專利名稱:疫苗的制備方法
本發(fā)明是關(guān)于一種疫苗，它能抵抗致病體在人或暖血動物體內(nèi)產(chǎn)生的疾病。
本發(fā)明主要是對各致病體在人或暖血動物體內(nèi)產(chǎn)生的疾病，如由病毒、細菌和真菌引起的疾病，提供一種疾病特異性的疫苗，能夠產(chǎn)生永久或暫時性免疫，和/或治療一種已發(fā)生疾病。
本發(fā)明的驚人發(fā)現(xiàn)，是有可能產(chǎn)生已對人或暖血動物失去致病特性的有選樣的致病形態(tài)，但仍能在人或動物體上產(chǎn)生免疫或治療效果。
本發(fā)明疫苗特征在于它們含有致病體的某些類型，它們能夠生存于非暖血動物的蛋白質(zhì)上。它們通常是葡萄球菌，尤其是金黃色葡萄球菌。能夠生活在魚蛋白質(zhì)上的其他細菌類型也可使用，特別是鏈球菌、肺炎球菌、綠膿桿菌、棒桿菌以及沙門氏菌和其他病原菌。除魚蛋白質(zhì)外，甲殼動物、爬行動物、兩棲動物，昆蟲和蠕蟲等的蛋白質(zhì)亦可使用。
此外，本發(fā)明亦涉及培養(yǎng)對人及暖血動物非致病型態(tài)，這種方法特征在于用非暖血動物的非變性蛋白特別是魚蛋白特別是魚蛋白在培養(yǎng)基內(nèi)接種致病體，讓菌落在正常培養(yǎng)條件生長，這個過程可能要重復(fù)多次。假定當(dāng)完成此過程時致病菌由突變產(chǎn)生適應(yīng)性并得到最后疫苗的前述特性。
在突變和自然競擇激化外來因素發(fā)揮作用的同時，也可用短波電磁輻射、鈷輻射，和/或伽碼輻射加以輻照激化，而紫外輻射效用尤著。
應(yīng)該特別指出，致病微生物可能起作用。
下列各例子將有助于解釋本發(fā)明。
例1在一Petri培養(yǎng)皿內(nèi)的正常營養(yǎng)瓊脂上，大面積接種金黃色葡萄球菌，于37℃置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
待細菌充分生長后“用鉑針把一部份細菌轉(zhuǎn)移接種到第2個Petri培養(yǎng)皿的營養(yǎng)介質(zhì)中，再把這碟置入培養(yǎng)箱于37℃進行培養(yǎng)，同時用UV燈照射。
觀察發(fā)現(xiàn)大部份細菌都無法在魚蛋白質(zhì)培養(yǎng)基上生存，接種后生存的細菌只屬少數(shù)。
讓這些經(jīng)鉑針移殖的細菌充分生長，然后再把一部份移殖到第3碟培養(yǎng)基，進行培養(yǎng)，再用UV燈照射。
用新培養(yǎng)基重復(fù)上述操作。
本例子需要進行超過150次培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移，但這不等于重復(fù)的次數(shù)可因而增加或減少。
由最后的培養(yǎng)基上生存的細菌直接制備活疫苗。將多倍致死劑量(按照原來菌株計算)的疫苗接種在試驗動物(家鼠、老鼠、豚鼠、兔)身上，但是沒有動物死亡或顯示疾病徵狀。為求證實，把已接種疫苗株感染;結(jié)果顯示，就是把相等于多倍致死劑量(對未接種疫苗動物而言)注進已接種疫苗動物內(nèi)，它們?nèi)匀煌耆庖?。用兔子做試驗時，可以按照平板雙向擴散沉淀法來測試免疫能力。
例2如例1一樣，在Petri培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基上養(yǎng)殖一種葡萄球菌菌株的菌落，同時亦如前例，把細菌轉(zhuǎn)移接種至其他魚蛋白質(zhì)培養(yǎng)基去。使用長波X射線輻射促進突變，最后從這菌株制造活疫苗。
用例1及例2試驗對鏈球菌，特別是溶血鏈球菌，和綠膿桿菌與及白喉棒狀桿菌進行測試，結(jié)果跟以前一樣。此外，又使用其他新鮮(即蛋白質(zhì)并未變性)魚，尤其是剛殺或新鮮雪藏的魚作試驗。蛋白質(zhì)可以是懸浮液或分散體狀態(tài)。如果培養(yǎng)條件和輻射強度都能選擇恰當(dāng)，所有已知或?qū)戆l(fā)現(xiàn)的致病細菌、病毒、真菌和“微原生質(zhì)等的相應(yīng)非致病突變型態(tài)，都應(yīng)該能夠制造;特別重要的，是可以治療那些已經(jīng)染病的暖血動物。
勘誤表
權(quán)利要求
1.培養(yǎng)對人或暖血動物無致病性的致病體類型的方法，特征在一含有非暖血動物蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基內(nèi)接種致病體，并讓此致病體的菌落在正常培養(yǎng)條件下生長于培養(yǎng)基上，如有必要，重復(fù)上述步驟。
2.按照權(quán)項5的方法，特征在于蛋白是魚蛋白質(zhì)。
3.按照權(quán)項5或6的方法，特征在于同時給予促進突變或自然選擇的影響。
4.按照權(quán)項7的方法，特征在于促進突變或自然選擇的影響，是是用電磁短波輻射線輻照。
5.按照權(quán)項7或8的方法，特征在于最后的培養(yǎng)物充分培養(yǎng)之后，直接由活培養(yǎng)物制備活疫苗，而不進行額外處理。
專利摘要
一種供人或暖血動物預(yù)防或治療由致病細菌如葡萄球菌或其他細菌引起的疾病的疫苗，它是由培養(yǎng)生存于暖血動物以外的動物蛋白質(zhì)如魚蛋白上相應(yīng)致病細菌型態(tài)獲得，并把此型態(tài)的致病細菌用于疫苗中。
文檔編號A61K39/02GK85104796SQ85104796
公開日1986年12月24日 申請日期1985年6月19日
發(fā)明者E·F·馮·馬爾森-波尼卡 申請人:E·F·馮·馬爾森-波尼卡導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan