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一種降血脂瓜蔞皮復方及其制備方法與流程

文檔序號:12930888閱讀:596來源:國知局
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域,具體地說是關(guān)于一種以瓜蔞皮提取物和薤白提取物為主要成分的降血脂復方。
背景技術(shù)
:現(xiàn)代社會,隨著生活方式和環(huán)境等因素的變化,人類疾病譜與過去發(fā)生了很大的改變,心血管類疾病變成了危害人類健康的主要慢性病之一,高血脂癥加劇了新陳代謝紊亂增加了心血管疾病的風險,高血脂癥和它的并發(fā)癥被認為是重要社會問題之一。高血脂是一種血脂代謝異常的終身性病癥。通過藥物治療,血脂可以穩(wěn)定在正常值之間,但并未被根治了。如果停止藥物治療,血脂濃度會又一次增高。西藥調(diào)脂效果顯著,但臨床觀察顯示其有使用后易反彈,療效不易維持的特點,且存在引起對肝能功損傷等副作用,所以人們對此有些畏懼心理。因此開發(fā)既高效又安全的降血脂的功能性食品很有必要。瓜蔞皮是雙邊栝樓(trichosanthesrosthorniiharms)或者葫蘆科植物栝樓(trichosantheskirilowiimaxim)的果皮含有氨基酸類、黃酮類、三萜類(劉金娜,溫春秀,劉銘,等.瓜蔞的化學成分和藥理活性研究進展[j].中藥材,2013,36(5):843-8.)等物質(zhì),其提取物或注射液具有擴張小動脈、抗血小板凝聚、活血化瘀、緩解胸悶的功能(出自陳新謙,金有豫,湯光.新編藥物學[m].17版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011.),對心血管疾病有一定的治療作用。薤白中活血化瘀類活性成分主要是皂苷和腺苷類化合物(出自姚新生,陳海峰,王乃利.中藥薤白活血化瘀作用活性物質(zhì)的研究[c]:第三屆世界中西醫(yī)結(jié)合大會,中國廣東廣州,2007)。瓜蔞皮薤白組方對心血管疾病的預防及治療具有重要意義,且安全、無毒副作用(出自鄒純才,鄢海燕,魏美玲,等.瓜蔞薤白滴丸的長期毒性實驗[j].中國醫(yī)院藥學雜志,2015,35(13):1172-1179.)將瓜蔞皮提取物與薤白提取物復配,通過多靶點,更加顯著降低血脂水平,并具有顯著的抗氧化活性。參考張仲景《金匱要略》中的“瓜蔞薤白白酒湯”,并結(jié)合天然藥物降血脂的調(diào)節(jié)機制和配伍原則,對瓜蔞皮和薤白提取物進行配伍。兩種天然藥物(提取物)按照一定的比例聯(lián)用,開發(fā)出瓜蔞皮&薤白降血脂的復方制劑,提取物中的活性成分通過多靶點達到最佳降脂效果。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供一種藥物或食品,該藥物或食品中含有所述降血脂組合物。為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:一種降血脂瓜蔞皮復方,該復方包括瓜蔞皮提取物和薤白提取物為有效成分。瓜蔞皮和薤白原料的比例在1:7.83-1:3.58。所述的瓜蔞皮提取物中的槲皮素和薤白提取物中腺苷的比例1:8-1:4。其中瓜蔞皮提取物中總黃酮的含量為5-6mg/g,總多酚的含量為7-8mg/g,總皂苷的含量為7-8mg/g,槲皮素的含量為0.1-0.2mg/g,腺苷的含量為0.07-0.08mg/g,總氨基酸的含量為62-63mg/g;薤白提取物中總黃酮的含量為2-3mg/g,總多酚的含量為3-4mg/g,總皂苷的含量為19-20mg/g,腺苷的含量為0.1-0.2mg/g,總氨基酸的含量為26-27mg/g。一種降血脂瓜蔞皮復方的制備方法,包括如下步驟:步驟一,分別稱取瓜蔞皮、薤白的干燥粉末置于不同的回流瓶中;步驟二,分別加入10倍體積60%的乙醇,回流,過濾,收集濾液;步驟三,將步驟二中的殘渣再加入10倍體積的60%乙醇,回流,過濾,收集合并濾液;步驟四,將步驟三中的產(chǎn)物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去乙醇和水分,再加入一定體積的純水,混合均勻,配置成濃度為2.1g/ml生藥。所述的步驟二和步驟三中回流時間均為2小時。上述降血脂瓜蔞皮復方,其具有抗氧化活性和降血脂雙層功效。上述降血脂瓜蔞皮復方的抗氧化活性功效,表現(xiàn)為:顯著升高血清和肝組織sod及gsh-px活性及降低血清和肝組織mda含量。上述降血脂瓜蔞皮復方的降血脂功效,表現(xiàn)為:顯著降低血清tc、tg、ldl-c水平。本發(fā)明的有益效果:瓜蔞皮提取物,薤白提取物和瓜蔞皮&薤白提取物配伍后均可改善高脂血癥小鼠的血脂代謝,不同比例的瓜蔞皮&薤白提取物組優(yōu)于單獨使用瓜蔞皮提取物或薤白提取物的調(diào)節(jié)血脂的效果。說明瓜蔞皮與薤白中活性成分起協(xié)同效應(yīng),能更好的調(diào)節(jié)血脂,同時該復方具有顯著的抗氧化活性,并對肝臟、主動性具有修復功能。具體實施方式實施例1.復方的制備分別取瓜蔞皮提取物和薤白提取物,按照表1所列的不同質(zhì)量比(瓜蔞皮:薤白提取物)混合,加入一定體積的純水,混合均勻,配置成濃度為2.1g/ml(生藥體積),制備成藥物復方組物備用。表1復方組成瓜蔞皮與薤白原料比瓜蔞皮提取物&薤白提取物4組1:7.83瓜蔞皮提取物&薤白提取物5組1:3.58實施例2.抗氧化及降血脂活性實驗實驗動物c57bl/6小鼠,雄性,體重20g左右,3-5w周齡,清潔級,由上海斯萊克實驗動物有限公司提供在鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學院動物中心spf級動物房飼養(yǎng),合格證號:scxk(滬2012-0002)小鼠飼料基礎(chǔ)飼料(飼料依照gb14924.3-2001《實驗動物小鼠大鼠配合飼料》配制),高脂飼料參照cfda標準配制。為了防止飼料被氧化,每星期配制新鮮飼料,保存在-20℃冰箱。實驗材料和儀器苯扎貝特片江蘇天士力貝特制藥有限公司(國藥準字:h20010013),過氧化物岐化酶(sod)試劑盒,丙二醛(mda)試劑盒,谷胱甘肽過氧化物酶(gsh-px)試劑盒均購于南京建成研究所。eclipsee100顯微鏡日本尼康公司。實驗步驟按照表2進行分組給藥,進食量和飲水相同,每日以灌胃方式給藥一次,p1、p2、p3、p4、p5、p6、p7組灌胃溶液劑量為0.2ml/10g/day[43](相當于生藥的42g/kg/day)。75days后取血,分離血清備用。①血樣采集:用藥治療75天后采血,低溫3000rpm離心后收集血清,-80℃保存,用于血生化檢測。血生化檢測指標有:甘油三酯(tg)、總膽固醇(tc)、低密度脂蛋白(ldl-c)和高密度脂蛋白(hdl-c)。②體內(nèi)抗氧化指標的測定:血清、肝臟組織檢測超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶的活性及丙二醛含量。參照建成研究所提供的說明書,此試劑采用的是羥胺法來測定sod、gsh-px活力及mda含量。③按樣品采集:麻醉小鼠經(jīng)生理鹽水灌流后,取心臟及血管(從主動脈弓到腎髂總動脈),生理鹽水沖洗,于主動脈弓下緣水平切長1cm主動脈血管,將主動脈浸泡于4%多聚甲醛固定;心臟組織包埋于oct,-80℃保存?zhèn)溆?;剝離小鼠的肝臟、心臟和腎臟后,用生理鹽水洗去污血,再用濾紙吸干、稱重,將肝臟器浸泡于4%多聚甲醛固定。④病理觀察:將固定樣品肝、心臟流出道進行石蠟包埋,he染色。表2分組及給藥分組劑量對照組常規(guī)飼料高脂組高脂飼料高脂+生理鹽水同體積高脂+苯扎貝特片117mg/kg/d高脂+p1瓜蔞皮提取物高脂+p2薤白提取物高脂+p3瓜蔞皮&薤白原料1:1.50高脂+p4瓜蔞皮&薤白原料1:7.83高脂+p5瓜蔞皮&薤白原料1:3.58高脂+p6瓜蔞皮&薤白原料2.10:1高脂+p7瓜蔞皮&薤白原料7.69:1(1)結(jié)果①建模指標測定由表3得知,模型組喂養(yǎng)高脂飼料連續(xù)喂4周后,通過與對照組比較,血清甘油三酯升高,血清總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇升高,差異均有顯著性,判定模型成立。表3建模后小鼠指標變化(與常規(guī)飼料相比,**表示p<0.01)②對小鼠血脂的影響由表4可知,瓜蔞皮提取物,薤白提取物,瓜蔞皮&薤白提取物的不同復方的配伍均有調(diào)節(jié)實驗性高脂血癥小鼠血脂的作用,從血脂指標來看,瓜蔞&薤白提取物復方配伍制劑調(diào)節(jié)血脂的作用優(yōu)于單獨使用瓜蔞皮提取物或者薤白提取物。表4瓜蔞皮提取物、薤白提取物及復方組對小鼠血脂影響(n=10,)mmol/l(注:a為p>0.05,b為0.05>p≥0.01,c為p<0.01)③對小鼠體內(nèi)抗氧化的影響表5各組小鼠血清、組織中sod活性、gsh-px活性及mda含量(注:a為p>0.05,b為0.05>p≥0.01,c為p<0.01)i不同組別血清、組織樣品中的sod如如表5所示,生理鹽水與高脂組無顯著性差異,說明灌胃對sod沒有影響。高脂組小鼠血清中的sod低于常規(guī)飼料組,但無顯著性差異。與瓜蔞皮提取物組p1,薤白提取物組p2相比,瓜蔞皮&薤白提取物復方組中除p3組的sod降低,其他均有升高,其中p4組、p5組、p6組和p7組分別升高1.75%、6.56%、5.52%、12.87%。p7組sod值最高,且與高脂組有顯著性差異,sod升高13.20%。高脂組小鼠肝組織中的sod低常規(guī)飼料組,且有顯著性差異。其他各組sod值均高于于高脂組,除p3組無顯著性差異,苯扎貝特組較高脂組升高7.52%,p1組較高脂組升高5.26%,p2組較高脂組升高7.52%,p3組較高脂組升高2.26%,p4組較高脂組升高27.82%,p5組較高脂組升高18.05%,p6組較高脂組升高8.27%,p7組較高脂組升高12.78%,瓜蔞皮&薤白提取物復方組的sod值均高于瓜蔞皮提取物組p1,薤白提取物組p2,其中p4組sod值最高。ii不同組別血清、組織樣品中的gsh-px如如表5所示,生理鹽水與高脂組無顯著性差異,說明灌胃對gsh-px沒有影響。高脂組小鼠血清中的gsh-px低于常規(guī)飼料組,但無顯著性差異。與高脂組比較,苯扎貝特組、p1組、p2組p3組、p4組、p5組、p6組和p7組分別升高50.92%、10.93%、9.20%、39.89%、91.41%、117.18%、19.63%、23.31%,其中p5組與高脂組有顯著性差異。瓜蔞皮&薤白提取物復方組的gsh-px值均高于瓜蔞皮提取物組p1,薤白提取物組p2,其中p5組gsh-px最高。高脂組小鼠肝組織中的gsh-px低于常規(guī)飼料組,且有顯著性差異。與高脂組比較苯扎貝特組、p1組、p2組、p3組、p4組、p5組、p6組和p7組分別升高36.81%、1.49%、24.04%、28.70%、14.07%、33.64%、7.74%,其中苯扎貝特組、p2組、p3組、p4組和p6組與高脂組存顯著性差異。瓜蔞皮&薤白提取物復方組的p3組和p6組的gsh-px值均高于瓜蔞皮提取物組p1,薤白提取物組p2,其中p6組gsh-px最高但低于苯扎貝特組。iii不同組別血清、組織樣品中的mda如表5所示,生理鹽水與高脂組無顯著性差異,說明灌胃對mda沒有影響。高脂組小鼠血清中的mda高于常規(guī)飼料組,且存在顯著性差異。與高脂組比較苯扎貝特組、p1組、p2組、p4組、p5組、p6組和p7組分別降低了38.52%、9.02%、7.38%、17.21%、24.59%、18.03%、27.04%,p3組升高13.11%。苯扎貝特組、p4組、p5組和p7組與高脂組存在顯著性差異。瓜蔞皮&薤白提取物復方組的p4組、p5組、p6組和p7組的mda值均低于于瓜蔞皮提取物組p1,薤白提取物組p2,其中p7組mda最低,p5組次之。高脂組小鼠組織中的mda低于常規(guī)飼料組,其他各組除p6組mda低于高脂組,其他都高于高脂組,這可能與組織中的雜質(zhì)有關(guān)。p6組降低33.98%。④對肝臟及主動脈病理觀察結(jié)果高血脂癥小鼠肝臟組織病理學顯微鏡(20×)觀察,高脂組小鼠肝臟、肝小葉結(jié)構(gòu)欠清晰,小鼠均存在中度到重度的肝細胞脂肪變病,胞漿中呈現(xiàn)了大小不同的脂肪氣泡,肝細胞體積均變大變圓,細胞核被擠向一邊,形狀發(fā)生改變,肝竇顯著變窄或者消失,肝細胞的染色比正常細胞的淺,胞漿淡染,腺泡內(nèi)多呈現(xiàn)點狀或者灶狀壞死,匯管區(qū)伴隨中、輕度的炎癥細胞浸潤,未發(fā)現(xiàn)顯著的肝纖維化,大部分肝小葉中央靜脈附近出現(xiàn)膽固醇結(jié)晶,常規(guī)飼料組小鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,肝索以中央靜脈為中心成放射狀向四周排列,肝小葉輪廓分明,肝細胞呈現(xiàn)多邊形,細胞邊界分明,核圓而清晰,居于細胞中間,大量胞質(zhì);苯扎貝特組小鼠肝臟細胞結(jié)構(gòu)完整,細胞水樣變性消失,氣泡減少,肝細胞著色加深;p1-p7組小鼠肝臟均稍有好轉(zhuǎn),其中p4組最好,p5組次之。高血脂癥小鼠血管病理學顯微鏡(40×)觀察,高脂組小鼠血管內(nèi)膜增厚、隆起,有部分內(nèi)皮細胞衰落,內(nèi)皮下空隙變大,內(nèi)膜有水腫現(xiàn)象,有泡沫滲入細胞,平滑肌細胞向內(nèi)皮下轉(zhuǎn)移,中膜明顯變粗,平滑肌細胞出現(xiàn)增多且不規(guī)則垂直于內(nèi)膜而后轉(zhuǎn)向內(nèi)膜,組織形態(tài)產(chǎn)生變化,常規(guī)飼料小鼠血管清晰,內(nèi)膜平滑,內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,內(nèi)皮下不存在脂質(zhì)和炎性細胞浸潤,中層及外膜結(jié)構(gòu)清楚,中膜層由彈力纖維膜組成,彈力纖維膜之間存在的眾多棱形核平滑肌細胞和少數(shù)纖維組分,外膜較薄,沒有出現(xiàn)脂肪細胞;苯扎貝特組血管結(jié)構(gòu)狀態(tài)的到改修護,層次比較清晰、內(nèi)膜比較光滑且內(nèi)皮細胞形態(tài)連續(xù)完好;p1-p7組均有所改善。當前第1頁12
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