專利名稱：非腸道使用的穩(wěn)定組份及其制備方法
美國專利U.S.No.4，837，381披露了一種適宜于非腸道使用的、由脂肪或蠟或其混合物和生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽組成的微球狀組份。該專利披露了在非腸道使用中組份緩慢釋放出蛋白質(zhì)、肽或多肽的應(yīng)用，還披露了數(shù)量在被處理動物的血液中得以用較長的時間提高和維持生長激素增量級的方法，由于該發(fā)明的組份的使用，從而增加了哺乳動物的產(chǎn)奶量和動物的重量收益率。
在開發(fā)能持久釋放出含生物活性大分子藥用的組份中，產(chǎn)生一些專門問題，問題起因于大分子的大小和復(fù)雜性，尤其是蛋白質(zhì)和制藥用的賦形劑混和時，對加工和貯存時的化學變化和結(jié)構(gòu)變化甚為敏感。這些問題為現(xiàn)有技術(shù)的制藥配方的熟練人員所周知，可歸結(jié)為化學穩(wěn)定性問題。由大分子的結(jié)構(gòu)的不可逆變化導致的不合適的制藥組份的化學穩(wěn)定性以及其與賦形劑的相互作用可能使得組份失活或使組份不能提供出所需要的生物響應(yīng)的數(shù)量。
制藥配方中的另一類問題是物理穩(wěn)定性。一個明顯的例子是在加工、包裝或貯存時片劑的損耗或注入時的損耗。另一個例子是乳油、糊或凝膠物理性分離而成為各個成分，這將導致活性成份的不均勻分布和稠度變化。配方中的物理性變質(zhì)的結(jié)果將使易于使用的特點蕩然無存，對病人用藥劑量也無法指明。在制藥配方中不太明顯的物理變化還包括賦形劑的結(jié)晶或顯微組織的各種變化。這類變化將導致活性物質(zhì)釋放時的明顯改變。應(yīng)予指出的是，藥用劑量在物理穩(wěn)定性上的改變既可在口服時形成也可在非腸道使用時形成，而最有問題的乃是配料的持久釋放。持久釋放出活性的藥用劑量在商業(yè)上是至關(guān)緊要的，這些藥用劑量在整個批量生產(chǎn)和經(jīng)長時間的存放后仍保持著釋放特性。藥用劑量的物理穩(wěn)定性是用來說明加工性能，例如硬度、流動性、或粘度的恒定性以及藥理功能的恒定性。
本發(fā)明的一個目的是為非腸道使用提供各種穩(wěn)定的組份，本發(fā)明的另一個目的乃是提供制備這些穩(wěn)定組份的新穎方法。還有一個目的是提供一種微球狀組份，它能作為隨時可以用配方加以包裝，具有良好存貯性，通過對本發(fā)明的說明將使這些目的清晰起來。
本發(fā)明關(guān)于非腸道使用的意想不到的穩(wěn)定的微球狀組份，按重量計，本組份含約30%至95%脂肪、蠟或其混合物，約2%到70%生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽，以及約1%至30%油、半軟脂肪、脂肪酸衍生物或其混合物。
本發(fā)明還關(guān)于在環(huán)境溫度中制備高穩(wěn)定組份的方法。使人吃驚的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在造粒之前，將少量油、半軟脂肪和/或脂肪酸衍生物加入到脂肪和/或蠟以及生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽的混合物中將加速從α晶體結(jié)構(gòu)到β晶體結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變。因為β晶體穩(wěn)定得多，因此本發(fā)明的組份顯示出穩(wěn)定性有所增加。令人尤為驚訝的是，本發(fā)明認為，在現(xiàn)有技術(shù)的組份中作為賦形劑使用的某些油，在造粒后，并不能導致晶體轉(zhuǎn)變的加速。
對推薦實施例的說明本組份適用于動物的非腸道使用。生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽包括生長激素、生長調(diào)節(jié)素，生長因子，和其它的生物活性生成物或其衍生物。
本發(fā)明還提供了一種微球狀組份，它能夠作為即用配方來包裝，由于穩(wěn)定性增加而具有良好的貯存能力。
本發(fā)明組份中使用的蠟或脂肪一般其熔點高于40℃。本發(fā)明中的蠟可以是Hawley's The Condensed Chemical Dictionary(簡明化學辭典)第十一版中提出的蠟，是低熔點的有機混合物或是高分子量的化合物，在室溫下是固體，除了不含甘油酯外，在組成上類似脂肪或油類。其中一些是烴，另一些是脂肪酸酯和醇酯。這些化合物包括飽和和不飽和的長鏈C10-C24脂肪酸、醇，酯，鹽，醚或其混合物。它們按類酯來分類。蠟是熱塑性的，但它們不是高聚物，因此它們不歸入塑料類。共性是防水性、光滑的質(zhì)地、無毒，無令人不悅氣味和顏色。它們是可燃的，有良好介電特性。它們?nèi)芙庠诖蠖鄶?shù)有機溶劑中，不溶于水。主要種類如下Ⅰ天然1.動物蠟(蜂蠟、羊毛脂蠟、紫膠蠟、中國蠟)2.食物蠟(巴西棕櫚蠟、小燭樹蠟、月桂子蠟、甘蔗蠟)3.礦物蠟(a)化合蠟或地蠟(地蠟、純地蠟，褐煤蠟)(b)石油蠟(石蠟，微晶蠟)(疏松石蠟或鱗狀蠟)Ⅱ合成蠟1.乙烯聚合物和多醇醚酯(聚乙二醇，山梨醇)2.氯化萘(鹵蠟(β氯代萘))3.經(jīng)Ficher-Tropsch合成的烴類蠟本發(fā)明的脂肪可以是Hawley's的簡明化學辭典，第十一版中提出的，是較高脂肪酸，例如硬脂酸和棕櫚酸的甘油酯。這些酯和其混合物在室溫下是固體，顯示晶體結(jié)構(gòu)。豬脂和牛脂是其例子。在脂肪和油之間沒有化學差別，唯一區(qū)別是室溫下脂肪是固體，油是液體。術(shù)語“脂”(fat)通常是特指三酸甘油酯，而“類脂”(lipid)卻包括所有酯。
脂最好是長鏈C10-C24脂肪酸的單、雙、或三甘油酯。單酸、雙酸或三酸甘油酯極大部分是由硬脂酸酯、棕櫚酸酯、月桂酸酯，亞油酸酯、亞麻酸酯、油酸酯和其殘余物或混合物所構(gòu)成，最好熔點大于50℃。三硬脂酸甘油酯是最值得推崇的脂。此外，脂肪酸的親脂鹽，例如硬酯酸鎂及其類似物也都適用。
本發(fā)明中的油、半軟脂肪或脂肪酸衍生物都是一些能溶解在熔化硬脂中的介質(zhì)，當溶化硬脂或蠟被造粒后，在室溫或接近室溫下，它能夠使硬脂晶體及一種不大穩(wěn)定的狀態(tài)到更穩(wěn)定的狀態(tài)的物理轉(zhuǎn)變得以加速。油或半軟脂最好包括短鏈到中鏈長度脂肪酸，例C2至C18的單、雙或三甘油酯的混合物或較純的構(gòu)成。半軟脂指的是熔點在室溫或近室溫的甘油酯。脂肪酸衍生物包括短鏈到中鏈長的脂肪酸、醇、酯、醚、鹽或其混合物。因為，甘醇油和半硬脂是軀體生理組分以及其生物相容性和生物降解性之故而更為適用。
本發(fā)明的微球體是分散在制藥和藥理上可接受的液體中，以獲得一種非腸道使用的可緩慢釋出的組份，賦形劑可以是水緩沖系統(tǒng)或油系統(tǒng)。油系統(tǒng)可以是動物油或植物油的衍生物或經(jīng)合成制得。賦形劑最好包括中性的單酸、雙酸或三酸甘油酯液體或其混合物。中性油是不含殘留酸的油。適宜于本發(fā)明組份中使用的賦形劑包括含水系統(tǒng)，(例如緩沖鹽水)、有機溶劑(如甘醇和醇類)以及和水不混溶的液體(例如油)，具體使用哪一種取決于使用的活性成份的溶解度。
適宜于本發(fā)明組份中使用的生物活性的蛋白質(zhì)，肽和多肽包括生長激素、生長調(diào)節(jié)素、生長因子、和其它的生物活性生成物及其衍生物。推薦的蛋白質(zhì)包括牛、羊、馬、豬、雞和人的生長激素，而蛋白質(zhì)意指包括天然、合成、重組體或生物合成不源的蛋白質(zhì)。此外，與生物活性蛋白質(zhì)、肽和多肽締合的金屬或金屬化合物，以及酸鹽、衍生物和配合物以及防水合劑等都適于并用在本發(fā)明的組份中。
穩(wěn)定劑、防腐劑、表面活性劑、鹽、緩沖劑或其混合物都可有選擇地包括在本發(fā)明的組份中。推薦的穩(wěn)定劑包括脫氫乙酸、N-水楊酰苯胺、山梨酸、硼酸、苯甲酸、和其鹽類;亞硝酸鈉和硝酸鈉。根據(jù)需要，適于用在本發(fā)明中的所述物質(zhì)的量，按重量計，應(yīng)在0.1%至20%的范圍。
用在本發(fā)明的組份中所推薦的表面活性劑含有生物活性大分子，且在性質(zhì)上是非離子型表面活性劑，例如聚氧乙烯單油酸山梨醇酯(20克分子乙氧基化)，和環(huán)氧乙烷以及環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物。適宜于在本發(fā)明中使用的表面活性劑的量，按重量計，約為0.1%至10.0%。
獨特的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，可以獲得生長激素在血液中漸增的含量并使之長期保持下去，由此可通過對哺乳動物注射本發(fā)明中含有適當賦形劑的組份而提高哺乳動物的重量收益率和產(chǎn)奶量。血液中生物活性蛋白質(zhì)、肽和多肽含量的提高一般可以收益的效果和/或治療效果的結(jié)合而觀察到。這些效果包括哺乳動物的重量收益率，生長率提高，奶產(chǎn)量增加，聯(lián)系到培育被處理動物的后代而獲得的增產(chǎn)奶量，增加了肌肉的大小，提高了飼料效率，降低了軀體脂肪，提高了瘦肉脂肪比。將血液中含量的提高保持下去則表明活性成份在慢慢的釋放。例如奶產(chǎn)量提高，增長率提高，飼料效率提高和瘦肉率的提高的特性，一般都是由于保持在血液提高了的活性成份而觀察到的。本發(fā)明包括了組份的應(yīng)用，由于增加和保持了動物血液中激素的含量而提高了產(chǎn)奶量，提高了增長率，提高了飼料效率和提高了瘦肉率。
本發(fā)明的實施例包括了生物活性的蛋白質(zhì)、肽和多肽摻雜在脂或蠟微球體中，而經(jīng)選用的油或半軟脂也含有上面提到的賦形劑的部分或全部，然后將它們都分散在賦形劑中。微球體，最好是脂微球體，直徑在1000微米以內(nèi)，重體平均尺寸范圍是25至300微米，將這種大小的微球體用在非腸道使用的配方中，含70%以內(nèi)的生物活性的蛋白質(zhì)、肽和多肽的微球體根據(jù)活性成份的溶解度和蠟或脂，表面活性劑，緩沖劑和所使用的賦形劑的性質(zhì)而在各個時間段內(nèi)顯示出其持久的釋放能力。
廣義地講，本發(fā)明涉及緩慢釋放的組份，組份由脂或蠟或其混合物，生物活性蛋白質(zhì)、肽或多肽藥物以及油、半軟脂、脂肪酸衍生物或其混合物(都分散在制藥和藥理可接受的賦形劑中)等加以混合所構(gòu)成。微球體和涂復(fù)的蛋白質(zhì)粒子可以存在于緩慢釋放的組份中。組份可以是溶解在脂或蠟的蛋白質(zhì)，也可以是活性成份對脂或蠟的疏水相互作用或鍵合到脂或蠟上。為使用激素，組份含有按重量計，約1%至70%生長激素，生長調(diào)節(jié)素，生長因子或生物活性生成物或其衍生物，其重體平均粒度最好小于20微米;約5%至60%最好是10%至48%的脂、蠟或其混合物;約1%到30%最好是5%到20%油;任選的賦形劑約15%，例如表面活性劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、鹽或緩沖劑或其混合物，并含有足夠量的制藥和藥理可接受的液體賦形劑，總量為100%。賦形劑又是上面提到的水性緩沖系統(tǒng)或油系統(tǒng)。
為了生長激素，(例如牛生長激素)的非腸道使用，按重量計，微球體含5%至40%固體激素，其重體平均粒徑最好小于20微米，含有上面提到的約20%其它賦形劑，賦形劑在約40%至95%脂或蠟或其混合物中;其重體平均粒徑為25至300微米，這樣的微球體使激素持久的釋放出來并使奶牛的產(chǎn)奶量增加到約2周。這些推薦的組份顯現(xiàn)出奶產(chǎn)量有所增加，增加的奶量可與每天注射牛生長激素所增加的量相匹敵。
為了使用含有水溶性蛋白質(zhì)、肽或多肽的組份，例如牛生長激素，較好的是用和水不混溶液體，最好是用油或液脂以及和水不混溶的醇和甘醇及其混合物。所選的賦形劑要能夠?qū)⑽⑶蝮w混合物分散開來并加以涂復(fù)，還能夠提供可接受的注射混合物的粘度，利用HLB值(親水親油平衡值)和粘度值作為選用的標準。
根據(jù)這一點，在環(huán)境溫度下呈液體的脂肪酸甘油酯包括合成油;植物油，(例如橄欖油、麻油、花生油、葵花油、豆油、棉仔油、玉米油、紅花油、棕櫚油、菜油和椰子油);動物油(如魚油、魚肝油、鯨油);或其衍生物及其混合物，其HLB值的范圍1至5，粘度的范圍為10至1000厘泊，粘度用Brookfield粘度儀RTV＃1錠加以測定，找到本發(fā)明的組份中使用的賦形劑。
本發(fā)明的微球體系將具有符合粒度要求的活性成份和其它賦形劑與熔脂、蠟或其混合物加以摻合，再與油、半軟脂和/或脂肪酸衍生物加以混合，再將形成的混合物用各種辦法，例將混合物乳化或霧化(或造粒)后形成球體，或?qū)⒏鹘M份和熔脂，蠟或其混合物加以混合，進行機械加工和利用離心盤加以冷卻后形成微球體。此外，將活性成份、賦形劑脂、蠟和其混合物、和油加以混合且經(jīng)過冷卻獲得固態(tài)物質(zhì)，再將其用粉碎、研磨和類似方法進行加工。
適于注射用的本發(fā)明的混合物易于制備，即將蛋白質(zhì)、肽或多肽，賦形劑、脂，蠟或其混合物和油在提高溫度下直接分散在賦形劑中并加以冷卻制得。
大多數(shù)脂和脂和/或蠟的混合物通過熱熔產(chǎn)生的顆粒的噴淋霧化制得微球體，熱熔產(chǎn)生的顆粒用DSC分析證實其結(jié)晶種類大多數(shù)是很不穩(wěn)定的α型。例如三硬脂酸酯和三棕櫚酸酯一類的硬脂，經(jīng)噴淋化霧，在典型的室溫下貯放幾個月之后仍維持α晶態(tài)。令人驚奇的是，硬脂與液脂的混合物在熔融摻混和噴淋霧化而形成粒子或微球體時，顯示出室溫下的從α晶態(tài)向β晶態(tài)的加速轉(zhuǎn)變，物理穩(wěn)定性明顯提高，使藥用的非腸道使用的組份獲得意外的成功。根據(jù)混合物中成份，這種轉(zhuǎn)變在幾小時至幾天內(nèi)基本上完成。硬脂和液脂的合適組份如下99至70份硬脂，硬脂是脂肪酸的單一、雙一，或叁甘油酯，脂肪酸主要是鏈長C10至C22飽和烴，最好是C14至C18，以及1至30份的油，油是烴鏈長C2至C10的脂肪酸的單一、雙一、或叁甘油酯。
用硬脂和液脂以及具有或沒有活性物質(zhì)制成的微球體，其晶體結(jié)構(gòu)自發(fā)加速轉(zhuǎn)變的結(jié)果是當微球體懸浮在賦形劑中，在典型的室溫下貯存或在典型的冷凍柜溫度下貯存時，粘度的增加相當慢。鏈長C2至C12的脂肪酸的液體甘油酯因其優(yōu)良的生物相容性和生物降解性特別適宜于用作制藥的賦形劑。這樣產(chǎn)生的微球體一方面能從不穩(wěn)定的α晶態(tài)迅速轉(zhuǎn)變成熱動力學上更為穩(wěn)定的β晶態(tài)，另一方面還有下述特性其粉未顯示出良好流動性、低粘滯、貯存時低結(jié)快性、密度增加、以及物理加工時的更大韌性。此外，這些改進了的微球體配方用于蛋白質(zhì)、肽或多肽物質(zhì)的非腸道持久釋放，用于保持血中提高的激素含量其目的在于改善和提高美國專利U.S.P4，837，381中披露的重量收益率和/或產(chǎn)奶量。最后，這些微球體在物理加工和穩(wěn)定性上的提高使得它能夠生產(chǎn)出商業(yè)上可以接受的即時使用配方并加以包裝，這些配方具有良好的貯放性能。本發(fā)明再用下面的實施例加以說明，實施例并不僅限于已提到的幾個。
實施例1-7微球體在中性油賦形劑中的物理穩(wěn)定性這些實施例說明了通過摻合2-15%油、半軟脂或其混合物的組份而明顯地穩(wěn)定的微球體組份的范圍，物理穩(wěn)定的測量是將微球體懸浮在中性的三甘醇油賦形劑中，并對懸浮液施加了測試條件、測試條件模似了懸浮液貯存在熱環(huán)境條件，即30℃(86°F)或38℃(100°F)下的條件。在本實施例的測試中，將3克微球體懸浮在7.5毫升的中性三甘醇油中，使懸浮液在不變的溫度下慢慢旋轉(zhuǎn)(2-6轉(zhuǎn)/分)，直到懸浮液不再在容器中流動，凝膠時間大致上與懸浮液不再流動所耗去的時間相當。結(jié)果列在下表1中。當不能觀察到正確的凝膠時間時表1給出了凝膠時間的大致范圍。凝膠時間以小時計，除非另有說明。每一批量、來源或類型的硬脂不都是穩(wěn)定到同一程度。確切地說，凝膠時間與所選用的硬脂的種類、加到微球體組份的油或半軟脂的量和種類而有不同。然而，如結(jié)果所示，對每一特定批量、來源或種類的硬脂來說，油或半硬脂的加入大大增加了凝膠時間，將微球體的老化時間也列在下表的括弧內(nèi)，因為它是凝膠時間的重要的決定因素，因為晶態(tài)從不大穩(wěn)定的α態(tài)轉(zhuǎn)變到比較穩(wěn)定的β態(tài)的時間與其有關(guān)。
表 1凝膠時間，小時脂 油或半軟脂 微球體的老化(天)在30℃ 在38℃GTS11.a. 無 1.5(1)b. 無 6-24(14) 10分(29)c. 10%Miglyol2812 ＞168(1) 6(15)d. 5%GDS 6-24(21)2.a. 無 7分(1)b. 10%Miglyol 812 1(1)c. 10%Miglyol 812 2(80)3.a. 無 ＜1(1)b. 無 1.3(6) 7分(39)c. 2%Miglyo 812 2(8)d. 5%Miglyol 812 1.3(8) 12分(22)e. 10%Miglyol 812 6-24(8) 1(29)f. 15%Miglyol 182 24(1)g. 2%GDS ＜2(1)h. 5%GDS 3(21) 7分(39)i. 10%GDS 1.3(1)j. 5%Triacetin 8-24(1) 1.25(8)k. 2%GDS和 8-24(1)10%Miglyol 812
4.a. 無 1.6(1)b. 10%Miglyol 812 24(1)5.a. 無 6-24(21)b. 10%Miglyol 812 ＞168(1)6.a. 無 5分(1)b. 10%Miglyol 812 6-24(1)7.a. 無 1.1(120)b. 10%Miglyol 812 2(0)1.例1-5乃是用Huls of America，商品牌號為Dynasan 118的GTS(三硬脂酸甘油酯)的不同批量來做的。
例6是用Pfaltz & Bauer生產(chǎn)的物料做的。
2.Miglyol 812 購自Huls of America公司，是一種中性三甘醇油。
3.物料來源Gattefosse，商品牌號Gelucire 64/02。
實施例8經(jīng)制備的不穩(wěn)定的三硬脂酸甘油酯(GTS)微球體配方和穩(wěn)定GTS微球體配方具有如下組成不穩(wěn)定的微球體 28% 牛生長激素2% 苯甲酸鈉0.14% Pluronic F68 70% 三硬脂酸甘油酯穩(wěn)定的微球體 28% 牛生長激素2% 苯甲酸鈉0.14% Pluronic F68 63% 三硬脂酸甘油酯7% Miglyol 812 兩種微球體配方都是懸浮在同樣量的中性油賦形劑中并貯存在25℃或4℃。定期從貯存中取出配方試樣，在測量粘度(用Brookfield粘度計T(Viscometer T)錠子C(Spindle C)，100轉(zhuǎn)/分測量)前將試樣加熱到室溫(22-25℃)。列于下表2中的結(jié)果表明，在典型的貯存條件下，穩(wěn)定過的配方其粘度在整個時間內(nèi)增加明顯放慢。
1.Pluronic F68R是BASF公司生產(chǎn)的環(huán)氧乙烷和環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物。
表 2未穩(wěn)定和已穩(wěn)定的GTS微球體配方的粘度比較在25℃測得的粘度(厘泊)在25℃貯存 在4℃貯存時間 未穩(wěn)定 已穩(wěn)定 未穩(wěn)定 已穩(wěn)定0 66 66 66 661天 452 - 168 -5天 2300 - 159 -1周 7300 119 159 702周 - 195 159 714周 - 442 - 798周 - 1971 164 8213周 - 2629 270 7426周 - 2629 624 7039周 - 5280 741 71實施例9牛奶產(chǎn)量比較和分析制備了如實施例8中未穩(wěn)定和穩(wěn)定微球體相同組成的微球體，并用乳牛作了試驗以評定產(chǎn)奶功效。為進行注射將微球體懸浮在Miglyol 812 中即中性的三甘醇油中。此實施例中，療程在二次二一周注射之后跨越進行，即，B組牛在周1(即第1周)和周3開始注射4周不穩(wěn)定配方，在圖5、7和9開始這些牛改用穩(wěn)定配方注射。C組牛在周1(即第1周)和周3開始起注射穩(wěn)定配方，在周5，7和9開始改用不穩(wěn)定配方注射。這些實驗的結(jié)果列于下面表3。通過確定每組用不穩(wěn)定配方注射的牛的平均奶產(chǎn)量和用穩(wěn)定配方注射時的平均奶產(chǎn)量之間的平均差來進行兩種配方的統(tǒng)計比較。在第5周和第6周期的奶產(chǎn)量不計入統(tǒng)計分析中，因為在這段時間內(nèi)兩種配方間會進行相互作用。平均差是-0.9±4.7%，沒有統(tǒng)計學上的意義，P＞0.05。結(jié)論是兩組配方的奶產(chǎn)量幾近相同。
表 3奶產(chǎn)量的比較和分析不穩(wěn)定對穩(wěn)定的微球體持久釋放配方牛奶的百分增加率兩周-＞ 1 2 3 4 5 差＊組 牛 配方1 配方2B 1 18.5 24.2 24.6 15.5 15.4 5.92 12.4 15.3 7.3 9.7 6.3 5.93 5.6 14.3 13.8 9.9 9.8 0.24 6.4 2.7 12.9 7.3 12.2 -5.25 0.9 4.5 12.8 7.9 8.1 -5.36 -4.5 8.3 8.1 8.0 13.9 -9.07 8.5 31.9 33.4 21.7 24.4 -2.98 4.7 10.9 4.5 7.9 9.9 -1.19 7.4 16.7 16.4 14.3 14.3 -2.310 18.5 19.2 23.5 21.3 22.3 -3.0
C 1 -6.9 5.3 12.3 3.5 6.2 5.72 4.0 6.5 -3.2 3.0 5.0 -1.23 3.1 4.6 8.2 7.1 8.7 4.04 4.3 10.5 15.4 9.9 12.3 3.75 2.9 15.4 19.5 16.9 11.7 5.26 4.9 4.8 9.8 -6.9 -13.0 -7.47 2.9 4.9 7.7 2.5 -3.1 -4.28 7.7 11.7 12.7 9.1 11.9 1.69 9.9 14.1 18.1 6.0 6.3 -5.810 13.3 20.4 23.1 13.5 15.6 -2.6平均偏差 -0.9+/-標準偏差 +/-4.7＊差是指每頭牛的，是指B組1和2兩周中或是C組4和5兩周中用配方1(未穩(wěn)定)時的平均奶產(chǎn)量和B組4和5兩周中或C組1和2兩周中用配方2(穩(wěn)定)時的平均奶產(chǎn)量之間的差值。由于療程橫貫了三個兩周的開端，所以從注射的順序來看，實驗是取得平衡的。為了減少一個療程的結(jié)果帶到下一個療程中去的可能性，將三個兩周的結(jié)果不計入統(tǒng)計分析中去。平均差值反映了兩種配方之間的差別。
權(quán)利要求
1.一種改進的制備微球體組份的方法，具有將脂或蠟或其混合物和生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽熔融摻混以形成摻混物，并將所述的摻混物加以造粒以形成所述的微球體組份等幾個步驟，其改進系由所述的摻混物在造粒前，將約1%至30%的油、半軟脂、脂肪酸衍生物或其混合物加以混合所構(gòu)成。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中摻混物系由約30%至95%的脂或蠟或其混合物以及約2%到70%的生物活性蛋白質(zhì)、肽或多肽所構(gòu)成。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中生物活性蛋白質(zhì)是牛、豬和羊的生長激素。
4.如權(quán)利要求3的方法，其中的摻混物由約5%至20%的中性三甘醇油所構(gòu)成。
5.如權(quán)利要求1的方法，其進一步是將微球體組份懸浮在制藥和藥理可接受的液體賦形劑中所構(gòu)成。
6.按權(quán)利要求1制備的微球體組份。
7.非腸道使用的微球體組份，按重量計，系由約30%至95%的脂或蠟或其混合物，約2%至70%生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽，以及約1%至30%的油、半軟脂、脂肪酸衍生物或其混合物所構(gòu)成。
8.按權(quán)利要求7的微球體組份，含有約5%至20%中性的三甘醇油和牛、豬或羊的生長激素的生物活性蛋白質(zhì)。
9.制備微球體組份的方法，包括按重量計，將約30%至95%的脂或蠟或其混合物，約2%至70%生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽以及約1%至30%的油進行熔融摻混形成摻混物;再將所述的摻混物進行造粒形成所述的組份。
10.按權(quán)利要求9的方法，其中摻混物系由5%至20%中性三甘醇油和是牛、豬、或羊生長激素的生物活性蛋白質(zhì)所構(gòu)成。
全文摘要
本發(fā)明系某些適于非腸道使用的穩(wěn)定微球狀組份，組份含脂肪或蠟或其混合物，生物活性的蛋白質(zhì)、肽或多肽以及油、半軟脂肪、脂肪酸衍生物或其混合物。本發(fā)明也涉及制備此微球狀組份的方法。
文檔編號A61K9/50GK1055293SQ9110131
公開日1991年10月16日 申請日期1991年2月28日 優(yōu)先權(quán)日1990年3月30日
發(fā)明者威廉·斯蒂伯 申請人:美國氰胺公司