專利名稱：抗變態(tài)反應(yīng)組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種變態(tài)反應(yīng)性疾病的治療和預(yù)防藥物。
近年來，例如花粉病和特應(yīng)性皮炎越來越常見，并且被認(rèn)為是一種免疫系統(tǒng)疾病。這種疾病的病因和發(fā)病機(jī)制至今還未能解釋，因此還未建立起任何徹底的有效的治療或預(yù)防方法。目前，只有對癥治療。
本發(fā)明的目的在于提供一種抗變態(tài)反應(yīng)藥，它能有效地徹底地治療和預(yù)防這種疾病。
近年來，免疫系統(tǒng)與其他器官間的關(guān)系已逐漸明了，愈來愈多的人認(rèn)為免疫系統(tǒng)與其他器官在功能上關(guān)系密切。例如已知免疫系統(tǒng)通過激素接受顱神經(jīng)系統(tǒng)的作用，在高度精神緊張條件下會(huì)降低天然殺傷細(xì)胞(NK)的活性(Matsuda，Hirano“NotoMeneki(theBrainandtheIumme)”，TAISHA(METABOLISM)，26，SpecialNo.45-61)，(R.Aderetal.，“InteractionsbetweentheBrainandtheImmuneSystem”，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.，30，561-602(1990))。進(jìn)一步講，派伊爾氏淋巴集結(jié)(Payerpatches)是經(jīng)由腸內(nèi)的抗原控制免疫系統(tǒng)組織，腸內(nèi)細(xì)菌叢和免疫系統(tǒng)兩者被認(rèn)為密切相關(guān)。
關(guān)于變態(tài)反應(yīng)(allergies)，考慮到它與其他器官和生活環(huán)境的關(guān)系已變得非常重要?；谶@種考慮，本發(fā)明人進(jìn)行了大量廣泛調(diào)查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)病的某些病因，例如特別是特應(yīng)性皮炎和花粉病的病因并不是很清楚，在許多情況下可能與精神系統(tǒng)的應(yīng)激和消化道內(nèi)存在的腸內(nèi)菌叢失調(diào)有關(guān)。可通過改善這些問題達(dá)到治療目的。也已發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)上用于調(diào)控腸功能的藥物不足以治療或預(yù)防變態(tài)的反應(yīng)，服用(即增加了菌株數(shù)量，也增加細(xì)胞數(shù)的)腸功能調(diào)控藥物能明顯地增強(qiáng)療效。這些發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致產(chǎn)生出本發(fā)明。
以下將詳細(xì)描述本發(fā)明。
多年來本發(fā)明人已檢查過許多變態(tài)反應(yīng)病人。經(jīng)Nodje's耳廓檢查方法(WrittenbyPurdiorandtranslatedunderthesupervisionofYukioKurosu“AuricularAcupuncture”-P.Nodje'sTheoryandclinics，publishedbyTheEnterpriseK.K.(1985);WrittenbyNodjeandtranslatedbyIkubiroFukuda“HandbookofAuricularReflexPoints”，publishedbyTheTaniguchishotenK.K(1989);andWrittenbyMingHangcho“ObeiJishinhonoRirontoRinsho”(TheoriesandClinicsofAuricularAcupunctureinEuropeandAmerica)，publishedbytheIdoNoNihomShaK.K(1979))。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)雖然病人中有許多沒有嚴(yán)重的主觀癥狀，他們的消化器官在開始時(shí)腸道出現(xiàn)異常。經(jīng)過問診，也發(fā)現(xiàn)他處于精神緊張狀態(tài)。本發(fā)明人已治療了各種疾病，這些疾病都是由于自主失調(diào)引起的，其治療方法是耳廓電治療法，并達(dá)到極好的治愈效果。對于變態(tài)反應(yīng)疾病，電療和向皮膚上施用抗感染藥物的聯(lián)合使用能達(dá)到一定程度的療效，但在許多情況下，治療時(shí)間長。
對那些患者的問診結(jié)果是，許多患者處于精神緊張狀態(tài)，或者有便秘，或者有便秘的傾向，或者相反有發(fā)展成腹瀉的傾向，特別是腹?jié)q或產(chǎn)氣，并帶有異常強(qiáng)烈的臭味。這些患者因此被認(rèn)為已發(fā)展成腸內(nèi)菌叢異常及腸道疾患。已知由于精神緊張的原因，腸內(nèi)菌叢和消化道上皮很容易產(chǎn)生問題和失調(diào)。
近年來，常常指出農(nóng)業(yè)化學(xué)品，抗生素，合成抗菌制劑等等大量地用于農(nóng)業(yè)、漁業(yè)、家畜領(lǐng)域并殘留在食物中。它們也成為引起腸內(nèi)菌叢問題的原因。因此在這種情況下，現(xiàn)代觀點(diǎn)認(rèn)為腸內(nèi)菌叢易于失調(diào)。人們相信這種腸內(nèi)菌叢失調(diào)和粘膜上皮的問題對免疫系統(tǒng)，精神系統(tǒng)，代謝系統(tǒng)等帶有毒害作用，結(jié)果產(chǎn)生各種問題，例如變態(tài)反應(yīng)疾病。
根據(jù)本發(fā)明，抗變態(tài)反應(yīng)藥物含有至少一種，優(yōu)選為多種的選自人消化道的代表性非病原菌，這種制劑每天服用以可見細(xì)胞計(jì)1011-1013細(xì)胞。這種抗變態(tài)反應(yīng)藥物能改善或保持腸內(nèi)細(xì)胞菌叢，當(dāng)它與一種抗感染藥和電療并用時(shí)，能表現(xiàn)出對變態(tài)反應(yīng)病的藥效。采用通常調(diào)控腸功能的藥物劑量，可見細(xì)胞計(jì)數(shù)少于上述可見細(xì)胞計(jì)數(shù)的百分之一或更少，它們的作用不足以達(dá)到。
細(xì)菌按照本發(fā)明，用于抗變態(tài)反應(yīng)腸內(nèi)菌叢改善劑的菌株包括糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)，屎腸球菌(Enterococcusfaecium)，durans種腸球菌(Enterococcusdurans)，禽腸球菌(Enterococcusavium)，唾液鏈球菌(Streptococcussalivarius)，牛鏈球菌(Streptococcusbovis)，馬腸鏈球菌(Streptococcusequinus)，嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)，產(chǎn)氣乳桿菌(Lactobacillusgaseri)，唾液乳桿菌(Lactobacillussalivarius)，酵母乳桿菌(Lactobacillusfermentum)，Lactobacillusreuteri，阿拉伯糖乳桿菌(Lactobacillusarabinosus)，短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)，長雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)，青春雙歧桿菌(Bifidobacteriumadolescentis)，幼兒雙岐桿菌(Bifidobacteriuminfantis)，和兩歧雙歧桿菌(Bifidobacteriumbifidum)。
本發(fā)明實(shí)施例中采用了的特殊菌株是糞腸球菌ATCC19433(EnterococcusfaecalisATCC19433)，屎腸球菌ATCC19434(EnterococcusfaeciumATCC19434)，durans種腸球菌IID677(EnterococcusduransIID677)，唾液鏈球菌IID5223(StreptococcussalivariusIID5223)，hirae種腸球菌ATCC8043(EnterococcushiraeATCC8043)，hirae種腸球菌ATCC9790(EnterococcushiraeATCC9790)，嗜酸乳桿菌ATCC4356(LactobacillusacidophilusATCC4356)，阿拉伯糖乳桿菌ATCC8014(LactobacillusarabinosusATCC8014)，酵母乳桿菌IAM1148(LactobacillusfermentumIAM1148)，酪乳桿菌ATCC393(LactobacilluscaseiATCC393)，長雙歧桿菌JCM1217(BifidobacteriumLongumJCM1217)，兩歧雙歧桿菌JCM1254(BifidobacteriumbifidumJCM1254)，短兩歧桿菌JCM1192(BifidobacteriumbreveJCM1192)，和酪酸梭狀芽胞桿菌ATCC6015(ClostridiumbutyricumATCC6015)。
在有空氣的條件下，采用Rogosa培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)所述的腸球菌，鏈球菌和乳酸桿菌。另一方面，在有空氣的條件下，采用GAM培養(yǎng)基(Nissui Pharmaceutical Co.Ltd的產(chǎn)品)37℃培養(yǎng)腸球菌，鏈球菌和乳酸桿菌細(xì)菌。每種培養(yǎng)基在高壓消毒鍋內(nèi)121℃滅菌15分鐘。將每個(gè)細(xì)菌株接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基內(nèi)，接種量為106/ml。菌株培養(yǎng)15小時(shí)后，12，000rpm離心該培養(yǎng)物收集細(xì)胞。收集到的細(xì)胞分散到培養(yǎng)物容積的20分之一的10%的脫脂乳中，隨后進(jìn)行凍干。在下列實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的每克凍干菌株含有約109-1012個(gè)細(xì)胞。
請注意，Rogosa培養(yǎng)基為1升水中含有胰蛋白酶解酪蛋白10g酵母抽提物5g胰化蛋白3gK2HPO43gKH2PO43g檸檬酸銨2g吐溫-801g葡萄糖20g半胱氨酸0.2g鹽溶液5ml鹽溶液為每1，000ml純水中含有MgSO4·7H2O 11.5gFeSO4·7H2O 0.68gMnSO4·ZH2O 2.4g
下列實(shí)驗(yàn)中的患者已接受過電療并且也同時(shí)使用一種抗炎藥膏(Shiunko)。Shiunko是一種傳統(tǒng)的日本藥膏，采用加熱芝麻油，蜂蠟，豬油和日本當(dāng)歸根(Japanesearigeliearoot)，再加入紫草根(lithospermunroot)，沸煮一或二次得到的混合物，然后過篩，得所述的油狀組合物而制得這種藥膏，按施用本發(fā)明下述的抗變態(tài)反應(yīng)組合物達(dá)到的療效比較僅用電療和抗炎藥膏(Shiunko)達(dá)到的療效，以及比較市售的腸功能調(diào)控抑菌劑，以所述的劑量口服后的療效，這些藥物為“Lebenin”(商標(biāo)NakamotoPharmaceuticalCO.ltd的產(chǎn)品)和“Biothree”(商標(biāo)ToaPharmaceuticalCo.Ltd的產(chǎn)品)。
實(shí)驗(yàn)例中所使用的菌株名稱及可見細(xì)胞計(jì)算見表1。
實(shí)驗(yàn)例1上述的菌株凍干細(xì)胞等重量混合，得一混合的凍干細(xì)胞粉。將混合凍干細(xì)胞粉裝入500mg大小的明膠膠囊，日服三次，每次一粒。
實(shí)驗(yàn)例2將混合后的凍干細(xì)胞粉加入1升的已冷凍過的市售牛奶中。將得到的混合物置于孵育器內(nèi)，40℃保持8-12小時(shí)。牛奶變成稍稍半固態(tài)。冷藏，日飲約500毫升。飲用時(shí)，可將糖，天冬酰苯丙氨酸甲酯(Aspartame)，低聚糖或其他甜味劑，果醬，水果和/或其類似物加入所述的半固態(tài)牛奶。
實(shí)驗(yàn)例3將hirae種腸球菌ATCC9790(EnterococcushiraeATCC9790)的凍干細(xì)胞裝入500mg大小的明膠膠囊，日服三次，每次一粒。
實(shí)驗(yàn)例4將嗜酸乳桿菌ATCC4356(LactobacillusacidophilusATCC4356)的凍干細(xì)胞裝入500mg大小的明膠膠囊，日服三次，每次一粒。
實(shí)驗(yàn)例5將長雙歧桿菌JCM1217(BifidobacteriumlongumJCM1217)的凍干細(xì)胞裝入500mg大小的明膠膠囊，日服三次，每次一粒。
實(shí)驗(yàn)例6每個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行3個(gè)月。凍干細(xì)胞或者裝有凍干細(xì)胞的膠囊在4℃或更低的溫度下密封的瓶中保藏。
其結(jié)果匯總在表2中。本發(fā)明之抗變態(tài)反應(yīng)組合物的優(yōu)點(diǎn)十分清楚可見。多種菌株的并用發(fā)現(xiàn)比單一使用具有更高效的作用。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)，如上所述，本發(fā)明之抗變態(tài)反應(yīng)藥對特應(yīng)性皮炎等具有明顯效果。
表1實(shí)驗(yàn)例中所使用的菌株名稱及可見細(xì)胞計(jì)算細(xì)菌名稱平板計(jì)數(shù)(細(xì)胞/g)糞腸球菌(Enterococcusfaecalis) ATCC 19433 1011.6屎腸球菌(Enterococcusfaecium) ATCC 19434 1011.9durans種腸球菌(Enterococcusdurans)IID 667 1011.7hirae種腸球菌(Enterococcushirae)ATCC 8043 1011.6hirae種腸球菌(Enterococcushirae)ATCC 9790 1011.7唾液鏈球菌(Streptococcussalivarius)IID 5223 1012嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)ATCC 4356 1010.7
(續(xù)表1)細(xì)菌名稱平板計(jì)數(shù)(細(xì)胞/g)阿拉伯糖乳桿菌(Lactobac-illus arabinosus)ATCC 8014 109酵母乳桿菌(Lactobacillusfermentum)IAM 1148 109.7酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)ATCC 393 1010.3青春雙歧桿菌(Bifidobac-terium adolesentis)ATCC 15705 109長雙歧桿菌(Bifidob-acterium longum)JCM 1217 109.3兩歧雙歧桿菌(Bifidoba-cterium bifidum)JCM 1254 109.7短雙歧桿菌(Bifidobact-erium breve)JCM 1192 109酪酸梭狀芽胞桿菌(Clostridumbutyricum)ATCC 6015 1010.3
表2對于特應(yīng)性皮炎病人治療的效果 (表中每個(gè)數(shù)字表示病例數(shù))A組電療+使用ShiunkoB組電療+使用Shiunko+服用市售的腸功能調(diào)控可見細(xì)胞藥物。
C組電療+使用Shiunko+服用市售的腸功能調(diào)控可見細(xì)胞藥物(Biothree)D組實(shí)驗(yàn)例1F組實(shí)驗(yàn)例3E組實(shí)驗(yàn)例2G組實(shí)驗(yàn)例4H組實(shí)驗(yàn)例5明顯有效皮膚無角化，紅斑顏色轉(zhuǎn)為正常，或接近于正常，搔癢基本消失?；蚋腥酒つw區(qū)域減少約50%或更多。
有效
角化減輕，紅斑顏色明顯變淺。或感染皮膚區(qū)域減少約20%或更多。
無效實(shí)際上無改善，或即使是改善也只是十分有限。
權(quán)利要求
1.一種抗變態(tài)反應(yīng)藥物，包括至少一種屬于鏈球菌屬，腸球菌屬，雙歧桿菌屬，乳桿菌屬和梭狀芽胞桿菌屬細(xì)菌的做為有效成分的可見細(xì)胞。
2.一種抗變態(tài)反應(yīng)藥物，包括一種在可食用的培養(yǎng)基中對如權(quán)利要求1所述的至少一種可見細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)得到的培養(yǎng)物做為其有效成分。
全文摘要
本發(fā)明提供一種安全有效地治療和預(yù)防如特應(yīng)性皮炎和花粉病等變態(tài)反應(yīng)疾病的組合物。該組合物包括至少一種屬于鏈球菌，腸球菌，雙歧桿菌，乳桿菌和梭狀芽胞桿菌屬的細(xì)菌，或者在可食用培養(yǎng)基中培養(yǎng)至少一種所述的細(xì)菌而得到的可食用的培養(yǎng)物。
文檔編號(hào)A61K35/74GK1110147SQ9410396
公開日1995年10月18日 申請日期1994年4月9日 優(yōu)先權(quán)日1994年4月9日
發(fā)明者山田武敏, 石原一興 申請人:山田武敏, 石原一興