本發(fā)明涉及一種可具有防治皮膚干燥綜合征功效的皮膚養(yǎng)護/治療組合物，可以作為對皮膚水分過少或易患干皮癥的皮膚具有養(yǎng)護/治療作用的外用藥物或化妝品。
背景技術(shù)：
：皮膚干燥綜合征是指皮膚因水分或脂質(zhì)缺乏而產(chǎn)生的緊繃、脫屑、瘙癢等一系列癥狀，是一個全球性的疾病。多個國家橫斷面調(diào)查顯示，目前老年人皮膚干燥發(fā)生率在29.5%~85.5%之間。例如，德國開展的一項大樣本多中心調(diào)查顯示，醫(yī)院和養(yǎng)老機構(gòu)中老年人的皮膚干燥發(fā)生率分別為48.8%和52.6%，其中42.9%的皮膚干燥出現(xiàn)在小腿和足部，32.0%的皮膚干燥發(fā)生在手部和上肢，下肢皮膚干燥的發(fā)生率相對較高。法國進行的一項由全科醫(yī)生開展的多中心橫斷面調(diào)查顯示，輕中度皮膚干燥的總體發(fā)生率達55.6%，在男性和女性中的發(fā)生率分別為37.4%和62.6%，性別差異明顯。澳大利亞調(diào)查顯示，養(yǎng)老機構(gòu)中老年人皮膚干燥發(fā)生率為29.5%。印度調(diào)查了數(shù)個三級診療中心，老年人皮膚干燥發(fā)生率高達85.5%。我國目前的相關(guān)調(diào)查較少或范圍局限，僅檢索到中國臺灣地區(qū)南部針對養(yǎng)老機構(gòu)398例老年人皮膚病現(xiàn)狀的調(diào)查，皮膚干燥發(fā)生率為58.3%，小腿部位皮膚干燥發(fā)生率最高，與德國研究一致（戴付敏等，國外老年人皮膚干燥評估與干預(yù)的研究進展，中華護理雜志，2017，(01):53-58）。皮膚干燥不僅可引起皮膚瘙癢、魚鱗癥等皮膚病，還顯著降低老年人的生活舒適度，增加感染概率，減緩創(chuàng)面愈合速度，嚴(yán)重降低老年人的生活質(zhì)量。皮膚干燥綜合征的發(fā)病原因，主要可與睡眠不足、年齡的增長、環(huán)境的影響以及不正常的飲食習(xí)慣等因素有關(guān)。睡眠不足使得血液循環(huán)變差，肌膚就會失去活力和滋潤，導(dǎo)致皮膚干燥和粗糙；隨著年齡的增長，皮脂分泌就會慢慢減少，從而導(dǎo)致皮膚保存水分的能力降低；環(huán)境的變化，尤其是在秋冬季，由于空氣干燥，汗液和皮脂的分泌都會減少，而皮膚表面的水分也會大量的蒸發(fā)和流失，從而加速皮膚干燥的現(xiàn)象發(fā)生。不正常的飲食習(xí)慣也會使得皮膚無法得到充分的營養(yǎng)支撐，逐漸失去水分和彈性，變得干燥、脆弱（譚萍等，皮膚干燥綜合征的護理，黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2012，(04):82）。皮膚干燥雖不會直接威脅生命，但可間接降低人的生活舒適度和健康水平，增加身體、心理和經(jīng)濟負擔(dān)。皮膚干燥若不及時發(fā)現(xiàn)、及早干預(yù)，將會出現(xiàn)脫皮、裂紋或演變?yōu)槠つw瘙癢癥。若抓撓破損，則增加感染風(fēng)險，且影響夜間睡眠，嚴(yán)重降低了人的生活質(zhì)量。有研究表明，皮膚干燥是皮膚瘙癢的最主要原因，69%的皮膚瘙癢癥老年患者的皮膚為中、重度干燥。干燥皮膚的自我修復(fù)能力減弱，皮膚創(chuàng)面（如壓瘡、劃傷等）的愈合速度減慢，皮膚完整性長時間受損，導(dǎo)致感染風(fēng)險增加。人的皮膚需要保持一定量的水分，通常含水量保持在15~25%為正常，低于10%則屬于皮膚干燥綜合征。作為人體的第一道防線，人的皮膚可具有良好的防御能力，抵御外來物質(zhì)通過皮膚進入體內(nèi)，對人體造成可能的損害。而人體皮膚并不能從外界直接吸收水分。皮膚干燥與水分從真皮層到角質(zhì)層轉(zhuǎn)運的能力、皮膚表面水分流失速度、角質(zhì)層水分結(jié)合能力3個方面密切相關(guān)。對于皮膚干燥的外用防治方法，目前主要有以甘油、透明質(zhì)酸為代表的補水產(chǎn)品和以羊毛脂、凡士林等為代表的油脂型產(chǎn)品為主。甘油是使用歷史很長的補水劑，由于甘油本身的吸水性很強，使用時，甘油的濃度不能過高，否則反而會導(dǎo)致皮膚干燥。透明質(zhì)酸是一種高分子量的多糖，吸水能力非常強，對皮膚有很強的滋潤感。但是，透明質(zhì)酸的分子量過大，并不能透過皮膚，故不能真正起到為皮膚補水的作用。透明質(zhì)酸涂敷在皮膚表面，會形成一層膜，膜的外側(cè)，水分會自然蒸發(fā)，而透明質(zhì)酸本身也需要保持一定量的水分，自然蒸發(fā)掉的水分則會從內(nèi)側(cè)（皮膚）吸收補充。因此，長期使用透明質(zhì)酸產(chǎn)品，不僅不能起到補水作用，反而可能導(dǎo)致皮膚更干燥。含羊毛脂或凡士林的產(chǎn)品，雖可以起到補充皮脂不足和皮膚滋潤，并進而起到減少水分蒸發(fā)的作用。但這類產(chǎn)品并不能具有補水的作用。技術(shù)實現(xiàn)要素：鑒于此，本發(fā)明提供了一種具有防治皮膚干燥綜合征功效的皮膚養(yǎng)護/治療組合物，可作為皮膚局部外用藥物和/或化妝品等制劑形式使用，至少能顯著增加局部皮膚的水分，并對因皮膚水分過少引致干燥綜合征有輔助的治療作用。本發(fā)明具有防治皮膚干燥綜合征功效的皮膚養(yǎng)護/治療組合物中的基本活性成分，是桂花寡糖。桂花是木樨科木犀屬下眾多樹木的習(xí)稱，代表物種木犀（osmanthusfragrans(thunb.)lour.），又名桂花、巖桂、九里香等，常綠喬木或灌木，花冠合瓣四裂，形小。由于桂花顯著的甜美芳香的氣味和味道，其作為食品加工領(lǐng)域中的添加成分已有廣泛的應(yīng)用和悠久的歷史。經(jīng)過長期的人工栽培和自然雜交，目前已形成了多種栽培品種，如四季桂、金桂、丹桂和銀桂等。我國現(xiàn)已登錄的桂花栽培品種達150余個（劉玉蓮：桂花品種資源及其分類研究，江蘇林業(yè)科技，2000，(s1):26-31；臧德奎等：中國桂花的研究歷史、現(xiàn)狀與桂花品種國際登錄，植物資源與環(huán)境學(xué)報，2003，(04):49-53；臧德奎等：桂花品種研究(英文)，南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2004(s1):7-13）。寡糖一般是指2~9個單糖分子通過糖苷鍵連接而成的糖類物質(zhì)，是動植物體內(nèi)的重要代謝產(chǎn)物?，F(xiàn)有研究表明，寡糖不僅是動植物體內(nèi)的能量單位，也是生物體內(nèi)承載生物信息傳導(dǎo)的載體，同時還與蛋白結(jié)合構(gòu)成糖蛋白，或與脂質(zhì)結(jié)合構(gòu)成糖脂質(zhì)，是蛋白或脂質(zhì)生理活性的重要組成部分。寡糖一般可具有多種生理活性，能促進體內(nèi)菌群平衡，激活人體自我防衛(wèi)系統(tǒng)，具有抗菌、抗過敏、抗病毒、抗腫瘤等作用。桂花的花卉中含有一定量的寡糖成分?，F(xiàn)有研究顯示，盡管目前的桂花品種繁多，但在構(gòu)成其特征性寡糖的組成上，實際并無本質(zhì)差異。桂花寡糖的制備方法，僅見由周奮進，黃靜等報道的“均勻設(shè)計法優(yōu)化桂花寡糖的提取工藝”（華西藥學(xué)雜志，2017(01):63-66）。其原料包括了自然干燥的桂花干花、經(jīng)超臨界二氧化碳萃取桂花凈油后的花渣、桂花鮮花、冷凍桂花或鹽漬桂花經(jīng)水蒸氣蒸餾后干燥的花渣等。本發(fā)明所述具有補水保濕功效的皮膚養(yǎng)護/治療組合物的重量組成為：桂花寡糖0.5%~20%，包括皮膚外用制劑可接受的輔料成分在內(nèi)的輔助成分余量。作為本發(fā)明上述組合物中活性成分的桂花寡糖，一般情況下多為呈淡黃色至黃色的固體（顏色的深淺主要與制備方法及條件、過程有關(guān)，例如提取的溫度高，則顏色較深；溫度低，則顏色可較淺）。在上述組成的基礎(chǔ)上，本發(fā)明上述組合物中所述的活性成分除直接使用純品形式的桂花寡糖外，也允許替換為不僅含有同樣量桂花寡糖成分、同時還含有其他不會對活性成分的功效造成影響的非活性成分的桂花寡糖提取物。其中，所述桂花寡糖提取物中桂花寡糖活性成分的重量比例應(yīng)不低于50%，更好的是以桂花寡糖提取物中桂花寡糖活性成分的重量比例不低于60%；最好其重量比例為不低于80%。與目前各類藥物/化妝品類似，為適應(yīng)或滿足不同使用對象的特點、個體實際情況、使用條件或環(huán)境等多方面的使用需求，上述皮膚養(yǎng)護/治療組合物組成中所述的皮膚外用制劑可以接受的輔料成分，可以包括在外用藥物和/或化妝品制劑中可以接受的各類輔料添加成分。例如，除作為最為普遍使用的水外，還可以分別選擇如軟化劑或潤滑劑，增稠劑，表面活性劑或乳化劑，穩(wěn)定劑或保存劑或防腐劑，皮膚滲透促進劑，角質(zhì)蛋白溶解劑，防曬劑等常用輔料中的一種或幾種成分的組合。其中，軟化劑或潤滑劑，可包括常用的動物油、植物油或礦物油等油類物質(zhì)，凡士林，石蠟，純地蠟，天然地蠟，微晶蠟，全氫角鯊烯，二甲基聚硅氧烷，甲基苯基聚硅氧烷，硅氧烷-乙二醇共聚物，三酸甘油酯，乙?；瘑嗡岣视王?，乙氧化甘油酯，脂肪酸的烷基酯，脂肪酸和醇類，羊毛脂和羊毛脂衍生物，多元醇酯，甾醇，蜂蠟衍生物，多元醇和聚醚類，以及脂肪酸的酰胺等。可有助于軟化皮膚角質(zhì)層，滋潤皮膚，減少皮膚水分蒸發(fā)。增稠劑，可以包括如黃原膠、黃原膠鹽水耐受劑、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、水溶乙烯基聚合物（carbopol）和阿拉伯樹膠，以及鋁硅酸鎂鹽或鋁硅酸鎂等，可有助于提高制劑使用時的延展性，方便涂抹。保存劑（防腐劑）或穩(wěn)定劑，可包括如烷醇，特別是乙醇、苯甲醇和苯氧乙醇，以及羥苯甲酸酯、山梨酸、山梨酸酯、山梨酸鉀、咪唑烷基脲衍生物、碘丙炔醇丁基胺甲酸酯和異噻唑啉酮等。能抑制制劑中微生物的繁殖，保障制劑在限定保質(zhì)期限內(nèi)的品質(zhì)。角質(zhì)蛋白溶解劑或脫落劑，可包括水楊酸、過氧化苯甲酰、曲酸苯醌、甘草衍生物、抗壞血酸及其衍生物（如抗壞血?；姿徭V）、甘油酸(glycerhetinicacid)及其衍生物等化妝品中常用的有助于改善或提高皮膚光亮性的成分。皮膚滲透促進劑可包括如氮酮（月桂氮?酮），二甲基亞砜，n-甲基-2-吡咯烷酮，1-丁基-3-十二烷基-2-吡咯烷酮，1-己基-2-吡咯烷酮，1-月桂酰-2-吡咯烷酮，丙二醇，油酸，吐溫-80，吐溫-60，司盤-60，卵磷脂，泊洛沙姆和卡波姆，冰片，薄荷腦等成分，有利于促進活性成分穿透皮膚，提高活性效果。防曬劑可有如二氧化鈦，氧化鋅，對甲氧基肉桂酸異辛酯，二苯丙酮-1、二苯丙酮-2和二苯丙酮-4，蘆薈提取物，黃芩提取物等，有利于降低紫外線對皮膚的再損傷，保障活性成分的效果。本發(fā)明上述皮膚養(yǎng)護/治療組合物，可以制成目前已有報道/使用的不同類型/形式的皮膚外用藥物和/或化妝品供使用，可包括水劑、噴劑、乳液劑、乳霜劑、乳膏劑、乳條劑、凝膠劑、軟膏劑、膠布或貼布、巴布劑、脂質(zhì)體調(diào)配物等形式的皮膚外用藥物和/或化妝品制劑。例如，乳霜膏形式的制劑，可以由所述比例的桂花寡糖形式提取物活性成分，與0.5~50(w)%（以下未特別說明時均為w%）的軟化劑，0.1~6%的增稠劑，及余量部分的水共同組成；或者由所述比例的桂花寡糖形式提取物活性成分，與0.5~50%軟化劑，0.1~30%的乳化劑，0.1~6%的增稠劑及余量部分的水共同組成。微乳液形式的制劑，可以由所述比例的桂花寡糖形式提取物活性成分，與0.5~20%的凡士林等外用制劑中常用烴類成分，0.5~20%的霍霍巴油、橄欖油、大米油、玉米胚芽油等外用制劑中常用的一種或多種油類成分及余量部分的水共同組成；或由所述比例的桂花寡糖形式提取物活性成分，與0.5~15%的烴，1~15%的油，0.1~10%的甘油、1,3-丁二醇、丙二醇等外用制劑中常用的一種或多種脂肪醇成分，30%的吐溫-80，吐溫-60，司盤-60，卵磷脂等非離子表面活性劑，及余量部分的水共同組成。乳液形式的制劑，可包括如常用的水包油型或油包水型乳液，以及如水/油/水型、油/水/硅氧烷流體型三重乳液等形式的多相乳液（可參照美國專利no.4254105、no.4960764等文獻）。臨床實踐中發(fā)現(xiàn)，不少皮膚干燥的患者，同時還可能會伴隨有不同形式/程度的皮膚損傷或其他癥狀。因此，在上述組成的基礎(chǔ)上，還可以根據(jù)中國藥典規(guī)定允許的成分和/或用量的范圍，進一步增加皮膚外用制劑中可以接受的包括抗生素類成分，抗/殺菌或真菌性成分，營養(yǎng)性成分（維生素、氨基酸），類視黃醇(retinoids)成分，抗過敏成分，h1和/或h2抗組胺成分，激素類成分，麻醉性成分等中的至少一種，作為輔助成分。其中，抗生素類成分，可包括如紅霉素、四環(huán)素、多西霉素、頭孢菌素、青霉素、大環(huán)內(nèi)酯類等；肽化合物中的新生霉素、萬古霉素、竹桃霉素、巴龍霉素、桂晶白霉素等；帶大環(huán)內(nèi)酯分子的安福霉素、喹諾酮衍生物等；以及具有干擾細菌等微生物的細胞壁合成、膜功能、rna代謝、嘌呤、嘧啶和蛋白質(zhì)合成、呼吸或磷酸化作用等功能的化合物?？?殺真菌類成分，包括如克霉唑、酮康唑、咪康唑、萘替芳、托萘酯、兩性霉素b、制霉菌素、5-氟胞嘧啶、灰黃霉素、鹵普羅近等。維生素類成分，包括如維生素b6、維生素b12、維生素d3、1，25-二羥基維生素d3、維生素b1、維生素b2、維生素k、維生素e、生育三烯酚類及其衍生物、煙酸及其酯類、泛酸及其酯類、泛醇、葉酸及其衍生物、膽堿、肉堿以及無正式維生素狀態(tài)的物質(zhì)，酶輔因子，以及如視黃醇、視黃酸、棕櫚酸視黃基酯、丙酸視黃基酯、乙酸視黃基酯、異視黃酸及合成的類視黃素模擬物等可具有促進修復(fù)修復(fù)作用的類視黃醇化合物。激素類成分，包括雌三醇、雌二醇、雌酮或綴合的雌激素組合成組合物；氫化可的松、羥基曲安西龍(hydroxytriamcilone）、α-甲基地塞米松、磷酸地塞米松、二丙酸氯地米松(beclamethasonedipropionate）、戊酸氫化可的松、氫化可的松環(huán)戊丙酸酯、潑尼松龍及其混合物（可優(yōu)選潑尼松龍和氫化可的松）等皮質(zhì)酮成分。在所述組合物中用量的比例范圍一般可為0.025~10%，優(yōu)選的范圍是0.5-1%（重量%）。氨基酸類成分，包括如甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、絲氨酸、硫堇、蛋氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、組氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、賴氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、色氨酸、絲氨酸、苯丙氨酸、瓜氨酸、肌酸、脯氨酸、3-或4-羥脯氨酸、5-羥賴氨酸、鳥氨酸及其衍生物、3-氨基丙酸，以及如氨基羧酸中的刀豆氨酸、副刀豆氨酸、高精氨酸、?；撬?、氨基醛糖酸和氨基糖、氨基糖醛酸、氨基醛糖二酸、脫乙酰透明質(zhì)酸、玻璃二糖醛酸(hyalobiuronicacid)、軟骨膠素、脫硫肝素、神經(jīng)氨酸或唾液酸、蛋氨酸砜、甘氨酰甘氨酸、軟骨素、d，l-鞘氨醇、鞘磷脂、蛇肉肽、胰高血糖素、高肌肽、磷脂酰絲氨酸、可可基兩性甘氨酸(cocoamphoglycine)、磷脂酰乙醇胺、半胱亞磺酸、谷胱甘肽、兩性無機氧化物、聚酰氨基胺、基于聚酰氨基胺的樹枝狀物、羥甲基甘氨酸鈉和聚乙烯胺等，可以增強本發(fā)明上述組合物對皮膚的一般活性和溫和性?？惯^敏劑和h1和/或h2抗組胺類成分，可包括如二苯基醇胺、克立咪唑(clomisole)、安他唑啉、噻苯哌胺、芐苯醇胺檸檬酸鹽，以及三環(huán)抗過敏劑的酮替芬，二硫庚啶和硫庚啶(thiadene)中的3-噻吩基硫化物，h2受體阻滯劑，特別是布立馬胺、甲硫米特和西咪替丁(cimetidien)、色甘酸(cromolicacid)及其鹽等。此外，針對與皮膚干燥同時伴隨的不同現(xiàn)象和/或癥狀，在本發(fā)明上述形式的組合物基礎(chǔ)上，還可以與本申請人已提供的其他不同形式桂花提取物的相應(yīng)制劑，如桂花精油提取物、桂花凈油提取物、含桂花精油的芳香水的制劑等配合使用，以獲得全面綜合緩解/治療的更好效果。對比實驗結(jié)果顯示，本發(fā)明上述形式的皮膚養(yǎng)護/治療組合物，可以有效增加皮膚水分，對皮膚干燥具有顯著的減輕效果，并對皮膚干燥癥的治療產(chǎn)生直接或間接的積極作用。以下通過實施例的具體實施方式再對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段做出的各種替換或變更，均應(yīng)包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。具體實施方式下述各實施例中所使用的桂花寡糖和桂花寡糖提取物樣品，如非特別說明，均為采用上述周奮進，黃靜等人“均勻設(shè)計法優(yōu)化桂花寡糖的提取工藝”（華西藥學(xué)雜志，2017,32(1):63-66）報道的方法，以四川成都地區(qū)產(chǎn)金桂的冷凍鮮花經(jīng)超臨界二氧化碳萃取后的花渣為原料，制備得到的桂花寡糖提取物（黃色固體，無氣味，硫酸-丙酮法測定提取物中桂花寡糖的含量為70%）。將該桂花寡糖提取物經(jīng)反相色譜分離，脫去大部分色素等雜質(zhì)后，得到干燥的桂花寡糖（淡黃色固體，無氣味，硫酸-丙酮法測定提取物中糖的含量為86%）。所述的吸濕性（通常用吸濕率%來表示），代表了活性成分對水分的親和能力及攜帶水的能力，吸濕性越好，則表示活性成分對水分的親和能力及攜帶水的能力越強。吸濕性的測定受環(huán)境因素的影響嚴(yán)重，故相關(guān)實驗分別是在相對濕度（rh）43%和81%的條件下進行測試。所述的失水性（通常用失水率%來表示），代表了活性成分在充分吸水后，是否容易將所吸水分釋放出來的能力。失水性越好，則表示活性成分能更好地將所吸收的水分釋放出來，補水能力更強。實施例1：桂花寡糖與透明質(zhì)酸鈉的吸濕性比較11.試驗樣品：桂花寡糖（其中寡糖含量為86%）。2.對照樣品：透明質(zhì)酸鈉（ha，華熙福瑞達生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號：1305093）。3.試驗方法：在室溫下，取試樣樣品和對照樣品各0.5克，分別放入直徑為30mm稱量瓶中，精密稱定，平行稱取樣品各3份。將所有樣品放入底部放置有飽和碳酸鈉溶液（相對濕度為43%）的密閉干燥器內(nèi)，于放置第0小時、4小時、8小時、12小時、24小時、36小時和48小時，分別稱量，記錄數(shù)據(jù)。按下式計算吸濕率：吸濕率（%）=（mn-m0）/m0×100%，式中：m0為放置第0小時的質(zhì)量；mn為放置第n小時的質(zhì)量。4.試驗結(jié)果：見表1。5.試驗結(jié)論：在相對濕度為43%的條件下，在4小時-12小時內(nèi)，桂花寡糖和透明質(zhì)酸鈉樣品的吸濕率比較，兩者無顯著性差異（p>0.05）；24小時-48小時，桂花寡糖和透明質(zhì)酸鈉樣品的吸濕率均不斷上升，但桂花寡糖的吸濕率明顯高于透明質(zhì)酸鈉，兩者之間有顯著性差異（p<0.05）。實施例2：桂花寡糖與透明質(zhì)酸鈉的吸濕性比較21.試驗樣品：同實施例1。2.對照樣品：同實施例1。3.試驗方法：稱取樣品方式同實施例1。將所有樣品放入底部放置有飽和硫酸銨溶液（相對濕度為81%）的密閉干燥器內(nèi)，于放置第0小時、4小時、8小時、12小時、24小時、36小時和48小時，分別稱量，記錄數(shù)據(jù)。吸濕率的計算同實施例1。4.試驗結(jié)果：見表2。5.試驗結(jié)論：在相對濕度為81%的條件下，在4小時-12小時內(nèi)，桂花寡糖和透明質(zhì)酸鈉樣品的吸濕率比較，兩者無顯著性差異（p>0.05）；24小時-48小時，桂花寡糖和透明質(zhì)酸鈉樣品的吸濕率均不斷上升，但桂花寡糖的吸濕率明顯高于透明質(zhì)酸鈉，兩者之間有顯著性差異（p<0.05）。實施例3：桂花寡糖與甘油的失水率比較11.試驗樣品：同實施例1。2.對照樣品：甘油（>98%，廈門星鯊制藥有限公司，批號：140901）。3.試驗方法：在室溫下，取試樣樣品和對照樣品各0.5克，分別放入直徑為30mm稱量瓶中，并加入1.0克蒸餾水水，振動溶解均勻后，精密稱定。平行稱取樣品各3份。將稱量后的稱量瓶，放入40℃烘箱中，于放置第0小時、4小時、8小時、12小時、24小時和36小時，稱量，記錄數(shù)據(jù)。按下式計算失水率。失水率（%）=（m0-mn）/m0×100%，式中：m0為放置第0小時的質(zhì)量，mn為放置后第n小時的質(zhì)量。4.試驗結(jié)果：見表3。5.試驗結(jié)論：40℃烘箱的條件下，在4小時-12小時內(nèi)，桂花寡糖和甘油樣品的失水率比較，兩者無顯著性差異（p>0.05）；24小時-36小時，桂花寡糖和甘油樣品的失水率均不斷增加，但桂花寡糖的失水率明顯高于甘油，兩者之間有顯著性差異（p<0.05）。實施例4：桂花寡糖與甘油的失水率比較21.試驗樣品：同實施例1。2.對照樣品：甘油（>98%，廈門星鯊制藥有限公司，批號：140901）。3.試驗方法：在室溫下，取試樣樣品和對照樣品各0.5克，分別放入直徑為30mm稱量瓶中，并加入1.0克蒸餾水，振動溶解均勻后，精密稱定。平行稱取樣品各3份。將稱量后的稱量瓶，放入底部放置等量的變色硅膠的密封干燥器中，密封放置第0小時、4小時、8小時、12小時、24小時、36小時和48小時，稱量，記錄數(shù)據(jù)。按實施例3的公式計算失水率。4.試驗結(jié)果：見表4。5.試驗結(jié)論：在常溫和有干燥劑的環(huán)境下，在4小時-12小時內(nèi)，桂花寡糖失水率比甘油樣品略高，但兩者之間無顯著性差異（p>0.05）；24小時-48小時，桂花寡糖和甘油樣品的失水率均不斷增加，但桂花寡糖的失水率明顯高于甘油，兩者之間有顯著性差異（p<0.05）。實施例5：桂花寡糖的急性毒性試驗1.試驗樣品：實施例1的桂花寡糖，真空冷凍干燥法干燥后，取6.25克桂花寡糖干品，溶解于25ml生理鹽水中，配制成0.25g/ml的桂花寡糖試驗樣品液。2.試驗動物：成年健康昆明小鼠（清潔級）18只，雌（♀）雄（♂）各半，體重20±2克（成都達碩實驗動物有限公司，許可證編號：scxk（川）2015-24）。3.試驗環(huán)境：飼養(yǎng)實驗室溫度，室溫22±2℃，相對濕度（rh）60±10%。雌雄動物分籠飼養(yǎng)，全價顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲水。在該環(huán)境中飼養(yǎng)3天，適應(yīng)環(huán)境后，開始試驗。試驗前一天晚上5點開始禁食16小時，但不限制飲水。4.劑量設(shè)計：參照《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》及文獻方法（石金金等，益母草成分鹽酸水蘇堿對小鼠的急性毒性研究，時珍國醫(yī)國藥，2015，(4):865-866；陳奇，中藥藥理研究方法學(xué)，人民衛(wèi)生出版社，1991，p43）進行設(shè)計。5.急性毒性預(yù)試驗：取昆明小鼠4只，按5g/kg的最大給藥量法及樣品配制濃度換算灌胃體積，并對小鼠進行灌胃，給藥后24h內(nèi)密切觀察小鼠的行為活動。結(jié)果顯示，小鼠的行為活動均表現(xiàn)正常，未出現(xiàn)小鼠死亡。故本試驗采用小鼠最大給藥量法，進行經(jīng)口灌胃給藥的急性毒性試驗。6.觀察指標(biāo)：參照《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》及文獻方法（肖小年等，薏苡仁油微乳對小鼠的急性毒性研究，南昌大學(xué)學(xué)報（理科版），2015，39(1):92-93），設(shè)計觀察指標(biāo)包括小鼠外觀、行為、攝食、飲水、毛發(fā)、糞便等一般變化及小鼠體重、存活情況、死亡情況等。另外，于給藥第0d、1d、4d、7d、10d和14d各稱1次體重，記錄體重變化情況。7.給藥方法：試驗當(dāng)天，測量小鼠體重，按5g/kg最大給藥量法及樣品濃度換算灌胃體積，如小鼠體重25g，則灌胃藥量為25g×5g/kg=0.125g，灌胃體積=灌胃藥量/樣品濃度=0.125g/0.25g/ml=0.5ml?？瞻捉M小鼠給予鹽水。給藥后24h內(nèi)嚴(yán)密觀察，詳細記錄各組小鼠的活動狀態(tài)、毒性癥狀、重度反應(yīng)起始時間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時間、恢復(fù)時間以及死亡動物數(shù)。8.急性毒性試驗結(jié)果1）小鼠一般狀態(tài)觀察結(jié)果：各組連續(xù)觀察14天，動物毛皮光滑，飲食、飲水、大小便正常，眼、鼻無分泌物，黏膜無充血，呼吸、心跳正常。觀察期滿后，小鼠解剖未見肉眼可見病理變化。心、肝、脾、肺、腎的外觀正常。2）小鼠的死亡情況：見表5。3）小鼠體重變化測定結(jié)果：見表6。小鼠的體重，給藥后與給藥前比較，無顯著性差異（p>0.05），雌雄組比較，也無顯著性差異。各組小鼠的體質(zhì)量增加趨勢也無顯著性差異（p>0.05）。9.試驗結(jié)論：桂花寡糖在最大給藥劑量5g/kg經(jīng)口灌胃的急性毒性試驗結(jié)果表明，桂花寡糖無明顯的經(jīng)口急性毒性。實施例6：桂花寡糖對皮膚刺激性/腐蝕性的試驗材料和方法：1.受試動物：健康新西蘭大白兔4只，普通級，雌性，體重2.0~2.5kg，由四川省實驗動物管委會養(yǎng)殖場提供（生產(chǎn)許可證號：scxk(川)2.13-14）。由四川省實驗動物管委會養(yǎng)殖場在溫度23±20c，相對濕度50-80%，12/12小時明暗交替照明。單籠飼養(yǎng)，自主飲水，全價顆粒飼料喂養(yǎng)。試驗前適應(yīng)3天。2.試驗樣品：按實施例5制備的桂花寡糖干品，稱取8.25g溶解在25ml生理鹽水中，配制成0.33g/ml的試驗樣品。試樣用量：0.5ml/2.5cm*2.5cm/只。3.試驗方法：試驗前約24小時，將實驗動物背脊兩側(cè)毛減掉，不可損傷表皮，去毛范圍左右各約為3×3cm。將試樣0.5ml直接涂抹在皮膚上（面積約為2.5×2.5cm），每天涂抹1次，連續(xù)涂抹14天。從第2天開始，每次涂抹前剪毛，用溫水清除殘留受試物。1小時后觀察結(jié)果，按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007年版）皮膚刺激性/腐蝕性試驗表1評分，對照區(qū)和試驗區(qū)同樣處理。按照相應(yīng)公式計算每天每只動物平均積分，以表1判定皮膚刺激強度。4.試驗結(jié)果：見表7。5.試驗結(jié)論：桂花寡糖對家兔的皮膚刺激性試驗為無刺激性。實施例7：桂花寡糖對眼睛的刺激性試驗1.受試動物：健康新西蘭大白兔4只，普通級，雌性，體重2.0~2.5kg，由四川省實驗動物管委會養(yǎng)殖場提供（生產(chǎn)許可證號：scxk(川)2.13-14）。由四川省實驗動物管委會養(yǎng)殖場在溫度23±20c，相對濕度50-80%，12/12小時明暗交替照明。單籠飼養(yǎng)，自主飲水，全價顆粒飼料喂養(yǎng)。試驗前適應(yīng)3天。試驗前對實驗動物的眼睛進行檢查，檢查結(jié)果顯示所使用的動物均無眼刺激性癥狀，無眼角膜缺陷和結(jié)膜損傷。2.試驗樣品：按實施例5制備的桂花寡糖干品，稱取3.3g溶解在10ml生理鹽水中，配制成0.33g/ml的試驗樣品。3.試驗方法：試驗時，輕輕拉開動物眼睛的下眼瞼，分別在左側(cè)眼睛滴入桂花寡糖生理鹽水溶液0.1ml，并使眼睛上下眼見閉合10s。右側(cè)眼睛中則滴入生理鹽水作為對照。滴入受試樣品24小時后，用生理鹽水沖洗眼睛，沖洗后1h觀察角膜、虹膜i、結(jié)膜情況，判斷眼刺激反應(yīng)積分，并判斷眼刺激反應(yīng)強度。1h后，按上述方法繼續(xù)滴入受試樣品，連續(xù)給藥7天。4.判斷標(biāo)準(zhǔn)：最后一次給藥后，用生理鹽水沖洗殘留物，分別在1h、24h、48h和72h后，觀察眼睛，并進行刺激評分。評分標(biāo)準(zhǔn)按《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007年版）眼刺激性試驗表進行評分，對照區(qū)和試驗區(qū)同樣處理。按照相應(yīng)公式計算每天每只動物平均積分，以判定眼睛刺激強度。5.試驗結(jié)果：見表86.試驗結(jié)論：桂花寡糖對家兔的眼睛刺激性試驗為無刺激性。實施例8：補水保濕霜（化妝品制劑）組成：組成克桂花寡糖5.0硬脂酸（天津市鼎盛鑫化工有限公司，生產(chǎn)日期：2016年3月10日）8.0羊毛脂（天津市致遠化學(xué)試劑有限公司，生產(chǎn)日期：2016年4月10日）2.0乳化劑（聚山梨醇-80，成都科龍化工試劑廠，批號：151201）1.5防腐劑（杰馬bp，上海同頂實業(yè)有限公司，批號：20160301）0.1去離子水加至100制備方法：按常規(guī)化妝品制備方法，將上述組成中的硬脂酸、羊毛脂和聚山梨醇-80混合，70-80℃水浴加熱熔化成液態(tài)（油相）。另將桂花寡糖，防腐劑加入到去離子水中，攪拌溶解均勻后，水浴加熱至70-80℃（水相）。在保持70-80℃溫度，并在攪拌下，緩慢將水相加入到油相中至乳化形成，待冷卻后，混合均勻。即制得所述產(chǎn)品。實施例9：補水保濕乳劑（化妝品制劑）組成：組成克桂花寡糖8.0硬脂酸（同實施例8）2.01,3-丁二醇（美國oxea，上海同頂實業(yè)有限公司，批號：20160115）1.0木糖醇（山東福田藥業(yè)有限公司，批號：116032307）0.5乳化劑（同實施例8）1.5防腐劑（同實施例8）0.1去離子水加至100制備方法：按常規(guī)化妝品制備方法，將上述組成中的硬脂酸、木糖醇和乳化劑混合，70-80℃水浴加熱熔化成液態(tài)，在保持70-80℃溫度，并在攪拌下，加入20克的去離子水，攪拌至乳化完成，放冷。另將桂花寡糖，1,3-丁二醇和防腐劑加入到剩余的去離子水中，攪拌溶解均勻。將乳化完成的乳化液，加入到溶解了1,3-丁二醇和防腐劑的水中，攪拌均勻，即制得所述產(chǎn)品。實施例10：補水保濕水（化妝品制劑）組成：組成克桂花寡糖10.0防腐劑（同實施例8）0.1去離子水加至100制備方法：將桂花寡糖、防腐劑直接加入到去離子水中，攪拌均勻，高溫滅菌后，即得到所述產(chǎn)品。實施例11：補水保濕凝膠（化妝品制劑）組成：組成克桂花寡糖15.0甘油（廈門星鯊制藥有限公司，批號：140901）6.0卡波姆940（廣州美懿生物科技有限公司，批號:160415）0.5杰馬bp（上海同頂實業(yè)有限公司，批號:20160301）0.1三乙醇胺（成都市科隆化學(xué)品有限公司，批號：2016122101）0.5含桂花精油的芳香水加至100制備方法：取卡波姆，加入甘油和70克芳香水，攪勻，使其充分溶脹，待用。另取桂花寡糖、杰馬bp加入30克芳香水，攪拌溶解均勻后，加入到待用的卡波姆液中，攪拌均勻后，高溫滅菌。冷卻后，補加芳香水至100克，攪拌均勻，用三乙醇胺調(diào)節(jié)ph值至凝膠形成，即得所述凝膠產(chǎn)品。實施例12：補水保濕軟膏（藥物制劑）組成：組成克桂花寡糖提取物18丙二醇（同實施例1）6.0十四酸異丙酯（廣州美懿生物科技有限公司，批號：151205）4.0十六醇（廣州美懿生物科技有限公司，批號：151108）2.0十八醇（廣州美懿生物科技有限公司，批號：151221）1.5失水山梨醇單硬脂酸酯（廣州美懿生物科技有限公司，批號：151118）1.2聚山梨醇80（同實施例1）1.0無水亞硫酸鈉（成都科龍化工試劑廠，批號：151016）0.8防腐劑（同實施例1）0.2純化水加至100制備方法：按常規(guī)的皮膚外用藥制備方法，將桂花寡糖提取物、聚山梨醇80、無水亞硫酸鈉和防腐劑加入到40ml純化水中，攪拌溶解后，加熱至70-80℃，即得水相。另取丙二醇，十四酸異丙酯，十六醇，十八醇，失水山梨醇單硬脂酸酯混合，加熱至70-80℃，即得油相，備用。將同溫的水相緩慢加入到油相中，邊加邊攪拌至冷凝，即得所述的外用藥膏。實施例13：補水保濕巴布劑（藥物制劑）組成：組成克桂花寡糖提取物20.0甘油（南京化學(xué)試劑有限公司，批號：14072610893）14.01,3-丙二醇（上海凌峰化學(xué)試劑有限公司，批號：130815）3.0聚丙烯酸鈉（北京國人逸康科技有限公司，批號：20150227）1.8卡波姆940（北京國人逸康科技有限公司，批號：20141205）0.3甘羥鋁（山西西岳制藥有限公司，批號：150901）0.16檸檬酸（南京化學(xué)試劑廠）0.32明膠（國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：f20150713）1.5高嶺土（國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：f20150420）1.6純化水加至150制備方法：取處方量卡波姆加適量水靜置，使其充分溶脹，作為i相。取處方量明膠加入適量水，自然溶脹，60oc水浴溶解，加入溶解好的甘羥鋁和檸檬酸溶液，混勻，作為ii相。取處方量甘油和丙二醇，將聚丙烯酸鈉和高嶺土分散其中，作為iii相。取桂花寡糖提取物，加入甘油5克，水適量，攪拌溶解，作為iv相。將iv相加入到i相中混勻后，加入iii相混勻，再加入ii相充分?jǐn)嚁嚢杈鶆蚝?，用三乙醇胺調(diào)ph6-7，低速攪拌，至黏稠狀半固態(tài)流體后立即涂布于無紡布上，干燥，加聚乙烯膜覆蓋，即得所述的補水保濕巴布劑。實施例14：對皮膚補水功效試驗11.試驗樣品：按實施例9方式制備成桂花寡糖的含量分別為0.5%，1%，5%，10%，15%，20%的補水保濕乳劑?？瞻讓φ瘴铮簽橥瑯影磳嵤├?方式制備的不含桂花寡糖的（以等量甘油替換含桂花寡糖）乳劑。2.試驗對象：年齡為45歲~60歲的試驗志愿者24人，其中女性15人，男性9人。3.試驗方法、分組與觀察時間：將24人隨機分為2組，實驗組20人，對照組4人。將試驗樣品2-3ml直接噴涂在小腿部位1次，輕輕拍打至吸收后，分別在5分鐘、10分鐘、30分鐘和60分鐘進行皮膚水分測試。試驗結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：用皮膚測試儀對涂抹部位進行皮膚水分測定，比較皮膚含水量。4.試驗結(jié)果：見表95.試驗結(jié)論：桂花寡糖的含量在0.5%~1.0%時，有一定補充皮膚水分的作用，但作用不明顯。含量在5%~20%時，補充皮膚水分的作用明顯。實施例15：對皮膚補水功效試驗21.試驗樣品：按實施例9的方法進行制備，制備過程中用桂花寡糖提取物替換桂花寡糖，按桂花寡糖提取物中桂花寡糖的含量折算后，分別配制成為含桂花寡糖0.5%，1%，5%，10%，15%，20%的補水保濕乳劑?？瞻讓φ瘴铮簽橥瑯影磳嵤├?方式制備的不含桂花寡糖提取物的（以等量甘油替換含桂花寡糖提取物）乳劑。2.試驗對象：年齡為45歲~60歲的試驗志愿者24人，其中女性15人，男性9人。3.試驗方法、分組與觀察時間：將24人隨機分為2組，實驗組20人，對照組4人。將試驗樣品2-3ml直接噴涂在小腿部位1次，輕輕拍打至吸收后，分別在5分鐘、10分鐘、30分鐘和60分鐘進行皮膚水分測試。試驗結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：用皮膚測試儀對涂抹部位進行皮膚水分測定，比較皮膚含水量。4.試驗結(jié)果：見表105.試驗結(jié)論：桂花寡糖提取物中桂花寡糖的含量在0.5%~1.0%時，有一定補充皮膚水分的作用，但作用不明顯。含量在5%~20%時，補充皮膚水分的作用明顯。桂花寡糖提取物與桂花寡糖的補水效果基本一致。實施例16：與現(xiàn)有補水產(chǎn)品的對比試驗1.試驗樣品：按實施例9方式制備成桂花寡糖的含量為10%的補水保濕乳劑。2.對照樣品：百雀羚草本水嫩倍現(xiàn)保濕精華乳液（上海百雀羚日用化學(xué)有效公司，生產(chǎn)日期：20161123）3.試驗對象：年齡為45歲~60歲的試驗志愿者12人，其中女性8人，男性4人。4.試驗方法、分組與觀察時間：將12人隨機分為2組，實驗組6人，對照組6人。將試驗樣品2-3ml直接噴涂在小腿部位1次，輕輕拍打至吸收后，分別在5分鐘、10分鐘、30分鐘和60分鐘進行皮膚水分測試。試驗結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：用皮膚測試儀對涂抹部位進行皮膚水分測定，比較皮膚含水量。5.試驗結(jié)果：見表116.試驗結(jié)論：兩種產(chǎn)品均有良好的補水效果，但含桂花寡糖的乳液在使用后39分鐘以上的補水效果更明顯（p<0.05）。當(dāng)前第1頁12