本發(fā)明屬于組織修復(fù)材料制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種鱈魚皮膠原肽復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法。
背景技術(shù)：
纖維素作為天然的生物高聚物，具有生物可降解性、生物相容性以及獨特的物理、化學(xué)和機械性能，已成為新型生物醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域的研究熱點。而現(xiàn)有技術(shù)多是采用再生纖維素與其他材料共混，冷凍干燥制備復(fù)合膜，采用此方法制得的復(fù)合膜均勻性、穩(wěn)定性較差，且組織修復(fù)能力及藥物附著性有待進一步的提高。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種具有良好的組織修復(fù)能力及藥物附著性的鱈魚皮膠原肽復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法。
本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
一種鱈魚皮膠原肽復(fù)合再生纖維修復(fù)材料的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：取鱈魚皮膠原蛋白，配置成質(zhì)量濃度1％的膠原蛋白水溶液，調(diào)整膠原蛋白水溶液ph值為8.0，加入質(zhì)量百分比1％的堿性蛋白酶，在50℃的水浴鍋中進行酶解反應(yīng)60min后，沸水滅酶10min，冷卻至室溫以8000r/min離心處理15min，取上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的一半，得鱈魚皮膠原肽提取物；
步驟二：稱取20g竹纖維，投入到400g、質(zhì)量分數(shù)為17.5％的naoh溶液中，并放置到溫度為100℃的恒溫水浴鍋中，沸煮60min，再用去離子水對竹纖維反復(fù)清洗至中性后，置于70℃烘箱內(nèi)干燥6h，干燥后粉碎成粗粉過80目篩,得竹粉；
步驟三：取16glicl投入到裝有40℃、184g二甲基乙酰胺的容器中，在恒溫磁力攪拌器的作用下使licl充分溶解，配制成質(zhì)量分數(shù)為8％的溶劑，取溶劑100g及步驟二制得的竹粉10g，于60℃恒溫水浴鍋中混合攪拌3h，置于超聲波細胞粉碎儀中，在輸出功率800w的條件下超聲處理15min，得竹納米纖維溶液；
步驟四：將蠶繭去蛹，置入煮沸的質(zhì)量濃度為0.5％的碳酸鈉水溶液中，浴比為1:50，除去蠶繭表面絲膠,將已成絲狀的蠶繭撈出并擰干，再重復(fù)上述操作一次后，用去離子水洗凈，風(fēng)干后得到脫膠絲素；
步驟五：將cacl2在室溫狀態(tài)下溶解于甲酸中，攪拌30min，制得濃度為5wt.％的cacl2-fa溶液，然后將脫膠絲素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力攪拌3h，獲得再生絲素蛋白溶液，室溫下干燥成膜，將膜用去離子水浸泡3h，再干燥，獲得再生絲素蛋白膜，將再生絲素蛋白膜在室溫狀態(tài)下二次溶解于甲酸中，浴比為1:10，溶解時間為2h，得再生絲素蛋白紡絲液；
步驟六：取棉短絨5g，將其溶解在甲酸中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液；
步驟七：將再生絲素蛋白紡絲液與纖維素溶液按重量比4:1混合均勻得再生纖維素紡絲液；
步驟八：將鱈魚皮膠原肽提取物、竹納米纖維溶液、再生纖維素紡絲液按質(zhì)量比3:4:19混合均勻，使用超聲波震蕩對其進行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續(xù)攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中，通過靜電紡絲制得修復(fù)材料，高壓裝置電壓為20kv，紡絲流量2ml/h，將制得的材料置于體積濃度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
優(yōu)選的，步驟八中所述的醫(yī)用針管的容量為20ml。
優(yōu)選的，步驟八中所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處。
優(yōu)選的，步驟八中所述的醫(yī)用針管的針頭內(nèi)徑為0.41mm。
本發(fā)明的有益效果在于：
1)鱈魚皮膠原肽是一種對皮膚具有多重保護作用的物質(zhì)，可以修復(fù)皮膚損傷，補充皮膚中的膠原蛋白。
2)絲素蛋白及竹納米纖維具有良好的抗菌性及生物相容性。
3)纖維素具有良好的生物相容性、可降解性及優(yōu)良的機械性能。
4)纖維素可以改善材料的機械性能，絲素蛋白、鱈魚皮膠原肽可以改善材料的組織修復(fù)能力。
5)添加竹納米纖維，并采用靜電紡絲技術(shù)制備的材料，進一步提高了材料的孔隙率，有利于藥物的附著。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的描述。
實施例1
步驟一：取鱈魚皮膠原蛋白，配置成質(zhì)量濃度1％的膠原蛋白水溶液，調(diào)整膠原蛋白水溶液ph值為8.0，加入質(zhì)量百分比1％的堿性蛋白酶，在50℃的水浴鍋中進行酶解反應(yīng)60min后，沸水滅酶10min，冷卻至室溫以8000r/min離心處理15min，取上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的一半，得鱈魚皮膠原肽提取物；
步驟二：稱取20g竹纖維，投入到400g、質(zhì)量分數(shù)為17.5％的naoh溶液中，并放置到溫度為100℃的恒溫水浴鍋中，沸煮60min，再用去離子水對竹纖維反復(fù)清洗至中性后，置于70℃烘箱內(nèi)干燥6h，干燥后粉碎成粗粉過80目篩,得竹粉；
步驟三：取16glicl投入到裝有40℃、184g二甲基乙酰胺的容器中，在恒溫磁力攪拌器的作用下使licl充分溶解，配制成質(zhì)量分數(shù)為8％的溶劑，取溶劑100g及步驟二制得的竹粉10g，于60℃恒溫水浴鍋中混合攪拌3h，置于超聲波細胞粉碎儀中，在輸出功率800w的條件下超聲處理15min，得竹納米纖維溶液；
步驟四：將蠶繭去蛹，置入煮沸的質(zhì)量濃度為0.5％的碳酸鈉水溶液中，浴比為1:50，除去蠶繭表面絲膠,將已成絲狀的蠶繭撈出并擰干，再重復(fù)上述操作一次后，用去離子水洗凈，風(fēng)干后得到脫膠絲素；
步驟五：將cacl2在室溫狀態(tài)下溶解于甲酸中，攪拌30min，制得濃度為5wt.％的cacl2-fa溶液，然后將脫膠絲素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力攪拌3h，獲得再生絲素蛋白溶液，室溫下干燥成膜，將膜用去離子水浸泡3h，再干燥，獲得再生絲素蛋白膜，將再生絲素蛋白膜在室溫狀態(tài)下二次溶解于甲酸中，浴比為1:10，溶解時間為2h，得再生絲素蛋白紡絲液；
步驟六：取棉短絨5g，將其溶解在甲酸中，配制成質(zhì)量濃度4％的纖維素溶液；
步驟七：將再生絲素蛋白紡絲液與纖維素溶液按重量比4:1混合均勻得再生纖維素紡絲液；
步驟八：將鱈魚皮膠原肽提取物、竹納米纖維溶液、再生纖維素紡絲液按質(zhì)量比3:4:19混合均勻，使用超聲波震蕩對其進行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續(xù)攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中，通過靜電紡絲制得修復(fù)材料，高壓裝置電壓為20kv，紡絲流量2ml/h，將制得的材料置于體積濃度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
步驟八中所述的醫(yī)用針管的容量為20ml，所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處，針頭內(nèi)徑為0.41mm。