本發(fā)明屬于益生菌，具體是指一種具有減肥作用的益生菌組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、肥胖的根本原因在于身體堆積過多的脂肪，并伴隨著全身低程度的炎癥反應(yīng)和不良的行為模式（包括飲食趨勢(shì)，體育鍛煉等），從而造成能量輸入與消耗失衡，而肥胖的“源頭”是人們對(duì)于高脂肪高熱量食物的偏愛，導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)過剩，改變了人體脂質(zhì)代謝，引發(fā)腸道微生物群的紊亂，因而通過微生物干預(yù)而改善腸道微生物來減輕肥胖以及相關(guān)代謝疾病可能成為肥胖人群的一個(gè)重要干預(yù)手段。

2、腸道微生物通過腸道激素及迷走神經(jīng)連接（影響能量消耗和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中與飲食行為相關(guān)的區(qū)域）來影響“腦?腸”軸，從而改變宿主行為，同時(shí)，腸道微生物代謝物和其產(chǎn)物還可以充當(dāng)信號(hào)分子并調(diào)節(jié)腸內(nèi)分泌細(xì)胞的激素分泌，從而調(diào)節(jié)食欲、腸道運(yùn)動(dòng)、能量吸收、儲(chǔ)存以及能量消耗等攝食相關(guān)行為，進(jìn)而影響肥胖發(fā)展；與傳統(tǒng)藥物相比較，益生菌具有較低的副作用、較高的安全性和穩(wěn)定性，能在一定程度上減輕肥胖，從而達(dá)到預(yù)防和治療的效果。

3、目前現(xiàn)有技術(shù)主要存在以下問題：

4、益生菌在儲(chǔ)存過程中容易受到外界環(huán)境的影響，導(dǎo)致活性較低，并且進(jìn)入在消化道后，對(duì)消化液的耐受性較差，進(jìn)一步降低了菌體的存活率，從而限制了減肥效果的發(fā)揮。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明提出了一種具有減肥作用的益生菌組合物，包括如下重量份的組分：改性芹菜idf多功能載體20-30份，減脂凝膠保護(hù)材料10-20份，中藥益生元復(fù)合物8-12份，植物乳植桿菌1-2份。

2、所述改性芹菜idf多功能載體，是通過亞臨界水、堿性過氧化氫對(duì)芹菜不溶性纖維進(jìn)行聯(lián)合改性得到的結(jié)構(gòu)物質(zhì)，并且作為植物乳酸桿菌的發(fā)酵載體使用。

3、所述減脂凝膠保護(hù)材料，包括如下重量份的組分：海藻酸鈉15-18份，果膠12-15份，檸檬酸3-6份，卵磷脂6-9份，氯化鈣6-9份。

4、所述中藥益生元復(fù)合物，包括如下重量份的組分：人參3-5份，枸杞3-5份，桑葚多酚1-2份，菊粉1-2份。

5、所述改性芹菜idf多功能載體的制備方法，具體包括以下步驟：

6、（1）將芹菜洗凈，切斷，按照料水比1:1打漿，漿液過100-200目篩網(wǎng)，去除芹菜汁，收集芹菜渣，芹菜渣中主要包括纖維素、半纖維素、木質(zhì)素和殼聚糖等，水不溶性纖維的結(jié)構(gòu)中維管束大量密集，呈絲狀，表面粗糙，比表面積大，有利于益生菌菌體的附著，芹菜水不溶性膳食纖維還具有增加飽腹感、有助于減肥、減輕水腫等功效，得到芹菜idf；

7、（2）將8g步驟（1）所述的芹菜idf加入80-100ml蒸餾水中，攪拌混合，再置于反應(yīng)釜多功能攪拌器中，在180-220℃下處理10-30min，結(jié)束后立即用自來水將反應(yīng)器快速冷卻至室溫，使用真空泵收集固體殘留物，用蒸餾水洗至中性，干燥，研磨，亞臨界水改性不需要添加額外的化學(xué)試劑，因此具有反應(yīng)過程清潔、提取效率較高等優(yōu)點(diǎn)，高溫使細(xì)胞壁多糖降解，使得芹菜idf具有松散的多孔結(jié)構(gòu)，暴露了吸附位點(diǎn)，得到亞臨界水改性芹菜idf；

8、（3）將10g步驟（2）所述的亞臨界水改性芹菜idf加入200ml過氧化氫溶液中，經(jīng)過亞臨界水改性后的芹菜idf中出現(xiàn)了網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，降低了纖維素、半纖維素和木質(zhì)素之間的作用力，更有助于過氧化氫進(jìn)入內(nèi)部發(fā)揮作用，從而有利于半纖維素和木質(zhì)素連接鍵破壞的更徹底，用5mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph至11.0，再置于恒溫水浴鍋中攪拌3-4h，控制溫度70-80℃，然后用1mol/l的鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph至中性，結(jié)束后使用真空泵收集固體殘留物，用蒸餾水洗滌2-3次，干燥，研磨，亞臨界水和過氧化氫的聯(lián)合改性處理，大量纖維素暴露出來，從而使芹菜idf中具有更多的吸附位點(diǎn)，內(nèi)部結(jié)構(gòu)打開，有利于益生菌的附著而起到保護(hù)作用，進(jìn)一步促進(jìn)了益生菌的增殖，得到改性芹菜idf多功能載體；

9、優(yōu)選地，步驟（3）中，過氧化氫溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.0-2.0%，過氧化氫的加入能夠降解木質(zhì)素中的生物質(zhì)連接鍵，使內(nèi)部結(jié)構(gòu)和活性基團(tuán)暴露，增強(qiáng)了吸附能力。

10、所述中藥益生元復(fù)合物的制備方法，具體包括以下步驟：

11、a、將人參、枸杞加水置于煎藥機(jī)內(nèi)浸泡2-4h，浸泡有利于中藥有效成分的浸出，提高了提取效率，煎煮1-2次，微沸提取2-3h，合并煎液，棄去濾渣，收集的濾液濃縮，真空壓力-0.06mpa、溫度40-50℃，干燥，粉碎，人參、枸杞中含有皂苷、多糖等活性成分，具有顯著的益生元特性，能夠促進(jìn)腸道內(nèi)乳桿菌屬、雙歧桿菌屬等菌群的生長(zhǎng)，得到中藥提取物；

12、b、將桑葚原汁在4℃下以4000rpm轉(zhuǎn)速離心10min，將上清液緩慢倒入裝載好的x-5大孔樹脂的層析柱中，待大孔樹脂吸附飽和后，用蒸餾水進(jìn)行清洗，可去除糖、酸和其他水溶性雜質(zhì)，再用酸性乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進(jìn)行減壓濃縮至乙醇全部回收，控制濃縮溫度38-42℃，冷凍干燥，桑葚多酚具有益生元特性，能夠調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，具有促進(jìn)腸道有益菌的作用，并通過與腸道微生物的相互作用發(fā)揮增效功能，桑葚多酚還能夠通過調(diào)節(jié)機(jī)體脂質(zhì)代謝，影響脂肪細(xì)胞的增殖、分化與凋亡，刺激機(jī)體產(chǎn)熱而加速能量消耗，得到桑葚多酚；

13、c、將1-2g菊粉分散在10ml純水中，磁力攪拌1-2h，再加入1-2g步驟b所述的桑葚多酚、3-5g步驟a所述的中藥提取物，桑葚多酚與菊粉、中藥提取物的結(jié)合，可以保護(hù)多酚不被降解，提高穩(wěn)定性，桑葚多酚與菊粉還賦予了中藥提取物多重益生元功效，繼續(xù)磁力攪拌3-4h，冷凍干燥，得到中藥益生元復(fù)合物；

14、優(yōu)選地，步驟b中，酸性乙醇溶液中，無水乙醇、水、鹽酸溶液的體積比為80:19:1，酸性乙醇溶液能夠充分洗脫大孔樹脂中的酚類物質(zhì)。

15、本發(fā)明還提供了一種具有減肥作用的益生菌組合物的制備方法，具體包括以下步驟：

16、s1、將1-2g植物乳植桿菌接種于裝有mrs培養(yǎng)基和改性芹菜idf多功能載體的藍(lán)口瓶中培養(yǎng)36h，改性芹菜idf多功能載體可以有效富集益生菌，對(duì)益生菌的活性有較好的保護(hù)作用，減少外界環(huán)境對(duì)益生菌活性的不良影響，過濾，去除上清液，將含有植物乳植桿菌的改性芹菜idf多功能載體放入發(fā)酵罐中，加入mrs培養(yǎng)基，達(dá)到罐體容積的80%，在37℃下培養(yǎng)7d，每隔1d更換罐內(nèi)的mrs培養(yǎng)基，培養(yǎng)完成后，棄去上清液，冷凍干燥，此時(shí)植物乳植桿菌的含量為13-14logcfu/g，利用生物膜富集微生物的原理，將改性芹菜idf多功能載體與益生菌共同發(fā)酵培養(yǎng)，不僅培養(yǎng)物的益生效果得到增強(qiáng)，而且對(duì)胃腸消化液的耐受性也得到了有效提升，有利于更好地保持益生菌的活性，從而達(dá)到理想的減肥效果，得到復(fù)合培養(yǎng)物；

17、s2、將卵磷脂、氯化鈣加入50ml水中，其中，氯化鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4-6%，磁力攪拌使其充分溶解，待用，再將5-6g海藻酸鈉、4-5g果膠加入80-100ml水中，攪拌使其完全水化，加入1-2g檸檬酸進(jìn)行交聯(lián)，調(diào)節(jié)ph至5.0-6.0，交聯(lián)溫度40-50℃，交聯(lián)時(shí)間30-50min，檸檬酸的交聯(lián)增強(qiáng)了海藻酸鈉和果膠的穩(wěn)定性，有利于增強(qiáng)減脂凝膠保護(hù)材料的力學(xué)性能，進(jìn)一步提升了對(duì)益生菌的包覆性，冷卻至室溫，然后加入步驟s1所述的復(fù)合培養(yǎng)物、中藥益生元復(fù)合物，攪拌均勻，用注射器自動(dòng)推進(jìn)泵以1ml/min的速度滴入氯化鈣卵磷脂溶液中，靜置固化5-10min，用200目紗布濾網(wǎng)過濾，沉淀物冷凍干燥，減脂凝膠保護(hù)材料包裹著復(fù)合培養(yǎng)物和中藥益生元復(fù)合物，進(jìn)一步增強(qiáng)了對(duì)益生菌的保護(hù)作用，可在結(jié)腸定點(diǎn)釋放，減少了胃腸道對(duì)益生菌的破壞，從而也提高了益生菌的減肥效果，得到具有減肥作用的益生菌組合物；

18、優(yōu)選地，步驟s2中，卵磷脂的加入量為2-3g，卵磷脂有助于促進(jìn)多糖分子鏈之間的均勻分布，填充減脂凝膠保護(hù)材料的凝結(jié)結(jié)構(gòu)，提升穩(wěn)定性和保護(hù)性，并且卵磷脂還具有分解乳化油脂的作用。

19、本發(fā)明取得的有益效果如下：

20、本發(fā)明通過將植物乳植桿菌富集在改性芹菜idf多功能載體上發(fā)酵培養(yǎng)，得到的復(fù)合培養(yǎng)物與中藥益生元復(fù)合物協(xié)同搭配，并且在減脂凝膠保護(hù)材料的包裹下，有效提升了益生菌的活性，增強(qiáng)了對(duì)胃腸道消化液的耐受性，有利于更多益生菌及其代謝產(chǎn)物在結(jié)腸的吸收利用，發(fā)揮最大化的減肥作用；所述改性芹菜idf多功能載體中，通過亞臨界水、過氧化氫的雙重聯(lián)合改性，使芹菜idf的大量纖維素暴露出來，具有更多的吸附位點(diǎn)，有利于益生菌在載體表面或空腔內(nèi)附著、富集，減少外界環(huán)境對(duì)益生菌活性的不良影響，并且芹菜idf不被消化液和酶分解，具有一定的耐消化性，可減少益生菌進(jìn)入胃腸道后的消化分解，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)益生菌活性和數(shù)量的保護(hù)；所述中藥益生元復(fù)合物中，中藥益生元物質(zhì)與桑葚多酚、菊粉結(jié)合，賦予了多重益生元功效，還增強(qiáng)了抗氧化性，對(duì)益生菌的活性也具有積極作用；所述減脂凝膠保護(hù)材料中，形成了一種凝膠球形結(jié)構(gòu)，包裹著復(fù)合培養(yǎng)物和中藥益生元復(fù)合物，有效隔離外界環(huán)境，減少了溫度、光照等因素對(duì)菌體活性的影響，保持益生菌活性的穩(wěn)定性，同時(shí)，減脂凝膠保護(hù)材料可在結(jié)腸靶向釋放，進(jìn)一步增強(qiáng)了對(duì)胃腸道消化液的耐受性，提高益生菌經(jīng)過胃腸道的菌體存活率；改性芹菜idf多功能載體與減脂凝膠保護(hù)材料的雙重保護(hù)作用，顯著提高了益生菌的活性，減少在胃腸道中的消化分解，有利于益生菌、益生元在結(jié)腸的吸收利用，通過改善腸道菌群的生長(zhǎng)繁殖而發(fā)揮減肥作用；本發(fā)明以改性芹菜idf多功能載體、減脂凝膠保護(hù)材料、中藥益生元復(fù)合物和植物乳植桿菌制成一種具有減肥作用的益生菌組合物，減少了外界環(huán)境的不良影響，有效保持益生菌的活性，增強(qiáng)了對(duì)胃腸道消化液的耐受性，提高在結(jié)腸部位的吸收利用，具有優(yōu)異的減肥作用。