(zhì)(如醚)中并在體內(nèi)可被酶降解而放出氧氣。如果采用過(guò)氧化氫,添加一種抗氧化穩(wěn)定劑也是有利的。
在氣體或流體本身能夠形成穩(wěn)定的乳狀液情況下,乳狀液的油相主要可以包括氣體/流體以及任何必須的生物相容的乳化劑;在這種情況下,一個(gè)關(guān)鍵性的要求是氣體或流體應(yīng)是凝聚態(tài)而不是氣態(tài),如果必要可施加壓力使其成為凝聚態(tài)。
更為通常的是,油相主要由氣體/流體或溶解于至少一種親油溶劑組分的氣體前體以及任何必須的、生物相容的包括表面活性劑和其它穩(wěn)定劑的乳化劑所組成。顯而易見(jiàn),根據(jù)特定的乳狀液體系的要求,這類乳化劑可以優(yōu)先或在油相中或在水相中溶解或分散。
適用于根據(jù)本發(fā)明乳狀液油相的一類親油溶劑組分包括高度氟化的有機(jī)化合物(如已經(jīng)被提議作為“人造血液”的組分—見(jiàn)EP—A—0231091和WO—A—8910118,其內(nèi)容在此列入本文作為公開(kāi)內(nèi)容的一部分)。應(yīng)該注意到,當(dāng)這些氟化的化合物用于人造血液時(shí),可認(rèn)為氟化化合物是與氧分子復(fù)合而實(shí)現(xiàn)氧的輸送的。本發(fā)明與此不同,氟化的化合物在本發(fā)明中有效提供了一種脂溶性氣體/流體的溶劑介質(zhì)。
依據(jù)本發(fā)明可以采用的高度氟化有機(jī)化合物包括如至多含20個(gè)碳原子的脂族和脂環(huán)族全氟碳化合物(如全氟—2,2,4,4—四甲基戊烷、全氟辛烷、全氟癸烷、全氟三甲基環(huán)己烷、全氟異丙基環(huán)己烷、全氟萘烷、全氟二氫化茚、全氟三甲基二環(huán)〔3.3.1〕壬烷、全氟二環(huán)〔5.3.0〕癸烷、全氟甲基金剛烷及全氟二甲基金剛烷);上述這類化合物的溴代類似物(如全氟溴代辛烷);至多含20個(gè)碳原子的脂族和脂環(huán)族全氟代胺(如全氟代三丙基胺、全氟三丁基胺、全氟代—N—甲基十氫喹啉、全氟—4—甲基八氫喹諾里西啶和全氟—1—氮雜三環(huán)胺);全氟醚及任何上述化合物的混合物。其中優(yōu)選的化合物包括全氟溴代辛烷和全氟萘烷,后者可與全氟三丙基胺組合使用如在Fluosol DA產(chǎn)品中。
表面活性劑可用作乳化劑以穩(wěn)定乳狀液或其本身作為溶解氣體/流體或氣體前體的親油溶劑組分。適用的、生物相容的表面活性劑包括陰離子表面活性劑如脂肪酸堿金屬鹽(如十二烷酸鈉鹽)、烷基硫酸堿金屬鹽(如月桂基硫酸鈉)和磺化酯堿金屬鹽(如磺基丁二酸二辛酯鈉鹽(docusate)),更優(yōu)選的是非離子或兩性離子表面活性劑。后兩類表面活性劑的實(shí)例包括脂肪醇(如正十二烷醇)、聚氧乙烯—聚氧丙烯共聚物(Poloxamers如PluronicRF68)、脫水山梨醇脂肪酸酯如斯盤(Span)類表面活性劑及其聚氧乙基化的類似物如吐溫(Tween)類表面活性劑、磷脂類(如磷脂酰膽堿(即卵磷脂)或二油酰磷脂酰二乙醇胺)以及脂肪酸聚乙二醇酯(如CremaphorR產(chǎn)品)。
可聚合的兩親物質(zhì)如在WO—A—9217212中所述的(其內(nèi)容在此列入本文作為公開(kāi)內(nèi)容的一部分),也可用作表面活性劑;這類兩親物質(zhì)可通過(guò)紫外輻射或其它適當(dāng)?shù)囊l(fā)方式,根據(jù)需要可在乳化后進(jìn)行聚合。
也可采用多間隔泡囊狀表面活性劑(如由Kim等在Biochem.Biophys.Acta728(1983)P.339和EP—A—0280503中所述的)。這類表面活性劑可被認(rèn)為具有雙層脂膜包裹的非同軸芯結(jié)構(gòu),即具有半蜂窩結(jié)構(gòu)??梢苑奖愕夭捎迷S多兩親的脂質(zhì)化合物,這類化合物的優(yōu)點(diǎn)之一是具有凈負(fù)電荷,也可存在一種或一種以上中性脂質(zhì)類化合物。代表性化合物包括磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油(如二肉豆蔻酰磷脂酰甘油)、磷脂酸(如二肉豆蔻酰磷脂酸)、磷脂酰膽堿(如二油酰磷脂酰膽堿或二棕櫚酰磷脂酰膽堿)、堿脂酰乙醇胺、二油酰卵磷脂、膽甾醇、三油酸甘油酯、三辛酸甘油酯及其它的油類/甘油三酯類和它們的衍生物。
可以用在乳狀液中的其它親油物質(zhì)(如作為穩(wěn)定的組分)包括抗氧化劑(如生育酚或硫辛酸)、可溶解并可穩(wěn)定脂溶性氣體或氣體前體的全氟化表面活性劑、液晶、供制備Langmuir—Blodget膜的化合物以及親油的生物可降解聚合物,如嵌段共聚物(如在WO—A—9204392或WO—A—9317718中所述的)。也可使用氣體/流體的油溶性載體分子,卟啉是適用于此目的的載體。
也可使用象表面活性劑助劑那樣的添加劑如糖類增粘劑,如蔗糖。
一類特別適用的乳狀液包括以脂肪為基本成分的乳狀液(如市場(chǎng)上可購(gòu)得的靜脈給藥乳狀液LiposynR(Abbot Laboratories)、IntralipidR(Kabi Vitrum)及SoyacalR(Alpha Therapeutic))。這類乳狀液通常是以大豆油、蛋黃磷脂、甘油和注射用水為主要成分的,并且乳狀液微粒直徑小于0.5μm,其大小與天然存在的乳糜粒相似。這類乳狀液在使用方面的優(yōu)點(diǎn)包括長(zhǎng)的儲(chǔ)存期限、改善的血管造影半衰期和能持續(xù)地釋放氣體。
如果需要,根據(jù)本發(fā)明的造影劑油相可額外含有一種或多種生物相容的、粒子小于1μm,優(yōu)選小于0.2μm的無(wú)機(jī)物懸浮固體微粒。包括如二氧化硅或氧化鐵的這種微粒可起成核點(diǎn)作用以促進(jìn)造影劑在給藥后,在固體/液體界面上產(chǎn)生氣體。
根據(jù)本發(fā)明造影劑的確切組成可依據(jù)諸如如所采用的各具體組分、面對(duì)的特殊用途、以及給藥后預(yù)期的微泡大小等諸因素作很大的改變。
因此,給藥后所形成的微泡體積一般隨氣體/流體的濃度增加而增加,也受構(gòu)成油相材料性質(zhì)的影響。在造影劑含有溶解氣體的場(chǎng)合,通常氣體含量可達(dá)到任何需要的程度,直到飽和或甚至過(guò)飽和(如造影劑在壓力下儲(chǔ)存)。
在增壓造影劑情況下,微泡是在造影劑給藥前,如小瓶子或其它形狀容器一打開(kāi)就開(kāi)始形成的,并且給藥后在體內(nèi)繼續(xù)形成。對(duì)于非增壓造影劑,由于在體內(nèi)造影劑被溫?zé)岬襟w溫,血液成分?jǐn)U散進(jìn)入穩(wěn)定化的乳狀液中和/或乳狀液逐漸破乳而產(chǎn)生微泡。另一種方法,可在給藥前如通過(guò)預(yù)熱(微波加熱)乳狀液來(lái)誘導(dǎo)產(chǎn)生微泡。
如上所述,優(yōu)選的油溶性氣體是那些在水中溶解度低的氣體。由此能促進(jìn)氣體與乳狀液中親油組分結(jié)合,因而進(jìn)一步增強(qiáng)了微泡的穩(wěn)定性,并可導(dǎo)致產(chǎn)生柔性的微泡/親油的結(jié)合體,如被包殼的微泡形態(tài)。在技術(shù)上可以認(rèn)為,這種柔性的結(jié)構(gòu)與較剛性包封的微泡體系在增強(qiáng)超聲造影效應(yīng)方面相比較是特別有利的。
可以用任何方便的方法制備根據(jù)本發(fā)明的造影劑。因此,可采用常規(guī)技術(shù)(如均質(zhì)化或超聲均質(zhì))將含氣體/流體或含氣體前體的油相(如含凝聚的油溶性氣體/流體或油溶性氣體/流體或氣體前體在至少一種親油溶劑介質(zhì)中的溶液)在水相中乳化而形成水包油型乳狀液,或者將所需的氣體/流體或氣體前體摻混到已經(jīng)預(yù)先形成的水包油乳狀液的油相中。
采用油溶性氣體時(shí),氣體如在加壓下溶入所選定的親油溶劑介質(zhì)中,按下文方法使油相順利地乳化。即在過(guò)量氣體自身的壓力下并根據(jù)需要或要求,在一種或多種生物相容的乳化劑存在下進(jìn)行乳化。當(dāng)采用油溶性流體或氣體前體時(shí),也可用這類技術(shù)??蛇x擇的另一方法是將氣體混入到已經(jīng)預(yù)先形成的乳狀液中,如將氣體通入乳狀液中和/或使乳狀液保持在較高的氣體壓力之下。
本發(fā)明的超聲造影劑可以腸道給藥或非腸道給藥,雖然在具體應(yīng)用中直接向體腔如輸卵管給藥是有利的。但是,為了增強(qiáng)血管影象,通常最可能采用血管內(nèi)給藥(最常用的為靜脈注射)包括心臟和心臟外灌注。
顯而易見(jiàn),供靜脈給藥的造影劑所產(chǎn)生的微泡應(yīng)當(dāng)小到足以透過(guò)肺系的毛細(xì)管床。因此,最好是能產(chǎn)生直徑小于10μm、優(yōu)選0.2—8μm范圍(如0.3—7μ)微泡的造影劑。
下列非限制性實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1將0.1021g Span20溶解在10ml正戊烷中,加入溶解有0.5466g Tween60的40ml水溶液,采用Ystral均質(zhì)器在0℃下將混合物乳化,得到穩(wěn)定的細(xì)乳狀液。將2ml乳狀液注加到5ml 37℃(高于正戊烷沸點(diǎn))蒸餾水中,測(cè)量其超聲波衰減。得到的超聲波衰減信號(hào)在20分鐘內(nèi)是穩(wěn)定的。
實(shí)施例2將0.1193g Span20溶解在10ml四甲基硅烷(TMS)中,加入溶解有0.9535g Tween60的40ml水溶液,采用Ystral均質(zhì)器在0℃下將該混合物乳化,得到穩(wěn)定的細(xì)乳狀液。將2ml乳狀液注加到5ml 37℃(高于TMS的沸點(diǎn))蒸餾水中,測(cè)量其超聲波衰減。得到強(qiáng)的超聲波衰減并且信號(hào)在20分鐘內(nèi)是穩(wěn)定的。
實(shí)施例3將0.35ml上述實(shí)施例2的乳狀液注加到6.65ml 37℃(高于TMS的沸點(diǎn))的蒸餾水中。獲得的超聲回聲效應(yīng)在4分鐘后顯示最大,且信號(hào)在20分鐘內(nèi)是穩(wěn)定的。
實(shí)施例4將2ml上述實(shí)施例2的乳狀液注加到5ml 0℃蒸餾水中,并將該稀釋后的乳狀液緩慢加熱到37℃。在加熱過(guò)程中測(cè)量其超聲波衰減,發(fā)現(xiàn)在20分鐘內(nèi)造影效果緩慢地提高,說(shuō)明氣體隨時(shí)間釋放的。
實(shí)施例5
將0.0987g Span20加到10ml呋喃中,加入溶有1.0098gTween60的40ml水溶液,并用Ystral均質(zhì)器在0℃下乳化,得到穩(wěn)定的細(xì)乳狀液。取2ml乳狀液注加到5ml 37℃(高于呋喃沸點(diǎn))蒸餾水中。測(cè)量其超聲波衰減。得到回聲效應(yīng),信號(hào)在20分鐘內(nèi)是穩(wěn)定的。
實(shí)施例6將5ml戊烷加到含0.68g二—十二烷基二—甲基溴化銨的40ml水溶液中,并用Ystral均質(zhì)器在0℃下乳化該混合物,由于形成層狀液晶相而得到穩(wěn)定的細(xì)乳狀液。取2ml該乳狀液注加到5ml37℃蒸餾水中,測(cè)量其超聲波衰減。得到回聲效應(yīng),信號(hào)在20分鐘內(nèi)穩(wěn)定。
實(shí)施例7將5ml戊烷加到含0.56g十二烷基硫酸鈉和0.60g 1—癸醇的40ml水溶液中,并用Ystral均質(zhì)器在0℃下將混合物乳化,得到由于形成層狀液晶而穩(wěn)定的細(xì)乳狀液。取2ml該乳狀液注加到5ml37℃蒸餾水中,并測(cè)量其超聲波衰減。得到回聲效應(yīng),信號(hào)在20分鐘內(nèi)是穩(wěn)定的。
實(shí)施例8將0.10g Span20分散在4ml全氟萘烷中,然后在4℃下用六氟化硫飽和。將0.45g Tween60溶于36ml水中,冷卻至4℃,然后采用Ystral均質(zhì)器在4℃下以20000rpm將該兩溶液乳化30秒鐘。取2ml該乳狀液注加到6ml 4℃蒸餾水中并緩慢加熱到37℃,測(cè)量其超聲波衰減。觀察到2dB/cm或更高的衰減持續(xù)約120秒。
實(shí)施例9
將0.5ml正癸醇和0.50g十二酸鈉分散在36ml水中,將4ml全氟萘烷冷卻到4℃并用六氟化硫飽和。采用Ystral均質(zhì)器在4℃下以20000rpm將該兩溶液乳化30秒鐘。將2ml該乳狀液與6ml37℃蒸餾水混合,測(cè)量其超聲波衰減。觀察到強(qiáng)衰減(>2dB/cm)持續(xù)約30秒。
實(shí)施例10取實(shí)施例9的乳狀液2ml與6ml 4℃蒸餾水混合,并將稀釋的乳狀液緩慢加熱到37℃。測(cè)量其超聲波衰減,約30秒后觀察到最大衰減為2.7dB/cm。
實(shí)施例11將0.5ml正癸醇和0.5g十二酸鈉分散在36ml水中,將4ml全氟萘烷冷卻至4℃并用氙氣飽和。采用Ystral均質(zhì)器在4℃下以20000rpm將該兩溶液乳化30秒鐘。取2ml該乳狀液與6ml 37℃蒸餾水混合,測(cè)量其超聲波衰減。在5分鐘內(nèi)超聲波衰減從1dB/cm增加到約3dB/cm。
實(shí)施例12將0.5ml正癸醇和0.5g十二酸鈉分散在36ml水中,將4ml全氟溴辛烷冷卻到4℃并用氙氣飽和。采用Ystral均質(zhì)器在4℃下以20000rpm將該兩溶液乳化30秒鐘。取2ml該乳狀液與6ml 37℃蒸餾水混合,測(cè)量其超聲波衰減。
實(shí)施例13在高壓釜中將Intralipid(Kabi Vitrum,Stockholm,Sweden)或Fluosol(Alpha Therapeutic Ltd,UK)或10ml全氟溴辛烷冷卻到4℃。在用氙氣加壓(20atm)下攪拌乳狀液16小時(shí)。然后停止攪拌、緩慢地釋放壓力。分別取每種乳狀液2ml與6ml37℃蒸餾水混合,測(cè)量其超聲波衰減。
實(shí)施例14將1.6g 2.5大氣壓力的全氟正丁烷加到已冷卻到—5℃(低于全氟正丁烷的沸點(diǎn)(約—2℃))的0.4g全氟萘烷中。得到的油相組分與含Pluronic F68(1%W/W)和蔗糖(30%W/W)的40ml水溶液,在冷卻的密閉塑料容器中超聲乳化20分鐘。用顯微鏡觀察所制得的水包油乳狀液微滴的直徑大約是1微米;儲(chǔ)存一星期后無(wú)顯著變化。取部分乳狀液(5ml)置于15ml容器中,在800W微波爐中加熱至80℃(通常加熱時(shí)間為8—10秒),冷卻并過(guò)濾(Millipore,10μm)。顯微鏡觀察證實(shí)形成了具有全氟萘烷穩(wěn)定包殼的全氟正丁烷微泡。稀釋到總油含量為0.2%W/W的微泡分散體,其容器內(nèi)的超聲波衰減,在1—6MHz頻率范圍內(nèi)為大于10dB/cm,可穩(wěn)定10分鐘以上。準(zhǔn)備一個(gè)相同的試樣,只是乳狀液不預(yù)先加熱,在37℃下進(jìn)行容器內(nèi)超聲衰減試驗(yàn),在微泡自發(fā)地產(chǎn)生的7分鐘內(nèi)超聲衰減從2dB/cm增至6dB/cm。
權(quán)利要求
1.由生物相容的水包油型乳狀液構(gòu)成的超聲造影劑,其中油相包括油溶性氣體/流體或氣體前體。、
2.根據(jù)權(quán)利要求1的造影劑,其中氣體/流體是惰性氣體,必要時(shí)鹵化的或其它取代的烴,脂族或環(huán)醚、硅烷、胂或硫的鹵化物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的造影劑,其中氣體/流體是全氟烷烴。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的造影劑,其中氣體/流體選自氙、正戊烷、呋喃、四甲基硅烷、六氟化硫及全氟正丁烷。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的造影劑,其中氣體前體是有機(jī)碳酸鹽;吡唑啉、吡唑、三唑啉、重氮酮、重氮鹽、四唑、疊氮化物或疊氮化物/碳酸鹽混合物;可光解的環(huán)酮、內(nèi)酯或碳酸鹽;過(guò)酸;可熱降解的羧酸;酶可降解的亞甲基二酯或過(guò)氧化氫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任何一項(xiàng)的造影劑,其中乳狀液的油相主要包括凝聚的氣體/流體與任何必須的生物相容的乳化劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5任何一項(xiàng)的造影劑,其中乳化劑的油相主要包括溶解在至少一種親油溶劑組分中的氣體/流體或氣體前體與任何必須的生物相容的乳化劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的造影劑,其中親油溶劑組分選自脂族和脂環(huán)族全氟碳及其溴取代類似物,脂族和脂環(huán)族全氟胺、全氟醚及任何上述化合物的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的造影劑,其中親油溶劑組分是全氟溴代辛烷、全氟萘烷或全氟萘烷與全氟三丙基胺的混合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求6至9任何一項(xiàng)的造影劑,含一種或多于一種選自脂肪酸堿金屬鹽、烷基硫酸堿金屬鹽和磺化酯、聚氧乙烯—聚氧丙烯共聚物、脫水山梨醇脂肪酸酯及其聚氧乙基化類似物、磷脂、脂肪酸聚乙二醇酯、可聚合的兩親化合物以及多間隔泡囊狀表面活性劑系統(tǒng)的表面活性劑作為乳化劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求7至10任一項(xiàng)的造影劑,其中乳化劑也作為親油溶劑組分。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)的造影劑,其中乳狀液的油相含大豆油和蛋黃磷脂,水相含甘油和注射用水。
13.根據(jù)上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)造影劑,其中一種或多于一種生物相容的無(wú)機(jī)物微粒是懸浮在油相中的。
14.制備權(quán)利要求1所述超聲造影劑的方法,包括(i)將含凝聚的油溶性氣體/流體或溶于至少一種親油溶劑組分的油溶性氣體/流體或氣體前體的溶液在水相中乳化而形成水包油型乳狀液;或(ii)將所需的油溶性氣體/流體或氣體前體混合到已預(yù)先形成的水包油乳狀液的油相中。
15.增強(qiáng)人體或動(dòng)物軀體影象的方法,包括向所述軀體給予根據(jù)權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的造影劑并使至少部分所述軀體產(chǎn)生超聲影象。
全文摘要
用作超聲造影劑的水包油型乳狀液,其油相含有凝聚的或溶解的油溶性氣體/流體或氣體前體。這類產(chǎn)品在儲(chǔ)存形態(tài)含極其微量的游離氣泡或微泡,并有良好的儲(chǔ)存穩(wěn)定性,但可預(yù)期在給藥前或給藥時(shí)使其立即迅速地產(chǎn)生微泡。
文檔編號(hào)A61K49/22GK1121315SQ9419180
公開(kāi)日1996年4月24日 申請(qǐng)日期1994年3月16日 優(yōu)先權(quán)日1993年3月16日
發(fā)明者A·博格, H·杜斯塔德, P·A·佛斯, J·科拉沃尼斯, J·約思特森, P·龍威德, P·思特蘭德 申請(qǐng)人:奈科姆成像有限公司