專(zhuān)利名稱(chēng)：用紅景天提取物制備一種治療貧血及促白細(xì)胞增生的藥物的制作方法
用紅景天提取物制備一種治療貧血及促白細(xì)胞增生的藥物本發(fā)明涉及一種藥物制品，該制品可用于治療貧血并有促白細(xì)胞增升作用。該制品是由紅景天提取物和藥物可接受的載體組成的。
紅景天為一種藏族常用的中草藥，屬景天科紅景天屬植物，其藥用部位是根和莖，經(jīng)提取后的提取物可以用來(lái)治療肺炎咳嗽，咳血咯血，婦女白帶，外用治療跌打損傷，燙火燒傷。(引自《西藏常用中草藥》第74頁(yè))近年研究表明紅景天有強(qiáng)壯，抗缺氧，抗寒冷抗疲勞，抗微波輻射及興奮人的大腦和脊髓作用。(《高原醫(yī)學(xué)雜志》1984(2)37《國(guó)外醫(yī)學(xué)》中醫(yī)中藥分冊(cè)1979(3)142)可以提高體力和腦力勞動(dòng)的工作效率，延緩機(jī)體衰老，防治老年疾病等功能。用紅景天的根和莖制備的中藥成藥也已在市場(chǎng)出現(xiàn)，其作用和功效均如上述所述，貧血為一種由失血，造血機(jī)能障礙或溶血引起的外周血紅細(xì)胞或血紅蛋白數(shù)低于正常值并伴隨各種臨床癥狀的疾病。臨床上對(duì)該病的治療有多種方式，較常用的有用促進(jìn)造血機(jī)能的藥物治療，用補(bǔ)充血液成分的藥物治療等。
白細(xì)胞減少癥是由各種物理和化學(xué)因素(如放療，化療)對(duì)骨髓造血機(jī)能的破壞引起的血中白細(xì)胞數(shù)低于正常值并伴有臨床癥狀的疾病。對(duì)此病的治療目前多用病因療法和使用刺激白細(xì)胞增生的藥物。
本發(fā)明在于發(fā)現(xiàn)了紅景天根和莖的提取物有促進(jìn)骨髓造血功能的作用，可用該提取物制備一種治療由造血機(jī)能障礙引起的貧血和白細(xì)胞數(shù)降低的藥物。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了紅景天提取物對(duì)造血系統(tǒng)CFU-GM，CFU-E，BFU-E均有明顯的提高作用，對(duì)由輻射或化學(xué)物質(zhì)所致外周血細(xì)胞數(shù)降低有明顯的改善作用以及對(duì)再生障礙性貧血有治療作用，而且，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)紅景天提取物在增加造血祖細(xì)胞數(shù)及外周血細(xì)胞數(shù)的一些指標(biāo)上優(yōu)于常用中藥制品再障生血片。
紅景天提取物的制備方法如下所述1，藥材預(yù)處理
新鮮生藥去除枝葉，取根莖，去泥土，粉碎，晾干備用。
2，取處理好的生藥，加入6倍量的70%乙醇，浸泡過(guò)夜，加熱回流1小時(shí)，趁熱過(guò)濾。儲(chǔ)存好醇液，將藥渣加入4倍量的70%乙醇加熱回流1小時(shí)趁熱過(guò)濾，存好醇液將藥渣加入4倍量的70%乙醇加熱回流1小時(shí)趁熱過(guò)濾。用擠壓機(jī)擠盡醇液，合并上述醇液，經(jīng)減壓蒸餾，真空干燥得醇提干浸膏。此干浸膏即為紅景天提取物。(提取物與生藥量之比為1∶4，即4份量紅景天生藥經(jīng)提取可得1份量的紅景天提取物)。
以下為紅景天提取物對(duì)造血系統(tǒng)作用的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上海種小鼠，雌雄均有，體重18-22g藥物紅景天提取物，用水配成混懸液。
實(shí)驗(yàn)一紅景天提取物對(duì)正常小鼠造血功能的作用實(shí)驗(yàn)方法取小鼠20只隨機(jī)分為兩組，每組10只，組別為紅景天提取物組，生理鹽水對(duì)照組。給藥前先測(cè)定小鼠外周血紅細(xì)胞數(shù)，白細(xì)胞數(shù)，血小板數(shù)，隨后灌胃給藥七天，給藥量為2mg/0.2ml/只，第八天測(cè)外周血的血象，另作CFU-GM，CFU-E，BFU-E細(xì)胞培養(yǎng)。
CFU-GM，CFU-E，BFU-E細(xì)胞培養(yǎng)方法如下原理成熟的血細(xì)胞是由造血祖細(xì)胞轉(zhuǎn)化來(lái)的，造血祖細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下能形成可辯認(rèn)的各系細(xì)胞，其中主要為紅系祖細(xì)胞(BFU-E，CFU-E)粒-巨噬系祖細(xì)胞(CFU-GM)，在這些細(xì)胞增多時(shí)表明骨髓造血功能增強(qiáng)。
培養(yǎng)方法無(wú)菌條件下取小鼠股骨，用1640培養(yǎng)液沖出骨髓，制成單細(xì)胞懸液備用。
1，粒-巨系培養(yǎng)用PRMI1640培養(yǎng)液4ml。馬血清2ml，肌浸液0.8ml，小鼠骨髓細(xì)胞為1*105個(gè)有核細(xì)胞/ml，最后加入5%瓊脂0.4ml，混勻后在每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)加入1ml，置于37℃，飽和濕度的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，六天后觀察細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果。
2,紅系培養(yǎng)用MECOY’S 5A培養(yǎng)液，二巰基乙醇10-40.2ml，3%L-谷氨酰胺0.03ml，馬血清0.5ml，EPO0.2ml，BPA0.1ml，有核細(xì)胞數(shù)0.5*105/0.2ml，2.7%甲基纖維素0.7ml，混勻后在每個(gè)培養(yǎng)板小孔內(nèi)種入0.2ml，置于37℃，飽和濕度的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。分別于第三天和第七天觀察BFU-E，CFU-E的結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下對(duì)外周血血液成分的影響組別給藥前RBC(萬(wàn)/mm3) WBC(萬(wàn)/mm3) PT(萬(wàn)/mm3)對(duì)照組874±90.212900±109029.8±1.4紅景天組827±9611410±46028.2±1.9給藥后RBC(萬(wàn)/mm3) WBC(萬(wàn)/mm3) PT(萬(wàn)/mm3)對(duì)照組909.2±72.712520±65029.2±0.7紅景天組1062±81.814430±91037.5±1.2對(duì)骨髓造血功能的影響組別 CFU-E.(個(gè)/105) BFU-E(個(gè)/105) CFU-GM(個(gè)/105)對(duì)照組60.3±4.149.3±3.5112.5±5.4紅景天組88±3.561.7±7.4180.5±3.7在一項(xiàng)紅景天提取物和再障生血片對(duì)CFU-E和CFU-GM的影響的對(duì)照實(shí)驗(yàn)中可看到如下結(jié)果此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)一相同，再障生血片的給藥量與紅景天提取物一樣。
組別 CFU-E(個(gè)/105) CFU-GM(個(gè)/105)生理對(duì)照組60.3±4.1112.5±5.4紅景天組88.0±3.5180.5±3.7再障生血片組74.3±2.8160.7±7.7
實(shí)驗(yàn)二紅景天提取物對(duì)Co60γ-射線照射小鼠的造血功能的作用實(shí)驗(yàn)方法取小鼠30只，隨機(jī)分為三組，每組10只，分別為生理鹽水組，生理鹽水照射組，紅景天組。給藥前測(cè)外周血象，隨后給藥組腹腔注射給以紅景天提取物4mg/0.2ml/支，其余各組給以生理鹽水，隨之照射Co60γ-射線，照射劑量為350rad，時(shí)間為2小時(shí)23分9秒，照射后第三天再分別給藥一次，第六天測(cè)外周血白細(xì)胞，第七天稱(chēng)體重后處死小鼠，取脾稱(chēng)重，取股骨作CFU-GM，CFU-E，BFU-E細(xì)胞培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下對(duì)照射小鼠脾重的影響組別脾重(g)對(duì)照組159.8±15.1照射對(duì)照組55.9±9.4紅景天組117.1±13.2脾臟為重要的造血器官，放射線照射后導(dǎo)致造血功能低下使脾臟重量降低，紅景天提取物可明顯對(duì)抗放射線照射后引起的脾重降低。
對(duì)小鼠外周血白細(xì)胞的影響組別外周血白細(xì)胞(個(gè)/mm3)對(duì)照組19770±22.9照射對(duì)照組8860±9.3紅景天組20600±16.8對(duì)小鼠股骨造血祖細(xì)胞的影響:
組別 CFU-GM(個(gè)/105) CFU-E(個(gè)/105) BFU-E(個(gè)/105)對(duì)照組138±4.9117.3±7.970.0±3.5照射對(duì)照組26.4±2.940.2±2.016.7±2.6紅景天組74±6.9102.6±8.957.2±3.1
實(shí)驗(yàn)三紅景天提取物對(duì)環(huán)磷酰胺所致造血功能障礙的作用實(shí)驗(yàn)方法取小鼠20只，分為兩組，每組10只，分別為環(huán)磷酰胺+生理鹽水組，環(huán)磷酰胺+紅景天組，領(lǐng)取小鼠后三天，測(cè)各組小鼠的外周血的白細(xì)胞，紅細(xì)胞，血小板數(shù)，然后腹腔注射環(huán)磷酰胺5mg/0.2ml/只，次日開(kāi)始灌胃給藥，劑量為2mg/0.2ml/只，連續(xù)七天，每天一次，第八天測(cè)小鼠外周血血象并作CFU-GM，CFU-E，BFU-E細(xì)胞培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下對(duì)小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響組別給藥前WBC(個(gè)/mm3) RBC(萬(wàn)/mm3) PT(萬(wàn)/mm3)環(huán)磷酰胺+10320±1170878.3±57.230.9±1.8生理鹽水環(huán)磷酰胺+12910±880703.5±61.534.1±2.5紅景天給藥后WBC(個(gè)/mm3) RBC(萬(wàn)/mm3) PT(萬(wàn)/mm3)環(huán)磷酰胺+8770±670794.8±54.524.7±2.3生理鹽水環(huán)磷酰胺+20090±1650934.7±29.238.1±3.9紅景天對(duì)小鼠股骨造血祖細(xì)胞的影響組別 CFU-GM(個(gè)/105) CFU-E(個(gè)/105) BFU-E(個(gè)/105)環(huán)磷酰胺+64.2±7.929.3±3.717.3±1.7生理鹽水環(huán)磷酰胺+103.0±3.485.0±5.651.7±2.6紅景天在一項(xiàng)紅景天提取物和再障生血片的對(duì)照實(shí)驗(yàn)中可看到如下結(jié)果此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)三相同，再障生血片的給藥量與紅景天一樣。
對(duì)白細(xì)胞的作用組別給藥前WBC(個(gè)/mm3) 給藥后WBC(個(gè)/mm3)環(huán)磷酰胺+10320±11708770±670生理鹽水環(huán)磷酰胺+12910±88020090±1650紅景天環(huán)磷酰胺+11970±92013400±340再障生血片對(duì)CFU-GM的作用組別 CFU-GM(個(gè)/105)環(huán)磷酰胺+64.2±7.9生理鹽水環(huán)磷酰胺+103.0±3.4紅景天環(huán)磷酰胺+84.5±6.7再障生血片人體實(shí)驗(yàn)以下是一項(xiàng)服用紅景天提取物制成的藥物使人血紅蛋白濃度提高的實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果如下受試對(duì)象長(zhǎng)跑運(yùn)動(dòng)員，人數(shù)12名，男7名，女5名實(shí)驗(yàn)分兩組，分別為服藥組和對(duì)照組，其中服藥組7人，對(duì)照組5人服藥時(shí)間連續(xù)服藥5周劑量每天服用一粒膠囊，每粒膠囊含紅景天提取物280mg
血紅蛋白的測(cè)定取指血20微升，用高鐵氰化鉀法進(jìn)行比色測(cè)定。
結(jié)果組別服藥前服藥后第四周服藥后第五周g%g%g%試驗(yàn)組13.5±0.7514.5±0.6814.6±0.67對(duì)照組13.8±0.9713.5±0.7313.4±0.74服藥后兩組間有顯著差異。
以下是用紅景天提取物膠囊治療再生障礙性貧血的臨床資料病例4例，其中男性3例，女性1例，均為慢性再生障礙性貧血病人年齡12-59歲病程1-4.5年，服藥方法每天服用9粒膠囊，分三次服用，每粒膠囊含紅景天提取物280mg，連續(xù)服藥8周。
診斷和判斷標(biāo)準(zhǔn)按1987年全國(guó)再生障礙性貧血會(huì)議修訂的標(biāo)準(zhǔn)。
治療結(jié)果如下病例HbWBCBPC骨髓象(增生程度)(g/l) (109/l) (109/l)治療前治療后治療前治療后治療前治療后治療前治療后1621253.74.63597減低正常2581212.94.53182減低正常323671.12.36958減低正常4471281.53.82738減低正常另外第3例和第4例病人治療后的網(wǎng)織紅細(xì)胞和骨髓巨核細(xì)胞在數(shù)量上均有明顯的上升。以上病例經(jīng)療效評(píng)價(jià)第1例和第2例病人為基本治愈，第3例和第4例病人為明顯進(jìn)步。
以下為用紅景天提取物制備藥物制品的實(shí)施例膠囊劑:紅景天提取物280mg
將上述提取物粉碎過(guò)篩后按規(guī)定量填充膠囊即得。
片劑:紅景天提取物300mg淀粉100mg硬酯酸鎂8mg將上述組份混合制成顆粒后壓片即得。
口服糖漿劑:紅景天提取物300mg蔗糖200mg50%乙醇1ml檸檬酸5mg苯甲酸鈉3mg水加至10ml將上述組分加入水中調(diào)至所需量,混勻后裝瓶即可。
顆粒劑:紅景天提取物300mg蔗糖500mg橘子香精10mg食用色素適量將上述組分混合后制成顆粒，包裝。
本發(fā)明涉及的紅景天提取物的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下雌性小鼠的口服LD50在10.39g/kg以上，雄性小鼠的口服LD50在9.93g/kg以上，雌性小鼠腹腔注射LD50為4.55g/kg，雄性小鼠腹腔注射LD50為4.23g/kg。
從以上實(shí)驗(yàn)可以看出，紅景天提取物有提高骨髓造血功能的作用，可使外周血細(xì)胞數(shù)低下者的血象恢復(fù)正常，其作用在一些指標(biāo)上優(yōu)于常用中藥制品再障生血片。紅景天膠囊有治療再生障礙性貧血的作用并有較低的毒性，由以上結(jié)果可知用紅景天提取物制備的藥物能夠治療貧血并能夠促進(jìn)白細(xì)胞增生。
權(quán)利要求
1.用紅景天提取物制備一種治療貧血及促白細(xì)胞增生的藥物，所述的紅景天提取物由下述方法制備將紅景天的根和莖用溶劑提取一至數(shù)次，提取液經(jīng)過(guò)蒸發(fā)，濃縮，得到浸膏，該浸膏即紅景天提取物。所述的溶劑是水，乙醇，乙醚，乙酸乙酯，丙酮。
2.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥是作為口服應(yīng)用的。
3.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥為口服液。
4.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥為片劑。
5.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥為膠囊劑。
6.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥為顆粒劑。
7.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥能治療因化療或放療導(dǎo)致的人血中紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板數(shù)量下降引起的疾病。
8.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥有刺激骨髓造血功能的作用。
9.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥可使人血中低于正常值的紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板數(shù)量恢復(fù)到正常。
10.按權(quán)力要求1所述的藥物，其特征在于該藥可使骨髓造血功能低下病人的骨髓造血功能恢復(fù)正常。
全文摘要
本發(fā)明涉及用紅景天提取物制備一種治療由造血機(jī)能障礙引起的貧血和白細(xì)胞下降的藥物，用紅景天提取物制備的藥物通常用來(lái)治療肺炎咳嗽，咳血咯血，婦女白帶，跌打損傷，燙火燒傷，以及抗疲勞抗缺氧等，并有滋補(bǔ)強(qiáng)壯作用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了紅景天提取物有抗貧血和促白細(xì)胞增升作用，可用于防治由輻射或化療引起的造血機(jī)能障礙引起的疾病，從而增加了該藥物的適應(yīng)癥。
文檔編號(hào)A61P7/06GK1101847SQ93118728
公開(kāi)日1995年4月26日 申請(qǐng)日期1993年10月21日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月21日
發(fā)明者高月, 劉秀珍, 葛忠良 申請(qǐng)人:軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所